Medios de Cultivo

CALDO GLUCOSADO
Este medio de cultivo se utiliza para el crecimiento y multiplicacin de diversos

microorganismos. Como no contiene ms hidratos de carbono que la glucosa,
el medio es adecuado para la demostracin de fermentacin de glucosa
cuando se agrega previamente un indicador de pH. pH =7.30.1
Peptona de casena 10.0g
Extracto de carne 3.0g
NaCl 5.0g
Glucosa 10.0g
Agua destilada 1.01g
AGAR ALMIDON
Este medio se utiliza para identificar microorganismos que degradan el

almidn. La hidrolisis del almidn se evidencia cubriendo la placa con una
solucin de lugol. Se forma un complejo color azul con el almidn, ausente en
las zonas donde hubo hidrolisis. Si las colonias son almidn positivas, aparece
un halo transparente alrededor de las mismas.
Extracto de carne 3.0g
Peptona 5.0g
Almidn soluble 2.0g
Agar- agar 15.0g
Agua destilada 1.01L
AGAR TRIBUTIRINA
Este medio se utiliza para la identificacin de microorganismos lipoliticos. La
degradacin de tributirina produce halos de aclaramiento alrededor de las
colonias, en contrate con el resto del medio que permanece turbio. La
incubacin es hasta 72h en condiciones ptimas.
Extracto de levadura 3.0g

Peptona 5.0g
Tributirina 10.0g
Agar agar 15.0g
MEDIO DE GELATINA
FUNDAMENTO
Ciertas bacterias elaboran una enzima extracelular que tiene la propiedad de

hidrolizar la gelatina, esta enzima es conocida como Gelatinasa. La presencia
de gelatinasa puede ser demostrada inoculando un cultivo bacteriano en un
medio conteniendo gelatina. pH 6.8 0.2.
La prueba se realiza a temperatura a la cual la gelatina se mantenga en estado

slido por si misma (por ejemplo a 37C de temperatura)
COMPOSICIN
Peptona 5.0 g
Gelatina 120.0 g
Extracto de carne 3.0 g
Agua destilada 1000.0 ml
PROCEDIMIENTO
Inocular los tubos en profundidad e incubar a 37C durante 24 hrs., Incubar

tubos sin inocular para el control.
INTERPRETACIN
La presencia de lquido significa que la gelatina ha sido hidrolizada

(liquefactada). Por el contrario, si el medio permanece slido es seal de que la
bacteria no posee la enzima gelatinasa. Este medio puede ser repartido en
placas, 20ml por placa y sembrado en estras, luego de la incubacin se agrega
el siguiente reactivo:
REACTIVO DE FRAZIER
HgCL2 15 g
Agua destilada 100 ml
HCl(c) 20 ml .
Peptona de caseina 10.0g
NaCl 5.0g
Se cubre la placa
con el reactivo, cuando la gelatina no es hidrolizada, se formar un precipitado
blanco muy opaco ( ausencia de hidrlisis ), y cuando la gelatina es hidrolizada
se formar un halo claro en el contorno de la colonia sobre la estra.
CALDO TRIPTOSA
Para enriquecimiento, aislamiento, cultivo y diferenciacin, sobre todo de

brucellas, pero tambin de Estreptococcos, Pneumococcos, Meningococos,
Listerias, Pasteurellas y otros microorganismos patgenos.
Aislamientos de razas de brucellas a partir de cultivos mixtos: La adicin de

violeta cristal sirve para la inhibicin de la flora gram positiva.
Diferenciacin de las especies de Brucella, en base a su sensibilidad frente a

determinados colorantes: Adicin de tionina y fuscina bsica.
Este medio de cultivo constituye una buena base para la preparacin de agar-
agar. Investigacin de brucella melitensis en hemocultivos: Adicin de sodio
citrato, como anticoagulante; la adicin de agar-agar y el cultivo en atmsfera
con 10% de CO2 aumentan el rendimiento en Brucellas; pH 7.30.2
La peptona de casena (triptona) consiste en una elevada proporcin de

triptfano, el cual degradado por los microorganismos indol (+) formndose
indol. El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico.
Se incuba 12-24 horas a 37C. luego de la incubacin se agrega el reactivo

Kovacs, en los microorganismos indol (+) la capa de reactivo toma un color
rojo-cereza al cabo de pocos minutos.
MEDIO UREA
USO
Se emplea para la diferenciacin de bacterias por medio de la utilizacin de la

urea como nica fuente de carbono.
PRINCIPIO
La enzima ureasa hidroliza la urea en amonaco y anhidrido carbnico, ante la

variacin de pH por la alcalinizacin, el indicador rojo de fenol, vira de amarillo
claro a ligeremente rosado o rosa mexicano. Se utiliza solamente para la
deteccin de la actividad de la ureasa en especies del gnero Proteus que dan
la prueba positiva despus de una incubacin de 8 h. Si los nutrientes
suministrados por el extracto de levadura se consumen antes de que la
bacteria muestre un crecimiento aceptable no podr determinarse con exactitud
su capacidad de hidrolizar la urea. Si un microorganismo es capaz de hidrolizar
la urea, pero no de utilizar el amonaco como fuente de nitrgeno, no se
produce crecimiento y es posible observar un resultado falso negativo. No se
recomienda para las bacterias con reaccin de ureasa retardada. Sembrar el
medio de cultivo con el cultivo puro de ensayo. Incubar 24 48 h a 35C.
Formula en gramos por un litro de agua destilada
Extracto de levadura 0.10g
Fosfato monopotasico 9.10g
Fosfato disodico 9.50g
Rojo de fenol 0.01g
urea 20.0g

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CALDO GLUCOSADO

Este medio de cultivo se utiliza para el crecimiento y multiplicacin de diversos

Peptona de casena 10.0g

Extracto de carne 3.0g

Agua destilada 1.01g

Este medio se utiliza para identificar microorganismos que degradan el

Extracto de carne 3.0g

Almidn soluble 2.0g

Agar- agar 15.0g

Agua destilada 1.01L

Extracto de levadura 3.0g

Ciertas bacterias elaboran una enzima extracelular que tiene la propiedad de

La prueba se realiza a temperatura a la cual la gelatina se mantenga en estado

Inocular los tubos en profundidad e incubar a 37C durante 24 hrs., Incubar

La presencia de lquido significa que la gelatina ha sido hidrolizada

Para enriquecimiento, aislamiento, cultivo y diferenciacin, sobre todo de

Aislamientos de razas de brucellas a partir de cultivos mixtos: La adicin de

Diferenciacin de las especies de Brucella, en base a su sensibilidad frente a

La peptona de casena (triptona) consiste en una elevada proporcin de

Se incuba 12-24 horas a 37C. luego de la incubacin se agrega el reactivo

Se emplea para la diferenciacin de bacterias por medio de la utilizacin de la

La enzima ureasa hidroliza la urea en amonaco y anhidrido carbnico, ante la

Formula en gramos por un litro de agua destilada

Extracto de levadura 0.10g

Fosfato monopotasico 9.10g

Fosfato disodico 9.50g

Rojo de fenol 0.01g

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