MAESTRIA EN BIOQUIMICA CLINICA Y MICROBIOLOGIA

MODULO VI

ENZIMOLOGÍA CLÍNICA
CLASIFICACION DE LAS ENZIMAS

MSc. Violeta A. Fernandez Gálvez

Historia
A lo largo del siglo XIX y durante gran parte del XX no se disponía de una
nomenclatura o clasificación sistemática de las enzimas.
El nombre de cada enzima reflejaba vagamente la reacción catalizada en el
mejor de los casos, y no era en absoluto extraño encontrar nombres nacidos
directamente de la jerga del laboratorio descubridor:
• diastasa (separador, por separar dextrinas solubles a partir de almidón
insoluble).
• Otros que aún siguen hoy en plena vigencia a pesar de su inadecuación o
su falta de sistemática descriptiva: catalasa, pepsina, tripsina, etc.
• En otras ocasiones se pretendía reflejar el género o especie biológica de
procedencia; así, la ficina, un grupo de enzimas proteolíticas extraídas
del género Ficus, o la papaína, aislada del látex de la papaya.

2
Historia
Para tratar de poner orden y dar lugar a un
criterio uniforme de clasificación, en los años
50 del siglo pasado se constituyó en el seno
de la I.U.B. una Comisión para redactar una
serie de reglas a partir de las cuales la
denominación de las distintas enzimas fuera
inequívoca.
Esta Comisión (Enzyme Commission, E.C.)
presentó sus primeras propuestas al V
Congreso de la IUB celebrado en Moscú
(1961).

3
 Nombre sistemático: Grupo transferido

ATP: hexosa fosfotransferasa

Donador Aceptor

Grupo
Número sistemático Subgrupo

Enzyme EC 2.7.1.1 Enzima

Comission
Sub-subgrupo

Nombre común: Hexoquinasa

5
6
 Enzimas que catalizan una misma reacción pueden
proceder de muy diversas fuentes (microorganismos,
vegetales, animales), y varía ampliamente su
estructura molecular; igualmente, dentro de un https://www.brenda-enzymes.org
mismo organismo, enzimas que catalizan la misma
reacción pueden corresponder a estructuras https://www.genome.jp
moleculares distintas (isoenzimas). Por ello, se suele
añadir entre paréntesis la fuente biológica de la
enzima, y en su caso el órgano; por ejemplo,

[E.C. 2.7.1.1], ATP:D-hexosa fosfotransferasa, hexokinasa (cerebro de rata)

7
 CLASIFICACION
1 DE LAS ENZIMAS

8
1. Oxidorreductasas
2. Transferasas
Clasificación de enzimas:
3. Hidrolasas Grupos
4. Liasas
5. Isomerasas
6. Ligasas
7. Translocasas
 Grupo 1: Oxidorreductasas
Catalizan reacciones de oxidorreducción

Ared + Box Aox + Bred

A : es el reductor o dador electrónico; en el curso B : es el oxidante o aceptor electrónico; en el curso
de la reacción se oxida (pierde electrones) de la reacción se reduce (gana electrones)

En el medio biológico tienen lugar a través de la

transferencia de electrones o átomos de En las reacciones redox, siempre tienen que estar
hidrógeno de un dador (reductor) a un aceptor presentes a la vez el aceptor y el dador electrónico.
(oxidante). Otras veces la reacción consiste en la
incorporación de átomos de oxígeno en el
substrato.
Ej: E.C. 1.1.3.4 BUSCAR
SUBGRUPOS
1.1.- Actúan sobre grupos alcohol (-CHOH-)
1.2.-Actúan sobre grupos aldehído u oxo (-
CHO, -CO-)
1.3.-Actúan sobre grupos -CH-CH
1.4.-Actúan sobre grupos -CH-NH2
1.5.-.- Actúan sobre grupos -CH-NH
1.6.-.- Actúan sobre NADH o NADPH

11
Deshidrogenasas
• La transferencia de electrones catalizada por estas
enzimas se hace en forma de átomos de hidrógeno
(2 átomos, esto es, dos protones y dos electrones, o
un ion hidruro H-, un protón y dos electrones).
• Las deshidrogenasas utilizan siempre alguna
coenzima; por ejemplo, nucleótidos de
nicotinamida (NAD+, NADP+), nucleótidos de
flavina (FAD, FMN), ácido lipoico, ácido
ascórbico, quinonas, pteridinas, etc.

12
Alcohol deshidrogenasa
Cataliza la oxidación de alcoholes a
aldehidos, con NAD+ como aceptor. Se
trata de una importante enzima, implicada
en el metabolismo del etanol o alcohol
etílico, siendo la última enzima del
proceso de fermentación alcohólica. Tiene
poca especificidad, dado que es capaz de
oxidar un gran número de alcoholes
primarios o secundarios y hemiacetales.
Es una metaloenzima, que contiene Zn o
Fe.

13
Oxidasas
• Son las enzimas que utilizan como aceptor
electrónico el oxígeno molecular, produciéndose
por lo general H2O2 o H2O, o incluso el anión
superóxido O2-,en el curso de la reacción. Al
utilizar O2, estas reacciones son aeróbicas,
mientras que las catalizadas por deshidrogenasas
pueden tener lugar aeróbica o anaeróbicamente.
Las oxidasas suelen ser flavoproteínas o
metaloproteínas, o ambas cosas a la vez; las
reacciones que catalizan suelen ser bastante
complejas.

14
Glucosa Oxidasa
Se trata de una enzima de origen fúngico
con una gran cantidad de aplicaciones
biotecnológicas. Es una flavoproteína con
estructura de homodímero, y utiliza FAD
como cofactor. La gran mayoría de los
métodos actuales de determinación de
glucosa en fluidos biológicos se basa en
la reacción catalizada por esta enzima.

EC 1.1.1.34
15
Peroxidasas
• Utilizan peróxidos (R-O-OH) y muy frecuentemente el
peróxido de hidrógeno (H2O2) como aceptores
electrónicos. Este compuesto se produce muy
frecuentemente en las reacciones catalizadas por
oxidasas, y puede resultar bastante dañino hacia las
estructuras celulares. De ahí que sean necesarias enzimas
encargadas de su reducción a H2O. Este papel lo
cumplen las peroxidasas. En general, las peroxidasas
suelen ser hemoproteínas, es decir, con un grupo
prostético porfirínico. Las peroxidasas corresponden al
subgrupo 1.11. de la clasificación sistemática.

16
Catalasa
Pertenece a este grupo la catalasa, enzima
que cataliza la descomposición de H2O2
a H2O y oxígeno molecular O2.
Es muy abundante en los leucocitos
polimorfonucleares, y es la responsable
del burbujeo de oxígeno cuando la sangre
entra en contacto con peróxido de
hidrógeno (agua oxigenada).

17
18
Oxigenasas
• Introducen oxígeno molecular en la
molécula de substrato, lo que resulta
normalmente en la apertura de una
estructura cíclica cuando la introducción se
hace en un enlace doble (dioxigenasas), o
bien se introduce un solo átomo de oxígeno
y el otro se libera en forma de agua
(monooxigenasas). Aparecen en los
subgrupos 1.13 y 1.14 de la clasificación
sistemática.

19
Homogentisato-1,2-dioxigenasa
Forma parte de la vía de degradación de los
aminoácidos fenilalanina y tirosina. Su
carencia congénita conduce a la enfermedad
metabólica conocida como alcaptonuria.
Se hereda con un patrón autosómico recesivo y
causada por un defecto en el gen HGD que
codifica a la enzima homogentisato-1,2-
dioxigenasa.
Se caracteriza por la orina de color oscuro,
ocronosis (pigmentación del tejido conjuntivo)
y artrosis degenerativa de las articulaciones.

20
Hidroxilasas- Fenilalanina hidroxilasa
• Catalizan la introducción de un átomo de oxígeno a
partir de oxígeno molecular con formación de un grupo
hidroxilo -OH, al tiempo que un segundo dador
electrónico reduce al átomo de oxígeno restante.
• Cataliza la formación de tirosina a partir de
fenilalanina, introduciendo un grupo hidroxi- en el
anillo bencénico de la fenilalanina. Utiliza como
correductor un biopterina reducida (representada por
AH2).
• Es una enzima clave en el metabolismo de los
aminoácidos aromáticos, y su deficiencia congénita
conduce a una grave enfermedad congénita, la
fenilcetonuria.

21
Fenilcetonuria

El exceso de fenilalanina dietética (es decir, que no es usada para síntesis

de proteínas) se convierte, en condiciones normales, en tirosina por acción
de la fenilalanina hidroxilasa: la tetrahidrobiopterina (BH4) es un cofactor
esencial para esta reacción. Cuando una o varias mutaciones genéticas
determinan deficiencia o ausencia de fenilalanina hidroxilasa, se acumula
la fenilalanina de la dieta; el encéfalo es el principal órgano afectado, quizá
por alteración de la mielinización.
22
Reductasas-Dihidrofolato reductasa

• Reduce el dihidrofolato a tetrahidrofolato, que es una coenzima activa en la transferencia de grupos

monocarbonados, de gran importancia en el metabolismo de nucleótidos (síntesis del anillo purínico).
Por ello su inhibición específica se emplea en la quimioterapia antineoplásica, mediante un inhibidor
competitivo de esta enzima, el methotrexate.
• El metotrexato (MTX) es un análogo estructural del ácido fólico que actúa inhibiendo competitivamente
la enzima dihidrofolato reductasa (DHFR), la cual participa en la formación del ácido folínico que es
necesario para la formación del nucleósido timidina, requerido para la síntesis de ADN, ARN,
timidilatos y proteínas
23
 Grupo 2: Transferasas
Catalizan reacciones de transferencia de grupo:

A-X + B A + B-X

Dador: Aceptor - Grupo transferido - transferasa

ATP: D-Hexosa Fosfotransferasa
Nombre común: hexokinasa
EC 2.7.1.1
SUBGRUPOS

2.1.-Transfieren grupos monocarbonados (-CH3, -CHO, -COOH, -CHNH2,

etc.)
2.4.- Glicosiltransferasas
2.5.-Transfieren grupos alquil- o aril-, distintos del grupo metil-.
2.6.-Transfieren grupos nitrogenados
2.7.- Transfieren grupos fosforados

25
Transfieren grupos monocarbonados

El subgrupo 2.1 comprende a las transferasas de

grupos monocarbonados, esto es, que transfieren
entre dador y aceptor los grupos metilo -CH3,
hidroximetilo -CH2OH, formil -CHO y
formimino -CHNH.
Las metiltransferasas utilizan normalmente como
dador la coenzima S-adenosil metionina (SAM);
las transferencias de los restantes grupos se hacen
a partir de coenzimas folínicas.
Estos últimos tienen particular importancia en la
síntesis de nucleótidos, entre otros procesos.

26
Catecol-O-metiltransferasa

Transfiere el grupo metilo de la S

adenosilmetionina (SAM) a un
catecol aceptor. SAM se convierte
en S-adenosil homocisteína (SAHC).
Se trata de una reacción de gran
importancia en el catabolismo de
aminas neurotransmisoras
(catecolaminas), como dopamina,
adrenalina y noradrenalina. Esta
enzima funciona en combinación
con la aminooxidasa
(monoaminooxidasa, MAO, EC
1.4.3.4) para dar los distintos
catabolitos de estas aminas.

27
Catecol-O-metiltransferasa

Transfiere el grupo metilo de la S

adenosilmetionina (SAM) a un
catecol aceptor. SAM se convierte
en S-adenosil homocisteína (SAHC).
Se trata de una reacción de gran
importancia en el catabolismo de
aminas neurotransmisoras
(catecolaminas), como dopamina,
adrenalina y noradrenalina. Esta
enzima funciona en combinación
con la aminooxidasa
(monoaminooxidasa, MAO, EC
1.4.3.4) para dar los distintos
catabolitos de estas aminas.

28
Glicosil transferasas

En el subgrupo 2.4 están las glicosiltransferasas, que

transfieren restos glicosilo entre dador y aceptor.
En ocasiones el aceptor es fosfato inorgánico, y en ese caso
hablamos de fosforilasas.
Estas reacciones suelen ser reversibles en las condiciones
intracelulares, de modo que la fosforilasa, por ejemplo,
puede catalizar la transferencia de restos glicosídicos desde
un éster fosfato a una cadena de poli- u oligosacárido. Otras
veces se transfiere todo un segmento oligosacárido, como en
el caso de la enzima ramificante del glucógeno.
Asimismo, muchas de estas enzimas utilizan como
substratos derivados de nucleósido-difosfatos, como el UDP,
ADP o CDP.

29
Glucógeno Fosforilasa

Cataliza la reacción de degradación del glucógeno,

hepático o muscular.
La reacción de degradación es una fosforolisis
realizada sobre un residuo α-1,4-glucosil situado en
los extremos no reductores de α-glucanos como
amilopectina, amilosa o glucógeno.
Utiliza como cofactor piridoxal fosfato.
La enzima hepática controla, mediante esta reacción,
el nivel de glucemia sistémica. Por ello no es de
extrañar que sea una enzima fuertemente regulada;
alostéricamente, mediante una activación ejercida por
AMP e inhibición por ATP, ADP y glucosa-6-fosfato;
y lo que es más importante, a través de una compleja
cascada de modificaciones covalentes.

30
Subgrupo 2.6: transfieren grupos nitrogenados

Otro importante subgrupo de transferasas es el 2.6 que

agrupa las enzimas encargadas de la transferencia de
grupos nitrogenados, y particularmente el 2.6.1
(aminotransferasas o transaminasas). Estas últimas catalizan
el intercambio de un grupo amino entre un aminoácido y un
cetoácido; se trata de reacciones reversibles que utilizan
como coenzima el piridoxal fosfato. Una pareja aceptor-
dador muy frecuente en estas reacciones es oxoglutarato-
glutamato. De esta manera en el catabolismo de los
aminoácidos el nitrógeno amínico va concentrándose en
forma de glutamato, para formar posteriormente amoníaco
libre mediante la glutamato dehidrogenasa

31
 TEST BIOLÓGICOS DE ENFERMEDAD
HEPATOBILIAR

TRANSAMINASAS
Metabolismo de aminoácidos: Transferir grupos amino.
GOT/AST: Aspartato aminotranferasa
GPT/ALT: Alanino aminotransferasa
INDICADORES SENSIBLES DE CITÓLISIS O DAÑO
CELULAR HEPÁTICO
GOT: Enzima citoplasmática y mitocondrial, presente en
hepatocitos, corazón, músculo esquelético y riñón. Vm: 17
hrs. Más sensible
GPT: Enzima citoplasmática, mas específica de daños
hepático o renal. Vm: 47 hrs
Aumentan en un 40-50% en obesos, con el ejercicio físico
V.N. 9-35 U/L
o daño muscular: got aumenta.
GPT: 7-40 U/L
Hemólisis: got aumenta.
GOT:10-40 U/L
32
 TEST BIOLÓGICOS DE ENFERMEDAD
HEPATOBILIAR
TRANSAMINASAS
Indice de masa corporal elevado: >40-50%
Ejercicio: AST y ALT menores
Entrenamiento de fuerza: > 50%
Fallo renal:< ALT
Hemolisis > AST
El piridoxal 5 fosfato actúa como cofactor necesario
de ASY y ALT

Se miden a través de reacciones acopladas,

utilizando NADH como el producto final de la
reacción que se mide.
Las muestras para AST y ALT, son estables en
sangre durante máximo 12 o 24 horas.
33
HIPERTRANSAMINASEMIA
PATOLOGÍA VALORES
Hepatitis agudas: Mayor elevación de GPT que

Hepatitis virales >1000 U/l

Epstein Barr, CMV, VIH No mas de 8x
TB, fiebre tifoidea, parásitos Menor a 300 U/L
Intoxicacion con paracetamol Elevado
Hepatitis Alcohólica Moderada, inferior a 500 U/l. GOT/GPT
GOT.

mayor a 2.
Insuficiencia hepática aguda grave Elevación intensa
Hepatitis Crónicas Moderada, inferior a 300 U/l
Cirrosis hepática Moderada, menor a 300 U/l
Colestasis Moderada , menor a 500 U/l, F.A. elevada
Pancreatitis aguda Ligera-moderada, GOT: pronostico de
gravedad cuando es mayor a 250 U/l
Infarto Agudo de Miocardio Solo se eleva la GOT (8 hrs), pico máximo a
36 hrs.
34
Subgrupo 2.7: Fosfotransferasas o kinasas

Normalmente el compuesto dador es el

ATP, o más propiamente, el complejo
ATP-Mg2+. La importancia de estas
enzimas deriva del hecho de ser
enzimas activantes de multitud de
substratos, que entran en el
metabolismo en forma de ésteres
fosfóricos. En el subgrupo 2.7.7
encontramos las nucleotidil
transferasas, entre las que se
encuentran enzimas como las DNA
polimerasas y las RNA polimerasas.

35
Creatin Kinasa
Cataliza la transferencia de un fosfato desde el ATP a la
creatina para formar creatinfosfato, un fosfágeno muy
abundante en tejidos cuyas necesidades energéticas son
grandes y pueden fluctuar ampliamente, como el músculo
esquelético, corazón, cerebro y espermatozoides.
Se trata de una enzima homo o heterodimérica formada por
subunidades de tipo B o de tipo M (existen además otros dos
tipos de subunidades de origen mitocondrial). Así, las isozimas
de la CK pueden ser BB, MB y MM. La isozima BB es
predominante en el tejido cerebral, y la MM en el músculo
esquelético. La isozima MB está presente en el músculo
miocárdico y se utiliza en química clínica como enzima
marcadora de infarto de miocardio, siendo su nivel elevado un
signo relativamente precoz del mismo, muy específico y con
importancia pronóstica

36
Creatin Kinasa

La CK necesita magnesio como cofactor y tiene

grupos sulfidrilo en su reducidos en su sitio
catalitico.
MEDIDA:
Electroforesis
Inmunoensayo de masa, con un anticuerpo
monoclonal especifico para CK-MB
Electroforesis de alta resolución

37
 Grupo 3: Hidrolasas
Catalizan reacciones de hidrólisis

A-B + H2O A-OH + H-B

El nombre de las hidrolasas se forma a partir del substrato seguido de
"hidrolasa". Ahora bien, el nombre común o recomendado de estas
enzimas se forma con el nombre del substrato seguido del sufijo "asa";
es decir, en nombres como ureasa, fosfatasa, amilasa, etc., se entiende
que se trata de enzimas hidrolíticas. En muchos casos, particularmente
en las proteinasas, se conservan nombres consagrados por el uso sin
que tengan ninguna sistemática; por ejemplo, tripsina, pepsina, papaína,
ficina, etc.
SUBGRUPOS

3.1.- Hidrolizan enlaces éster

3.2.- Glicosidasas
3.4.-Péptido hidrolasas
3.6.-Hidrolizan acil-anhídridos

39
Subgrupo 3.1. Hidrolizan enlaces éster
Acetilcolinesterasa
Esta enzima hidroliza la acetilcolina a acetato
y colina. y de esta manera se interrumpe la
acción de este neurotransmisor en los
receptores colinérgicos. Es el inactivador
fisiológico de este tipo de sinapsis. Por ello,
los inhibidores de la acetilcolinesterasa (por
ejemplo, los organofosfóricos) hacen persistir
el efecto de la acetilcolina, lo que en la placa
neuromuscular se traduce en una activación
continua de la misma, produciendo parálisis
muscular (y en su caso la muerte a través de
la parálisis respiratoria).

40
Subgrupo 3.1. Hidrolizan enlaces éster
Acetilcolinesterasa

La AChE es una hidrolasa de serina, su proceso catalítico

implica acilación y desacilación en un residuo de serina de la
triada catalítica en el centro activo de la enzima.

41
Subgrupo 3.1. Hidrolizan enlaces éster
Acetilcolinesterasa

Los aminoácidos componentes de la triada

catalítica son una serina (Ser 200), una histidina
(His 440) y un glutamato (Glu 327).
Las enfermedades deAlzheimer, Parkinson y
miastenia gravis son las tres neuropatologías más
estudiadas en relación con alteraciones en la AChE.

42
FOSFATASA ALCALINA

ALP mas abundante en plasma están Rangos de Referencia:

Vida media:
codificadas por un único gen (brazo Aumento de niveles en la 1° década de la
Intestino: minutos
corto del cromosoma 1 1p36.12) y vida.
Hueso: 1 día
En mujeres después de la menopausia la
produce la isoenzima no especifica Hígado: 3 días
de tejido: riñon, hígado y hueso. isoenzima del hueso aumenta.
Placenta: 7 días
2 genes (cromosoma 2) Fosfatasa de Embarazo: 2x, 3x isoenzima placentaria.
origen placentario e intestinal. Alto índice de masa corporal,
tabaquismo: >10%
Anticonceptivos orales, transfusiones
sanguíneas: < 20 %

43
FOSFATASA ALCALINA
La actividad normalmente se mida utilizando p-
nitrofenol fosfato como sustrato a ph alcalino.
Zn y Mg.
EDTA disminuye la actividad.
Inhibición con fenilalanina: reduce isoenzimas
intestinal y de placenta.
Levamisol: Isoenzimas de hueso e hígado.
Electroforesis de alta resolución en gel de
poliacrilamida y enfoque isoeléctrico.
CAUSAS DE ELEVACION:
Colestasis, osteosarcoma, tumores metastásicos,
diabetes (intestina, hueso) y cirrosis.
Placenta: tumores de células germinales,
endometrial, leucemia.

44
Subgrupo 3.2: Glicósido hidrolasas (glicosidasas)

Es un numeroso grupo de enzimas cuya acción consiste en la hidrólisis de enlaces glicosídicos.

Tienen un gran interés biotecnológico, en las industrias del almidón, de la celulosa y otros
productos naturales . Se clasifican en tres subgrupos:
3.2.1, rompen O-glicósidos;
3.2.2 rompen N-glicósidos;
3.2.3, rompen S-glicósidos.
El mecanismo de acción de todas ellas es similar, presentando dos residuos de aminoácidos
dicarboxílicos (aspártico o glutámico) en el centro activo.
45
Lisozima
Hidroliza los enlaces β-glicosídicos
establecidos entre residuos de
Nacetilmurámico y N-acetil glucosamina
de los peptidoglicanos bacterianos. Se trata
de una enzima ampliamente difundida en
la naturaleza, desde los bacteriófagos hasta
los mamíferos, y cumple una función
esencialmente bactericida.
Está presente en multitud de secreciones
(lágrima, clara de huevo, etc.) y su
estructura y función están muy bien
estudiadas. Fue la primera enzima que
pudo estudiarse mediante cristalografía de
rayos X formando complejo con su
substrato.

46
 Grupo 4: Liasas
Son enzimas que catalizan reacciones de rotura (o establecimiento) de un enlace de forma que la reacción
puede describirse como adición o sustracción de un grupo a o desde un doble enlace, y que normalmente
suelen ser reversibles.
Se caracterizan por tener un substrato en una dirección y dos en la contraria

A=B + X AXB
COO- H2O COO-
CH HO CH
CH CH2
COO- COO-
Fumarato L-Malato
(trans-)
 SUBGRUPOS

4.1.-Liasas C-C
REACCIONES
4.2.-Liasas C-O
- Descarboxilasas
4.3.-Liasas C-N
- Aldolasas
4.4.-Liasas C-S
- Anhidrasa carbónica
4.5.-Liasas C-halógeno
- Adenilato ciclasa
4.6.-.Liasas P-O
4.99.-Otras liasas 48
Enzimas de interés clínico
El subgrupo 4.1 contiene varios sub-subgrupos importantes de enzimas.
• 4.1.1 son las descarboxilasas, enzimas que eliminan grupos carboxilo, de gran importancia en el
metabolismo. Muchas de ellas utilizan tiamina difosfato o piridoxal fosfato como coenzimas.
• 4.1.2 son las aldehido-liasas o aldolasas, que catalizan condensaciones aldólicas
• 4.1.3 están agrupadas las oxoácido-liasas, con enzimas de gran importancia metabólica, como la citrato
sintasa o enzima condensante.

HISTIDINA DESCARBOXILASA
Cataliza la descarboxilación de histidina para
dar histamina. Ésta reacción y otras similares
son importantes en la síntesis de numerosos
neurotransmisores.
Esta enzima es un homodímero que requiere
piridoxal fosfato. La histamina es un efector
muy potente en los estados alérgicos y
anafilácticos. 49
Enzimas de interés clínico
El centro activo de la mayoría de las anhidrasas carbónicas
contiene un ion de zinc.
El ion zinc está coordinado con los átomos de nitrógeno de
los anillos de imidazol de tres residuos de histidina, His94,
CARBONATO DESHIDRATASA His 96 e His119
Esta enzima cataliza la hidratación de CO2 a
ácido carbónico, el cual se disocia
inmediatamente en bicarbonato y protón.
Requiere zinc como cofactor, y se conocen al
menos siete formas moleculares distintas de la
enzima en mamíferos. Tiene una gran
importancia fisiológica, ya que participa en el
proceso de transporte de gases en sangre, en la
secreción de HCl por el estómago y en la
excreción renal de bicarbonato.

50
Grupo 5: Isomerasas
Catalizan reacciones de isomerización

Algunas reacciones isomerásicas:

- Racemasas
- Oxidorreductasas intramoleculares
- Mutasas o transferasas intramoleculares

Catalizan reagrupamientos dentro de la misma

molécula. A pesar de ser (aparentemente)
enzimas monosubstrato, muchas veces las
reacciones catalizadas por estas enzimas son
muy complicadas.
SUBGRUPOS

5.1.-Racemasas y epimerasas
5.2.-Isomerasas cis-trans
5.3.- Oxidoreductasas intramoleculares
5.4.-Transferasas intramoleculares (mutasas)
5.5.-Liasas intramoleculares
5.99.-Otras isomerasas

52
DNA Topoisomerasa

Esta enzima cataliza la interconversión entre distintos

isómeros topológicos del DNA, por ejemplo, la
relajación de un superenrollamiento negativo. No
requiere ATP. Participa en multitud de procesos
asociados a la replicación, reparación y recombinación
del material genético.
Estas acciones las lleva a cabo a través de la
introducción de un corte en una cadena (nick,
melladura) y el cabo roto de DNA se fija
transitoriamente a través de un fosfodiéster al grupo
fenol de un residuo de tirosina. Posteriomente la cadena
rota vuelve a soldarse por acción de la misma enzima

53
DNA Topoisomerasa

Si su actividad es incompleta las topoisomerasas pueden

generar roturas persistentes con el enzima unido
covalentemente a los extremos 3’ o 5’ del corte, una
estructura aberrante que puede comprometer la
supervivencia celular y/o la integridad del genoma con las
consiguientes implicaciones en tumorigénesis.
Esta peculiaridad del mecanismo de acción de las
topoisomerasas es además la base de la eficacia antitumoral
de los llamados venenos de topoisomerasas, que permiten al
enzima llevar a cabo la rotura del DNA pero inhiben la
reacción de religación, induciendo así roturas en el DNA que
afectan preferentemente a las células tumorales, ya sea por su
alto índice de proliferación como por carecer frecuentemente
de algunos mecanismos de reparación

54
 Grupo 6: Ligasas
Catalizan la unión de dos moléculas concomitante a la hidrólisis de un enlace pirofosfato del ATP u
otro nucleósido trifosfato. Para estas enzimas se utiliza el nombre de "sintetasas" en contraposición a
las "sintasas", que son liasas y no requieren la rotura de un enlace rico en energía. Las reacciones
catalizadas por las sintetasas suelen ser bastante complejas, ya que son reacciones trisubstrato como
mínimo. La reacción general podría describirse como

A + B + ATP A-B + ADP + Pi

O bien

C + D + ATP C-D + AMP + PPi

SUBGRUPOS

6.1.-Ligasas C-O
6.2.-Ligasas C-S
6.3.-Ligasas C-N
6.4.-.Ligasas C-C
6.5.-Ligasas P-O

56
Subgrupo 6.1: Ligasas C-O
El subgrupo 6.1 contiene las ligasas que forman enlaces C-O.
Entre ellas, el sub-subgrupo
6.1.1 es el correspondiente a las aminoacil-tRNA sintetasas,
enzimas encargadas de la
activación de los aminoácidos en la síntesis de proteínas.

Tirosina-tRNA ligasa
La reacción es dependiente de ATP, formándose en una primera fase un
aminoacil-adenilato y transfiriéndose después el residuo aminoacil al
término 3' del polinucleótido. Estas enzimas son de una especificidad
absoluta para sus substratos, tanto el aminoácido como el tRNA.

57
Subgrupo 6.4: Ligasas C-C
El subgrupo 6.4 presenta las enzimas encargadas de formar
enlaces C-C, normalmente en
reacciones de carboxilación, por lo que las enzimas de este
grupo son las llamadas
carboxilasas (no confundir con las descarboxilasas). La
mayor parte de ellas contienen
biotina como grupo prostético.

Acetil-CoA carboxilasa
Es una enzima multifuncional. Interviene en la formación de malonil-
CoA a partir de acetil-CoA y CO2, que es el paso limitante en la
biosíntesis de ácidos grasos. Es el prototipo de las enzimas conocidas
como carboxilasas. Utiliza, como todas las carboxilasas, biotina como
cofactor. Es una enzima sometida a regulación, con efectos alostéricos y
modificación covalente a través de fosforilación.
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 Grupo 7: Translocasas

Las translocasas de AN son enzimas que utilizan la energía libre liberada por el nucleósido trifosfato
(ATP), para alimentar el movimiento unidireccional a los largo de las cadenas de ADN o ARN.
Son considerados motores moleculares.

Existen translocasas de membrana interna y de membrana externa

Junto a su actividad de translocación estas enzimas pueden eliminar las proteínas unidas a AN.
Translocasas

Translocasas mitocondriales de
ADP y ATP
Clase de nucleótido translocasas
abundante en las mitocondrias y
componente integral de la membrana
mitocondrial interna. Facilita el
intercambio de ADP y ATP entre el
citosol y la mitocondria, vinculando
así el compartimento subcelular de
producción de ATP a aquellos de
utilización del ATP.

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Translocasas
La traslocasa de la membrana
externa (TOM, siglas
en inglés de translocase of the outer
membrane) es un complejo proteico que se
encuentra en la membrana mitocondrial
externa de la mitocondria. Su función es
permitir el movimiento de proteínas a través
de esta barrera y hacia el interior del espacio
intermembranoso mitocondrial. La mayoría
de las proteínas que se necesitan en la
función mitocondrial se codifican en
el núcleo celular. La membrana externa de
la mitocondria es impermeable a moléculas
con un tamaño mayor de 5000 Daltons

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Thanks!
Any questions ?

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