Universidad de San Carlos de Guatemala

Facultad de Ingeniería
Escuela de Ingeniería Química

EXTRACCIÓN A NIVEL DE LABORATORIO DE ACEITE ESENCIAL CRUDO DE

PERICÓN (Tagetes lucida Cav), Y UTILIZACIÓN DEL DESECHO SÓLIDO
PARA LA EXTRACCIÓN DEL COLORANTE NATURAL, PARA SU USO EN EL
TEÑIDO DE FIBRAS NATURALES

Claudia Maribel Ac Santa Cruz

Asesorada por: Inga. Qca. Thelma Maricela Cano Morales

Guatemala, abril de 2005

 UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE INGENIERÍA

EXTRACCIÓN A NIVEL DE LABORATORIO DE ACEITE ESENCIAL CRUDO

DE PERICÓN (Tagetes lucida Cav), Y UTILIZACIÓN DEL DESECHO
SÓLIDO PARA LA EXTRACCIÓN DEL COLORANTE NATURAL, PARA SU
USO EN EL TEÑIDO DE FIBRAS NATURALES

TRABAJO DE GRADUACIÓN

PRESENTADO A JUNTA DIRECTIVA DE LA

FACULTAD DE INGENIERÍA
POR
CLAUDIA MARIBEL AC SANTA CRUZ
ASESORADA POR: INGA. QCA. THELMA MARICELA CANO MORALES
AL CONCONFERÍRSELE EL TÍTULO DE
INGENIERA QUÍMICA

Guatemala, abril de 2005

 UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA
FACULTAD DE INGENIERÍA

NÓMINA DE JUNTA DIRECTIVA

DECANO Ing. Sydney Alexander Samuels Milson

VOCAL I Ing. Murphy Olympo Paiz Recinos
VOCAL II Lic. Amahán Sánchez Álvarez
VOCAL III Ing. Julio David Galicia Celada
VOCAL IV Br. Kenneth Issur Estrada Ruiz
VOCAL V Br. Elisa Yazminda Vides Leiva
SECRETARIO Ing. Carlos Humberto Pérez Rodríguez

TRIBUNAL QUE PRACTICÓ EL EXAMEN GENERAL PRIVADO

DECANO Ing. Herbert René Miranda Barrios

EXAMINADOR Ing. Williams Guillermo Álvarez Mejía
EXAMINADOR Ing. Julio Alberto Rivera Palacios
EXAMINADOR Ing. Carlos Salvador Wong Davi
SECRETARIO Inga. Gilda Marina Castellanos de Illescas
 HONORABLE TRIBUNAL EXAMINADOR

Cumpliendo con los preceptos que establece la ley de la Universidad de San

Carlos de Guatemala, presento a su consideración mi trabajo de graduación
titulado:

EXTRACCIÓN A NIVEL DE LABORATORIO DE ACEITE ESENCIAL CRUDO

DE PERICÓN (Tagetes lucida Cav.) Y UTILIZACIÓN DEL DESECHO
SÓLIDO PARA LA EXTRACCIÓN DEL COLORANTE NATURAL, PARA SU
USO EN EL TEÑIDO DE FIBRAS NATURALES

Tema que me fuera asignado por la Dirección de la Escuela de Ingeniería

Química con fecha 16 de noviembre de 2004.

Claudia Maribel Ac Santa Cruz

 DEDICATORIA

A Dios Por haberme permitido vivir este momento.

A la virgen Por se luz y ejemplo en mi vida.

A mis padres Marta Judith Cruz Alonzo de Ac y Flavio Leonardo Ac

Caal, por brindarme todo su amor y ayuda. Que
este momento sea una pequeña recompensa a todos
sus sacrificios.

A mis hermanos César, Marvin, Hugo, Mayra, Mauricio, Luis René,

Denis, por todo su apoyo y ayuda ¡MUCHAS
GRACIAS!

A Jennifer Andrea Pedacito de mi ser, para que este trabajo sea para
ella motivo de orgullo y ejemplo a seguir.

A Otto René Por todo su amor y comprensión.

A mis sobrinos Para que sigan adelante y alcancen sus metas.

A mis tíos Especialmente a Delia Santa Cruz

A Amelia Macz Por todos sus consejos.

A las familias Aguilar Quiquivix y Gómez Aguilar, por todo su
apoyo.

A mis amigos Que de una u otra forma compartieron conmigo

gratos momentos.
 AGRADECIMIENTOS

A todos los que de una u otra forma colaboraron para el desarrollo de este
trabajo de graduación, especialmente a:

Inga. Qca. Telma Maricela Cano Morales. Por su asesoría, consejos y

paciencia.

Ing. Qco. José Eduardo Calderón García. Por su valiosa colaboración al revisar
el trabajo de graduación.

Lic. Zuly Díaz. Por su ayuda en la realización de la parte experimental,

especialmente en el análisis cromatográfico y espectro de absorción.

Al señor Joel Ajxup, por toda la información y experiencia brindada, para la

realización de este trabajo de graduación.
 ÍNDICE GENERAL

ÍNDICE DE ILUSTRACIONES v
LISTA DE SÍMBOLOS vii
GLOSARIO viii
RESUMEN xii
OBJETIVOS xiii
HIPÓTESIS xiv
INTRODUCCIÓN xv

1. MARCO TEÓRICO 1
1.1 Aceites esenciales 1
1.1.1 Antecedentes 1
1.1.2 Definición 4
1.1.3 Composición química 6
1.1.4 Estructura química 7
1.1.5 Factores que influyen en el deterioro de un aceite
esencial 7
1.1.6 Usos de los aceites esenciales 8
1.1.7 Métodos de extracción de aceites esenciales 10
1.1.7.1 Exprimir 11
1.1.7.2 Extracción por arrastre con vapor 11
1.1.7.3 Extracción con solventes volátiles 13
1.1.7.4 Enflurage 15
1.1.7.5 Maceración 16
1.2 Colorantes naturales 16
1.2.1 Antecedentes 17

i
 1.2.2 Definición 21
1.2.3 Distribución de los colorantes naturales 25
1.2.4 Clasificación de colorantes naturales utilizados en
el teñido de fibras 28
1.2.4.1 Características físicas 28
1.2.4.2 Usos tradicionales 30
1.2.4.3 Características químicas 31
1.2.5 Uso artesanal de colorantes naturales en el teñido
de fibras naturales 32
1.2.5.1 Fibras textiles naturales 32
1.2.5.1.1 Fibras de origen vegetal 33
1.2.5.1.2 Fibras de origen animal 33
1.2.5.1.3 Fibras de origen mineral 34
1.2.5.2 Teñido vegetal o natural 34
1.2.5.3 Tintes vegetales 34
1.2.5.4 Características de algunos tintes 38
1.2.6 Acidez y alcalinidad de los tintes naturales 42
1.2.6.1 Ácidos suaves 43
1.2.7 Mordientes 44
1.2.8 Taninos 44
1.3 El Pericón 45
1.3.1 Nombres comunes 46
1.3.2 Distribución y hábitat natural 46
1.3.3 Descripción botánica 47
1.3.4 Usos medicinales 49
1.3.5 Composición química 50
1.3.6 Farmacognosia 50
1.3.7 Toxicología 51

ii
 1.3.8 Características fisicoquímicas del aceite esencial
de Pericón (Tagetes lucida Cav.) 52
1.4 Pigmentos naturales flavonoides 52
1.4.1 Estructura 53
1.4.2 Extracción y técnicas de identificación 54
1.5 Equipo de extracción 59
1.6 Cromatografía 60
1.6.1 Clasificación de la cromatografía 60
1.6.1.1 Cromatografía de reparto 60
1.6.1.2 Cromatografía de adsorción 62
1.6.1.3 Cromatografía de exclusión 62
1.6.1.4 Cromatografía de permeación 63
1.6.1.5 Cromatografía de intercambio iónico 63
1.6.2 Cromatografía de capa fina 63
1.6.2.1 Proceso de adsorción 64
1.6.2.2 Fase estacionaria (adsorbentes) 64
1.6.2.3 Preparación de las placas para
cromatografía 65
1.6.2.4 Aplicación de la muestra 65
1.6.2.5 Desarrollo de la placa 66
1.6.2.6 Cámaras para desarrollo 66
1.6.2.7 Identificación de la especie 67
1.6.2.8 Evaluación de un cromatograma de
capa fina 68

2. METODOLOGÍA 69
2.1 Localización 69
2.2 Recursos humanos 69
2.3 Recursos materiales 70

iii
 2.4 Diseño de tratamientos y manejo del experimento 70
2.4.1 Metodología experimental 73
2.4.1.1 Extracción de aceite esencial 73
2.4.1.2 Extracción de colorante 74
2.4.2 Identificación de flavonoides 75
2.4.2.1 Reacciones coloridas 75
2.4.3 Análisis cromatográfico en capa fina 75
2.4.3.1 Preparación de la muestra 76
2.4.3.2 Preparación de las soluciones estándar 76
2.4.3.3 Preparación de la fase móvil 76
2.4.3.4 Preparación de la placa cromatográfica 76
2.4.3.5 Desarrollo de la placa cromatográfica 77
2.4.3.6 Preparación de las soluciones reveladoras 77
2.4.4 Espectrofotometría UV 78
2.4.4.1 Preparación de las soluciones 78
2.4.4.2 Obtención de los espectros 78

3. RESULTADOS 79
4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS 85
5. ANÁLISIS ESTADÍSTICO 89

CONCLUSIONES 92
RECOMENDACIONES 93
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 94
BIBLIOGRAFÍA 96
APÉNDICE 98

iv
 ÍNDICE DE ILUSTRACIONES

FIGURAS

1. Planta de Pericón (Tagetes lucida Cav.) 48

2. Estructura básica de los flavonoides 53
3. Rendimiento porcentual promedio de colorante extraído 82
4. Gráfica de absorbancia vrs longitud de onda para cada
repetición 98
5. Gráfica de absorbancia vrs longitud de onda para
soluciones estándar 102
6. Secador de Bandejas 105
7. Equipo Neoclevenger 105
8. Equipo Shoxlet 106
9. Rotaevaporador 106
10. Prueba Reacción de Shinoda 107
11. Prueba Reacción con H2SO4 conc. 107
12. Desarrollo de la placa cromatográfica 108
13. Resultado de la Cromatografía en capa fina 108

TABLAS
I. Colorantes flavonoides 31
II. Colorantes carotenoides 31
III. Colorantes quinónicos 31
IV. Especies utilizadas en el teñido de fibras 35
V. Análisis de varianza 72

v
 VI. Gramos obtenidos de aceite esencial crudo de Pericón 79
VII. Rendimiento porcentual de aceite esencial crudo obtenido 80
VIII. Gramos de extracto de colorante natural 81
IX. Rendimiento porcentual de extracto de colorante de Pericón 81
X. Resultados de las pruebas de la reacción de Shinoda 82
XI. Resultados de las pruebas de la reacción con H2SO4 conc. 83
XII. Resultados de la cromatografía en capa fina 83
XIII. Nomenclatura del análisis de varianza 90
XIV. Fórmulas para el análisis de varianza 90
XV. Resultados del análisis de varianza 91

vi
 LISTA DE SÍMBOLOS

msnm metros sobre el nivel del mar

cm centímetro
mm milímetro (10-3 m)
nm nanómetro (10-9 m)
g gramo
kg kilogramo
mg miligramo (10-3 g)
mg/ml miligramos por mililitro
cm3 centímetro cúbico
ml mililitro (10-3 l)
µl microlitro
ºC grado centígrado
p.f. punto de fusión
atm atmósfera
UV ultra violeta
% porcentaje
FeCl3 cloruro férrico
H2SO4 ácido sulfúrico
λmax longitud de onda máxima
Rn número de repeticiones
S1 metanol
S2 acetona
S3 etanol

vii
 GLOSARIO

Absorbancia Propiedad que presentan las moléculas de la materia

de poder absorber una determinada cantidad de luz.

Aceites esenciales Productos químicos que forman las esencias

odoríferas de un gran número de vegetales, son
líquidos volátiles, en su mayoría insolubles en agua,
pero fácilmente solubles en alcohol, éter y aceites
vegetales y minerales.

Astringente Propiedad de ciertas sustancias de producir

constricción y sequedad en los tejidos orgánicos.

Auxócromos Radicales químicos que dan a las sustancias

colorantes cierta afinidad con las fibras. Tienen la
propiedad de fijar a la fibra eficazmente el colorante
deseado.

Colorantes naturales Son materias colorantes que tienen origen vegetal o

animal, y se encuentran presentes como pigmentos
en plantas, hojas y frutos.

Cromóforos Son las agrupaciones atómicas no saturadas,

responsables de que se produzca absorción de la luz
de la zona visible y que aparezca color.

viii
Cromatografía Técnica de análisis químico utilizada para separar
sustancias puras de mezclas complejas, basada en
la diferencia de velocidad con que se mueven los
solutos a través de un medio estacionario; el flujo en
un solvente llamado eluente.

Espectroscopía Es la técnica que estudia las interacciones

electromagnéticas con la materia que provocan la
absorción o emisión de energía a través de la
transición de los electrones entre niveles cuánticos o
discretos de energía, vibraciones de enlaces,
rotaciones moleculares y transición de electrones
entre orbitales de átomos y moléculas.

Extracción Procedimiento por el cual se obtienen los principios

químicos de una planta, al colocarla en contacto con
un solvente, en el que la sustancia que se desea
separar es muy soluble, siendo el resto de los
materiales de la solución insolubles en el.

Flavonoides Pigmentos hidrosolubles que se encuentran tanto en

el citoplasma como en las vacuolas de las células
vegetales y son los responsable de los colores
intensos de las flores y frutas. Se ubican dentro del
grupo de compuestos aromáticos y fenólicos, que
poseen un esqueleto carbonado C6-C3-C6.

ix
Fibra Estructura de origen animal, vegetal, mineral o
sintético parecida al pelo. Su diámetro no suele ser
superior a 0.05 cm.

Fibras de líber Son las fibras fuertes que crecen entre la corteza y el
tallo de muchas plantas dicotiledónas, como el lino,
cáñamo, yute y ramio.

Jerga Tela gruesa y tosca.

Longitud de onda Distancia entre dos puntos consecutivos de una onda

que tienen el mismo estado de vibración.

Maceración Procedimiento que consiste en dejar reposar las

plantas en un solvente frío durante algunas horas.
Sirve para extraer principios activos inestables frente
al calor.

Mordiente Sustancia que se emplea para fijar los colores en las

fibras.

Neoclevenger Aparato utilizado en la extracción de aceites

esenciales, por medio del método de extracción por
arrastre con vapor en caldillo, el destilado se recoge
en un tubo graduado donde la fase acuosa es
automáticamente separada de la fase oleosa y es
devuelta al balón de extracción. El aparato consta de
tres partes principales: balón de extracción, tubo
graduado, refrigerante de reflujo.

x
Odorífero Compuesto que tiene la característica de tener buen
olor o fragancia.

Pigmento Sustancias polvorosas de color que precisan

mezclarse con agentes adhesivos antes de aplicarse
a una superficie.

Secado Operación unitaria que consiste en la eliminación de

agua interior de ciertos productos mediante un
gradiente de temperatura entre el interior del
producto con el medio de calefacción.

Soxhlet Aparato de extracción semicontinua, en donde el

sustrato se agrega al principio, mientras que el
solvente cumple un ciclo de extracción-purificación
continuo. La purificación se realiza por destilación,
de tal manera que el sustrato siempre está en
contacto con el solvente. El aparato consta de tres
partes principales: el matraz, la cámara de extracción
y el refrigerante de reflujo.

Teñido Proceso en el que se colorean fibras textiles y otros

materiales de forma que el colorante se convierta en
parte integrante de la fibra o materia.

xi
 RESUMEN

Se realizó la extracción, a nivel de laboratorio, de aceite esencial crudo

de la planta de Pericón (Tagetes lucida Cav.), empleando el método de
extracción por arrastre con vapor en caldillo, con el equipo denominado
Neoclevenger, con el objetivo de determinar el rendimiento de aceite esencial
crudo y utilizar el desecho sólido para la extracción del colorante natural,
empleando el método de extracción semicontinua en Soxhlet, con el fin de
determinar con que solvente se obtienen mejores rendimientos. Los solventes
que se utilizaron son: acetona, metanol, etanol.

Para realizar la experimentación se utilizaron muestras de 100 gramos de

la planta seca triturada, con períodos de extracción de aceite esencial de 2
horas, utilizando como solvente hexano, realizando nueve extracciones. Se
separó el aceite esencial crudo, y se mantuvo en refrigeración en frascos color
ámbar, hasta realizarle los análisis correspondientes, el desecho sólido se secó
a temperatura no mayor de 40 ºC , hasta que presentó peso constante, luego se
procedió a la extracción del colorante natural.

Para la extracción del colorante se utilizaron muestras de 10 gramos de

materia seca, haciendo tres repeticiones para cada solvente. Los extractos se
concentraron al vacío, a temperaturas menores de 40 ºC. Luego de obtener los
extractos, se mantuvieron en refrigeración y protegidos de la luz directa, hasta
realizar los análisis correspondientes.

Se utilizaron reacciones coloridas, para identificar el tipo de colorante, así

como cromatografía en capa fina y espectro de absorción.

xii
 OBJETIVOS

General
Extraer a nivel de laboratorio aceite esencial crudo de la planta de
Pericón (Tagetes lucida Cav.), y utilizar el desecho sólido, para extraer
colorante natural, por medio de tres solventes.

Específicos
1. Determinar el rendimiento de aceite esencial crudo extraído de la
planta de Pericón (Tagetes lucida Cav.) por medio del método de
extracción por arrastre con vapor en caldillo.

2. Determinar el rendimiento del colorante obtenido del desecho sólido

del Pericón (Tagetes lucida Cav.), utilizando tres solventes para la
extracción.

3. Caracterizar el tipo de colorante obtenido del Pericón (Tagetes

lucida Cav.) por métodos de espectrofotometría y cromatografía en
capa fina.

4. Crear una fuente de información sobre colorantes naturales y la

importancia que éstos están cobrando en la industria textil
guatemalteca.

xiii
 HIPÓTESIS

Hipótesis general

Es factible el uso del desecho sólido obtenido del Pericón (Tagetes lucida
Cav.), utilizado en la extracción de aceite esencial crudo, como fuente de
colorante natural para teñir fibras naturales.

HIPÓTESIS ESTADÍSTICA

Hipótesis nula

El rendimiento de colorante, obtenido en la extracción es independiente

del solvente utilizado.

µ1 = µ2 = µ3

Hipótesis alternativa

El rendimiento de colorante natural obtenido varía significativamente

dependiendo del solvente utilizado.

µ1 ǂ µ2 ǂ µ3

xiv
 INTRODUCCIÓN

En la actualidad la demanda por los productos naturales provenientes de

plantas y animales es mayor, las normas que rigen los mercados mundiales son
cada vez más estrictas en cuanto al uso de colorantes naturales en alimentos,
cosméticos, fibras, medicamentos.

El presente trabajo de investigación se refiere al estudio de una planta

bastante común en nuestro medio, el Pericón (Tagetes lucida Cav.), el cual
aparte de tener propiedades medicinales, también es portador de compuestos
que proporcionan colorantes.

Del Pericón (Tagetes lucida Cav), se han hecho varios estudios sobre el
aceite esencial que proporciona, pero también se ha observado que es portador
de compuestos que proporcionan color, dependiendo de la parte que se
estudie.

El objetivo de este estudio es determinar el rendimiento de colorante que

se puede obtener del desecho sólido del Pericón (Tagetes lucida Cav.), luego
de extraer el aceite esencial crudo, utilizando tres solventes, y evaluando el
solvente con el cual se producen mayores rendimientos, así como el uso que se
le puede dar al colorante obtenido.

La importancia de este estudio, radica en que se cuenta en la región,

con varias plantas de las cuales se pueden obtener colorantes. Estos
colorantes naturales derivados de plantas, árboles, raíces, semillas e insectos,
han sido usados en alimentos, cosméticos y textiles.

xv
 Actualmente los tintes naturales tienen un gran valor para las artesanías
del país, debido a que pueden usarse en el teñido de hilo de algodón y lana,
telas, yute, palma, cuero, pieles, plumas, paja, madera, flores naturales y
artificiales, jabones, candelas y aserrín.

Su valor radica en que son productos de la naturaleza, contrario a los

tintes químicos, con contenidos azocolores, que hacen daño a la naturaleza
humana.

Para la realización del experimento se utilizaron como materia prima,

hojas secas de la planta de Pericón (Tagetes lucida Cav.), cristalería, material y
equipo de laboratorio, reactivos. Al obtener el extracto se realizaron pruebas
coloridas, luego se analizaron por medio de cromatografía y espectrofotometría,
para determinar su composición química.

xvi
 1. MARCO TEÓRICO

1.1 Aceites esenciales

Los productos obtenidos de las plantas fueron utilizados por las antiguas
civilizaciones, los aceites esenciales se produjeron y se usaron por primera vez
en Egipto, Persia y la India.

Uno de los avances se llevó acabo cuando se descubrió que si ciertas

especies y flores se maceraban en grasa o aceite, la grasa o el aceite podrían
retener una parte de su principio odorífero. De esta forma se prepararon
ungüentos y fragancias de fama bíblica. Avicena médico árabe, descubrió la
extracción por arrastre con vapor de aceites volátiles. Durante su búsqueda de
pociones médicas, encontró que las flores hervidas en un alambique con agua
desprendían algunas de sus esencias al destilado. Los cruzados llevaron a
Europa todo el arte y la destreza del Oriente en perfumería, así como la
información sobre las fuentes de resinas, aceites y especies. (1)

1.1.1 Antecedentes

El médico español Arnoldo de Villanova (1235-1377), describió por

primera vez la extracción por arrastre con vapor de aceites esenciales con fines
terapéuticos. Philippus Von Hohenheim (1493-1541) médico suizo, desarrolló
una teoría acerca de la quinta esencia, la parte más sutil de una sustancia
utilizada para fines terapéuticos.

1
 La naturaleza de los aceites esenciales fue estudiada por los
farmacéuticos Baumé, Rovelle, Bindheim, Hoffman y Glauber en los siglos XVII
y XVIII. Sin embargo, la industria de los aceites esenciales surgió en el siglo
XIX, a consecuencia de los trabajos experimentales de Lavoisier.

A principios del siglo XX se publicó un exhaustivo estudio sobre el aceite

esencial de trementina, por el científico G. Houston de la Billardiere, en el que
encontró una proporción de carbono e hidrógeno de 5:8, que se estableció más
adelante para todos los hemiterpenos, terpenos, sesquiterpenos y politerpenos.

Kekulé empleó por primera vez el término terpeno, pero quien profundizó
sobre la investigación de éstas sustancias contenidas en los aceites esenciales
fue O. Wallace. Desde entonces se ha incrementado el conocimiento y estudio
de los aceites esenciales.

Se han realizado recientemente en la Universidad de San Carlos de

Guatemala estudios acerca de la extracción de aceites esenciales de diversas
plantas medicinales populares, como la albahaca, tomillo, romero, hoja de
naranja agria, manzanilla, pericón, entre otras.

En el año de 1992, el estudio titulado Determinación de la acción

antiespasmódica del aceite esencial del pericón (T. lucida), realizado por el
Químico Farmacéutico Daniel Ortiz, determinó que el aceite esencial posee
actividad antiespasmódica in vitro, y que ésta es mayor ante cloruro de bario
que ante acetilcolina.

2
 Otro estudio realizado en el año de 1995 titulado Determinación de la
concentración y rendimiento de 7-metoxicumarina y aceite esencial, en
cinco estados de desarrollo del pericón (T. Lucida) en la Alameda,
Chimaltenango, realizado por la Inga. Agrónoma Claudia Barillas, concluyó
que la mayor concentración de aceite esencial se encuentra en las hojas,
cuando la planta esta en plena floración.

En la sección de Química Industrial del Centro de Investigaciones de

Ingeniería, USAC, se han realizado estudios de Extracción de Aceites
Esenciales con varias plantas, uno de ellos es el proyecto 77-00 de la línea
FODECYT del CONCYT, denominado Obtención y caracterización de Aceite
Esencial de cuatro plantas medicinales cultivadas a diferentes niveles
altitudinales de Guatemala el cual fue coordinado por la Inga. Qca. Telma
Maricela Cano Morales, las plantas medicinales estudiadas en este proyecto
fueron, manzanilla, pericón, hinojo y ajenjo. En relación al Pericón (Tagetes
lucida Cav.), el estudio se hizo a nivel de la planta piloto de extracción-
destilación, empleando el método de extracción con arrastre de vapor directo,
usando como solvente hexano y períodos de extracción de 2 horas y
temperaturas entre 78 ºC – 94 ºC, en el cual se estudiaron cuatro lotes
diferentes de materia prima provenientes de distintos niveles altitudinales, con
tres repeticiones para cada lote, obteniendo rendimientos muy cercanos en el
lote proveniente del nivel altitudinal de 1776 msnm, al reportado por
Fenarolis(1998) y Cáceres(1998), que se encuentra en el rango de 0.3 % - 0.4
% en masa, dependiendo de la región de producción. El estudio más reciente
lo realizó el Ing. Químico Werner Ottoniel Valiente Mazariegos, en el año 2003
titulado Evaluación del rendimiento de aceite esencial de Pericón (Tagetes
lucida Cav.) procedente de tres niveles altitudinales de Guatemala,
realizando el estudio a nivel de laboratorio y de planta piloto.

3
 Concluyendo que a nivel de planta piloto el rendimiento de aceite esencial
depende del nivel altitudinal, así como del tamaño de la partícula, y a nivel de
laboratorio el rendimiento de aceite esencial depende del tamaño de la
partícula.

1.1.2 Definición

De acuerdo a la definición adoptada por Stteffen Arctander en su obra

Perfume and Flavor Materials of Natural Origin, los aceites esenciales son
productos odoríferos obtenidos de materias primas naturales por
destilación, habitualmente con agua o vapor o, como en el caso de los
frutos cítricos, mediante un proceso mecánico.

La doctora Olga Lock de Ugaz en su libro de Investigación Fitoquímica,

los define como los constituyentes odoríferos o esencias de una planta.

También se pueden definir según George T. Austin como aceites

volátiles odoríferos de origen vegetal, sin embargo, se debe hacer una
distinción entre aceites naturales de flores obtenidos por enflurage o extracción
por disolventes y aceites esenciales que se recuperan por arrastre con vapor. A
los aceites extraídos les puede faltar algún componente que no sea lo
suficientemente volátil o que se pierda durante la extracción, por ejemplo en el
aceite de rosas, el alcohol feniletílico se pierde en la porción acuosa del
extracto, y el aceite de azahar, en el cual el aceite extraído contiene una
cantidad mínima de antranilato de metilo, mientras que el aceite extraído de la
flor puede contener tanto como una sexta parte de este componente. (1)

4
 El término aceite, probablemente, se origina del hecho que el aroma de
una planta existe en las glándulas o entre las células en forma líquida, el cual al
igual que los aceites grasos son inmiscibles con el agua y solubles en
disolventes orgánicos. La palabra esencial se deriva del latín quinta essentia
que significa el quinto elemento, asignado a estos aceites, ya que la tierra, el
fuego, el aire y el agua, fueron considerados los cuatro primeros elementos. (2)

Los aceites esenciales se pueden encontrar en muchas especies de las

familias de las Umbeliferae (apio, comino, perejil, anís), de Rutaceae (limón,
naranja, lima, mandarina), de Labiateae (lavanda, romero, timol, orégano), de
Mirtaceae (eucalipto, clavo), Piperaceae (pimiento, matico), entre otras.

Los aceites esenciales son arrastrables con corrientes de vapor de agua.

Difieren de los aceites fijos por sus propiedades, tanto químicas como físicas.
Un aceite esencial puede localizarse en un determinado órgano vegetal, flores,
hojas, frutos y hasta raíces o en toda la planta, por ejemplo, en la rosa, sólo se
encuentran en el pétalo; en el comino, en las semillas; en clavo de olor, en el
brote o yema; en la lima, en los frutos; en la menta, en los pelos glandulares de
las ramas y hojas. Cuando se localiza en toda la planta la composición puede
ser igual o diferente, por ejemplo, la canela, el aceite esencial obtenido de las
hojas contiene principalmente eugenol, de la corteza principalmente
cinamaldehído y de la raíz el alcanfor. Algunos aceites esenciales se
encuentran en la planta en forma de precursores no volátiles, frecuentemente
glicósidos, la descomposición es enzimática o en medio ácido diluido, esto se
observa en las almendras amargas, pimienta negra. Las esencias se producen
en glándulas especiales formadas por células secretoras arregladas para formar
una bolsa donde se acumula el aceite esencial. (3)

5
 1.1.3 Composición química

En un aceite esencial pueden encontrarse hidrocarburos alicíclicos y

aromáticos, así como los derivados oxigenados, con la excepción de las
esencias derivadas de heterósidos (por ejemplo las de almendras amargas y
mostaza). En algunos aceites esenciales, por ejemplo, la trementina,
predominan los hidrocarburos y existen sólo cantidades pequeñas de
componentes oxigenados, y en otros, por ejemplo la esencia de clavo, la
mayoría de los compuestos son oxigenados. (4)

El olor y el sabor de las esencias están determinados principalmente por

estos componentes oxigenados que, por lo general, son notablemente solubles
en agua (agua de azahar, agua de rosas, etc.).

Muchos de los aceites esenciales son de origen terpenoide y sólo un

pequeño número de ellos, como los de canela y de clavo, contienen
principalmente derivados aromáticos (bencénicos). (4)

El gran número de compuestos químicos contenidos en los aceites

esenciales se pueden clasificar de la siguiente manera: ésteres (principalmente
ácido benzoico, acético, salicílico y cinámico), alcoholes (linalol, geraniol,
citronelol, terpinol, mentol, borneol), ácidos (benzoico, cinámico, mirístico,
isovalérico; todos en estado libre), fenoles (eugenol, timol, carvacrol), cetonas
(carvona, mentona, pulegona, irona, fenchona, tujona, alcanfor, metil nonil
cetona, metil heptanona), aldehídos (citral, citronela, benzaldehído,
cinamaldehído, aldehído cumínico, vainilla), éteres (ciñelo, éter interno
(eucaliptol), anteol, safrol), lactonas (cumarina), terpenos (canfeno, pineno,
limoneno, felandreno, cedreno) e hidrocarburos (cimeno, estireno (fenil etileno)).
(1)

6
 1.1.4 Estructura química

Los hidrocarburos contenidos en los aceites esenciales se denominan

colectivamente terpenos, y al igual que el caucho, derivan probablemente de la
condensación de unidades de isopreno, C5H8.

Los aceites esenciales químicamente están formados por la mayoría de

los monoterpenos y algunos sesquiterpenos y compuestos aromáticos.

Los terpenos propiamente dichos, C10H16 pueden ser de cadena abierta,

por ejemplo, el mirceno, monocíclicos como el p-cimeno, limoneno y felandreno,
o bicíclicos como el pineno y canfeno. Los sesquiterpenos, C15H24 pueden ser
de cadena abierta, como el farnesol, monocíclicos como el zingibereno o
bicíclicos como el cadineno.

Entre los derivados oxidados de terpenos pueden mencionarse los

alcoholes de cadena abierta (geraniol, nerol y citronelol) y los aldehídos
relacionados (geranial y citral). Los alcoholes terpénicos monocíclicos están
representados por el mentol y el terpineol; son bicíclicos el alcohol borneol y la
cetona alcanfor. (3)

1.1.5 Factores que influyen en el deterioro de un aceite esencial

Los factores que influyen en el deterioro de un aceite esencial son varios

entre los que podemos mencionar las reacciones generales de oxidación,
resinificación, polimerización o hidrólisis de ésteres, reacciones que son
activadas por el aumento de temperatura, la presencia de aire (oxígeno), siendo
también muy importante la humedad y la luz.

7
 Los aceites que contienen cantidades apreciables de terpenos, se ven
afectados especialmente, tal es el caso del té de limón y de cítricos. Como los
terpenos son hidrocarburos no saturados, absorben fácilmente oxígeno del aire.

Como regla general, cualquier aceite será tratado antes de almacenarlo,

removiéndole impurezas metálicas, humedad y materia suspendida. Los
envases deben quedar completamente llenos, colocándose en un lugar fresco y
protegido de la luz. Antes de sellar los recipientes es conveniente burbujear
nitrógeno o anhídrido carbónico para desalojar del envase la cámara de aire
que pudiera haber quedado dentro del aceite.

La presencia de hierro es otro de los factores que producen deterioro, ya

que éste actúa como catalizador de varias reacciones de descomposición.
Cuando se realiza una destilación el aceite esencial entra en contacto con
oxígeno, agua, altas temperaturas y hierro durante períodos prolongados. El
resultado es la descomposición de aldehídos que contiene el aceite esencial
transformándose en resinas que al estar presentes en el aceite esencial reflejan
la calidad de aceite y por consiguiente su precio, ya que durante el
fraccionamiento posterior del aceite la economía se verá afecta por este
producto resinoso que tiene poco mercado y además causa problemas en el
procesamiento y al equipo.

1.1.6 Usos de los aceites esenciales

Los aceites esenciales han sido utilizados durante mucho tiempo,

constituyen las materias primas básicas de los fabricantes de perfumes.

8
 También son materias básicas para los que elaboran sustancias
saporíferas, se utilizan en la industria alimenticia o como fuente de materias
primas, por ejemplo, el citral obtenido del zacate limón se ha usado para
sintetizar vitamina A. En cuanto al papel biológico que desempeñan las
esencias en los vegetales se ha especulado mucho, algunos por ejemplo,
intervienen como hormonas en la polinización; sirven de atrayente de insectos
polenóforos; regulan la transpiración; son productos de desecho metabólico. (3)

En general, los aceites esenciales son utilizados comúnmente como

aromatizantes de cosméticos, perfumes, desodorantes ambientales, en
preparaciones farmacéuticas y semifarmacéuticas, saborizantes de medicinas,
bebidas (alcohólicas y no alcohólicas) y alimentos, carnes salsas, enlatados,
pastelería, también en dulces, confitería, gomas masticables, sopas,
desinfectantes, artículos de baño, etc.

El aceite esencial del Pericón (Tagetes lucida Cav.), se utiliza en la

industria licorera y en la elaboración de perfumes. Además se estudia su
aplicación como antiespasmódico, existiendo ya un estudio en el cual se revela
la actividad de éste en extracto alcohólico, ya que posee mayor potencial
espasmolítico ante cloruro de bario, actuando a través de un mecanismo
antagonista no competitivo. También se ha encontrado que tiene actividad
inhibitoria microbiana en extractos provenientes de plantas recolectadas en
plena floración.

Estos aceites constituyen una valiosa fuente de ingresos, aunque de

carácter más bien secundario, para gran número de pequeños agricultores y
negociantes en pequeña escala en países de desarrollo, aunque existe también
una producción más organizada a escala de plantaciones.

9
 Tanto los aceites esenciales como las oleorresinas de especias, por estar
altamente concentrados, son productos de reducido volumen y elevado valor
cuya preparación en muchos casos no presenta dificultades técnicas y cuyo
transporte a los puntos de destino de ultramar es invariablemente barato. (5)

1.1.7 Métodos de extracción de aceites esenciales

Los aceites volátiles se pueden obtener de las plantas por varios

métodos: (1)

1. por el acto de exprimir

2. por arrastre con vapor
3. por extracción con solventes volátiles
4. por enflurage
5. por maceración

La mayor parte de los aceites se obtienen por extracción, generalmente con

vapor, pero ciertos aceites se pueden dañar con altas temperaturas. Los
aceites cítricos extraídos son de calidad inferior por lo tanto se obtienen al
exprimir. Para ciertas flores que no liberan aceite por extracción por arrastre
con vapor o lo hacen con deterioración del aceite, se emplean los tres últimos
métodos. Sin embargo, la extracción con disolventes volátiles, un proceso
relativamente reciente, ha sustituido a la maceración (extracción con grasas
calientes) para todos los propósitos prácticos y está reemplazando al enflurage.
La extracción por solventes es el proceso más avanzado en cuanto al aspecto
técnico y produce olores verdaderamente característicos, pero es más costoso
que la extracción por arrastre con vapor.

10
 1.1.7.1 Exprimir

Al exprimir por máquinas puede producirse un aceite casi idéntico al

producto exprimido a mano y es el método aplicado en forma comercial. De los
procesos de exprimir a mano, el proceso de esponja es el más importante, ya
que produce el aceite de mayor calidad. Aquí la fruta se parte y la piel se
monda y se sumerge por varias horas; cada cáscara se prensa contra una
esponja y el aceite se absorbe en ella, que se exprime periódicamente.

1.1.7.2 Extracción por arrastre con vapor

La extracción generalmente se efectúa con vapor, las flores y hierbas se

cargan normalmente sin preparación. Las hojas, raíces jugosas y varas se
cortan en trozos pequeños. Los materiales secos se pulverizan. Las maderas y
raíces fuertes se cortan en pequeños pedazos o se astillan mecánicamente.

Las semillas y bellotas se alimentan a través de rodillos quebradores por

un espacio suficiente sólo para romperlas. Las bayas se cargan en su estado
natural, ya que el calor de extracción pronto desarrolla suficiente presión para
romper su integumento.

La extracción por arrastre con vapor puede ser:

a. Por arrastre con vapor directo, que consiste en poner en contacto vapor
seco, generado en una caldera, con el material vegetal preparado, para
posteriormente condensar el vapor.

11
 Este método ofrece la ventaja que el vapor de agua se introduce
en el material vegetal a una mayor presión, pudiendo, de esta manera,
romper con facilidad las micelas donde se encuentra confinado el aceite
esencial. Tiene la desventaja de no poder reducir de tamaño las
partículas a tamices muy pequeños, ya que el vapor arrastraría el
material vegetal, contaminando el condensado.

b. Por arrastre con vapor en caldillo, en este método el material vegetal

está en contacto directo con agua hirviendo. Se coloca el material
vegetal en un recipiente y se inunda con agua, se suministra calor, para
generar vapor, el cual está en íntimo contacto con el material vegetal,
conduciéndolo después al condensador. En este método el tamaño de
la partícula puede ser de un tamiz muy pequeño sin que exista riesgo de
que el vapor lo arrastre, ya que al ser generado el vapor en el mismo
recipiente su presión es menor que la del vapor generado en una
caldera. La desventaja de baja presión se compensa al reducir el
tamaño de las partículas del material vegetal a un tamiz menor que el
utilizado en el método anterior. Exponiendo de ésta manera una mayor
cantidad de micelas que contiene el aceite esencial.

c. Por extracción mixta, el material es soportado sobre una red perforada o

una reja insertada a una distancia sobre el fondo del extractor. La parte
baja del extractor es llenada con agua a un nivel por debajo de la red y
el agua puede ser calentada por alguno de los métodos previamente
mencionados. Las características de este método son: el vapor siempre
está saturado, húmedo y nunca sobrecalentado; el material está en
contacto solamente con el vapor y no con el agua hirviendo.

12
 1.1.7.3 Extracción con solventes volátiles

El factor más importante para lograr el éxito de este método es la

elección del solvente. El solvente debe tener las siguientes características:

a. Ser selectivo, esto es, disolver rápida y totalmente los

componentes odoríferos, con sólo una parte mínima de materia
inerte.

b. Tener un bajo punto de ebullición.

c. Ser químicamente inerte al aceite.

d. Evaporarse completamente sin dejar residuo odorífero.

e. Ser de bajo precio y de ser posible no inflamable.

Entre los solventes que pueden utilizarse se encuentran el éter de

petróleo altamente purificado, hexano, acetona y benceno. El primero se
prepara por rectificación repetida y tiene un punto de ebullición no mayor de 75
ºC. Cuando se utiliza benceno, se purifica en especial por cristalización
repetida; el hexano y acetona también dan muy buenos resultados.

Otro proceso de extracción que utiliza solventes es la extracción con

fluidos en estado supercrítico, este proceso es una operación unitaria que
aprovecha el poder disolvente de fluidos a temperaturas y presiones por encima
de sus valores críticos.

13
 Un fluido supercrítico tiene propiedades entre un líquido y un gas, estas
propiedades incrementan el poder como solvente de un fluido supercrítico y le
proporciona mayor poder penetrante en el material a extraer.

Los solventes supercríticos son superiores a los líquidos para penetrar en

los microporos de una estructura sólida. Algunos de los solventes usados en
este proceso son: etileno, clorotrifluorometano, dióxido de carbono, etano,
propileno, acetona, benceno y agua. Entre ellos el dióxido de carbono es
considerado el solvente supercrítico ideal porque no es tóxico, ni inflamable, es
barato y con una baja temperatura crítica.

Las ventajas de este proceso, comparadas con la destilación y la

extracción con líquidos son:

- Se pueden lograr y controlar una determinada selectividad en el

proceso de extracción.

- El extracto queda virtualmente libre de solvente residual.

- Los fluidos supercríticos pueden usarse para vaporizar sustancias

no volátiles y termolábiles a temperaturas moderadas.

- Se reduce el requerimiento energético comparado con la

extracción por arrastre con vapor.

- Se pueden usar fluidos supercríticos no tóxicos como el dióxido de

carbono en industrias alimenticias y farmacéuticas sin contaminar
el producto.

14
 - La baja viscosidad y la alta difusividad provee ventajas sobre las
velocidades de transporte del solvente.

- El extracto puede ser fraccionado en numerosos componentes,

aún si ellos tienen volatilidades semejantes.

Este proceso conjuga las ventajas de la destilación y de la extracción con

líquidos. Leves cambios en temperatura y la presión en la zona crítica provocan
grandes cambios en la densidad del solvente y por ende en su poder disolvente.

Actualmente este proceso se utiliza en la descafeinización del café y del

té, en el refinamiento y recuperación de aceites y la extracción de lípidos y
colesterol, en la extracción de colorantes y en otras áreas relacionadas con la
extracción y refinamiento de distintos productos naturales.

1.1.7.4 Enflurage

El proceso de enflurage es un proceso de extracción de grasas en frío

que se aplica sólo en algunos tipos de flores delicadas, por ejemplo, el jazmín,
tuberosa, violeta entre otras, y que produce aceites que de ninguna forma se
podrían obtener por destilación. Consiste en poner en contacto las flores con
una capa delgada de grasa dentro de cámaras pequeñas, al desprenderse el
perfume de las flores se fija en la grasa, debido a su gran afinidad y después de
renovar varias veces las flores se dejan los pétalos 24 horas sobre la grasa.
Pasados 60 días aproximadamente, al final de período de recolección, la grasa
llega a estar saturada con el aceite de la flor. La grasa o base consiste en una
mezcla altamente purificada de una parte de sebo y dos partes de manteca, con
0.6 % de benzoína como conservador.

15
 La extracción alcohólica de la grasa olorosa, llamada pomada, da una
solución llamada extracto, eliminando el alcohol por destilación, se produce el
absoluto de enfloración.

1.1.7.5 Maceración

Consiste en remojar el material vegetal, debidamente fragmentado en un

menstruo hasta que este penetre en la primera estructura celular ablandando y
disolviendo las porciones solubles. Se puede utilizar cualquier recipiente con
tapa que no se ataque con el solvente, en este se coloca el material vegetal con
el solvente y tapado se deja en reposo por un período de 2 a 14 días con
agitación esporádica. Luego se filtra el líquido y se exprime el residuo. Si el
material aún contuviera el principio de interés, se repetirá el proceso con
solvente fresco (puro) tantas veces como sea necesario.

1.2 Colorantes naturales

Los colorantes han sido ampliamente utilizados en la preparación de

alimentos y bebidas, y siguen siendo a nivel mundial una contribución
significante en la preparación y procesamiento de los mismos. De igual
manera, desde la antigüedad, antes del desarrollo de la industria de colorantes
de síntesis, el teñido de fibras se hacía con plantas conteniendo colorantes
naturales, llamadas especies tintóreas. (2)

16
 1.2.1 Antecedentes

Los pigmentos naturales para textiles, derivados de plantas, animales y

minerales, han sido usados por miles de años. Históricamente, la mayoría de
las fuentes de colorantes naturales han sido recolectados en estado silvestre.

Sólo algunos pocos, como el índigo y la cochinilla han sido cultivados

comercialmente a gran escala. A mediados de 1800, los químicos empezaron a
producir substitutos sintéticos de colorantes naturales y por 1914, solamente el
cuatro por ciento del índigo utilizado como colorante para textil era extraído de
plantas. Posteriormente, se ha incrementado el interés en colorantes naturales
a medida que los consumidores toman conciencia de los problemas ecológicos
y ambientales relacionados con el uso de colorantes sintéticos.

El uso de colorantes naturales disminuye significativamente la calidad de

afluentes tóxicos relacionados con el proceso de tinción. Los colorantes
naturales son, a menudo, utilizados en fábricas de cáñamo o algodón de
crecimiento orgánico, el cultivo requiere menos sustancias sintéticas que el
cultivo del algodón convencional.

En la actualidad, existe gran cantidad de información que abarca desde

la siembra, hasta la aplicación de los colorantes, tanto de origen natural como
sintéticos.

El área Maya, por su localización en la franja del trópico, cuenta con una
gran diversidad de flora y fauna originada gracias a las grandes diferencias de
altitud y pluviometría.

17
 En ella encontramos cuatro de los colorantes más preciados a través de
la historia humana, los cuales son: el añil que se extrae de la planta llamada
jiquilite, el caracol de la púrpura (Púrpura patula) oriundo de las costas del
Pacífico y golfo del Caribe, el insecto de la grana cochinilla (Dactylopius coccus,
antiguamente Coccus cacti), huésped de las plantas del género Opuntia y
Nopalea y el Haematoxylon campechianum de los yucatecos, que los españoles
denominaron palo de Campeche en alusión al principal punto de procedencia
en las llanuras pantanosas de esa provincia.

Guatemala, desde la época colonial y hasta finales del siglo XIX fue uno
de los principales productores y exportadores de materias colorantes naturales
en el mundo entero. La cochinilla, el añil y el palo amarillo eran los principales
colorantes que se producían.

En los libros antiguos, como los Códices Mayas pueden encontrarse

referencias acerca de los colorantes naturales utilizados por los indígenas en
los años de esplendor de la cultura Maya. Años después, en la época de la
conquista, los mismos españoles llevaron al viejo mundo el añil o jiquilite,
materia tintórea de color azul intenso, que los aborígenes de América Central
usaban para teñir las plumas de sus penachos. En la época colonial, los tintes
naturales y el cacao, ocuparon un lugar importante en la producción nacional.
Se teñían los hilos de lana y algodón con gran variedad de colorantes naturales.

A partir de 1870 aproximadamente, los colorantes químicos empiezan a

ser una fuerte competencia para los tintes naturales. Hasta el año 1920, la
cochinilla se usaba para teñir en color rojo, la mayor parte de la producción se
encontraba en La Antigua Guatemala y Amatitlán.

18
 La necesidad de volver lo natural, en armonía con el medio ambiente, ha
influenciado en los estudios de colorantes naturales obtenidos de plantas y
animales, para ser utilizados en la industria de los alimentos, textiles,
cosméticos y medicamentos, actualmente se han realizado trabajos de
investigación sobre este tema y se han establecido de esta manera
fundamentos científicos.

En el año 1987, Augusto Domínguez, de la Facultad de Ingeniería de la

Universidad de San Carlos de Guatemala, desarrolla el trabajo de investigación
denominado: Extracción de los pigmentos colorantes del tipo Xantófilas
contenido en la flor Tagetes erecta (Marigold), (esta flor es una planta
ampliamente conocida por su alto contenido de colorantes del tipo
carotenoides), utilizando los métodos de saponificación en frío y
saponificación en caliente para determinación de Xantofilas, presentados
por el AOAC. en su 13ª. edición (1980), demostrando que mediante el método
de saponificación en frío se obtienen resultados más altos, que el método de
saponificación en caliente.

En el año de 1999, se realizó un curso de tintorería natural para tejedores

momostecos, el cual fue subvencionado por el PROYECTO ALA 94/81
PRODETOTO, SEP/UE, PROSIGUA, PROART, CEDART y ejecutado por la
FUNDACIÓN GABINA J.M., éste tenía como objetivo publicar un manual para el
tintorero momosteco, en donde se explica el procedimiento del teñido de hilos
de algodón y lana con tintes naturales, especifica el equipo y tipo de instalación
para el tintorero, proporciona una lista de las sustancias botánicas de donde se
extraen algunos tintes, así como los parámetros que deben controlarse en todo
proceso de teñido. Es de hacer notar que todo este procedimiento se realiza de
manera rudimentaria y empírica.

19
 En la sección de Química Industrial del Centro de Investigaciones de
Ingeniería USAC, en la línea de investigación de Extractos Vegetales de la Inga.
Qca. Telma Maricela Cano Morales, se han realizado estudios de Extracción de
Colorantes Naturales.

En el año 2000, Marco Donado, de la Facultad de Ingeniería USAC,

trabajó en la Extracción de carotenoides de la caléndula (caléndula
Officinalis L.) para su utilización como colorante natural en productos
para consumo humano, por dos métodos de extracción a nivel laboratorio,
demostrando que sí es factible obtener carotenos a partir de la flor de
caléndula, usando como solvente acetona y éter etílico. En marzo de 2004,
Henry Estuardo del Cid Vásquez presentó su trabajo de tesis titulado
Extracción a nivel de laboratorio, de los pigmentos colorantes del tipo
flavonoides contenidos en la flor del Subín (Acacia farnesiana L. Willd)
proveniente de un bosque silvestre guatemalteco, en el cual se estudia el
rendimiento promedio de extracto de flavonoides en relación a la cantidad de
materia prima utilizando tres solventes y empleando el método Soxhlet,
determinando mediante pruebas colorimétricas, cromatográficas y
espectrofotométricas, que sí existe presencia de colorantes flavonoides
(principalmente Quercetina, hiperósido, rutina). En octubre de 2004 Byron
Alfredo Quiñónez Figueroa realizó el trabajo titulado Extracción de colorante
de chile jalapeño (Capsicum annum L.) a nivel de laboratorio con tres
solventes con el objetivo de extraer colorantes del tipo carotenoides contenidos
en el chile jalapeño (Capsicum annum L.) en estado maduro a nivel de
laboratorio con tres diferentes solventes provenientes del departamento de
Santa Rosa, específicamente Barberena, utilizando un extractor de cuchillas.
Concluyendo que existe diferencia significativa entre los rendimientos promedio
de cada solvente utilizado en la extracción de colorante del tipo carotenoides
provenientes del chile jalapeño.

20
 1.2.2 Definición

Un colorante natural es toda aquella materia colorante que tiene origen

vegetal o animal.

Para que una sustancia coloreada, sea considerada un colorante, deberá

contener grupos cromóforos llamados auxócromos, los que dan a la sustancia
afinidad con la fibra.

De acuerdo a la investigación de la Doctora Olga Lock Sing de Ugaz, en

su obra titulada Colorantes Naturales, el teñido con colorantes naturales fue
hecho desde tiempos prehistóricos hasta la mitad del siglo XIX, donde las
plantas, animales y minerales fueron las únicas fuentes como agentes
colorantes utilizados para teñir o pigmentar.

Las primeras fibras teñidas fueron usadas aproximadamente alrededor

del año 1000 a.C. estos teñidos fueron simples y fueron los primeros ejemplos
de la aplicación de los llamados colorantes directos o colorantes sustantivos, sin
embargo resultaron de muy pobre solidez, pobre resistencia al lavado y a la luz,
posteriormente fueron desarrollados teñidos más sofisticados, produciéndose
colores con mejor solidez.

La historia esta llena de ejemplos de aplicaciones con aditivos

colorantes. Pinturas en tumbas egipcias que datan de 1500 años a.C.
presentan la manufactura de dulces coloreados. El vino ha sido artificialmente
coloreado por siglos antes del nacimiento de Cristo y, es bien sabido que las
especias y condimentos eran coloreados, por lo menos, 500 años atrás.

21
 Las plantas utilizadas, así como los antiguos procedimientos de teñido
han sido registrados, especialmente por dos historiadores del primer siglo
después de Cristo. Plinio El Viejo, naturista romano, refiere en sus escritos dos
colorantes comunes usados por las tribus Gálicas, el índigo y el glasto, mientras
que el griego Dioscórides describe los colorantes de la rubia para el rojo, del
azafrán (de los estigmas del Crocus sativa) y gualda (de Roseda luteola) para
amarillos, glasto para el azul, Alkanna tinctorea para rojo, entre otros.

Durante la Edad Media, alrededor de 1250 d.C., los procedimientos de

tintura fueron registrados por los monjes medievales. En aquellos tiempos las
mismas plantas eran usadas para teñir y para fines medicinales. El uso de
colorantes en drogas, indudablemente, ha tenido una larga historia, debido a
que el color ha sido asociado con enfermedades y su tratamiento desde la
antigüedad. Muchas prácticas han sido documentadas en papiros egipcios.

Hasta mediados del siglo XIX, los colorantes usados en alimentos,

drogas y cosméticos y textiles, fueron materiales fáciles de obtener de fuentes
naturales como animales, vegetales y minerales. Sin embargo la importancia de
los colorantes naturales disminuyó cuando en 1856, en Inglaterra, William
Henry Perkin, en su intento de sintetizar quinina, oxidó sulfato de anilina con
dicromato potásico y produjo el primer colorante sintético, la mauveína, de color
púrpura. Posteriormente, los químicos alemanes perfeccionaron los colorantes
derivados del alquitrán de hulla, hasta tal punto, que empresas de colorantes
vegetales se arruinaron, totalmente, antes de que finalizara el siglo XIX.

En los últimos 130 años, se han sintetizado varios miles de compuestos

químicos coloridos, de los cuales alrededor de 10,000 son o han sido
producidos a escala industrial, tratando, en muchos casos, de sintetizar
productos idénticos a los naturales, como el β-caroteno.

22
 En 1987 se estimó que la producción mundial de colorantes era
alrededor de 700,000 toneladas, de esta producción, aproximadamente el 50 %
fue destinada a la industria textil y un 2.2 % fue destinado al sector de
alimentos, medicamentos y cosméticos.

Esta proliferación en el uso de aditivos colorantes fue enseguida

reconocida, como una amenaza para la salud. De particular interés fue el
hecho que las substancias conocidas de ser venenosas fueron, a menudo,
incorporadas en alimentos y los tintes fueron frecuentemente usados para
ocultar baja calidad y para añadir peso o consistencia a ciertos productos.
Algunas de estas prácticas fueron deshonestas pero no inherentemente
peligrosas.

Por ejemplo, la harina era frecuentemente coloreada de amarillo para

esconder la suciedad y aparentar un alto contenido de huevo; naranjas
ordinarias fueron inyectadas con tintes rojos para darle una mejor apariencia;
carne vieja era coloreada para hacerla parecer fresca; conservas y jaleas fueron
coloreadas para aparentar un mayor contenido de frutas.

Luego, otros usos de colorantes fueron criminales y a veces mortales.

Era un hecho que poco o ningún control era aplicado sobre la pureza de los
agregados a los alimentos y que colorantes encontrados insatisfactorios para
textiles eran, a veces, deliberadamente canalizados en productos alimenticios.
Debido al creciente interés público sobre tales prácticas, algunas mediciones
fueron eventualmente tomadas por los manufactureros americanos de
alimentos para control de su propia industria.

23
 En 1900, se investigó por parte del gobierno estadounidense la relación
entre materias primas colorantes y la salud, con el fin de establecer un principio
para gobernar su uso y de esta manera controlar las prácticas de manufactura.
Como resultado de esta investigación se encontró que muy pocos colorantes
habían sido evaluados sobre sus efectos en la salud y que muchos de ellos,
habían sido evaluados impropiamente. A veces, la verdadera identificación
química de un colorante estudiado era desconocida. En otros casos la pureza
del colorante era incierta. Más a menudo, los procedimientos usados para su
análisis eran ingenuos. De esta manera, se formuló la regulación que puso fin al
uso indiscriminado de materias colorantes peligrosas e impuras en alimentos.
Entre otras cosas, esta nueva legislación requirió que solamente colores de
composición conocida, examinados fisiológicamente y que no mostraban
resultados adversos, podían ser usados.

Debido al incremento de las necesidades de la industria, durante las

siguientes tres décadas, hubo un crecimiento continuo en el uso y número de
aditivos colorantes. Como resultado de estos esfuerzos, se culminó con la
publicación en 1940 de la declaración de servicios y regulaciones en Alimentos,
Drogas y Cosméticos, la cual listaba colorantes específicos que podían ser
usados junto con especificaciones y regulaciones relacionadas con su
manufactura, clasificación, certificación y venta.

Debido a los serios problemas generados por el efecto de los tintes

sintéticos en el medio ambiente y la salud humana, se ha renovado el interés en
los colorantes naturales. El aumento de la demanda del tinte natural en la
industria de tintorería, así como en la de alimentos, cosméticos y medicinas
entre otras ha motivado el incremento del número de países en que se está
dando el renacimiento del cultivo y producción del mismo

24
 1.2.3 Distribución de los colorantes naturales (2)

Los colorantes naturales pueden ser clasificados, según su naturaleza

química en diversos grupos. Como fuentes naturales de estos colorantes se
pueden considerar las plantas superiores, las algas, hongos y líquenes, algunos
insectos, así como algunos organismos marinos invertebrados.

La función de diversos pigmentos que se encuentran en forma natural en

plantas y animales es muy variada, tal es el caso de algunos fenoles que
absorben la luz ultravioleta y pueden desempeñar la función de guiar a los
insectos a las flores para realizar la polinización. Las quinonas (compuestos
fenólicos) pueden actuar como sustancias tóxicas para defensa, un caso digno
de mencionar es el gusano telero (Laetillia coccidivora Comstock), el cual ha
superado los efectos tóxicos del colorante, cuando consume el pigmento
enmascara la toxina y luego la utiliza al regurgitar el pigmento sobre su agresor.
(Harbone, 1985)

Aunque las funciones antes mencionadas son casos puntuales, es

importante señalar que la gran diversidad de pigmentos cumple funciones
específicas dentro de la naturaleza, ya que algunos pueden actuar como
inhibidores para la germinación de semillas, hormonas de crecimiento,
atrayentes o disuasivos.

Son muchas las plantas superiores que producen colorantes; sin

embargo la concentración de estos es mínima, lo que no permite una rápida y
económica extracción y en consecuencia son relativamente pocas las que
tienen gran importancia comercial como fuente de colorantes.

25
 Debido a esto, la elección de una planta con tales fines es determinada
por consideraciones económicas; el material debe estar disponible en suficiente
cantidad a un precio razonable, el proceso para obtener el colorante no debe
ser excesivamente complejo y costoso y el producto final debe cubrir las
perspectivas industriales y los requerimientos legales de los gobiernos.

Otro grupo considerado como fuente de colorantes naturales son las

algas, estas deben su color a las ficobilinas, las cuales se clasifican en
ficocianinas y ficoeritrinas de color azulado con fluorescencia roja y de color
rojizo con fluorescencia naranja brillante, respectivamente. El rango de color en
el que se encuentran es bastante amplio, dependiendo de la fuente de
biliproteina y el medio en el cual es aislado, proporcionando así una variedad de
colores naturales en las algas.

Las algas también contienen carotenoides, especialmente, β-caroteno y

cetoderivados como cantaxantina, astaxantina y equinenona. Los hongos,
particularmente la parte correspondiente al cuerpo fructífero, están fuertemente
pigmentados. El número de pigmentos diferentes, probablemente, excede los
1000; aunque algunos son de naturaleza química común a las plantas
superiores (siendo más notorio el caso de la betalaínas y en menos extensión
los carotenos y quinonas) muchos de ellos no han sido encontrados en algún
otro organismo biológico

Los líquenes han sido intensamente utilizados para el teñido desde

tiempos antiguos. Dentro de los compuestos coloreados que ellos producen
están las quinonas (antraquinonas, naftoquinonas y terfenilquinonas)
dibenzofuranos (ácido úsnico y derivados) xantonas, depsidos y depsidonas,
carotenoides y xantófilas, así como fenoxazinas.

26
 Entre los líquenes se pueden destacar las especies del género Xanthoria,
cuya coloración naranja y naranja – rojizo brillante es debida a la presencia de
antraquinonas y del género Cladonia, en los cuales los colores rojo a rojo-
sangre se deben a la contribución de las naftoquinonas presentes.

Dentro de los organismos marinos invertebrados, los crustáceos y

moluscos quizás son los que proveen las más diversas fuentes de colorantes,
muchos de ellos aún no caracterizados y que serían de potencial interés
económico.

De los insectos se destaca la cochinilla por su contenido de ácido

carmínico, así como el kermés que produce ácido kermésico, ambos
compuestos son de naturaleza antraquinónica. Las pterinas contribuyen a los
colores blanco, crema, amarillo y rojo de muchos insectos. Por ejemplo, los
colores de las mariposas y avispas son a menudo, formados de pterinas, como
las xantopterinas que proporcionan un color amarillo brillante a muchas avispas;
otras pterinas contribuyen también a los colores: amarillo, naranja y rojo de
crustáceos, peces, anfibios y reptiles.

Las flavinas, como la riboflavina o vitamina B2, excepcionalmente,

producen la pigmentación amarilla de algunos organismos marinos
invertebrados.

Las fenazinas contribuyen al color de algunas bacterias, por lo general en

las especies de Pseudomonas y Streptomices, mayormente amarillo y
ocasionalmente azul y azul violeta.

27
 Las fenoxazinas se han encontrado en algunas bacterias Streptomices,
en hongos Polyporus cinnabarimes y en líquenes como Rocello tinctoria y otros
que contienen orceína.

Se estima que el obtener colorantes naturales puros puede costar de 30

a 100 veces más que el producir colorantes sintéticos certificados, reduciendo
con ello las posibilidades de explotación de estas fuentes naturales, sin
embargo, las estrategias biotecnológicas en la producción de colorantes
naturales que se han desarrollado en los últimos años son de gran importancia
y podrían otorgar una serie de ventajas, entre ellas, las económicas.

1.2.4 Clasificación de colorantes naturales utilizados en el teñido de

fibras (6)

Los colorantes naturales se pueden agrupar en diferentes formas: por

tipo de teñido, composición química, características físicas, etc.

1.2.4.1 Características físicas

a. Colorantes directos:

Son los grupos de colorantes de antocianina, carotenoides derivados de

calcona. Los colorantes son obtenidos de una solución acuosa y esta
extracción se usa directamente para teñir o pintar en frío o en caliente. A
veces se usa sustancias auxiliares como ácidos o sales. Como ejemplo se
tiene la flor de cártamo, cúrcuma, azafrán, cempoalxóchitl, etc.

28
b. Mordentados:

Este tipo de colorantes no tienen por sí mismos el poder de entintar, sólo

con un tratamiento especial de sales metálicas solubles que reaccionan
sobre la fibra. Esta técnica se aplica a la mayoría de las plantas que dan
color como la gardenia, cempoalxóchitl, rubia, cochinilla, palo de Campeche
y de Brasil, etc.

c. Tipo de reducción:

Derivados del indol, estas materias colorantes se encuentran en el

interior de los cuerpos vegetales o animales, pero son insolubles, para
darles solubilidad, se les aplica una sustancia reductora, obteniéndose una
solución incolora que se aplica a la fibra y después, mediante una oxidación
aparece el color, como ejemplo esta el añil.

d. Pigmentos:

Polvos de materiales minerales, son insolubles que no tienen poder de

entintar, por lo cual solo pueden utilizarse mezclándose con otro cuerpo,
como el engrudo, cola, resina, caseína, clara de huevo, etc., con los que se
forma una pasta para pintar.

29
 1.2.4.2 Usos tradicionales

a. Untado directamente sobre la fibra: se aprovecha directamente el color de

la fibra.

b. Exprimidos: el caracol púrpura (caracol de mar) da un color que aparece

por oxidación con el aire.

c. Aprovechamiento de colorantes naturales rojos de la cochinilla mediante la

aplicación de mordientes y calor.

d. Cocción de colorantes: por extracto de cocción aparecen varios tono con el

uso de mordientes, como por ejemplo, la flor de dalia.

e. Separación del colorante: las sustancias que permiten su separación

pueden ser ácidas o cenizas , como la flor de cártamo.

f. Reducción y oxidación como el añil flora.

g. Mordentes naturales: se sumerge la fibra previamente teñida con extractos

de colorantes en agua de lago o pozo, que contenga alumbre, tequezquite o
hierro, el color aparece con diferentes tonos según las sales minerales que
lo fijan.

30
 1.2.4.3 Características químicas

a. Colorantes flavonoides. son cuatro grupos principales:

Tabla I. Colorantes flavonoides

GRUPO COLOR PROCEDENCIA
Flavonol Amarillo Bidens
Flavonona Crema amarillo Perejil
Calcona Rojo y amarillo Cártamo
Antocianina Rojo y Violeta Tinantía

b. Colorantes carotenoides: son dos grupos principales:

Tabla II. Colorantes carotenoides

GRUPO COLOR PROCEDENCIA
Caroteno Anaranjado Zanahoria
Xantofila Amarillo Achiote

c. Colorantes tipo quinona: son dos grupos:

Tabla III. Colorantes quinónicos

GRUPO COLOR PROCEDENCIA
Antraquinona Rojo Rubia Cochinilla
Naftoquinona Violeta Henna

31
d. Derivados de indol: color azul proveniente del añil.
e. Derivados de delfinidina: color azul proveniente de la hierba de pollo.
f. Derivados de dihidropilano: color rojo y violeta proveniente del palo de
Brasil.
g. Grupo betaleína: color rojo proveniente del betabel.
h. Grupo xantonas: color amarillo proveniente de algunos líquenes.
i. Grupo tanino-pirogalol y catecol: color café proveniente del castaño.
j. Grupo clorofila: color verde proveniente de las plantas verdes.

1.2.5 Uso artesanal de colorantes naturales en el teñido de fibras

naturales (7)

En la actualidad muchas comunidades indígenas, están elaborando sus

tejidos con hilos teñidos con plantas tintóreas, utilizando métodos artesanales
sencillos y que les proporcionan buenos resultados.

1.2.5.1 Fibras textiles naturales

Es el material con el cual se fabrican los hilos y los tejidos. Se encuentran

en la naturaleza como parte de las semillas, en los vegetales o en el pelo de los
animales. Muchas fibras se encuentran disponibles en el mercado y son de
origen vegetal, animal o mineral.

32
 1.2.5.1.1 Fibras de origen vegetal

La celulosa es el alto polímero natural más extendido e importante y

constituye el material de sostén de las células vegetales. Todas las fibras
vegetales como el algodón, lino, yute, cáñamo y ramio, contienen un sesenta y
noventa por ciento de celulosa. Asimismo, las fibras de seda artificial o rayón y
la lana vegetal están formadas exclusivamente por celulosa regenerada, la cual
se obtiene por disolución y precipitación de la celulosa natural.

Las fibras vegetales se clasifican en fibras de semilla como el algodón y en

fibras de líber, estas últimas se subdividen en fibras de tallo como el lino y en
fibras de hoja como el henequén o yute.

1.2.5.1.2 Fibras de origen animal

Las fibras proteínicas más importantes son la lana y la seda. Así como la
celulosa funciona en las plantas, las proteínas serán el sostén de los
organismos animales. A este grupo pertenecen la queratina (lana, pelo,
plumas) y la fibroína de la seda.

La lana procede principalmente de la oveja y en menor cantidad del pelo de

camello, cabra, llama y conejo. Su calidad varía con relación a la raza,
alimentación y medio ambiente de las especies ovinas.

La seda es el producto de secreción del gusano Bombyx Mori. Esa

secreción líquida se va solidificando al aire, dando finalmente una fibra enrolada
de unos mil metros de longitud.

33
 1.2.5.1.3 Fibras de origen mineral

A este grupo pertenecen las fibras de alginato, vidrio, amianto y las diversas
fibras metálicas. Estas fibras son de importancia secundaria, en la industria de
los textiles.

1.2.5.2 Teñido vegetal o natural

Se le llama así porque para realizarlo se utilizan sustancias vegetales

colorantes y astringentes o tánicas (sustancias que estrechan y fijan colores),
que se encuentran en las hojas, flores, cortezas, raíces, frutos de algunos
vegetales.

Estas sustancias tienen la propiedad de insolubilizar naturalmente la gelatina

en la fibra de algodón o lana, de tal manera, que la transforman en una
sustancia no hidrolizante, que lo hace ser un tinte sustantivo, es decir no
necesita mordiente o fijador, en cambio otras necesitan ayuda de fijador, para
que el tinte se fije en la fibra.

1.2.5.3 Tintes vegetales

Actualmente se están utilizando distintas plantas para realizar el teñido de

fibras. Las partes de la planta que se utilizan en el proceso de teñido, son
generalmente hojas, corteza, flores, frutos, cáscaras del fruto, semillas y raíces.
El hecho que se utilicen plantas, no significa que se afecte el equilibrio
ecológico, la mayor parte de materia prima para tinción son desechos de las
plantas, por ejemplo, del aguacate se utiliza la pepita, del coco la cáscara.

34
 En la siguiente tabla se enlistan los nombres de algunas plantas, que se
utilizan para teñir, el nombre científico y el color que proporcionan, la
combinación de algunas plantas produce una coloración distinta, dependiendo
la proporción de cada una de ellas. Este proceso es considerado como un arte,
debido a la forma en que se combinan las plantas en el momento de teñir.

Tabla IV. Especies utilizadas en el teñido de fibras

NOMBRE NOMBRE COLOR PARTE
UTILIZADA
COMÚN CIENTÍFICO
Achiote Bixa Orellana L Naranja Semilla
Aguacate Persea americana Mill Café Pepita
Albahaca Ocimum basilicum L. Verde amarillento Hojas
Flores
rosado pálido
Alcachofa Cynara scolymus L. Verde Hojas
Aliso Agnus arguta Amarillo/Café Hojas/Corteza

Añil Indigofera tinctoria Azul Hojas y tallo

Arrayán Myrica splendens Verde, amarillo Hojas y ramas
tiernas
Banano Musa acuminata Café Tronco o sepa
Barba de León Cuscuta corymbosa Amarillo/Naranja Guías
Bejuco de Sangre Machoerium sp Rojo Tallo
Berro Nasturtium officinale Verde Hojas y tallos

Boldo Peurnus boldus Amarillo Hojas

Buganvilea Bougainvillea glabra Rosado Flores

Café Coffea arabica L. Café Fruto ó
cáscara/corteza
Caléndula Calendula officinalis L. Amarillo Flores
Camotillo Curcuma Longa L. Rojo Raíz
Canguro Rourea glabra Rojo Raíces

35
Continuación
Canté Caesalpinia violacea Rojo Corteza
Standl
Caoba Swietenia macrophylla Rojo Corteza
G. King
Cebolla Allium cepa L. Amarillo Cáscaras exter-
nas coloreadas
Cedro Cedrela mexicana Morado/Beige Fruto/Corteza
Cereza Malpighia glabra L Morado/Café Fruta/Corteza
Chacahuanté Sickingia salvadorensis Carmín corteza
Standl
Chalchupa Rauvolfia tetraphylla Azul oscuro Fruto
Chaperno Lonchocarpus rugosus Púrpura Corteza
Chilca Thevetia peruviana Amarillo /Verde Flor/Hojas
Cinco negritos Lantana camara Amarillo Hojas y ramas
Cochinilla o Dactylopius Coccus Rojo, Rosado Cuerpo del
insecto(hembra)
Grana
Coco Cocos nucifera Café rojizo Cáscara
Coralillo Erythrina berteroana Amarillo Corteza
Encino Quercus sp Café Fruto,corteza y
flor
Eucalipto Eucalyptus globulus Amarillo/verde Hojas/corteza
Flor de Muerto Tagetes erecta L. Amarillo canario Flores
Granada Púnica granatum Amarillo Cáscara del
Fruto
Guayaba Psidium guajava L. Amarillo/Café claro Hojas/Corteza
Higo Ficus carica L. Amarillo Hojas y ramas
tiernas
Hinojo Foenicum vulgare Mill Verde Hojas y tallos
Icaco Chrysobalanus icaco Negro Hojas/fruto
Jiquilite Justicia aurea Azul Hojas y tallos
Lengua de vaca Curatella americana Amarillo Hojas y raices

36
Continuación
Madre de flecha Apoplanesia paniculata Amarillo Corteza
Maíz Zea mays l. Café, amarillo claro Pelos del elote
Mangle Avicennia germinans Rojo Corteza
Manzana rosa Syzygium jambos Café Corteza
Mejorana Mejorana hortensis L. Verde Hojas y flores
Nacascolo o Caesalpinia coriaria Negro Fruto
dividivi
Nance Byrsonima crassifolia Café amarillo Corteza
Cáscara
Color encarnado
Tinta verde Fruto verde
Nogal Negro Juglans guatemalensis Café Carnaza del
fruto
Ojo de Venado o Mucuna pruriens nigra Negro Semilla
de buey
Palo de Brasil Haematoxylon brasiletto Rojo Corteza
Palo de Hematoxyliun Rojo a púrpura Corteza
Campeche Campechanun

Palo de culebra Lafoensia punicifolia Amarillo Corteza

Palo de Mora Chlorophora tinctoria L. Rojo/verde Corteza
Papa Solanum tuberosum L. Violeta/azul Cáscara
Perejil Petroselinum crispum Amarillo verde Hojas y tallos
Pericón Tagetes lucida Cav. Verde olivo Hojas
Pitaya Hylocereus undatus Rojo Fruto
Recino o Ricinus communis L. Marrón-caoba Frutos secos
Higuerillo
Romero Rosmarinus officinalis Verde amarillento Hojas y ramas
L. secas

Rosa jamaica Hibiscus sabdariffa Cafe/rosado Corteza/flores

Sábila Aloe vera (L.) Purpura Hojas

37
Continuación
Sábila real Salvia officinalis L. Amarillo Hojas
Sacatinta Jacobina spicigera Azul lila Tallos y hojas
Sauco Sambucus Canadensis Lila morado Hojas/Fruto
Subín Acacia farnesiana L Amarillo Flores
Tamarindo Tamarindos indica L. Amarillo Hojas, semillas
Té Camellia sinensis Verde café Hojas
Verbena Verbena officinalis H.B.K. Amarillo Hojas y tallos
Xilil Ardisia paschalis Donn Lila Fruto
Zanahoria Daucus carota L. Naranja/amarillo Fruto/tallos y
hojas verdes
Fuente: datos obtenidos del Manual del Tintorero Momosteco, libro de Colorantes
Naturales de la doctora Olga Lock Sing y Diccionario de Plantas Útiles de Guatemala de
Jorge Morales Alistum.

1.2.5.4 Características de algunos tintes

a. Palo de campeche: conocido también con el nombre de Palo de tinte,

hay en el sur de México y Petén, Guatemala. Su madera se emplea en
tintorería para producir colores negros, azules y otras combinaciones
dependiendo de las sales que se utilicen. Por infusión en agua da un
bello color oscuro que mezclado con goma sirve para tinta de escribir,
cocida el color se torna rojo oscuro y púrpura según la cantidad de agua
que se utilice.

b. La cochinilla o grana: es un tinte rojo que se extrae de un insecto que se

da en los nopales de la tuna, se utiliza para teñir lana por los buenos
resultados. Mezclado con chinchigrito se obtiene un color más oscuro.
Si se mezcla con cinco negritos el color se torna más rojo vivo. Los

38
 países donde se produce son México y Perú, en la época colonial
Guatemala fue exportador de este tinte animal.

c. Barba de león: es una planta de las llamadas parásitas, es un tinte

prehispánico. Si se mezcla con zanahoria da un color anaranjado.

d. Chinchigrito o chinchicre: los tintoreros momostecos lo usan como fijador

o bien para darle otro tono de color al tinte químico, es un pequeño
arbusto, existe en abundancia en la región de Momostenango.

e. Aliso: árbol que crece en la zona de Momostenango, se utiliza la corteza,

que es de color castaño rojizo. Las fibras se tiñen primero de color
amarillo y luego en un segundo baño de lejía fría de cenizas y agua las
fibras se tornan de color café.

f. Nance: especie nativa de Centroamérica en bosques secos y tropicales.

En Guatemala se encuentra en Alta Verapaz, el Quiché, Huehuetenango,
Quetzaltenango, San Marcos. La corteza de los árboles, es dura y
flexible, contiene ácido tánico, proporciona agradable color amarillo y a la
vez es fijador. Se utiliza en la industria de cueros, tiñe el algodón de
color café claro, la cáscara del fruto se usa para teñir hilos de algodón de
color encarnado, del fruto verde se obtiene una tinta verde.

g. Sacatinta: es el añil momosteco, los tintoreros lo conocen como raxabal y

lo usan como fijador con agua de ceniza en los tintes de anilina de color
negro café, especialmente en la jerga. La planta entera se utiliza para
teñir fibras de color azul, combinada con agua de ceniza y una solución
de índigo en polvo.

39
h. La granada y nogal: se usa la carnaza del fruto. La granada es
abundante en Momostenango, no así el nogal negro, pero hay en
abundancia en la región de Chimaltenango.

i. Tamarindo: se cultiva en la zona cálida de Chiquimula, El Progreso,

Escuintla, Jutiapa, Petén, Retalhuleu, San Marcos, Santa Rosa,
Suchitepéquez y Zacapa. Las hojas producen un colorante amarillo, se
usa como mordiente, el polvo de la semilla se usa en la industria textil
para acabado del algodón, para curtir cueros y estabilizar ladrillos.

j. Sábila: planta nativa del norte de África, en Guatemala se encuentra

plantada en algunos lugares de la bocacosta del Pacífico, en el oriente y
altiplano. Las hojas se usan para hacer fibra y barnices, se prepara un
colorante que da color púrpura a la seda, negro a la lana y rosado al lino.

k. Salvia real o salvia santa: en Guatemala se encuentra cultivada en el

altiplano central, se acostumbra sembrar como planta aromática,
cosmética y para artesanías, produce un colorante que da a la lana un
color amarillo con un mordiente de alumbre y verde-grisáceo con un
mordiente de hierro.

l. Romero: nativo de la cuenca mediterránea del sur de Europa, se cultiva

comercialmente. En Guatemala se cultiva en el altiplano central y norte
del país. Las ramas frescas y secas son aromáticas, se usan para
aromatizar platillos, arreglos florales. Colorea la lana de color verde
amarillento.

40
m. Plátano o banano común: del tronco del banano se obtiene un líquido
que mancha de color negro, rico en taninos. Del banano africano que se
cultiva en jardines y en lugares muy húmedos, se extrae por incisión en
su tronco un color violeta muy firme. Mezclado con ácidos toma un tinte
carmín, con sosa y potasa más unas gotas de ácido toma un color ocre-
amarillo, con ácido tartárico, oxálico o sulfúrico da un líquido que colorea
los tejidos de color rosa vivo al secarse, con la sal común se obtiene un
tinte lila.

n. Milenrama: planta nativa de Europa y Asia, adaptada a climas templados,

en Guatemala se encuentra en Chimaltenango, Guatemala,
Huehuetenango, Jalapa, Quetzaltenango, Suchitepéquez, Sacatepéquez,
San Marcos, Sololá y Totonicapán, de las flores se obtiene un colorante
que tiñe de amarillo la lana con un mordiente de alumbre, toda la planta
colorea de verde olivo con un mordiente de hierro.

o. Mejorana: nativa y muy frecuente de bosques húmedos y secos de

América tropical y el Caribe. En Guatemala se le conoce con el nombre
de Origanum majorana, una especie de la familia lamiaceae, se
encuentra cultivada en Alta Verapaz, Chiquimula, Escuintla,
Huehuetenango, Izabal, Jalapa, Jutiapa, Quetzaltenango, Retalhuleu,
San Marcos, Sololá, Suchitepéquez y Zacapa. Las hojas y flores tienen
uso culinario, aromático, medicinal, ornamental, cosmético y produce un
colorante que tiñe de verde la lana con mordiente de alumbre y verde
olivo con mordiente de cromo.

p. Guayaba: nativa de América tropical, se encuentra en bosques húmedos

y secos, en Guatemala se cultiva en todo el país, particularmente en Baja
Verapaz, Chimaltenango, Chiquimula, Quetzaltenango y Totonicapán.

41
 La fruta madura se come fresca, cocida y en jalea. La corteza es
amarilla y se utiliza para curtir pieles y teñir seda y algodón.

q. Chalchupa: nativa de México y Centroamérica, Caribe y norte de

Sudamérica. En Guatemala se ha descrito en Baja Verapaz,
Chimaltenango, El Progreso, Escuintla, Huehuetenango, Izabal, Jutiapa,
Petén, Retalhuleu, San Marcos, Santa Rosa, Suchitepéquez y Zacapa.
El fruto de este arbusto produce un colorante azul oscuro.

r. El aguacate: se usa la pepita.

s. Encino: se usa el fruto o bola de encino, la corteza y las flores. Tiñen de

un color café oscuro de distintas tonalidades.

t. El nance, nogal, bola de encino, sacatinta, chinchigrito y el añil: son tintes

sustantivos, es decir, que no necesitan fijador o mordiente, la cualidad
de estas sustancias botánicas es que son tintes y mordientes a la vez.

1.2.6 Acidez y alcalinidad de los tintes naturales

El grado de acidez o alcalinidad del baño de tinte es muy importante, ya

que afecta el comportamiento que puede tener el tinte. Por lo que es necesario
tener un debido control de la acidez del baño de teñido, para ello se utilizan
potenciómetros o papel medidor de pH.

42
 1.2.6.1 Ácidos suaves

Los ácidos de origen natural que pueden utilizarse en el teñido de

fibras son:
a. Limón
b. Lima
c. Crémor tártaro
d. Vinagre

Debe evitarse el uso de ácidos fuertes, es decir ácidos con pH menor de

3, ya que estos afectan el proceso de teñido.

La lana, seda y otras fibras animales, se tiñen generalmente con baños

ácidos. Ahora bien el algodón puede ser dañado por los ácidos fuertes por lo
que se recomienda no utilizarlos. El pH se debe mantener arriba de 5 durante
el teñido del algodón y luego neutralizarlo, lavándolo con un jabón neutro que
tenga pH de 7.

Los jabones y detergentes, carbonato y bicarbonato de sodio son álcalis

suaves. El carbonato de sodio se utiliza para ajustar el pH del baño de tinte del
añil. Otros álcalis fuertes incluyen la lejía de ceniza o el hidróxido de sodio.
Cuando cualquier fibra haya sido expuesta a un baño alcalino fuerte debe
neutralizarse con un jabón neutro, de otra manera las fibras perderán su brillo
natural y resistencia. El añil es el único tinte que necesita un pH arriba de 10.

43
 1.2.7 Mordientes

Son sustancias químicas naturales o sintéticas que preparan la fibra para

recibir el tinte, es decir, fijan el tinte para que el color no se destiña. Cuando el
método de tinción que se utiliza es indirecto se agrega un mordiente.
Actualmente se utilizan por su acción más enérgica, sales metálicas como la
piedra de alumbre, crémor tártaro, carbonato de sodio, hierro y otros.

Los tintoreros momostecos en el proceso de teñido artesanal, utilizan

también ceniza, de la cual preparan una lejía para teñir con añil, sacatinta.

Si el método utilizado en el teñido es directo en agua caliente, este se

realiza con plantas que son ricas en sustancias tánicas las que actúan como
mordientes naturales.

1.2.8 Taninos

El tanino es una sustancia astringente contenida en algunos vegetales,

que sirve para adherirse en las fibras y que también se usa para curtir pieles.
Se clasifican en fuertes y suaves; entre los taninos fuertes se tiene el encino, la
granada, el nance, el aguacate y entre los taninos suaves el nogal negro y el
aliso. Los taninos son también tintes al mismo tiempo de ser mordentes o
fijadores.

El nombre tanino deriva del francés TANIN y este del germánico TAN
TANNA. Químicamente, se define como cualquiera de los principios inmediatos
vegetales, terciarios (C,H,O), de sabor astringente, que reaccionan en forma
fácil con las sales de hierro originando productos de un color azul, negro o
verde. (8, 9)

44
 Por la propiedad que tienen los taninos de reaccionar en forma fácil con
sales férricas, proporcionando productos de tonos muy variados, éstos han sido
utilizados universalmente en la tintorería y por ende en la elaboración de tintas.

1.3 El Pericón (10,11)

Tagetes lucida Cav.

El género Tagetes esta compuesto de un grupo de especies aromáticas,

algunas de las cuales son comúnmente llamadas maravillas. Además, varias
especies se han establecido bien horticulturalmente, y existen registros de su
cultivo y uso extensivo hecho por las tribus indias de México y Sudamérica el
que se extiende más allá del tiempo de los conquistadores.

Según Kaplan (1960), Fuchs fue el primero en aplicar el nombre Tagetes

que después fue adoptado por Linneo. Parece haber alguna evidencia que
apoya la afirmación frecuente de que Tagetes se derivó de Tages el nombre de
un dios etrusco.

El rango de distribución natural del género se extiende desde el suroeste

de los Estados Unidos hasta Argentina, y el área de su mayor diversidad es en
el Sur y Centro de México.

45
 1.3.1 Nombres comunes

Es llamada comúnmente pericón (algunas veces hipericón); liya

(Totonicapán), iyá, jolomocox, ucá (el Quiché), hierba de San Juan
(Quetzaltenango) y ey’ ya’ en cackchiquel. Algunas veces es llamado periquillo
en México. El nombre pericón, está bien establecido en Guatemala.

1.3.2 Distribución y hábitat natural

Es una planta originaria de Mesoamérica. Crece en su mayor parte en

terrenos de gramíneas, campos abiertos, a orillas de bosques de pino y
encinos, algunas veces sobre rocas secas de las laderas de los cerros.

Standley (1976), reporta su distribución entre los 1000 y 2000 metros

sobre el nivel del mar, sin embargo Gohler (1992), reporta haberla encontrado
hasta los 2450 metros sobre el nivel del mar.

Se distribuye desde el noroccidente de México hasta Honduras. Con

base en la Flora de Guatemala (Nash y Williams, 1976), se distribuye
principalmente en el altiplano central y occidental, en los departamentos de
Chimaltenango, Guatemala, San Marcos, Huehuetenango, Quiché,
Sacatepéquez, Jalapa y Petén, aunque en este último departamento, las
condiciones climáticas necesarias para que la planta crezca a campo abierto no
son las favorables.

Un estudio hecho por el Ing. Vicente Martínez, indica que la planta se

encuentra en un ámbito altitudinal de 1350 a 2625 msnm, con una mayor
abundancia en áreas arriba de los 1800 msnm.

46
 La temperatura promedio anual de las regiones está entre 15 a 20 ºC y
la precipitación media anual de 1000 a 1500 msnm, textura del suelo arcillosa,
característicos de bosques de pino. Las zonas de vida donde crece son
Bosque muy húmedo montano bajo subtropical, bosque húmedo montano bajo
subtropical y bosque húmedo subtropical (templado).

1.3.3 Descripción botánica (4,11)

Es una planta perenne, herbácea de base leñosa con ramas erectas que
alcanzan entre 30 y 95 cm de altura, fuertemente aromática, crece a partir de
una base corta gruesa y leñosa, cimosamente ramificada arriba; hojas
opuestas, sesiles lineales u oblongolanceoladas, 5-10 cm de largo, obtusa o
agudas en la base, finamente dentadas, con numerosas y pequeñas glándulas
esparcidas; inflorescencias en cabezuelas con cimas densas o abiertas planas
en la copa, involucro cilíndrico, 9-10 mm de largo, filarios de 5-7, subulados en
el ápice, con numerosas glándulas pequeñas y esparcidas; flores del radio
femeninas, comúnmente 3 flabeliformes, de 3 mm de longitud, truncadas,
estigma bifurcado pubescente; flores del disco perfectas de 5-7, la corola de 5-6
mm de longitud, estigma bifurcado, sin pubescencia; aquenios de 6-7 mm de
longitud, estriados; papus escamoso de 5-6, dos de ellos setiformes de 3 mm
de largo, los otros dos una tercera parte de longitud, oblongos, obtusos (Nash y
Williams, 1976).

47
Figura 1. Pericón (Tagetes lucida cav.)

Fuente: Cáceres- Plantas de uso medicinal en guatemala

Dibujo basado en Midence en House y Lagos-Whitte. pp.305

Se obtiene principalmente por recolección de la planta silvestre, los grupos

que se dedican a su obtención manejan en forma rudimentaria los campos de
crecimiento silvestre. Por su eficacia en el tratamiento de afecciones
gastrointestinales y su potencial en el mercado de los aceites esenciales, se
esta promoviendo su domesticación y cultivo a nivel nacional. Su cultivo es
principalmente por semilla, que germina a los 15-20 días, se trasplanta a los 2-3
meses a una distancia de 40-50 cm; florece a los 5-6 meses. La parte utilizada
del Pericón son las sumidades florales en época de floración, hojas y tallos, que
ocurre entre el mes de junio a septiembre, se corta por encima del suelo, se ata
en ramilletes y se les deja secar al aire en un lugar oscuro a temperaturas no
mayores de 35 ºC, se separan las hojas y flores por aporreo. El secado reduce
el peso en una relación 3.5-4:1.

48
 1.3.4 Usos medicinales

Es una planta de uso medicinal bastante antiguo, y arraigado en algunas

tradiciones populares. Se utilizan por vía oral las hojas y flores preparándolas
en infusión o cocimiento, principalmente para el tratamiento de diarrea,
disentería, flatulencia, parasitismo intestinal, dolor de estómago, indigestión,
inflamación, nauseas, vómitos, malaria, para aliviar el parto, dolor menstrual,
tratar anemia, inflamación de ojos, mordedura de escorpión, hepatitis,
paludismo, etc.

Hipócrates recomendaba el Pericón como remedio antiinflamatorio y

refrescante. Sebastián Kneipp recomendaba su aceite en las contusiones,
dolores artrósicos, neurálgicos y procesos dolorosos. Para ello recomendaba
macerar flores frescas en aceite de oliva. Se le atribuyen propiedades
antiespasmódicas, antiinflamatorias, antidiarréicas, febrífugas, antisépticas,
antibacterianas y digestivas diuréticas.

Es utilizado como saborizante y aromatizante en elotes y güisquiles.

Para agregar al agua en el baño de niños. Es usada en rituales religiosos como
incienso y se quema para ahuyentar zancudos y moscas.

Juega un papel importante en algunas creencias tradicionales, por

ejemplo en el altiplano occidental de Guatemala se dice que debe ser cortada
antes del 24 de junio (día de San Juan), porque después es envuelta por el
demonio, de ahí uno de sus nombres comunes Hierba de San Juan.

49
 1.3.5 Composición química

Las hojas y flores contienen aceite esencial (limoneno, β-ocimeno, β-

cariofileno, mirceno, acetol, alilanisol, esdragol (metilchavicol), éter metílico de
eugenol, tagetona, dihidrotagetona, tetrahidrotagetona y linalool), alcaloides
cuaternarios, flavonoides (quercetagetina, patuletina), saponinas,
leucoantocianinas, ácido gálico, poliacetileno, glicósidos cianogénicos,
cumarinas (dimetilalileter de 7-hidroxicumarina, 7-metoxicumarina y 6,7,8-
trimetoxicumarina), derivados de tiofeno, α-tertienilo, poliacetilenos (5-(3-buten-
1-inil)-2,2`-bitienol), goma, dextrina, grasas, pectina, tres resinas acídicas,
taninos y sales minerales.

A principios del siglo, en 1904, el estudio de los constituyentes del

Pericón comenzó con la determinación del aceite esencial, taninos y pigmentos
naturales. También se encuentran resinas, en la parte aérea de la planta están
presentes numerosos constituyentes polifenolicos pertenecientes a los grupos
de los bioflavonoides, antraquinonas, diterpenoides y n-alcanos.

El análisis proximal de 100 g de semillas secas contiene: proteína (18-21

g) y grasa (9-11 g).

1.3.6 Farmacognosia

La materia médica son las hojas y flores secas. Según la norma

guatemalteca obligatoria, la materia seca vegetal para infusión debe ser
aromática, las hojas y flores estar enteras, el extracto acuoso en masa tener un
máximo de 32 % y el material no contener más del 10 % de humedad.

50
 Microscópicamente se presentan numerosas glándulas de color amarillo
brillante y células de parénquima; flores enteras o fragmentos de color amarillo,
liguladas, cáliz con numerosas glándulas, ovario unilocular y granos de polen
equinados.

El aceite esencial tiene un agradable aroma anisado y del extracto

alcohólico se obtiene una miel color café (3.33 mg/ml igual a FeCl3 2 %),
soluble en etanol, densidad 1.47 a 26 ºC, concentración de 30 g/100 g de
materia seca.

La actividad biológica y farmacológica se atribuye a α-tertienilo y

herniarina que están presentes en las hojas y flores. El α-tertienilo es un cristal
amarillo, peso molecular 248, punto de fusión 93-94 ºC, soluble en éter, acetona
y etanol, insoluble en agua; presenta actividad antimicrobiana.

La herniarina(7-metoxicumarina) es un cristal blanco-amarillo, peso

molecular 176, con actividad antibacteriana, espasmolítica, diurética y
antiinflamatoria.

1.3.7 Toxicología

Popularmente se le atribuye propiedad abortiva. La DL50 de los extractos

con actividad espasmolítica por vía oral es mayor de 100 mg/kg de peso. El
extracto alcohólico provoca en algunas personas síntomas cardiovasculares.

El α-tertienilo puede ser fototóxico en presencia de luz ultravioleta

cercana y producir una fotodermatitis por un mecanismo que no depende de la
peroxidación lipídica de la membrana.

51
 1.3.8 Características fisicoquímicas del aceite esencial de pericón
(Tagetes lucida Cav.)

Aspecto: líquido aceitoso a 26 ºC

Color: amarillo, equivalente a una solución 1.77 % de FeCl3
Densidad: 0.9718 g/cm3 a 26 ºC.
Punto de ebullición: 233 ºC a 1 atm.
Solubilidad: soluble en etanol al 95 %, cloroformo y acetona.
Concentración: 0.9718 g/10 g de masa seca
Índice de refracción: 1.5322 a 26 ºC (refractómetro ABBE)

1.4 Pigmentos naturales flavonoides (2,3)

Los flavonoides son pigmentos vegetales que poseen un esqueleto

carbonado C6-C3-C6, es uno de los grupos más numerosos y ampliamente
distribuidos de constituyentes naturales, conocidos algunas veces como
antoxantinas.

Estos compuestos tienen como características generales su solubilidad

en agua y en etanol, su carácter fenólico y su intensa absorción en la región
ultravioleta y visible del espectro debido a la presencia de sistemas aromáticos
y conjugados. Por regla general son insolubles en éter de petróleo, lo que
permite desengrasar un material antes de extraerlos. Para realizar una
clasificación preliminar se puede hacer un estudio de sus propiedades de
solubilidad y de comportamiento ante reacciones de color, seguidamente se
hace un examen cromatográfico del extracto, y la identificación de los
componentes individuales por comparaciones cromatográficas y
espectroscópicas con compuestos estándar o con la literatura.

52
 Los flavonoides se emplearon durante mucho tiempo como colorantes de
lana, y actualmente se usan en la conservación de grasas o jugos de frutas
debido a las propiedades antioxidantes de algunas polihidroxiflavonas. Entre
otras aplicaciones están la de los glucósidos de dihidrochalconas como
edulcorantes, de la rotenona como insecticida, etc.

De acuerdo con el libro de Colorantes Naturales de la doctora Olga Lock ,

hasta 1990 se conocían alrededor de 3000 flavonoides, entre ellos 450
flavonoles, 300 flavonas, 150 isoflavonas, 60 chalconas, 20 auronas, etc., los
que encuentran extensamente distribuidos entre las plantas, tanto libres o como
glicósidos; estos últimos contribuyen a darle color a las flores, frutos y hojas.

1.4.1 Estructura

Se conocen como diez clases de flavonoides, todos contienen quince

átomos de carbono en su núcleo básico y están arreglados bajo un sistema
C6-C3-C6, en el cual dos anillos aromáticos llamados A y B están unidos por
una unidad de tres carbonos que pueden o no formar un tercer anillo, que en
caso de existir es llamado anillo C.

Figura 2. Estructura básica de los flavonoides

53
 Cada una de las clases de flavonoides, suele encontrarse bajo la forma
de glicósidos con una o tres unidades de azúcar, generalmente en los
carbonos 3 y/o 7, siendo los azúcares más comunes la glucosa, galactosa,
ramnosa, xilosa y arabinosa.

Los flavonoides se encuentran generalmente en mezclas como agliconas

y/o glicósidos; en muchos casos, debido a la complejidad de la mezcla es más
frecuente el estudio de estos compuestos bajo la forma de agliconas para lo
cual los extractos deben hidrolizarse previamente.

1.4.2 Extracción y técnicas de identificación

Los solventes empleados en la extracción de flavonoides son muy

variados y pueden ser desde muy polares como el agua y etanol para glicósidos
o agliconas muy hidroxiladas, hasta menos polares como éter y cloroformo para
flavonas altamente metoxiladas. Es recomendable emplear una sucesión de
dos o más solventes, usualmente en el orden lipofílico; por ejemplo: éter de
petróleo, benceno, éter etílico, acetato de etilo, alcoholes y finalmente agua,
aunque con el agua se presenta la desventaja de su alto punto de ebullición y
presión de vapor que dificultan luego el ser removida rápida y completamente
del extracto; por otro lado, podrían ser extraídos otros compuesto de alto peso
molecular que usualmente interfieren en las subsiguientes etapas de
purificación del flavonoide.

54
 La extracción de compuestos colorantes de las plantas se pueden realizar
por distintos métodos: la infusión o decocción que es la técnica más popular,
consiste en una extracción en agua de la planta fresca o seca con ayuda de
calor, o en alcohol (tintura, vino), en algunos casos se usa la planta machacada,
como cataplasma, jugo o polvo de la planta seca administrada directamente.

La extracción para tamizaje se realiza con una extracción por maceración

a temperatura ambiente con uno a tres solventes con diferentes polaridades,
generalmente diclorometano o hexano, éter o etanol y agua. Los extractos se
concentran, evaporando los solventes a presión reducida y temperatura
controlada (rotavapor) hasta alcanzar un estado de miel. Con los extractos
acuosos se concentran por medio de liofilización. De esta forma los extractos
son más estables y fáciles de almacenar y dosificar.

La extracción para elucidación estructural consiste en una maceración o

extracción Soxhlet usando inicialmente un solvente de amplio espectro (metanol
o etanol) y luego un fraccionamiento con diferentes solventes o mezclas de
solventes que permiten separar las diferentes fracciones por partición.
Idealmente el fraccionamiento debe ser guiado por un bioensayo que permita
llegar a la estructura química responsable de la actividad en un tiempo
relativamente corto. (12)

Los flavonoides se pueden extraer por los siguientes métodos:

a. Extracción con metanol y cromatografía: se realiza una extracción con

metanol en frío, el extracto se seca en presencia de policapolactama
(nylon) pulverizada. El residuo es lavado con cloroformo, después con
agua y finalmente con metanol.

55
 Todos los flavonoides se van en el metanol. La solución metanólica
se evapora y el residuo se percola por una columna cromatografica
empacada con gel de sílice. El componente principal se eluye con
acetato de etilo y se cristaliza en metanol-agua. Este procedimiento se
utilizó para estudiar la parte aérea de Oethera lavandulaefolina,
obteniéndose cristales anaranjados de p.f. 198-201 ºC (peso 0.380 g).

b. Extracción con etanol y separación con borax: para obtener kaemferol de

los pétalos de rosas amarillas se utiliza etanol caliente. El extracto se
evapora a presión reducida. El residuo se extrae varias veces con éter
de petróleo y después se hierve con una solución acuosa o etanólica de
ácido sulfúrico (al 7 %) durante 2 horas. La suspensión enfriada se
extrae varias veces con éter etílico. Se juntan los extractos y se extraen
con una solución acuosa de 10 % de bórax, el cual disuelve la
quercetina, p.f. 312 ºC, que se recupera al añadirle un ácido. Al destilar
el éter queda kaemferol, p.f. 275 ºC como residuo.

c. Extracción y separación con sales de plomo: con pétalos secos y

molidos, de flor de jamaica (Hibiscus Sabdariffa), se extraen con etanol.
El etanol se destila a presión reducida y el residuo se extrae con éter de
petróleo, para quitarle lípidos y carotenoides. En seguida se extrae con
éter etílico y finalmente el residuo mezclado con un poco de etanol se
deja en el refrigerador varios días para que se separe la hibiscitrina, la
cual se recristaliza en etanol diluido, cristales amarillos, p.f. 238-240 ºC.
El filtrado obtenido se diluye con agua, se trata con suficiente acetato de
plomo para precipitar los flavonoides. El precipitado se filtra, se
suspende en etanol y se descompone burbujeando ácido sulfhídrico. Se
filtra el sulfuro de plomo, y el filtrado se calienta para eliminar el exceso
de ácido sulfhídrico. En seguida se evapora a presión reducida.

56
 El residuo siruposo se macera con éter etílico anhidro. El sólido
amarillo formado se cristaliza en etanol; se obtienen prismas amarillentos
de gositrina, p.f. 181 ºC.

d. Extracción con etanol: hojas y tallos de apio triturados se mezclan con

etanol. El extracto se concentra a presión reducida y se filtra en caliente
sobre un poco de carbón activado. Al enfriarse forma una pasta
gelatinosa que se separa de los licores madres. La masa gelatinosa se
extrae en frío con éter para eliminar la clorofila, luego se extrae varias
veces con acetona helada. La porción insoluble (apiina cruda) se
disuelve en agua caliente y se pone a hervir, se le añade, gota a gota,
una solución de acetato neutro de plomo hasta que no se forme más
precipitado, la suspensión se filtra en caliente. El precipitado se descarta
y al filtrado se le añade, poco a poco, una solución de acetato básico de
plomo hasta que no se forme más precipitado, éste se recoge por
filtración. El precipitado de plomo se suspende en etanol y se le
burbujea exceso de ácido sulfhídrico. Se filtra la suspensión. El filtrado
se hierve para eliminar el exceso de ácido sulfhídrico y después se
concentra. El concentrado se deja reposar en un lugar frío y se separan
los cristales, los cuales se recristalizan en etanol dando agujas incoloras
de apiina, p.f. 230-232 ºC. (6)

Los métodos anteriores son para extractos específicos, generalmente los

flavonoides se pueden extraer con etanol al 70 % o metanol al 80 %, sin
embargo se debe tomar en cuenta que el método de extracción depende de la
textura y contenido de agua en la planta, así como de la sustancia a extraer.

57
 Para la identificación de flavonoides se utilizan varias reacciones
coloridas, la más usual es la reacción de Shinoda.

a. Reacción de Shinoda: al extracto alcohólico incoloro o ligeramente

amarillo se le coloca un pequeño trozo de magnesio y unas pocas gotas
de HCl concentrado el desarrollo inmediato de coloración es indicativo de
la presencia de flavonas y flavonoles (amarillo a rojo), flavanonoles (rojo
a magenta) flavanonas (rojo, magenta, violeta, azul), isoflavonas
(amarillo), isoflavononas, chalconas y auronas no dan coloración.

b. Reacción con H2SO4 conc. : las flavonas y flavonoles dan coloraciones

fuertemente amarillas, las flavanonas, anaranjadas o guindas; las
chalconas y auronas, rojo guinda o rojo azulado.

c. Reacción con álcalis: los extractos acuosos pueden mostrar variaciones

de color con el agregado de un álcali, si hay presencia de flaconas,
flavanonoles e isoflavonas se ponen amarillas; flavanonas y flavonoles
cambian de amarillo a naranja; chalconas de naranja a rojizo.

d. Prueba de Marini Bettolo: con solución de SbCl5 en CCl4, los flavonoides

en general dan colores característicos o formación de precipitados; por
ejemplo, las flaconas dan precipitados amarillo o anaranjado, y las
chalconas, rojo oscuro o violeta.

e. Reactivo de Dimroth: solución de H3BO3 en Ac2O, las 5-hidroxiflavonas

dan soluciones anaranjadas o rojas.

58
 f. Reacción con solución acuosa o etanólica de FeCl3: aunque hay
coloración en presencia de cualquier compuesto fenólico, la aparición de
un color verde sugiere la presencia de un derivado de catecol y de un
color azul de un derivado de pirogalol.

1.5 Equipo de extracción

Para la extracción de sólidos se dispone a nivel de laboratorio de

aparatos simples para la extracción semicontinua, que utilizan una mínima
cantidad de solvente con el máximo de rendimiento en la extracción y la
recuperación del solvente.

El extractor clásico de este tipo es el aparato de Soxhlet, es un aparato

semicontinuo, pues en una de las fases (el sustrato) se agrega sólo al principio,
mientras que el solvente cumple un ciclo de extracción-purificación continuo. La
purificación se realiza en forma paralela, por destilación, de tal manera que el
sustrato siempre se contacta con solvente puro. El aparato consta de tres
partes principales: el matraz, la cámara de extracción y el refrigerante de reflujo.
(Ver apéndice B, figura 19, pág. 106)

El matraz inferior contiene el solvente, que por calor se evapora. La

cámara de extracción en su parte inferior tiene un tubo estrecho doblado en U
que funciona como sifón. En la cámara de extracción se introduce la sustancia-
problema, dentro de un cartucho de papel filtro o en una bolsita de tela tupida.

Los vapores llegan al refrigerante que los condensa y el líquido cae en

gotas sobre la sustancia-problema. Cuando el condensado alcanza la altura del
sifón refluye al matraz, cargado de principios extraídos.

59
 Se continúa así hasta un número calculado de horas, lo suficiente para
agotar el material, es decir, que el líquido pase incoloro por el tubo-sifón.

Es útil en escala laboratorio, porque, si bien la eficiencia de extracción

no es muy alta, la regeneración del solvente se produce automáticamente con
lo cual se evita el excesivo manipuleo de la extracción discontinua en sucesivas
etapas.

1.6 Cromatografía

La cromatografía es una técnica de separación basada en la diferencia de

velocidad con que se mueven los solutos a través de un medio estacionario
mediante el flujo en un disolvente llamado eluente.

1.6.1 Clasificación de la cromatografía

La cromatografía se clasifica en: cromatografía de reparto, cromatografía

de adsorción, cromatografía de exclusión, cromatografía de permeación y
cromatografía de intercambio iónico.

1.6.1.1 Cromatografía de reparto

La separación de una mezcla de solutos es función de la distribución de

las moléculas de estos entre una fase estacionaria líquida, soportada sobre un
sólido, y la fase móvil o eluente del sistema.

60
 La fase móvil puede ser un líquido o un gas según sea el caso de la
cromatografía; en caso de que la cromatografía sea líquida-líquida la fase móvil
será un líquido, o de un gas en cuyo caso es cromatografía gas-líquido.

Si el soluto A se disuelve en B y C, la distribución entre ellos está dada

por la ecuación:

Coeficiente de reparto = (concentración de A en B)/(concentración de A en C)

La temperatura a la que el coeficiente de reparto se determina es

constante.

Cromatografía líquido-líquido: se lleva a cabo principalmente en celulosa

y gel de sílice húmeda, el agua se comporta como soporte por lo que se emplea
para separar sustancias acuosolubles, se puede realizar en papel, columna o
capa fina, la fase estacionaria está constituida por la parte individual de cada
fibra.

Cromatografía gas-líquido: se elige la fase estacionaria que presente una

estructura análoga a una de las sustancias que presente la mezcla. Se crea
una película muy fina para facilitar el reparto, esta capa debe poseer baja
volatilidad sobre el soporte sólido y de esta forma aumentar la superficie
interfacial entre el gas y el líquido tanto como sea posible.

61
 1.6.1.2 Cromatografía de adsorción

La adsorción se manifiesta por un aumento de la concentración del soluto

en la interfase que rodea el medio estacionario. La separación está basada en
la diferencias en el comportamiento, adsorción, deserción de sustancias
contenidas en las fases móvil sobre un sólido estacionario y pueden ser
sistemas líquido-sólido y gas-sólido. Se deben tomar en cuenta tres variables
que influyen en el proceso de adsorción: adsorbente, eluente y solutos. El
término adsorción en términos cromatográficos se refiere a interacciones
débiles.

Cromatografía líquido-sólido: la fase estacionaria suele ser gel de sílice,

alúmina, carbón activado y polvo poliamida. Algunas veces al aplicar alúmina
pueden ocurrir cambios químicos, es decir, quimisorción durante el paso del
soluto por la fase estacionaria.

Cromatografía gas-sólido: los adsorbentes más usados son alúmina, gel

de sílice, carbón activado y mallas moleculares. Se realizan en columna, el
material que se utiliza como adsorbente debe presentar una estructura rígida,
tamaño uniforme y ser químicamente inerte.

1.6.1.3 Cromatografía de exclusión

La separación está basada en los diferentes volúmenes moleculares de

los solutos. El tiempo de elusión es proporcional al peso molecular de los
mismos, lo que da como resultado que no sea muy usada con compuestos de
alto peso molecular. En este proceso principalmente, se emplean geles no
iónicos de partículas uniformes y porosos como fase estacionaria

62
 Cromatografía de filtración: se emplean geles de filtración como el
sephadex, que es un polímero de dextrano. El eluente empleado es agua o
soluciones amortiguadoras, los geles aumentan su volumen cuando se ponen
en contacto con el eluente e impiden el paso de moléculas de gran tamaño a
través de sus poros, y por eso se separan primero.

1.6.1.4 Cromatografía de permeación

Se emplean polímeros que se disuelven en solventes orgánicos como

fase estacionaria.

1.6.1.5 Cromatografía de intercambio iónico

Se lleva a cabo con materiales especiales de estructura porosa e

insoluble los cuales contienen grupos reactivos que están asociados a iones
hábiles capaces de intercambiarse con otros iones presentes en el medio que
los rodea. Se emplea en separaciones de sustancias iónicas, tanto orgánicas
como inorgánicas.

1.6.2 Cromatografía de capa fina

La cromatografía en capa fina es una herramienta importante en la

identificación de colorantes naturales. Se realiza por medio de placas
cromatográficas, una fase estacionaria y una fase móvil móvil.

63
 1.6.2.1 Proceso de adsorción

La muestra aplicada en la capa es adsorbida en la superficie del material

por la acción de fuerzas electrostáticas (fuerzas de Van der Waals, puentes de
Hidrógeno, efectos inductivos, etc.). Luego, cuando la capa es expuesta a un
flujo por acción capilar se inicia una competencia de enlaces entre los sitios
activos del adsorbente y la sustancia con el solvente.

1.6.2.2 Fase estacionaria (adsorbentes)

El absorbente o adsorbente, (en algunos casos) más utilizados son: Gel

de sílice, que funciona a menudo como soporte para el agua u otros disolventes
polares en las separaciones líquido-líquido. Sin embargo, si se seca en un
horno la capa del gel de sílice después de preparada, ésta pierde la mayor
parte de la humedad y su superficie resulta predominantemente sólida de modo
que sirve como adsorbente para separaciones líquido-sólido, se debe tener
cuidado para evitar exponer la superficie a la atmósfera, ya que la absorción de
la humedad del aire se da en pocos minutos.

Oxido de Aluminio o alúmina (ácida, neutra o básica), tierra silícea o

Kieselguhr, celulosa (nativa o micro-cristalina), poliamidas, son otros de los
adsorbentes utilizados en los procesos de cromatografía en capa fina.

Estos adsorbentes deben tener ciertas características: tamaño de

partícula, volumen de poro, diámetro de poro, área superficial, homogeneidad,
pureza.

64
 1.6.2.3 Preparación de las placas para cromatografía

Las placas para cromatografía en capa fina, pueden prepararse

distribuyendo una pasta acuosa del sólido finamente dividido sobre la superficie
limpia de una placa de vidrio o de mylar, o un portaobjetos de microscopio. Por
lo general, se agrega una sustancia adhesiva a la mezcla para mejorar la
adhesión de las partículas sólidas entre sí y con el vidrio. Se deja entonces la
placa en reposo hasta que la capa se asienta y se adhiera intensamente a su
superficie; en algunos casos puede calentarse en un horno durante varias
horas.

La limpieza de las separaciones en la técnica de capa fina depende de la

existencia de partículas con un estrecho intervalo de tamaño y de una capa de
grosor uniforme.

Se usan como soporte del adsorbente láminas de vidrio, plástico o

metálicos, como el aluminio. Los tamaños de la placa para TLC convencional
son: 20 cm x 20 cm; 10 cm x 20 cm y 5 cm x 2 cm.

Hay placas que contienen un indicador de fluorescencia: F254 ó F366. El

número que aparece como subíndice indica la longitud de onda de excitación
del indicador utilizado.

1.6.2.4 Aplicación de la muestra

La muestra se aplica en la capa según el objetivo: banda, punto o

mancha. Se coloca una gota de la muestra cerca del extremo de la placa y se
marca su posición con un lápiz.

65
 1.6.2.5 Desarrollo de la placa

Es un proceso mediante el cual los compuestos son transportados a

través de la fase estacionaria por la fase móvil.

Después de colocar la gota de muestra se evapora el disolvente de la

muestra, se coloca la placa en un recipiente cerrado saturado con los vapores
del disolvente utilizado para el desarrollo. Se moja un extremo de la placa con
el disolvente, teniéndose cuidado de no mojar la muestra. Después de que el
disolvente ha recorrido la longitud de la placa, ésta se retira y se seca; la
posición de los componentes se determina por diferentes medios.

1.6.2.6 Cámaras para desarrollo

Existen varios tipos de cámaras:

• Normal
• Doble compartimiento
• Sándwich
• Horizontal
• Vario KS
• U
• Detección o visualización

Dependiendo del tipo de cámara la dirección del flujo puede ser, flujo
ascendente, flujo descendente y flujo horizontal.

66
 1.6.2.7 Identificación de la especie

Si la muestra no es coloreada se requiere de métodos que permitan

visualizar el (los) componente(s) presentes. Este procedimiento se conoce
también como revelado.

Los métodos son:

• Químicos (por inmersión). Se obtienen derivados coloreados o
fluorescentes.
• Físicos (ópticos). Se utiliza radiación UV

Dos métodos comunes, que pueden aplicarse a la mayoría de las mezclas

orgánicas, consisten en rociar con soluciones de yodo o ácido sulfúrico; ambos
reaccionan con los compuestos orgánicos para dar productos de reacción de
color oscuro. También se utilizan reactivos específicos como la ninhidrina, para
localizar especies determinadas; se puede incorporar un material fluorescente a
la fase estacionaria. Las sustancias fluorescentes se pueden detectar con una
lámpara ultravioleta.

Después del desarrollo, se examina la placa con luz ultravioleta. En este

caso, toda la placa presenta fluorescencia, excepto en los sitios donde se
localizan los componentes no fluorescentes de la muestra.

67
 1.6.2.8 Evaluación de un cromatograma de capa fina

La evaluación puede realizarse por los siguientes métodos:

a. Análisis cualitativo
• Medida de Rf
• Comparación visual de color/intensidad
• Propiedades UV/IR/MS/NMR

b. Análisis semi-cuantitativo

Se puede lograr una estimación semicuantitativa de la cantidad presente

de un componente realizando una comparación visual del diámetro y la
intensidad del color de la mancha contra una serie de manchas patrones de
concentración conocida. Se puede obtener mejores datos rascando la mancha
de la placa, extrayendo el analito de la fase sólida y midiendo su concentración
por medio de un método químico o físico adecuado.

c. Análisis cuantitativo
• Indirecta
• Directa
• Densitometría, se utiliza un densitómetro de barrido para medir la
radiación emitida por una mancha por fluorescencia o reflexión.
• Medida de transmisión, medida de luz transmitida a través de la
sustancia.
• Medida de emisión, medida de luz reflejada desde la sustancia.
• Espectrofotometría.
• Fluorescencia.
• Florescencia con quenching.(20)
68
 2. METODOLOGÍA

2.1 Localización

Laboratorio de la sección de Química Industrial del Centro de

Investigaciones de Ingeniería de la Facultad de Ingeniería, Universidad de San
Carlos de Guatemala, en donde se realizaron las actividades de secado,
molienda de la materia prima y extracción de aceite esencial crudo y colorante
natural.

El procedimiento de cromatografía y espectro en la región visible se

realizó en el laboratorio de Investigación de Productos Naturales (LIPRONAT)
de la Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia.

2.2 Recursos humanos

Investigadora: MEPU Claudia Maribel Ac Santa Cruz

Asesora: Inga. Qca. Telma Maricela Cano Morales

Revisor: Ing. Qco. José Eduardo Calderón García

69
2.3 Recursos materiales

Materia prima: hojas secas de la planta, secadas a temperaturas menores de

35ºC,

Cristalería: micro pipetas, balones, erlenmeyer, ampolla de decantación, varillas

de agitación, embudo, probetas graduadas, perlas de vidrio, magnetos, frascos
opacos, codos.

Equipo: secador de bandejas, plancha de calentamiento, bomba de vacío,

balanza, refrigeradora, rotavapor, espectrofotómetro UV, Neoclevenger, placas
cromatograficas, Soxhlet, vortex.

Reactivos: metanol, etanol, acetona, éter etílico, limaduras de magnesio, HCl

conc., ácido sulfúrico, acetato de etilo, ácido fórmico, ácido acético glacial,
soluciones estándar de hiperosido, rutina, quercitina, naringenina y ácido
clorogénico, difenilboriloexietilamina y polietilenglicol 4000, hexano, agua
destilada.

Otros: papel aluminio, tapones de hule, soportes de metal, mangueras, anillo,

toalla, papel parafilm, papel mayordomo.

2.4 Diseño de tratamientos y manejo del experimento

Para la extracción de aceite esencial se utilizó una muestra de 100

gramos de materia seca y triturada, se realizó la extracción durante 2 horas,
manteniendo constante la cantidad de materia y el tiempo, se hicieron nueve
extracciones.

70
 En el estudio de colorante natural, se evaluó el porcentaje de colorante
contenido en el pericón (Tagetes lucida Cav.), obtenido del residuo seco de la
planta, triturado a un tamiz Num. 4 (escala Tyler, 4.699 mm de diámetro
utilizando el método de extracción con Soxhlet, con tres solventes diferentes
(acetona, metanol, etanol) realizando tres repeticiones con cada solvente.

El diseño experimental será de 1 especie * 3 solventes = 3 tratamientos

con 3 repeticiones cada uno. Utilizando para evaluar un arreglo combinatorio al
azar. Donde la respuesta que se observará en cada uno de los “a” tratamientos
es una variable aleatoria.

El análisis se realizó de la siguiente manera:

a = especie a analizar
i = 1,...,a

b = 3 solventes utilizados en la extracción

j = 1,...,b

n = 3 repeticiones
k= 1,...,n

a*b*n= número de unidades experimentales

La variable que se desea medir en este procedimiento es:

*El rendimiento de extracto de colorante en gramos, obtenidos del pericón
utilizando tres solventes para la extracción.

71
 Como solo se desea comparar los tratamientos de un factor único se
utilizó un análisis de varianza. Los datos aparecen como:

Tabla V. Análisis de varianza

TRATAMIENTO OBSERVACIONES TOTALES PROMEDIOS
1 Y11, Y12... Y1n Y1 Y1
2 Y21, Y22... Y2n Y2 Y2
: : : :
: : : :
B Yb1, Yb2,...Ybn Yb Yb

MODELO LINEAL

yj= µ + τ i + ε ij
Donde:
i = 1, 2,…,b
j = 1,2,…,n
yij = ij-ésima observación del tratamiento i
µ = es el parámetro común a todos los tratamientos denominado media global.
τi = es un parámetro único para el i-ésimo tratamiento llamado efecto del
tratamiento i-ésimo .
ε ij = es la componente aleatoria del error

Para probar la hipótesis se supone que los errores del modelo son
variables aleatorias independientes, con distribución normal, con media cero y
variancia σ2. Se supone que ésta última es constante para todos los niveles del
factor.

72
 Este modelo se denomina análisis de variancia de clasificación en un
sentido porque solo investiga un factor.

2.4.1 Metodología experimental

Para la realización de la parte experimental se utilizan dos métodos, uno

para la extracción de aceite esencial y otro para la extracción de colorante
natural, seguidamente se realizan pruebas físicas cualitativas, análisis
cromatográfico y espectro de absorción.

2.4.1.1 Extracción de aceite esencial

Para realizar la extracción de aceite esencial, se tritura el material seco,

luego se utiliza el método de extracción por arrastre con vapor en caldillo a nivel
de laboratorio.

El método de extracción por arrastre con vapor en caldillo consiste en

introducir la materia vegetal seca en un balón, luego se humedece y se arma el
equipo Neoclevenger. La separación del aceite esencial de la materia vegetal
húmeda se realiza por arrastre con vapor, se recoge el destilado en un tubo
graduado donde la fase acuosa es automáticamente separada de la fase oleosa
y es devuelta al balón de extracción. Cuando el aceite esencial tiene densidad
próxima a la densidad del agua se debe adicionar en el tubo graduado una
cantidad previamente medida de solvente de baja densidad y punto de
ebullición adecuado, en este caso n-hexano, lo que permite disolver el aceite
esencial. Para separar el aceite del solvente se debe rotavaporar. (Ver figura
18 y 20, apéndice B, pág. 105-106)

73
 2.4.1.2 Extracción de colorante

Para realizar la extracción de colorante se secó el desecho sólido de

materia prima obtenido de la extracción de aceite esencial crudo de pericón, a
una temperatura no mayor de 40 ºC, hasta que la muestra presentó peso
constante.

Se utilizó una muestra de 10 g de material seco de Pericón (Tagetes

lucida Cav.) con una aproximación de 0.0005 g, se introdujo en un dedal de
celulosa, éste se colocó en la cámara de extracción y luego se armó el equipo
Soxhlet, se agregó el solvente, se aplicó calor con una plancha de
calentamiento y se inició la extracción hasta agotamiento, se utilizaron tres
solventes diferentes: metanol, etanol, acetona con tres corridas por cada
solvente. (Ver figura 19, apéndice B, pág. 106)

Luego de obtener los extractos, el solvente se concentró a presión

reducida en un rotavapor, a temperatura no mayor de 40 ºC y girando a una
velocidad constante. El tiempo de extracción de solvente es continuo, hasta
que la muestra no tenga presencia de solvente. El residuo obtenido contiene
extracto de colorante, el que es almacenado en viales debidamente
identificados y a temperaturas bajas (en refrigeración).

Después de obtener los extractos se le realizaron pruebas físicas y

químicas, por medio de técnicas de identificación de flavonoides, cromatografía
en capa fina, espectro UV.

74
 2.4.2 Identificación de flavonoides

Para identificar flavonoides se utilizaron pruebas colorimétricas,

cromatografía en capa fina y espectro de absorción

2.4.2.1 Reacciones coloridas

a. Reacción de Shinoda: al extracto alcohólico incoloro o ligeramente

amarillo se le coloca un pequeño trozo de magnesio y unas pocas gotas
de HCl concentrado el desarrollo inmediato de coloración es indicativo de
la presencia de flavonas y flavonoles (amarillo a rojo), flavanonoles (rojo
a magenta) flavanonas (rojo, magenta, violeta, azul), isoflavonas
(amarillo), isoflavononas, chalconas y auronas no dan coloración. (Ver
tabla X, sección resultados, pág. 82)

b. Reacción con H2SO4 conc. : a la muestra se le agrega una gota de ácido y

se observa si hay cambio de color: las flavonas y flavonoles dan
coloraciones fuertemente amarillas, las flavanonas, anaranjadas o
guindas; las chalconas y auronas, rojo guinda o rojo azulado. (Ver tabla
XI, sección resultados, pág. 83)

2.4.3 Análisis cromatográfico en capa fina

Para realizar el análisis cromatográfico se utilizó la técnica de capa fina,

para realizar este análisis se deben preparar varias fases.

75
 2.4.3.1 Preparación de la muestra

Se prepararan las muestras colocando en un tubo de ensayo 100 mg de

extracto en 1 ml de metanol. La solución se somete a fuerte agitación, en un
vortex. Se filtran las soluciones y el filtrado se coloca en un tubo de ensayo con
tapón.

2.4.3.2 Preparación de las soluciones estándar

En un beaker se colocan 5 mg del estándar a utilizar y se mezclan con 10

ml de metanol., se agita para homogenizar la solución. Estas soluciones deben
ser guardadas en recipientes cerrados y debidamente identificados.

2.4.3.3 Preparación de la fase móvil

En un beaker mezclar 50 ml de acetato de etilo, 5.5 ml de ácido fórmico,

5.5 ml de ácido acético glacial y 13.5 ml de agua. (la mezcla debe estar siempre
tapada para evitar evaporación). Se agita durante 5 minutos con un agitador
magnético, luego se traslada la mezcla a la cámara cromatográfica la cual debe
permanecer tapada.

2.4.3.4 Preparación de la placa cromatográfica

Se corta una placa de 10 cm x 18 cm de un cromatofolio de aluminio de

sílice gel 60F254 y se realiza lo siguiente:

76
 1. Trazar con lápiz, una línea horizontal un centímetro arriba de la parte
inferior de la placa.

2. Marcar a lo largo de la línea horizontal 17 puntos, dejando 1 cm de

separación entre cada uno.

3. Inyectar con ayuda de un capilar 5 µl de cada solución preparada

(muestra + metanol), en cada punto. Hacer lo mismo con las soluciones
estándar. Debe tenerse cuidado de que la mancha sea lo más pequeña
posible.

2.4.3.5 Desarrollo de la placa cromatográfica

Se coloca la placa dentro de la cámara cromatográfica que contiene la

fase móvil, se deja que las líneas que aparecen, lleguen a una distancia de 2
cm abajo del borde superior de la placa. Se retira la placa y se coloca en la
campana de extracción, para que seque la fase móvil, si es necesario se rocía
la placa con solución reveladora, luego se observa la placa con una lámpara
ultravioleta. (Ver figura 23, apéndice B, pág. 108)

2.4.3.6 Preparación de las soluciones reveladoras

A la placa se le aplica un revelador para que se observen de mejor

manera los colores que se forman en la placa al introducirla a una cámara de
luz ultravioleta, este revelador se prepara con:

• Difenilboriloexietilamina en 1 % de metanol: se pesa 0.2 g de NP

y se mezcla con 20 ml de metanol.

77
 • Polietilenglicol 4000 en 5 % de etanol: se pesa 1 g de PEG y se
mezcla con 20 ml de etanol.

Luego de preparar las soluciones se debe rociar la placa con cierta

cantidad de cada solución reveladora.

Se observa con luz ultravioleta los puntos que coinciden con los puntos
de las soluciones estándar, identificando de esta manera la presencia de
colorantes del tipo flavonoides. (Ver figura 24, apéndice B, pág. 108)

2.4.4 Espectrofotometría UV

Para obtener las gráficas de espectro de absorción se deben preparar

diferentes soluciones y por medio de un espectrofotómetro UV se obtienen los
picos representativos

2.4.4.1 Preparación de las soluciones

Pesar 25 mg de cada muestra colocarlos en un tubo de ensayo. Mezclar

con una cantidad de metanol y homogenizar la mezcla, trasladar la mezcla a un
balón aforado de 25 ml y aforar con más metanol.

2.4.4.2 Obtención de los espectros

Las soluciones fueron analizadas en un espectrofotómetro UV, donde se

obtuvieron graficas que muestran la relación entre absorbancia vrs. longitud de
onda (nm).

78
 3. RESULTADOS

3.1 Gramos de aceite esencial crudo obtenidos

En la siguiente tabla, los datos se expresan en gramos de aceite

esencial crudo/100 g de masa seca.

Tabla VI. Gramos de aceite esencial crudo

Repetición Aceite esencial crudo (g)
1 0.139
2 0.124
3 0.292
4 0.367
5 0.263
6 0.314
7 0.307
8 0.321
9 0.337

79
 3.2 Rendimiento de aceite esencial crudo

Los siguientes datos se encuentran expresados en porcentajes en

masa.

Tabla VII. Rendimiento porcentual de aceite esencial crudo

Repetición % en masa de
Aceite
1 0.139
2 0.124
3 0.292
4 0.367
5 0.263
6 0.314
7 0.307
8 0.321
9 0.337

3.3 Media total (x) del rendimiento de aceite esencial crudo de

Pericón (Tagetes lucida Cav.).

x = 0.2738 %

80
3.4 Gramos de extracto de colorante natural obtenidos

Los siguientes datos se encuentran expresados en gramos de extracto

de colorante natural obtenido/10 gramos de masa seca.

Tabla VIII. Gramos de extracto de colorante natural

Repetición Colorante (g)
S1R1 1.139
S1R2 1.318
S1R3 0.764
S2R1 0.691
S2R2 2.863
S2R3 0.930
S3R1 1.258
S3R2 0.972
S3R3 0.755

3.5 Rendimientos porcentuales

Tabla IX. Rendimiento porcentual de extracto de colorante de Pericón

(Tagetes lucida Cav.)
REPETICIÓN S1 S2 S3
1 1.139 0.691 1.258
2 1.318 2.863 0.972
3 0.764 0.930 0.755

81
3.6 Rendimiento porcentual promedio

Figura 3. Gráfica del rendimiento porcentual promedio de extractos de

colorante natural del Pericón (Tagetes lucida Cav.)

Rendimiento porcentual promedio del

colorante del Pericón

12 10.74
9.95
% Rendimiento

10 8.1
8
6
4
2
0
Metanol Acetona Etanol
Solventes

3.7 Pruebas Colorimétricas

Tabla X. Resultados de las pruebas de Reacción de Shinoda

Solvente Repetición Cambio de color Tipo de flavonoide
R1 Amarillo a rojizo amarillento Flavonas
S1 R2 Amarillo a rojizo amarillento Flavonas
R3 Amarillo a rojizo amarillento Flavonas
R1 Amarillo a amarillo verdoso Isoflavonas
S2 R2 Amarillo a rojizo amarillento Flavonas
R3 Amarillo a rojizo amarillento Flavonas
R1 Amarillo a rojo Flavonas
S3 R2 Amarillo a rojo Flavonas
R3 Amarillo a rojo Flavonas
Nota: ver figura 21, apéndice B, pág. 107.

82
 Tabla XI. Resultados de las pruebas de Reacción con H2SO4 concentrado
Solvente Repetición Cambio de color
R1 Amarillo fuerte
S1 R2 Amarillo fuerte
R3 Amarillo fuerte
R1 Amarillo fuerte
S2 R2 Amarillo fuerte
R3 Amarillo fuerte
R1 Amarillo fuerte
S3 R2 Amarillo fuerte
R3 Amarillo fuerte
Nota: ver figura 22, apéndice B, pág. 107.

3.8 Prueba cromatográfica

Tabla XII. Resultados de la cromatografía en capa fina

Metanol Acetona Etanol
Estándar R1 R2 R3 R1 R2 R3 R1 R2 R3
Hiperósido + + + + - + + + +
Rutina - - - - - - - - -
Quercetina + + + + + + + + +
Naringenina - - - - - - - - -
Ácido - - - - - - + + +
clorogénico
Nota: ver apéndice B, figura 24, pág. 108.

83
3.9 Prueba espectrofotométrica

Cada una de las soluciones se analizó gráficamente comparando

el espectro de absorción contra la longitud de onda, determinando que
efectivamente se encontraban flavonoides presentes en algunas
muestras.

En el apéndice A (pág. 98), se pueden observar las gráficas de

los extractos obtenidos y las gráficas de las soluciones estándar, las que
permitieron comparar los picos de las longitudes de onda más
representativos, y de esta manera determinar la presencia de pigmentos
colorantes del tipo flavonoides.

84
 4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS

El objetivo general de este trabajo de investigación fue extraer aceite

esencial crudo del Pericón (Tagetes lucida Cav.) y utilizar el desecho sólido
para extraer los pigmentos naturales del tipo flavonoides. En la extracción de
aceite esencial se utilizó el método de extracción por arrastre con vapor, a nivel
de laboratorio, este método proporciona la facilidad de tener una partícula lo
suficientemente pequeña, sin que sea arrastrada por el vapor y de esta manera
garantizar que se extraerá la mayor cantidad de aceite esencial crudo, ya que al
triturar la materia vegetal se rompen las vesículas o micelas donde se
encuentra confinado el aceite esencial y por ello es más fácil extraerlo y
arrastrarlo con vapor. Como se puede observar en la Tabla VII, pág. 80, el
rendimiento de aceite esencial obtenido en las diferentes repeticiones se
encuentra muy cercano al reportado en la literatura, que es de 0.3 % - 0.4 % en
masa de acuerdo a Fenarolis(1998) y Cáceres(1998). El rendimiento promedio
de aceite esencial crudo obtenido durante la extracción fue de 0.273 %.

Después de extraer el aceite esencial crudo se procedió a secar la

materia vegetal (desecho sólido), hasta que presentó peso constante, para
extraer el colorante natural, se empleo el método de extracción semicontinua,
utilizando para ello el aparato denominado Soxhlet, el cual tiene como
característica principal que se utilizan cantidades mínimas de solventes y estos
son regenerados casi en su totalidad al separar el extracto del solvente en un
rotaevaporador.

85
 De los tres solventes que se usaron para realizar las extracciones
(metanol, etanol y acetona), el que mayor rendimiento de extracto de colorante
tuvo fue el metanol con 10.74 % en masa, seguido de etanol con 9.95 % en
masa y por último la acetona con 8.10 % en masa, aunque la diferencia entre
ellos no es muy apreciable, es de hacer notar que en el grupo de repeticiones
con acetona existió un dato que se salió del rango, probablemente debido a
existencia de humedad en la muestra seca o que el solvente no fue
rotaevaporado en su totalidad, por lo que fue descartado para que el error fuera
mínimo.

Para demostrar la presencia de pigmentos flavonoides en los extractos

de pericón (Tagetes lucida Cav.) se utilizaron dos pruebas colorimétricas
cualitativas, cromatografía en capa fina y espectrofotometría.

De la prueba colorimétrica Reacción de Shinoda (tabla X, pág. 82), se

puede observar que la mayor cantidad de corridas de extractos obtenidos con
metanol y acetona presentan un cambio de coloración de amarillo a rojizo
amarillento, aunque en una corrida con acetona la coloración fue de amarillo a
amarillo más fuerte, mientras que con los extractos obtenidos con etanol la
coloración fue de amarillo a rojo, presentándose una coloración más pareja en
las tres corridas. De estos datos se puede determinar la presencia de
flavonoides, específicamente flavonas, que es el grupo al cual pertenecen los
flavonoides presentes en el Pericón: Quercetagetina y Patuletina. (Ver figura
21, apéndice B, pág. 107)

86
 En la prueba con ácido sulfúrico (tabla XI, pág. 83), se puede observar
que la coloración fue de amarillo a amarillo fuerte, resultando positiva para
todas las corridas ya que en esta prueba las flavonas reaccionan dando
coloraciones fuertemente amarillas. (Ver figura 22, apéndice B, pág. 107)

El análisis cromatográfico se realizó con el método de cromatografía en

capa fina. Mediante este método se pudo observar la presencia de flavonoides
en los extractos obtenidos con los tres solventes. Por no contar con las
soluciones estándar de Quercetagetina y Patuletina, únicamente se compararon
los extractos con otros compuestos de la familia de los flavonoides. Se puede
observar que los extractos de metanol, acetona y etanol fueron positivos para
hiperosido y quercetina (flavona), dando coloraciones fluorescentes amarillas
(ver figura 24, apéndice B, pág. 108), los extractos de etanol, fueron positivos
también para el ácido clorogénico (ver tabla XII, pág. 83). De acuerdo a éste
análisis los extractos que contienen mayor cantidad de pigmentos flavonoides
son los de etanol, seguidos de acetona y por último el metanol.

El análisis de espectrofotometría se realizó comparando las gráficas de

absorbancia vrs longitudes de onda de los extractos obtenidos con los tres
solventes contra las gráficas de cuatro compuestos estándar conocidos,
naringenina (figura 13, apéndice A, pág. 102), quercetina (figura 14, apéndice A,
pág. 103), rutina (figura 15, apéndice A, pág. 103), ácido clorogénico (figura 16,
apéndice A, pág. 104), debido a que no se contaba con los compuestos
estándar de quercetagetina y patuletina, únicamente se compararon las
longitudes de onda de los picos más representativos en cada una de las
corridas. Se puede observar que los puntos más representativos de las figuras
4 (pág. 98), 5 (pág. 98), 8 (pág. 100) y 11 (pág. 101), coinciden con la gráfica
de la quercetina, rutina y ácido clorogénico en 268 nm; de igual manera
coinciden con el ácido clorogénico en 261 nm.

87
 Estos datos se encuentran en el rango de 200 - 270 nm donde los flavonoides
tienen una banda de absorción, específicamente la quercetagetina se encuentra
en un rango de 259 – 272 nm.

88
 5. ANÁLISIS ESTADÍSTICO

Para comprobar cual de las dos hipótesis es la que mejor se ajusta a la parte
experimental del presente estudio, se realizó un análisis estadístico de varianza
de clasificación en un sentido o unilateral, esto debido a que solo investiga un
factor.

Las hipótesis que se desean comprobar son hipótesis nula el rendimiento

de colorante, obtenido en la extracción es independiente del solvente
utilizado o la hipótesis alternativa el rendimiento de colorante natural
obtenido varía significativamente dependiendo del solvente utilizado. El
único factor que afecta este estudio es la secuencia extractiva de los solventes,
ya que la variable que se desea medir es el rendimiento de extracto de
colorante que se obtiene con tres diferentes solventes.

El análisis de varianza se basa en el modelado de los datos de la muestra

por medio de un modelo lineal, que para el análisis unilateral se define por:
yij= µ + τ i + ε ij

Al realizar este análisis se debe suponer:

1. Las observaciones son al azar e independientes.
2. El modelo es una representación verdadera de las observaciones.
3. Los errores al azar se encuentran normalmente distribuidos con
media igual a cero una varianza σ2

89
 La nomenclatura que se utiliza esta dada por la siguiente tabla:

Tabla XIII. Nomenclatura usada para el análisis estadístico

TRATAMIENTO OBSERVACIONES Totales (Sj) Promedios (yj)
1 Y11, Y12... Y1n Y1 Y1
2 Y21, Y22... Y2n Y2 Y2
: : : :
: : : :
B Yb1, Yb2,...Ybn Yb Yb
nj n1

Ƹyij2

ESSj

Donde:
nj = Tamaño de la muestra

Ƹyij2 = Suma de cuadrados

Sj = Suma de corridas por tratamiento
yj = Promedio de corridas
ESSj = Suma del cuadrado de los errores

El análisis de varianza se realizó por medio de la siguiente tabla:

Tabla XIV. Fórmulas para el análisis de varianza

Fuente SS Gl MS F muestra Ftabulada
Tratamientos CSS (k-1) S1 S1/S2 5.79
Error ESS (n-k) S2
Total TSS

90
Las fórmulas para calcular los datos de la tabla anterior son:

TSS= Ƹyij2 – S2/n

ESS =Ƹ ( Ƹyij2 – Sj2/n)

CSS = Ƹ Sj2/n - S2/n

S1= CSS/(k-1)
S2 = ESS/(n-k)

El criterio para determinar si se acepta o se rechaza la hipótesis nula

es:
Acéptese sí Fmuestra < Ftabulada , de lo contrario rechácese.

Luego de aplicar las fórmulas anteriores, los datos que se obtuvieron en

el análisis de varianza son:

Tabla XV. Resultados del análisis de varianza

Fuente SS Gl MS F muestra Ftabulada
Tratamientos 0.0844 2 0.0422 0.66 5.79
Error 0.3157 5 0.0631
Total 0.4001 7

De los datos anteriores se puede observar que la F muestra es menor que

Ftabulada , por lo tanto se acepta la hipótesis nula y se rechaza la hipótesis
alternativa, concluyendo que el rendimiento de colorante natural extraído es
independiente del solvente utilizado.

91
 CONCLUSIONES

1. Sí es factible extraer colorante natural del desecho sólido de Pericón

(Tagetes lucida Cav.) después de haber extraído aceite esencial crudo.

2. Estadísticamente no existe diferencia significativa entre los tres solventes,

sin embargo se obtuvieron mejores resultados con etanol.

3. Las pruebas colorimétricas, Reacción de Shinoda y Reacción con Ácido

Sulfúrico concentrado demostraron la presencia de pigmentos flavonoides,
especialmente flavonas.

4. Por medio de la cromatografía en capa fina se demostró la presencia de

pigmentos flavonoides, tales como hiperosido, quercetina (flavona) y ácido
clorogénico.

5. De acuerdo a la prueba cromatográfica el extracto en el que se identificó

mayor número de pigmentos flavonoides fue el obtenido con etanol.

6. El análisis espectrofotométrico determinó la presencia de flavonoides en los

extractos, al coincidir la longitud de onda con las soluciones estándar.

92
 RECOMENDACIONES

1. En la etapa de recolección, secado y almacenamiento de la materia debe

tenerse especial cuidado para evitar posibles variaciones en los resultados.

2. En el proceso de secado del desecho sólido, asegurarse de que la muestra

tenga peso constante, para que no exista la posibilidad de presencia de
humedad.

3. Al realizar el análisis cromatográfico en capa delgada, usar cromatofolios de

aluminio de Sílica Gel 60F254 , para obtener un porcentaje alto de confianza
y validez.

4. En el proceso de rotaevaporación del solvente, tratar de que la temperatura

no exceda de 40 ºC para evitar caramelización del extracto.

5. Analizar otras plantas, propias de la región y con cultivos sostenidos, con el

fin de obtener otro tipo de colorantes.

93
 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1
George T. Austin. Manual de procesos químicos en la industria.
(Colombia: Editorial McGrawHill, 1997) pp. 573-578.

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caléndula (calendula officinalis L.) para su utilización como colorante natural en
productos para consumo humano. Tesis Ingeniero Químico. Facultad de
Ingeniería. USAC. Guatemala, 2000.

4
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(Guatemala: Editorial Universitaria, 1996) pp 305-307

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mercados importantes. Financiado por el Gobierno de Dinamarca. CCI,
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6
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2003

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Manual del tintorero. Fundación Gabina J.M. (Guatemala. 1999)

8
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Plantas tánicas registradas en Colombia. (Bogotá: Fondo Colombiano de
Investigaciones Científicas y Proyectos Especiales. Instituto de Ciencias
Naturales. Museo de Historia Natural Universidad Nacional de Colombia, 1983)

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 9
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bajo dirección del Doctor Jose Estalella. Gustavo Gil, Editor; Barcelona: 1985)
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rendimiento de 7-metoxicumarina y aceite esencial, en cinco estados de
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11
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Volumen xix. 2001

12
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(México: Editorial Limusa, 1985)

13
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Grupo Editorial Iberoamericana, 1991)

14
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 BIBLIOGRAFÍA

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21. Cromatografía de capa fina.www.ccf.com, 21 de septiembre de 2004

97
 APÉNDICE A

Gráficas absorbancia vrs longitud de onda

Figura 4. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para S1R1

Figura 5. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para S1R2

98
Figura 6. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para S1R3

Figura 7. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para S2R1

99
Figura 8. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para S2R2

Figura 9. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para S2R3

100
Figura 10. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para S3R1

Figura 11. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para S3R2

101
Figura 12. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para S3R3

Figura 13. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para

estándar Naringinina

102
Figura 14. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para
estándar Quercetina

Figura 15. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para

estándar Rutina

103
Figura 16. Gráfico de absorbancia vrs longitud de onda para
estándar Ácido clorogénico

104
 APÉNDICE B

Figura 17. Secador de Bandejas

Figura 18. Equipo Neoclevenger

105
Figura 19. Equipo Soxhlet

Figura 20. Rotaevaporador

106
 Figura 21. Resultados de las pruebas de Shinoda

Figura 22. Resultados de las pruebas de Ácido Sulfúrico concentrado

107
 Figura 23. Desarrollo de la placa cromatográfica

Figura 24. Resultados de la cromatografía de capa fina

108