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    TC - Fraserdemibouillon - 74704717202 - FR - Listeria

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    Le document décrit un bouillon Fraser demi utilisé pour l'enrichissement sélectif de Listeria dans les échantillons alimentaires. Il contient la formule, les conditions de conservation, le protocole d'utilisation, les critères attendus et les références bibliographiques pour ce milieu de culture.

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    Fiche technique Bouillon Fraser Demi Version 2018.

    05

    BOUILLON FRASER DEMI

    PRINCIPE
    Le bouillon Fraser ½ est destiné au pré-enrichissement sélectif des Listeria dans les échantillons
    alimentaires ou d’environnement. Il est conforme à la norme EN ISO 11290-13 et à son amendement
    A14 pour la recherche de Listeria monocytogenes.

    FORMULE
    Ingrédients en grammes pour un litre d'eau purifiée.

    Peptone de viande 5,00 Esculine 1,00


    Peptone de caséine 5,00 Acide nalidixique 0,01
    Extrait de viande 5.00 Acriflavine HCl 0,0125
    Extrait de levure 5,00 Chlorure de lithium 3,00
    Chlorure de sodium 20,00 Citrate ferrique ammoniacal 0,50
    Mélange Tampon 13,35
    Ce milieu peut être ajusté et/ou supplémenté en fonction des critères de performances imposés

    CONDITIONS DE CONSERVATION avant ouverture


    Flacons et poches : 2 et 25°C à l'obscurité
    La date d’expiration est indiquée sur l’emballage.

    UTILISATION
    Se conformer aux protocoles en vigueur. D’une façon générale, le protocole suivant peut être appliqué :
    1. Enrichissement primaire : ensemencer 25 grammes du produit à examiner dans 225 ml de bouillon
    Fraser-demi, homogénéiser et incuber à 30°C pendant 24 heures.
    2. Enrichissement secondaire : après incubation, ensemencer 0,1 ml du bouillon Fraser-demi dans un
    tube de 10 ml de bouillon Fraser. Incuber les tubes à 37°C pendant 24 heures, suivies d’une nouvelle
    incubation de 24 heures.
    3. Isoler à chaque étape (primaire et secondaire) sur milieu Oxford ou Palcam, incuber 18 à 24 heures,
    48 heures si nécessaire, à 37°C. D'autres milieux comme la gélose selon Ottaviani et Agosti peuvent
    également être utilisés. Se référer dans ce cas à la lecture spécifique de ces milieux.
    4. Les Listeria provoquent un noircissement du milieu par hydrolyse de l’esculine. Cette réaction n’est
    pas exclusive de Listeria, il est donc impératif d’isoler et d’identifier la souche pour affirmer la
    présence de Listeria.

    CRITERES ATTENDUS
    Le contrôle est conforme aux recommandations de la norme ISO 11133
    Aspect Brunâtre.
    Physico-chimie pH 7.2 ± 0.2

    Z.A. La Parlière - 69610 - Saint Genis l'Argentière - France


    Tel : +33 (0)4 74 72 36 10 - [email protected] www.indicia.fr
    Fiche technique Bouillon Fraser Demi Version 2018.05

    Activité microbiologique
    Inoculum Durée et T°
    Référence des souches Résultat attendu
    requis d’incubation
    Escherichia coli 24 h ± 2 h
    103 – 104 UFC Inhibition après isolement sur TSA
    ATCC 25922 • WDCM 00013 à 30°C ± 1°C
    Enterococcus faecalis 24 h ± 2 h Inhibition partielle (<100 UFC) après
    103 – 104 UFC
    ATCC 19433 • WDCM 00009 à 30°C ± 1°C isolement sur TSA
    Escherichia coli
    103 – 104 UFC
    ATCC 25922 • WDCM 00013
    Croissance de colonies bleu-vert avec halo
    +
    opaque caractéristiques de L.
    Enterococcus faecalis 24 h ± 2 h
    103 – 104 UFC monocytogenes (>10 UFC) après isolement
    ATCC 19433 • WDCM 00009 à 30°C ± 1°C sur OAA
    +
    (incubation 24h à 30°C)
    Listeria monocytogenes
    10 – 102 UFC
    ATCC 13932 • WDCM 00021
    Escherichia coli
    103 – 104 UFC
    ATCC 25922 • WDCM 00013
    Croissance de colonies bleu-vert avec halo
    +
    opaque caractéristiques de L.
    Enterococcus faecalis 24 h ± 2 h
    103 – 104 UFC monocytogenes (>10 UFC) après isolement
    ATCC 19433 • WDCM 00009 à 30°C ± 1°C
    sur OAA
    +
    (incubation 24h à 30°C)
    Listeria monocytogenes
    10 – 102 UFC
    ATCC 35152 • WDCM 00109
    Exemple de tests de performances recommandés pour ce milieu

    BIBLIOGRAPHIE
    1. Fraser, J. and W. Sperber. 1988. Rapid detection of Listeria Spp in food and environmental samples
    by esculin hydrolysis. Journal of Food Protection. 51:762-765.
    2. ISO 11290-1. Microbiologie des aliments - Méthode horizontale pour la recherche et le
    dénombrement de Listeria monocytogenes - Partie 1 : méthode de recherche.
    3. ISO 11290-1/A1. Microbiologie des aliments - Méthode horizontale pour la recherche et le
    dénombrement de Listeria monocytogenes - Partie 1 : méthode de recherche. Amendement 1 :
    Modification des milieux d'isolement, de la recherche de l'hémolyse et introduction de données de
    fidélité.
    4. ISO 11290-2. Microbiologie des aliments - Méthode horizontale pour la recherche et le
    dénombrement de Listeria monocytogènes - Partie 2 : méthode de dénombrement.

    PRESENTATION
    Code Description
    0120285 6 flacons de 225 ml
    0120212 4 poches de 3 litres
    0120328 80 poches de 3 litres en carton palette
    0120216 2 poches de 5 litres
    0120320 55 poches de 5 litres en carton palette
    Autre présentation : nous consulter

    Z.A. La Parlière - 69610 - Saint Genis l'Argentière - France


    Tel : +33 (0)4 74 72 36 10 - [email protected] www.indicia.fr

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