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    TC 905-TBX FR 230215

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    Ce document décrit une gélose TBX utilisée pour la détection et le dénombrement d'Escherichia coli. Il contient la formule du milieu, les instructions de préparation, d'utilisation et de contrôle qualité.

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    Fiche technique Gélose TBX Version 03.

    2012

    GELOSE TBX

    PRINCIPE
    La gélose TBX est un milieu chromogénique, sélectif et différentiel utilisé pour la détection et le
    dénombrement d’Escherichia coli .

    FORMULE
    Ingrédients en grammes pour un litre d'eau distillée ou déminéralisée.

    Peptone de caséine 20,00


    Sels biliaires N° 3 1,50
    5-bromo-4-chloro-3-indolyl-ß-D-glucuronide 144 µmol/l
    Agar 15,00

    pH final à 25°C : 7,2  0,2

    CONSERVATION
    Flacons: 2 - 8°C à l'obscurité
    Base déshydratée : 2 - 30°C
    La date d’expiration est indiquée sur l’emballage.

    PREPARATION
    Pour le milieu déshydraté :
    1. Dissoudre 36,6 grammes dans 1 litre d’eau pure.
    2. Chauffer sous agitation fréquente et laisser bouillir 1 minute pour dissoudre complètement la
    suspension.
    3. Répartir en flacons.
    4. Autoclaver 15 minutes à 121°C.

    Pour le milieu en tubes ou flacons :


    1. Liquéfier le milieu à 100°C au bain-marie.
    2. Bien mélanger, laisser refroidir à 45-47°C.
    3. Répartir immédiatement en boîtes de Petri et laisser solidifier sur une surface froide.

    UTILISATION
    Se conformer aux protocoles en vigueur. D’une façon générale, le protocole suivant peut être appliqué :
    1. Technique en surface : Ensemencer les boîtes, en stries avec une anse ou déposer une membrane à
    la surface du milieu. Incuber les boîtes pendant 18 à 24 heures à 44 ± 1°C.
    2. Technique dans la masse : Introduire dans une boîte de Pétri stérile, 1 ml du produit à étudier et
    couler 15 ml du milieu en surfusion. Mélanger et laisser solidifier. Incuber les boîtes pendant 24 heures
    à 44°C.
    Les colonies caractéristiques sont bleues. Compter les colonies sur les boites présentant entre 150 et 300
    colonies.
    Les colonies non caractéristiques sont blanches à légèrement vert.

    PRECAUTIONS
    Ne pas surchauffer, ou maintenir trop longtemps en surfusion ce milieu.

    Z.A. Les Alleux • 22100 Taden • France


    www.indicia.fr
    Tel. +33(0)2 96 87 66 86 • [email protected]
    Fiche technique Gélose TBX Version 03.2012

    CONTROLE DE QUALITE
    2 3 4
    Selon ISO 11133, suspension à 10-10 CFU/ml (productivité) et 10 -10 CFU/ml (sélectivité),
    incubation 21  3 heures à 44  1°C.
    Souche ATCC® Croissance Couleur des colonies
    Enterococcus faecalis 19433 Inhibée -
    Escherichia coli 25922 Bonne Bleue
    Pseudomonas aeruginosa 27853 Faible à bonne Blanche

    BIBLIOGRAPHIE
    1. Frampton E W, Restaino L, Blaszko L.1988. Eavaluation of ß-glucoridase substrate 5-bromo-4-
    chloro3-indolyl-B-Dglucuonide (X-GLUC) in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli.
    Journal of Food Protection. 51:402-404.
    2. ISO/TS 11133:2014. Microbiologie des aliments, des aliments pour animaux et de l'eau - Préparation,
    production, stockage et essais de performance des milieux de culture.
    3. ISO 16649-1. 2001. Microbiologie des aliments - Méthode horizontale pour le dénombrement des
    Escherichia coli ß-glucuronidase positive - Partie 1 : technique de comptage des colonies à 44° C
    au moyen de membranes et de 5-bromo-4-chloro-3-indolyl ß-D glucuronate.
    4. ISO 16649-2. 2001. Microbiologie des aliments - Méthode horizontale pour le dénombrement des
    Escherichia coli ß-glucuronidase positive - Partie 2 : technique de comptage des colonies à 44 °C
    au moyen de 5-bromo-4-chloro-3-indolyl ß-D-glucuronate.
    5. ISO 16649-3. 2005. Microbiologie des aliments - Méthode horizontale pour le dénombrement des
    Escherichia coli ß-glucuronidase positive - Partie 3 : technique du nombre le plus probable utilisant
    bromo-5-chloro-4-indolyl-3 ß-D-glucuronate.

    PRESENTATION
    Code Description
    31905 10 flacons de 100 ml
    80905 500 g
    Autre présentation : nous consulter

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