Tema

Te
ema 1: Pendie
Pendiente
ente de adquisición
adquisició
La! mi
La
La!microbiología
microbiología clínica ica realiza!diagnósticos!
clínic re
etiológicos! de! enfermedades! infecciosas,! infecciosas
El informe presuntivo es un
acon
ac
aconsejando!el!tratamiento!antimicrobiano.!
onse seja
jand
ja ndo!
o!el
el!t
!tra
rata
tami
mien
entoto!a
!ant
ntim
imic
icro
robi
bian
ano
o. diagnóstico hecho a partir
Cuanto! más! complejo! un! organismo,! más! de la observación al
sencilla! la! técnica! analítica.! Mientras! que! las! microscopio que se
técnicasde cultivoson!más!utilizadas!para!hongos confirma posteriormente.
y bacterias,!la!detección de antígenoses!de!especial! La visualización de los
interés! en! virus.! La! serología y microscopia es! de! cultivos permite realizar un
utilidad!para!cualquier!grupo!de!mmoo.! informe preliminar.
La! selección! de! las! pruebas! diagnósticas! se!
realiza! según! los! datos clínicos y epidemiológicos
del paciente (viaje al extranjero o contacto con fuente
de infección) realizando! un! diagnóstico clínico
tentativo de!sospecha!clínica,!orden de probabilidad
de agentes etiológicos y! nivel de urgencia:!como!
técnicas! rápidas! son! examen microscópico, detección de antígenos,
detección de ácidos nucleicos y Point of care.!
El! microbiólogo! debe ser capaz de dar una respuesta rápida, interpretar
resultados, recomendar nuevos estudios y conocer las normas específicas de recogida y
transporte de muestras.!Hay!que!tener en cuenta para el análisis se!debe!
conocer!el!origen y tipo de muestra, diagnóstico clínico de sospecha, signos y síntomas
principales y si ha habido administración previa de antimicrobianos (disminuye la
detección). El!trabajo es mejorable mediante!revisióndeinformaciónperiódica
de nuevas técnicas, datos epidemiológicos
lógicos importantes, comisiones hospitalarias, servicios
as El!laboratorio!microbiológico!debe!estar!
asistenciales y autoridades sanitarias
sanitarias.!
as.!
integrado!en!otros!campos para!poder!realizar!su!trabajo!correctamente.!
!!!!!!!!!
!!!!Responsabilidad del microbiólogo
1. Establecer un laboratorio que esté conforme con
…....las normas reguladoras.
2. Disponer de los métodos para
diagnosticar de forma rápida de mayor
interés.
3. Establecer relaciones con laboratorios
externas para pruebas especiales.
4. Mantener programas de control de
calidad que asegure la exactitud de
pruebas.
5. Proporcionar la información sobre las
pruebas analíticas dirigidas al médico.
6. Mantener un sistema computarizado que
sirva como un sistema de comunicación
para información preliminar, publicación
periódica de los patrones de sensibilidad de los
antimicrobianos, incidencias, notificaciones de
resultados inmediatas.
7. Vigilancia de los microorganismos
8. Mantener sistemas de conservación de todos los
...........especímenes a corto plazo y a largo plazo.
El médico debe conocer el menú, alertar al laboratorio si el
mo es altamente patógeno, priorizar las pruebas requeridas y
establecer una línea de comunicación adecuada, que además
sirva para solicitar una prueba que no aparezca en el menú.
 Tema 2: BIOSEGURAMENTE
La!bioseguridad es!distinta!en!función!de!la!ruta de exposicióny!las!actividadesque!se!realizan!
en!el!laboratorio!(contagio por aerosoles o agujas).!Es complejo establecer la relación
causa-efecto,!por!lo!que!es!imprescindible!conocer!los!
riesgos y niveles de riesgo, las medidas de contención y la formación en Contaminación:!presencia! las
de!un!agente!infeccioso!en!
técnicas y medidas de seguridad. la!superficie de!cualquier!
cosa!random!que!se!te!
Peligro:!todo!aquello!que! ocurra!(un!pato).!
La! seguridad! es! puede!producir!daño!
individual!y!daño!
responsabilidad! del! colectivo!(protéjanme).
jefe! de! laboratorio! y!
del! resto! del! personal!
pers Desinfección:!
Limpieza:!
de!l
de!laboratorio.! eliminación!mediante!
eliminación!de!
agentes!infecciosos,!
fregado!y!lavado.!
fuera del!organismo.

Daño:!consecuencia!
Daño:!c
Riesgo:!probabilidad! INMUNO
cuantificable!de!
producida!por!el!peligro!
producid
individual!o!colectivo.!
individu
producirse!daño!por! Esterilización:!
riesgo.! destrucción!de!todas!
las!formas!de!vida.!

Agentes biológicos:
MMOO incluidos los
genéticamente modificados,
cultivos celulares y
endoparásitos humanos,
susceptibles de originar
cualquier tipo de infección.

Se!incluyen!M. tuberculosis y!Plasmodium flaciparum del!

grupo!3,!por!ser!peligrosos!debido!a!virulenciao!resistencias.
Los! niveles de contención/seguridad (BSL/BL/P/NCB/C1-4)! son! métodos que!
aseguran!el!manejo!correcto!de!materiales!infecciosos!en!el!laboratorio,!co
aseguran!el!manejo!correcto!de!materiales!infecciosos!en!el!laboratorio,!con!el!objetivo!de!
reducir al mínimo la exposición del personal d de los laboratorios y el
entorno a agentes potencialmente peligrosos. !Para!mantener!el!nivel!
de! bioseguridad! adecuado! es! necesario! tener! unas! buenas prácticas de
laboratorio identificacndo! los! riesgos, conocer! el! manual de seguridad biológica
(procedimientos de trabajo) tomar!parte!en!una!formación continua y!controlar
!"Exquisito Además!es!requisito!obligatorio!
el mododeactuaciónanteincidentes.!"
trabajar!con!el!equipo de seguridad – barreras 1º –,!tanto!aparatos
(cabinas de seguridad biólogica) como equipos de protección Hay 4 niveles de
individual –EPI– (batas o pijamas, delantal de plástico, calzado, gafas de protección, contención, pero no
pantallas protectoras, mascarilla y guantes),!y!en!unas!instalaciones!– barreras 2º están relacionados
– con! diseño! especificado! que! dependerá! del! tipo! de! agente! directamente con los
infeccioso.! grupos de riesgo.
 Las! cabinas de seguridad
biológica es! el! principal!
ento! de! contención
elemento! ón
$ es!parte!de!la!contención física
ca. Todas!a!excepción!de
física. Todas!a!excepción!de!la! de!la!
cabina!básica!
cabina!básica!(tipo!I)!protegen!
ásica!(tipo!o!I) pr
protegen
tanto! a! la!
la muestr
muestra
m a,! como!
tra,!
tra com al!
trabajador or y! el! medio
ambiente.!Se!diferencian!en!el!
flujo! de! aire,! cuanto! mayor!
seguridad!menor!reciclaje!del!
aire.!En los niveles de riesgo 1 y 2
se pueden utilizar cualquier clase
de cabina, en las de riesgo 3 y 4 es
mejor utilizar las de clase III.

Clase!I:!El! Clase!II!A:!Las!de!clase! Clase!II!B1:! Clase!II!B2:! Clase!III:!En!

aire!se! IIA!de!flujo!laminar! La!cabina!de! Son!las!más! los!niveles!de!
mueve!hacia! tienen!2!filtros!HEPA! clase!II!B1! utilizadas,!y! bioseguridad!
el!interior!y! para!proteger!el! tiene!3! son!capaces! 3!y!4!se!
se!filtra!por! producto.!El!aire!del! filtros,! de!proteger! utilizan!
el!filtro! exterior!es!succionado! filtrando!el! el!usuario!y! únicamente!
HEPA.!! hacia!debajo!a!través!de! aire!que! la!muestra.! estas!
las!rejillas!y!luego!pasa! entra!a!la! No!se!recicla! cabinas.!
por!un!filtro!arriba!para! cabina.!! el!aire!del! Absolutamen
volver.!El!70%!del!aire! exterior#. te!cerrados.
recircula.!!

Se debe conocer y utilizar

correctamente los equipos
previamente limpios y en
perfectas condiciones, objetos
de vidrio y materiales
punzantes, limpieza de las
superficies de trabajo y los
reactivos que se vayan a utilizar,
además de otros elementos de
seguridad y máquinas.
En la gestión de residuos
sanitarios se fundamenta en la
clasificación de los residuos y el
marco legal para tratamiento.
Los residuos biológicos deben
ser esterilizados o incinerados.
Los objetos punzantes y
cortantes se depositan en
contenedores especiales y
etiquetados.
El transporte de la muestra se
realiza con triple envase. El
envase interior está envuelt
envuelto
en un material absorbente.
Se realizan controles de calidad
exhaustivos de las técnicas y
actividades de carácter
operativo para cumplir los objetivos de calidad.
 Tema
Tem
ma 3: EL AMOR
R ES
E COSA DE DOS (mil millones)
La!microbiología
La! microbiología clínica
m clínic ica se!encarga!de!decidir!qué!m
se!encarga!de!decidir!qué!mmoo!aislado!de!una!muestra!clínica!
se moo!aislado!de!una!muestra!clín
son!los!implicados!en!la!enfermedad!infecciosa!cuya!causa!se!pretende conocer.!
La! microbiota es! una! relación! 10:1! estable y! dinámica entre! el! organismo! y! mmoo!
resistentes a las defensas y!adaptados al!nicho!ecológico!en!el!
que!residen.!Se!contacta!con!los!mmoo!desde!el!parto;!ocurre!la! El microbioma es el contenido
colonización #sin!activación!de!la!RI!superando!las!defensas# genético de mmoo del
organismo. El microbioma
y!formándose!la!microbiota.!No es uniforme en todo el organismo.!
contiene miles de especies de
Aparte! de! la! microbiota! residente,! también! existe! la! biota! bacterias,
s, virus, hongos y
transitoria,!por!contacto!con!el!medio!ambiente,! de!mmoo!no! ss. Se encuentran en un
protozoos.
protozoos
adaptados!que!se!eliminan!con!un!simple!lavado. La!microbiota!
comensalismo
mens is sap
saprófito,
to, pepero
!estimula el SI, excluye invasores y toma parte en la nutrición y metabolismo
son potencialmente
so potencialmen patógenos
humano!.! Sin! embargo,! "provocan infecciones oportunistas, son un – oportunistas.
factor de confusión en diagnóstico de análisis microbiológicos y toman
parte en muchos estados patológicos".!!
En!caso!de!una!infección hay!una!colonización que!si!
produce!una!RI y!daño.!La diseminación puede ser a la
puerta de entrada o más alejado y la multiplicación puede
ser anterior o posterior a la diseminación.
La! enfermedad
en
enf ermedad
#Los reservorios mantienen infecciosa sa es! una!
los mmoo; si se eliminan el mmo manifestación!clínica!de!la!infección!relacionado!con!la!
ica!de!la!infe la!dosis,
sis, la!
no existirá. Hay reservorios
humanos, animales e inanimados. virulencia del mmoo oo y! la!
la rapidez de la RI.! La! enfermedad!
infecciosa! se! puede! dar! por! un! encuentro endógeno
#La transmisión ocurre por (oportunista) o! exógeno. En las infecciones puede haber hab
vía aérea, feco-oral, contacto directo, confusión entre los mmoo portadores y los patógenos.! La!
parenteral, transplacentaria y a infección!no!siempre!produce!enfermedad.!Si no se llega a la dosis
través de artrópodos.
mínima infectiva gracias a un SI fuerte no se sufre la enfermedad.!El!patógeno!
#El patógeno tiene distintas produce!patogenicidad,!capacidad!de!producir!daño!que!se!en!
puertas de entrada: inhalación, función! del! grado! tiene! una! mayor! o! menor! virulencia,!
ingesta, vía urinaria, piel traumada dependiente!de!la!susceptibilidad!de!los!huéspedes.!En caso del
o picaduras, conjuntiva, patógeno oportunista la enfermedad aparece si el organismo es
transfusiones o instrumental médico. susceptible.! El! daño! producido!
puede! ser! mecánico, celular,
#Las rutas de salida coinciden
modificación del metabolismo y RI
normalmente con las rutas de
del hospedador.! La! infección!
entrada.
asintomática!sigue!eliminando!los!
tomática!sigue!eliminando!los!
mmoo
mmoo.!
oo.! El! desenlace! dependerá!
dependerá de!
los!factores!conjuntos!del!huésped!y!el!microorganismo.
Tema 4: Animales microstáticos y cómo atraparlos
Muestras de áreas estériles (líquido articular,
lar, pleural,
)! se! realizan! en! condiciones! asépticas.!
CFR)! ép s.! En! estas!
RECOGIDA!DE!MUESTRA
muestras! no! hay! mmoo mmoo! por! lo! que! cualquier!
La! buena! muestra! es! la! recogida! en! cantidad
suficiente en!el!foco de infección con!una!mínima! aparición!será!relevante.!
contaminación! de! secreciones! adyacentes,! Muestras de orina y de esputo pasan! por! zonas!
nas! de! alto!
establecido! el! tiempo de recogida óptimo
contenido! de! mmoo! de! la! microbiota. Hay que!
basándose! en! la! fisiopatología! y! utilizando!
conocer! bien! la! microbiota;! a! veces! la! propia!
dispositivos, medios de transporte y recipientes
correctos (no se recomienda hisopos de algodón ya microbiota!puede!ser!la!causante. La!orina!y!heces!se!
que coge biota del organismo).!Los procedimientos de refrigeran!con!conservante; duran!24!horas.
recogida están recogidos en el protocolo de trabajo. Muestras de áreas no estériles son!muestras!de!piel, boca,
oído, exudados de nariz o faringe, exudados vaginales
y heces.
#Recogida de muestras para TRANSPORTE
estudios moleculares: debe ser sangre El! transporte! debe! ser! rápido, menos! de! 2! horas! a!
en tubo sin anticoagulante (inhibe la temperatura! ambiente.! Para algunos son necesarios
polimerasa) siguiendo las minutos.! Hay! que! valorar! las! condiciones! de!
especificaciones del fabricante de la almacenamiento!y!si!las!muestras!son!prioritarias o!no.
prueba. Se puede conservar en nevera
hasta 5 días o congelados a -20ºC y -70ºC.
#Recogida de muestra de mmoo
anaerobios: es mejor recoger la muestra
con una jeringa aspirando.
RECEPCIÓN!DE!MUESTRAS
#Hay que tener en cuenta que los Debe!de!haber!un!correcto etiquetado y!una!solicitud!
mmoo son sensibles a cambios de de! petición! analítica.! Tras! el! registro! se! realiza un!
temperatura.
estudio visual macroscópico para! comprobar! que!
#Se obtiene la muestra antes de haya! llegado! en! buen! estado! y! un! estudio
administrar los antibióticos, porque los microscópico de!algunas!muestras. De!esta!manera!se!
mmoo pueden recuperarse. acepta!o!se!rechaza!la!muestra razonadamente:!
#Frecuentemente se realizan frotis y a •La información de la etiqueta no coincide con la información de la solicitud o la muestra no
veces se hace inoculación directa del está etiquetada (el nombre del paciente o el origen de la muestra es diferente).
medio de cultivo. • La muestra se ha transportado a una temperatura inadecuada.
• La muestra no se ha transportado en el medio adecuado (por ejemplo, muestras de bacterias
anaerobias enviadas en transportes aeróbicos).
• La cantidad de muestra es insuficiente para la prueba
• La muestra en recipiente inadecuado, derrames, contenedor roto
• El tiempo de transporte de la muestra es superior a 2 horas después de la recogida o la
PREPARACIÓN!PARA!OBSERVACIÓN! muestra no está conservada correctamente.
DIRECTA • La muestra se ha recibido en formol que, en esencia, mata cualquier microorganismo
Mediante! microscopía! se evalúa la calidad presente.
de la muestra (si hay cel. epiteliales se ha • La muestra se ha recibido para cultivo anaerobio de un lugar en el que se sabe que los
tomado mal),! se identifica rápidamente anaerobios forman parte de la microbiota normal (vagina, boca, OTRAS )
(preliminar o final)! confirmando! • La muestra está seca.
• El procesamiento de la muestra produciría información de dudoso valor médico (ej., la
posteriormente,! se! detecta microbiota mixta
punta del catéter Foley).
(hasta! 3)! y mmoo no cultivables,!s,! se busca
células indicadoras de inflamación n ((en la piel
se coge
og de la zona p profunda
fu pa
para no cogerge
Tinción GRAM (diagnóstico rápido de la gonorrea debido a la
células epiteliales con contaminación)!
presencia de Neisseria gonorrhoeae inter/extraleucocitaria en
contaminantes celulares. La! observación!
exudado uretral masculino) se!puede!utilizar para!valorar!la!
microscópica! ayuda! a! elegir el cultivo
calidad!de!la!muestra,!visualizar!presencia!de!inflamación!en!
alizar!presencia!de!inflamación!en!
idóneo,! además! de! saber! si! es! necesaria la
células!de!diferentes!tejidos.! ej os.!Es!un!método!rápido!pero!difícil!
concentración de la muestra.
de preparar! e interpretar. Los diplococos intra y extraleucocitarios pueden
#La!visualización!en!fresco!sin!teñir# se! identificarse de manera casi definitivo con la tinción GRAM.
puede! hacer! por! montaje húmedo con!
Tinción Ziehl-Neelsen se!utiliza!para!identificar!la!micobacteria!
poca! frecuencia! o! campo oscuro
de!la!tuberculosis!alcohol-resistente.
(espiroquetas, treponemas sífilis,
leptospira). Tinción de cápsula por tinción negativa o tinta china (criptococos de
levadura, S. pyogenes, N. meningitiditis)! se! aumenta! el!
#La! visualización! de! muestras! fijadas!
contraste!de!la!cápsula.
(por! calor! o! alcohol)! con! tinción% se!
realiza! con! una! previa! extensión! a! partir! clínicam
Tinción de esporas:!poco!interesa!clínicamente!(Bacillus cereus).
de!un hisopo, un líquidoclaroosemisólidolomásfino
posible, citocentrifugación o materiales granulares
que se machacan antes y se dejan enfriar.

Peroque me microcuentas ¿?!?!?!

 EXAMEN!DE!LAS!PREPARACIONES
- Se!caracterizan!los!materiales!de!fondo.!
OBSERVACIÓN!DIRECTA - Se!buscan!los!mmoo
- Se! identifican! los! materiales! contaminantes
!Microscopio óptico de
(humo!negro,!exudados)
(epi)fluorescencia!: la! luz! UV! incide!
- Se! redacta! un! informe! de! los! resultados!
sobre!la!muestra!desde!la!parte!de!arriba.!
preciso!y!conciso.
Se!hacen!tinciones!con!fluorocromos.

- Auramina-Rodamina:!Detecta micobacterias
alcohol-resistentes,! por! afinidad! a! ácidos!
micólicos.! CULTIVO!DE!BACTERIAS
- Naranja de acridina:! ADN! verdoso! y! ARN! Elegido! en! función! del! tipo! de! muestra.! Los!
anaranjado para! diferenciar! si! la! célula! objetivos!son!facilitar el crecimientoy el aislamientode
está!en!crecimiento. todaslasbacteriaspresentes,!distinguir entreloscausantes
- Blanco de calcoflúor: quitina! en! la! pared! de! de la infección y los de la biota, y obtener un crecimiento
los!hongos!y!mohos.! suficiente para la identificación.
- Fluoresceína: marca! moléculas! de! Ac! o! 1. Procesamiento!miento! de! muestras! dependiendo!
ácidos! nucleicos,! sirviendo! de! señal! para! del! tipo.! Muestras líquidas y! frotis
otro! tipo! de! técnicas,! es! decir,! se! utiliza!
faríngeo
ng se! pueden!
p sembrar!
para!inmunofluorescencia.
directamente;!las!heces!se!resuspenden!y!
;!
se!eliminan!las!partículas.
2. Medio! de! cultivo! debe! ser! seleccionado!
Medios no selectivos enriquecidos: Agar sangre con 5% de según!las!condiciones!óptimas!necesarias
3. Forma!de!siembra!adecuada
sangre de carnero; es!un!medio diferencial para!los cocos
4. Determinar!condiciones!óptimas!de!T,!P!y!
G(+) según! hemólisis. Agar chocolate se! utiliza! para! tincubación.
mmoo!fastidiosos!como!el!Haemophilus influenza y!las! 5. Determinar!los!aislamientos!de!los!medios!
Neisserias.! primarios! que! requieren! la!
Medios selectivos: Agar McConkey para! BGN o Agar caracterización.
CNA (agar sangre+colistina+ ac. nalidixico) para! coco 6. Realizar! pruebas! de! sensibilidad! a!
G(+), porque! los! antibióticos! añadidos! destruyen!
uy los! antibióticos
G( ) Agar Thayer
G(-). a,, porque! es! un!
Thayer-Martin para Neisseria,
agar! chocolate! con! nistatina! (antigúngico),! y! los!
antibióticos!colistina,!vancomicina!y!trimetoprim.
Cultivos anaerobios:! agar Chandler y! caldo tioglicato
enriquecido. LECTURA!DE!CULTIVOS
Tiempo de incubación:!de!24!horas,!aunque!hay!algunos!de! La! lectura! de! las! placas! empieza! con! la!
48! horas! y! en! el! caso! de! la! micobacterias,! es! de! observación! de! las! características
semanas. macroscópicas (elevación, forma, margen,
tamaño, textura) que!tiene!que!coincidir!con!
Agar Müller Hinton:!Se!realiza!el!antibiograma para! lo!identificado!con!el!frotis!original.!Se!puede
la!detección!de!sensibilidad!a!los!antimicrobianos. hacer una! identificación! preliminar.! En! los!
cultivos líquidos puede! haber colonias
Agar Cled:!se!utiliza!para!los!urocultivos.!Es!un!medio!
serpentinas,
nas, bolas algodonosas, turbidez o escoria en
diferencial (azul de bromotimol)!para!fermentadores
entadores de
ie.!Lo!que!más!se!utiliza!son!los!medios!
superficie
superficie.!
ie
lactosa (c
(colonias!amarillas!si!+),!además!por!
), por!restricción!
po
cromogénicos!
og con! el! uso! de! las! sustancias!
de!electrolitos!de!minimizar!la!proliferación!del!
de!electrolitos!de!minimizar!la!proliferación!de
del!Proteus
del!
cromógenas!
óg unida! al! sustrato que! al!
que!normalmente!crece!con!manto!característico.
degradarse!dan!color;!cada!medio!y!cada!mo!
Agar XLD:! selectivos! para! BGN y! diferencial! para! tendrá!su!color!específico.!La!diferenciación!
fermentadores de lactosa/sacarosa.! Salmonella à se!debe!al!cromógeno,!no!al!cambio!de!pH.
Rosa!con!negro!por!H2S,!Shigella à Rosas/incoloras,!
E. coli à Amarillas.
Se puede realizar un recuento Las! condiciones! ambientales! óptimas! de!
semicuantitativo/cuantitativo mediante la siembra de temperatura son! 35-36ºC
muestra de orina y uso de un asa calibrada 1-10 μL. Se (campilobacter a 42ºC, micobacterias no
tuberculosas a 25-30ºC),! de! pH se!
identifica si hay bacteriuria significativa à
consiguen! mediante! tampones,! de!
>10e5 UFC/mL. En caso de levaduras y cocos G(+) presión dependerá! del! mo!
es 10e4 UFC/mL y en hombres de 10e3 UFC/mL. (microaerófilos, anaerobios,! capnófilos
como los estreptococos) y! de! tiempo! de!
incubación! suelen! ser! de! 48 horas (24
horas para orina).!Es!de!importancia!en!la!
toma!de!muestra!y!transporte!el!control!de!

IDENTIFICACIÓN!DE!COOLONIAS
Los! principios! de! la! identificación! son! la!
determinación del significado clínico,!guiar al médico con los
métodos de identificación presuntiva y final,!determinar si las
pruebas de susceptibilidad antimicrobiana son necesarias y
si el patrón es aberrante,!determinación del tipo de terapia,!
Tema 5: POR LA COLONIA!!!! determinación del riesgo del mmoo y!recogida de datos.!
Los!hongos!causan!intoxicaciones!por! Se! necesita! una! cantidad! suficiente! para! la!
ingestión directa (micetismo),! identificación.!La! identificación!según!los! criterios
ingestión! de! alimentos! con! toxinas fenotípicos mediante! pruebas! bioquímicas!
(micotoxicosis)!o!por!enfermedades identifica! según los! requerimientos nutricionales y
infecciosas fúngicas (micosis).! Están morfología.! Entre! las! pruebas! bioquímicas! son!
aumentando las infecciones por hongos por mayor importantes!
po las! de! catalasa y! la! oxidasa.!.! Las!
susceptibilidad de la población.! Las! micosis! se! pruebas!permiten elegir!el!API!correcto.!Se!pueden!
clasifican! en! superficiales/cutáneas,! añadir!estudios genotípicos y!Maldi-tof. El maldi-
subcutáneas y! profundas/sistémicas que! a! tof permite extraer las proteínas de la colonia y
su!vez!se!clasifican!en endémicas (por comparar con la base de datos para identificaciónific
icac ón de
accciió
a ión de
hongos dimórficos importante en manera rápida a partir de hemocultivos o urocultivos.
uro
rocu
ro ccu
cult
ult
ltiv
ivos
ivos
ivos.
inmunodeprimidos)! y! oportunistas.!
Las!vías!de!infección!son!aéreas,!inoculación
accidental,! zoonosis (tiñas)! )! y! oportunistas
((candidiasis, s, cryptococosis).!
rypt ocosis). ).! No! se! transmiten!
).
de! persona! a! persona
pers nana#,!
#,! por! lo! que! no! es! necesario!
aislar!a!pacientes.
Es importante la toma de muestra, transporte y procesado
veloces para que la muestra no esté muy contaminada por bacterias erias
cuyo crecimiento es más rápido que el de los hongos.
de!secreciones respiratorias, pelo
Se!suele!recoger!muestras!de!secreciones elo,
pelo,
piel, uñas, sangre, tejidos.tejidos. Se! trabaja! en! cabinas!
cabi
ca bina
bi nas!
na s! de!
de!
seguridad
segu
se guri
gu rida
ri dad
da d de
de!! nivel!
niv
niv
ivel
el!! 2 por! los! aerosoles,! se! utilizan!
el
mecheros!
m
me eecheros!
cher
cheros
er os!! elé
os eeléctricos
léct
léctri
ct rico
coss (los!
co
mecheros! convencionale
convencionales!
causan! aerosoles)! y! TINCIONES
se!prefiere!el!cultivo!
se!prefiere!el!cu cultivo!
cult
cu ltiv
lt ivo
iv o
Calcoflúor à Quitina
en!! tub
en ttubos!
ubos
ub os!! cer
os ccerrados
erra
er rado
ra doss
do
para! evitar! la! Azul de lactofenol
deshidratación! y! la! Tinta china
dispersión!de!esporas.
Se! realizan! cultivos! a! 25-30ºC para!
estudiar!
ar! los! hongos filamentosos y! las! PRETRATAMIENTO!DE!MUESTRAS
s El!cultivo!más! frecuentemente!
levaduras.!
s.! - Muestra de sangre:! para! liberar! patógenos!
utilizado!es!e
utilizado!es!el!
!el!l!Sabouraud
!el!Sabourau
Sa audd (con glucosa y interiorizados!se!realiza!la!lisis-centrifugación.
- Líquidos corporales (LCR):! centrifugación,!
pH 5 6) con! adición! de! antibacterianos
H 5-6) a ti
anti
an tib
bact
ba
b cter
ct eria
eriano
ianoss
no
extensión!y!cultivo!del!sedimento!concentrado.
(ge
gentamicina, cloranfenicol
cloranfen
ranfen
enico
icol )! excepto!
ol)!
ol cepto!
pto! en! - Orina: Centrifugación.
LCR!y antifúngicos
anti
an tifú
ti fúng
fú ngic
ng icos
icos ((cicloheximid
cicloheximida
ci ida) para!
ida - Secreciones respiratorias:! tratadas! con! agentes
eliminar! hongos! no! patógenos.! El! agar! mucoliticos en!caso de!muestras!muy!espesas,!no!
Sabouraud! es! selectivo! para! mohos! y! se!recomienda!centrifugación#.
levaduras.! - Exudados, pus y drenajes:! lavado! o! machacado
IDENTIFICACIÓN!DE!LEVADURAS dependiendo! de! la! magnitud! de! la! colonia!
Las! levaduras! de! mayor! interés! son! formada! en! esa! muestra;! se! quiere! eliminar! los!
Candida que! forma! colonias blancas restos!de!no!interés.
cremosas (semejantes a las bacterianas)!y! - Piel, uñas:! raspar, cultivar! y! observar,! con! una!
Cryptococo que! forma! colonias blancas previa desinfección con alcohol! para! pa
mucosas (debido a cápsula) Si! hay! eliminación!de!biota.
crecimiento!se!siembran!en!Agar extracto
de maíz (arroz)!deficiente!en!nuetrientes!para!visualizar!blastoconidios y pseudohifas
en!caso!de!Candida y!blastoconidios capsulados en!caso!de!Cryptococo.
Para! candida! hay! medios cromogénicos
selectivo: en! función! de! la! especie! tendrán! un!
color!distinto.!Se!realiza!el!test!de!tubo!germinal!
(pseudohifa).!
¿Cómo confirmar si se trata de C. albicans u de otra?!
La! resencia! de! pseudohifas! y! tubo! germinal.! Se! inocula! en!
suero!y!se!incuba.!Si!no!se!da!la!formación!del!tubo germinal,!
no! es! C. albicans#.! Si! se! da! la! formación! del! tubo,! hay! que!
comprobar!a!qué!temperatura!se!da!el!crecimiento.!Si!no!es!a!
42º,!se!trata!de!C.!dubliniensis!mientras!que!si!el!crecimiento!
es! a! 42º,! se! trata! de! C. albicans%.! Las pseudohifas tienen una
constricción, y el tubo germinal no.
También se puede hacer otro tipo de prueba de
identificación de levaduras mediante el auxonograma, un
agar deficiente en carbohidratos. Se colocan discos con
distintos carbohidratos.
di

IDENTIFICACIÓN!
IDEN DE! HONGOS!
FILA
FILAMENTOSOS
La
La! identificación! de! hongos!
fila
filamentosos! se! realiza! con! la!
siem
siembra! en! medio! Sabouraud
mediante!la!aplicación!de un!punto!o!una!línea.! Un par dee
veces por semana se comprueba que crece correctamente.! Se! buscan! las!
estructuras!del!hongo!filamentoso!mediante!observación!
microscópica.! Los! dermatofitos tienen! macroconidias y
microconidias. Los!mucor y!rhizopus son!oportunistas.!

IDENTI
IDENTIFICACIÓN!DE!HONGOS!DIMÓRFICOS
TIF
FICA
FICAC
CACIÓN!DE!HONGOS!DIMÓR
CAC ÓRFIC
ÓRFICOS
ix (lesi
Sporothrix
Sporothr
hrix lesiones
siones que siguen elel tracto linfátivo
linfátitivo
vo) presenta! pseudohifas y! en! muestra
muestras! de! tejidos
presenta!la!forma!levaduriforme (difícilmente crece en medios artificiales).!El! histoplasma
es!un!hongo!dimórfico!importante.!
 Tema 6: Uzted padeze un viruzito
La!identificación!de!un!virus!no!se!realiza!siempre,!si!no!en!casos!de!
estudios epidemiológicos o!un!tratamiento específico.!No todos los laboratorios
Los hisopos de
poseen el instrumental para identificar virus.!El!punto!de!inicio!es!la!recogida de algodón no sirven
muestra que! debe! llevarse! a! para recoger
cabo! en! la! fase aguda de la muestras víricas;
enfermedad (48 horas),! hay que utilizar
recogiendo!un!volumen adecuado hisopos sintéticos.
de muestra mediante! dispositivos
adecuados compatibles con la
supervivencia vírica.! La! elección! de! tipo! de! muestra! es!
compleja.
El transporte se! realiza! en! un medio! de! transporte! (Amies,
Stuart):!solución tamponada que!cambia!de!color!si!se!contamina,
cambia!de!color!si!se!contamina,
con antibióticos y! fuente de proteí s Se! transporta! en! cabinas! de!
proteínas.!
s.!
seguridad! de! tipo! 2! a! 4ºC.! Las! muestras! deben! procesarse!
rápidamente!y!se!pueden!conservar!durante!más de 4 días a
-80ºC.!

Microscopia Técnicas!rápidas
Procesa!a!observación de efecto citopático a MO. Detección de Ag (IF, inmunoblot, EIA):
!En el frotis de tzank se ven cuerpos de inclusión (herpes) causadas rápido!y!sirve!para!patógenos!de!difícil!
por la replicación vírica. El citomegalovirus causa "ojos de buho" "y cultivo$.!Pueden!dar!falsos!positivos!y!
el adenocirus "margaritas"#. negativos.&
!La prueba de Papanicolaou es una citología vaginal para el Detección de ác. nucleicos (más
diagnóstico de cáncer de cuello uterino por papilomavirus a través utilizada): PCR con!buena!buena!
de la observación de las células afectadas. sensibilidad,!especificidad!y!velocidad!
de!diagnóstico.!Las instalaciones no
! El virus respiratorios sincitial forma sincitios, un cúmulo de células.! están presentes en todos los
La!microscopia!electrónica!se!utiliza!en!investigación.! laboratorios.
La!micrsocopia!de!epifluorescencia!detecta!los!virus!directamente! ante!para!los!
Serología:!es!interesante!para!los!
en!la!muestra!o!en!tejidos!unión!de!Ac!marcados!a!Ag!víricos. estudios!epidemiológicos.!
estudios!epidemiológicosicos
os Se!necesitan!
os.!Se!necesitan!
2!muestras!de!Ac,!de!la!infección!y!de!la!
!de!Ac,!de!la!infe
inffe
infe
convalencia.!
Cultivo!celular
Los!cultivos!permiten!aislamiento!y!aumentar!la!cantidad!de!virus.!
Además,!permite!la!detección!de!forma!histológica!e!identificación.!El! El Shell- vial tiene un
cultivo!celular!está!limitado!por!el!tiempo,!sensibilidad!baja!y!la! soporte en el que se
insuficiencia!de!cultivos!específicos!para!todos!los!virus.!En!laboratorios!
no!suele!haber!material!para!los!cultivos.! s.! siembran los virus. El tubo
se centrifuga a baja
El!plástico!de!los!falcons!para!cultivo!celular!es!especial;!
El!plást
lástico!de!los!falcons!para!cultivo!ce ial;!las!células!se!
adhieren!a!la!pared!formando!un!tapiz.!Se!pueden!utilizar!líneas!de!cultivo! velocidad para facilitar la
cruzadas,!modificadas!genéticamente!y!tridimensionales.!No!tiene!un!uso! adhesión de los virus del
directo!en!el!laboratorio!clínico.! soporte a la muestra y
Cultivos celulares 1º:!células!de!biopsias!que!forman!un!tapiz!en!el!flask.! observar el efecto
Tienen!vida!media!corta.! citopático. Se detecta por
Cultivos celulares semicontinuos:!Las!células!se!mantienen!vivas!por!la! inmunofluorescencia de
realización!de!pases!(max!40-50),!pero!van!perdiendo!receptividad!a!los! los Ac fluorescentes
virus.! liberado
dos.
liberados.
Cultivos celulares
ulares continuos
continuos:!se!utilizan!células!inmortalizadas.!!
uos:!se!utilizan!
n!célula
n! las!
la
as!
s!in
s!in
inmortalizadas.!!
Tema 6: Bienvenido a la inmunodepresión
El!diagnóstico!serológico!se!basa!en!la!detección!de!Ac!específicos!en! El título de Ac 1:64
sangre. Para!los!mmoo!no!cultivables!o!de!difícil!cultivo!se!utilizan! es el inverso de
métodos!de!diagnóstico!inmunológicos.! dilución de suero más
#Presencia de IgM à Infección! aguda! o reactivación.! En! recién! alta a la que se
nacidos!es!la!forma!segura!de!detectar!una!infección. detectan los
anticuerpos.
#IgG específica en n 2 muestras separadas por 22-33 semanas à Se!detecta!
sión
la!seroconversión.! n.!Hay!una!infección!activa!en!caso!de!un!aumento
n .!Hay!una!infección!activa!en!caso!de!un!aumento en
4 del! título!
título de! Ac! entre! suero! de! la! fase! aguda! y de!
convalcencia. El! test! es! negativo! en! pacientes
inmunodeprimidos#.!
#IgG específica en una dosis de título alto à Infección!
activa!de!enfermedad!de!Lyme, legionella, rabia.!
#Evaluación del estado inmune por detección de Ac à
Exposición!de!la!población!a!la!rubeóla, sífilis o citomegalovirus.!
1. Aglutinación: Es!una!técnica!cualitativa!que!
se!basa!en!la!formación!de!inmunocomplejos!
Ac-Ag sobre!partículas!de!látex!cubiertas!(sensibilizadas)!de!Ag!
o! Ac.! Es! útil! para! la! tipificación y! diagnóstico de! mmoo!
(estreptococos, estafilococos, meningococos en LCR).!
En! la! variante! de! coaglutinación,! se! sensibiliza! el! S.
aureus (o el látex)! con! Ac-anti proteína A,! para!
luego! añadir! los! antígenos.! La! hemaglutinación
consiste!en!utilizar eritrocitos!en!vez!de!partículas!
de! látex! que! se! aglutinan! al! añadir! virus con!
hemaglutininas (virus influenza, sarampión,
ti ). La!inhibición de la hemaglutinación mediante
parotiditis).
arotiditis
Ac sse! utiliza! para! la! estandarización!
arización! de! distintos!
métodos.!La!aglutinación
métodos.!La!La aglutinación en tubo bo permite!dete
permite!determinar!
el!título!de!Ac,!mayor!dilución!aglutinable.!
2. Precipitación: Es!posible!detectar!Ac!o!Ag!
mediante!la!formación!de!precipitado!en!la! La! inmunodifusión doble de
zona de equivalencia o! línea de Ouchterlony permite! detectar!
precipitación. Se!realiza!en!un!medio!de!agarosa. hongos desconocidos.!Se!coloca!un!
3. Inmunofluorescencia (IFDirecta/IFIndirecta): Mediante! IFD se! hongo! desconocido! se! coloca! en! el!
detecta! el! inmunocomplejo! Ag-Ac! marcado! con! sustancia! centro!y!en!los!pocillos!alrededor!Ac!
fluorescente.! Es! una! técnica rápida rápi
pida
da para!
pa realizar! y! Ag! de! distintos! hongos.! Se! forma!
diagnóstico y!calcular!el!título
y!calcular!el! Ac.!EN!IFI
de Ac.!EN! IFI se!utilizan!2!Ac,!,! una!línea!de!precipitación!con!el!Ag!
del!hongo.
Ac! sin! marcar! y Ac-AntiAc
Ac AntiAc marcado,! lo! que! permite!
amplificar!la!señal,!ya!que!a!veces!la!cantidad!de!Ag!es!escasa.!
4. Enzimoinmunoensayo:! El! ELISA tiene! una! fase! sólida! ólida! (placas
(placas de microtiter er)!
microtiter)!
sobre!la!que!se!adhiere!anticuerpos!o!antígenos.!Se marca con un enzima
con sustrato cromógeno.! Para! la! detección! de! Ag! se! puede! utilizar! el!
formato sándwich (Ac marcado),!directo o!indirecto (Ac sin
marcar y Ac-anti Ac marcado).!El!ELISA!original!es!el! es!el!
colorimétrico,! aunque! el marcaje! puede! dar!
reacciones! de! quimioluminiscencia (CLIA)! o!
inmunofluorescencia (ELFA)! que! está!
automatizado.
5. Western blot:! Western! blot! es! una! técnica! de de!
referencia!para!el!diagnóstico de VIH.!!!
 INTERLUDIO: INFECCIONES FÚNGICAS INVASORAS (IFI)
Las! infecciones! fúngicas! invasivas! en! pacientes! inmunodeprimidos! son! de!
difícil diagnóstico.!El!cultivo!es!lento,!por!lo!que!se!detectan antígenos, metabolitos
y compuestos estructurales.! No! se! realizan! pruebas! serológicas! de! IFI;! se! utiliza! la!
inmunodifusión.!

$(1,3) β-D-Glucano panfúngico:!aparece!en!muchos!hongos (excepto!en!Zygomycetos y Cryptococcus noeformans#).!

Se!puede!detectar!por!ELISA-platelia,!específico!y!sensible!para!IFI. Se!combina!con!cultivos!y!detección!de!Ag.!
$ Galactomanano:!componente!de!la pared!celular!de!Aspergillus. Se!utiliza!para!cribados.
$ Manano: componente!de!la!pared!celular!de!Candida.!
$ D-arabinitol:!Producido!por!Candida,!no!C.!krusei!ni!C.!glabrata#.!Se!utiliza!para!IFI!en!suero
ata#.!Se!utiliza!para!IFI!en!suero y orina.
$ Proporción D-arabinitol/L-arabinitol: en!orina!o!sangre!es!útil!para!diagnosticar!candidiasis
!útil!para!diagnosticar!candidiasis sistémica.!
$ L-manitol:!diagnóstico!de!Cryptococcus neoformans y!Aspergillus.
rgillus.

MÉTODOS GENÉTICOS-
Es importante el MOLECULARES PCR
ELISA para la 1. Técnicas clásicas de Se! realiza! una! hibridación con! la! sonda sonda! marcada!
detección de Ac hibridación:! La! toma! de! con! enzimas que dan color o! o moléculas fluorescentes
fluore o
de hepatitis, VIH, muestra!y!transporte!se! quimioluminiscentes y! el! ADN.! Se! amplifica! m mediante!
EBV y CMV. realizan! con! los! PCR:!se busca los extremos de la secuencia diana y luego se
procede a la amplificación con el uso de nú núcleotidos,
dispositivos! de! las! casas! cebadores y polimerasas específicas para el mo que se quiera
comerciales! específicos! para! PCR.! Se! puede! detectar. Se realiza con controles (+) con DNA del de patógeno
coger!cualquier!tipo!de!muestra!y!cualquier!tipo! y (-(-)
(-) sin DNA. Ocurren los pasos de desnatur
desnaturalización,
de! microorganismo vivo o muerto con! ácidos hibridación u extensión. Se pasan 3 ciclos 30-40 veces.
nucleicos íntegros.! Se! extraen! los! ácidos! Los! productos! de! la! PCR! se! analizan! m mediante!
nucleicos según! el! tipo! de! muestra por! lisis! electroforesis o reacciones!de!hibridación co con!sondas!
celular! (pH ácido, lisis enzimática, lisis física)! y! se! de! los! fragmentos! amplificados.! También se puede
purifica! sin inhibir! los! enzimas.# Tras! la! estudiar mediante enzimas de restricción restri y
precipitación con! alcohol! y! resuspensión en! secuenciación de ADN para realizar estudios
agua!o!buffer se!procede!a!la!reacción!molecular.! epidemiológicos de caracterización.!
La! PCR múltiple utiliza! primers! múltip múltiples! de!
2. Técnicas no tan clásicas de hibridación o técnicas tos!mmoo,!obteniendo fragmentos!de
distintos!mmoo,!obteniendo ffragmentos!de!distinto!
de!distinto!
isotérmicas de amplificación de ADN: se!realizan!sin! tamaño
tamaño.ño. Hay!paneles!que!incluyen!dianas!de
Hay!paneles!que!incluyen!dianas!de!ADN!de!
de!ADN!de!
termociclador#.! La! técnica de amplificación a
agentes!
ag infe
infecciosos!
io para! pruebas!eb rápidas!
ráp
áp de!
dependiente de helicasa se! realiza a! una! misma! diagnóstico.!
diagnóstico
temperatura de!una!manera!más!sencilla que!la! El PCR a tiempo real consiste!en!la!amplifica
El! consiste!en!la!amplificación!con!
PCR!clásica!utilizando!helicasas para separar la sondas específicas marcadas con fluorescen fluorescencia; se!
ds-DNA.! Es! una! prueba rápida igual! que! la! mide! la! fluorescencia! emitida.! Es! un! proc proceso! más!
nicking endonuclease amplification reaction.! TMA y
sensible!,! más! específica! ! y! menos!
NASBA son para la amplificación de RNA.!
s
susceptible! a! contam ació ! Aume
contaminación!.! Aumenta! la!
fluorescencia!de!manera!exponencial!a!medida!que!
fl
fluorescencia!de!manera!exponencial!a!me
fluorescencia!de!manera!exponen ial!a!me
aumentan!las!copias!genómicas.!Interesa
aumentan!las!copias!genómicas Interesa el c
In ciclo CT
que representa un incremento de fluo fluorescencia
significativo.! Se! utilizan! las! sondas! % %be
%beacon% %
((fluoróforo y q nc )).!. Cuando! está! en! forma!
quencher
quencher).! f de!
ho hibr
horquilla!no!emite!fluorescencia,!pero!al!hibridarse
horquilla!no!emite!fluorescencia,!pero!al!
orescencia pero!al!hibr
s rompe! la! ho
se! se! hidroliza prod
horquilla! y! se produciendo!
fluorescencia.!
fl
fluorescenciaci .! Cuanta!
Cu ta más!
ás copias,!
copias
ia más!
fluorescencia.! Se! S miden! las! copias pias genóm
genómicas
ómicas o!
cargaga viral,!importante!en!el!VIH
viral,!importante!en!el!VIH.! IH.!Tiene!qu
Tiene!que!haber!
que!haber!
un!control!( )!bien!establecido
un!control!(+-)!bien!establecido,!para!relacionar!el!
un!control!(+-)!bien!establecido,!para!relac el
CT!con!las!copias!génomicas.!
 3. Secuenciación: conseguir! la secuencia! ordenada! de!
La secuenciación de 2º
nts de!la!muestra.!
de!la!muestra.
a.!Lo!importante!es!tener!una!base! generación es masiva y de
de!datos!a
de!datos!asequible,!para!que!la!secuenciación!tenga! 3º generación de molécula
utilidad. Se! realiza! en! bacterias! y! en! células! única. Los laboratorios de
eucariotas.! Sirve! para! el! diagnóstico etiológico de las microbiología clínica tienen
enfermedades infecciosas hoy en día instrumental
para secuenciación.
(cultivos! complejos),!
detección de mecanismos de
resistencia de los antibióticos
(mutaciones de M. tubercolosis y
beta-lactamasas; SKAPE que son
difíciles de manejar por
panresistencias),!detección de genes
de virulencia, integrones, transposones nes
plásmidos y bacterióafgos y!caracterización
ión de
brote(vigilancia epidemiológica).!
3. MALDI-TOF:! MALDI-TOF:! identificar las! cepas! (levaduras, duras,
micobacterias, hongos flojillo),! analizar! resistencia! de! de
antimicorbiacnos! y! las! diferencias! intraespecies! según! su! perfil proteico.! Se aplica en
muestras clínicas como el hemocultivo u orina.!
La automatización del
procesado de las
Las!pruebas!point of care o!test rápidos, pruebas a la cabecera del muestras, pruebas
paciente, pruebas descentralizando, pruebas periféricos se! serología,
bioquímicas, serolog ogía,
og
realizan! fuera! del! laboratorio o! laboratorios! periféricos! pruebas genéticas.
g né
genéti
ttiica
ica
cas.
cas.
pequeños.! Son! pruebas! sencillas! menos! de! 15 minutos (hay!
hasta!2!horas).!Se!necesitan!menos!recursos!y!menos!personal.!
Se!usa!en!caso!de!necesitar una respuesta rápida para manejar al paciente, para disminuir
el uso injustificado de los antimicrobianos, en ausencia de instalaciones sanitarias de alta
complejidad y utilidad en salud pública.!Los!paneles!de!diagnóstico!múltiple!
se!venden!por!casas!comerciales.!sistémica.!

Tema 6: La sensibilidad aumenta

Las!pruebas de susceptibilidad a los antimicrobianos Es!importante!para!
#Tratamiento profiláctico preventivo
se! realizan! para!predecir el tratamiento idóneo a través in vitro,
#Tratamiento empírico:!basándose!en!las!
detectarnuevas resistencia y realizar estudios epidemiológicos.!
causas!más!frecuentes!que!causan!la!patología
El! antibiograma son! el! conjunto! de técnicas! para!
#Tratamiento anticipado:! evidencias! sin!
sceptibilidad! de! los! mmoo! a! los!
estudiar! la! susceptibilidad! síntomas!en!pacientes!oncológicos!y!neonatos
antimicrobianos.! No! se! realiza! para! mmoo! mmo oo! cuya! #Tratamiento dirigido:! conociendo! el!
resistencia!
resistenc
encia!
a! se!
se puede! predecir! (SKAPE)!
(SKA por!
r! resistencias diagnóstico!etiológico
cas y!
intrínsecas y sensibilidad universal.!
Necesario!en!mmoo!normalmente!
A!veces!interesa Casi!no!es!necesario
Se! necesita! la! estandarización
resistentes
mediante!el!control!de!los!factores!
• Estafilococos • Bacterias!anaerobias • Estreptococos!!-
• Streptococcus viridans en sitios • N.!gonorrheae hemolíticos ambientales!s! en! la! expresión! de! la!
estériles!!!!! • H.!influenzae • N.!meningitidis resistencia.! Los! datos! obtenidos!
• Enterococos • Listeria!monocytogenes
• Enterobacterias deben! coincidir!
coin entre! los!
• P.!aerugionosa
• Acinetobacetr laboratorios.! La! estandarización!
obliga! a! trabajar! en! condiciones!
perfectas,!pero!el!crecimiento!en!el!organismo!no!es!reproducible!sobre!la!placa!Petri.
Los! antimicrobianos! se! testan! según! la! infección,! el!
microorganismo y!la!población a!la!que!afecta!(niños, adultos,
dinosaurios).! Todos! los! antimicrobianos! de! interés,!
seleccionados! cuidadosamente! por! Comités! polifacéticos,
deben! estar! presentados! en! el! antibiograma.! Se! establecen!
baterías! o! paneles! de! antimicrobianos! según! los! mmoo.! Se!
calcula!la!Cmax ("g/mL)!tras!administrar!una!dosis!estándar!
del! antibiótico,! debe! ser
Se establece controles de mayor que la MIC.! El!
potencia de antimicrobianos antibiograma! se! realiza! en
(contaminación del agar! Mueller-Hinton,!aunque!pueden!ser!necesarios!otros!
antimicrobiano) usando cepas agares!enriquecidos.!El!inóculo!se!prepara!de! un!cultivo!
de referencia, controles de puro! que! se! resuspende en! un! Mueller-Hinton! caldo! (se
contaminación del medio puede partir de colonias sólidas recientes)!hasta!lleg
)!hasta!llegar!al!
de cultivo y control del
crecimiento! logarítmico,! sse! ajusta! la! densidad! por!
microorganismo (cultivo
puro con densidad de inóculo turbidez!a!0,5 McFarland y!se!inocula!para!una disolución
correcto). en caldo o!difusión en disco con!un!tiempo!de!incubación!de
18-20 horas.!
Dilución en caldo Sensible!
Dilución en agar
(susceptibles a Difusión en disco
Se!hacen!macrodiluciones! Se!realiza!con!agar!fluido,! dosis normales),!
(256!a!1)!o!microdiluciones!en! que!tras!la!incubación!de! susceptible! El halo da una mejor
placasque!permiten!hasta!12! CMI.!El!método!se!utiliza! dependiente!de! caracterización de la
diluciones!en!horizontal!(más! solo!para!los!mmoo dosis!o!resistente! inhibición según
frecuente)!siempre con fastidiosos.!El!antibiótico! concentración. Hay
controles.!El!tubo!de!cción! difunde! problemas de
min.!que!no!presenta! preogresivamente.! interpretación cuando
crecimiento!bacteriano!es!el! hay cultivos contaminados
MIC.!Los!tubos!que!no! (colonias dentro del
presentan!crecimiento!se! Epsilon-test halo), colonias de la misma
resiembran!para!identificar!la!
Se!realiza!con!una!tira!del! especie son resistentes, el
MBC.
antibiótico!con!un! proteus produce doble halo
gradiente!de!cciones.!Se! (considerar el diámetro
MIC!(ccion!mín.! mide!la!CMI,!la!zona!en!la! todo el halo), y
El informe! que! se! inhibitoria)!en! que!comienza!el!halo!de! estafilococos/oxacilina y
realiza! se! da! con! "/mL inhibición.! enterococcus/vancomicina
resultados! claros,! ros,! MBC!(ccion!mín.! cualquier halo indicaría
bactericida) sensibilidad.
simples!y!concisos
simples!y!concisos.! os.!Se! utiliza! el!
el
antimicrobiano de! menor toxicidad,! mayor efectividad
toxi dad
clínica y!mejor relación eficacia-costo.!
Métodos fenotípicos:! detección de β-lactamasas
MÉTODOS está!basada!en!técnicas cromogénicos (cambia de color
AUTOMATIZADOS si es degradado por la betalactamasa mostrandoo
!Los! métodos!
resistencia),! iodométrico y acidométrico.! !Dan!
automatizados! dan! resultados
rápidos y! procesan! muchas información!bastante!escasa.!
muestrasde manera reproducible.!El! El!test de cefoxitina permite!detectar!en!S. aureus SARM RM
propio! equipo! realiza! la! y estafilococos coagulasa (-) que!suelen!ser!resistentes!a!los!
lectura!y!realiza el!registro!de! antimicrobianos! antiestafilococicos.! El! test de oxacilina no!
datos.! &Tienen! alto costo,! sirve!para!coagulasa!(-)#.!En caso de resistencias
esistencias aparecen
no sirve para todos los patógenos y!
microcolonias dentro del halo de inhibición.!
inhibición .!La!aparición!de!la!
n.!La!aparición!de!la!
n
hay! problemas con resistencias
inusuales.& El! VITEK2! realiza! resistencia!
resistencia!a!una!penicilina!indica!la!resistencia!a!todas!las!
la! identificación! y! la! del!grupo.!Hay!pruebas inmunocromatográficas para!detectar!la!
sensibilidad! a! PBP2´ que! causa! la! resistencia! a! las! penicilinas!
antimicrobianos,! utilizando! antiestafilocócicas.!
paneles!de!antibióticos.
Métodos genotípicos:!identificar!los!genes!que!codifican!las!β-lactamasas y!carbapenemasas
por!Malditof.!Se!utiliza!PCR!y!secuenciación.!
Combinaciones de antibióticos:! Se! puede! medir! la!
sinergia! o! antagonismo! de! los! antimicrobianos.! Se!
hacen! check-boards de combinación a distintas!
cciones!de!antibióticos.!Tras!convertirlo!en!curva!se!
puede! estudiar! el! comportamiento! de! sinergismo! o!
antagonismo.!Se!debe!comunicar!de!manera!correcta!
toda!información.!

Las pruebas de sensibilidad a antivíricos no se hacen de manera

rutinaria#. Hay test fenotípicos en cultivos celulares (complejos,
díficiles de interpretar, costosos), ensayos de reducción de placas,
prueba de recaptación de colorante (solo absorbe las celúlas vivas), Los antifungigramas se realizan para Candida y Criptococcus,
ensayos de unión de neuraminidasa fluorogénico, y citometría de flujo.estandarizados para antifúngicos específicos. Se hace en placas de
microdifusión en plano en medio de cultivo es RPMI por incubación a
Los test genotípicos son más fácil de realizar, se buscancan 35º C durante 24 4 h. Se calcula la CMI
CM y se clasifica en sensible,
sen
ensible,
viraaall. Si es
mutaciones en el genomas o se trabaja con la carga viral.
in
intermedio resistent
ente. En el
ente.
o resistente e caso de lal an
nfooteric
otericina
ricina
anfotericina a B, laa CMI es una
positiva y hay un aumento considerable se procede
proced a la
extracción del ADN para detección de resistencias. Hay kits in inh
nhibición del crecimiento
nhibic
inhibición to m
iento mayor o igu
igual
gual o de
del 90%
90%
90 % res
respecto
espectoto al control
control..
comerciales para la detección de manera rápida. rocitosisna, azoles y equ
La fluorocitosisna, quinocan
quinocan ndinass es la ccion min.
equinocandinas m para
inhibir el crecimiento al 50% % respecto al control.
El manual americano recoge un método de difusión para algunas
levaduras. Se utilizan métodos colorimétricos a 2 cciones de
distintos antifúngicos. Cambia de color por reacción de redox (rosado
à +). Se pueden hacer e-test: la anfotericina tiene una identificación
sencilla, pero los azoles son más complicado.
SISTEMA!NERVIOSO!CENTRAL
ANATOMIA: El! SNC! está! formado! por! el! encéfalo,! médula! espinal! y! nervios! centrales,! protegidas! por! 3!
membranas:!duramadre,!aracnoides!y!piamadre.!En!el!espacio!subaracnoideo!circula!el!LCR que!protege!de!
traumatismos! y! sustancias! tóxicas,! y! comprende! el! intercambio! de! sustancias.! En! situación! normal! es!
transparente e incoloro.!El!volumen!aumenta!con!la!edad!a!100-150!mL. La!composición!del!LCR!varía!en!
situaciones!patologícas.
PATOLOGIA: La!infección!del!SNC!es!una urgencia médica.!En!orden!de!incidencia!interesan!la meningitis
bacteriana y vírica, encefalitis, meningoencefalitis y abscesos cerebrales.! Las! infecciones! pueden! ser! hematógenas
(neumococo, meningococo)!que!son!la!mayoría,!por!traumatismos, cirugía, otitis, sinusitis o virus neurótropos
(herpes y cica).
Meningitis:!La!meningitis!es!una!infección!del!espacio!subaracnaoideos,!caracterizada!por!rigidez en la nuca y
fiebre.! Las!meningitis agudas tienen!causa!normalmente! bacteriana (BGN)!pero!también suelen!frecuentar!las!
infecciones! víricas en! niños.! La! meningitis crónica suele ser! hematógena:! Treponema pallidum à sífilis! 3º! o!
neurosifilis,!amebas (vía!nasal),!tuberculosis, brucelosis.! Aumentan las infecciones relacionadas con derivaciones (trepanaciones para
desaguar). Los!hongos!y!parásitos!no!son!tan!frecuentes. Los!factores!de!virulencia!como!la!endotoxina!en!cocos!
se!relacionan!con!el!estado!patológico.
Meningoencefalitis: hay!más!manifestaciones neurológicas,!mientras!que la!rigidez!de!la!nuca se!atenúa.
Absceso cerebral: proceso!supurativo!en!el!parenquíma!cerebral.!La!sintomatología!es!neurológica focal.
ETIOGENIA:
Meningitis bacterianas:!Se!toma!en!cuenta!la!edad.
· Neonatos:! BHE! muy! permeable! y! contacto! con! el! canal! de! parto.! Streptococcus agalactiae (biota!
vaginal),!E. coli (BGN), Klebsiella (BGN), Enterobacter,!Listeria monocytogenes.!
· Niños: Neumococo, Meningococo, S. agalactiae, E. coli, H. influenza (reducido!por!la!vacuna).
· Adultos: Streptococcus pneumoniae (neumococo) y!Neisseria meningitidis (meningococo).!
· Ancianos: Neumococos (reducido!por!la!vacuna),!meningococos, listeria, BGN aerobios.
Meningitis asépticas o linfocitarias:!Son!benignas y!autolimitadas,!exceptuando!en!inmunodeprimidos!y!
recién! nacidos. El! 80%! de! los! casos! la! causa es! vírica.! Enterovirus, parechovirus,! herpesvirus (más!
importante!HSV-2),!arbovirus (zonas!endémicas),!M. tuberculosis, Brucella, Cryptococcus (ID),!Candida (ID) y!
espiroquetas.
Encefalitis/Meningoencefalitis:!Casi!exclusivamente!vírica.!Enterovirus, herpesvirus, parotiditis, sarampión.
En!inmunodeprimidos!pueden!causarse!por!parásitos.
Abscesos cerebrales:!La!etiología!es!variable,!pero!normalmente son!infecciones!por!tejidos adyuvantes
por!inflamaciones!(otitis, sinusitis)!o!cirugías!(biota cutánea) como!S. aureus, estreptococos, enterobacterias
y estafilococos (postquirúrgicas),!etiología mixta u hongos hematógenos (ID).!!En!caso!de!abscesos crónicos,!
la!etiogenia!es!tuberculosis, cisticercosis, actinomicosis, toxoplasmosis (ID)!o!criptococosis (ID).
DIAGNÓSTICO MICROBIÓLOGICO
Recogida de muestra:!Se!recoge!1-5 mL de!LCR!por!
punción entre la L3-L4 tras desinfección.!Se!recogen!3-4
tubos (estudios
tudios bioquímico, citológico, microbiológico
microbio
y otros).! El! transporte! debe! ser! inmediato! (max. 6
horas, más tiempo para virus)! para! el! éxito! de! los!
cultivos.!Muestras de virus para análisis de Ag o ácidos
nucleicos se pueden refrigerar y guardar.!Las muestrass
de!sangre se!utilizan!para!hemoc
se!utilizan!para!hemocultivo,!serología!y!PCR.!
oculti R.!Las muestras de orina pueden contener los polisacáridos
de las cápsulas de los neumococos cos. En!abscesos!cerebrales!se!hace!un!diagnóstico!por!imagen!y!hemocultivo.
Procesado de la muestra:!Si!hay!volumen!suficiente!se!centrifuga,!el!sobrenadante!contendrá!los!virus!para!
PCR o!detección de antígenos capsulares (neumococo y H. influenzae dan!muchos!FN!y!útil!para C. neoformans
si!se!hace!de!manera!correcta).!El!sedimento!se!puede!cultivar!y!permite!realizar!un!informe!preliminar.!
Identificación:! OBLIGATORIOS agar sangre hasta! 5! días! de! incubación, agar chocolate (neumococos y H.
influenza) incubado!con!CO2!al!10%,!y tioglicato o caldo BHI nutritivo por!sí!hay!poca!cantidad!(se mide la
rbidez y se vuelve a sembrar). Pueden!ser!necesarios!
turbidez Pueden!ser!necesarios!el agar Sabouraud para!hongos!y! agar McConkey para!
BGN.!
N.!La meningocococemia se puede ver los diplococos.!
Tiene!que!haber!correlación!en!la!identificación.!Existen!paneles!de!PCR!múltiples.!El!tratamiento!empiríco!
se!ajusta!según!los!resultados!microbiológicos.!
INFECCIONES!DEL!TORRENTE!SANGUÍNEO
La!bacteremia constituye una!urgencia médica.!Cada!hora!que!se!ralentiza!el!tratamiento, la!probabilidad!
de!supervivencia disminuye!en!un!8%.!La!bacteriemia puede!evolucionar!a!sepsis
ionar!a!sepsis y!luego!a!shock séptico.!La!
sepsis es!una disfunción!orgánica
disfunción
unción
ón!orgánica que!amenaza!la!vida!del
que! paciente;!
te;!la!gravedad!y!el!grado!de!urgencia!es
cuantificable por! la! escala qSOFA.! El shock séptico es! una! sepsis asociada! a! profundas! alteraciones!
circulatorias,!celulares!y!del!metabolismo, que!no!responde!al!tratamiento!y!tiene!una!mortalidad!del!40%.!!
Hasta!el!30%!del!uso!de medicamentos!es!inadecuado.!
PATOLOGIA:
Según la duración:
Transitorias/Subclínicas: intervención quirúrgica, heridas.
Intermitente:!infecciones neumocócicas
neu y meningocócicas,!abscesos.! os.!Los!mmoo!se!detectan!a!los!45
min antes!del!estado!febril.
Continuas:!el!mmoo!está!siempre!presente.!Endocardititis, infecciones de catéter.
Según el origen:
Procesos!1º!o!intravasculares:!no!hay!foco!extravascular.!Las!infecciones!por!BGN!son!más!comúnes!
infecciones!por!BGN!son!más!comúnes!
en!las!adquiridas en la comunidad o asociadas a cuidados sanitarios;!
s;!en!los!cuidados!sanitarios!suelen!ser!
resistentes!a! antimicrobianos.!En! ambiente! hospitalario! (nosocomiales)! es!más!común! las! bacterias!
G(+). 1/3 son de causa desconocida.
o Endocarditis infecciosa:! bacteriemia! persistente que! afecta! a! válvulas cardíacas generalmente
dañadas.!Tras!la!colonización!se!establecen!en!vegetaciones (colony-like).
o Infecciones asociadas a dispositivos:!catéter,!prótesis,!marcapasos.
o Aneurisma micótico:! debilitamiento! del! endotelio!
bacteriana!con!mortalidad alta asociada.
o Trombofelebitis supuradas: debilitamiento!
endotelial!con!microabscesos!de!bacterias.
o Consumición de drogas parenterales, infección por
artrópodos.!
Procesos! 2º! o! extravasculares:! se! producen! desde! un!
foco!infeccioso.!Los!focos!más!frecuentes!son!el!tracto
GI y! vías respiratorias,! aunque! puede! ser! cualquier!
foco! infectado.! Los! factores! de! riesgo! son!
inmunodeficiencias, práctica médica invasiva, edad y
administración de antibióticos e inmunosupresores.!
ETIOGENIA:
Gram!(+)!à S. aureus, S. coagulasa (-), Enterococos y estreptococos
Gram!(-)!à Enterobacterales (E. coli, Klebsiella, Salmonella), Pseudomona aeruginosa
Hongos!à Candida albicans, C. glabrata y krusei. Estan!aumentando!como!causa!por!los!catéteres.!
El!70-80%!son!infecciones!oportunistas!y!20%!polimicrobianas.
o Endocarditis infecciosa:! MALA!HIGIENE!DENTAL!+!ENDOCARDIO!DAÑADO.!La!causa!más!frecuente!son!la!
biota bucal (Estreptococos del grupo viridans α-hemolíticos),! S. aureus en! drogadictos,
estafilococos coagulasa (-), enterococos, 5% BGN HACEK (siglas de mmoo de difícil cultivo, no crecen en McConkey)!
y hongos!(candida y a veces aspergillus).
o Infecciones asociadas al catetér: Biota cutánea y mucosas (estafilococos, S. aureus, enterobacterias,
pseudomonas, candida)!con!capacidad!de!formar!biopelículas.

DIAGNÓSTICO MICROBIÓLOGICO
o Bacteremias 1º: Hemocultivo! antes! de! empezar! el! tratamiento! antibiótico. En! las! infecciones!
nosocomiales,!se!procesa!la!punta!y!parte!central!del!catéter.
o Bacteriemias 2º: Se! hará hemocultivo! en! infecciones!
nfecciones! de! herida
heridass graves, meningitis, en niños y
eo. Debe!aparecer!el!mismo!mo!en!el!foco!y!en!la!sangre.
ancianos, facilidad de pasar al torrente sanguíneo.
Recogida de muestra:!2-3 hemocultivos!de!10-20 mL (2mL en neonatos solo para aerobios y 1-5 mL en niños
solo para aerobios)!a!diferentes!intervalos!(10-30 min)!antes!del!tratamiento y!del!pico!febril!si!es!posible.!
Se!realiza!una!punción!aséptica!y!la!sangre!es!directamente!inoculada!en!frascos!de!cultivo!de!8-10!mL. El
principal problema es la contaminación con biota cutánea, por lo que debe ser escupulosamente realizado. El!
transporte!tiene!que!ser!inmediato.
Procesado de la muestra:! a:!Se!hacen!cultivos!en!aerobiosis!y!anaerobiosis!(3 muestras à 6 frascos)!en!caldos!
estériles!enriquecidos!(soja, Columbia, BHI, tioglicato)!con!anticoagulantes (SPS,!sin!citratos!ni!EDTA#),!resinas TA#),!resinas
para! captar! restos! de! antibióticos! y! gelatinas para! neisseria.! ! Se! diluye! al! 1/5 o! 1/10 para! ra! diluir! los!
antimicrobianos!y!los!inhibidores!sanguíneos.!Se!incuban!hasta!4 semanas (brucella).
Cultivo convencional manual: no!se!usa!porque!es!tediosa su!observación!diaria.
Sistema autónomo de subcultivos autónomo (septo-check): se inocula la sangre en el medio de cultivo y en
un plazo de 4-6 horas se le acopla un tubo con láminas de agar. Se seleccionan los agares según las sospechas. Se agita y
se inocula en los agares para sembrarlos. Se examinan diariamente. No!sirve!para!los!anaerobios#,!pero!sí!para!
mmoo!fastidiosos (Brucella).!Se puede acoplar a un sistema manométrico.!
Método de lisis-centrifugación: Los!reactivos!son!saponinas (lisis!celular),!SPS (anticoagulante),!EDTA
(inhibidor!de!la!coagulación),!polietilenglicol (antiespumante) y!líquido fluoroquímico inerte.!Los!mmoo!se!
concentran por! centrifugación! y! el! sedimento! se! siembra! en! el! medio! sólido! elegido.! Se! utilizan! para!
hongos! filamentosos y levaduras.! !Posibilita! el! recuento por UFC, observar si hay colonias diferentes
(polimicrobianas), un alto coste y una mayor recuperación de mmoo intracelulares.!"Tiene!más!riesgo!de!
contaminación y!hay!peor recuperación!de!estreptococos, listeria y haemophyllus.!
Sistemas automatizados: Las! botellas! se! introducen! en! el! incubador! para! realizar! la! lectura! del!
crecimiento.!Se!detecta!el!CO2!del!crecimiento!bacteriano!por! isótoposradioactivos,!pero!se!utiliza!más!por!
presión, colorimetría y potencial redox.!BacT/ALERT, BACTEC.
Técnica de Maki: M Para! la! infecciones nosocomiales,! por! recuento! de colonias! (15! colonias! s! à
colonización) tras!colocar!la!superficie!externa!de!la!punta!del!catéter!en!el!medio!de!cultivo.
éter!en!el!medio!de!cultivo. Se!compara!
sangre!del!catéter y!la!sangre: aumento!de!4 veces ve de la UFC/mL.! L.!El catéter!colonizado!da!positivo!2!
horas!antes!que!la!muestra!de!sangre!sembrada.!Tiene que coincidir con el mo del hemocultivo.!
Identificación:! Si! el! crecimiento! es! positivo,! se! realiza! una! tinción! Gram! para! redactar! un! diagnóstico!
preliminar, y!el subcultivo!en!placas!de!agar!sangre!y!chocolate.!En función de lo que se vea en la observación
microscópica se utilizan izan distintos os cultivos.
cul Se!aísla
Se! aísla para!identifi
aísl
aí para!identificación!y
entifi
ficación!y se!realiza!el!antibiograma!porque!es
se!realiza!el!antibiograma!porque!es!
una!urgencia!médica.! a.!Se!utiliza!el!
!el!MALDI-TOF TOF y!
y!detección de Ag para!realizar!una!identificación!más!rápida.!En
los BGN se realiza PCR para betalactamasas (marcadores de resistencia). Se! cultiva! y! se! detecta! el! CO2! o!
espectrofotometría.!Se!pueden!utilizar!biomarcadores para!la!identificación!de!sepsis.!
Interpretación:!se!toma!en!cuenta!el!mo a identificar, nº de hemocultivos y!las!características del paciente.!Se!concluye!
que!hay!contaminante en!caso!de!que!aparezcan en uno o varios cultivos, múltiples organismos en un cultivo, síntomas clínicos no
consistentes con la sepsis, o que el aislado del foco 1º y sangre no coincide. Se!concluye!que!es!el!patógeno cuando coincide en!
varios cultivos cogidos de distintos puntos, biota comensal en pacientes inmunodeprimidos y prótesis, crecimiento de ciertos mmoo y si son de
interpretación compleja (S. viridans, enterococos, estafilococos coagulasa (-)).!
INFECCIONES!DEL!TRACTO!URINARIO
Las!infecciones!del!tracto!urinario!consisten!en!la presencia!y!multiplicación!de!mmoo en!el!tracto!urinario!
con!invasión!de!tejidos!subyacentes.!El!tracto!urinario!distal!se!coloniza!con!la!biota!cutánea!y!tracto!GI,!por!
lo! demás! es! estéril.! Suele! ser! más! común! en! el! tracto inferior (cistitis y uretritis),! e! infecciones
nosocomiales en!ambiente!de atención 1º y hospitales (40% de las infecciones nosocomiales)!debido!a!las!
ocomiales)!debido!a!las!
biopelículas. En los centros de larga estancia (geriátricos) aparecen con frecuencia. !La incidencia es variablee
según edad
d y sexosexo;
o; comúnmente mujeres de 40 años, ya que tienen uretra muy corta con cercanía al recto, y con riesgo aumentado si
va acompañado de coito y embarazo.! Normalmente!no!requiere!un!diagnóstico!microbiológico.!Las!condiciones!
patológicas (diabetes, menopausia, prolapso de uretra) que! producen! retención! urinaria! aumentan! las!
probabilidades!de!sufrir!infecciones!urinarias.!Si afecta los riñones se trata de pielonefritis.
o Bacteriruria:!presencia!de!bacterias!en!orina.
o Bacteriuria significativa: indican!una!infección!urinaria!(variables:!sexo,!edad,!técnica!de!recogida).!
o Piuria: presencia! de! células inflamatoria en! orina (>10 leucocitos/mL x40 o centrifugado >5
leucocitos/mL).!
PATOLOGIA:
o Bacteriuria asintomática:!Índice de Kass >105 UFC/ mL sin o con piuria.!
o Abacteriuria sintomática o síndrome uretral agudo: se!refiere!a!paciente!con!síntomas!de!ITU!con!o!sin!piuria!
y!cultivo!de!orina!estériles!o!con!bajos!recuentos!bacterianos.!Ocurre!sobre!todo!en!mujer!joven.
Los! síntomas! se! suelen! relacionar con! la! piuria.! Aparece disuria, polaquiuria, tenesmo urinario, dolor
suprapúbico o lumbar, fiebre a veces (si!hay!fiebre,!añadir!un!hemocultivo).!
Infección no complicada: en!mujer!sana!joven!no!embarazada!con!síntomas!que!duran!menos!de!7
días con!riesgo!mínimo!de!complicación.!
Infección complicada: con!riesgos condicionantes (diabetes, manipulación de la vía urinaria)!o!por!
vía urinaria anormal (embarazo, cálculos)! con! riesgo! de! complicaciones porque los! mmoo se!
relacionan!con!resistencias y!la!sepsis.!
ETIOGENIA:
La! causa!más! frecuente! es! E. coli, y! otros!mmoo!intestinales,! que! al llegar!a! la! uretra! colonizan! de!forma!
ascendente.!En!algunos!casos!puede!darse!la!diseminación!hematógena por!C. albicans y S. aureus.!Suelen!ser!
monomicrobianas;!polimicrobianas en el caso de infecciones crónicas y pacientes instrumentalizados.!
- Sin factores predisponentes:!E. coli.!Se!empiezan!a!detecta!con!más!frecuencia!otros!BGN (P. mirabilis,
Klebsiella, Stapylococcus saprophyticus).!En!niños!se!puede!el!caso!de!adenovirus.
- Con factores predisponentes:! E. coli, Enterobacter, Serratia, BGN no fermentadores (P. aeruginosa),
Enterococcus faecalis y faecium, Staphyloccocus epidermis y C. albicans.!
DIAGNÓSTICO MICROBIÓLOGICO
Recogida de muestra:!Las!muestras!se!recogen!en!un!tubo!de!boca!ancha!y!se!transportan!rápidamente,!o!
se!almacenan!max. 24 horas a 4-6ºC refrigerado.!Se!realiza!un!cribado!para!seleccionar!las!muestras!que!
requieren!de!urocultivo!y!hemocultivo.!
requieren!de!urocultivo!y!hemo o.!En!caso!de!fiebre!o!escalofríos!con!sospecha!de!pielonefritis!puede!
ser! necesario! un! hemocultivo. La! recogida! de! muestra! se! realiza! por! micción espontánea con! instrucciones!
precisas!(separación!del!prepucio!y!labios),!sonda permanente (la muestra nunca se recoge de la bolsa de la orina,
sino de los tubos conectores),!sondaje vesical, punción-aspiración suprapúbica y bolsas colectoras en niños.
Procesado de muestra:!Los!métodos!rápidos!de!cribado!se!realizan!con!
tiras!reactivas!de esterasa leucocitaria, nitrito reductasa, catalasa, ATPasa con tiras
reactivas.! Puede!e! haber! FN y FP.. Se! complementa con! tinción Gram tras!
centrifugación.!
centrifugación ón.! Se! comprueba! la! calidad! de! la! muestra:! si! se! observan!
células!escamosas!se!pide!otrs!muestra.!
Identificación:! Se! cultiva! en! agar sangre, CLED (medio deficiente en
electrolitos y lactosa) y! McConkey (complicado para Proteus).! En el! agar!
cromógenico!screcen BG!(+)!y!(-).!El!volumen!de!siembra!es!conocido (1-
10 μL) y!se!inocula!con!asas!de!siembra!calibradas.!Para!la!evaluación!de!
los! recuentos! se! debe! tomar! en cuenta! el! método de recogida de la orina, piuria,
sintomatología, tipo de mo y grado de contaminación.! Se! debe! repetir! si! está!
contaminada o si aparecen 3 o más mmoo. Los!métodos automatizados son!
la que!sirve!para medir!si!hay!un!nº!suficiente!de!mmoo!(<5000)!para!aplicar!el!
que!detecta!a!partir!de!la!muestra!directamente.!Se!realiza!un!antibiograma!en!caso!de!cultivo!(+).
INFECCIONES!DE!TRANSMISIÓN!SEXUAL
ANATOMIA: El!diagnóstico!y!tratamiento!correcto!son!necesarios!la!para!prevención!de!complicaciones.!Se!
transmiten!por!contacto sexual persona-persona, contacto madre-hijos, sangre, trasplante y procedimientos
médicos.!Hay!unos!30!agentes!bacterianos,!algunos!de!la!propia!biota.!Hay!8!de!mayor!frecuencia:!Clamidia
Neisseria gonnorhaeae, Treponema pallidum, Trichomona vaginalis y! crónicas! sin! tratamiento! VHS-2, VPH,
VHB y VIH.!Hay!otros!que!puede!acompañar!estas!infecciones.!
PATOLOGIA: La!clínica!es!poco!significativa,!por!lo!que!deben!tratarse!como!infecciones!sindrómicas.!Suelen!
ser!infecciones mixtas y!paucisintomáticas en!mujeres,!dependendientes!de!hábitos-conductas!sexuales.!
La prevalencia es diferente, hay riesgo de incumplimiento terapéutico y se priorizan las infecciones tratables.!!
· Síndromes exudativos o purulentos:
o Uretritis (H/M) gonocócica en! hombres presenta disuria y! prurito.! Es! la! ITS! más! común! en!
hombres,!aunque!es!poco frecuente.!En!mujeres los!síntomas!son!menos!específicos!(dolor entre
menstruaciones),!aunque suelen!ser!asintomáticos (transmisores de gonococos asintomáticas estas mujeres)!y!
acompañar! de! manera! silente! la! uretritis. Las! mujeres! son! transmisoras! de! gonococos!
asintomáticas.!
o Uretritis no gonocócica (UNG): (UNG)
G): es!más
es!más!frecuente,!normalmente!causada!por!chlamydia!y!tiene!
un!período!de!incubación!de!7-21!días.!Se!debe!cuestionar!si!la!etiología!es!bacteriana.
o Uretritis posgonocócica (UPG): infección! mixta! xta! simultánea! de! gonococos y! clamidia que!
aparece! en! paciente! con con! UG! tratados! con! éxito.!
to.! Aparece! porque! el! tiempo! de! incubación! de!
clamidia!es!más!largo.!Responde!a!tetraciciclinas.
o Cervicitis (M) y proctitis (H)
· Vulvovaginitis: Son!inflamaciones!de!la!mucosa!vaginal!frecuentes.
Son!inflamaciones!de!la!mucosa!vaginal!frecuentesss.. El!50%!de!las!vulvovaginit
El!50%!de!las!vulvovaginitis!bacterianas!
son!asintomáticas,!pero!hay!una!relación!directa!con!la!enfermedad!inflamatoria!pélvica.
· Vaginosis: Disbiosis! no! inflamatoria.! Es una! modificación! de! la! biota! por! mmoo! que! producen!
secreciones!vaginales. Aparece!exudado!abundante,!blanquecino!y!maloliente.
· Tricomoniasis: ITS!inflamatoria con exudado vaginal, picor e irritación y mal olor.!
· Candidiasis:!autoinfección!inflamatoria.!
· Síndromes vesiculares o ulcerosos: sífilis, herpes (más frecuente). La!sífilis causa!condilomas!planos.
· Síndromes verrugosos: es! la! ITS! más! frecuente! a! nivel! mundial.! El! papilomavirus infecta! las! células
escamosas del cuello uterino.! Puede! desarrollarse! en! un! cáncer de cérvix.! Los! tipos! altamente!
oncogénicos!son!el!16 y!18,!aunque!hay!otros!tipos!que!se!relacionan!con!el!cáncer!cervical.!Los!tipos!6!y!
11!se!relacionan!con!verrugas!benignas. Puede!ser!asintomático o!provocar!condilomas!acumulados.!
ETIOGENIA:
Síndromes exudativos à Neisseria gonorrhaea y chlamydia trachomatis. En! autoinfección Gardenerella
vaginallis y candida. Ureaplasma, Mycoplasma, Herpes.
Síndromes vesiculares y ulceradas à Treponema pallidum (úlcera!no!dolorosa) y Herpes virus 1/2.!Endémicos!
en! otros! países:! H. ducreyi (chancroide),! Chlamydia trachomatis (linfogranuloma! venéreo)! y! Klebsiella
(granuloma inguinal).
Vaginosis bacteriana à Gardnerella vaginalis, mycoplasma hominis, ureoplasma, candida, trichomona,
anaerobios y!biota (salmonella, shigella, S. pyogenes, S. agalactiae, S. aureus, oxiuros).!
Lesiones verrugosas à Papilomavirus (40!serotipos!se!relacionan!con!la!ITS).
DIAGNÓSTICO MICROBIÓLOGICO
La mayoría de los mmoo no son cultivables, son fastidiosos o lábiles. Se!utilizan!exudados vaginales y uretrales
y muestras endocervicales recogidos!con!torunda!(más fina si es la uretral),!que!absorbe!los!exudados,!transportada!
en! medio Amies/Stuart,!vesículas por!aspirado!con!jeringa,!úlcera por!lavado!con!suero!fisiológico!y!aspiración,!
ectales, faríngeas, hemocultivos (meningocococemias)!y!orina (uretritis gonocócica).!Normalmente!se!recogen!2
muestras rectales, gonocócica).!Normalmente!se!recogen!2-3!3!
torundas!y!
torundas!y !y!en!caso!de!sospecha!de!gonococo!se!complementa!con!carbón!activado!para!eliminar!la!toxicidad!
!y!en!caso!de!sospecha!de!gonococo!se!complementa
de!detergentes!que!afectan!a!la!supervivencia!del!gonococo.!Siempre!acompañada!con!suero para!la!detección!
de!VIH!y!sífilis.!Se!utilizan!para!cultivo!Agar sangre, chocolate y Thayer-Martin,!y!se!añaden!más!según!sospechas.!
Los!tiempos!de!incubación!son!desde!las!72 horas.!
Síndromes exudativos:
#Uretritis gonocócica: tinción Gram de!exudados!uretrales!permite!visualizar!diplococos G(-) y!
alguna!células PMN.!La!confirmación!se!realiza!por!cultivos!específicos!y!PCR múltiple.
#UNG:!tinción Gram de!exudados!uretrales!sin!diplococos G(-)#,!pero!con!inflamación (4 o más
células PMN).!La!confirmación!se!realiza!por!cultivos!específicos!y!PCR múltiple para!los!di para!los!distintos!
patógenos.! s.!Hay!que!realizar!pruebas!para!el!gonococo!porque!suelen!ser!infecciones!mixtas.!
Vaginosis bacteriana: A!MO!giemsa!se!observa!celúlas clave constituidas!por!células epiteliales con GAMM
(Gardnerella-Anaerobios-Micoplasma-Mobiluncus)!sin!células!PMN#.!Se!puede!realizar!test de whiff (olor a
pescado)!pero!es!poco!sensible!y!poco!específico.!
Vulvovaginistis: tricomoniasis se!diagnostica!por!microscopia!en!fresco!o!GRAM!(mo+PMN),!cultivo!en!Roiron!o!
Diamon! (2-7! días),! detección! de! Ag! por! IFI,! PCR,! inmunocromatografia! y! aglutinación.! La! candidiasis se!
diagnostica!por!MO GRAM!o!en!fresco,!cultivo (sangre,!Sabouraud,!cromogénicos),!MALDI-TOF,!tubo!germinal!
y!PCR.
Síndrome ulceroso o genital
o Herpes genital: frotis de Tzanck (inclusiones intracelulares), IFD,!cultivo!y!PCR.
o Sífilis à MO en campo oscuro de!lesión, aspirado de una adenopatía, tejido o LCR.
Diagnóstico serológico reverso:!!1º prueba treponémica (EIA, CLIA)!cualitativa!automatizada!
específica!precoz!(persiste!durante!toda!la!vida)!de!Ac totalesà (-) no!se!puede!descartar!infección!
reciente o! inmunodepresión, o (+) posible sífilis! 1º,! 2º,! 3º! o! congénita à 2º prueba
treponémica à (-) para resolver discrepancia o (+) à 3º prueba prueba no treponémica
(VDRL, RPR)!cuantitativa!tardía!(6!semanas!positivización)!de!Ac noespecíficospara!células!dañadas!
adores!de!actividad!para!el!seguimiento!de!la!efectividad!del tratamiento. à Sífilis pasada
o marcadores!de!actividad!para!el!seguimiento!de!la!efectividad!del
o nueva.!
a.!Se!trata!en!caso!de!elevación!de!título!en!dos!diluciones.
o Se!pueden!englobar!en!PCR!múltiple:!Klebsiella granulomatosis (muy difícil cultivo, MO presenta
cuerpos de Donoban)! à Granuloma! inguinal,! H. ducreyi (Agar chocolate con vancomicina en
capnofilia a 33-35ºC con identificación por MALDI-TOF, IFD y PCR) à Chancroide,! Chlamydia
trachomatis à Linfogranuloma!venéreo.
Lesiones verrugosas:! Se! recoge! por! cepillado
do endocervical con! una! torunda o! biopsia de! las! verrugas! en!
tratamientos!resistentes!o!etiología!dudosa.!
tratamient a.!Se!transporta!sin!inhibidores!de!PCR!para!hacer!un!diagnóstico!
directo.!Se!buscan!coilocitos (células!precancerosas)!y!la!detección!del!tipo!de!virus!por!PCR.!El!cribado!se!
realiza!por!citología,!pero!se!recomienda!hacerlo!por!PCR.!Si!es!positivo!el!screening de PCR,!se!determina!
por!genotipificación si!es!oncogénico!o!no.!En!caso!positivo!se!procede!a!citología;!con!resultados!negativos!
se!realiza!seguimiento!durante!12!meses.!Si!da!positivo!en!los!genotipos!16/18!o!la!citoscopia!presenta!células!
escamosas!dudosa,!se!acude!a!la!colcoscopia.!

El! VIH es! un! retrovirus esférico con! 2! copias! de! ssRNA asociadas! a! proteínas! nucleares! (p7! y! p9),! de! la!
cápside (p24!y!la!p17),!enzimas!de!la!transcriptasa!inversa!(p66!y!p51),!proteasas!(p10), integrasa!(p31)!y
espículas!(GP120!y!GP41!del!precursor!gp160).
El!diagnóstico!se!realiza!por!serología!de!tipo combo por!detección!de!Ac específicos y Ag p24 sin!discriminar!
El!diagnóstico!se!realiza!por!serolog
en!el!suero!o!plasma!del!paciente.!Los ensayos de 4º generación tardan 10 días.!La!detección!se!hace!por!cribado!
utilizando pruebas! altamente! sensibles
(ELISA, multispot, test rápidos),!que!debe!
confirmarse! con! prueba! de! confirmación!
específicas (Western blot, LIA)! por! la!
aparición!de!FP.
El western blot separa los fragmentos de
las distintas proteínas del virus. Al trasferir
el gel a la membrana de etilcelulosa e
incubar con el suero del paciente, para que
ocurra una reacción con los Ac.!La!lectura!
es!compleja y!poco objetiva.!El LIA tiene
las proteínas preparadas en tiras que se
ponen en contacto con el suero para la
reacción de Ac.
positivo!se!define!según!distintas!organizaciones es. Los!resultados indeterminados son!los!resultados!(+)!
El positivo!se!define!según!distintas!organizaciones.!
es.!Los!resu
pero!que!no!corresponden!con!las!definiciones!anteriores.!Se!procede!a la!determinación!de!ARN!vírico.!El!
diagnóstico!de!infección aguda se!hace!por!detección!de!Ag p24.!Se!determina!la!carga viral por!RT-qPCR a
tiempo real en! nº!
n de! copias! del! virus/mL.! Se!mide! la efectividad!
efecti del! tratamiento y! el! estado! del! paciente.!
Menos de 50 copias representa!una!evolución!satisfactoria.!Se!evalúa!fenotipo para!la!inhibición!del!fármaco,!
el!genotipo relacionados!con!las!mutaciones!y!la!resistencia!a!antivirales,!y el!fenotipo virtual que!predice!el!
fenotipo!a!partir!del!genotipo.!
INFECCIONES!INTESTINALES!
ANATOMIA: Las! infecciones! GI! están! causadas! por! bacterias,! virus! y! parásitos.! Es! una! causa de!
morbi/mortalidad! importante,! sobre! todo! en! países! subdesarrollados.! Normalmente! suelen! ser! leves y!
autolimitadas.!A!veces!pueden!aparecer!situaciones!graves por!la!deshidratación!y!alteración!del!blanace!
hidroeléctrico en!poblaciones!de!riesgo!(ancianos, niños, desnutridos, inmunodeprimidos).!
PATOLOGIA:.!La!enterocolitis es!una!inflamación!de!la!mucosa!del!intestino!delgado!y!grueso,!mientras!que!la!
gastroenteritis aguda es!un!síndrome!con!náuseas,!vómitos,!diarrea!y!malestar!abdominal.!La!causa!puede!ser!
bacteriana o!toxigénica.!La!transmisión!es!feco-oral directa o!indirecta (intoxicación alimentaria).!El!reservorio!
puede!ser!el!humano(shigella)!o!zoonótico.!
o Diarrea secretora o acuosa: deposiciones!frecuentes!líquidas!sin!fiebre!ni!dolor!que!se!relacionan!con!
infecciones! del! intestino! delgado.! Causadas! por! neurotoxinas ingeridas! con! alimentos por! C.
botulinum (parálisis),! S. aureus (emesis) y B. cereus (emesis),! y enterotoxinas xinas liberadas! en! el!
intestino!por!E. coli enterotoxigénica, B. cereus, C. perfigerens y Vibrio cholerae.
e. Hay!que!demostrar!
que!la!bacteria!toxigénica,!no!basta!con!identificar!el!mo.!Los!períodos de!incubación!son!más!
cortos
o Disenteria o diarrea invasiva:!diarrea!con!sangre,!moco!y!pus.!Va!acompañada!de!fiebre!y!suele!estar!
afectado! el! intestino! grueso.! En! la! diarrea! inflamatoria! ocurre! una! invasión! de! las! células!
intestinales!provocando!su!destrucción!y!la!aparición!de!sangre en!heces. Pueden!estar!causadas!
por citotoxinas de E. coli enterohemorrágica y C. difficile (colitis pseudomembranosa) Producen!
manifestaciones! sistémicas! por! diseminación! a! otros! tejidos.! Tienen! un! tiempo! de! incubación!
largos!y!tienen!una!fácil!transmisión!entre!personas.

ETIOGENIA:
Enteritis esporádica benigna por toxiinfección alimentaria à Campylobacter jejunii y Salmonella entérica
Post-tratamiento antibiótico à Clostridium difficile
Gastroenteritis vírica (50-70%) à Norovirus! ! en! adultos! y! rotavirus! ! en! pediatría.! Rotavirus suele requerir
hospitalización. Adenovirus (40,41) en niños, astrovirus, sapovirus.
Enteritis por protozoos à Giardia lamblia y Cryptosporidium parvum.!
Intoxicaciones leves à S. aureus, Bacillus cereus y Clostridium perfigerens.!
Inmunodeprimidos à Posibilidad!de!patógenos!oportunistas!(aeromonas)!
DIAGNÓSTICO MICROBIÓLOGICO
Enteritis esporádica benigna à Sin!fiebre!ni!deshidratación!sin!necesidad!el!estudio!microbiológico#
Enteritis graves à diarreas! persistente,! lactantes,! ancianos! o! brotes! epidémicas à Diagnóstico! y! prueba! de!
antimicrobianos
La!muestra!suele!ser!heces; vómitos!para!estafilococos.!5-10 mL de!muestra!líquida!y!una!pequeña!cantidad
de!muestra!sólida.!Aunque!no!es!indicado,!puede!llegar!un!hisopado rectal de!niños pequeños o para buscar
el clostridium difficile.! Se! transporta! rápidamente, en! menos de 2 horas, un! medio! de! transporte! para!
bacterias! lábiles,! con! conservantes! en! caso! de! parásitos. También! pueden! llegar! muestras de aspirado
duodenal, biopsias y muestras de alimentos.!
El!estudio!microscópico!no!es!rutinario.!Se!puede!observar!leucocitos
udio!microscópico!no!es!rutinario.!Se!pu por!test de lactoferrina o!por!tinción
GRAM.!M.!Los!parásitos se!observan!en!fresco.!La!mayoría!de!los!enteropatógenos!son!G(-).
El!coprocultivo!se!realiza!en! agar sangre y!medios!selectivos!que!dependerán!del!laboratorio:! agar mcConkey
sorbitol y XLD (E.!coli!enterohemorragico),! CIN (yersinia),! TCBS (Vibrio),! CAMPY en!microaerobiosis!a!42ºC
y medios cromogénicos.! A! veces! se! realiza! el! enriquecimiento! en! caldo selectivo (Selenito/Rappaport) para! ra!
aumentar!el!número!del!mo!diana!(E.coli
au
aument
aumentar!el!númenúmeero!del!mo!diana!(E.coli enterohemorragíca con bolitas magnéticas que luego se siembran).!
).!La!identificación!se!hace!
).!
siembran).
con!
n!MALDI-TOF TOF directamente!de!las!colonias,!que!permitirá!identificar al!mo!como!toxigénico.!
El! C. difficile se! diagnostica! por! coprocultivo! en! medio! selectivo en! anaerobiosis (CCFA y CCEY) y! la!
detección de toxinas A y B (aglutinación, citotoxicidad o ELISA).! Se! puede! realizar! la glutamato
deshidrogenasa o!PCR para!identificar!la!C.!difficiles.!
Se!pueden!utilizar!paneles!de!PCR!múltiple!para!enteropatógenos!y!sus!toxinas.! Los!virus!se!detectan!por!
aglutinación!y!ELISA.!Las!esofagitis por!candida,!proctitis por!ITS y!gastritis por!H. pylori que!se!diagnostica!con!
prueba!de!la!ureasa en!el!aliento.
 DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL

Hepatitis A Hepatitis A

9 Familia Picornaviridae y género Hepatovirus: virus RNAss (+)

Microbiology. 15th ed. Mosby Elsevier;

Tille PM. Bailey & Scott's Diagnostic
9 Los infectados excretan
n altas cantidades en las heces Murray PR, Rosenthal KS, Pfaller MA. Medical
Microbiology. 8th ed. Elsevier; 2016.

9 Transmisión:: contacto fecal-oral directo e ingestión de agua y alimentos

9 PI de 1 mes aproximadamenteÎ ictericia

2021.
9 No causa enfermedad crónica
9 Frecuente en niños. El 50% de los mayores de 40 años tiene IgG.
9 Vacuna disponible Vacuna A+B
Infección aguda

El diagnóstico de confirmación es por la detección de

e IIgM específica (IgM antiVHA))
• Detección de anti-VHA IgM, IgG o anticuerpos totales (IgG+IgM) en
n plasma o
o del genoma del virus Enfermedad pasada suero mediante ELISA

El marcador
m anti-HAV
V IgG
G permanece detectable toda la vida • Detección dell ARN viral mediante RT-PCR en
n heces y sangre en laa fase aguda
• Se puede detectar el Ag vírico en heces por Immunocromatografia

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL

Hepatitis E Hepatitis B
9 Familia Hepeviridae, género Orthohepevirus: virus RNAss (+) 9 Familia Hepadnaviridae y género Orthohepadnavirus : virus DNA, envuelto
9 7 Genotipos (GT 3 es el detectado en países desarrollados) 9 Variabilidad genética importante
Mayor variabilidad que HAV
9 El mayor causante de ictericia y hepatitis a nivel mundial. 9 Transmisión:: Parenteral, sexual y perinatal
9 Similar a Hepatitis A. Más frecuente en países en desarrollo 9 PI aprox 3 meses, síntomas de ictericia
9 Transmisión: 9 Asintomática, hepatitis aguda, crónica, cirrosis y hepatocarcinoma
• Fecal-oral directa, principalmente por
or agua contaminada. 9 Vacuna
• Zoonótica 9 OMS: 250 mil. Infectados en el mundo
• Parenteral
LA HEPATITIS NO SE CURA, HAY RECUPERACION
9 Grave en embarazo: fracaso hepático fulminante
9 Evolución a cronicidad rara
a el diagnóstico de laboratorio se utilizan dos grupos de marcadores
Diagnóstico de confirmación mediante detección de IgM específica a) Serología: ag y ac
(antiVHE IgM) o del genoma viral (sangre, heces)
b) Detección del DNA viral
or anti-HEV IgG permanece positivo varios años
El marcador
 DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL Hepatitis B DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL
Hepatitis D
IgM solo en Infección aguda o en reactivación Inmunidad vacunal
Ig totales siempre menos en e infección pasada
inmunidad por vacuna
Anti-HBc y Anti-HBs • Virus delta o virus D (VHD) es un virus defectivo quee necesita al VHB para producir infección
A • Es RNA ss (-), solo codifica la proteína de la cápside, el HDAg
En ausencia de replicación • Utiliza la envuelta lipoproteíca del VHB (HBsAg)
Anti-HBe y no hay HBeAg
• Solo viable en coinfección o sobreinfección con VHB
Ya han Recuperación TOTAL
desaparecido anti-HBc IgG
en ausencia de HbsAg Coinfección Sobreinfección
en el core • Diagnóstico:
window
• Marcadores serológicos
No han aparecido
en el core window M
• Marcadores moleculares
Replicación viral

Marcador mas Infección crónica

PRECOZ Coinfección: HBsAg + Anti-HBc IgM + Anti-VHD
Sobreinfección: HBsAg + Anti-HBc IgG + Anti-VHD

Evaluar la efectividad del tratamiento Secuencia de aparición de marcadores: No aparecen el infección aguda
ADN-VHB, HBsAg, anti-HBc (IgM e IgG), HBeAg, anti-HBe y anti-HBs.
HBcAg no se detecta en plasma

DIAGNÓSTICO DE HEPATITIS VIRAL

Infecciones del tracto respiratorio. Factores de riesgo a considerar:
Hepatitis C
• Familia Flaviviridae : virus RNAss (+), envuelto 9 Condiciones del huésped
• Gran variabilidad que complica su manejo ` Estado inmune
• Infección aguda tendente a la cronicidad y a cirrosis y carcinoma
` Edad
• Transmisión: Parenteral, secreciones y vertical
` Patologías o condiciones que pueden reducir el aclaramiento
de las secreciones respiratorias o la obstrucción aérea
El diagnóstico específico se logra mediante ` Tratamiento antimicrobianos
detección de anticuerpos anti-VHC (clase IgG)) o del antígeno ((ELISA)
o mediante detección del RNA vírico (QPCR)
9 Estacionalidad La gripe se da en invierno normalmente, mientras que el virus respiratorio se da por otoño.
La detección mediante anticuerpos indica infección.
9 Comunidad / hospital A nivel hospitalario son más comunes los BGN.
Para diagnosticar su actividad se requiere detección de la viremia, detección del
antígeno o del ARN 9 Considerar además la fuente de la muestra La muestra con células epiteliales es inadecuada.
9 Importancia de terapia antimicrobiana empírica antes de obtener la
CARGA VIRAL y GENOTIPO: MONOTORIZACIÓN TRATAMIENTO identificación
Infecciones de vías respiratorias altas Infecciones de vías respiratorias altas
Tipos y etiología Faringitis y tonsilitis
RESFRIADO COMÚN y otras
patologías respiratorias
iología Bacterias
Virus respiratorios (~ 200)
` Streptococcus pyogenes ;ɴ-hemolitico del grupo A)
` Rhinovirus (>100 serotipos) ` Estreptococos ;ɴ-hemolítico del grupo C y G)
` Virus Influenza ` Arcanobacterium haemolyticum
` Virus Respiratorio Sincitial ` Otras causas:
` Parainfluenzavirus Neisseria gonorrhoeae
` Metapneumovirus Corynebacterium diphteriae
` Adenovirus Mycoplasma pneumoniae
Borrelia vincentii plus fusiform bacilli (angina de Vincent)
` Coronavirus
` Enterovirus Se deben diferenciar el VEB y el streptococcus
Virus como causas porque causan una faringitis similar

` Rinovirus, Coronavirus
Diagnóstico
o solo en situaciones ggraves o con
potencial epidémico ` Influenza A y B, Parainfluenza, Coxasakie, Adenovirus
Muestras: Lavado o aspirado o frotis nasofaríngeo ` Virus Epstein-Barr (VHH-4, Mononucleosis infecciosa) Manifestaciones diferentes según
Detección de Ag: IFI, ELISA o IC y Citomegalovirus (VHH-5) agente
TAAN:
N: PCRm ` VIH, Otros Diferenciar para tto

Faringitis y tonsilitis
Infecciones de vías respiratorias altas Faringitis y tonsilitis
Infecciones de vías respiratorias altas
FARINGITIS ESTREPTOCOCICA FARINGITIS ESTREPTOCOCICA Diagnóstico microbiológico solo en caso de que sea sintomática

` Niños de 5-15 ¿Es de origen bacteriano para que pueda recibir tratamiento
bacteriano? (niños) , ¿vírica?
` Inicio rápido: fiebre, cefalea, dolor de garganta y abdominal
`Inflamación faringo-amigdalar ((exudado
exudado y petequias en dŽƌƵŶĚĂ;ŚŝƐŽƉŽͿїexudado faríngeo (material purulento)
amígdalas o superficie de la boca y adenitis cervical dolorosa - Medio de transporte (Stuart/Amies)
` No hay rinitis, no tos, afonía o diarrea
Nimishikavi eta al. 2005 Engl J Med
Se deben diferenciar el VEB y el streptococcus
como causas porque causan una faringitis similar Crecimiento en agar sangre (gold estándar)
(otros agares selectivos)
Otros cuadros: Catalasa (-) y ɴ-hemolisis y cocos G(+)
Escarlatina, erisipela, impétigo, Shock tóxico Sensible a la Bacitracina
Diagnóstico rápido (POCT)
exantemática PYR (L-pirrolidonil-ß naftilamida ) + Detección
ección del Ag de la pared
p
Complicaciones: autoinmune
Aglutinación látex
Inmunocromatografía
• Fiebre reumática
• Glomerulonefritis post-estreptococica Escarlatina
Lengua aframbuesada Escarlatina
¿Significado de + ?
Prescott. MacGrawHill. (exantema)
¿Es la causa?
Infecciones de vías respiratorias altas Infecciones de vías respiratorias altas
MONOCUCLEOSIS INFECCIOSA MONOCUCLEOSIS INFECCIOSA
9 Astenia EBV CMV No suele ir acompañado de faringitis.
Es más frecuente en inmunodeprimidos
9 Fiebre Cultivo celular • Cultivo celular (saliva, orina, otras)
Aparecen inclusiones en forma de ojo de búho
9Faringitis (D. diferencial) Linfocitos atípicos • Pruebas serológicas: IgM, IgG
9 Adenomegalia Detección rápida de anticuerpos heterófilos mediante la • Detección directa :
9 Esplenomegalia prueba de Paul-Bunnell (Aglutinación
A del suero del paciente y
• Examen de tejidos. Giemsa
9 Monocitosis en sangre hematíes de carnero, EIA)
• Antigenemia (EIA, Inmunofluorescen
9 Elevación de transaminasas (hepatitis) Detección de anticuerpos específicos contra antígenos del
virus mediante ELISA : • PCR cuali o cuantitativo (carga viral)
LINFOCITOS ATÍPICOS 30%
- VCA (IgM, IgG) y EA,
- EBNA (persisten vida ) Linfocitos
PCR cuali o cuantitativo (carga viral) atípicos
Prats. Microbiología y Parasitología médicas.2013 (30%)

aringe enrojecida, Figure 25.21 Cells infected with CMV become enlarged and have a
characteristic “owl’s eye” nucleus. This micrograph shows kidney cells fro
placas purulentas Adenomegalia Murray 2019 patient with CMV. ASM Press

Infecciones de vías respiratorias altas Infecciones de vías respiratorias altas

Epiglotitis Diagnóstico clínico y exploración (gold standard)
Epiglotitis Epiglotitis
Haemophilus influenzae tipo b HEMOCULTIVO /cultivos epiglotis
Asfixia
Urgencia médica Agar sangre y (solo si seguro)
Estreptococos, S. aureus,
s Haemophilus RIESGO DE Agar chocolate Medio selectivo estreptococos
MUERTE
H. influenzae tipo b, H. parainfluenzae
No crece en caso
difusión desde orofaringe •Niños de 2-6 años No tocar!!! de influenza
•Fiebre elevada
•Dolor de garganta
•Dificultad respiratoria
•Estridor inspiratorio
•Disfagia Hemocultivo
Agar MUELLER HINTON
Mahon; Lehman (Eds).
Textbook ofDiagnostic

•Agitación
Microbiology 6ª Ed.

•Factor X (hemina)
•Factor V (NAD)
Elsevier2016

•Factores X + V
Epiglotis normal y epiglotitis.
A) Epiglotis normal. B) Edema y eritema característicos de la epiglotitis aguda.
r NIÑOS por vacunación Hib •Diferenciación de especies
ADULTO con dolor de garganta
A
ADULTO
En niños DD con otras causas de obstrucción aire / epiglotitis
http://www.elrincondelamedicinainterna.com/2010_07_17_archive.html
Infecciones de vías respiratorias altas Infecciones de vías respiratorias altas
Laringitis Laringotraqueítis o laringotraqueobronquitis: Crup
Laringe
Adultos: afonía Laringe y tráquea
+ síntomas inespecíficos de Frecuente en niños <3 años
infección respiratoria Síntomas respiratorios + Fiebre + tos seca
9 Viral: Parainfluenza,, In
Influenza. VRS, rinovirus, adenovirus. Otros
Viral: IInfluenza. Parainfluenza. VRS, rinovirus, adenovirus. Otros

9 Buen pronóstico

Si aparece membrana mucosa o es purulenta Inflamación de la mucosa

Infección de vías altas

Infección Estreptocócica, mononucleosis, difteria?-otras causas

9Laringoscopia. Tos perruna Disminución del paso de aire

9Tinción de Gram Estridor
9Cultivo del exudado purulento.
Diagnóstico clínico
9Hemocultivo Puede requerir corticoides

Infecciones de vías respiratorias altas Infecciones de vías respiratorias altas

Sinusitis Sinusitis
` Vírus respiratorios comentados
Diagnóstico
` Bacteriana: duración >7 días, mayor sintomatología o mala evolución (<5 %)
` Clínica
` Aguda
` Streptococcus pneumoniae Infección
` Radiografía de senos paranasales
Daño
` Haemophilus influenzae vírica celular ` Muestras: procesos invasivos
` Moraxella catharralis
` Punción de senos paranasales y aspiración (infrecuente)
` Otras menos frecuentes
Sobreinfección ` Aspirado nasofaríngeo (infección fúngica)
bacteriana con aireación
` Crónica y drenaje alterado ` Cultivo en medios específicos en aerobiosis y anaerobiosis (AS, Ach. MCA)
` Staphylococcus aureus
` Estreptococos grupo viridans
Infección Escasez de
` Anaerobios: Peptostreptococcus,
crónica Oxigeno
Fusobacterium, Bacteroides Criterios clínicos diagnóstico sinusitis
bacteriana
` Hongos en inmunodeprimidos
Crecimiento anaerobios
Infecciones de vías respiratorias altas Infecciones de vías respiratorias altas
Otitis Otitis

to Clinical Infectious Diseases. Springer 2019

` OTITIS MEDIA AGUDA En niños
` OTITIS EXTERNA AGUDA (oído del nadador)
Causas:
` Similar a infecciones piel • S. pneumoniae (25-30%), H. influenzae no tipable (15-30%), Moraxella catharralis,
` No por anaerobios aureus, estreptococos, BGN
• Virus respiratorios
` P. aeruginosa, S. aureus, Candida,
Aspergillus spp… • Pueden aislarse anaerobios (crónica)
• Alloiococcus otitis (Otitis media con efusión)
` Pruriginosa, dolorosa, edematosa,
purulenta
Clínica: Si aparecen secreción, dolor de oído intenso, cefalea, fiebre, tímpano enrojecid

Domachowske (Ed). Introduction

` Humedad, cuerpos extraños .. hinchado y sin movilidad

Sin tratamiento
Cultivo no es diagnóstico (biota) Rotura timpánica y
sordera

Infecciones de vías respiratorias altas Infecciones de vías respiratorias altas

Otitis ` DIAGNÓSTICO CLÍNICO/TRATAMIENTO EMPIRICO Otras infecciones DIFTERIA

Diagnóstico clínico y examen físico: ` Faringitis porr Corynebacterium diphteriae

` Demostración del exudado
` No habitual por vacunación masiva
` Otoscopia
` Timpanometría ` Características De User:Dileepunnikri - Trabajo propio, CC BY-SA 3.0,
https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=27093
cdc.gov
9 Rinitis con exudado purulento
9 Faringe, amígdalas y úvula: pseudomembrana muy adherida, dolor,
Diagnóstico laboratorio:
sangrado al tocar
solo si complicaciones , situaciones graves, procesos recurrentes
9 Ganglios linfáticos inflamados, fiebre

• Muestra 9 Complicaciones: miocarditis y cambios neurológico (Toxina Diftérica)

` Oído externo: exudado mediante hisopo

` Oído medio: pus procedente de tímpano perforado La difteria causa un
característico engrosamiento
` Timpanocentesis: no es necesaria del cuello, a veces referido
como “cuello de toro”
Infecciones de vías respiratorias altas Infecciones de vías respiratorias altas
Otras infecciones DIFTERIA Otras infecciones DIFTERIA

http://textbookofbacteriology.net/diphtheria.html
` Comunicar sospecha clínica
` Hisopado faríngeo en medio de trasporte Amies o Stuart
` Hisopado faríngeo, con medio Amies o Stuart.
` ESTUDIO DIRECTO
` Estudio directo
` CRECIMIENTO EN MEDIOS ESPECÍFICOS
` GRAM: +, pequeños, con forma de bastón (“coryne”)
` Azul de metileno o ALBERT : corpúsculos metacromáticos ` DETECCIÓN DE LA TOXINA
` Inmunodifusión ELEK
` CULTIVO EN MEDIOS ESPECÍFICOS ` PCR a tiempo real (gen
n tox) desde exudado
` Agar sangre: colonias negras/grises
` Agar Tinsdale : SA + telurito + cisteína: colonias negras con halo marrón
` Agar Loeffler (con huevo y suero): crecimiento rápido de C. diphteriae (8-18 h), favorecen
la aparición de corpúsculos metacromáticos

Infecciones de vías respiratorias altas Infecciones del tracto respiratorio inferior

Otras infecciones TOSFERINA ` Bronquitis aguda
` Faringitis por
or Bordetella pertussis. Grave en < 2 años ` Bronquitis cónica

Tortora et al. Microbiology, an introduction. 10th Ed. 2010

` Gram negativo, aerobio obligado, encapsulado, con fimbrias. Muy lábil ` Bronquiolitis
` No habitual por vacunación masiva
` Neumonía aguda
` Neumonía crónica
` Tuberculosis pulmonar
` Absceso pulmonar
` Empiema pleural
` Infecciones en Fibrosis quística

Muestra:: exudado nasofar

nasofaríngeo
Test elección: PCR • Aerosoles ¿Por qué ocurren las ininfecciones?
El tracto respiratorio • Aspiración
Serología (EIA): brotes 1. Fallo en las defensas
inferior es estéril • Diseminación 2. Microorganismo muy virulento
hematógena 3. Inóculo microbiano muy elevado
 Generalidad
Infecciones del tracto respiratorio inferior Infecciones del tracto respiratorio inferior
Relacionado con una infección de las vías respiratorias superiores

` Son muy frecuentes

Bronquitis y Bronquiolitis Infección e inflamación de tráquea-bronquios

` Responsables de alta morbi-mortalidad DAÑOS Hipersecreción de moco Obstrucción Dificultad

En epitelio bronquial flujo aire respiratoria y tos
` El diagnóstico microbiológico es fundamental pero…. Edema en lamina propia
expectoración
El diagnóstico no es de rutina, Fiebre
ipos y causas mas frecuentes a veces en niños
` En el 40-60 % de casos no se aísla el patógeno responsable por PCR BRONQUITIS CRÓNICA:
` Dificultad en la interpretación: ¿el microorganismo aislado tiene trascendencia clínica? NQUITIS AGUDA Adultos y con factores predisponentes.
fiebre oscilante, producción de esputo semanas. Gran ƉƌŽĚƵĐĐŝſŶĚĞŵŽĐŽїĞdžƉĞĐƚŽƌĂĐŝſŶĐĂƐŝĚŝĂƌŝĂ͕
` Algunos microorganismos que se aíslan siempre se consideran patógenos:
s: Mycobacterium mantenida durante al menoss tres meses seguidos y
tuberculosis, Legionella spp,
p Bordetella spp. sa vírica (gripe, VRS y otros virus respiratorios). durantee dos años consecutivos.
terias, < 10% (Mycoplasma pneumoniae,
` La serología confirma el diagnóstico pero es lenta mydophila pneumoniae, Bordetella pertusis, B.
Colonización bacteriana crónica
En neumonía neumocócica se puede detectar pertusis)
` Pueden detectarse algunos antígenos de pared por aglutinación o inmunocromatografia (cepas no capsuladas S. pneumoniae H. influenzae,
e
Inflamación del epitelio
` La PCR a tiempo real es muy valiosa: ofrece diferencia cuantitativa entre los portadores y los pacientes NQUIOLITIS de los bronquiolos frecuente en niños Moraxella catarrhalis). Episodios agudos por virus
con infección aguda Si hay pocas copias no se consideran suficientes para provocar infección cuente en < 2 años. VRS parainfluenza
ancias y tos; rinorrea; taquipnea; dificultad respiratoria. DIAGNÓSTICO??

Infecciones del tracto respiratorio inferior Infecciones del tracto respiratorio inferior
DEFINICIÓN Y RUTAS DE INFECCIÓN
NEUMONÍA NEUMONÍA

Prats. Microbiología Médica.21ª Ed. 2022

Elevada morbi-mortalidad
Inflamación e infección del tejido pulmonar ,ŽƐƉŝƚĂůуϯϱйĚĞůŽƐƉĂĐŝĞŶƚĞƐ
DŽƌƚĂůŝĚĂĚ͗ϱ-ϯϬй;ĂŐĞŶƚĞͬĨĂĐƚŽƌĞƐƉƌĞǀŝŽƐͿ ` Puede adquirirse:
WƌŝŵĞƌĂĐĂƵƐĂŝŶĨĞĐĐŝŽƐĂĚĞŵƵĞƌƚĞ;ϱDͬĂŹŽͿ
` En la vida ĚŝĂƌŝĂ͕ƉĞƌƐŽŶĂƐ͞ƐĂŶĂƐ͟їComunitaria
Colonización de la orofaringe

S. neumoniae ` En el hospitall : N
Nosocomial Neumonía neumocócic
Nosocomial por BGN
Microorganismo
roorganism en Aspiración ` Neumonía
ía después de las primeras 48 h de hospitalización.
aerosoles
En caso de pérdida de reflejos ` Y también asociada a otras condiciones sanitariass (personas institucionalizadas,
de toser (alcoholismo, coma)
Inhalación tratamientos domiciliarios ..)
Falta de control pulmonar Desde otro foco

ionella spp., Chlamydia spp., Diseminación por vía sanguínea Distinta etiología
tiología según si es comunitaria o nosocomial
pneumoniae, Coxiella burnetii, (edad y factores previos de salud)
ergillus spp., hongos dimórficos
Desde colonización o diseminación
US (Gripe y SARS-CoV-2). Neumonía infección en vías a TRADICIONALMENTE, las neumonías se clasificaban por síntomas y signos: típicas y atípicas.
No diferencias importantes. Considerar todas las posibles etiologías
 Infecciones del tracto respiratorio inferior Infecciones del tracto respiratorio inferior
ETIOLOGIA
n monomicrobianas ;ϭϬйpolimicrobianas))
La mayoría son
UMONÍA `
Diagnóstico
` Principal agente:: Streptococcus pneumoniae 50% Las técnicas moleculares v
Micoplasma, clamidia, gripe y VRS, SARS-CoV-2 cambiando estos datos
Estudio clínico y radiográfico
уйϱϬĞƚŝŽůŽŐşĂdesconocida
Hemograma, Bioquímica (Proteína C reactiva)
Etiología de neumonía en paciente previamente SANO
Gasometría arterial
Niños(>5meses) Jóvenes y adultos Ancianos
cuentes •Streptococcus pneumoniae •Mycoplasma pneumoniae •Streptococcus pneumoniae
•VRS •Chlamydophila pneumoniae •Virus de la Gripe Diagnóstico microbiológico (no siempre)
• Virus Gripe •SARS-CoV-2 y otros (20%) •VRS
•SARS-CoV-2 Diagnóstico complejo, necesita:
` Toma de una muestra adecuada sin contaminación de la biota de la orofaringe
•Mycoplasma pneumoniae •Influenza virus •E. coli
` Pruebas microbiológicas adaptadas a las sospechas etiológicas
nos •Haemophilus influenzae •Streptococcus pneumoniae • Klebsiella pneumoniae
cuentes •Chlamydophila pneumoniae •Mycobacterium tuberculosis • Microscopía (tinciones) y cultivos
•Otros virus respiratorios •Coxiella burnetii •Legionella pneumophila • Antígenos
•Hongos dimórficos: Histoplasma, •Mycobacterium tuberculosis • Serología
Blastomyces, ….. (áreas geográgicas) •Biota oral mixta • Molecular

Infecciones del tracto respiratorio inferior Infecciones del tracto respiratorio inferior
Broncoscopia (cepillado broncoalveolar, biopsia bronquial):
Diagnóstico microbiológico: ESPUTO en recipientes estériles Se utiliza en casos grave por posibles riesgos

spontáneo Provocado
` Muestras: • 2 horas sin comer
• Drenaje postural y percusión torá
• Limpieza intensa de la cavidad bu
• Lavado bucal con solución salina
` Esputo • Tos profunda
dentadura
• Provocado por aerosol
• Recipiente estéril
` Sangre porque se producen bacteriemias • Envío rápido al laboratorio
• ϯйĚĞƐŽůƵĐŝſŶƐĂůŝŶĂ

` Orina en busca de Ag
Maniobra de inducción del esputo mediante aerosol.
ŚƚƚƉ͗ͬͬǁǁǁϭ͘ŝŵƉĞƌŝĂů͘ĂĐ͘ƵŬͬŶŚůŝͬƌĞƐƉŝƌĂƚŽƌLJͬĂŝƌĚŝƐĞĂƐĞͬĐůŝŶŝĐĂůƌĞƐͬ
` Material aspirado endotraqueal (pacientes con traqueotomía),
aspirado gástrico. Lavado broncoalveolar (broncoscopia). Otros 1. Evaluación de la calidad de la muestra
00 x

Tille. Bailey & Scott’s Diagnostics

` Suero MN >25

Microbiology. 13ª ed. 2014

Aspirado gástric
Simple, rápido y barato, pero: epiteliales
0 células epiteli
eliales
• los pacientes no siempre expectoran Si no cumple Aspirados
Para evitar la contaminación se repite endotraqueale
es mejor punción transtraqueal • debe ser profundo
o broncoscopia • se contamina al pasar por la orofaringe: muestra
poco relevante
 Infecciones del tracto respiratorio inferior Infecciones del tracto respiratorio inferior
Con esputo se puede realizar diagnóstico preliminar tinción de plata
Diagnóstico microbiológico: PROCESADO DE MUESTRA
RÁPIDO Diagnóstico microbiológico DIRECTO: MICROSCOPIA
CABINA BIOSEGURIDAD Hay que informar si hay biota mixta o el morfotipo más abundante
ESPUTO 9 Gram (bacterias y levaduras). Evaluación de calidad de muestras
9 Fresco KOH o calcofluor (hongos)
ƒ Fluidificante (cisteína) Ä homogeniza el esputo y no tiene efecto sobre los microorganismos IFD Legionella
9 Naranja de acridina/ Auramina-Rodamina / Ziehl-Nielsen
ƒ Cultivar, fijar en porta, teñir Gram e interpretar (Micobacerias, Nocardia) En ocasiones es necesario concentra el
esputo antes de la tinción

9 Giemsa / plata, Azul de toluidina: Pneumocystis

ƒ En el caso de Legionella y micobacterias Ä Descontaminación͗ŝůƵŝƌϭͬϱĞŶ,ůͬ<ů;Ɖ,Ϯ͕ϮͿ͕ 9 IFD (Legionella); antígenos de virus (sustitituido por PCR)
agitar en vortex, dejar a 4 qC Tinta china. Se ven cápsulas pero solo en muestras frescas,
no las conseguidas en cultivo

• Legionella: tinción de plata, IFD. Cultivo en BCYE (buffered

( charcoal-yeast extract (BCYE) agar ) . Interpretar.

• Micobacterias: extensión en porta y tinción Ziehl-Neelsen, Auramina. Cultivo. Interpretar Naranja de acridina
Pneumocystis Ziehl-Nielsen

Infecciones del tracto respiratorio inferior Infecciones del tracto respiratorio inferior
Diagnóstico microbiológico DIRECTO: CRECIMIENTO
Diagnóstico microbiológico Mycoplasma es una causa
¿Cómo informar o interpretar los resultados
frecuente en jóvenes y adultos,
DIRECTO: CULTIVO mejor por PCR Variables en significado clínico de los cultivo
- Muestras contaminadas y no contaminadas con
AS ACh McC Sab BCYE
microbiota Esputo que pasa
por orofaringe Lavado bronquial
- Calidad de muestra
Mirar si hay células inflamatorias
- Morfotipos
Tardan 6 semanas
- Correlación gram y cultivo
Neumococo
Específico para Legionella
• Aislamiento de patógenos, no biota normal
Para Micobacterias
BGN
En ambientes (Middlebrook, • Si biota: si mo es el predominante en gram y cultivo
nosocomiales AIRE Lowenstein-Jensen
CO2 Para pacientes Medios líquidos) • Otros mo que crecimiento en cantidad
hospitalizados En caso de hongos Varias semanas significativa y predominante en el cultivo, en
a microscopio particular
lar si se ha observado su morfoti
morfotipo en la
s medios necesarios para crecimiento de tinción de Gram de la muestra
., vvirus!!
Cultivo celular: Chlamydia spp.,
oplasma (MC), B pertussis
No son todos cultivables PCR!!: Virus, Chlamydia, Mycoplasma… - Muestras no contaminadas (fibrobroncoscopia,
uestras para anaerobios biopsias)
Infecciones del tracto respiratorio inferior
Diagnóstico microbiológico; técnicas de diagnóstico rápido
Hay que confirmar el diagnostico en el laboratorio DIRECTO: DETECCIÓN DE ANTIGENOS
En los servicios de urgencia

MUESTRAS RESPIRATORIAS ORINA

TEST COMBO O PARA MÚLTIPLES VIRUS PCR múltiple DETECCIÓN DE ANTIGENOS
RESPIRATORIOS para varios mmoo

La serología es lenta,
seroconversión
requiere tiempo
y normalmente la
neumonitis es una Ag en el 70% casos
urgencia
Realizaar prueba de
resistencia a antimicrobianos Detección de polisacárido C de
neumococo
oco y de Legio
Legionella del
Shell vial. Cultivo de virus en tubo. Se concentra, se forma una moncapa serogupo 1
se centrifuga, se adhiere y se observa a picroscopio
TEMA 15. ESTABLECIMIENTO DE LA ENFERMEDAD PARASITARIA
El Triángulo Epidemiológico es necesario para la transmisió n y establecimiento de una enfermedad, y
está compuesto por tres elementos principales: el agente (su pervivencia, dosis infectiva,
resistencia a fármacos o SI ), el hospedador ( edad, genética, sexo..) y el entorno ( temperatu ra,

agu a, gestión de residu os ). En parasitologı́a el entorno se cambia por el vector, que si se conocen

puede constituir una medida del control de la enfermedad por medio de la modi icacióndel
entorno.. El entorno es donde se da el contacto entre vectores y hospedadores. Si se conoce el ciclo de
vida del pará sito, se puede modi icar el entorno para evitar la aparició n de determinadas parasitosis.
Parásito: microorganismo que vive en el hospedador pero no le beneficia. No siempre produce
daño porque el parásito busca beneficiarse, no lesionar al hospedador.
Parasitismo 🡪 Simbiosis no mutualista: estrecha relación entre dos especies en la que un
miembro (parásito) muestra dependencia del otro (hospedador).
✔ Obligatorio: necesita al hospedador
▪ Intermitentes o recurrentes: en el momento de la alimentació n. Garrapatas.
▪ Estacionarios: perió dicos: só lo en una fase del ciclo de vida (fase larvaria de vida libre) o
permanente (a lo largo de todo el ciclo de vida; excepto diseminació n/fase infectiva por
quistes o huevos)
✔ Opcional (facultativo): organismo de vida libre que puede ser pará sito (amebas).
El diagnóstico de una infección Parasitismo Parasitosis
por parásitos es complicada • Infecció n • Enfermedad
porque el mo manipula el • Presencia del pará s ito • Enfermedad parasitaria
• Cambios funcionales lentos • Cambios funcionales importantes
sistema inmune. ES MUY • Infecció n sin sintomatologı́a • Sintomatologı́a
IMPORTANTE LA APARICIÓN
DE SINTOMATOLOGÍA PERO
HACE MUY TARDE.

Patogenia del parásito

Acciones del parásito sobre el hospedador Cambios en los tejidos :

▪ Hiperplasia (hepatomegalia),
Acción expoliadora: Transversal (competencia
Hipertro ia y Neoplasia:
por alimentos del hospedador. Taenia spp.) o
Acción infecciosa/inoculadora: transmisió n de
directo (componentes celulares, sangre.
otras infecciones. Las larvas migran por dentro
Plasmodium spp., Ancylostoma spp.). Impide que
del hospedador, moviendo biota intestinal que
el hospedador tenga acceso a los nutrientes.
causa infección por movimiento. Pueden ser
Acción mecánica: Traumática (rotura de cé lulas
directas (pará sito inocula al agente capaz de
y tejidos. E. histolytica, Leishmania spp.),
generar infecció n) o indirectas (pará sito produce
compresiva (presió n de ó rganos y ruptura de
heridas que permiten la entrada de organismos
conductos. Fasciola hepatica, E. granulosus) u
capaces de generar infecció n).
obstructiva (obstrucció n de conductos y
Patogenia con base inmune: formació n
canalı́c ulas. Filarias, Ascaris spp.)
complejos inmunes (complejo Ac-Ag), reacción
Acción química y toxigénica: provocada por las
cruzada de la respuesta inmune (procesos
secreciones y residuos del pará sito. Anisakis
autoinmunes) y creació n de granulomas (es una
simplex. Reacció n alé rgica provocada por
reacció n de defensa del organismo que puede
helmintos.
conllevar la pé rdida de funció n del tejido).
Capacidad del parásito para evitar la RI del Esconder los antígenos : cubren los antı́genos con
hospedador proteı́nas del hospedador y el hospedador
identi ica a é stos como propios. E. granulosus,
Cambio antigénico: durante su ciclo de vida, los
Filarias, Schistosoma y Trypanosoma.
pará sitos cambian sus antı́genos super iciales para
Ubicación intracelular: En la super icie de las
evitar que el hospedador genere una defensa
cé lulas de hospedador no se exponen los antı́genos
especı́ ica. Esto lo hacen má s de una vez gracias a
microbianos (Plasmodium, Trypanosoma,
VSG (variant surface glycoproteins).
Leishmania, Toxoplasma), evitan la generació n de
Trypanosoma spp, Plasmodium spp, Babesia spp y
fagolisosoma (Toxoplasma) o tienen la capacidad
Giardia spp.
de abandonar el fagosoma, replicá ndolse en el
Mimetismo antigénico: Presentan antı́genos
citoplasma (Leishmania, Trypanosoma cruzi).
semejantes a las proteı́nas del hospedador (a nivel
Inmunosupresión: Generan proteinasas que
estructural, no funcional), generando una dé bil
degradan las inmunoglobulinas. Schistosoma
respuesta inmune. Plasmodium, Trypanosoma y
mansoni
Schistosoma

TEMA 16. MÉTODOS DIAGNÓSTICOS DE ENFERMEDADES PARASITARIAS

El diagnóstico de las parasitosis suele ser complicado ya que tiene manifestaciones clı́nicas
inespecı́ icas (en función de la fase del ciclo de vida) y retardadas en el tiempo, y las pruebas
convencionales de laboratorio (bioqu ímica, hematológica, radiología, anatomía patológica)
son de baja utilidad (excepto eosinofı́lia en alergias). Para un diagnó stico adecuado, se debe obtener las
muestras adecuadas que se mandan al laboratorio en el plazo adecuado que dependerá del ciclo de vida,
y la interpretació n de los resultados se realiza gracias a la comprensión del ciclo vital y la patogenia
del parásito . Ademá s, hay que realizar una anamnesis correcta ( factores de riesgo como viajes,
ingesta de alimentos, situación socieconómica). Son de alta importancia los otros servicios

clínicos para poder realizar el diagnóstico.

Importancia del ciclo de vida: El desarrollo de la enfermedad varı́a segú n la fase del ciclo de vida en la
que se encuentra el pará sito. En el caso del hospedador paraténico, no es necesario para el ciclo pero
alarga el ciclo de vida del pará sito. Si el humano es un hospedador paraté nico, el pará sito tenderá a
morir. En cambio, el hospedador accidental no es necesario para el ciclo de vida pero tampoco lo
alarga.

Pruebas diagnósticas
o Analíticas (bioquı́mica +
hematologı́a)
o Diagnó stico a travé s de
imagen (TAC, radiografı́a,
RMN): pará sito, quiste,
abscesos, etc
o Histología
(anatomopatoló gico):
protozoos, larvas, huevos
A la hora de seleccionar una té c nica,
se debe considerar qué se busca y
dó nde y las ventajas y desventajas.
 Diagnóstico de laboratorio parasitológico

HAY QUE CALIBRAR porque hay huevos de pará sitos de una morfologı́a muy similar, pero de un tamañ o
muy distinto. Para la identi icación morfológica se utiliza microscopio óptico (tinciones lu gol y
Fields ) y microscopio de fluorescencia ( tinción au ramina, tiñ e todo lo que tenga material gené tico)

que utiliza inmuno luorescencia mediante Ac especı́ icos (es úti pa Cr to r i , po lo hu so

pe ños). La lupa binocular para visualizar elementos macroscópico s se usa junto con el microscopio
óp co para observar en excrementos y diferenciar componentes de los helmintos ( progló des llenas de
huevos), dis nguir el dimorfismo sexual e iden ficar insectos y arácnidos. Se puede utilizar la tinta china
para buscar componentes de la tenia.
Ventajas Desventajas:
● LA VISUALIZACIÓN MACROSCÓPICA ES EL GOLD STANDARD ● El pa rá s i to ene que es ta r PRESENTE en heces ,
s a ngre o en l os teji dos , en ca n da d s ufici ente.
de mucha s pa ra s i tos i s : giardiasis y malaria.
Parasitemia intermitente, ubicación en los tejidos,
● Fá ci l de i nterpreta r: es una rea cci ón es pecífica .
liberación periódica en los excrementos
● Ba ra to (pos i bl e s i n l uz).
(helmin asis)… Sensibilidad (↓).
● Skin-snip s e u l i za pa ra bi ops i a s cutá nea s , pa ra ● A veces no se pueden di ferenci a r
bus ca r l a rva s morfol ógi ca mente.
● Exper s e: Dependi endo del mi cros copi o
ca mbi a n l os res ul ta dos . Es neces a ri o s a ber
di ferenci a r l os a rtefa ctos e i den fica r l a s
es peci es de pa rá s i tos
● Mues tra s e fija , el pa rá s i to no es tá vi vo.🗙

Cultivo: permite que algunos protozoarios o larvas de nemátodos se

desarrollen. Es interesante si hay pocos parásitos, y se quiere concentrar la
muestra. Se observa con microscopio invertido utilizando los flask de
cultivo celular.

Kinetoplas dos:
- Leishmania (MO-sangre): NNN. Es mejor mé dula ó sea que sangre, la sangre se
utiliza en fase aguda cuando hay muchos protozoos.
- Trypanosoma cruzi: NNN, LIT- (Liver Infusion Tryptose). Se observan los
amastigotes movié ndose.

Amebas intes nales→ Medio de Robison → Diamond

Amebas de vida libre (Acanthamoeba, Naegleria): Page

Trichomonas vaginalis: Roiron en tubo. Se recoge una muestra de exudado vaginal,

y se pone en el medio de cultivo. Se visualizan trofozoítos.

Strongyloides, Uncinarias (Ancylostoma, Necator), Trichostrongylus: difusió n en

agar, cultivo en carbó n, Harada-Mori
Ventajas: Desventajas:
▪ Es pecífico. Método directo. ▪ Rá pi do. Pa rá s i to vi a bl e.
▪ El pa rá s i to es tá vi vo, s e va a mover. ▪ La rgos peri odos de empo (día s y s ema na s )
▪ Se puede empl ea r pa ra moni tori za r el tra ta mi ento. ▪ Ba ja s ens i bi l i da d ( kinetoplas dos en s a ngre).
▪ Se puede a i s l a r el pa rá s i to: i nves ga ci ón ▪ Us a do ta mbi én pa ra i nves ga ci ón ( Trypanosoma
(epi demi ol ogía , res i s tenci a s ). cruzi, Malaria: método Trager-Jensen)

Diagnóstico de laboratorio inmunológico

❖ Test rá pidos: Inmunocromatogra ías y aglutinaciones en latex: bú squeda de Ag
 ❖ ELISA y tecnologı́a Architect (quimioinmuno luorescencia): bú squeda de Ag o Ac (Ag naturales
o recombinantes) en suero. Architect se basa en la unión del Ag a un enzima luorescente.
❖ Inmuno luorescencia directa (bú squeda de Ag) o indirecta (Ac)
❖ Hemaglutinación en serum (Chagas, Ac se unen a los eritrocitos)
❖ Western-blot (para con irmar).

Ventajas:
● Pa ra pa rá s i tos que no s e pueden di a gnos ca r Desventajas:
por mi cros copi a ( toxoplasma). ● No permi ten di ferenci a r i nfecci ón
● Método de screening opcional: a s i ntomá cos , a guda /pa s a da s obre todo en pa ís es
tra s pl a ntes , dona ntes endémi cos porque s on a n geni ca mente muy
de s a ngre. va ri a bl es )ç; s i ha ha bi do conta cto. Numeros os
● Apropi a do pa ra estudios pos i vos en zona s endémi ca s .
epidemiológicos. ● Rea cci ones cruza da s .
● La ma yoría s on fá ci l es . ● La s ca s a s comerci a l es proporci ona n da tos de
● Ki ts l i geros (poi nt- of S y E, pero s i empre ha y que i nves ga r.
-ca re) ● Li mi ta ci ones ( po de pa rá s i to/es peci e).
● Los que no s on tes t l i geros neces i ta n
equi pa ci ón, frío
● Ca ro

Diagnóstico de laboratorio molecular

Ventajas
✔ Sens i bi l i da d ↑ ↑ y Futuro-a utoma za ci ón-s creeni ng pobl a ci ona l mucho má s rá pi do.
Desventajas
✔ Interpreta ci ón: DNA ≠ RNA. El pri mero es má s res i s tente y perdura a l o l a rgo del empo, puede da r pos i vo
por ha ber teni do l a enfermeda d. En teoría s i hemos da do pos i vo en RNA puede que s i es temos en fa s e de
i nfecci ón a guda .
✔ Se s uel en conta mi na r con ba s ta nte fa ci l i da d, por el l o ha y que ha cerl a s en es pa ci os l i bres de conta mi na ntes .

✔ Cons erva ci ón (es peci a l mente RNA), Caro

✔ A veces pa ra i den fica r l a es peci e es neces a ri o rea l i za r má s de una PCR. La rtPCR no es pos i bl e rea l i za rl a en
todos l os ca s os
✔ Pos i vo, a unque no es temos enfermos , por conta cto previ o con el pa rá s i to.

Diagnóstico de laboratorio xenodiagnóstico

En Leishmaniasis y enfermedad del Chagas se emplean sus vectores

artró podos. Utiliza mé todo de ampli iació n: ”PCR natural”. No se
emplea para el diagnó stico de rutina. Es de interé s en los paı́ses
endé micos, donde no hay disponibilidad de equipos. Se pone el vector
sin infectar en contacto con el hospedador. En caso de parasitosis, el
parásito continuará su ciclo de vida en el vector. Se sacrifica el vector
y se detecta por ELISA o inmunofluorescencia que no necesita cultivo.
Ventajas:
o Es pecífico y No es muy ca ro.
Desventajas
o Des a gra da bl e.
o Neces a ri o ma ntener l a s col oni a s de l os i ns ectos .
o Proces o l a rgo: Cha ga s (30 día s +-cul vo+-PCR) y Lei s hma ni a s i s (6-10
día s +-cul vo+- PCR.)
TEMA 17. DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO DE LAS ENTEROPARASITOSIS (I)
Enteroparasitosis : Parasitosis del aparato digestivo y de glándulas asociadas (hı́gado, bazo).
Pueden ser protozoos (amebas, lagelados, ciliados y coccidios), en cuyo caso se encontrarı́an quistes
en heces (a veces trofozoı́tos) o helmintos (nematodos, trematodos y cestodos) que se presentan en
forma de elementos macroscó picos o pará sitos enteros en heces..
Parásitos que se pueden encontrar en heces:
o Protozoos intestinales: Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, Cryptosporidium spp. Son los
que aparecen en nuestra zona y provocan diarreas acuosas. El perı́odo prepatente es largo.
o Nematodos intestinales: Enterobius vermicularis aparece a nivel mundial, mientras que Trichuris
y uncinarias son má s comunes en viajes. Tienen un perı́odo prepatente de semanas.
o Cestodos intestinales: El periodo prepatente en Taenia Saginata es un poco má s largo que en
Taenia Solium (3-5 dı́as), aunque en ambos casos la distribució n es bastante amplia. Aquı́ no
buscamos huevos, sino progló tides.
o Esquistosomas y fasciola aparecen en otros tejidos pero expulsan huevos en heces.
Las vías de infección incluyen ingestión con fecalismo (contacto con las heces, especialmente con agua
y alimentos contaminados. Giardia, Cryptosporidium) o carnivorismo (comer carne con cisticercos) y
tambié n vía cutanea (Ancylostoma, Schistosoma). La muestra puede ser heces (CPP), contenido
intestino (aspirados, biopsias), muestras perianales (oxiuros, test de Graham), suero obtenido de sangre
sin anticoagulantes (en fases agudas de algunas infecciones), esputo (larvas-nemá todos generan cuadros
respiratorios) y abscesos del hı́gado y LCR (amebiasis intestinal).
Examen coproparasitario (CPP)
En caso de heces formadas se recogen más de 2g (100g)
y con heces líquidas se recogen mas de 5 mL (10mL). Las
heces formadas se licúan. Cuando son frescas se deben
procesar en 2-4 horas y cuando son fijadas el procesado
puede ser tardío. Normalmente se fijan, porque hay
peligro de infección, aunque no posibilita la visualización
del movimiento de los parásitos y puede alterar la
morfología. También se debe tener en cuenta la
temperatura, para nematodos no es bueno el frío. Primero se hace el análisis microscópico, y luego el
macroscópico porque para ello se pasa la muestra por un tamiz, lo que conlleva la pérdida de la muestra.

o Protozoos intestinales: Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, Cryptosporidium spp. Se llevan a

Inmunocromatogra ía para detección de Ag o Inmuno luorescencia.
o Nematodos intestinales: en sospecha de nemá todos se realiza un coprocultivo para detectar
larva. Es posible hacer cultivos de suelo en caso de geohelmintiasis. Los cultivos celulares se podrán
realizar en caso de que no se haya jado la muestra.
o Oxiuros: No se realizan examen CPP, sino que se analizan las zonas perianales.
Limitaciones
No asegura el diagnó stico de todas las entero parasitosis (limitado por la biologı́a de los pará sitos)y está
limitado por el ciclo vital del pará sito. Varias muestras pueden dar negativo, por lo que es importante
combinar con otras de diagnó stico.
● Oxiuros (Enterobius):: las hembras no desovan en el intestino, migran al ano para desovar.
● Taenia saginata y T. solium: se liberan los progló tides enteros que se pueden visualizar
macroscopicamente, no se buscan las formas larvarias.
● Fase invasiva de los helmintos o fase prepatente): se suele diagnosticar por serologı́a.
 ● Individuos de un ú nico sexo (huevos no): Strongyloides. Las hembras siguen el ciclo vital, los
huevos eclosionan dentro en el intestino, y en heces se detectan las larvas.
● Toxocara se enquista en distintos ó rganos por lo que no aparece en heces.
Un ú nico examen CPP no descarta parasitosis. Un examen seriado (mı́nimo 3 muestras) en dı́as
distintos aumenta la sensibilidad del examen microscó pico, ya que la liberació n del pará sito o de sus
elementos por las heces no es continua. Debido a esto, se necesita un muestreo adecuado: mé todo de
recogida e intervalo de tiempo entre muestras.
Tipo de muestras
Heces frescas: movimiento de los trofozoı́tos (normalmente no se ven quistes, pero es posibles) en
diarreas agudas (40x) a Tª ambiente (22-35°C), movimiento de las larvas a Tª ambiente (22-35°C),
detecció n rá pida de Ag en frio (2-8°C) o congeladas (-20°C). Disminuye la sensibilidad en la detección
de quistes de protozoos o huevos y larvas de helmintos, por lo que hay que utilizar heces fijadas.

Heces fijadas: es lo que SE REALIZA NORMALMENTE para evitar que los pará sitos infecten al
manipulador y sus formas se destruyan, ası́ como el desarrollo de las larvas y el embriogé nesis de los
huevos. Las sustancias ijadoras son derivados del formol 10%.
Examen macroscópico de CPP

Se realiza despué s del examen microscó pico (para evitar quedarnos sin muestra) y cuando estamos
buscando parásitos macroscópicos (Nematodos, Ascaris en la super icie, cestodos, proglotides de
Taenia). Se busca presencia de sangre, moco y características fá c ilmente distinguibles:
❖ Líquida (diarreas): si no se puede analizar en 30 min, se tiene que
ijar. Trofozoitos móviles que son muy lábiles.
❖ Blanda (medio-formadas): en caso de no poder analizarlas en 1 h, se
tienen que ijar. Trofozoitos móviles, quistes y huevos de helmintos.
❖ Duras: se pueden mantener hasta 24 h (en refrigeració n). Quistes y
huevos de helminto

Examen microscópico de CPP

1. EXAMEN DIRECTO (trofozoitos): Solo en caso de que nos lleguen muestras sin ijar de
heces lı́quidas. Solució n-salina o lugol (2 gotas) para dar contraste.

2. CONCENTRACIÓN (quistes, huevos, larvas): Preparació n en fresco: solució n-salina o

lugol. Se puede realizar mediante lotació n o sedimentació n; ambos procesos se aceleran
mediante centrifugación.

Flotación 🡪 Aná lisis de la super icie. Se concentran los qu istes, ooqu istes, larvas y

algu nos hu evos .

Má s ú til cuando se buscan huevos de baja densidad. Debido a la diferencia en la

densidad las formas de los pará sitos se quedan en la super icie y lı́quido de dilució n
debajo (los reactivos empleados para diluir tienen mayor densidad). Sus ventajas son que
es fá c il y necesita poco material y es adecuado para Ancylostoma y sus desventajas incluyen lotació n de
grasas (di iculta la visualizació n), la morfologı́a de larvas y quistes no se preserva siempre bien y
tambié n pueden perderse los huevos operculados (trematodos y D. latum) y los de Ascaris. El mé todo de
Willis Fülleborn (NaCl) se hace sin centrifugació n 🗙 y Faust (ZnSO4) con centrifugació n y es má s
utilizado.
El procedimiento consiste en añ adir formalina para ijar la muestra (puede haber larvas infectivas),
iltrar para poder eliminar las partı́c ulas grandes de la muestra ( ibras). Luego se añ ade NaCl, se
homogeneiza, centrifuga la muestra y se conserva la pastilla y se descarta el sobrenadante. Este paso
consiste en la limpieza de la muestra. Luego se añ ade ZnSO4 en dos tandas, se centrifuga y se recoge
una cantidad de muestra para analizarlo. Con un asa de siembra doblada por capilaridad se apoya en la
super icie de la muestra y se coloca sobre el porta. Se puede añ adir lugol para contraste.

Sedimentación 🡪 Aná lisis del sedimento : Se concentra una diversidad superior: qu istes, ooqu istes,
larvas y todos los hu evos . Es el proceso que más se utiliza porque es más fácil de realizar y su sensibilidad es

mayor.

⮚ Convencional: fase acuosa para homogenizar las heces. Faust & Ingalls: agua+glicerina
(favorece la sedimentació n) y Baroody & Most: agua+glicerina +centrifugació n
⮚ Difásicas: Retienen las grasas y facilitan la visualizació n.
El procedimiento consiste en los mismos pasos que en la lotació n para limpiar la muestra. Luego se
vuelve a agregar formalina (no es necesario) y tambié n etilo acetato . Se centrifuga y analiza el
sedimento. Hay que eliminar la fase lipı́dica primero, despué s de que se haya centrifugado.
Comerciales: Tiene una substancia fijadora, y filtros de diferentes tamaños. Se aprovechan de la centrifugación para
separar la muestra de los residuos y concentrarla simultáneamente. Con enen formol tóxico.
✔ Parasep –SAF +Triton (APACOR UK) 🡪 Sin disolventes de lípidos
✔ BioParaprep (Formol-Eter+Triton) 🡪 Con disolventes de lípidos

3. PREPARACIONES PERMANENTES: Para facilitar la identi icació n de protozoos intracelulares, porque los
ooquistes son muy pequeñ os. Por lo demá s solo se utiliza para fines didácticos.

Hematoxilina férrica (HF): Pa ra teñi r amebas y fla gel a dos con res ul ta dos muy buenos . Ci topl a s ma gri s a zul a do y l a
croma na negra o gri s os cura . Mues tra s frescas o fijadas

Tinción tricrómica de Wheatley: Pa ra teñi r protozoos. Ci topl a s ma verde-a zul a do y croma na roja
Ziehl-Neelsen modificada ( nci ón á ci do res i s tente). Cryptosporidium, Isospora y Microsporidium i ntra cel ul a res .
Orga ni s mos en rojo y el fondo a zul . Mues tra s fres ca s o fija da s . Se empl ea el calor
Kinyoun modificada ( nci ón á ci do res i s tente): s emeja nte a l a a nteri or, pero s e rea l i za en frio (má s fá ci l )
HF modificada (a ña di endo Ca rbol fucs i na ): pa ra muestras conservadas con SAF .. Ma yor contraste. Permi te rea l i za r l a s
nci ones de HF y Zi ehl -Ni el s en.

TEMA 18. DIAGNÓSTICO DE ENTEROPARASITOSIS (II): MÉTODOS DIAGNÓSTICOS ESPECIALES

Diagnóstico de enterobiosis

Causado por el agente Enterobius vermicularis (nematodo oxiuro

pequeñ o). La vı́a de infecció n es por contacto con alimentos, agua,
objetos o manos contaminadas con los huevos y los sı́ntomas
incluyen prurito . Los huevos son muy infectivos, embrionan a las
pocas horas. El perı́odo prepatente dura 3 semanas. Las hembras
migran a los lados del ano y depositan huevos en zona perianal y
perineal; no se suele detectar huevos en heces🗙 por lo que se recurre al
método Graham o método de la espátula adhesiva de
detección de huevos. Este consiste en colocar cinta adhesiva en la
zona perianal para luego transferirlo al portaobjetos. Tambié n se puede
simplemente coger muestras de la zona perianal.
Diagnóstico de enteroparasitosis con CPP negativ o: Patología biliar/gástrica/intestinal no identificada

Muestras : material obtenido con endoscopio y sondas:

Endoscopio: Tubo lexible con cá mara en uno de sus extremos que se introduce en el cuerpo por una
apertura natural o zona de corte para observar articulaciones (Artroscopio), vías respiratorias y
pulmones (Broncoscopio), vejiga (Cistoscopio), órganos abdominales y ovarios (Lamparoscopio),
intestino-grueso (Sigmoidoscopio ) y estómago e intestino delgado (Endoscopio gastrointestinal )
Sonda (gá strica, duodenal, nasogá strica): tubo lexible y ino que se introduce en el cuerpo por boca o
nariz hasta el estó mago o duodeno para realizar aspiración de muestras clínicas.
Endoscopia superior: Aná lisis de mucosa intestinal y
gá strica mediante raspado o aspirado. Utilizado para:
● Coccidiosis intestinal (criptosporidiosis e
isosporosis)
● Giardiasis
● Estrongiloidosis
● Distomatosis hepáticas (fasciloidosis y
clonorquiasis)
● Anisakiasis → larvas se establecen en el
estómago

Sondas duodenales: Se recoge el contenido

intestinal (lı́quido) mediante aspirado (no permite
recoger mucosa con coccidios y amebas). Utilizado
para el diagnó stico de giardiasiasis,
estrongiloidosis y distomatosis-hepática .
Endoscopia inferior: Se analiza la mucosa del
intestino grueso mediante biopsias. Utilizado para
diagnó stico de amebiasis (tras 3CPP negativos) y diagnó stico de esquistosomiasis .
Otras metodologías
para analizar las
muestras

Métodos moleculares
a rea l i za r en l a
mues tra s i no s e
ha n vi s ua l i za do
a meba s : PCR,
PCR-RFLP, Rea l Ti me -
PCR. Se u l i za pa ra
confirma r es peci e s .
Métodos serológicos:
Detecci ón de Ab-s
en el s erum del
pa ci ente

Coprocultiv o parasitológico

Usos :
Para el diagnó stico de infecciones leves por nematodos geohelmintos 🡪 Pocos adultos y pocos huevos
en heces. Anquilostomas y larvas de Strongyloides
 Objetivos:
▪ Facilitar la identi icació n de formas larvarias
mediante la inducció n de la eclosió n de los huevos
para ası́ poder obtener las larvas necesarias para el
diagnó stico diferencial.
▪ Obtener con inalidad cientı́ ica Ancylostoma,
Necator y Strongyloides de las heces o del suelo
No hay que enfriar la muestra porque disminuye la muestra,
tampoco ijarla por que impide la eclosió n de los huevos y el
movimiento de larvas. Hay que utilizar guantes porque
tienen capacidad infectiva (sobre todo las ilarias).

Cryptosporidium parvum y hominis

Epidemiologı́a: monoxeno de transmisió n oral-fecal por aguas contaminadas (baños, agua para beber)
con baja dosis infectiva. Tiende a la autoinfección. C. parvum infecta distintos vertebrados, mientras que el
C. hominis tiene como ú nico hospedador al humano. La forma infectiva es el ooquiste. Se reproduce
asexualmente en el intestino delgado. Los trofozoı́tos invaden los enterocitos y se reproducen.
Clı́nica: puede producir diarrea autolimitada, diarrea persistente acuosa con pé rdida de peso o diarrea
crónica (inmunodeprimidos) con afecciones extraintestinales que permiten el diagnó stico en otro tipo de
muestras.
Diagnó stico: Ante sospecha, las heces directamente se ijan con tinció n permanente. Se utiliza
Zleh-Nee¯eˆ ‡dlìcad, Klˆ×¼ˆ  F¼«e¯ceˆcla (a¼«a‡lˆa). EL GOLD STANDARD ES DETECCIÓN DE
OOQUISTES POR INMUNOFLUORESCENCIA . Se puede utilizar ICT Ag comerciales, pero no pruebas
seroló gicas🗙 porque la mayorı́a de la població n está inmunizada.

Giardia lamblia
Epidemiologı́a: monoxeno de transmisió n oral-fecal por aguas y alimentos contaminadas (también por
relaciones sexuales geis) . La incubació n dura hasta 2 semanas, y es muy habitual en verano-otoñ o. La forma
infectiva son los quistes con una dosis infectiva baja. El dañ o intestinal se produce por la unió n del
trofozoı́to a los enterocitos mediante discos, modi icando la permeabilidad e in lamació n. Se replica
asexualmente por isió n binaria en el intestino delgado.
Clı́nica: puede producir diarrea aguda acuosa con dolor abdominal y pé rdida de peso o diarrea crónica con
absorció n reducida que produce problemas de desarrollo en niños.
Diagnó stico: Se puede realizar un montaje en fresco con o sin contraste (lugol) o tinció n tricró mica. El
diagnó stico es por DETECCIÓN DE QUISTEs. En fase aguda se puede detectar Ag por ICT/ELISA , que no
es resolutiva en la fase cró nica. La serologı́a IgM es inespecı́ ica. En caso de no poder identi icar, puede ser
necesario la aspiración por sondas o biopsias por endoscopia superio r.

Entamoeba histolytica
Epidemiologı́a: distribució n mundial transmitida por alimentos y agua contaminadas (tambié n por seso
duro). La forma infectiva son los quistes que se desenquistan en el intestino delgado, pero se establecen en el
intestino grueso . Producen dañ o por mecanismos invasivos de enterocitos por enzimas citotó xicas (factor
de virulencia).
Clı́nica: 80% asintomático y raramente extraintestinal (abscesos en hígado, pulmón, cerebro ). Aparece
diarrea con sangre y moco o disenteria con dolor abdominal prolongada en el tiempo. En niñ os puede
producir perforació n del epitelio (cepas con factores de virulencia). La amebiasis metastásica se da a partir
de abscesos hepáticos, o directamente del intestino grueso en caso de amebiasis cutánea (infecta las zonas
perianales).
Diagnó stico: es importante la sospecha clínica. Se pueden realizar KITs ICT, ELISA Ag o PCR (identi icar
entamoeba histolytica). En caso de amebiasis extraintestinal el diagnó stico es RADIOLOGÍA + ELISA AG +
PCR (ASPIRADO DEL ABSCESO POR PUNCIÓN ASPIRACIÓN SI SE VISUALIZA). Se puede visualizar por
aná lisis coproparasitario: E. histolýtica tiene 4N y es más grande que E. hartmanni.

Strongyloides stercolaris
Epidemiologı́a: monoxeno transmitido por infección activa de la larva a travé s de la piel. Se encuentra en el
suelo, que en condiciones adecuadas puede desarrollarse todo el ciclo de vida. En el intestino delgado la
larva se desarrolla a la forma adulta. La hembra pone huevos que eclosionan y dan larvas rabdiformes que
son capaces de provocar autoinfección. Pueden aparecer en el pulmó n.
Clı́nica: pueden producir prurito con eosino ilia a medida que van migrando, croni icarse de manera no
complicada asintomática (75% eosino ilia) o complicada con dolor, pérdida de sangre, obstrucción
intestinal y larva currens . La hiperinfecció n se da en inmunodeprimidos por lo que es importante el
screening, tambié n los asintomá ticos.
Diagnó stico: se visualiza por MO para ver LARVAS CON UNO DE LOS EXTREMOS CON DOBLE PICO EN
HECES . En hiperinfecció n se pueden visualizar en esputo . Se realiza c oprocultivo o cultivo de suelo por
Baerman, Agar sangre, Carbón o Harada Mori. Se puede PCR cuando hay pocas larvas o ELISA IgG.

Anisakis simplex
No se establece en el intestino porque el humano es hospedador accidental . La transmisió n es por ingesta
de pescado crudo con larvas L3. La detecció n es por GASTROSCOPIA O IDENTIFICACIÓN
MORFOLÓGICA DE GUSANOS EN ESPUTO. Se realiza serologı́a IgE en pacientes alé rgicos. Mediante la
congelación se evita la infección, pero se dan reacciones alérgicas.

Fasciola hepá tica

Se transmite al humano por la consumició n de berros con metacercarias. Se produce una fase aguda 6-12
semanas tras la ingesta por la migració n de la metacercaria a travé s del paré nquima hepá tico (4 meses).
Aparece eosino ilia y marcadores de daño hepático.En la fase cró nica, se desarrolla a la forma adulta y
se reproduce en las vı́as biliares produciendo un cuadro subclı́nico similar a có licos. Debe de haber al menos
2 para que se reproduzca. Se puede dar migració n aberrante y lesiones ectó picas (granulomas).
Es importante la sospecha clínica. El diagnó stico se realiza por TÉCNICA DE IMAGEN para ver el dañ o
hepá tico y serologı́a que da positivo en caso de liberació n de huevos. Los huevos en heces solo aparecen en
la fase cró nica; son huevos operculados.

Opistorchis y clonorchis
Se infecta al consumir peces crudos con metacercarias. El DIAGNÓSTICO POR IMAGEN es muy resolutivo.
Los huevos operculados aparecen en heces.

Schistosoma
La infecció n ocurre por sumergirnos en agua con esquistosomas. La entrada produce rash y prurito
(Swimmer´s itch), luego aparece el síndrome de Katayama (dolor de cabeza, escalofríos) . Los huevos se
quedan atrapados en tejidos, formando granulomas (intestino, hı́gado) que inducen la pé rdida de la
funció n del tejido. La ibrosis hepá tica produce hipertensió n portal, esplenomegalia y glomerulonefritis.
Se realizan radiologı́a y se identi ican huevos en heces tras concentració n. Se pueden visualizar en forma de
GRANULOMAS (BIOPSIA) O ESTUDIO DE VIABILIDAD DE HUEVOS O “EGG HATCHING” EN
MUESTRAS DE SUERo. Se puede hacer hemaglutinació n Ac para S. mansoni o aglutinació n directa Ag.
Parasitosis urogenitales Trichomonas vaginalis
Generalidades • Mundial. Protozoo más habitual en países desarrollados
• Infección transmitida porr contacto sexual directo, porque no hay quistes
Parasitosis que afectan en el tracto urinario y reproductivo
• %50 de las ETS (dependiendo de la población diferencias)
•EEUU: 3,2 % de la población; Europa: < 1 %
•Mujeres: 40-49 años↑↑
•AGENTES •Hombres: 10-12 % de las UEG. Asintomático. www.cdc.gov/dpdx
•Protozoos: flagelados Trichomonas, trofozoítos trasnmitidos por vía sexual
Prefieren la vagina,
•Helmintos: nematodos y trematodos • Examen parasitológico por lo que
la mujer suele
•MUESTRAS ADECUADAS PARA EL DIAGNÓSTICO • Directo ser la
portadora Axostilo
• Orina Mucha cantidad que permita concentrar
• Post-concentración Nucleo
• 100 ml o a lo largo de 24 h • Detección de Ag-s Cuerpo basal

• Exudados: para flagelados

• Diagn. molecular Flagelos
• uretral, endocervical, vaginal No hay técnicas estandarizadas
de PCR ¿Dónde?
• mediante torunda, con medio para el transporte • ♀ Vagina (en lla parte inferior del aparato
reproductor).
Normalmente se concentra la muestra, pero si hay bastante parsitosis
no es necesario. • ♂ Uretra y vesícula seminal
• En un principio NO en el esófago y en la boca*

Trichomonas vaginalis Trichomonas vaginalis

PATOGENIA:
•SINTOMATOLOGIA: DIAGNÓSTICO: muestras
En la mucosa microúlceras*. Immunidad parcial: recurrencias habituales
EN LAS MUJERES: Se pone en cultivo
CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS • EXUDADOS
ADOS VAGINALES directamente
• EXUDADOSS ENDOCERVICALES (con colposcopio)
GENITAL SWAB
Mujeres Otro tipo de muestras:
(torundas genitales)
(torundas genitales)
(TÉCNICAS MOLECULARES)
• ORINA (TÉ
• Asintomáticas 50% Prurito MEDIO PARA TRANSPORTE
(líquido o gel) EN HOMBRES (más finas):
(amaril
• Sintomáticas: leucorrea (amarillo • EXUDADO URETRAL
Hombres
verdoso, olor a manzana), picor, dolor, Otro tipo de muestras
• Asintomáticos %95 • ORINA (cultivo y TÉCNICAS MOLECULARES)
inflamación de la pared del cervix: Colpitis • SEME
SEMEN (cultivo)
• Infrecuente: epididimitis,
macularis (forma
(f de fresa)
sa)
prostatitis, úlceras
• Complicaciones: parto prematuro,
infertilidad, enfermedad inflamatoria
pélvica * Al dañarse el epitelio, mayor
riesgo de otras infecciones
• Recién nacidos: neumonía, conjuntivitis,
(SIDA)
infección temporal vaginal
Trichomonas vaginalis Trichomonas vaginalis BD-MAX: PCR para ETS
C. trachomatis
N. gonorrhoaea
DIAGNÓSTICO DIAGNÓSTICO T. vaginalis
Se puede detectar por Teñido con
• Microscopia Es la más rápida test rápidos de Ag GIEMSA.
por inmunocromatografias
• Visualización directa de los fluidos, preparaciones húmedas: S: 44-68 DIRECTO: coger la
%; E: 98 %. muestra e introducirla
cultivo
en el medio de culti
ultiv
tivo www.cdc.gov/dpdx
•Retrasos de 10-30 minutos disminuyen mucho la sensibilidad del examen
al momento ↑↑ S
• Tras el cultivo:
o: medios Roiron o Diamon.. Frente a la PCR S:44-75 % (↓);
E:100 %. HA DEJADO DE SER EL Gold Standar En la uretra
• Técnicas rápidas la supervivencia
es más corta
•Detección de Ag : OSOM rapid test (<30 min): S: 90 %, E:92-100 %
•Mediante sondas: Affirm VPIII BD kit (1 h) S.=83 % ; E=99.9 %, Se verán leucocitos,
cel. epiteliales
• PCR: S:92,9-96,1 %. P. ej. BD MAX_DNA CUANDO ES SUPURATIVO biota vaginal y trofozoítos
se hace directamente
Torunda_Medio para el OM
•La combinación de diferentes muestras aumenta la S (orina, vaginal, Directamente: sin tinción.
trasporte. Del ambulatorio… CULTIVO
endocervical) ýý. Máximo mo 24 horas. En los
En
n el medio de cultivo 4
•NO SE EMPLEA SIEMPRE DE RUTINA uretrales la supervivencia es
días. 37 °C
C
más corta.

Schistosoma haematobium DISTRIBUCIÓN: África y Oriente Schistosoma haematobium

Medio
PATOGENESIS: POR LA RESPUESTA DEL HOSPEDADOR

Huevos en tejidos→ inflamación crónica→ granulomas→ fibrosis→ destrucción de tejido

Esquistosómula
CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS

Aguda
Porta • Infrecuente sindrome de Katayama por S. haematobium (diarrea, fiebre,
hepatomegalia, eosinofilia…
eosinofilia…,2-8 semanas tras la infección: hasta que se desarrollan los
huevos)
• Entrada: urticaria y rash (dermatitis generada por las cercaras, 24 h tras la entrada)
Plexos venosos de la vejiga
300 huevos/díaà en la vejiga,
Crónica (pasados meses o años desde la infección):
uréter, riñones.
• Asintomático* (inflamación crónica…morbilidad).
EOSINOFILIA
•Hematuria, disuria y úlceras en la vejiga.
• 200 millones de infectados
• En lugares endémicos <10 años: con microhematuria Eritrocitos en orina
• 120 millones sintomáticos: 200.000 enfermedad grave; 100.000 muertes/año • En la vejiga: polipo, nodulos- depositos de huevos
• Muy relacionado con la calidad del agua (water sanitation) • reflujo, obstrucción, hidroureter, hidronefrosis, bacteriuria..
• En mujeres: Lesiones papulomatosas cérvix, vulva..riesgo de STI
• En Japón es endémico y sin casos; en África subsahariana el 80 % de los casos
Schistosoma haematobium Schistosoma haematobium
En biopsias de vejiga se visualizan huevos
DIAGNÓSTICO DIAGNÓSTICO con tinción hematoxilina-eosina
Citoscopia: ddetectar daño en la urétra o hipertrofia
en vejiga
DATOS EPIDEMIOLÓGICOS (regiones endémicas, baños en lagos) os) + CLÍ
CLÍNICOS Radiologia: urografias para observar obtrucción y fibrosis
(signos) + ANALÍTICOS
OS (eosinofilia,
( , hematuria, proteinuria) + RADIOLÓGICOS- por huevos
ANATOMOPATOLÓGICOS + DIAGNÓSTICO A microscopio son grandes, y no presentan color
verdoso porque no pasan por el intestino
TÉCNICAS ESPECÍFICAS PARA EL DIAGNÓSTICO
Hay muchas causas de hematura posibles no Al conocer el volumen filtrado
infecciosas por lo que es importante los Orina MO directo: infección↑↑↑ al microscopio se puede
datos epidemiológico cuantificar los huevos
Serologico: Ag para S. mansonis y S. haematobium Concentración:

DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO •> 100ml

Visualización dee huevos en orina concentrada •A lo largo de 24 h: 10:00-14:00
liberación de huevos↑
DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO
Ag de adultos por aglutinación directa en látex
Detección de Ag y Ab Filtración: Nucleopore ® poro:
DIAGNÓSTICO MOLECULAR
15-20µm
>400 h/10 ml →
PCR, qPCR Grave

Onchocerca volvulus Normalmente en la

Onchocerca volvulus
piel. A veces en la
•Vía de infección: picadura de simulidos, inoculación de microfilarias sangre, orina y •Vía de infección: picadura de simulidos, inoculación de microfilarias
•Sintomatología: microfilarias en riñones Se suelta subcutaneamente esputo •Sintomatología: microfilarias en riñones
•Ciclo de vida heteroxeno •Ciclo de vida heteroxeno

Microfilarias en la orina…

O. volvulus→ en infecciones muy elevadas.

Normalmente: nódulos, river blindness.. Cuando es genital: hanging groin-adenopatía

Adultos de O. volvulus
inguinal Ceguera
Se aparean sexualemnte,
la mosca succiona las
larvas Causado por adultos

Causado por larvas

Oncocercosis. Ceguera generada por Onchocerca

Oncocercosis. Nódulos volvulus

Microfilarias de O. volvulus
Onchocerca volvulus Hemoparasitosis
•No siempre. A menudo
Diagnóstico : clínico +parasitológico detección accidental. Generalidades
• El diagnóstico de las filarias Parásitos del aparato circulatorio y de órganos asociados
Diagnóstico: microfilarias en orina.* normalmente en sangre y en la
piel (O. volvulus). •AGENTES
Microscopía óptica •Protozoos: flagelados y coccidios
•Helmintos: nematodos

•VÍAS DE INFECCIÓN
• Inoculación: transmisión mediante vectores artrópodos
W. bancrofti O. volvulus •MUESTRA ADECUADA PARA EL DIAGNÓSTICO
225 x 330 μm X 10 μm 280-330 μm X 7μm
Vaina Carece de vaina • SANGRE •Examen parasitológico
Tapón morado
•Punción venosa (generalmente, 3-5 ml + EDTA) •Preparaciones - directamente
Se busca especificamente Oncocercosis. Microfilaria teñida con GIEMSA
Anticoagulante para que el parásito no se esconda en húmedas - después de
- Al igual que en el diagnóstico de S. haematobium (mediante filtración) los coágulos
•Pr
Preparaciones concentrar
- Triple concentración de la orina:1
orina:1ml timerosal (tóxico)/100 ml orina: añadirlo al
orina •Serum o plasma fijadas
embudo Baerman: toda la noche filtración-concentración- centrifugar el filtrado y •Serología
• Detección de Ag-s
observar el sedimento (Ash). No se emplea normalmente.
• Médula ósea (leishmaniosis visceral, cuando el resultado en sangre es negativo)

• Biopsia de la piel (Leishmaniosis mucocutánea/cutánea; filarias cutáneas)

Diagnóstico de hemoparasitosis Diagnóstico de hemoparasitosis

EXAMEN PARASITOLÓGICO DE LA SANGRE OTRAS METODOLOGÍAS PARA ANALIZAR LA SANGRE
Es complejo porque los parásitos
§ Examen directo de la sangre pequeños no se ven por los enterocitos § Inmunocromatografías: Detección de antígenos
§ Preparaciones sanguíneas permanentes § Inmunofluorescencias
• Extensión de sangre o frotis de sangre (Thin blood films) • Empleo de anticuerpos específicos para detectar diferentes especies
Más sensible, pero tarda más. Así que realizar
• Gota gruesa de sangre (Thick blood films) 3 frotis va a tener la misma sensibilidad pero
más rápido
§ Métodos moleculares Nunca es la primera opción
solo para confirmar
• Tinciones: Giemsa, Wright-giemsa, tinción fluorescente con § Métodos serológicos
Benzothiocarboxipurina
§ Técnicas para concentrar la sangre
• TTécnica
écnica Buffy coat (leishmanias)
• Técnica con naranja de acridina (Microhematocrit Centrifugation Method
-QBC Becton-Dickinson)
• Triple centrifugación (tripanosomas)
• Filtración mediante membrana (microfilarias)
• Método Knott (microfilarias)
Malaria • 3,2 billones de personas en riesgo (en 97
países).
Malaria
• WHO 2018: 219 millones de casos y 435.000
Plasmodium spp. Apicomplexa: Coccidia muertes en 2017 Plasmodium spp. Apicomplexa:
• En África el 92 % de los casos y el 93 % de las Coccidia
muertes
•Agente principal: P. falciparum
Ciclo exo-eritrocitico: en el hígado
ocurren 2 divisiones asexuales
Los merozoítos infectan los
eritrocitos
P. knowlesi: Sureste Ciclo intra-eritrocitico: ruptura
asiático sincronizada y liberación de
TROFOZOÍTOS --> DIAGNÓSTICO
y sintomatología alos 10 días
P. vivax:
Especialmente en
P. malariae: trop y Asia. Sudamérica, Aparece fiebre (quartana en P.
subtrop↓ en algunas zonas de malariae), escalofríos, dolor de
cabeza, sudoración y trombocitopenia
África

P. falciparum infecta todo tipo de eritrocitos

por lo que es de mayor gravedad,
además de malaria cerebral, anemia grave
P. ovale: África y problemas respiratorio
P. falciparum: (Oeste). En el
Trop, subtrop. Ocurren reinfecciones por hipnozoitos
pacífico
Especialmente en con P. vivax y P. ovale
África

µWorld Malaria report 2018. WHO

Malaria Malaria
Plasmodium spp. Apicomplexa: Coccidia Plasmodium spp. Apicomplexa: Coccidia

DIAGNÓSTICO Primero ver si es falciparum que hay

que tratar rapidamente
DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO

MICROSCOPIA: EXTENSIÓN DE SANGRE Y GOTA GRUESA

MÉTODO PARASITOLÓGICO: MICROSCOPIA
- Especie, índice-parasitemia y fase • Directo del dedo o mediante extracción
EXTENSIÓN DE SANGRE-FROTIS (Thin film) Y GOTA GRUESA (Thick
(Th film) sanguínea (EDTA-anticuagulante).
• Se debe realizar el examen rápido: para

DETECCIÓN DE ANTÍGENOS: INMUNOCROMATOGRAFÍA mantener la forma de los eritrocitos + los

-Para completar la microscopia. Para diferenciar P. falciparum del resto Extensión Gota
puntos específicos que puede haber en
gruesa eritrocitos parasitados se pueden perder tras 2
Diferentes células sanguíneas en
una extensión
horas.
PCR: DIAGNOSTICO/CUANTITATIVO/CARACTERIZACIÓN DE ESPECIE
• Se puede requerir de más de una muestra para obtener el diagnóstico.
• En la malaria, la primera gota gruesa suele ser positiva en el 95 % de los casos, pero
SEROLOGÍA**** solo para investigación, epidemiología y para screening en
donantes de sangre* ELISA.
E Inmunofluorescencia •Una única gota gruesa negativa no descarta el diagnóstico: 12-24 h, 48 h
(Comerciales: P. falciparum).
 Malaria DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO Malaria DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO

MICROSCOPIA: GOTA GRUESA DE SANGRE MICROSCOPIA: EXTENSIÓN DE SANGRE

OM

OM

La gota gruesa es el Gold Standart Se mantiene la morfología de las células: para

••Se
Tinciones (Romanowsky): Siempre fijación
• Rompemos las células para liberar el parásito No hay que fijar la muestra identificar la especie y calcular la parasitemia (Metanol) + GIEMSA (10 %.10 minutos) o Field´s
MUCHO MÁS sencillo. (B ¼ +A, 2 min)
• Tinciones (Romanowsky). GIEMSA %3, 30 min FIELDS B+A
• El frotis nos da más información hematológica
• Sensibilidad­ : 5-20p / μl
μ 1ra opción para el diagnóstico del paciente.
• Sensibilidad: entorno a 600-1000 p/ml
evaluación del tratamiento

Malaria DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO

MICROSCOPIA
http://www.cdc.gov/dpdx/resources/pdf/benchAids/malaria/Parasitemia_and_LifeCycle.pdf
Parasitemia
Thin film:

ERITROCITOS INFECTADOS
X 100
ERITROCITOS CONTABILIZADOS

•Hay que contar mínimo 500 hematies.

% de hematies parasitados

Thick film:

• +/++/+++
• Dependiente de los glóbulos blancos (GB/μl= 8000).

8000
•Parásitos x = Parásitos/ μl
GB CONTABILIZADOS
Malaria Malaria
OTRAS METODOLOGÍAS PARA EL DIAGNÓSTICO OTRAS METODOLOGÍAS PARA EL DIAGNÓSTICO
DETECCIÓN DE ANTÍGENOS: INMUNOCROMATOGRAFÍA MÉTODO SEROLÓGICO Epidemiología
Screening en donantes de sangre (bajas
INMUNOCROMATOGRAFÍA-LATERAL FLOW-Rapid diagnostic test RDT ELISA: parasitemias)
• Diana diagnóstica (proteína): • Para la detección de IgG-s en nuestro entorno.
t
• HRP-II: Hi
Histidine rich protein-II. Antígeno específico de la superficie
cie de P.falciparum.. • Reacciones cruzadas con Babesia ssp.
• LDH: lactato deshidrogenasa. Antígeno metabólico (pan-LDH o LDH específicos-vivax).
• Aldolasa: enzima
en metabólica (pan-aldolasa). PCR: DIAGNOSTICO/CUANTITATIVO/CARACTERIZACIÓN DE ESPECIE
Ventajas •En auge como Gold standard
• Rápido, no se requiere experiencia ni microscopio, reproducible.
nested-PCR y PCRs en tiempo real especie-específicas
Desventajas
• Necesario completarlo con una extensión (S y E 99,9 % )
•A pesar de ser muy buena la sensibilidad de HRP-II, en ciertas zonas limitadas existen mutantes que no
contienen esa proteína (en la zona del Amazonas) → falsos negativos √: diagnóstico de bajas parasitemias (0,001-5 p/μl),
• S: 100p/μl → falsos negativos en bajas parasitemias Agarose gel (2%) analysis of a PCR diagnostic test for species-specific

• S muy baja para P. malariae, P. knowlesi y P. ovale confirmación de especies, para el diagnóstico de semi- detection of Plasmodium DNA. PCR was performed using nested
primers of Snounou et al.
Lane S: Molecular base pair standard (50-bp ladder). Black arrows
•CUALITATIVOS. Gravedad o monitorización NO. El resultado de HRP continúa siendo positivo después del inmunes, diagnóstico de infecciones mixtas, show the size of standard bands.
Lane 1: The red arrow shows the diagnostic band for P. vivax (size: 120
tratamiento (35 d) bp).

Test rápidos de malaria. De muchos tipos. A la hora de seleccionar el test es recomendable: test que combinen
monitorización del tratamiento. Única técnica eficaz para Lane 2: The red arrow shows the diagnostic band for P. malariae (size:
144 bp).
Lane 3: The red arrow shows the diagnostic band for P.
la HRP-II de P. falciparum y LDH o aldolasa de todas las pespecies (pan-LDH, -aldolasa). Procedimientos de la
detectar P. knowlesi. Estudio de los genes R. falciparum (size: 205 bp).
Lane 4: The red arrow shows the diagnostic band for P. ovale (size: 800
SEIMC. Diagnostico de parasitosis importadas en España. 2020 bp).

Leishmaniasis >20 especies de leishmania

Leishmaniasis
Ø 90 especies de flebótomos
Leishmania spp. Sarcomastigophora: kinetoplastida transmisores CLÍNICA: diversa.
Ø 70 especies de animales reservorios
Dependiente de la especie causante y el estado inmunitario del hospedador
Promastigotes EPIDEMIOLOGÍA COMPLEJA
metacíclicos

• Leishmaniasis cutánea
• La más leve y habitual
1 • Mundo viejo: L. major, L. tropica, L. infantum
• Mundo nuevo: L. mexicana, L. amazonensis, L. guyanensis, L. braziliensis

Promastigotes • Leishmaniasis mococutánea

2 • L. braziliensis u otras especies del subgénero viana

AMASTIGOTES
• Leishmaniasis visceral
DX • La más grave y mortal sin tratamiento
• L. infantum: cuenca mediterránea, Brasil y otros países Latinoamericanos
3 • L. donovani: África del este, India, Bangladesh y Nepal

www.cdc.gov/dpdx
Leishmaniasis Leishmaniasis
Leishmaniasis cutánea y mucocutánea (LC y LMC): CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS Leishmaniasis viscerales (LV): CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS

Tras unos meses el tratamiento nódulos con

Úlcera de los amastigotes que dura dos meses y constituye un foco de infección
Post Kala Azar
chicleros: PIEL
Lesiones localizadas Dermal
(LC) :lesiones localizadas en la L. mexicana en la piel Leishmaniasis
piel : pápula →úlcera+- GANGLIO (PKDL)
infecciones secundarias de Seca: LINFÁTICO L.donovani
bacterias→ CICATRIZ L. tropica BAZO
Sistema Sistema Retículo
Fiebre, cansancio, perdida de peso,
Retículo Endotelial (SRE) MÉDULA
Piel+ mucosas (LMC) Húmeda: OSEA (hepato)esplenomegalia, adenopatía,
Endotelial
=ESPUNDIA L. major ENFERMEDAD leucopenia, trombopenia, hemorragia,
(SRE)
SISTÉMICA HÍGADO
inmunosupresíón, infecciones bacterianas

Órganos ricos en macrófagos secundarias...MUERTE

por sobrevivir en el fogosoma
Leishmaniasis Seca, húmeda o de los chifleros
Puede expandirse a mucosas o
cutánea diseminada diseminarse solo por la piel CAPACIDAD
(LCD).
L. aethiopica PARA EVITAR LA
FAGOCITOSIS
µhttp://www.who.int/
Aytekin et al,2006; Vandana et al, 2009

Leishmaniasis Leishmaniasis
Para interpretar adecuadamente los resultados y realizar NO SE UTILIZA LA SANGRE porque son intracelulares
DIAGNÓSTICO un correcto diagnóstico, es muy importante tener la DIAGNÓSTICO EXAMEN MICROSCÓPICO
ÚLCERA EN LA PIEL si no evoluciona con t
información clínica y epidemiológica
ratamiento con antibioticos aqui se suele adecuada. Extensiones y extensiones por aposición,
sospechar en Espaá la cutánea
teñidas
Se obtiene la confirmación-diagnóstica al observar amastigotes en los
BIOPSIA O • Medula osea Más fácil de recoger y
tiene buenos resultados en el cultivo
tejidos o al aislar promastigotes en el cultivo Leishmaniasis viceral ASPIRADO • Ganglio linfático
(LV) • Hígado Muy buena sensibilidad,
por punción
• EXAMEN MICROSCÓPICO • Bazo (S:%95)-
Método 1 En función de la herida,
Gold-standard: Eá, pero
si es nódulo se biopsia
si es un aspirado se introduce directamente para
peligroso. S variable:
parasitológico observar y la biopsia hay que tratarla primero
LV: S: %64-94
• CULTIVO La sensibilidad varía con el organo biopsiado,
el bazo es el más sensible pero es peligroso biopsiarlo porque está inflamado y hay peligro LC: %50-80
2 LMC: S↓
Leishmaniasis cutánea o PIEL/MUCOSA
Otros métodos • PCR mucocutánea (LC o LMC) • BIOPSIA
3
• RASPADO
• IMPRESIÓN
• INMUNOLÓGICOS Y SEROLÓGICOS
4

SIDA-INMUNODEPRIMIDOS: EN SANGRE (S:%50), laringe, pulmones, LCR, aparato

digestivo…
Leishmaniasis Leishmaniasis
La sangre se tiene que centrifugar para que
queden3 fracciones
DIAGNÓSTICO EXAMEN MICROSCÓPICO DIAGNÓSTICO CULTIVO
EL cultivo aumenta la sensibilidad,
enla piel solo se sule hacer observación directa
By KnuteKnudsen at English Wikipedia, CC BY
3.0,
OBJETIVO: áS, aumentar la probabilidad de encontrar https://commons.wikimedia.org/w/index.php?cu
Tinción: GIEMSA (10 %, 10´), Diff-Quick parásitos rid=3986752

• SANGRE (EDTA) (↓S) BUFFY COAT: %64-67

%64-6
Se extiende sobre el porta, se utiliza para cultivar
MICROSCOPÍA DIRECTA → AMASTIGOTES PRESENTES DENTRO DE LAS CÉLULASS (O • MEDULA OSEA (litio heparina o EDTA) (áS):
): INMUNOCOMPROMETIDOS S 50-100 %;
FUERA) En la sangre directamente los visualizamos muy pocas veces.*
FUERA). Punción de hueso
INMUNOCOMPETENTES: S 53-70 %
• (GANGLIOS LINFÁTICOS, BAZO, HÍGADO-no se emplea)
• PIEL (S 50-60 %; LMC ↓). Se homogeniza. Contaminada; no se realiza en todos los
lugares.
PROCEDIMIENTO:
MEDIOS DE CULTIVO
un poco de sangre •226-27
6-2 °C.
• NNN Sangre de conejo + proteínas + sales
• 4 SEMANAS-observar
SEMANAS cada semana y
• M199 Para el cultivo celular, vitaminas, sales…
hacer pase. FLAGELADOS para ver si se mueve algo
• SCHNEIDER y realizar tinción
pH ¹ • +-Tinciones: para observarla
•GIM (GRACE´S INSECT MEDIUM)…
presencia/ausencia de parásitos
µLeishmania amastigotes. www.cdc.gov/dpdx + Antibióticos. No antifúngicos: cuidado: ¡levaduras!

Leishmaniasis Leishmaniasis
DIAGNÓSTICO CULTIVO DIAGNÓSTICO PCR

DONDE

• SANGRE: S%70
S%70-1
S%70-100*
EN EL CULTIVO TENDREMOS AMASTIGOTES, PERO ESPECIALMENTE Si haycantidad suficiente
PROMASTIGOTES * • MÉDULA ÓSEA (áS): S%82-100
• (GANGLIOS LINFÁTICOS, BAZO, HÍGADO): no se emplea
• PIEL. ↓S: contaminaciones ↓E

DIANA/TARGET

• RNA subunidad pequeña del ribosoma ; SSU

S rRNA
•DNA del kinetoplasto: kDNA
OM Diréctamente o desde cultivo… • NESTED PCR
• RT-PCR
Promastigotes en cultivo • PCR-RFLP
• (PCR+ SECUENCIACIÓN)
Leishmaniasis Tripanosomiasis americana
DIAGNÓSTICO Trypanosoma cruzi
Enfermedad de Chagas es endémica y
IMMUNOLÓGICO aparece tras muchos despues de la infeccón

INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA; mediante el empleo de anticuerpos monoclonales

(AcMo) en frotis de biopsia

ANTÍGENOS EN ORINA–MEDIANTE
ORINA– AGLUTINACIÓN EN LATEX WHO :
No deectan todas las especies de lishmania
• Sudamérica y América central.
SEROLÓGICO Útil especialmente en leishmaniasis visceral • 6-7 millones de personas infectadas.
• Miocardiopatía (y muerte)

INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA (empleando amastigotes encima del porta)

ÓWHO/CTD
TEST RÁPIDO: Inmunocromatografía _empleando el Ag recombinante
rK39ICT para el complejo L. donovani
rK39I
Fuera de las zonas endémicas. Rasi et
ELISA, empleando Ag-s recombinantes al, 2010. The lancet.

TEST DE MONTENEGRO : LEISHMANINA -HIPERSENSIBILIDAD RETARDADA http://www.thelancet.com/cms/attachment/2001010822/

En el post-kalazar 2003792859/gr2.jpg

Tripanosomiasis americana Tripanosomiasis americana

Trypanosoma cruzi Trypanosoma cruzi DEPENDIENDO DE LA FASE:
EMPLEO DE DIFERENTES
CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS
El modo de infección es la defecación que entra por picor debido a la toxicidad del parásito HERRAMIENTAS DIAGNÓSTICAS
• Mayoría ASINTOMÁTICOS
• Ciclo de vida complejo, evolución diferente dependiendo del hospedador

DX AMASTIGOTE ASEXUAL
(inmunidad) y del parásito (diferencias entre cepas de Trypanosoma cruzi).
Normalmente aparecen en corazón y
tracto digestivo
ASNTOMÁTICOS (%70) INDETERMINADA
Sangre, FASE CRÓNICA
trasplante,
congénita, En el ciclo entra en latencia
creando nidos en la musculatura
INFECCIÓN AGUDA DIAGNÓSTICO
SEXUAL
alimentos soltando amastigotes paulatinamente a sangre SINTOMÁTICOS (%30)
• APARATO DIGESTIVO CRÓNICA
AMASTIGOTE FLAGELADA intracelulares,
DX solo se reproduce en células preferiblemente musculares • CORAZÓN
• SISTEMA NERVIOSO PERIFÉRICO
FASE AGUDA
TRIPOMASTIGOTES EN SANGRE -->
DIAGNOSTICO LOS PACIENTES SE INFECTAN EN SU JUVENTUD. POSTERIORMENTE LA MAYORÍA VIVIRÁ EN LA FASE
ASINTOMÁTICA/INDETERMINADA TODA SU VIDA (%70), ), PERO EL30 %, TRAS ESTAR DURANTE 20-30 AÑOS
µwww.cdc.gov/dpdx EN LA FASE INDETERMINADA, ENTRARÁN EN LA FASE SINTOMÁTICA/CRÓNICA .
Tripanosomiasis americana Tripanosomiasis americana
Trypanosoma cruzi CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS Trypanosoma cruzi CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS

INFECCIÓN AGUDA Debe sospecharse para el diagnóstico

FASE CRÓNICA
• Limitada. 4-8 semanas. • Solo el 30 %
No siempre aparece chagoma
µwww.researchgate.com
• Chagoma en la zona del a picadura. edema e induración local • Megaesofago (reflujo gastroesofágico y disfagia) y megacolon (estreñimiento)

• Romaña: cconjuntivitis,, edema bipalpebral unilateral y linfadenitis • Miocardiopatía: insuficiencia cardiaca congestiva, arritmias, bloqueo

preauricular auriculoventricular y tromboembolismo (45.000 †s/año).

µwww.cdc.gov/dpdx
• Fiebre, linfadenopatias, hepatoesplenomegalia, diarrea, anorexia,
alteración del ritmo cardíaco. En la fase aguda

• Complicaciones: miocarditis aguda (<†3 %) y menigoecenfalitis (†50 %)

FASE INDETERMINADA (intervalo en el que la crónica no presenta síntomas)

• Asintomático
µ
• + método serológico +-parasitológico-molecular (PCR) Megaesófago
Miocardiopatía
• 20-30 años http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0100-
https://kissingbug.weebly.com/ 39842016000600358

Tripanosomiasis americana
Trypanosoma cruzi
DIAGNÓSTICO
Ó En zonas endémicas, aqui suelen estar en fase crónica

FASE AGUDA Gota gruesa, pero se recomienda en fresco para ver los tripanosomas moviendose
Tripomastigotes en sangre
En zonas endémicas normalmente, aquí muy infrecuente

Microscopio directa o empleando tinciones (thin y thick film GIEMSA 10 %) .

Se visualiza el sedimento
S: 60-70%

Strout (3ml sangre, 37°C-1h, tripomastigotes en el sobrenadante) o

microhematocrito S: 90-100 %

PCR ááS

CULTIVO: LIT, NNN (suficiente con

µcdc/dpdx
una pequeña cantidad de sangre)
 Tripanosomiasis americana
Trypanosoma cruzi
Se utiliza capilar comercial pretratado con naraja de acridina,
se quedan 3 fracciones. El material genético se tiñe con naranja DIAGNÓSTICO
Ó
de acridina y se visualiza

FASE INDETERMINADA Y CRÓNICA*:

• El diagnóstico se realiza normalmente en esta fase
• Parasitemia intermitente. Parasitos en los tejidos. AMASTIGOTES

Microscopía directa: NO

CULTIVO DE BIOPSIAS: NNN, LIT (30 ml). 27 °C. Búsqueda semanal de

EPIMASTIGOTES. ¡¡¡6 meses!!!.

XENODIAGNÓSTICO+cultivo+PCR (30 días)

MÉTODOS MOLECULARES

MÉTODOS SEROLÓGICOS *En la crónica las

características clínicas
ayudan (ECG,Rx)

Tripanosomiasis americana Tripanosomiasis americana

Trypanosoma cruzi Trypanosoma cruzi
DIAGNÓSTICO
Ó DIAGNÓSTICO
Ó

EN LA FASE INDETERMINADA Y CRÓNICA FASE INDETERMINADA Y CRÓNICA

MÉTODOS MOLECULARES MÉTODOS SEROLÓGICOS: detección de IgG

•Diagnóstico en territorio endémico
• PCR, rtPCR, comerciales Screening: donantes de sangre, donantes
•Screening:
•Sc don de órganos, en embarazadas.
• En sangre o en cultivo/triatomino
• ELISA
• DIANA: DNA del kinoteplasto (kDNA) • IF INDIRECTA
• ARCHITECT: IgG mediantee quimioluminiscencia: S: 99,8-
100; E: 96,6-99,9
FDA: donantes de sangre. þ

PROBLEMA: + DURANTE AÑOS, CON TRATAMIENTO LOS TÍTULOS BAJAN MUY

LENTAMENTE
Tripanosomiasis americana Tripanosomiasis africana
Trypanosoma cruzi Trypanosoma brucei
DIAGNÓSTICO
Ó Trypanosoma brucei gambiense,
Trypanosoma brucei rhodesiense
EN LA FASE INDETERMINADA Y CRÓNICA

MÉTODOS SEROLÓGICOS: detección de IgG (no existe un método con 100 % S)

Vector-mosca tse tse
WHO: empleo de 2 pruebas serológicas y diferentes antígenos. No aparecen en forma
redondeada, solo
En caso de discordancia: hacer una tercera prueba. flagelada
En caso de duda…repetir a los 6 meses +PCR Invade el SN

Normalmente, a los pacientes nuevos: Solo en

1. IgG Chagas _empleando África*
quimioluminiscencia-ARCHITECT 2012: 6314
2. IgG ELISA _para confirmar lo anterior casos. DX Tripomastogote
3. PCR. Control (!) Sangre o LCR

Monitorización de los pacientes

1. IgG Chagas quimioluminiscencia ARCHITECT.
2. PCR.

Tripanosomiasis africana Tripanosomiasis africana

Trypanosoma brucei Trypanosoma brucei DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO

CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS • MICROSCOPIA (pueden aparecer tripomastigotes, sin invadir células, en la

1º opción
úlcera de inoculación, sangre, glanglios linfáticos, médula osea y líquido
CHANCRO –HERIDA EN LA
PICADURA cefalorraquideo)
WINTERBOTTOM
• Examen sanguíneo: extensiones de la sangre,
e, gota gruesa, triple concentración
(en débiles parasitémias)
Fase hemolinfática
Diseminación hemolinfática: FIEBREE + LINFADENOPATÍA + PICOR • Examen de tejidos: aspirados de médula ósea y de ganglios linfáticos
No siempre aparece, puede ocurrir en otros ganglios
Trastorno del sueño • Examen del líquido cefaloraquídeo (LCR): tripomastigotes en sedimento
NSC: MENIGOENCEFALITIS, PERDIDA DE CONCIENCIA…COMA…sin tratamiento: Transferir Transferir
sobrenadante sobrenadante
Desechar
MUERTE Fase meningoencefálica
sobrenadante

T. b rhodesiense > T.b gambiense

EXTENDER EL
T. b. rhodesiense nno invade SEDIMENTO
T. b. gambiense
gam invade el
e SNC
S y
normalmente e el SNC, y Trypanosoma brucei gambiense in blood, 900x Trypanosoma brucei rhodesiense in blood, 900x.
habitualmente e es de desarrollo genera infección crónica
El sobrenadante se
rápido y mortal centrifuga 3 veces
• CULTIVO (en ratones)
Tripanosomiasis africana Filariosis linfáticas
Nematodos que se establecen en los
Trypanosoma brucei Wuchereria bancrofti, Brugia malayi, B. timori conductos linfáticos
Transmisión a través de la picadura de diferentes
Nematodos linfaticas producen filariosis mosquitos
Se inocula L3, aparecen larvas t
OTRAS METODOLOGÍAS DIAGNÓSTICAS ras la reproducción sexual A la noche
B. malayi, B.timori
• A nivel mundial hay 1
• DETECCIÓN DE ANTÍGENOS
billón de personas en
• ELISA ((en serum y en LCR) ADULTOS riesgo de padecer
filariasis. Hay 120
• CIATT - Card Indirect Agglutination Trypanosomiasis Test. (en sangre, serum o millones infectadas.
plasma)
A las noches paren las
• DETECCIÓN DE ANTICUERPOS hembras apareciendo las larvas

•CATT- Card Agglutination Trypanosomiasis Test

•ELISA

• PCR

MICROFILARIAS

Filariosis linfáticas Filariosis linfáticas

Wuchereria bancrofti, Brugia malayi, B. timori Wuchereria bancrofti, Brugia malayi, B. timori

PATOGENESIS DIAGNÓSTICO MÉTODOS PARASITOLÓGICOS

IDENTIFICACIÓN DE MICROFILARIAS
CROFILARIAS EN SANGRE TENER EN CUENTA LA
•Gusanos adultos en el sistema linfático: bloqueo. Inflamación, aumento de PERIODICIDAD!!!!
§ Extensiones de sangre o gotas gruesas (giemsa)
los conductos linfáticos W. bancrofti: DEC microfilaria
§ Técnicas de concentración más común “para que salgan a la sangre
CARACTERÍSTICAS CLÍNICAS § Filtración a través de membrana (10-15 ml sangre + EDTA)
periférica”.

POSIBLES CUADROS § Método Knott modificado (técnica que rompe los eritrocitos, y concentra los leucocitos
y las microfilarias)
1. Microfilaremia, pero ASINTOMÁTICA § Mezclar 1 ml sangre con
c 10 ml formalina ((2%) y centrifugar (500 x g, 1 min)

2. La infección comienza cuando son niños/as…cuando son ADULTOS/AS: § Desechar el sobrenadante, y extender el sedimento y teñirlo sobre un porta (giemsa, azul de
metileno) Por PCR se identifica la especie
ADENOLINFANGITIS (linfedema) con inflamación-aumento de brazo, o por observación a ojo experto Técnica
1 ml sangre Knott
pierna o genitales. Ganglios linfáticos o axilares aumentados. Elefantiasis
3. FIEBRE, SIN OTROS SÍNTOMAS 10´2000rpm
Microfilarias en sangre

Desechar el
sobrenadante. Observar
By Photo Credit: Content Providers: CDC/ OM bien lo que quede
Filariosis linfáticas
Wuchereria bancrofti, Brugia malayi, B. timori

DIAGNÓSTICO OTROS MÉTODOS DIAGNÓSTICOS

• DETECCIÓN DE ANTÍGENOS
• Wuchereria bancrofti (ICT, ELISA)

• DETECCIÓN DE ANTICUERPOS
•W. bancrofti IgG: IgG1, IgG2, IgG3,
IgG4

• mPCR EN SANGRE
• para el diagnóstico de varias
especies de filarias

CFA: Circulating filarial antigen- gold standard para

WHO