AGAR Verde Rojo Neutro Bilis Lactosa

AGAR ROJO NEUTRO-CRISTAL VIOLETA-BILIS RVB
Agar selectivo propuesto por DAVIS (1951) para la deteccin y la enumeracin de las bacterias del coliform incluyendo E. coli en agua, leche, helado, carne y otros comestibles. Medio de color prpura-rojizo AGAR RVB pH final: 7.4 0.2 0.002
Cristal violeta 0.03 Rojo neutro 15.0 Agar 5.0 Cloruro de sodio 10.0 Lactosa 1.5 Sales biliares 7.0 Peptona Suspender 41,5 g del polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar, calentando a ebullicin 1 o 2 minutos. Enfriar a 45C y verter en placas. Una vez preparado debe usarse de inmediato. NO AUTOCLAVAR. 3.0 Extracto de levadura Instrucciones Frmula (en gramos por litro) RESULTADOS Rosadas como punta de alfiler (puntiformes) Enterococcus spp. Incoloras
Enterobacterias no fermentadoras de lactosa Rojas, de 1 a 2 mm de dimetro, con halo de precipitacin rojizo Enterobacterias fermentadoras de lactosa Colonias Microorganismos
Violeta Rojo y Bilis Agar. Este es un medio selectivo para la investigacin presuntiva y recuento de coliformes en alimentos y productos lcteos. Fundamento En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aportan los nutrientes necesarios para el crecimiento bacteriano,las sales biliares y el cristal violeta inhiben el desarrollo de la flora Gram positiva, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y el rojo neutro es el indicador de pH. Los coliformes son bacterias que fermentan la lactosa, acidifican el medio y producen un viraje del indicador de pH al color rojo intenso. Debido a esto, se observan como colonias de color rojo prpura, de 1 a2 mm de dimetro, rodeadas, generalmente, de una zona rojiza de bilis precipitada. Frmula (en gramos por litro) Instrucciones Extracto de levadura 3.0 Peptona 7.0 Suspender 41,5 g del polvo por litro Sales biliares 1.5 de agua destilada. Reposar 5 Lactosa 10.0 minutos y mezclar, calentando a ebullicin 1 o 2 minutos. Enfriar a Cloruro de sodio 5.0 45C y verter en placas. Una vez Agar 15.0 preparado debe usarse de Rojo neutron 0.03 inmediato. NO AUTOCLAVAR. Cristal violeta 0.002 pH final: 7.4 0.2 Siembra -Para recuento bacteriano: sembrar en profundidad 1ml de la muestra directa o de la dilucin apropiada, agregar aproximadamente 12-15 ml de medio de cultivo enfriado a 45 C, agitar por rotacin y dejar solidificar. Luego, agregar una sobre capa de medio de cultivo para crear condiciones anaerbicas de manera que se evite el crecimiento de microorganismos Gram
negativos no fermentadores de azcares y el crecimiento en forma invasiva de Proteus spp. -Para propsitos generales: sembrar en superficie, una ansada a partir de los tubos con gas de un medio para coliformes (por ejemplo de Verde Brillante Caldo y Bilis 2% Mac Conkey Caldo Lauril Sulfato Caldo) Incubacin Para la deteccin de Enterobacterias mesfilas, incubar a 30C durante 24 horas. Se puede aumentar la selectividad incubando a 42 C. Resultados Microorganismos Colonias Enterobacterias fermentadoras de Rojas, de 1 a 2 mm de dimetro, con halo de lactosa precipitacin rojizo Enterobacterias no fermentadoras Incoloras de lactosa Enterococcus spp. Rosadas como punta de alfiler (puntiformes) Caractersticas del medio Medio preparado: prpura rojizo. Almacenamiento: Medio deshidratado: a 10-35 C. Presentacin x 100g :Cdigo: B02-143- x 500g :Cdigo: B02-14305 06
6.2 Empleo de las enterobacterias lactosa positivas totales como marcador. A un recuento de enterobacterias lactosa positivas se le llama tambin recuento de bacterias coliformes totales. Esto incluye los gneros: Escherichia Enterobacter Klebsiella Citrobacter. Hay miembros de este grupo que adems de en el intestino de hombres y animales se
encuentran tambin en suelo, plantas y otros ambientes. Su especificidad como indicador de contaminacin fecal no es buena. Suelen usarse, sin embargo, como indicadores de contaminacin fecal debido a: Su frecuencia en heces. Jos Mara 8 Espinosa Bernal Su fcil deteccin y recuento en el laboratorio. De hecho, el primer paso en el recuento de E. coli es un recuento de enterobacterias lactosa positivas. En determinados tipos de aguas y de alimentos sustituye o complementa al anlisis de Escherichia coli. Medios de cultivo empleados
e.coli
enterobacter
Para recuento por NMP, caldo lactosado verde brillante, cuya caracterstica principal es contener bilis de buey y verde brillante, que hacen que el medio sea selectivo. Adems, contiene lactosa, lo que permite diferenciar a la bacteria que la fermentan mediante una campana de Durham. La temperatura utilizada ser 37 C. Para recuento e identificacin: Agar lactosado con bilis al cristal violeta y rojo neutro (VRBl): Que contiene, adems de sales biliares y cristal violeta, un indicador de ph, el rojo neutro, que permite identificar las colonias. Estas tendrn un color rojo por la formacin de cido al fermentar la lactosa (que solo es fermentada por coliformes). Para identificacin: Utilizamos EMB Levine, que contiene lactosa e indicadores que van a dar un color caracterstico al microorganismo.
E.coli Enterobacter.

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