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    FT - XLD GELOSE - BK058 - v9

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    أنور مازوز أبو يوسف
    La gélose XLD est utilisée pour isoler Salmonella dans les produits pharmaceutiques et peut être utilisée comme second milieu d'isolement de Salmonella dans les aliments et les eaux. Elle inhibe les bactéries à Gram positif et permet de différencier Salmonella et Shigella.

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    FT_XLD GELOSE_BK058_v9

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    La gélose XLD est utilisée pour isoler Salmonella dans les produits pharmaceutiques et peut être utilisée comme second milieu d'isolement de Salmonella dans les aliments et les eaux. Elle inhibe les bactéries à Gram positif et permet de différencier Salmonella et Shigella.

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    La gélose XLD est utilisée pour isoler Salmonella dans les produits pharmaceutiques et peut être utilisée comme second milieu d'isolement de Salmonella dans les aliments et les eaux. Elle inhibe les bactéries à Gram positif et permet de différencier Salmonella et Shigella.

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    FICHE TECHNIQUE

    GELOSE XLD
    DETECTION DE SALMONELLA

    1 DOMAINE D’UTILISATION

    La gélose XLD (Xylose-Lysine-Désoxycholate) est utilisée pour l’isolement des Salmonella dans les produits
    pharmaceutiques.
    La formule-type répond à la composition définie dans les Pharmacopées européenne et américaine.
    La gélose peut aussi être utilisée comme second milieu au choix dans les méthodes normalisées de recherche de
    Salmonella dans les produits alimentaires et les eaux.
    Une seconde gélose XLD, correspondant à la formulation normalisée du milieu d’isolement, en microbiologie des
    aliments et dans les eaux, est proposée sous d’autres références (BK168, BM087).

    2 HISTORIQUE

    Le milieu a été formulé par Taylor pour accroître l’efficacité dans la récupération des entérobactéries pathogènes et
    plus particulièrement des Shigella et des autres germes présentant des exigences particulières qui, dans d’autres
    formulations contenant des inhibiteurs à toxicité élevée, ne se développent pas.

    3 PRINCIPES

    Le désoxycholate de sodium assure l’inhibition de la flore contaminante à Gram positif.


    Le xylose est fermenté par presque tous les germes entéropathogènes, à l’exception des Shigella qui sont ainsi
    différenciées des autres bactéries. Après avoir utilisé le xylose, les salmonelles décarboxylent la lysine (par
    l’intermédiaire de leur lysine-décarboxylase) en cadavérine, ce qui provoque une augmentation de pH. En milieu
    devenu alcalin, les colonies de salmonelles se présentent sous le même aspect que les shigelles.
    Les colonies qui se développent sont de couleur rouge en présence de l’indicateur, le rouge de phénol.
    L’addition de lactose et de saccharose au milieu permet aux coliformes qui décarboxylent la lysine de produire un
    excès d’acidité faisant virer l’indicateur au jaune, ce qui favorise leur différenciation.
    En milieu alcalin et par réduction du citrate ferrique ammoniacal, les germes pathogènes producteurs de sulfure
    d'hydrogène se manifestent par un noircissement qui est dû à l’apparition de sulfure de fer au centre des colonies.
    Les germes non pathogènes qui ne décarboxylent pas la lysine produisent une acidification résultant des
    fermentations sucrées. L’abaissement de pH s’oppose au noircissement des colonies.

    4 FORMULE-TYPE

    La composition peut être ajustée de façon à obtenir des performances optimales.


    Pour 1 litre de milieu :
    - Extrait autolytique de levure .................................................................... 3,0 g
    - L-Lysine ................................................................................................... 5,0 g
    - Lactose .................................................................................................... 7,5 g
    - Saccharose ............................................................................................. 7,5 g
    - Xylose...................................................................................................... 3,5 g
    - Désoxycholate de sodium ....................................................................... 2,5 g
    - Chlorure de sodium ................................................................................. 5,0 g
    - Thiosulfate de sodium ............................................................................. 6,8 g
    - Citrate ferrique ammoniacal .................................................................... 0,8 g
    - Rouge de phénol ................................................................................80,0 mg
    - Agar agar bactériologique .....................................................................13,5 g
    pH du milieu prêt-à-l’emploi à 25 °C : 7,4 ± 0,2.

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    Tél : + 33 (0)3 44 14 33 33 – Fax : + 33 (0)3 44 14 33 34 – www.biokar-diagnostics.fr
    4 PREPARATION

    • Mettre en suspension 55,2 g de milieu déshydraté (BK058) dans 1 litre d’eau  Reconstitution :
    distillée ou déminéralisée. 55,2 g/L
    • Porter lentement le milieu à ébullition sous agitation constante et l’y maintenir
    durant le temps nécessaire à sa dissolution.  Stérilisation :
    • Refroidir rapidement jusqu’à 44-47 °C. Ne pas autoclaver, couler
    • Couler en boîtes de Petri stériles rapidement et laisser solidifier sur une surface rapidement les boîtes
    froide.
    • Faire sécher les boîtes à l’étuve, couvercle entrouvert.

    Notes
    Le chauffage excessif ou le maintien prolongé du milieu à 44-47 °C peut provoquer une précipitation, si bien que les
    colonies risquent de donner des réactions moins nettes.
    Le milieu doit présenter un aspect clair et une couleur rouge orangé.

    5 MODE D’EMPLOI

    • Repiquer une öse à partir du milieu d’enrichissement sur la gélose XLD ainsi  Ensemencement :
    préparée. une öse
    • Incuber à 30-35 °C pendant 18 à 48 heures.
     Incubation :
    Note 18 à 48 h à 30-35°C
    Pour l’utilisation de la gélose XLD en second milieu d’isolement de Salmonella,
    incuber les boîtes 24 h à 37 °C.

    6 LECTURE

    Les Salmonella présentent des colonies rouges, avec ou sans centre noir.
    L’aspect des colonies est le suivant :

    Caractéristiques Microorganismes
    Escherichia coli, Citrobacter, Enterobacter,
    Colonies jaunes, avec ou centre centre noir
    Proteus, Serratia, Klebsiella
    Colonies rouges, sans centre noir Shigella, Providencia, Salmonella Paratyphi A
    Colonies rouges à centre noir Salmonella, Edwardsiella

    Voir ANNEXE 1 : SUPPORT PHOTO.

    8 CONTROLE QUALITE

    Milieu déshydraté : poudre de couleur crème à rosée, fluide et homogène.


    Milieu préparé : gélose rouge-orangé.
    Réponse culturale après 18 heures d’incubation à 30-35 °C, inoculum < 102 microorganismes
    Croissance
    Microorganismes
    (Rapport de productivité : PR)

    Salmonella Typhimurium WDCM 00031 PR ≥ 50 %


    Salmonella Abony WDCM 00029 PR ≥ 50 %

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    9 CONSERVATION

    Milieu déshydraté : 2-30 °C.


    La date de péremption est mentionnée sur l‘étiquette.

    Milieu préparé en boîtes (*) : 8 jours à 2-8 °C.


    (*) Valeur indicative déterminée dans les conditions standards de préparation, suivant les instructions du fabricant.

    10 PRESENTATION

    Milieu déshydraté :
    Flacon de 500 g ................................................................................................................................................... BK058HA

    11 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES

    Taylor, W.I.. 1965. Isolation of Shigellae. I. Xylose lysine agars: new media for isolation of enteric pathogens.
    American Journal of Clinical Pathology, 44 : 471-475.
    Pharmacopée Européenne. Chapitre 2.6.13. Contrôle microbiologique des produits non stériles : Recherche de
    microorganismes spécifiés.

    12 AUTRES INFORMATIONS

    Les mentions portées sur les étiquettes sont prédominantes sur les formules ou les instructions décrites dans ce
    document et sont susceptibles d’être modifiées à tout moment, sans préavis.

    Code document : XLD_FR_V9.


    Date création : 06-2003
    Date de révision : 03-2020
    Motif de révision : Modification de la couleur de la poudre.

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    ANNEXE 1 : SUPPORT PHOTO

    Gélose XLD
    Détection des Salmonella, Shigella et autres entérobactéries pathogènes.

    Lecture :

    Croissance obtenue après 24 heures d’incubation à 32,5 °C.

    Salmonella Enteritidis
    Colonie caractéristique :
    couleur rouge avec un précipité noir de
    sulfure de fer (souche H2S [+]) au centre.

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