Manual de Procedimientos Operativos Estándar
Manual de Procedimientos Operativos Estándar
Manual de Procedimientos Operativos Estándar
-2022-
INDICE
PAG.
1. INSTALACIÓN DE EQUIPO NUEVO 01
2. CALIBRACIÓN DE MICROPIPETAS 02
3. DETERMINACIÓN DEL GRUPO ABO – RH EN LAMINA 04
4. DETERMINACION DE GRUPO SANGUINEO GLOBULAR ABO-RH EN 06
TUBO.
5. TIPIFICACION DEL D débil DEL SISTEMA RH 09
6. TEST DE COOMBS DIRECTO CUALITATIVO ( POLIESPECIFICO ) 11
7. DETERMINACIÓN DE LA AVIDEZ 13
8. TECNICA DE PREPARACION DE ZONA DE VENOPUNTURA 14
9. CONTROL DE CALIDAD DE UNIDADES TRANSPORTADAS 16
10. PROCEDIMIENTOS OPERATIVOS ESTANDAR 17
11. TEST DE COOMBS INDIRECTO 18
12. DETERMINACIÓN DE LA ESPECIFICIDAD 19
13. PRUEBA DE COMPATIBILIDAD 20
CLÍNICA UNION
CENTRO DE HEMOTERAPIA Y BANCO DE SANGRE
PROCEDIMIENTO
1. Instalar el equipo de acuerdo a las especificaciones del fabricante.
2. Calibrar el equipo de acuerdo a lo sugerido por el fabricante.
3. Validar que el equipo trabaja como se espera y como especifica el fabricante.
4. Decidir si el equipo es crítico, de ser así incluirlo en la lista de equipos críticos.
Desarrollar procedimientos, horarios y registros para la calibración,
5. mantenimiento preventivo y control de calidad que forman parte de las
regulaciones, requerimientos de acreditación y manuales del operador.
Revisar el control de calidad semanalmente cuyo responsable será el supervisor
6. asegurar que la calibración, mantenimiento preventivo y reparaciones se
realicen adecuadamente.
7. Preparar el registro para anotar el record de reparaciones del equipo.
Si se encuentra que el equipo está defectuoso antes de ponerlo en
8. funcionamiento, colocarlo en situación de inactividad, marcándolo con un signo
visible.
9. Arreglar la devolución del equipo ya sea para su reemplazo o reparación.
REDACCIÓN
Lic. Blgo Jorge A. Vega Fernández Biólogo - Microbiólogo
REVISION
Dr. Tony Farias Rodriguez Patólogo Clínico
APROBACIÓN
Dr. Pedro Tenorio Santamaria Director médico
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PROCEDIMIENTO
Ajustar el volumen de la pipeta de acuerdo al modelo según la tabla. Ver
1.
Anexo: ANX2/01.
2. Colocar el contenedor limpio en la balanza analítica.
3. Pesar el contenedor y calibrar a cero.
4. Fijar el tip firmemente al cono de la pipeta.
5. Pipetear agua destilada dentro del contenedor y anotar el peso.
6. Repetir 5 veces cambiando de tip. Anotar los resultados.
7. Verificar los resultados con la tabla de valores permitidos. VerAnexo: ANX2/01
INTERPRETACIÓN
Si los resultados están dentro de los valores permitidos la pipeta esta calibrada y sólo necesita
continuar con el MANTENIMIENTO DIARIO de limpieza del cono con Etanol al 70%. Si uno de
los resultados está fuera de los límites aceptados la pipeta necesita ser RECALIBRADA y limpiada
desmontando las piezas y siguiendo las instrucciones del fabricante.
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PROCEDIMIENTO
1. Rotular la placa o lámina escavada identificando la muestra
2. Colocar una gota de Anti-A en un pozo.
Colocar una gota de Anti-B en otro pozo.
3.
Colocar una gota de Anti-D en un tercer pozo.
4. Agregar una gota de glóbulos rojos en estudio
5. Mezclar con la ayuda de una bagueta.
6. Observar la presencia de aglutinación a partir de los 10 seg hasta los 2 minutos.
7. Leer, interpretar y registrar los resultados.
INTERPRETACIÓN
La glutinación de los glóbulos rojos en estudio constituye resultados positivos.
ADJUNTO
Prueba Celular
Glóbulos rojos desconocidos
Anti-A Anti-B Anti-AB
0 0 0
+ 0 +
0 + +
+ + +
OBSERVACIONES
En los casos de anemia severa, realizar la aglutinación del Hematocrito al 50%, a fin de evitar
problemas en la determinación del factor Rh.
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Lic. Blgo Jorge A. Vega Fernández Biólogo - Microbiólogo
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INTERPRETACIÓN
1. La aglutinación de los glóbulos rojos en estudio constituyen resultados positivos.
2. La ausencia de aglutinación de las células constituye un resultado negativo.
La interpretación de la tipificación ABO del suero y los Glóbulos rojos se ilustra
3.
en la tabla.
Todas las discrepancias entre los resultados globular y sérico deben resolver
4.
antes de registrar la interpretación del tipo ABO del paciente o donante.
En la fase Globular ABO y RH, las reacciones positivas suelen mostrar
aglutinación 3+ á 4+; las reacciones en fase sérica son más débiles.. , Los GR A2
NOTA
se utilizaran si se encuentra un sub tipo “A” que pueda
desarrollar anticuerpos anti A1.
ADJUNTO
REFERENCIAS
Manual Técnico Asociación Americana de Bancos de Sangre 13ava Edición
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PROCEDIMIENTO
1. Suspensión al 5% de glóbulos rojos en estudio en solución salina al 0.9%
2. Colocar una gota de Anti D en un tubo limpio y rotulado. "D"
Colocar una gota de Suero Control RH ó Alb 22%en un tubo limpio y rotulado.
3.
"Control"
Agregar una gota de la suspensión al 5% de glóbulos rojos en estudio, a cada
4.
tubo.
Mezcla con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi
5.
siempre por 15 seg a 3,400 rpm ó por 1 min. a 1,000 rpm.
Re suspender con suavidad las células y/ examine macroscópicamente en
6.
busca de aglutinación con la ayuda del aglutinoscopio
Leer, interpretar y registrar los resultados.Si reacción es Negativa continuar
7.
procedimiento
Incubar en Baño María durante 30 min ,luego repetir paso 5 y 6 si es Negativo
8.
continuar.
Lavar los tubos con Sol. Salina por 4 veces decantando totalmente el ultimo
9.
lavado
10. Agregar 2 gotas de Suero Coombs (Antiglobulina Humana) repetir paso 5 y 6
11. Comprobar con Células Control de Coombs
INTERPRETACIÓN
La aglutinación de los glóbulos rojos en estudio constituyen resultados
1.
positivos
2. La resuspension de las células constituye un resultado negativo.
3. La validación como Rh Negativo se dara si ambos tubos no aglutinan
ADJUNTO
TABLA RH NO DETERMINADO
D Ctl RH Interpretación
Lectura Inmediata 0 0 Negativo?
Lectura Incubación 0 0 Negativo?
Lectura Suero de Coombs 1+ 1+ INVALIDO (+)
Control de Coombs
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Manual Técnico Asociación Americana de Bancos de Sangre 13ava Edición
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PROCEDIMIENTO
Preparar suspensión al 5% de glóbulos rojos en estudio en solución salina 0.9%
1.
lavados 4 veces en cada tubo rotulado
Realizar la dilución del suero de Coombs al 1/2 , 1/4 , 1/8 , 1/16 , 1/32 , 1/64 ,
2.
1/128, 1/256 , 1/512 , 1/1024 , 1/256 , 1/512 , 1/1024
PROCEDIMIENTO
La aglutinación de los glóbulos rojos en estudio constituyen resultados
1.
positivos.
2. La resuspension de las células constituye un resultado negativo.
Los resultados negativos deben ser comprobados con las células control de
3.
coombs.
4. Si el resultado es negativo la prueba es "no valida" y deberá repetirse.
La sumatoria del contaje de los puntos según la aglutinación será el score
NOTA
asignado
ADJUNTO
4+ 3+ 2+ 1+ 1/2+ 0
Puntuación 10 ptos 8 ptos 6 ptos 4 ptos 3 ptos 0
REFERENCIAS
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PROCEDIMIENTO
1. Colocar en una lámina de vidrio una gota del reactivo a evaluar
Colocar una gota de hematíes específicos a aproximadamente 1 cm del reactivo
2. a evaluar.
Mezclar determinando un círculo de no más de 2 cm de diámetro, accionado en
3.
forma simultánea el cronómetro.
4. Continuar la mezcla por balanceo de la lámina hasta ver aglutinación
5. Anotar el tiempo de inicio de aglutinación
INTERPRETACION
Tiempo óptimo de reacción: 9 a 12 segundos
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CENTRO DE HEMOTERAPIA Y BANCO DE SANGRE
PROCEDIMIENTO
1. Aplicar un torniquete en el brazo.
2. Identificar la zona de punción
3. Liberar el torniquete
Limpiar con la solución acuosa de yodo al 0.7% el área tomando hasta 4cm
4.
alrededor de la misma durante por lo menos 30 seg.
5. Retirar el exceso de espuma
Aplicar la solución de yodo al 10% y limpiar con movimientos concentricos
6.
hacia afuera por 30 seg.
7. Cubrir el área con gasa estéril
No tocar nuevamente el área después de terminado el procedimiento
NOTA
En caso de hipersensibilidad al yodo se puede usar clorhexidina.
REFERENCIAS
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REDACCIÓN
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APROBACIÓN
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CLÍNICA UNION
CENTRO DE HEMOTERAPIA Y BANCO DE SANGRE
PROCEDIMIENTO
1. Retirar de la caja transportadora 2 de las unidades de sangre
Colocar el extremo sensible de un termómetro de mercurio o electrónico entre
2.
las dos bolsas.
3. Asegurar el "sandwich" con bandas elásticas
4. Leer la temperatura después de 3 a 4 minutos
5. Registrar las lecturas
INTERPRETACIÓN
Si la temperatura de la sangre o glóbulos rojos excede los 10°C, se deben colocar las unidades
en cuarentena hasta su disposición final.
REFERENCIAS
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REDACCIÓN
Lic. Blgo Jorge A. Vega Fernández Biólogo - Microbiólogo
REVISION
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APROBACIÓN
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LINEAMIENTOS GENERALES
Cada procedimiento debe ser escrito según el formato que se describe y
constar de las siguientes partes:
Encabezado : Título
N° de Procedimiento Operativo Estándar (POE)
N° de Revisión
Fecha de Revisión
Fecha de Aplicación
Cuerpo : Propósito u Objetivo
FORMATO Ámbito
Materiales/Equipos (Si se requieren)
Procedimientos
Records, formatos y reportes
Adjuntos ( Si se requieren )
Referencias
Aprobación
Pié de Página Dirección Electrónica del Documento
APROBACIÓN
Cada procedimiento debe ser aprobado, firmado y fechado por el responsable del Centro de
Hemoterapia y/o Banco de Sangre, el responsable de calidad y el Coordinador Nacional del
PRONAHEBAS, antes de ser implementado en el servicio. La autorización también incluye la
fecha de efectividad o inicio.
REVISIONES
Todos los procedimientos Operativos Estándar (POE) deberán ser revisados por lo menos una
vez al año. Durante el año el responsable del Centro de Hemoterapia y/o banco de Sangre, junto
con todo el personal evaluaran la necesidad de procedimientos nuevos, adicionales o revisión
de los existentes
PERSONAL
Todo el personal deberá leer todos los procedimientos nuevos o revisados que sean relevantes
para el desarrollo de sus actividades. Esta revisión será documentada firmando la hoja de recibo
de información que asegura la lectura de los documentos.
LINEAMIENTOS GENERALES
Los originales impresos y firmados de cada procedimiento operativo estándar, son considerados
documentos legales, y deberán ser guardados en las oficinas administrativas.
Copias controladas de los procedimientos operativos estándar se encontraran disponibles en las
áreas de trabajo.
DEFINICIONES
TÉRMINOS Debe ser breve, omitiendo el uso de la palabra "procedimiento".
TÍTULO Empezar el título con las palabras claves que se usaran para encontrar
el procedimiento
NUMERO DE POE Número de identificación del procedimiento específico.
NUMERO DE Número de la versión del procedimiento. Este número cambia cada
REVISIÓN vez que el procedimiento es actualizado o modificado
FECHA DE Fecha en la que el procedimiento es implementado con el suficiente
APLICACIÓN personal entrenado.
PROPOSITO Razón por la cual se desarrolló el procedimiento.
AMBITO Áreas a las que el procedimiento involucra.
MATERIALES Listado de cualquier material, reactivos, y/o equipos requeridos para
llevar a cabo el procedimiento.
PROCEDIMIENTO Instrucciones de trabajo requeridas para completar las tareas listadas
en el formato, que incluyen el "Paso" y la "Acción" a ser tomada. Deber
ser breve pero incluir los detalles suficientes para la realización
correcta del procedimiento.
Utilizar "verbos de acción", tales como tipear, diluir, colocar, presionar,
contar, etc. , al empezar cada instrucción o paso.
REGISTRO Formatos, hojas de trabajo y cualquier registro relacionado al POE.
FORMATOS Y Cualquier documento relacionado al procedimiento podrá ser
REPORTES escaneado dentro del documento.
ADJUNTO Flujogramas, diagramas, gráficos y otras ilustraciones que puedan ser
usadas como ayuda en el desarrollo del procedimiento
REFERENCIAS Documentación relevante o de soporte que establece la necesidad o
validez del procedimiento.
Las referencias deben indicar la edición actual y el año de publicación
del documento
APROBACIONES La autorización oficial que documente la revisión del procedimiento.
Las firmas validan el uso del POE nuevo o revisado.
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Lic. Blgo Jorge A. Vega Fernández Biólogo - Microbiólogo
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PROCEDIMIENTO
Dispensar una gota de Glóbulos rojos (pool de globulos rojos) en 02 tubos
1.
debidamente rotulados.
2. Agregar 02 gotas del suero problema a cada tubo.
Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi
3.
siempre por 15 seg a 3,400 rpm ó por 1 min. a 1,000 rpm.
Leer, aglutinación y/o hemolisis, resuspender completamente el botón celular
4.
y anotar resultado.
5. Agregar 02 gotas de Albumina Bovina al 22%
Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi
6.
siempre por 15 seg a 3,400 rpm ó por 1 min. a 1,000 rpm.
Leer, aglutinación y/o hemolisis, resuspender completamente el botón celular
7.
y anotar resultado.
8. Incubar a 37º C por 15 min.
Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi
9.
siempre por 15 seg a 3,400 rpm ó por 1 min. a 1,000 rpm.
Leer, aglutinación y/o hemolisis, resuspender completamente el botón celular
10.
y anotar resultado.
Lavar los G.R. con solución Salina 0.9% x cuatro veces decantando totalmente
11.
en el último lavado
12. Agregar 02 gotas de Suero de Coombs Poliespecífico.
Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi
13.
siempre por 15 seg a 3,400 rpm ó por 1 min. a 1,000 rpm.
Leer, aglutinación y/o hemolisis, resuspender completamente el botón celular
14.
y anotar resultado.
15. Agregar 01 gota de células Control de Coombs en los tubos sin aglutinación
Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi
16.
siempre por 15 seg a 3,400 rpm ó por 1 min. a 1,000 rpm.
Leer, aglutinación y/o hemolisis, resuspender completamente el botón celular
17.
y anotar resultado.
INTERPRETACIÓN
La aglutinación de los glóbulos rojos en estudio constituyen resultados
1.
positivos.
2. La resuspensión de las células constituye un resultado negativo.
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CENTRO DE HEMOTERAPIA Y BANCO DE SANGRE
PROCEDIMIENTO
1. Rotular 3 series de tubos cada una como: A, B y D
2. Añadir una gota de anti A a los tubos rotulados "A" y una gota de hematíes A1
3. Añadir una gota de anti B a los tubos rotulados "B" y una gota de hematies B
4. Añadir una gota de anti D a los tubos rotulados "D" y una gota de hematies D
5. Centrifugar a 3500 rpm por 15 seg
6. Leer.
INTERPRETACION
Aglutinación: Reacción del anticuerpo con su antígeno específico
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Lic. Blgo Jorge A. Vega Fernández Biólogo - Microbiólogo
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Dr. Tony Farias Rodriguez Patólogo Clínico
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Dr. Pedro Tenorio Santamaria Director médico
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CENTRO DE HEMOTERAPIA Y BANCO DE SANGRE
PROCEDIMIENTO
Dispensar una gota de Glóbulos rojos (Concentrado de Hematíes) en 02 tubos
1.
debidamente rotulados.
2. Agregar 02 gotas del suero del paciente a cada tubo.
Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi siempre
3.
por 15 seg a 3,400 rpm ó por 1 min. a 1,000 rpm.
Leer, aglutinación y/o hemolisis, resuspender completamente el botón celular y
4.
anotar resultado.
5. Agregar 02 gotas de Albumina Bovina al 22%
Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi siempre
6.
por 15 seg a 3,400 rpm ó por 1 min. a 1,000 rpm.
Leer, aglutinación y/o hemolisis, resuspender completamente el botón celular y
7.
anotar resultado.
8. Incubar a 37º C por 15 min.
Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi siempre
9.
por 15 seg a 3,400 rpm ó por 1 min. a 1,000 rpm.
Leer, aglutinación y/o hemolisis, resuspender completamente el botón celular y
10.
anotar resultado.
Lavar los G.R. con solución Salina 0.9% x cuatro veces decantando totalmente en
11.
el último lavado
12. Agregar 02 gotas de Suero de Coombs Poliespecífico
Mezclar con suavidad y centrifugar de acuerdo con las instrucciones casi siempre
13.
por 15 seg a 3,400 rpm ó por 1 min. a 1,000 rpm.
Leer, aglutinación y/o hemolisis, resuspender completamente el botón celular y
14.
anotar resultado.
INTERPRETACIÓN
La resuspensión de los glóbulos rojos en estudio constituyen resultados
1.
positivos (Paquete de Globulos Rojos Compatible)
La aglutinación de las células constituye un resultado negativo (Paquete de
2.
Globulos Rojos Incompatible).
REDACCIÓN
Lic. Blgo Jorge A. Vega Fernández Biólogo - Microbiólogo
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Dr. Tony Farias Rodriguez Patólogo Clínico
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Dr. Pedro Tenorio Santamaria Director médico