UT 2 Seguridad en El Laboratorio de Microbiología
UT 2 Seguridad en El Laboratorio de Microbiología
UT 2 Seguridad en El Laboratorio de Microbiología
Las infecciosas son aquellas “enfermedades causadas por microorganismos patógenos como
bacterias, virus, parásitos u hongos”.
Principales funciones:
1. Aislamiento, identi cación y recuento de agentes causantes de enfermedades infecciosas.
2. Determinación de la sensibilidad de los microorganismos frente a los diferentes agentes
utilizados en la práctica clínica para combatir las enfermedades infecciosas.
Seguridad en el laboratorio
El estudio de las bacterias, virus, parásitos, hongos y otros agentes infecciosos que pueden ser
patógenos para el hombre, comporta riesgos que varían según el agente infeccioso y los
procedimientos utilizados.
✓Son muy rigurosas para los agentes más peligrosos y menos exigentes para los que causan
problemas de menor entidad.
Responsabilidades:
El Jefe de Servicio o del Laboratorio. Debe supervisar y mantener actualizado el Manual de
Seguridad entregado a todos los trabajadores del laboratorio, con constancia por escrito de este
hecho.
1
fi
fi
✓Cumplir los requisitos de seguridad biológica que garanticen el buen funcionamiento y las
buenas prácticas.
✓Super cies fácilmente desinfectables.
✓ Poseer el equipamiento necesario para la realización de las diferentes tareas rutinarias.
Conceptos epidemiológicos
Prevalencia
Nº de enfermos en el periodo de tiempo estudiado
Prevalencia =
Nº de sujetos totales
Incidencia
El resultado en ambos casos se deberá multiplicar por 1.000 si se desea estimar la medida por
cada 1.000 habitantes (forma más habitual), por cien si se estima en tanto por ciento, etc. la
medida deberá ser indicada.
❖Atendiendo a los grupos de riesgo, se añadirán una serie de normas que versarán sobre su
manipulación, su equipamiento y las características del laboratorio.
❖El tamaño del laboratorio será proporcional al volumen de análisis que se realizarán en él,
así como la cantidad de personal y de servicios suministrados.
2
fi
fi
fi
fi
1 Aquél que resulta poco probable que cause una enfermedad en el hombre.
Aquél que puede causar una enfermedad en el hombre y puede suponer un peligro,
2 siendo poco probable que se propague a la colectividad y existiendo generalmente
pro laxis o tratamiento e caz.
Aquél que puede causar una enfermedad grave en el hombre y presenta un serio
3 peligro, con riesgo de que se propague a la colectividad y existiendo frente a él
generalmente pro laxis o tratamiento e caz.
Aquél que causando una enfermedad grave en el hombre supone un serio peligro para el
4 hombre, con muchas probabilidades de que se propague a la colectividad y sin que
exista generalmente frente a él pro laxis o tratamiento e caz.
Niveles de contención
Técnicas de laboratorio
Como parte de estas prácticas está el desarrollo o adopción por parte de cada laboratorio de un
manual de operaciones en el que se identi quen los riesgos que pueda sufrir el personal y que
especi que los procedimientos que puedan minimizar esos riesgos.
Equipo de seguridad
Se incluyen en este apartado tanto dispositivos o aparatos que garantizan la seguridad (por
ejemplo, las cabinas de seguridad biológica), como las prendas de protección personal
(guantes, mascarillas, batas, calzado, etc.).
La magnitud de las barreras secundarias dependerá del tipo de agente infeccioso que se
manipule en el laboratorio. Dentro de ellas se incluyen la separación de las zonas donde tiene
acceso el público, la disponibilidad de sistemas de descontaminación (autoclaves), el ltrado del
aire de salida al exterior, el ujo de aire direccional, etc.
El término "contención" se emplea para describir los métodos que hacen seguro el manejo de
materiales infecciosos en el laboratorio.
3
fi
fi
fi
fi
fl
fi
fi
fi
fi
fi
Niveles de bioseguridad biológica en el laboratorio
Nivel de bioseguridad 1
❖Es el nivel de seguridad requerido para los agentes que NO producen enfermedad en el ser
humano sano y de susceptibilidad conocida y estable a los agentes antimicrobianos.
Nivel de bioseguridad 2
✓Es el obligado para agentes del grupo 2 como algunos que, perteneciendo a la propia ora
habitual del hombre, son capaces de originar patología infecciosa humana de gravedad
moderada o limitada.
Nivel de bioseguridad 3
➢El mayor y más frecuente peligro que entrañan éstos es la infección adquirida a través de
aerosoles y por uidos biológicos.
➢Ejemplos más típicos de este tipo de microorganismos son M. tuberculosis, Brucella, Coxiella
burneti, etc. Sólo pueden ser procesados por personal cuali cado y en una zona con la
infraestructura apropiada para el Grupo 3, es decir, con aire acondicionado independiente, sin
recirculación de aire, con gradiente de presión, cabinas de bioseguridad, etc.
4
fl
fi
fl
fi
fl
✓Batas sin aperturas delanteras. La ropa será de exclusivo, control y tratamiento médico al
personal expuesto.
✓ Usar centrifugas selladas.
✓ No usar mecheros ni incineradores.
✓Todos ltros HEPA deberán ser probados y certi cados. Se descontaminarán in situ antes de
retirarlos.
✓ Doble puerta automática.
✓Todas las manipulaciones deberán llevarse a cabo en campanas de bioseguridad de clase II o
III.
✓ Plan de contingencia frente a los accidentes. En caso de que ocurran, se deberá ofrecer
evaluación, control y tratamiento médico al personal expuesto.
✓ No se permite el trabajo de forma individualizada o sin vigilancia.
✓El ujo de aire deberá estar controlado y deberán existir alarmas que noti quen fallos en su
direccionalidad.
Nivel de bioseguridad 4
➢Este nivel también puede utilizarse para trabajar con animales de experimentación infectados
por microorganismos del Grupo 4.
➢Ejemplos de este nivel son los arenavirus como el que produce la ebre de Lassa y el virus
Machupo, virus Ebola, etc. Además, deben incluirse en este nivel de contención los
microorganismos propios del grupo 3 que adquieran propiedades patógenas que los eleven al
grupo 4. Un ejemplo sería Mycobacterium bovis multirresistente que puede causar fallecimiento
por fracaso terapéutico.
✓El acceso al laboratorio estará limitado al personal autorizado. No deben entrar en el mismo
familiares, ni amigos.
✓ El personal del laboratorio debe implicarse en el cumplimiento de las normas de seguridad.
✓ Todas las áreas estarán debidamente marcadas con la señal de riesgo biológico y su nivel
de contención.
✓Las puertas y ventanas deben permanecer cerradas para mantener la adecuada contención
biológica.
5
fl
fi
fi
fi
fi
fl
fi
fi
fi
fi
fi
✓Todas las super cies de trabajo se limpiarán y desinfectarán diariamente y siempre que se
produzca un derrame.
✓Los residuos y muestras peligrosas que van a ser incinerados fuera del laboratorio deben ser
transportados en contenedores cerrados, resistentes e impermeables siguiendo las normas
especí cas para cada tipo de residuo.
✓El laboratorio debe permanecer limpio (limpiar las mesas con alcohol de 70o o fenol al 5%) y
ordenado.
✓No es aconsejable utilizar los pasillos como almacén. Siempre debe quedar un espacio libre
para poder evacuar el laboratorio en caso de emergencia.
✓La ropa protectora, fácilmente ajustable y confortable, así como guantes, gafas, etc. debe estar
disponible en todo momento.
✓Los guantes siempre serán desechados antes de salir del área de trabajo. Jamás se saldrá de la
misma con los guantes puestos, ni con ellos se cogerá el teléfono. NI NADAAAA
✓Tras quitarse los guantes, se realizará un lavado de manos.
✓Se usarán gafas protectoras y mascarillas faciales si existe riesgo de salpicaduras y/o
aerosoles.
✓Se pondrá extremo cuidado en minimizar el riesgo de autoinoculación y de generación de
aerosoles.
✓Los derrames y accidentes deben ser informados inmediatamente.
✓Está rigurosamente prohibido pipetear con la boca. Se realizará pipeteo automático con
material adecuado y cada trabajador será instruido para manejarlo correctamente.
✓En la zona de trabajo no debe colocarse material de escritorio ni libros ya que el papel
contaminado es de muy difícil esterilización.
✓No deberá usarse lentes de contacto.
✓Identi car debidamente las placas y los tubos de ensayo.
Barreras primarias
Tal y como su nombre indica, las llamadas barreras primarias son la primera línea de defensa
cuando se manipulan materiales biológicos que puedan contener agentes patógenos.
• Guantes de protección.
- Equipo de protección individual (EPI).
- Producto Sanitario (PS).
• Protección respiratoria.
- Auto ltrantes.
- Máscaras con ltros.
• Protección ocular.
- Gafas de seguridad de patilla.
- Gafas de protección cerradas.
- Cubre gafas de seguridad.
- Pantallas faciales.
6
fi
fi
fi
fl
fi
fi
fi
• Calzado de seguridad.
- Zuecos, abiertos o cerrados.
- Botas de protección.
• Ropa de trabajo y uniformes sanitarios.
- Casacas sanitarias, pantalones, pijamas, batas y buzos.
CAMPANA DE GASES:
Es un recinto ventilado que captura los humos y vapores procedentes de la manipulación de los
productos químicos en el laboratorio. No ofrece protección alguna frente a riesgos biológicos.
Gestión de residuos
La gestión de residuos debe ser considerada como una parte muy importante de la seguridad en
el Laboratorio de Microbiología. Muchos de los desechos que se generan pueden estar
contaminados por microorganismos o contener sustancias químicas tóxicas y peligrosas.
- Residuos sólidos: las formas más frecuentes de tratamiento de los residuos sólidos son la
incineración y la esterilización por autoclave.
- Ducha de emergencia.
- Extintor.
- Sellarse de emergencia.
7
fi
fl
fi
ffi
Material de laboratorio
- Ordenadores.
- Agitadores.
- Centrífugas.
- Vórtex.
- Material fungible (medios de cultivo, tubos de ensayo, asas de siembra, reactivos, etc.).
- Material para ensayos moleculares (termociclador, cubetas de electroforesis horizontal y
electroforesis de campos pulsates, etc.).
- Balanzas.
- Pipeta Pasteur.
FLAMEADO:
Consiste en exponer un objeto o parte de un material a la llama de un mechero, durante 1 minuto
o más, dependiendo del material de que se trate.
La llama tiene distintas partes, la parte central es azul (es donde se consume más oxígeno).
Pongo lo que quiero esterilizar en esa parte azul (p.e.: el asa de siembra), espero que se ponga
incandescente, dejo que se enfríe, cojo la muestra y la siembro, y vuelvo a esterilizar el asa
después de usarla.
8
fl
fi
fi
fi
INCINERACIÓN:
Consiste en destruir en hornos crematorios todo el material. Se suele usar para destruir material
de un solo uso:
1. Jeringas.
2. Pipetas.
3. Guantes.
4. Catéteres.
5. En el hospital se utiliza también para destruir partes de un cuerpo.
CALOR HÚMEDO/AUTOCLAVE:
Autoclave de valor de agua.
Externamente lleva un manómetro, que mide la presión que hay en el interior de la autoclave,
termostato y válvula de seguridad. No debe usarse si no se conoce perfectamente.
Controlar una vez al mes su capacidad de desinfección mediante esporas, no siendo su ciente el
método químico. El uso de registros de presión y temperatura de cada proceso y la instauración
de un programa de mantenimiento también puede ser una alternativa válida al control mediante
esporas. El agua debe ser cambiada regularmente.
Suele tener:
• Válvula de seguridad que se abre espontáneamente de manera que, cuando la presión interna
supera la elegida, se abre automáticamente.
• Llave de purga, que permite la salida del vapor cuando yo quiero.
• Un reloj en el exterior para seleccionar el tiempo.
• En el interior lleva una resistencia en el fondo, que se va calentado y calienta el agua (que debe
ser siempre destilada), y ésta produce vapor de agua.
• Encima de esa resistencia hay una rejilla, para evitar el contacto entre la resistencia y el cesto.
• El vapor sube por la rejilla y entra en contacto con la “carga” de la autoclave, que es lo que
quiero esterilizar.
El autoclave del hospital tiene un tiempo de secado (batas, ...); el autoclave del laboratorio de
micro no puede tener tiempo de secado, pues se usa para esterilizar medios de cultivo que
pueden ser líquidos, y no podemos secarlos.
CALOR HÚMEDO/TINDALIZACION:
Es otro método de esterilización por vapor de agua. Consiste en realizar esterilizaciones
sucesivas, y se usa en microbiología cuando existe una contaminación problema en algún
material o en la propia autoclave.
Son esterilizaciones que pueden durar hasta 3-4 días, hasta que se elimine el germen
contaminante. Teóricamente la temperatura no debe superar los 100ºC, y no se debe abrir el
autoclave.
Se usa para esterilizar material o medios de cultivo que no soporten temperaturas superiores a
los 100ºC.
Se usa muchísimo para esterilizar medios azucarados, ya que si la temperatura aumentara más
de 100ºC el azúcar se caramelizaría.
RADIACIONES IONIZANTES:
▪ Rayos UVA (es la más usada):
Más que para esterilizar, se emplean para descontaminar recintos o super cies tiene poco poder
de penetración (queda en la super cie) actúan sobre los microorganismos, impidiendo y alterando
la duplicación del ADN.
▪ Rayos Gamma:
Se usan para esterilizar sobre todo productos de un solo uso (válvulas, prótesis, jeringas,
guantes, catéteres...) y cualquier material que se altere por el calor.
10
fi
fi
fi
fi
fi
fi
fi
fi
fi
- De ujo laminar: dispositivo de ltrado donde por una parte entra el aire contaminado y sale
estéril por otra (quirófanos, unidad de quemados...) Pueden ser: HORIZONTALES O
VERTICALES.
▪ Ultrasonido:
Consiste en introducir el material en tanques de distintos tamaños que contienen agua con un
líquido o polvo soluble en agua, que son desinfectantes.
Cuando el dispositivo se pone en marcha, vibra a gran velocidad, y esta vibración produce la
destrucción de los microorganismos (instrumental de odontología, joyería).
Producen la destrucción de todos los microorganismos patógenos, pero no los sapró tos. En
este método van incluidos:
• Desinfectantes (super cies inertes).
• Antisépticos (tejidos vivos).
DESINFECTANTES:
• Detergentes catiónicos: se suelen usar diluídos al 1% producto – 99% agua: Para la
desinfección de paredes, suelos, ropa y objetos en general.
• Clorofenoles: se usan asociados a los anteriores para mejorar el grado de desinfección
• Compuestos clorados: para super cies, ropas, aseos. Se usan disueltos en agua, p.e.: lejía
• Acido fénico: Diluído al 5%, para objetos y super cies.
ANTISÉPTICOS:
• Alcoholes: etanol o alcohol etílico (metanol para desinfección de objetos).
• Derivados yodados (yoduro potásico, povidona yodada = Betadine).
• Clorhexidina.
2. GLUTARALDEHÍDO
3. VAPORES DE FORMOL
11
fl
fi
fi
fi
fi
fi
Preguntas Kahoot!
Tipo test
1. El laboratorio de microbiología clínica se encarga de …… los agentes causantes de
enfermedades infecciosas:
Aislar, identi car y realizar el recuento.
Verdadero o falso
1. En el laboratorio de microbiología, con determinar tu propia seguridad, no importa
cómo trabaja tu compañero:
Falso.