RED ASISTENCIAL MOQUEGUA

HOSPITAL BASE II MOQUEGUA

ESSALUD
SERVICIO DE PATOLOGÍA CLÍNICA
SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO ABO-RH EN LÁMINA

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Determinar el Grupo Globular ABO-RH en donantes y en pacientes, mediante el uso

de antisueros específicos, que actúen aglutinando las células portadoras del antígeno
respectivo. Correlación con el grupo sérico con células de tipificación conocida.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera anticoagulada y suero o plasma
MATERIALES Sueros comerciales Anti A, Anti B, Anti D monoclonal, cuyo uso será de acuerdo a las
Y EQUIPOS especificaciones del fabricante.
Glóbulos rojos A1 y B al 40% comerciales o preparados en el laboratorio
Placa de vidrio o placa escavada, pipetas Pasteur, baguetas.
PROCEDIMIENTO EN LÁMINA: FASE CELULAR
1 Rotular la placa o lámina escavada identificando la muestra
2 Colocar una gota de Anti A en un pozo
3 Colocar una gota de Anti B en un pozo
4 Colocar una gota de Anti D en un pozo
5 Agregar una gota de glóbulos rojos en estudio
6 Mezclar con la ayuda de una bagueta
7 Observar la presencia de aglutinación a partir de los 2 seg. hasta los 2 minutos
8 Leer, interpretar y registrar
PROCEDIMIENTO EN LÁMINA: FASE SÉRICA
1 Rotular la lámina
2 Colocar una gota de glóbulos rojos (GR) “A” en uno de los pozos o en la placa
3 Colocar una gota de glóbulos rojos (GR) “B” en uno de los pozos o en la placa
4 Agregar 02 gotas de suero o plasma en cada pozo de los numerales 2 y 3
5 Agregar una gota de células A2 si correspondiera a un subtipo de A
6 Mezclar con la ayuda de una bagueta
7 Observar la presencia de aglutinación a partir de los 10 seg. hasta los 2 minutos
8 Leer, interpretar y registrar
9 Comparar los resultados de la prueba con los obtenidos en la fase celular
INTERPRETACIÓN
1 La aglutinación de los GR en estudio constituyen resultados positivos
2 La resuspensión de las células constituye un resultado negativo

ADJUNTO
TABLA: TIPIFICACIÓN ABO
Prueba Celular Prueba Sérica
Glóbulos rojos desconocidos Suero Desconocido
Anti - A Anti - B Anti – AB A1 B O Interpretación
0 0 0 + + 0 O
+ 0 + 0 + 0 A
0 + + + 0 0 B
+ + + 0 0 0 AB
OBSERVACIONES
En los casos de anemia severa, realizar la corrección del Hematocrito al 50%, a fin de evitar
problemas en la determinación del factor Rh.
REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
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SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO GLOBULAR ABO-RH EN TUBO

DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO SÉRICO ABO EN TUBO
POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 02
EG05

OBJETIVO Determinar el Grupo Globular ABO-RH en donantes y en pacientes, mediante el uso

de antisueros específicos, que actúen aglutinando las células portadoras del antígeno
respectivo. Correlación con el grupo sérico con células de tipificación conocida.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera anticoagulada y suero o plasma
MATERIALES Sueros comerciales Anti A, Anti B, Anti D monoclonal, cuyo uso será de acuerdo a las
Y EQUIPOS especificaciones del fabricante.
Glóbulos rojos A1 y B al 5%
Equipos: Centrífuga de Inmunohematología, aglutinoscopio, tubos 12x75, pipetas
Pasteur, solución salina.
PROCEDIMIENTO EN TUBO: FASE CELULAR
1 Preparar una suspensión de GR en estudio al 5% en solución salina 0.9%
2 Colocar una gota de Anti A en un tubo limpio y rotulado “A”
3 Colocar una gota de Anti B en un tubo limpio y rotulado “B”
4 Colocar una gota de Anti D en un tubo limpio y rotulado “D”
5 Agregar una gota de la suspensión al 5% de glóbulos rojos en estudio, a cada tubo
6 Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones por 15 seg a 3400 rpm o
1 min a 1000 rpm.
7 Resuspender con suavidad las células y examinar macroscópicamente en busca de
aglutinación con la ayuda de un aglutinoscopio
8 Leer, interpretar y registrar
PROCEDIMIENTO EN TUBO: FASE SÉRICA
1 Rotular 02 tubos como A1 y B (si se usan GR A2 se rotula en tubo adicional)
2 Agregar dos gotas del suero en estudio a cada tubo
3 Agregar una gota de células A1 al tubo rotulado como A1, glóbulos rojos (GR) “B” en uno de
los pozos o en la placa
4 Agregar una gota de células B al tubo rotulado como B
5 Agregar una gota de células A2 al tubo rotulado como A2 si correspondiera
6 Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones por 15 seg a 3400 rpm o
1 min a 1000 rpm.
7 Resuspender con suavidad las células y examinar macroscópicamente en busca de
aglutinación y/o hemólisis con la ayuda de un aglutinoscopio. Nota: Hemólisis =4+
8 Leer, interpretar y registrar
9 Comparar los resultados de la prueba con los obtenidos en la fase celular
INTERPRETACIÓN
1 La aglutinación de los GR en estudio constituyen resultados positivos
2 La ausencia de aglutinación constituye un resultado negativo
3 La interpretación de la tipificación ABO del suero y los GR se ilustra en la tabla
4 Todas las discrepancias entre los resultados globular y sérico deben ser resueltas antes de
registrar la interpretación del tipo ABO del paciente o donante
NOTA En la fase globular ABO y RH, las reacciones positivas suelen mostrar aglutinación 3+ a 4+;
las reacciones en fase sérica son más débiles. Los GR A 2 se utilizarán si se encuentra un sub
tipo “A” que pueda desarrollar anticuerpos anti A 1.
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TÍTULO DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO GLOBULAR ABO-RH EN TUBO

DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO SÉRICO ABO EN TUBO
POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 02 de 02
EG05

ADJUNTO
TABLA: TIPIFICACIÓN ABO
Prueba Celular Prueba Sérica
Glóbulos rojos desconocidos Suero Desconocido Interpretación
Anti - A Anti - B Anti – AB A1 B O
0 0 0 + + 0 O
+ 0 + 0 + 0 A
0 + + + 0 0 B
+ + + 0 0 0 AB
REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
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SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE
TÍTULO TEST DE COMPATIBILIDAD
POE Nº 1 EG05 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01

OBJETIVO Determinar la especificidad de Anticuerpos circulantes del receptor dirigidos contra

Antígenos Hemáticos del donante.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA GR del donante y suero o plasma del receptor
MATERIALES Antiglobulina Humana IgG-C3d (Suero de Coombs Poliespecífico)
Y EQUIPOS Albúmina bovina al 22%
Equipos: Centrífuga de inmunohematología, incubadora, aglutinoscopio, tubos de 12 x
75, pipetas Pasteur.
PROCEDIMIENTO
1 Suspensión al 5% de GR en estudio en solución salina al 0.9% lavados 04 veces
2 Dispensar una gota de GR en el tubo debidamente rotulado
3 Agregar 02 gotas del suero del receptor a cada uno
4 Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones por 15 seg a 3400 rpm o
1 min a 1000 rpm.
5 Leer: Aglutinación y/o Hemólisis, resuspender completamente el botón celular y anotar
resultado
6 Agregar 02 gotas de Albúmina bovina al 22%
7 Repetir paso 4 y 5
8 Incubar a 37º por 30 minutos
9 Repetir pasos 4 y 5
10 Lavar los GR con solución salina al 0.9% 04 veces decantando totalmente en el último lavado
11 Agregar 02 gotas de Suero de Coombs
12 Repetir los pasos 4 y 5
INTERPRETACIÓN
1 La aglutinación de los GR en estudio constituyen incompatibilidad de receptor – donante
2 La resuspensión de las células constituye un resultado negativo
NOTA Todos los reactivos deben ser usados de acuerdo a las instrucciones del fabricante
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TÍTULO TIPIFICACIÓN DEL “D” DÉBIL DEL SISTEMA RH

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 02
EG05

OBJETIVO La expresión del antígeno D en el grupo delos “D débiles” está disminuido en número
de copias de antígeno D, por lo que su presencia tiene que ser demostrado mediante
la técnica de la antiglobulina. El objetivo de esta técnica es demostrar la presencia del
antígeno D.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera anticoagulada
MATERIALES Sueros comerciales Anti D policlonal o monoclonal, Suero control RH ó Albúmina 22%
Y EQUIPOS Suero de Coombs Poliespecífico IgG C3d, Células control de Coombs
Todos los reactivos deben usarse de acuerdo a las especificaciones del fabricante.
Equipos: Centrífuga de inmunohematología, aglutinoscopio, tubos de 12 x 75, pipetas
Pasteur.
PROCEDIMIENTO
1 Suspensión al 5% de GR en estudio en solución salina al 0.9%
2 Colocar una gota de Anti D en un tubo limpio y rotulado “D”
3 Colocar una gota de suero control RH ó Albúmina 22% en un tubo limpio y rotulado
“Control”
4 Agregar una gota de la suspensión al 5% de GR en estudio, a cada uno
5 Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones por 15 seg a 3400 rpm o
1 min a 1000 rpm.
6 Resuspender con suavidad las células y examinar macroscópicamente en busca de
aglutinación y/o hemólisis con la ayuda de un aglutinoscopio.
7 Leer, interpretar y registrar. Si la reacción es negativa continuar el procedimiento
8 Incubar en baño maría durante 30 minutos, luego repetir paso 5 y 6. Si es negativo continuar
9 Lavar los tubos con Sol. Salina por 04 veces decantando totalmente el último lavado
10 Agregar 02 gotas de Suero Coombs (Antiglobulina Humana) repetir paso 5 y 6
11 Comprobar con células control de Coombs
INTERPRETACIÓN
1 La aglutinación de los GR en estudio constituyen resultados positivos
2 La resuspensión de las células constituye un resultado negativo
3 La validación como RH negativo se dará si ambos tubos no aglutinan

ADJUNTO
TABLA RH NEGATIVO TÍPICO
D CONTROL RH INTERPRETACIÓ
N
Lectura inmediata 0 0 Continuar
Lectura incubación 0 0 Continuar
Lectura Suero Coombs 0 0 Continuar
Control de Coombs 1+/2+ 1+/2+ NEGATIVO
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SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO TIPIFICACIÓN DEL “D” DÉBIL DEL SISTEMA RH

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 02 de 02
EG05

TABLA RH NO DETERMINADO
D CONTROL RH INTERPRETACIÓ
N
Lectura inmediata 0 0 Continuar
Lectura incubación 0 0 Continuar
Lectura Suero Coombs 1+ 0 POSITIVO
Control de Coombs 1+/2+ POSITIVO

TABLA RH POSITIVO DÉBIL

D CONTROL RH INTERPRETACIÓN
Lectura inmediata 0 0 Negativo?
Lectura incubación 0 0 Negativo?
Lectura Suero Coombs 1+ 1+ INVÁLIDO
Control de Coombs

OBSERVACIONES
Se debe analizar un control negativo de manera simultánea (autocontrol)
REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
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SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO TEST DE COOMBS DIRECTO CUALITATIVO (POLIESPECÍFICO)

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Determinar la presencia de Anticuerpos adheridos a la membrana del hematíe.

Inducción de la aglutinación in vitro de hematíes sensibilizados ante la presencia del
reactivo de Coombs.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera anticoagulada
MATERIALES Antiglobulina humana IgG C3d (Suero de Coombs Poliespecífico)
Y EQUIPOS Todos los reactivos deben usarse de acuerdo a las especificaciones del fabricante.
Equipos: Centrífuga de inmunohematología, aglutinoscopio, tubos de 12 x 75, pipetas
Pasteur.
PROCEDIMIENTO
1 Suspensión al 5% de GR en estudio en solución salina al 0.9% lavados 04 veces
2 Agregar una gota de Suero Coombs Poliespecífico
3 Colocar una gota de suero control RH ó Albúmina 22% en un tubo limpio y rotulado
“Control”
4 Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones por 15 seg a 3400 rpm o
1 min a 1000 rpm.
5 Leer, interpretar y registrar los resultados. De salir positivo realizar la misma operación con
los sueros Monoespecíficos
INTERPRETACIÓN
1 La aglutinación de los GR en estudio constituyen resultados positivos
2 La resuspensión de las células constituye un resultado negativo
3 Los resultados positivos deben ser comprobados con las células control de Coombs. Si el
resultado es negativo la prueba es “no válida” y deberá repetirse

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
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HOSPITAL BASE II MOQUEGUA
ESSALUD
SERVICIO DE PATOLOGÍA CLÍNICA
SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO TEST DE COOMBS DIRECTO CUANTITATIVO (POLIESPECÍFICO)

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Determinar el Título de Anticuerpos adheridos a la membrana del hematíe.

ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera anticoagulada
MATERIALES Antiglobulina humana IgG C3d (Suero de Coombs Poliespecífico)
Y EQUIPOS Todos los reactivos deben usarse de acuerdo a las especificaciones del fabricante.
Equipos: Centrífuga de inmunohematología, aglutinoscopio, tubos de 12 x 75, pipetas
Pasteur, Solución Salina Fisiológica.
PROCEDIMIENTO
1 Suspensión al 5% de GR en estudio en solución salina al 0.9% lavados 04 veces en cada tubo
rotulado
2 Realizar una dilución del Suero de Coombs Poliespecífico al ½, ¼, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64,
1/128, 1/256, 1/512, 1/1024
3 Agregar una gota de Suero Coombs Poliespecífico previamente diluido a cada tubo
4 Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones por 15 seg a 3400 rpm o
1 min a 1000 rpm.
5 Leer, interpretar y registrar los resultados. De salir positivo realizar la misma operación con
los sueros Monoespecíficos
INTERPRETACIÓN
1 La aglutinación de los GR en estudio constituyen resultados positivos
2 La resuspensión de las células constituye un resultado negativo
3 Los resultados positivos deben ser comprobados con las células control de Coombs.
Si el resultado es negativo la prueba es “no válida” y deberá repetirse
NOTA La sumatoria del contaje de los puntos según la aglutinación será el score asignado

ADJUNTO
4+ 3+ 2+ 1+ ½+ 0
Puntuación 10 ptos 8 ptos 6 ptos 4 ptos 3 ptos 0

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
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SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO TEST DE COOMBS DIRECTO CUALITATIVO (MONOESPECÍFICO) ANTI IgG y/o

C3d C3b
POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Determinar la presencia de Anticuerpos adheridos a la membrana del hematíe.

ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera anti coagulada
MATERIALES Antiglobulina Monoespecífica IgG, Antiglobulina Monoespecífica C3b, C3d
Y EQUIPOS Poliespecífico)
Todos los reactivos deben usarse de acuerdo a las especificaciones del fabricante.
Equipos: Centrífuga de inmunohematología, aglutinoscopio, tubos de 12 x 75, pipetas
Pasteur.
PROCEDIMIENTO
1 Suspensión al 5% de GR en estudio en solución salina al 0.9% lavados 04 veces en cada tubo
rotulado
2 Agregar una gota de Suero Coombs Monoespecífico IgG y C3b/C3d a cada tubo
3 Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones por 15 seg a 3400 rpm o
1 min a 1000 rpm.
4 Leer, interpretar y registrar los resultados. De salir positivo realizar la misma operación con
los sueros Monoespecíficos
INTERPRETACIÓN
1 La aglutinación de los GR en estudio constituyen resultados positivos
2 La resuspensión de las células constituye un resultado negativo
3 Los resultados positivos deben ser comprobados con las células control de Coombs.
Si el resultado es negativo la prueba es “no válida” y deberá repetirse

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
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HOSPITAL BASE II MOQUEGUA
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SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO TEST DE COOMBS DIRECTO CUANTITATIVO (MONOESPECÍFICO) ANTI IgG y/o

C3d C3b
POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Determinar el Título de Anticuerpos adheridos a la membrana del hematíe.

ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera anti coagulada
MATERIALES Antiglobulina Monoespecífica IgG, Antiglobulina Monoespecífica C3d/C3b
Y EQUIPOS Todos los reactivos deben usarse de acuerdo a las especificaciones del fabricante.
Equipos: Centrífuga de inmunohematología, aglutinoscopio, tubos de 12 x 75, pipetas
Pasteur, Solución Salina Fisiológica.
PROCEDIMIENTO
1 Suspensión al 5% de GR en estudio en solución salina al 0.9% lavados 04 veces en cada tubo
rotulado
2 Realizar una dilución del Suero de Coombs al ½, ¼, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64, 1/128, 1/256,
1/512, 1/1024
3 Agregar una gota de Suero Coombs Monoespecífico previamente diluido a cada tubo
4 Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones por 15 seg a 3400 rpm o
1 min a 1000 rpm.
5 Leer, interpretar y registrar los resultados. De salir positivo realizar la misma operación con
los sueros Poliespecíficos
INTERPRETACIÓN
1 La aglutinación de los GR en estudio constituyen resultados positivos
2 La resuspensión de las células constituye un resultado negativo
3 Los resultados positivos deben ser comprobados con las células control de Coombs.
Si el resultado es negativo la prueba es “no válida” y deberá repetirse
NOTA La sumatoria del contaje de los puntos según la aglutinación será el score asignado

ADJUNTO
4+ 3+ 2+ 1+ ½+ 0
Puntuación 10 ptos 8 ptos 6 ptos 4 ptos 3 ptos 0

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
 RED ASISTENCIAL MOQUEGUA
HOSPITAL BASE II MOQUEGUA
ESSALUD
SERVICIO DE PATOLOGÍA CLÍNICA
SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO TEST DE COOMBS INDIRECTO (PANTALLA)

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Determinar la presencia de Anticuerpos circulantes dirigidos contra Antígenos

Hemáticos.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera anticoagulada y suero
MATERIALES Antiglobulina Humana IgG-C3d (Suero de Coombs Poliespecífico)
Y EQUIPOS Antiglobulina Monoespecífica IgG, Antiglobulina Monoespecífica C3d/C3d
Células detectoras de Anticuerpos de fenotipos conocidos al 3% a 5%
Albúmina bovina al 22%
Equipos: Centrífuga de inmunohematología, incubadora, aglutinoscopio, tubos de 12 x
75, pipetas Pasteur.
PROCEDIMIENTO
1 Enumera los tubos como I, II, III, según sea el caso de 2 ó 3 células
2 Dispensar una gota de GR en cada uno de los tubos debidamente rotulados
3 Agregar 02 gotas del suero problema a cada uno
4 Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones por 15 seg a 3400 rpm o
1 min a 1000 rpm.
5 Leer: Aglutinación y/o Hemólisis, resuspender completamente el botón celular y anotar
resultado
6 Agregar 02 gotas de Albúmina bovina al 22%
7 Repetir paso 4 y 5
8 Incubar a 37º por 15 minutos
9 Repetir pasos 4 y 5
10 Lavar los GR con solución salina al 0.9% 04 veces decantando totalmente en el último lavado
11 Agregar 02 gotas de Suero de Coombs Poliespecífico
12 Repetir los pasos 4 y 5
13 Agregar 01 gota de Células Control de Coombs en aquellos tubos sin aglutinación
14 Repetir pasos 4 y 5
INTERPRETACIÓN
1 La aglutinación de los GR en estudio constituyen resultados positivos
2 La resuspensión de las células constituye un resultado negativo
NOTA De ser positivo realizar Test de Coombs Indirecto Panel
Todos los reactivos deben ser usados de acuerdo a las instrucciones del fabricante

ADJUNTO
Centr. inmediata Albúmina 37ºC Coombs Contr. Coombs
Cel I
Cel II
Cel III
REFERENCIAS
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ESSALUD
SERVICIO DE PATOLOGÍA CLÍNICA
SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE
TÍTULO TEST DE COOMBS INDIRECTO (PANEL)
POE Nº 1 EG05 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01

OBJETIVO Determinar la espdecificidad de Anticuerpos circulantes dirigidos contra Antígenos Hemáticos.

ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera anticoagulada y suero
MATERIALES Antiglobulina Humana IgG-C3d (Suero de Coombs Poliespecífico)
Y EQUIPOS Antiglobulina Monoespecífica IgG, Antiglobulina Monoespecífica C3d/C3d
Células detectoras de Anticuerpos de fenotipos conocidos al 3% a 5%. Panel Celular
Albúmina bovina al 22%
Equipos: Centrífuga de inmunohematología, incubadora, aglutinoscopio, tubos de 12 x 75,
pipetas Pasteur.
PROCEDIMIENTO
1 Enumera los tubos como 1, 2, 3, 4 hasta 11, según sea el caso de 11 células o más
2 Dispensar una gota de GR en cada uno de los tubos debidamente rotulados
3 Agregar 02 gotas del suero problema a cada uno
4 Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones por 15 seg a 3400 rpm o 1 min a
1000 rpm.
5 Leer: Aglutinación y/o Hemólisis, resuspender completamente el botón celular y anotar resultado
6 Agregar 02 gotas de Albúmina bovina al 22%
7 Repetir paso 4 y 5
8 Incubar a 37º por 15 minutos
9 Repetir pasos 4 y 5
10 Lavar los GR con solución salina al 0.9% 04 veces decantando totalmente en el último lavado
11 Agregar 02 gotas de Suero de Coombs
12 Repetir los pasos 4 y 5
13 Agregar 01 gota de Células Control de Coombs
14 Repetir pasos 4 y 5
INTERPRETACIÓN
1 La aglutinación de los GR en estudio constituyen resultados positivos
2 La resuspensión de las células constituye un resultado negativo
NOTA Todos los reactivos deben ser usados de acuerdo a las instrucciones del fabricante

ADJUNTO
Centr. inmediata Albúmina 37ºC Coombs Contr. Coombs

Cel 1

Cel 2

Cel 3

Cel 4

Cel 5

Cel 6

Cel 7

Cel 8

Cel 9
 Cel 10

Cel 11

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01

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ESSALUD
SERVICIO DE PATOLOGÍA CLÍNICA
SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO PREPARACION DE CELULAS CONTROL DE COOMBS

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Uniformizar la preparación de células control de Coombs para validar el resultado de

las pruebas inmunohematologicas que requiere anti globulina humana.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II del Hospital Base II
Moquegua Essalud
MUESTRA Glóbulos rojos lavados
MATERIALES 1. Antiglobulina Humana IgG-C3d (Suero de Coombs Poliespecífico)
Y EQUIPOS 2. Reactivo anti D
3. Baño Maria
4. Centrífuga de inmunohematología
5. Tubos de vidrio de 12 x 75
6. Pipetas graduadas
7. Solución Salina Fisiológica.
8. Aglutinoscopio
PROCEDIMIENTO
1 Seleccionar de 3-5 unidades de GR de grupo O Rh positivo tomar las muestras de un
fragmento de la tubuladura colocar las muestras en un tubo y lavar 4 veces con SSF
2 Realizar en un tubo una dilución al 50 % (200 GR lavados + 200 SSF)
3 Preparar un volumen igual al obtenido de GR al 50 % del reactivo anti D diluido 1/10
4 Mezclar ambas soluciones e incubar a 37 °C durante 1 hora. Mezclando por inversión cada
15 minutos.
5 Realizar 3-4 lavados con SSF y preparar una suspensión 2-5 %.
6 Agregar una gota de Suero Coombs mezclar con suavidad y centrifugar por 15 seg a 3400
rpm o 1 min a 1000 rpm.
7 Observar, no tiene que aglutinar sola seguir lavando si aglutina.
8 Colocar 1 gota de esta + 1 gota de suero Coombs, centrifugar y observar la aglutinación debe
de ser 2+ o 3+.
9 Control positivo: 1 gota de GR + 2 gotas de suero coombs
10 Control negativo: 1 gota de GR + 2 gotas de SSF
INTERPRETACIÓN
1 Control positivo: Aglutinaciòn 2+ o 3+
Control Negativo: Aglutinaciòn: No debe Aglutinar
NOTA Almacenar por 15 dìas de 2º C a 4º C
Todos los reactivos deben ser usados de acuerdo a las instrucciones del fabricante
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SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO DETERMINACIÓN DE LA AVIDEZ

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Determinar la velocidad de fijación de un antígeno con su anticuerpo.

ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MATERIALES Sueros comerciales Anti A, Anti B, Anti AB y Lectina A1.
Hematíes O al 45%
Hematíes B al 45%
Hematíes A1 al 45%
PROCEDIMIENTO
1 Colocar en una lámina de vidrio una gota del reactivo a evaluar
2 Colocar una gota hematíes específicos a aproximadamente 1 cm del reactivo a evaluar
3 Mezclar determinando un círculo de no más de 2 cm de diámetro, accionando en forma
simultánea el cronómetro
4 Continuar la mezcla por balanceo de la lámina hasta ver aglutinación
5 Anotar el tiempo de inicio de aglutinación
INTERPRETACIÓN
Tiempo óptimo de reacción: 9 a 12 segundos ( según el reactivo)
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TÍTULO DETERMINACIÓN DE LA ESPECIFICIDAD

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Determinar la capacidad de reacción de un anticuerpo frente a sus correspondientes

determinantes antigénicos.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MATERIALES Sueros comerciales Anti A, Anti B, Anti AB y Anti D.
Hematíes A1, B y D positivo
Tubos 12 x 75 mm
Pipetas pasteur, aglutinoscopio, Baño maría, centrífuga
PROCEDIMIENTO
1 Rotular 03 series de tubos cada una como A, B y D
2 Añadir una gota de Anti A a los tubos rotulados “A” y una gota de hematíes A 1
3 Añadir una gota de Anti B a los tubos rotulados “B” y una gota de hematíes B
4 Añadir una gota de Anti D a los tubos rotulados “D” y una gota de hematíes D
5 Centrifugar a 3 500 rpm por 15 segundos o a 1 000 rpm por 1 minuto
6 Leer
INTERPRETACIÓN
Aglutinación: Reacción del anticuerpo con su antígeno específico
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TÍTULO ELUCIÓN POR CALOR

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Investigación de la enfermedad hemolítica del recién nacido por incompatibilidad

ABO.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MATERIALES Albúmina bovina al 6% (Albúmna bovina al 22% o 30% diluída con cloruro de sodio).
Tubos 13 x 100 mm
Pipetas pasteur, aglutinoscopio, centrífuga
PROCEDIMIENTO
1 Mezclar volúmenes iguales de GR concentrados y lavados con Albúmina bovina al 6%
2 Incubar por 10 minutos a 56ºC
3 Agitar periódicamente
4 Centrifugar a 1 000 rpm por 2 – 3 minutos, si es posible en centrífuga calentada
5 Transferir el sobrenadante a un tubo limpio
6 Comparar con el sobrenadante salino del lavado final de los GR concentrados
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TÍTULO ENZIMOINMUNOENSAYO PARA DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS Y/O

ANTÍGENOS ELISA
POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Método enzimoinmunoenzimático directo o indirecto tipo “sándwich” para:

Detección cualitativa de anticuerpos específicos en suero o plasma.
Detección cualitativa de antígenos circulante en suero o plasma.
Usado para determinar la presencia de los siguientes agentes infecciosos:
Virus de Inmunodeficiencia Humana (Anti-HIV), tipo 1 y 2, subtipo 0.
Virus Linfotrópico Humano tipos I y II (Anti- HTLV 1 y 2)
Virus de Hepatitis B (Anti – HB core)
Hepatitis B Antígeno de Superficie (HBsAg)
Virus de la Hepatitis C (Anti- HCV)
Enfermedad de Chagas (Anti Trypanozoma cruzi) .
Sífilis (Anti Treponema pallidum).
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo I
MUESTRA Suero o plasma
MATERIALES Kit de reactivos
Agua destilada o deionizada
Hipoclorito de sodio (lejía)
Papel absorbente
Guantes desechables
Reloj alarma o cronómetro
Láminas autoadhesivas para cubrir las policubetas
Pipetas o micropipetas, automáticas o semi automáticas, fijas o graduables
Puntas o tips para pipetas de 5 a 250 ul
Probetas graduadas
Contenedor para residuos contaminados
Crioviales y criobox o cajas con soporte para crioviales
EQUIPOS Lavador de placas de ELISA (automático, semi automático o manual)
Incubador de placas de ELISA (de 37 a 40º C)
Lector de placas de ELISA equipado con filtros 450 nm., 620 nm.
Impresora
PROCEDIMIENTO
1 Establecer cuidadosamente el plan de distribución e identificación de las muestras
2 Dejar que los reactivos y los soportes de reacción se atemperen 15º C a 30º C por un
tiempo mínimo de 30 minutos.
3 Determinar el número total de pocillos que se necesitan para el ensayo incluyendo los
controles.
4 Preparar la solución de lavado, el conjugado de trabajo y el substrato como lo describe el
 inserto
5 Dispensar diluyente de muestras y controles, reservar un pocillo para blanco si así lo
requiere el procedimiento. Ver el inserto del kit.
6 Agregar las muestras y controles de acuerdo a lo estipulado en el inserto y cubrir
7 Incubar a la temperatura y el tiempo estipulado en el protocolo de ensayo
8 Lavar de 4 a 6 veces de acuerdo a lo estipulado en el protocolo de ensayo
9 Adicionar el conjugado de acuerdo al volumen estipulado y cubrir
10 Incubar a la temperatura y el tiempo estipulado en el protocolo de ensayo
11 Lavar de 4 a 6 veces de acuerdo a lo estipulado en el protocolo de ensayo
12 Adicionar el substrato/cromógeno de acuerdo al volumen estipulado y cubrir
13 Incubar a la temperatura y el tiempo estipulado en cámara oscura
14 Adicionar reactivo de parada (stop) de la reacción enzimática
15 Obtener lecturas impresas de densidad óptica (O.D.) utilizando el lector de ELISA
16 Calcular el valor de corte o cut off
17 Interpretar los resultados de acuerdo a la validación de la prueba realizada por el
fabricante
18 Guardar las muestras positivas y débil positivo de HIV, HTLV, HCV, CHAGAS y HBsAg en
crioviales para su posterior confirmación de acuerdo a las políticas de las institución

INTERPRETACIÓN
NO REACTIVO: muestras con una lectura menor a la del valor umbral (cut off).
Indica que la muestra utilizada no contiene el antígeno y/o anticuerpo investigado hasta los límites de
sensibilidad de la prueba. Se consideran NEGATIVAS.
REACTIVO: muestras con una densidad óptica igual o mayor a la del valor umbral.
Deben volver a ensayarse por duplicado antes de proceder a su interpretación definitiva y se
consideran POSITIVAS.
ZONA GRIS: muestras con una lectura comprendida entre el 10% por encima o debajo del cut off.
Deben ensayarse por duplicado antes de interpretarlo como DÉBIL POSITIVO.

OBSERVACIONE En los métodos competitivos inversos los resultados NO REACTIVOS son mayores
S al cut off. Y las lecturas menores que cut off son REACTIVO

NOTAS Si los resultados de los controles Positivo (+) y Negativo (-) no cumplen
los criterios de validación, se invalida toda la corrida y se realiza un
nuevo ensayo.

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
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TÍTULO ENSAYO INMUNOQUIMIOLUMINISCENTE (CLIA)

PARA DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS Y/O ANTÍGENOS
POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO El ensayo es inmunoquimioluminiscente tipo “sándwich” para:

Detección cualitativa de anticuerpos específicos en suero o plasma.
Detección cualitativa de antígenos circulante en suero o plasma.
Usado para determinar la presencia de los siguientes agentes infecciosos:
Virus de Inmunodeficiencia Humana (Anti-HIV), tipo 1 y 2, subtipo 0.
Virus Linfotrópico Humano tipos I y II (Anti- HTLV 1 y 2)
Virus de Hepatitis B (Anti – HB core)
Hepatitis B Antígeno de Superficie (HBsAg)
Virus de la Hepatitis C (Anti- HCV)
Enfermedad de Chagas (Anti Trypanozoma cruzi) .
Sífilis (Anti Treponema pallidum).
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo I
MUESTRA Suero o plasma
MATERIALES Kit de reactivos
Agua destilada o deionizada
Hipoclorito de sodio (lejía)
Papel absorbente
Guantes desechables
Cubetas
Puntas o tips
Solución de lavado concentrada WASHNUF 20X
Paquete de Luminol DIA.CHEMILUX (Luminol A y B)
EQUIPOS Instrumento Dia.Pro denominado SARA
Impresora
PROCEDIMIENTO
1 Ingresar a LOGIN, digitar USUARIO Y CLAVE
2 Inicializar, activar la función Removing Cuvette y presionar el botón PLAY
3 Vaciar los desechos líquidos y sólidos
4 Preparar soluciones; Needles solution y Wash Soluction de acuerdo a las instrucciones del
fabricante
5 Abastecer al equipo de cubetas y tips (actualizar en el sistema)
6 En la pantalla principal en la sección Liquids & Supplies presionar la opción Prime Fluids
(tiempo aproximado 25 minutos)
7 Centrifugar las muestras a 3500 rpm por 10 minutos
 8 En la pantalla principal, sección Editing & Scheduling presionar la opción Samples
Manager
9 Ingresar calibradores, controles positivos y negativos (lectura de código de barras o digitar
manualmente)
10 Verificar los resultados de los calibradores y controles: Passed o No Passed
11 Ingresar las muestras (lectura de código de barras o digitar manualmente)
12 Seleccionar las pruebas a realizarse y darle PLAY en Schedule
13 Al finalizar la Rutina hacer un cleaning con agua destilada, dejar el equipo con agua

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TÍTULO DETECCIÓN DE ANTICUERPOS DE TREPONEMA PALLIDUM

MÉTODO DE FLOCULACIÓN
POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Diagnóstico presuntivo de sífilis.

FUNDAMENTO Las personas con sífilis no tratadas desarrollan anti cardiolipinas.

La prueba de Reaginina Plasmática Rápida (RPR) usa partículas de carbón
recubiertas con cardiolipina, que aglutina cuando se agrega suero con anticuerpos
específicos.
El antígeno contiene micro partículas de carbón que permite incrementar la
diferencia visual entre los resultados reactivos y no reactivos.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia
MUESTRA Suero o plasma, si no se usa en el momento debe refrigerarse a 4º C o congelar de -
20 a -70º C.
MATERIALES Kit de detección de anticuerpos anti treponema por floculación.
Puntas o tips descartables adecuados para la pipeta.
Palillos o baguetas plásticas descartables.
EQUIPOS Rotador de placas 100 rpm
Cronómetro
Pipeta automática calibrada de 50 ul
PROCEDIMIENTO
1 Dispensar 50 ul de la muestra dentro del círculo de la tarjeta.
2 Incluir paralelamente un control negativo y uno positivo en los círculos respectivos.
3 Distribuir la muestra en toda el área del círculo de la tarjeta con la ayuda de la bagueta.
4 Mezclar por inversión el reactivo del RPR
5 Dejar caer una gota del reactivo en forma perpendicular
6 Rotar las tarjetas a 100 rpm por 8 minutos en el rotador mecánico
7 Leer inmediatamente los resultados macroscópicamente con buena luz

INTERPRETACIÓN
MUESTRA NO REACTIVA: si es homogénea y no se visualizan flóculos.
MUESTRA REACTIVA: si forma grandes flóculos en el centro o la periferie.
MUESTRA DÉBIL REACTIVA: si forma pequeños flóculos en el centro o la periferie.
REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01

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TÍTULO TPHA – SÍFILIS

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Es un test de hemaglutinación pasiva para la detección de antisueros específicos

anti Treponema pallidum en suero o plasma humano.
FUNDAMENTO Los hematíes de pollo estabilizados se sensibilizan con un extracto antigénico de
Treponema pallidum (cepa Nichols). Estos hematíes aglutinarán con los anticuerpos
específicos presentes en el suero o plasma de pacientes afectos de sífilis.
Los anticuerpos del grupo Treponema no específicos de la sífilis se absorben con un
extracto de Treponema reiter incluido en la solución diluyente.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia
MUESTRA Suero: usar suero fresco. Los sueros pueden ser conservados durante 5 días entre 2
y 8º C. si es por un periodo más largo los sueros deben ser congelados a -20º C.
Plasma: aunque el suero es la muestra de elección para todos los test de sífilis,
pueden utilizarse muestras de plasma EDTA para screening en bancos de sangre.
Otros anticoagulantes deben ser comprobados antes de utilizarse. Es conveniente
realizar el test antes de transcurridas 48 horas de la extracción.
MATERIALES Reactivo antígeno:
Suspensión de hematíes de pollo sensibilizados. Listo para su uso.
Reactivo control:
Suspensión de hematíes de pollo no sensibilizados. Listo para su uso.
Solución diluyente:
Tampón fosfato salino que contiene componentes solubles de T. reiter y agentes
estabilizadores.
Control positivo:
Suero de conejo inmune pre diluido a 1:20. Ver el título exacto en la etiqueta del
vial. Se acepta una variación de título de +/- una dilución doble.
Control negativo:
Suero de conejo no inmune pre diluido 1:20
EQUIPOS Visor de iluminación indirecta (aglutinoscopio).
Placas de micro titulación con fondo en U (redondo).
Pipetas automáticas
PROCEDIMIENTO
1 Dejar que los reactivos alcancen temperatura ambiente.
2 Distribuir 25 ul de la muestra en el pocillo 1, 100 ul en el pocillo 2 y 25 ul en cada uno de
 los pocillos 3 y 4.
3 Añadir 25 ul de la muestra en el pocillo 1. Mezclar el contenido del pocillo 1 y transferir 25
ul al pocillo 2.
4 Mezclar y transferir 25 ul del pocillo 2 al pocillo 3, mezclar y desechar 25 ul del pocillo 3.
Transferir otros 25 ul del pocillo 2 al pocillo 4, mezclar y desechar 25 ul del pocillo 4.
5 Añadir 75 ul de reactivo control al pocillo 3 y 75 ul de reactivo antígeno al pocillo 4.
6 Mezclar el contenido de los pocillos dando ligeros golpes en los lados de la placa o utilizar
un agitador de placas durante 30 segundos.
7 Cubrir la placa e incubar durante 45-60 minutos a temperatura ambiente.
Evitar cualquier movimiento de la placa y mantener lejos de cualquier fuente de calor.
8 Leer los resultados:
4+ Tapiz homogéneo de células aglutinadas que cubre el fondo del pocillo, a veces con
bordes irregulares.
3+: tapiz homogéneo de células aglutinadas que cubre parcialmente el fondo del pocillo.
2+: tapiz homogéneo de células aglutinadas rodeado por un anillo de hematíes.
1+: tapiz homogéneo d células aglutinadas rodeadas por un patente anillo de hematíes.
½+: botón de hematíes con una pequeña abertura central.
-: botón de hematíes con una muy pequeña abertura central o botón totalmente
compacto.
Positivo: desde 4+ a 1+
Dudoso: ½ +
Negativo: -

INTERPRETACIÓN
La reacción es considerada REACTIVA cundo forma una malla o red (aglutinación).
La reacción es considerada NO REACTIVA cuando los hematíes se depositan en el fondo de la placa
formando un botón.

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
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SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO HEMAGLUTINACIÓN INDIRECTA CHAGAS - HAI

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Inmunoserología. Detección de anticuerpos totales contra antígenos de

Tripanosoma cruzi (enfermedad de Chagas) por Hemaglutinación Indirecta.
FUNDAMENTO El reactivo consiste en una suspensión de GR sensibilizados con antígenos
citoplasmáticos de Tripanosoma cruzi. Estos hematíes reaccionan con los
anticuerpos específicos presentes en el suero del paciente, formando una malla
homogénea en la policubeta (muestra reactiva) o un botón nítido, en el fondo de la
policubeta, lo que indica ausencia de anticuerpos específicos (muestra no reactiva).
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia
MUESTRA Suero.
MATERIALES Reactivos de Hemaglutinación indirecta.
Placas de micro titulación con fondo en “U”.
Tips para pipetas automáticas.
Lámina adhesiva transparente.
EQUIPOS Visor de iluminación indirecta (aglutinoscopio).
Pipeta automática calibrada de 50 ul
PROCEDIMIENTO
1 Dejar que los reactivos alcancen la temperatura ambiente.
2 Resuspender el reactivo antígeno y reactivo control realizando movimientos giratorios
suaves por lo menos 2 minutos.
3 Distribuir 25 ul de buffer diluyente en el pocillo 1, 25 ul en el pocillo 2 y 25 ul en los
pocillos 3, 4 y 5.
4 Añadir 25 ul de la muestra en el pocillo 1. Mezclar el contenido del pocillo 1 y trnasferir 25
ul al pocillo 2. Mezclar y transferir 25 ul del pocillo 2 al pocillo 3, de este 25 ul al pocillo 4,
de este 25 ul al pocillo 5. Mezclar y desechar 25 ul del pocillo 5, obteniendo diluciones
sucesivas ½. ¼, 1/8, 1/16, 1/32.
5 Añadir 75 ul de reactivo control al pocillo 1
6 Añadir 75 ul de reactivo antígeno de los pocillos 2 al 5
7 Mezclar el contenido de los pocillos dando ligeros golpes en los lados de la policubeta o
utilizar un agitador de placas durante 3 segundos.
8 Cubrir la placa con una lámina adhesiva
9 Dejar la policubeta en reposo a Tº ambiente por una hora al resguardo de vibraciones.
10 Efectuar la lectura
 INTERPRETACIÓN
NO REACTIVA: formación de un botón nítido en el fondo de los pocillo 2 al 5.
REACTIVA: formación de una malla homogénea que cubre el fondo que puede ser de 1+ a 4+ hasta el
pocillo 5.
Sólo se consideran POSITIVAS las muestras que reaccionan hasta 1/32.
Las muestras que reaccionan sólo hasta 1/4, 1/8 o 1/16 se consideran NEGATIVAS.
El pocillo 1 es para detectar anticuerpos heterófilos, si es Positivo inválida la positividad de la muestra
y tiene que ser analizado por otra metodología.

OBSERVACIONES
Para cada test se necesitan 5 pocillos, uno de los cuales se utilizarán para el control de anticuerpos
heterófilos.

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01

HOSPITAL BASE II PRUEBAS RÁPIDAS FECHA: 02-13-2016

MOQUEGUA ESSALUD TEST PACK
MOQUEGUA PÁGINA 1

OBJETIVO Ensayo inmunocromatográfico para la detección cualitativa de antígeno y/o

anticuerpos de HIV 1-2, HBsAg
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia, Banco de Sangre
MUESTRA Suero, plasma, o sangre obtenida con EDTA.
MATERIALES Tarjetas de ensayo o tiras inmunocromatográficas que trae el kit.
EQUIPOS Frasco de tampón de arrastre que trae el kit.
Pipeta de precisión para 50 ul.
Tips o puntas descartables para la pipeta.
PROCEDIMIENTO
1 Retire adecuadamente la envoltura de protección de las tarjetas. Ver insertos.
2 Rotule adecuadamente cada tarjeta de ensayo. Incluya 1 CN y 1 CP
3 Para muestras de suero o plasma:
a. Añada 50 ul de muestra (con una pipeta de precisión) en la superficie absorbente
(señalada con una flecha).
b. Espere un mínimo de 15 minutos y máximo de 60 minutos para leer el resultado.
4 Para muestras de sangre (venopuntura):
a. Añada 50 ul de muestra (con una pipeta de precisión) en la superficie absorbente
(señalada con una flecha).
b. Espere un minuto y añada una gota de tampón de arrastre en la superficie
absorbente.
c. Espere un mínimo de 15 minutos y máximo de 60 minutos para leer el resultado.
5 Leer el resultado. Ver anexos.

INTERPRETACIÓN
MUESTRA REACTIVA: tanto en la ventana de control como en la ventana de resultados del paciente
aparece una banda roja. Cualquier tipo de tonalidad roja que pueda aparecer en la ventana de
resultados del paciente implica que el resultado es reactivo (2 barras).
MUESTRA NO REACTIVA: en la ventana de control aparece una barra roja y en la ventana de
resultado del paciente no aparece ninguna barra roja (1 barra).
INVÁLIDO: no aparece ninguna barra en la ventana de control del ensayo (0 barras). El ensayo se
 debe repetir.

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01

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SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO PRUEBAS CON METODOLOGÍA LÁTEX

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

PROPÓSITO Suspensión de partículas de látex sensibilizadas con antígenos o anticuerpos para la

detección de Anti Tripanosoma cruzi o Antígeno de superficie de hepatitis B, basado
en una reacción de aglutinación.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia. Bancos de Sangre
MUESTRA Suero.
MATERIALES Goteros descartables o micropipetas de 50 ul.
Palillos o baguetas descartables.
Placas de vidrio fondo negro incluidas en el kit.
Reactivo antígeno látex 1% incluido en el kit.
Solución de fluorescencia de contraste incluido en el kit.
Control positivo y Control negativo incluido en el kit.
EQUIPOS Rotador automático.
Cronómetro de reloj.
Lámpara o fuente de luz.
PROCEDIMIENTO
1 Llevar los reactivos a temperatura ambiente.
2 Diseñar el protocolo de trabajo y rotular las láminas de vidrio.
3 Dispensar una gota (50 ul) de muestras y controles en los circuitos correspondientes.
4 Añadir una gota (25 ul) de reactivo contraste.
5 Rotar la lámina manualmente para que se mezclen.
6 Agitar el reactivo látex, sin formar espuma, por 30 segundos antes de usar.
7 Dispensar una gota (25 ul) del reactivo látex a cada muestra y controles.
8 Mezclar con el palillo o bagueta por 5 segundos hasta obtener una suspensión uniforme.
9 Colocar las placas en el rotador por 5 minutos.
10 Leer los resultados macroscópicamente bajo una fuente de luz.

INTERPRETACIÓN
NO REACTIVA: suspensión que se mantiene homogénea.
REACTIVA: aglutinación visible, débil o intensa comparada con el control negativo.

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01

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TÍTULO TÉCNICA DE PREPARACIÓN DE ZONA DE VENOPUNTURA

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Asepsia de la zona de venopuntura

ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo I, Campañas de
donación
FUNDAMENTO Los compuestos iodados son usados para desinfectar el sitio de unción previo a la
recolección de sangre
MATERIALES Y Solución antiséptica acuosa al 0.7% del compuesto iodado
EQUIPOS Solución de yodo povidona al 10%
Gasa estéril
Ligadura para torniquete
PROCEDIMIENTO
1 Aplicar un torniquete en el brazo
2 Identificar la zona de punción
3 Liberar el torniquete
4 Limpiar con solución acuosa de yodo al 0.7% el área tomando hasta 4 cm alrededor de la
misma durante por lo menos 30 segundos
5 Retirar el exceso de espuma
6 Aplicar la solución de yodo al 10% y limpiar con movimientos concéntricos hacia afuera
por 30 segundos
7 Cubrir el área con gasa estéril

NOTAS No tocar nuevamente el área después de terminado el procedimiento

En caso de hipersensibilidad al yodo se puede usar clorhexidina
REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
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TÍTULO TÉCNICA DE FLEBOTOMÍA

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Extraer un volumen de sangre en condiciones de asepsia, que garantice componentes

adecuados y no represente peligro para la salud del donante
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia , Campañas de Donación
MUESTRA Sangre venosa
MATERIALES Camillas o sillones reclinables
Y EQUIPOS Tubos para muestras para estudios inmunoserológicos e inmunohematológicos. Clips
y selladores manuales.
Tijeras
Pinzas hemostáticas
Bolsas colectoras
Sistema de contrapeso para controlar el volumen de sangre extraída
PROCEDIMIENTO
1 Ubicar al donante en posición semi sentada o en decúbito dorsal
2 Codificar la bolsa principal, bolsas satélites y tubos para muestras
3 Ubicar la bolsa por debajo del nivel del brazo del donante
4 Hacer un nudo flojo en la tubuladura en caso de no usar clips y selladores manuales
5 Colocar la pinza hemostática en la tubuladura antes de destapar la aguja para prevenir el
ingreso de aire.
6 Elegir una vena de fácil acceso y visible
7 Realizar la asepsia de piel
8 Punzar la piel con la guja en ángulo de 45º, luego disminuir 10º de inclinación y atravesar la
vena.
9 Liberar la pinza de la tubuladura
10 Fijar la aguja y la parte inicial de la tubuladura
11 Mantener al donante abriendo y cerrando la mano lentamente
12 Observar al donante durante todo el proceso
13 Mezcal la sangre y anticoagulante suavemente cada minuto durante el proceso.
Puede ser a mano o con mezclador mecánico continuo
14 Controlar el volumen extraído, programando un volumen total no menor de 400 cc ni mayor de
500 cc.
Idealmente no extraer más del 10% del volumen sanguíneo total y en ningún caso más del 13%.
El proceso de extracción de sangre no será mayor de 12 minutos
15 Mezclar por inversión la sangre de la tubuladura con el anticoagulante
16 Llenar nuevamente la tubuladura
17 Sellar la tubuladura y dejar algunos segmentos adicionales para las pruebas de compatibilidad
18 Remitir la unidad a la sala de separación de componentes sanguíneos
19 Remitir las muestras al laboratorio de compatibilidad para el estudio de grupos sanguíneos y
otras pruebas que sean necesarias
 9 Comparar los resultados de la prueba con los obtenidos en la fase celular
NO Al concluir la extracción, el donante reposará durante 20 minutos
TA
REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01

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SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO PREPARACIÓN DE COMPONENTES SANGUÍNEOS

PAQUETE GLOBULAR
POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Optimizar el uso de la sangre en beneficio de un mayor número de personas.

Asegurar la sobrevida con un mayor tiempo y un adecuado funcionamiento de los GR
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera extraída en bolsas múltiples o en sistema automatizado
MATERIALES Bolsas de extracción
Y EQUIPOS Centrífuga refrigerada
Balanza de platillos
Extractor de plasma
Pinzas, tijeras
Sellador eléctrico de grapas o mecánico
PROCEDIMIENTO
1 Centrifugar la sangre usando centrifugación pesada a 4ºC. Ver Anexo 01
2 Colocar la bolsa de sangre centrifugada en el extractor de plasma o en el equipo de
separación automatizado.
3 Liberar suavemente el mecanismo de extracción del extractor
4 Cerrar con una pinza hemostática la tubuladura que comunica ambas bolsas
5 Romper el sellado de la bolsa primaria, retirar la pinza y dejar fluir el plasma en la bolsa
satélite (remover 225 a 250 ml de plasma) quedando un paquete de células con un
hematocrito del 70 a 80%
6 Pinzar nuevamente el tubo de comunicación, sellar en dos sitios mediante grapas de metal o
con el sellador eléctrico y separar las bolsas
7 Identificar la unidad de paquete globular y la del plasma con el sistema de codificación
establecido
8 Conservar el paquete globular entre 2 a 8 º C
NOTA De no contar con grapas, sellar aplicando nudos ajustados

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
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SERVICIO DE PATOLOGÍA CLÍNICA
SECCIÓN DE BANCO DE SANGRE

TÍTULO PREPARACIÓN DE COMPONENTES SANGUÍNEOS

PLASMA FRESCO CONGELADO
POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Obtener un producto que conserve la actividad de los factores lábiles de la

coagulación.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera recién extraída en bolsas múltiples en circuito cerrado.
MATERIALES Congeladora a -20 º C
Y EQUIPOS Centrífuga refrigerada
Balanza
Separador de plasma
Pinzas, tijeras y clips
Sellador eléctrico o manual
PROCEDIMIENTO
1 Centrifugar la sangre colectada entre 1 y 6 º C.
2 Transferir a la bolsa satélite 250 ml de plasma
3 Sellar el tubo de transferencia en tres segmentos dejando un espacio antes de llegar a la
base de la bolsa.
4 Identificar la unidad de plasma indicando: volumen, grupo y factor RH, fecha de extracción y
fecha de expiración y sello nacional de calidad.
5 Cortar el tubo de transferencia entre dos fragmentos de la tubuladura sellada.
6 Enrollar la tubuladura segmentada y fijarla a la unidad de plasma. Esta tubuladura puede ser
útil para posteriores controles que se deseen practicar.
7 Congelar inmediatamente a -20 º C asegurándose que la congelación se produzca dentro de
las seis horas de extraída la sangre.
NOTA Mantenido a la temperatura indicada puede ser almacenada por un año.

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
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TÍTULO PREPARACIÓN DE COMPONENTES SANGUÍNEOS

CONCENTRADO PLAQUETARIO
POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Optimizar el uso de la sangre y mantener un depósito suficiente de plaquetas para

cubrir demandas.
Mantener la actividad hemostática evaluada al tiempo máximo de almacenamiento.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera recolectada en bolsas múltiples (dobles, triples, cuádruples).
MATERIALES Centrífuga refrigerada
Y EQUIPOS Balanza
Extractor de plasma
Sistema automático de separación (opcional).
Pinzas hemostáticas, tijeras.
Sellador eléctrico de grapas o manual.
Rotador de plaquetas.
PROCEDIMIENTO
1 Centrifugar la sangre usando centrifugación liviana a 20 º C. Ver Anexo 01
2 Colocar la bolsa en el extractor de plasma y separar el plasma rico en plaquetas en la bolsa
satélite, sellar la tubuladura y almacenar los GR.
3 Centrifugar el plasma rico en plaquetas por centrifugación pesada a 20 º C
4 Colocar la bolsa centrifugada en el extractor de plasma y transferir el plasma sobrenadante
a la segunda bolsa satélite, deje un volumen no menor de 50 ml.
5 Identificar el producto con su respectivo código, grupo sanguíneo, fecha de preparación y
vencimiento y sello nacional de calidad.
6 Dejar el concentrado de plaquetas sobre la mesa de trabajo (20 a 24 º C) por una hora para
que desagregue espontáneamente, no agitarlas porque puede ocurrir agregación
irreversible.
7 Colocar la unidad de plaquetas obtenida en un agitador con rotación suave y constante para
así evitar su agregación y el acortamiento de su viabilidad.
NOTA Realizar la separación dentro de las 8 horas de la flebotomía.
No refrigerar la sangre ni antes ni durante la separación de las plaquetas.
Congelar el plasma sobrenadante rápidamente a -18 º C o menos.

REFERENCIAS
GUIA DE PROCEDIMIENTO OPERATIVOS ESTANDAR NT Nº014 – MINSA/DGSP – V.01
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TÍTULO PREPARACIÓN DE COMPONENTES SANGUÍNEOS

CRIOPRECIPITADO
POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Mantener un stock para el tratamiento de pacientes con deficiencia de Factor VIII
(Von Willebrand) y fibrinógeno.
Contar con factores de coagulación suficiente para tratamientos sin riesgos de
sobrecarga de volumen.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia y Banco de Sangre Tipo II
MUESTRA Sangre entera recién extraída en bolsas múltiples (triples, cuádruples).
MATERIALES Equipos de congelación.
Y EQUIPOS Hielo seco o baño de etanol al 95% con hielo seco triturado (Si no hay congelador).
Centrífuga refrigerada
Balanza
Extractor de plasma
Pinzas, tijeras y clips.
Sellador eléctrico de grapas o manual.
PROCEDIMIENTO
1 Colectar la sangre en un sistema de bolsas múltiples.
2 Centrifugar la sangre a alta velocidad a temperatura 1 a 6 º C.
3 Transferir el plasma pasándolo a una de las bolsas satélites en volumen no menor a 200 ml,
sellar el tubo, separar los GR y refrigerarlos entre 2 y 8 º C.
4 Congelar el plasma rápidamente, el proceso de congelado completo no debe ser mayor a 6
horas. Puede utilizarse un congelador (-65 º C) o una mezcla de etanol y hielo seco.
5 Descongelar lentamente el plasma fresco entre 2 y 8 º C en un período de 12 horas.
6 Centrifugar el plasma descongelado entre 2 y 8 º C a alta velocidad. Ver Anexo 01.
7 Colgar la bolsa de plasma invertida y pasar el sobrenadante rápidamente a otra bolsa
satélite o usar el extractor de plasma, dejando 15 a 20 ml de sobrenadante para re
suspender el crioprecipitado.
8 Identificar y guardar el plasma residual a -20 º C y el crioprecipitado a -30 º C o menos.
NOTA Duración 12 meses a partir de la fecha de preparación de plasma fresco congelado.
En lugares donde la temperatura ambiental sea menor de los 15 º C se sugiere que el
descongelamiento del plasma fresco de 2 a 8 º C se realice utilizando un recipiente que
contenga agua destilada en cantidad suficiente que cubra la base de las bolsas de
crioprecipitado.

REFERENCIAS
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TÍTULO PRUEBAS DE EVALUACIÓN EXTERNA DEL DESEMPEÑO (PROFICIENCIA)

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

OBJETIVO Participación de los Centros de Hemoterapia en el Programa de Evaluación Externa del

Desempeño (PEVED).
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia
PROCEDIMIENTO
1 Las muestras de los estudios de proficiencia deben ser manejadas de la misma manera que
las muestras de rutina. El responsable del Centro de Hemoterapia asignará las muestras de
tal manera que sean procesadas rotativamente entre todos los tecnólogos de ser posible.
2 Si la evaluación para el tipo de sangre se realiza en microplaca, manejarla como una muestra
de donante, con la posterior tipificación por parte de otro tecnólogo en la etapa de re
chequeo.
3 Si la evaluación para el tipo de sangre se realiza en tubo, manejarla como una muestra de
paciente, con todas las muestras nuevas que tendrán el re chequeo posterior por parte de
otro tecnólogo. Si las pruebas directa e inversa muestran discrepancias, seguir el
procedimiento pertinente.
4 Para las pruebas de ELISA, todas las muestras inicialmente reactivas deberán ser repetidas
en duplicado. A las pruebas de RPR reactivas se les practicará la prueba cuantitativa.
5 Se consultará con el responsable del Centro de Hemoterapia como cuando se realizan las
pruebas en las muestras de donantes o pacientes.
6 Se anotarán los resultados en los registros convencionales del servicio, y de allí se
transferirán a los formatos del programa de evaluación externa del desempeño.

REFERENCIAS
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TÍTULO SUERO DE CONTROL INTERNO

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

PROPÓSITO Evaluar la reproductibilidad de un resultado positivo débil con un mismo reactivo y

analizar las variaciones que se presentan entre los diferentes lotes.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia
MUESTRA Sueros fuertemente reactivos para HIV, HTLV, HBsAg, HB core, HCV, Chagas y Sífilis.
Pool de sueros completamente negativos a estos agentes infecciosos, que no estén
lipémicos y que hayan sido extraídos en vacutainer.
MATERIALES Tips o puntas descartables para pipeta.
Y EQUIPOS Pipetas de 200 – 1000 ul.
Viales de vidrio con tapa o crioviales de 10 ml.
Conservante Bronidox-L.
Refrigerador.
PROCEDIMIENTO
1 Diluir las muestras de HIV, HCV y Chagas 1:2 y 1:4 con el pool de sueros negativos.
2 Diluir las muestras de HTLV, Sífilis, HBsAg, HB core, 1:5 y 1:10 con el pool de sueros
negativos.
3 Colocar los viales con tapa debidamente rotulados incluyendo número o código, marcador y
dilución.
4 Adicionar un conservante para una concentración final de 0.05%.
5 Realizar los ensayos de ELISA para todos los marcadores a todas las diluciones.
6 Escoger las diluciones que representen dos o tres veces el cut-off
7 Agregar suero positivo o suero negativo a los marcadores que no consiguieron la
concentración adecuada y volver probar.
8 Guardar los viales en refrigeración, 2 a 6 º C evitando el congelamiento y descongelamiento
sucesivo.
9 Alicuotar en crioviales de 1 ml para usarlos diariamente en la rutina.
10 Colocar el control interno en todos los ensayos luego de los controles del kit.

REPORTES
Anotar diariamente el índice de cut-off del control interno y vaciar los resultados en el gráfico de
Levey-Jennings.
Estudiar los datos obtenidos cada 20 o 30 determinaciones y calcular la media y la desviación
estándar del índice del cut-off.

REGISTROS
Construir el gráfico de Levey-Jennings
El 0 % de los puntos debe de estar dentro de +/- 2 desviaciones estándar.
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TÍTULO CONTROL DE CALIDAD DEL CRIOPRECIPITADO

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

PROPÓSITO La unidad promedio de crioprecipitado debe contener 250 mg de fibrinógeno y un

mínimo de 80 UI de Factor VIII.
En el Centro de Hemoterapia la comprobación de la recuperación del Factor VIII debe
ser realizada en por lo menos 04 unidades de crioprecipitado al mes.
Estos exámenes deben ser realizados en el laboratorio de coagulación, mediante el
método establecido para las rutinas de evaluación del concentrado del Factor VIII.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia
MATERIALES Unidades de crioprecipitado.
Insumos del laboratorio de coagulación para determinación de fibrinógeno y Factor
VIII.
PROCEDIMIENTO
1 Seleccionar las unidades de crioprecipitado y retirarlas del congelador
2 Colocarlas en una bolsa plástica y llevarlas al baño maría por 15 20 minutos.
3 Registrar los datos y numeración de las unidades de crioprecipitado, incluyendo su peso,
pruebas solicitadas al laboratorio de coagulación y el nombre del solicitante.
4 Preparar diluciones de cada unidad en el laboratorio de coagulación, antes de realizar las
pruebas y determinar la actividad del Factor VIII, convirtiéndolo luego a UI.
5 Determinar también los valores de fibrinógeno.
INTERPRETACIÓN
A Se debe obtener un mínimo de 80 UI de Factor VIII en cada unidad de crioprecipitado, en
por lo menos el 75 % de las unidades evaluadas.
B Los niveles de fibrinógeno deben ir de 100-350 mg por cada unidad de crioprecipitado.
Esta evaluación se recomienda cuando el crioprecipitado es usado para reemplazar
deficiencias de fibrinógeno.
C Esta evaluación sirve como un control de calidad de los métodos de colección,
procesamiento y almacenamiento del crioprecipitado.
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TÍTULO CONTROL DE CALIDAD DE UNIDADES TRANSPORTADAS

POE Nº 1 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01
EG05

PROPÓSITO Contar con u mecanismo de monitorizar la temperatura durante el transporte de

sangre en distancias medias y largas, la misma que puede ser realizada al momento
de la recepción de los productos.
ALCANCE Sección de Centro de Hemoterapia
MATERIALES Unidades de sangre total o paquetes globulares.
Termómetros de mercurio o electrónicos.
PROCEDIMIENTO
1 Retirar de la caja transportadora 02 unidades de sangre.
2 Colocar el extremo sensible de un termómetro de mercurio o electrónico entre las dos
bolsas.
3 Asegurar el sándwich con bandas elásticas.
4 Leer la temperatura después de 3 a 4 minutos.
5 Registrar las lecturas.
INTERPRETACIÓN
Si la temperatura de la sangre o glóbulos rojos excede los 10 º C, se deben colocar las unidades en
cuarentena hasta su disposición final.
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ANEXO Nº 01 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01

ANEXO Nº 01

CENTRIFUGACIÓN PARA PREPARACIÓN DE HEMOCOMPONENTES

PROGRAMA 3 6 4
GLOBULOS ROJOS GLOBULOS CONCENTRADO
PRODUCTO UNIDAD + PLASMA RICO ROJOS + PLASMA PLAQUETARIO
EN PLAQUETAS FRESCO +PLASMA FRESCO
VELOCIDAD RPM 1800 3500 3500
TEMPERATURA °C 20 4 20
TIEMPO MINUTOS 8 8 9
ACELERACIÓN F/M 8 8 8
DESACELERACIÓN F/M 1 2 8
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ANEXO Nº 02 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01

ANEXO Nº 02

CALIBRACIÓN DE MICROPIPETAS

Modelo de Pipeta Volumen a medir Valores Permitidos en ul

Rango
De 2 a 20 ul 4 ul 3.9 – 4.1
De 5 a 50 ul 10 ul 9.8 – 10.1
De 10 a 100 ul 20 ul 19.7 – 20.3
De 20 a 200 ul 40 ul 39.6 – 40.4
De 100 a 1000 ul 200 ul 198.7 – 201.3
De 200 a 1000 ul 300 ul 298.3 – 302.0
De 1 a 5 ml 2 ml 1990 – 2010
De 2 a 10 ml 3.5 ml 3485 – 3515
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ANEXO Nº 03 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01

ANEXO Nº 03

MEDIOS DE REACCIÓN O ADITIVOS

ADITIVO PRINCIPIO SUERO INCUBACIÓN

Albúmina Disminución del potencial zeta 2–3g 15 – 60 min
LISS Incremento en la captación de 2g 10 – 30 min
anticuerpos
LISS/PEG Incremento en la captación de 2g 10 – 30 min
anticuerpos.
Incremento en la concentración Ag-Ac
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ANEXO Nº 04 Revisión Nº Fecha de revisión Fecha de aplicación Página 01 de 01

ANEXO Nº 04

CUADRO PARA EL CONTROL DE CALIDAD DE LOS REACTIVOS

REACTIVOS CONTROL DE INTERVALO LÍMITE DE OBSERVACIONES

CALIDAD VARIACIÓN
Reactivos Pruebas con Cada día que se Reacción de 1+ con Debe registrarse la
eritrocitarios controles positivos. utilice. el control positivo. fecha en que se
Revisar el Cuando se abre un Ausencia de recibe el producto y
sobrenadante frasco de lote hemólisis. cuando empieza a
distinto. usarse.
Sueros Pruebas con Cada día que se Reacción de 1+ con Debe registrarse la
Hemoclasificadores controles positivos utilice. el control positivo. fecha en que se
y negativos Cuando se abre un recibe el producto y
frasco de lote cuando empieza a
distinto. usarse.
Potenciadores Pruebas con control Cada día que se Ausencia de
negativo utilice. aglutinación.

Enzimas Pruebas con Cada día que se Reacción de 1+ con

anticuerpos que no utilice. el control positivo.
reaccionan en
pruebas salinas,
pero dan resultados
positivos con GR
tratados con
enzimas.
Controles positivos
y Negativos
Suero de Coombs Pruebas con GR Cada día que se Aglutinación de 1 – Debe registrarse la
sensibilizados con utilice. 2+ fecha en que se
pequeñas Cuando se abre un recibe el producto y
cantidades de IgG o frasco de lote cuando empieza a
de componentes de distinto. usarse.
complemento Debe añadirse GR
sensibilizados con
IgG a las pruebas de
Antiglobulina
negativas.