2 parcial de genética

Transcripción
El Dogma Central del Biología Molecular: al conjunto de procesos que explican la forma en que
se expresa la información genética. Este comprende los procesos de replicación, transcripción
y traducción.

• El avance en el estudio de la genética a motivado modificaciones en el dogma central para

incluir procesos como retrotranscripción o transcripción inversa y elementos replicables no
tradiciones, tales como los priones.

Tipos de ARN

ARN mensajero. Es la molécula de ARN en la cual se transcriben la información que codifica

para la síntesis de proteínas.

A través del ARN mensajero la información genética llega al ribosoma.

• ARN ribosomal. Molécula de ARN que forma parte constitutiva de los cromosomas. Ciertos
tipos de ARN ribosomal poseen función catalítica en la formación de enlaces peptídicos en la
creciente cadena de aminoácidos.

• ARN de transferencia. Estas moléculas se encargan de capturar los aminoácidos libres del
citoplasma y llevarlos al ribosoma, de acuerdo a la secuencia de nucleótidos contenida en el
mRNA.

El ribosoma eucariota y procariota

Eucariota Procariota
Subunidad menor 40s ,-33 Pro,ARNr 18s Subunidad menor 30s , 21 pro ,ARN16S
Subunidad mayor 60s, -60s Pro49 Subunidad Mayor 50s ,34 pro ARNr23s,5s
ARNr28s,5.8,5s

Ojo.

S (Svedberg) significa la medida de la velocidad de sedimentación de una molécula al ser

centrifugada 1 S = 10-13 segundos.

La transcripción

Es el proceso en el cual la información contenida en el ADN se copia en una molécula de ARN.

En este proceso interviene la holoenzima ARN polimerasa y varios tipos de ARN.

En el proceso de transcripción se distinguen tres etapas:

• Iniciación. La iniciación comprende el conjunto de pasos a través d ellos cuales la ARN

polimerasa se une al ADN.

• Enlongación. Es el proceso de crecimiento de la cadena de ARNm.

• Terminación. Consiste en el proceso mediante el cual se detiene la transcripción y se libera el
ARN polimerasa del ADN molde.

Es importante tener en cuenta

• Que no todos los genes se transcriben en todo momento. Se transcriben solo los genes que
se requieren en determinadas condiciones de crecimiento.

• La transcripción es un proceso que requiere una gran cantidad de energía, por lo tanto, es
estrictamente regulada.

• Durante la elongación de la cadena se añaden trifosfato de ribonucleótidos al 3 ́-OH de la

ribosa del nucleótido precedente. Por lo cual la dirección es en dirección 5 ́-3 ́.

La ARN polimerasa

• La ARN polimerasa es una enzima formada por dos subunidades alfa, una subunidad beta y
una beta prima y la subunidad omega. Esto se conoce como centro de la enzima.

• El polipéptido conocido como sigma factor, es el factor de transcripción que se une a la

enzima. Cuando la enzima está unido al factor de transcripción se denomina holoenzima.

La polimerasa eucariota

Las RNA polimerasas de eucariotas presentan numerosas subunidades:

Comparación RNA polimerasas eucariotas con la de E. coli.

Subunidades de las RNA polimerasas eucariotas:

1. Dos subunidades grandes similares a b y b’ de E. coli

2. Dos subunidades similares a a de E. coli
3. 5 subunidades comunes entre I, II y III pero sin homólogas
4. en E. coli
5. Subunidades adicionales distintas entre I, II y III

Factores de transcripción

• Solo cuando el factor de transcripción se une a la ARN Polimerasa, esta puede unirse al ADN
en lugares específicos denominados promotores.

• Los factores de transcripción son varios y se emplean según las condiciones de crecimiento o

estrés ambiental. El factor más común en E. coli y en la mayoría de las bacterias es el factor σ
70 que controla la transcripción de la mayoría de genes esenciales (house kiping genes).

• Sin embargo, existen otros factores de estrés ambiental como el σ s ( σ 32) el cual es el
encargado de la transcripción durante la fase estacionaria.

También existe el σ H el cual controla la transcripción de genes durante el shock de calor o

estrés térmico.

Secuencias de consenso

• Las secuencias de los promotores a los cuales se une el factor de transcripción no son
exactamente iguales, sin embargo, comparten regiones comunes en su secuencia. Estas
regiones comunes se denominan secuencia de consenso.

• Existen secuencias de consenso para para el promotor -35 y para el promotor -10. La
secuencia de consenso de los promotores -10 es TATAAT. La secuencia de consenso de la
región -35 es TTGACA.

Iniciación

• La ARN polimerasa, la enzima que sintetiza ARN, se une a regiones particulares del ADN
llamada promotores, ubicadas a una distancia de -35 y -10 bases antes de la región de inicio de
transcripción de los genes.

• En las bacterias el factor de transcripción denominado sigma factor es necesario para

reconocer al promotor y unirse a este.

• Una vez unida al promotor, la enzima ARN polimerasa separa las hebras que componen el
ADN y lo desenrolla. Luego, se mueve a lo largo de la molécula, formando un bucle a medida
que se desplaza.

• Las células bacterianas utilizan diferentes factores de transcripción y diferentes promotores

para regular la transcripción. Los factores de transcripción y los promotores se unen con
diferentes grados de fortaleza. A mayor afinidad o fuerza de unión entre un geny el factor de
transcripción usado, más frecuentemente se transcribirá este gen.

• De lo anterior se desprende que las variaciones en el factor de transcripción y en los

promotores afectan la cantidad de polipéptido producidos para un determinado gen.

Elongación de la transcripción

• A 10 nucleótidos de distancia del promotor, los trifosfatos ribonucleótidos (rATP, rUTP, rGTP,
rCTP) se aliean de manera opuesta y complementaria al ADN abierto en el bucle de
transcripción.

• La ARN polimerasa une los nucleótidos adyacentes obteniendo la energía de la escisión de

los grupos fosfatos de los precursores de los nucleótidos. No se requieren cebadores para este
proceso.

• La enzima se mueve a lo largo del ADN sintetizando o alargando la molécula de ARN mensaje
durante su desplazamiento. Muchas moléculas de ARN polimerasa pueden en secuencia
transcribir el mismo gen. De esta manera se producen múltiples transcritos del mismo gen.
ARN polimerasa Vs ADN polimerasa

1. La ARN polimerasa no necesita cebadores o primer.

2. La ARN polimerasa desenrolla por si misma el ADN, por lo cual no necesita helicasa.
3. Las ARN polimerasa transcribe solo una hebra del ADN, no ambas.
4. La ARN polimerasa es más lenta al sintetizar que la ADN polimerasa III. La ARN
polimerasa procesa solo 50 nucleótidos por segundo mientras la Pol III.
5. La ARN polimerasa incorpora ribonucloetidos en lugar de desoxiribonucleotidos.
6. La ARN polimerasa agrega un Uracilo como complemento de la Adenina, en lugar de
una Timina.
7. La función de lectura de prueba de la ARN polimerasa es menos eficiente.

Terminación de la transcripción

• Una vez que la transcripción ha iniciado esta continua a lo largo del ADN, hasta que
encuentra una señal de terminación en el ADN. Esta señal no se encuentra necesariamente al
final de un gen. Ya que en bacterias hay varios genes que se transcriben juntos. En estos casos,
la señal de terminación se encuentra al final de estos.

• Existen dos formas de terminación de la transcripción en procariotas, una en la que solo

intervienen la ARN polimerasa y el ADN denominada terminación independiente de factores.

• La otra forma de terminación requiere de sustancias que se unen al nuevo transcripto y

liberan e ARN mensajero del ADN.

Terminación independiente de factores

• La terminación independiente de factores o terminación intrínseca. Estas regiones son fáciles

de distinguir porque suelen tener secuencias muy similares en diferentes genes.

Esta sección está formada por repeticiones invertidas, al transcribir esta región la ARN
polimerasa reduce su velocidad, por lo cual en el ARN recién sintetizado se forman enlaces
entre las bases GC de la cadena simple. Este cambio conformacional provoca que la ARN
polimerasa se separe del ADN. De igual forma próxima a esta región hay una zona rica en la
base Adenina, se ha hipotetizado que la uniónA-U entre el ARN y el ADN es menos estable
favoreciendo así la separación.

Terminación dependiente de factores

• Características de la terminación dependiente de Rho.

• Rho solo termina la transcripción si el ARN no está siendo traducido.

• Rho actúa como helicasa, por lo cual es dependiente de ATP, solo está activa en presencia de
ARN.

• Rho desenreda o desenrolla la unión la hebra molde del ADN y el ARN.

• La proteína Rho se une a secciones denominadas rut en el ARNm. Luego sedesplaza en
dirección 5 ́-3 ́ a lo largo del ARNm generando un bucle y removiendo la ARN polimerasa.

ARN ribosomal

• Este ARN se encuentra ubicado en la subunidad mayor del ribosoma procariota. Posee una
actividad catalítica, es decir, constituye la enzima peptidil transferasa, que se encarga de unir
los aminoácidos dentro de la proteína en el ribosoma.

• En algunas especies el 23 S contiene intrones, los cuales son eliminados de la secuencia. Se

piensa a que esto se debe a secuencias de estos intrones pudieron ser originalmente ADN de
parásitos, los cuáles deben ser removidos. Sin embargo, a diferencia del proceso en eucariotas,
los fragmentos restantes, luego de la escisión, no vuelven a unirse, sino que son capaces de
realizar su función dentro del ribosoma, a pesar de la separación en la cadena.

Los ARNs ribosomales se copian juntos en unsolo transcrito que debe ser separado.

La transcripción el ARN

1. El segmento que contiene el 16S RNA ribosomal y el que contiene el 23S RNA
ribosomal están flanqueados por repeticiones invertidas que se aparean formando una
estructura secundaria en formad e tallo en el ARN transcrito.

2. Esta estructura en forma de tallo es reconodia y cortada por la ARNs III. Esta enzima
pertenece al grupo de las ribonucleasas, proteínas encargadas de procesar y degradar
el ARN.

Esto, más la subsecuente fragmentación genera los 16S and 23S rRNA maduros.

Maduración del ARN

• En contraste la mayoría del ARNm tiene una duración de vida promedio de 1-3 minutos. Es
decir, en este tiempo el 50 por ciento de estas moléculas ha sido degradado. Esto contrasta
con los eucariotas en los cuales la mayoría de los RNAm tienen una vida promedio de horas.

Transcripción en Archaea

• Las arqueas presentan más similitudes en su proceso de transcripción con los eucariotas que
con las bacterias. Sin embargo, el mecanismo de replicación de las arqueas es más simple.

• Tanto las secuencias de los promotores como la estructura y actividad de la RNA polimerasa
de arque recuerdan a los eucariotas. Mientras que la regulación de la transcripción es más
similar a las bacterias, quizás debido a su pequeño tamaño y a la carencia de núcleo.
Similitudes entre Archaea y Eukarya

• Las arqueas contienen una sola ARN polimerasa que es muy similar a la ARN polimerasa II de
los eucariotas. La ARN polimerasa de las

arqueas posee 8 unidades, mientras que la ARN polimerasa II de los eucariotas posee 12
unidades, en contraste con bacteria que posee 5 subunidades.

• El antibiótico rifampicina inhibe la ARN polimerasa bacteriana y no inhibe ni la eucariota, ni la

de arqueas, por ejemplo. ( La estructura de los promotores en arquea es también similar a los
eucariotas reconocidos por la ARN polimerasa II de los eucariotas).

CAJAS TATA

• Hay tres secuencias de reconocimiento principales en ambos dominios, y estas secuencias

son reconocidas por una serie de proteínas llamadas factores de transcripción que son
similares en eucariotas y arqueas.

• Las secuencias de reconocimientos más importante en estos dominios son las cajas TATA
compuesta de 6 a 8 pares de bases, localizada entre 18 y 27 nucleótidos antes del inicio de la
transcripción.

• Antes de esta se encuentra la secuencia BRE (elemento de reconocimiento B).

• A l caja TATA se une la proteína TBP y a la secuencia BRE se une la proteína TFB.

Terminación de la transcripción

• Se sabe poco de la terminación de la transcripción en arqueas. Algunos genes de arquea

tienen repeticiones invertidas al final, seguida por secuencias AT que hacen pensar en una
transcripción independiente de factores de transcripción. Otros carecen de repeticiones
invertidas, pero contienen repeticiones de T. No se han encontrado proteínas similares a Rho
en arquea hasta el momento.

Intrones en arqueas

• Al igual que en bacterias, las secuencias intercaladas en genes que codifican para proteínas
son raras en arqueas.

• Las regiones codificantes se llaman exones y las regiones no codificantes intercaladas se

denominan intrones. Llamamos transcrito primario, al ARNm que antes de eliminar los
intrones.

• Algunos genes que codifican para ARNt y ARNr en arqueas poseen intrones que deben ser
eliminados después de la transcripción para, sin embargo, su escisión no requiere un
explisosoma como en eucariotas, sino que está regulado por endonucleasas.
Mutaciones genéticas en procariotas
Una mutación es cualquier cambio que altera la información genética correspondiente a un
locus, pero que no es el resultado de la transferencia horizontal de genes.

Gen silvestre a la secuencia de un gen en bacterias aisladas de su hábitat natural.

Las mutaciones pueden tener un efecto beneficioso, tales como la resistencia a un

medicamento; o, por el contrario, tener un efecto adverso como la incapacidad para sintetizar
un aminoácido; también podrían no tener efecto alguno.

¿Cómo se clasifican las mutaciones?

Las mutaciones según su causa pueden ser espontáneas o inducidas.

Las mutaciones espontáneas: ocurren como resultado de un error del ADN

polimerasa en el proceso de incorporación de bases durante la replicación.

Las mutaciones inducidas: Son el resultado de factores químicos o físicos, tales como como la
radiación o algunas sustancias capaces de alterar la estructura tridimensional del ADN o su
secuencia.

Las mutaciones espontáneas

Estas ocurren como resultado de la tasa de error en la labor del ADN polimerasa, si bien es
cierto que la tasa de error es de 1 por 104 bases insertadas, esta puede ser incluso menor en la
realidad, debido al mecanismo de ‘lectura de prueba´, estudiado. Las mutaciones espontaneas
s pueden ser de varios tipos:

1. Mutaciones puntuales.
2. Mutaciones de pauta de lectura.
3. Grandes delecciones.
4. Inversiones.
5. Traslocaciones.
6. Duplicación Tandem.

Mutaciones puntuales

Las mutaciones puntuales son el resultado de la modificación de un par de bases. Estaspueden

ser transiciones o transversiones.

Transiciones. Una transición es el cambio de una pareja purina-primidina; por otra

pareja purina-pirimidina.

Transversiones. Una transversión supone un cambio de una pareja purina-pirimidina a una

pareja pirimidina-purina.

Esto ocurre porque se induce un error al sintetizar la nueva hebra, lo cual genera un cambio en
las generaciones siguientes.

¿Por qué ocurren las transiciones?

Algunas bases nitrogenadas pueden presentar de forma natural, un cambio en la disposiciónde

los átomos de hidrógeno en su estructura, llamada tautomerización.

Debido a que los átomos de hidrógeno son los que formaran puentes entre las bases
nitrogenadas de las cadenas complementarias, el ADN polimerasa las aparea erradamente.

Consecuencia de las mutaciones puntuales en secuencias no codificantes

Recordemos que el ADN contiene secuencias que no codifican para proteínas estas pueden
codificar para diferentes tipos de ARN o constituir secuencias de unión al ADN polimerasa u
otras proteínas regulatorias de la transcripción.

Si una mutación ocurriera en una secuencia destinada a ser reconocida por una proteína
reguladora, entonces la regulación se ve afectada, ya que la proteína no puede unirse a esta
secuencia.

Por ejemplo, si la mutación ocurre en el promotor, el gen no se transcribe. Sin embargo, si la

mutación ocurre en el operador se afecta la regulación de la transcripción del gen.

Consecuencias de las mutaciones puntuales en secuencias codificantes

Mutación silenciosa. El cambio de una base provoca que se incorpore un aminoácido con
características químicas similares y la proteína sigue siendo funcional.

Mutación sin sentido. Cuando la mutación puntual provoca que en lugar de un aminoácido se
genere un código de parada, en estos casos la síntesis de la proteína e interrumpe.

Mutaciones que alteran el sentido.

Es la mutación que cambia el código de un aminoácido por el de otro aminoácido, alterando la

secuencia de la proteína.

Estas mutaciones pueden dar origen a proteínas inestables que conserven todavía algo de la
función y que sean sensibles a cambios de pH y temperatura.
En otras ocasiones las mutaciones pueden provocar cambios en la estructura secundaria y
terciaria de la proteína afectando el plegamiento de la proteína y su función.

Mutaciones de Pauta de lectura

Las mutaciones en la pauta de lectura se deben a la inserción o deleción en un nucleótido.

La inserción o eliminación de un nucleótido cambian la forma en que se leerá todo el gen. Lo

cual cambian la estructura completa de la proteína. Estas mutaciones provocan productos no
funcionales.

Grandes deleciones

Una deleción es la eliminación de un gran número nucleótidos, de cientos a miles. Estas

deleciones se producen por la ocurrencia de bucles intracatenarios, que luego, resultan
removidos de la cadena. Esto es posible debido a la existencia de repeticiones directas en los
extremos de estos bucles, los que experimentan recombinaciones y el bucle entero se
desprende.

Estos eventos generan mutaciones irreversibles y eliminación de varios genes.

Inversiones

Cambio de orientación de un segmento de ADN. En muchos casos se deben a emparejamiento

y ulterior recombinación entre secuencias inversamente repetidas en los extremos del
material que sufre la inversión.

Consecuencias: En muchos casos no hay consecuencias fenotípicas, ya que simplemente se ha

invertido el orden de los genes del segmento invertido en relación al resto del genoma. A
diferencia de las deleciones, las inversiones suelen revertir, precisamente por un nuevo
proceso de recombinación entre las secuencias inversamente repetidas

Duplicaciones tandem

Las duplicaciones tándem consisten en la repetición de la misma secuencia del gen una detrás
de la otra. Las repeticiones tándem, por lo general se producen cuando ocurren eventos de
recombinación en el cual se inserta una copia del nuevo gen.

Se piensan que las duplicaciones tándem pudieron jugar un importante papel en la evolución
de los procariotas, tomando en cuenta que una de las copias del gen podría mutar llegando a
alcanzar una función diferente a lo del gen original.

Las repeticiones tándem suelen tener una longitud de ….bp.

Se trata de la aparición de una copia de una zona de ADN a continuación de la localización del
original. Suelen deberse al emparejamiento y recombinación entre secuencias similares en dos
moléculas de ADN (en realidad, en este evento, de las dos moléculas de ADN, una se queda
con una duplicación mientras que la otra se queda con una delección).
 Si el segmento duplicado es grande y lleva varios genes, no suele conducir a inactivación
génica (ya que, aunque en la juntura de la duplicación puede haber una mezcla de dos genes
truncados, sigue habiendo copias silvestres de dichos genes en el mutante).

Una de las propiedades más características de las duplicaciones en tándem es su inestabilidad,

ya que revierten con gran frecuencia por nueva recombinación dentro del segmento
duplicado.

Mutaciones insencionales

Las mutaciones insercionales ocurren cuando un segmento o secuencia es interrumpida por la

incorporación de otra secuencia foránea, un transposón.

Los resultados pueden variar, ya que pueden producir.

1. Desplazamiento de la pauta de lectura.

2. Terminación de la transcripción.
3. Si existen dos copias de transposón entonces, es posible que por eventos de
recombinación ocurran inversiones en las secuencias ubicadas entre estos.
4. También pueden ocurrir traslocaciones entre el material intercalado entredos
transposones.

En resumen, las mutaciones que involucran varios genes pueden ser:

Inversión

Inserción

Duplicación

Delecion

Translocación

Reversiones y supresiones de las mutaciones espontáneas

La reversibilidad de las mutaciones suele deberse a una segunda mutación que restaura el
fenotipo original.

La Supresión de una mutación ocurre cuando la 2ª mutación suprime los efectos de la 1ª pero
no restaura el genotipo original. Por lo tanto, tras la mutación supresora, la célula queda con
dos mutaciones. La supresión se clasifica a su vez en:

Supresión indirecta: no se corrige el producto del primer gen, pero la 2ª mutación anula

las consecuencias fenotípicas. Ejemplos:

Se abre una nueva vía para la síntesis del producto afectado por la 1ª mutación.
El producto mutado de la 2ª mutación puede sustituir al producto de la primera.

Supresión directa: la 2ª mutación corrige el producto del primer gen mutado. Puede ser de
dos tipos principales:

Supresión intragénica: la 2ª mutación ocurre en el mismo gen donde ocurrió primera.

Supresión intergénica extragénica: la mutación supresora afecta a otro gen, que suele ser uno
de los genes implicados en la maquinaria de traducción del ARNm: ARNt y proteínas
ribosómicas.

Agentes mutágenos y mutaciones inducidas

Son factores físicos o químicos capaces de producir mutación. Los más importante son:

1. La radiación ionizante.
2. Radiación UV.
3. Los análogos de bases.
4. Sustancias que alteran los nucleótidos.
5. Los intercaladores

La radiación ionizante

Los rayos X y los rayos Gamma son un tipo de radiación ionizante. Este tipo de radiación

recibe su nombre, ya que libera iones que interactúan con la molécula de ADN.

La radiación puede tener un efecto directo los enlaces covalentes entre la azúcar y los

grupos fosfatos en la estructura externa de la molécula causando ruptura física del cromosoma
y pérdida del control celular.

También pueden tener un efecto indirecto al generar radicales libres que provoquen daño en

la información genética al provocar mutaciones.

Radiación UV

La radiación no ionizante como la UV causa dímeros, es decir uniones covalentes entre las
bases pirimidinas adyacentes en una misma hebra o cadena, haciendo imposible la formación
de puentes de hidrógeno y provoca deformación en la doble hélice. De igual forma interfiere
en la replicación.

Estas mutaciones son reversibles, ya que la célula procariota cuenta con un sistema de
reparación ante daños por UV.

¿Cómo se repara el daño por UV?

Los dímeros producto de la UV se producen entre bases primidinas de una misma cadena, es
decir, T-T o C-T o C-C. E. coli cuenta con un sistema de reparación denominado sistema ABC al
estar compuesta por un conglomerado de proteínas, las cuales actúan como endonucleasas,
eliminando el dímero al producir la escisión del segmento dañado. Luego, la ADN polimerasa I
sintetiza los nucleótidos faltantes.
Mutágenos químicos

Existen diferentes sustancias químicas que pueden producir mutaciones, los tipos más
comunes son:

Análogos de nucleótidos. Son compuesto cuya estructura química similar a los nucleótidos.
Cuando los análogos de los nucleótidos están disponibles es posible que estos sean insertados
en la cadena en crecimiento. Este hecho puede inhibir al ADN polimerasa o de lo contrario,
producir apareamiento incorrecto.

Por ejemplo, un análogo de nucleótido es el 5´-bromouracil, el cual, al ser insertado en lugar

de la timina, se aparea con guanina en lugar que con la adenina. Resultado en una mutación
puntual.

Intercaladores

Algunos agentes químicos funcionan como intercaladores, es decir se unen al ADN

produciendo una mutación por pauta de lectura.

El compuesto bromuro de etidio utilizado comúnmente para teñir el ADN durante la

electroforesis es un potente mutágeno que causa este tipo de mutación, por lo cual su uso y
descarte es estrechamente regulado en los laboratorios de Biología Molecular. Lo mismo que
los derivados de acrilamida que también es empleado para generar mutaciones en ensayos de
laboratorio.
Transferencia Horizontal de Genes (THG)

¿Cuál es la fuente de variabilidad genética en

organismos con reproducción asexual?

Los organismos con reproducción asexual pueden tener dos fuentes de variabilidad genética,
unas de ellas son las mutaciones, transferidas verticalmente a la descendencia y otra es la
transferencia horizontal de genes.

Mientras las transferencias verticales se realizan en células de la misma especie y linaje, la

transferencia horizontal puede ocurrir entre especies.

Formas en que ocurre la transferencia horizontal de genes

La transferencia de genes entre individuos no relacionados puede ocurrir por los siguientes
medios:

Transformación. Implica la incorporación de segmentos desnudo de ADN foráneo.

Conjugación. Implica el intercambio de material genético a través de un pili, estructura

especializada para la conjugación.

Transducción. Ocurre a través de bacteriófagos los cuales se insertan en el cromosoma o en un

plásmido.

Recombinación de secuencias homologas

Decimos que dos fragmentos de ADN son homólogos si comparte una serie de bases en su
secuencia, por lo que se piensan que tienen orígenes y funciones similares.

Si un fragmento de ADN foráneo presenta regiones homologas con genes propios del aceptor,
puede recombinarse con este dando origen a variaciones o incorporaciones que favorecen la
variabilidad genética.

A través de la recombinación las bacterias pueden adquirir varias características a un tiempo y

evolucionar así más rápido que mediante mutaciones.

Transformación

En la transformación la bacteria receptora acepta moléculas desnudas de ADN que penetran

por su pared desde el medio externo.
Las células receptoras deben poseer estructuras, que permiten la adquisición de este material
foraneo.

Las células que las poseen se denominan competentes, es decir, capaces de sufrir
transformación son ejemplo de células competentes las especies de Streptococuus,
Staphylococcus, Haemophilus, Neisseriay Bacillus.

Los bacteriófagos son entes replicables que se reproducen en el interior celular. Estas
estructuras son virus compuestos por ADN o ARN y una cápside o cápsula de proteína con
forma variada.

La cápside puede ser icosaédrico (cortico virus), filamentoso (fago M13) o enforma cabeza-cola
(fago T7).

Diversidad de fagos

Los fagos son específicos, es decir afectan a especies o grupos particulares. Son mucho más
abundantes que las propias células procariotas. Se estima que por cada célula procariota en
ecosistemas Acuáticos lo podemos encontrar

Dada su capacidad para integrar material genético tanto en el cromosoma como en plásmidos,
los fagos son útiles herramientas en ingeniería genética.

En el campo de la biología molecular, la clonación de genes a través del ensamblaje de ADN ha

sido posible al combinar enzimas de restricción que las bacterias usan para cortar secuencias
específicas de ADN junto con el proceso de unir moléculas de ADN con la ADN ligasa del
bacteriófago T4.

Asimismo, las ADN polimerasas de fagos han servido para la secuenciación de moléculas de
ADN.

Otra tecnología en pleno auge para la edición genética es CRISPR-Cas (“clustered regularly
interspaced short palindromic repeats”), lal cual está basada en el mecanismo de defensa de
bacterias contra bacteriófagos.

En la industria alimentaria pueden emplearse fagos para atacar a bacterias patógenas o

capaces de estropear la calidad del producto.

Fago Utilidad
Empleado en genética como control para la
Lambda λ cuantificación de ADN
T4 y T7 Empleado en biotecnología para
producir ADN recombinante
T2 Empleado en genética
como herramienta para
inserción de genes en
E. coli
ΦH5 y ΦA72 Extracción de enzimas Endo lisinas para la
eliminación de bacterias patógenas en
la industria agroalimentaria .
Bacteriofagos como herramientas en Biotecnología

En la industria alimentaria, los bacteriófagos se han usado como agentes biosanitizantes al

matar bacterias patógenas (Campylobacter jejuni y Listeria monocytogenes) o produciendo
enzimas (depolimerasas y endolisinas) para reducir la formación de biopelículas en las
superficies de los materiales de uso industrial.

Otro enfoque ha sido la aplicación de bacteriofagos como agente biopreservante para alargar
el tiempo de vida en productos alimenticios al matar bacterias responsables en la putrefacción
de los alimentos.

En la industria láctea, los bacteriofagos pueden eliminar patógenos como Staphylococcus.

Ciclo lítico y Ciclo lisogénico

Los bacteriófagos pueden presentar dos tipos de comportamiento o ciclos. El ciclo lítico y el
ciclo lisogénico. Ambos ciclos juegan un papel en la THG en procariotas.

En la transducción son los virus bacteriofagos los que llevan un fragmento de ADN de la
bacteria donadora hasta el citoplasma de la receptora.

Esta puede ser de dos tipos:

Transducción generalizada. Cuando cualquier gen de la bacteria huésped tiene igual

probabilidad de ser transferido horizontalmente por un bacteriófago

Este proceso ocurre de la siguiente manera.

1. El fago ingresa a la célula y desarrolla ciclo lítico.

2. Detiene el proceso de replicación del ADN bacteriano y este comienza a
3. degradarse.
4. Luego, promueve el proceso de replicación de su propio ADN.
5. Finalmente se transcribe los genes de la cápside y se empaqueta el ADN del fago.
6. Al empaquetar su propio ADN en la cápside, comete errores y algunas cápsides llevan
ADN de la bacteria huésped.
7. Estas partículas pueden iniciar la infección de otra bacteria y le inyectan de forma
automática el ADN que portan.

Transducción especializada

En este tipo de transducción solo los genes próximos al punto de inserción del bacteriófago
son transferidos, por eso solo genes específicos se mueven de esta forma.

Sucede la siguiente manera:

1. Cuando un fago entra en la célula huésped y se desarrolla el ciclo lisogénico,

integrándose en regiones precisas del cromosoma.
2. Condiciones ambientales internas o externas activan el ciclo lítico del fago.
3. Se reproduce el ADN del fago y se empaqueta en las cápsides, al hacer la escisión del
cromosoma bacteriano, algunos genes próximos se empaquetan en la cápside junto
con el genoma incompleto del fago.
 4. Los fagos invaden una célula y se integran en su cromosoma llevando el genoma
propio más los genes empaquetados por error del huésped anterior.
5. Las bacterias infectadas tienen mayor probabilidad de sobrevivir, ya que la infección
no es del todo exitosa.
6. De igual forma adquiere ADN foráneo que fomenta la variabilidad genética

Los fagos dan nuevos fenotipos a las bacterias

Algunos bacteriófagos son capaces de circular e integrar su ADN en el cromosoma de la

bacteria infectada iniciando así un ciclo lisogénico, en el que no hay lisis ni se producen nuevas
partículas víricas, pero el genoma del virus se reproduce junto al de la bacteria a la que puede
proporcionan nuevos factores de virulencia.

Por ejemplo, la capacidad de sintetizar las exotoxinas en las especies Corynebacterium

diphteriae y de Streptococcus pyogenes depende de que las cepas estén infectadas por fagos
lisogénicos.

Conjugación

Para conjugar tiene que existir contacto físico entre la bacteria donadora de ADN y la
receptora.

La capacidad de donar la proporciona el poseer un plásmido conjugativo, que también se

denomina factor de fertilidad o plásmido sexual.

El episoma que hospeda al factor F puede existir como un plásmido independiente o integrarse
al genoma de la célula bacteriana. Existen diferentes nombres para los posibles estados:

Bacteria Hfr: posee un episoma F completo integrado al genoma de la bacteria.

Bacteria F+: posee un factor F como un plásmido independiente del genoma bacteriano. El
plásmido F únicamente contiene ADN del factor F.

Bacteria F' (F primo): están formadas por esciciones incorrectas del cromosoma, que resulta en
un plásmido F que contiene secuencias bacterianas próximas a donde el episoma F estaba
insertado.

Bacteria F-: bacteria que no contiene el factor F y actúa como receptor.

Conjugación bacteriana

Las bacterias que lo poseen (F+) sintetizan 2 o 3 pili con los que contactan con bacterias
receptoras y se acercan a ellas. Es importante recordar que el plásmido se replica
independiente del cromosoma bacteriano.

El ADN bicatenario que compone el plásmido se separa y la transferencia inicia a la vez, que la
síntesis de la hebra complementaria.

Entonces el plásmido F se rompe por un lugar fijo (el origen de transferencia), y una de sus
cadenas pasa a través del puente citoplásmico creado por el pili, hasta el citoplasma de la
célula receptora.
Bacteria F+

Replicación en círculos del plásmido

(Roling circle replication)

En ambos citoplasmas se van sintetizando las cadenas complementarias de forma que al final
del proceso ambas bacterias poseen un plásmido F completo. Por tanto, la conjugación
convierte a la bacteria receptora (F-) a su vez en donadora (F+).

Características del plásmido F

Es un replicón de doble cadena formado por 100 kbp (100,000 pares de bases). Fue elprimer
plásmido en ser descubierto. Posee dos orígenes de replicación.

El origen de replicación vegetativo (ori v). Promueve una replicación bidireccional (de ambas
cadenas) es el que favorece la replicación cuando no está ocurriendo conjugación. Un evento
de replicación vegetativos.

El origen de replicación T (ori T). Promueve la replicación unidireccional de una hebra durante
el proceso de conjugación.

Además, el plásmido F contiene:

1. Genes que regulan el proceso de transferencia del plásmido (Tra operon).

2. Elementos insercionales (IS) Una región denominada origen de transferencias (Región
Tra)

Los genes Hfr (High Frecuency Recombination)

El plásmido F, como otros plásmidos conjugativos, puede integrarse en el cromosoma en

forma de episoma Hfr (high frequency of recombination).

Si estando integrado se inicia un proceso de conjugación, el episoma se abre por su origen de

transferencia y comienza a pasar a través del pili sexual arrastrando a su vez los genes
cromosómicos próximos a su punto de integración.

Es frecuente que el vínculo entre ambas bacterias se rompa antes de que el plásmido haya
pasado completamente. Es por esto que la bacteria receptora no se transforma en un F+.