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République Algérienne Démocratique et Populaire
Ministère de l’Enseignement Supérieur et de la Recherche Scientifique

Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene
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U.S.T.H.B
Faculté des sciences biologiques
Evaluation du dysfonctionnement de la chaine respiratoire mitochondriale induit par un AINS : Diclofenac
Évaluation du dysfonctionnement de la
de sodium
chaine respiratoire mitochondriale induit par

un AINS : Diclofenac de sodium
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Rédigé par :
➢ DAMACHE
Question 1: Syrine
➢ BENDAFLA Dounia
➢ BOUZID Nour-El-Houda
➢ ZIANI Yasmine Lydia
Question 1 :
• Question 2 :
Justification du choix d’organe (foie) :

• Facile à isoler.
• Riche en mitochondrie (20 %).
• Centre de plusieurs réactions métaboliques.
• Question 3 :
Justification du choix de la vitesse et le temps de centrifugation :

Dans une première centrifugation à faible accélération, les éléments
les plus massifs vont sédimenter et former un culot au fond du tube.
Tous les autres éléments (pour lesquels l’accélération a été trop faible
pour contrebalancer les effets de l’agitation moléculaire, ou pour
lesquels le temps de centrifugation a été trop court) vont rester dans la
fraction liquide appelée alors surnageant.
• La première centrifugation à faible vitesse : 800 g pendant 5 minutes,
cette vitesse permet d’obtenir l’ensemble des débris lourds (les débris
de la paroi ou la membrane plasmique et le noyau)
• La deuxième centrifugation à haute vitesse : 1000 g pendant 10
minutes, permet la récupération du surnagent qui contient la fraction
brute des mitochondries.
• Question 4 :
L’intérêt de l’utilisation KCN (cyanure de potassium) dans la solution

tampon :
Le KCN permet l’inhibition du complexe cytochrome C oxydase (Complexe 5)
de la chaine respiratoire ce qui réduit la réduction d’oxygène.
• Question 5 :
La réaction de réduction de ferricyanure de potassium :
• Question 6 :
Un autre protocole expérimental :
1. Un autre moyen pour étudier le phénomène sur des souris vivantes :
utilisation d’animaux génétiquement modifiés pour sécréter de la
luciférase. Cette enzyme produit de la lumière quand elle est combinée
à un autre composé, appelé luciférine. C’est ainsi que les lucioles
illuminent parfois nos soirées estivales.
2. mise au point de deux molécules qui sont inoculées au rongeur,
passent à l’intérieur des mitochondries, où elles activent une réaction
chimique. Les mitochondries produisent alors de la luciférine et
l’éjectent vers l’extérieur.
3. La luciférine se combine avec la luciférase sécrétée par les souris
génétiquement modifiées: elles produisent de la lumière. “Dans un
pièce entièrement assombrie, vous pouvez voir les souris briller,
exactement comme des lucioles”
4. Mesure de l’intensité lumineuse pour se faire une idée précise du bon
fonctionnement des mitochondries. Quand elles fonctionnent moins
bien, leur membrane laisse entrer moins de composés chimiques. La
production de luciférine baisse, et donc la luminosité aussi.
• Question 7 :
moyenne
0.6
0.5
0.4
0.3
moyenne
0.2
0.1
0
contrôle dic
D’après le test de student : la pvalue =0.00016 très inferieur a 0.05 donc
la différence est très hautement significative
Interprétation :
Pour le groupe contrôle on remarque qu’il y a une augmentation d’absorbance d’une
manière significative à une longueur d’onde de 420 nm, ce qui nous renseigne sur la
réduction de ferricyanure de potassium dans une mitochondrie saine fonctionnelle
qui a assuré une bonne respiration grâce à les 5 complexes de la membrane interne .
Pour le groupe traité avec du diclofenac du sodium on remarque qu’il y a une
diminution de l’absorbance ce qui nous dit une inhibition de la réduction de
ferricyanure de potassium , donc la presece de diclofenac a permit un
disfonctionnement d’un complexes de 5 complexes responsables de la respiration
dans la mitochondrie qui est le complexe c oxydase où se trouve l’accepteur final
des e- qui est l’oxygene grace a l e KCN introduit avec ferricyanure de potasium.
References:
*Le protocole expérimentale : https://www.bluewin.ch/fr/infos/faits-
divers/mesurer-l-activite-des-mitochondries-425021.html
*la justification des vitesse de centrifugation : https://planet-
vie.ens.fr/thematiques/manipulations-en-laboratoire/la-centrifugation
* la réaction de réduction de ferricyanure de potassium https://www.als-

japan.com/1822.html
*le role du KCN :
https://tel.archivesouvertes.fr/tel01167467/file/VA2_Long_Romain_29042014.
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Evaluation du dysfonctionnement de la chaine respiratoire mitochondriale induit par un AINS : Diclofenac

chaine respiratoire mitochondriale induit par

Justification du choix d’organe (foie) :

Justification du choix de la vitesse et le temps de centrifugation :

L’intérêt de l’utilisation KCN (cyanure de potassium) dans la solution

La réaction de réduction de ferricyanure de potassium :

* la réaction de réduction de ferricyanure de potassium https://www.als-

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