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ACTIVIDAD PRACTICA Nº1: “PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD”

La terapia transfusional involucra el estudio y selección de componentes sanguíneos, y la posterior


administración en pacientes que lo necesiten en forma vital, lo cual resulta en un producto
transfundido con sobrevida aceptable, sin destrucción clínicamente significativa y no afecten los
glóbulos rojos (GR) propios del paciente.
Para asegurar esta premisa, se realizan, por tanto, las llamadas pruebas de compatibilidad
sanguínea, que son todos aquellos procedimientos y pruebas de laboratorio cuyo objetivo final es
asegurar principalmente la compatibilidad entre el donante y el receptor de una transfusión
sanguínea. En la siguiente tabla se detallan los elementos involucrados en las pruebas de
compatibilidad eritrocitarias:

ELEMENTOS A CONSIDERAR EN LAS PRUEBAS DE


COMPATIBILIDAD ERITROCITARIAS

1. Indicación de Transfusión

2. Identificación del Receptor

- En la muestra del receptor


- En la solicitud de transfusión

3. Análisis a realizar a la muestra del Receptor


- Características y condiciones de la muestra
- Clasificación ABO-RhD
- Detección e Identificación de Anticuerpos Irregulares (cuando corresponda)
- Fenotipo eritrocitario (cuando
corresponda)
- Comparación de resultados previos

4. Selección de la Unidad a transfundir


- Reclasificación ABO-RhD
- Fenotipo eritrocitario

5. Prueba Cruzada o Crossmatch


- Serológico
- Electrónico

6. Etiquetado de componente a transfundir

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Las pruebas cruzadas (PC), como una parte de las pruebas de compatibilidad, se definen como un
procedimiento que se utiliza para excluir la incompatibilidad entre donante y receptor. Utiliza suero
o plasma del paciente y GR de las unidades de sangre a transfundir a un paciente. Se realiza para
asegurar que:

I. No hay incompatibilidad del sistema sanguíneo ABO entre el paciente (receptor) y


los GR a transfundir.
II. No hay otros anticuerpos irregulares que puedan causar una reacción transfusional
hemolítica o un acortamiento de la vida media de las células transfundidas.
El procedimiento de PC se debe aplicar según las Reglas de Compatibilidad Transfusional, es decir,
en primera instancia deben compatibilizarse unidades “isogrupo” y en caso de no ser posible se debe
recurrir a compatibilizar unidades ABO y RhD compatibles.
La Guía Técnica “Orientaciones sobre las Unidades de Medicina Transfusional” según Resolución
Exenta N° 1026 del Ministerio de Salud de Chile establece los tipos de indicaciones de transfusión
de GR, en donde destaca la transfusión de tipo inmediata dentro de los 10 minutos en que llega la
solicitud de transfusión a la UMT, tiempo que nos permitiría realizar al menos la reclasificación ABO
RhD y la PC en salino (tubo).
En el caso de la aplicación del “Código Rojo” de algunas instituciones, no hay tiempo para realizar
pruebas pretransfusionales, por lo que se envían unidades O RhD negativas en stock a los servicios
de sangre. Ambas situaciones son de responsabilidad del médico solicitante. Mientras en la UMT se
debe terminar de realizar la PC completa. Algunas instituciones en sus protocolos de emergencia
transfusional compatibilizan en paralelo otras alternativas de GR, en caso que las unidades que se
enviaron sean incompatibles debido a los resultados de los estudios de compatibilidad realizadas
concomitantemente.

MUESTRA

 Muestra sanguínea anticoagulada EDTA (No más de 24 horas de extraída).

MATERIALES

 Tubos de Khan de vidrio 12 x 75


 Pipetas Pasteur Vidrio o plástico
 Gradilla
 Centrífuga inmunohematológica
 Lector (fuente de luz) o negatoscopio.
 Tijeras

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REACTIVOS

 Solución salina isotónica PBS


 Antisueros Anti-A, Anti-B y Anti-D
 Células testigos A1 y B.
 Suero de antiglobulina humana poliespecifico (IgG, C3d)
 Medio de Baja Fuerza iónica (LISS)
 Células panel detección anticuerpos irregulares.
 Células control Coombs.

PROCEDIMIENTO EN TUBO.
I. Seleccionar unidades de acuerdo a reglas de compatibilidad del sistema sanguíneo ABO
II. Rotular 3 tubo con los últimos 4 dígitos de la unidad seleccionada. (tubo muestra, tubo
suspensión y tubo reacción)
III. Cortar cuidadosamente con las tijeras un extremo del segmento, luego colocar el extremo
cortado al interior del tubo rotulado y proceder a cortar cuidadosamente con las tijeras el
extremo opuesto. Realizar este procedimiento apoyando el tubo idealmente en una gradilla.
IV. Preparar una suspensión globular al 2-5% con PBS. (tubo suspensión)
V. Agregar al tubo reacción 1 gota de suspensión de glóbulos rojos de la unidad seleccionada.
VI. Adicione 2 gotas de plasma del paciente o receptor.
VII. Mezclar todos los tubos y centrifugar según estandarización.
VIII. Leer en busca de hemólisis o aglutinación rotando suavemente el tubo en una fuente de luz.
Anotar los resultados inmediatamente en el antigrama respectivo, importante registrar
intensidad de aglutinación. ** (Fase Salina)
IX. Incubar los tubos por 45 minutos a 37ºC o si se añade una gota de LISS a cada tubo el tiempo
de incubación se reduce a 15 minutos a 37ºC.
X. Retirar los tubos de la incubación y centrifugar para realizar lectura.
XI. Leer en busca de hemólisis o aglutinación rotando suavemente el tubo en una fuente de luz.
Anotar los resultados inmediatamente, importante registrar intensidad de aglutinación. **
(Fase 37ºC)
XII. Lavar los tubos por 4 veces con PBS.
XIII. Agregar a cada tubo 2 gotas de suero antiglobulina humano.
XIV. Mezclar, centrifugar y leer en busca de aglutinación rotando suavemente el tubo en una
fuente de luz. Anotar los resultados inmediatamente, importante registrar intensidad de
aglutinación. ** (Fase coombs)
XV. Los tubos que no presenten aglutinación deben ser validados con células control Coombs,
agregar 1 gota de células control Coombs y centrifugar para realizar lectura.
XVI. leer en busca de aglutinación rotando suavemente el tubo en una fuente de luz. Anotar los
resultados inmediatamente.
XVII. La presencia de aglutinación en cualquier fase se interpreta como una unidad incompatible
y no puede ser utilizada en el receptor.

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IMPORTANTE. SE RECOMIENDA REALIZAR EN PARALELO PRUEBA DE
COMPATIBILIDAD Y DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES.

ACTIVIDAD PRACTICA
Instrucciones para el trabajo en el laboratorio:
Usted recibirá 1 muestra a la cual el médico tratante indica transfusión de 2 unidades de
concentrados de glóbulos rojos de carácter urgente. Usted realizará clasificación ABO RhD,
detección de anticuerpos irregulares y prueba cruzada según protocolo correspondiente.

A. Registre los resultados de aglutinación en cruces e interprete sus resultados de clasificación


ABO RhD.

Nombre Paciente Interpretación Anti-A Anti-B Anti-D Gr A1 Gr B

N° Muestra

B. En paralelo a la clasificación ABO realice detección de anticuerpos irregulares y la prueba


de compatibilidad mayor, por técnica de aglutinación en columna y en técnica en tubo.
C. Registre los resultados de aglutinación en cruces e interprete sus resultados.

Paciente Salino 37°C SAGH Células Interpretación


control
Prueba Unidad N°
Compatibilidad
en TUBO
Unidad N°
Detección Panel I
anticuerpos
irregulares en Panel II
TUBO

D. Interprete los resultados obtenidos e Indique si considera realizar estudios


complementarios y por qué.

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