1 Tecnica Histologica - Alumnos

TP N 1 – CURSO ANUAL PARALELO
POR BENJAMIN YAFAR HELPERCITO

+54 381 55 71 40
CURSO ANUAL PARALELO - 2024

Conjunto de pasos (de distinta índole) a los cuales se somete una
muestra para obtener preparados histológicos visibles al microscopio
(MO y ME) permitiendo analizar estructuras invisibles al ojo humano
Paso mediante el cual se evitan los procesos de lisis celular,
conservando la muestra de la forma más fiel a cuando estaba viva
•
•
•
•
•
•
96
10%
•
•
Paso donde se elimina todo el agua de la muestra biológica
preparándola para la inclusión en parafina
OH 100%
OH 50% OH 70% OH 80% OH 96% X2
100
La muestra deshidratada se somete as 2 baños de solventes
orgánicos (xilol, toluol, benceno) actuando como mordiente y
favoreciendo el ingreso de parafina en el tejido
La muestra es embebida en parafina líquida en una estufa (~60 C)
en dos baños de 12 hs y 4 hs lo que permite que difundir en la
muestra. A T ambiente la parafina solidifica formando el taco de
parafina
LA muestra parafinizada se corta en láminas histológicas mediante
el micrótomo (3-8 µm)
•
•
•
Paso que permite el reconocimiento de la organización de los tejidos y
células utilizando colorantes.
•
•
•
•
•
0
< > 7 14
EOSINA HEMATOXILINA
• Aniónico • Catiónico
• Carga global negativa (-) • Carga global positiva (+)
• Colorea estructuras básicas o (+) • Colorea estructuras ácidas o (-)
• SIEMPRE ES CITOPLASMÁTICO • SIEMPRE ES NUCLEAR / CITOPLASMÁTICO

•
•
•
•
BASOFILIA
Los colorantes básicos o catiónicos poseen una carga eléctrica
positiva. Se les denomina también colorantes nucleares, pues tienen
afinidad por estructuras celulares ácidas.
Las sustancias teñidas por colorantes básicos se denominan

“basófilos” y están constituidas por componentes ácidos.
Ejemplos de colorantes básicos: la hematoxilina, el rojo nuclear, el azul de

metileno, la tionina, el azul de toluidina, la fucsina básica.
Los núcleos de las células vivas, presentan un alto contenido de ácidos

nucleicos (ADN, ARN), lo que les confiere un pH ácido, por lo tanto
tendrán afinidad por un colorante básico, de modo que los núcleos
serán siempre basófilos, y el citoplasma celular será basófilo, cuando
haya un predominio de organelas ácidas (ej: RER, ribosomas,
proteínas ácidas).
•
•
ACIDOFILIA
Los colorantes ácidos o aniónicos, tienen carga eléctrica negativa. A
estos también se les conoce como colorantes citoplasmáticos, pues
tiñen al grupo químico, cargado eléctricamente, localizado en un
extremo de la cadena de aminoácidos que integran las proteínas
citoplasmáticas.
Las sustancias que atraen eléctricamente a los colorantes
ácidos se denominan “acidófilas” y químicamente están
constituidas por componentes básicos o alcalinos .
Ejemplos de colorantes ácidos: la eosina, la fucsina ácida, el ácido
pícrico, el naranja G, la safranina, el azul de anilina, etc.
En las células con una gran actividad energética, como las células
musculares que presentan un alto contenido en mitocondrias, REL,
proteínas básicas, membranas celulares, el citoplasma de estas
células, se tiñen con un colorante ácido, por lo tanto será acidófilo.
Polisomas y ribosomas libres
Lisosomas, peroxisomas, Abundan en células productoras A. Golgi
cuerpos residuales de proteínas, en células madre Abundan en células productoras
Abundan en células inmunes de reserva de proteínas; no colorea
(imagen negativa de Golgi)
Mitocondrias
Abundan en túbulos
renales, epitelio de
vesícula biliar, fibras
musculares
Retículo liso
Abundan en células productoras
de esteroides (células de Leydig, Retículo rugoso
células de la granulosa), fibras Abundan en células productoras
musculares de proteínas, neuronas
TECNICA COLORANTE pH Elementos que tiñe COLOR
Hematoxilina Básico Núcleos, citoplasmas basófilos Violeta
Hematoxilina Eosina Ácido Citoplasmas acidófilos, fibras Rosa pálido a rosa
Eosina colágenas, fibras musculares y intenso
eritrocitos
Colorantes naturales Artificiales
Ácidos (g. cromóforo carboxilo)
Animales: carmín • Eosina, fucsina ácida
Básicos (g. cromóforo amino)

Vegetales: hematoxilina, eosina • Azul de metileno
• Azul de toluidina
Neutros
• Mezcla de colorantes ácidos y básicos
• Giemsa
Indiferentes
• Solubilizan en alcohol o grasas
• Sudan
La lámina histológica se monta en vidrio portaobjetos, se cubre con
un vidrio cubreobjetos y se sella con bálsamo de Canadá
Mama
HE
•
•
•
Ac conjugado a una enzima Ac conjugado a fluorocromo

Requiere un sustrato incoloro soluble Requiere de luz UV para que el
que se transformará en uno coloreado fluorocromo genera fluorescencia
insoluble
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• SIEMPRE ES CITOPLASMÁTICO • SIEMPRE ES NUCLEAR / CITOPLASMÁTICO

Las sustancias teñidas por colorantes básicos se denominan

Ejemplos de colorantes básicos: la hematoxilina, el rojo nuclear, el azul de

Los núcleos de las células vivas, presentan un alto contenido de ácidos

Básicos (g. cromóforo amino)

Ac conjugado a una enzima Ac conjugado a fluorocromo

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