Tincion de Papanicolaou

❖ TINCION DE PAPANICOLAOU
_____________________________________________________________________
___________ Principio La tinción de Papanicolaou se aplica a exudados vaginales
para la detección de cáncer uterino o vaginal. La técnica utiliza un elevado número de
colorantes en su procedimiento.
• Hematoxilina: es la tinción nuclear escogida, permite básicamente revelar los núcleos de las
células presentes en la muestra. Suele usarse Hematoxilina de Harris.
• Orange G: es un colorante sintético de carácter ácido que revela compuestos básicos como
la prequeratina (que tiñe de color rosado) o la queratina (que tiñe de color naranja brillante).
• Eosina amarillenta: tiñe de color rosa-anaranjado el citoplasma de las células escamosas

maduras, de las células ciliadas y de los eritrocitos.
• Verde Luz SF amarillento: tiñe de color verde-azulado las células escamosas no superficiales
(inmaduras o a parcialmente maduras).
• Pardo Bismark R: no tiñe el citoplasma celular pero si la mucina.
• Ácido fosfotúngstico: tiene una función mordiente, especialmente importante para el Verde
Luz SF.
Al presentar su composición varios colorantes, es capaz de revelar diferentes tipos de células.

Estas características son las que la hacen óptima para estudios de tipo citológico. La técnica
implica el uso de tres soluciones diferentes, por un lado la correspondiente a la hematoxilina,
por otro la que contiene Orange G (solución de Papanicolaou OG) y la última con el resto de
colorantes (solución de Papanicolaou EA).
Comentario Final:
La técnica de Papanicolaou es muy noble, ha tolerado infinidad de modificaciones y es muy útil

para ser aplicada no sólo en citología ginecológica sino también en todo el resto. Por esta
razón es la coloración fundamental de la citología general.
Se colorea con ella material obtenido de aparato digestivo (esófago, hígado, páncreas, vías
biliares) aparato respiratorio (esputos, lavados bronquiales y bronquioloalveolares, punciones
transcarinales y de pulmón), punciones de diversos órganos (tiroides, glándulas salivales,
mama, abdominales, tejido linfático), líquidos de cavidades (asscítico, pleural, pericárdico y
otros) líquido céfalo raquídeo.
Se ve con claridad: detalles en la flora de los extendidos cérvico vaginales, detalles que
expresan la maduración en el epitelio pavimentoso (evaluación hormonal), alteraciones
morfológicas nucleares (lesiones pre neoplásicas y neoplásicas), sustancias químicas
(glucógeno, moco, asbestos), otros elementos infecciosos (Pneumocistis Jiroveci, parásitos,
hongos).
En fin, la coloración de Papanicolaou es la que nos ha acompañado a lo largo de tantos años

aliada fundamental de cualquier persona vinculada a la citología.
❖ Azul de toluidina
El azul de toluidina o cloruro de tolonio (según el INN), a veces abreviado como TBO) es un
colorante catiónico (básico) metacromático de color azul, utilizado en histología y algunas
veces en el ambiente clínico. El compuesto es un derivado del aminotoluol, compuesto
homólogo de la anilina derivada del toluol. Se encuentra químicamente emparentado con
el Azure A, Azure B y Azure C.
Propiedades
En suspensión presenta un color azul y cuando se expone a estructuras ricas en grupos
aniónicos (heparina, condroitín sulfatos, etc.) las moléculas de esta sustancia se ordenan
formando agrupaciones que alteran la longitud de onda absorbida, virando del color azul al
color rojo. Este efecto se denomina metacromasia.
Este colorante tiñe estructura basófilas, tales como la cromatina. Se puede comportar como
colorante ortocromático (tiñe de color azul) o metacromático (tiñe de color violeta-rojo),
dependiendo del pH y de la naturaleza química de la sustancia teñida.
Se usa frecuentemente como colorante ortocromático para teñir tejido nervioso, donde tiñe la
heterocromatina y los gránulos de Nissl (acúmulos de cisternas de retículo endoplásmico
rugoso de los somas neuronales, así como las fibras nerviosas amielínicas y células glíales.
Se usa frecuentemente como colorante metacromático en las estructuras ricas en

proteoglucanos sulfatados, como el heparán sulfato, presente, por ejemplo, en
el cartílago joven (condroblastos y matriz inmadura) y en los gránulos de las células cebadas.
Las intoxicaciones con azul de toluidina son tratadas con heparina.
Test para lignina
La solución de azul de toluidina se utiliza en una prueba para demostrar la presencia de lignina,
una molécula orgánica compleja que cementa las fibras de celulosa en las paredes celulares,
endureciendo y aumentando su resistencia. Un test de azul de toluidina positivo provoca que la
solución vire del color azul al color rosado. Un test similar se puede realizar utilizando una
solución de clorohidrato de floroglucinol, la cual se torna roja.
Otros usos histológicos
El azul de toluidina se utiliza a menudo para identificar a los mastocitos, en virtud de

la heparina presente en sus gránulos. También se utiliza para
teñir proteoglicanos y glicosaminglicanos en tejidos tales como el cartílago. Las estructuras
macromoleculares de carbohidratos fuertemente acídicos presentes en los mastocitos y
cartílagos se tiñen de rojo por el colorante azul.
Las soluciones azules alcalinas de toluidina, se usan comúnmente para teñir secciones
semidelgadas (0,1 a 0,5 μm) de tejidos fijados en resina. A pH altos (cercanos a 10) el
colorante se une a los ácidos nucleicos y a todas las proteínas. A pesar de que todas las
estructuras resultan teñidas, los detalles estructurales se hacen claramente visibles debido a la
delgadez de todas las proteínas. Las secciones semidelgadas se utilizan en conjunción con
estructuras ultradelgadas examinadas por microscopía electrónica.
Usos clínicos
Este colorante se utiliza a veces por los cirujanos para ayudar a resaltar áreas
de displasia en mucosas (las cuales captan preferencialmente el colorante en comparación con
el tejido normal) en las lesiones premalignas (p. ej. leucoplasia). Esta propiedad puede
utilizarse para elegir el mejor sitio para biopsiar la lesión, o durante la cirugía de remoción para
decidir donde remover más tejido y donde dejarlo.

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• Eosina amarillenta: tiñe de color rosa-anaranjado el citoplasma de las células escamosas

• Pardo Bismark R: no tiñe el citoplasma celular pero si la mucina.

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