Scribd Logo
Cargar

¡Te damos la bienvenida a Scribd!

  • 66 vistas

    Aislamiento Bacteriológico PDF

    Cargado por

    Camila Velandia
    El documento describe los procedimientos para el aislamiento bacteriológico de Brucella spp., el cual es el agente causal de la brucelosis. Explica que para estudiar bacterias como Brucella es necesario cultivarlas en medios de cultivo apropiados para obtener poblaciones aisladas de una sola célula. Luego detalla los métodos para el aislamiento de Brucella a partir de diferentes muestras, las características de las colonias y las pruebas para su identificación. Finalmente, brinda recomendaciones sobre el diagnóstico

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd

    Aislamiento Bacteriológico PDF

    Cargado por

    Camila Velandia
    66 vistas19 páginas
    El documento describe los procedimientos para el aislamiento bacteriológico de Brucella spp., el cual es el agente causal de la brucelosis. Explica que para estudiar bacterias como Brucella es necesario cultivarlas en medios de cultivo apropiados para obtener poblaciones aisladas de una sola célula. Luego detalla los métodos para el aislamiento de Brucella a partir de diferentes muestras, las características de las colonias y las pruebas para su identificación. Finalmente, brinda recomendaciones sobre el diagnóstico

    Título original

    AISLAMIENTO BACTERIOLÓGICO.pdf

    Derechos de autor

    © © All Rights Reserved

    Formatos disponibles

    PDF, TXT o lea en línea desde Scribd

    ¿Le pareció útil este documento?

    ¿Este contenido es inapropiado?

    El documento describe los procedimientos para el aislamiento bacteriológico de Brucella spp., el cual es el agente causal de la brucelosis. Explica que para estudiar bacterias como Brucella es necesario cultivarlas en medios de cultivo apropiados para obtener poblaciones aisladas de una sola célula. Luego detalla los métodos para el aislamiento de Brucella a partir de diferentes muestras, las características de las colonias y las pruebas para su identificación. Finalmente, brinda recomendaciones sobre el diagnóstico

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
    Descargar como pdf o txt
    66 vistas19 páginas

    Aislamiento Bacteriológico PDF

    Cargado por

    Camila Velandia
    El documento describe los procedimientos para el aislamiento bacteriológico de Brucella spp., el cual es el agente causal de la brucelosis. Explica que para estudiar bacterias como Brucella es necesario cultivarlas en medios de cultivo apropiados para obtener poblaciones aisladas de una sola célula. Luego detalla los métodos para el aislamiento de Brucella a partir de diferentes muestras, las características de las colonias y las pruebas para su identificación. Finalmente, brinda recomendaciones sobre el diagnóstico

    Copyright:

    © All Rights Reserved
    Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
    Descargar como pdf o txt
    de 19

    AISLAMIENTO

    BACTERIOLÓGICO
    Paula Barreto
    Camila Velandia
    Las bacterias no pueden
    cultivos
    Para obtenerlas
    estudiarse como
    debemos cultivarlas,
    individuos aislados,
    utilizando medios de
    sino como poblaciones, cultivo con los
    por su tamaño. nutrientes necesarios
    Estas poblaciones
    y en cantidades
    deben cumplir con el apropiadas a los
    requisito de provenir requerimientos
    de una sola célula. específicos de los
    microorganismos
    BRUCELLA spp.
    Aislada por primera vez por Sir David Bruce
    en 1886, que observó el microorganismo en
    cultivos esplénicos de soldados que habían
    fallecido por fiebre en Malta, país donde
    la enfermedad era endémica.

    Aunque la prueba más específica para el


    diagnóstico de brucelosis humana es el
    aislamiento de Brucella spp., su eficacia
    es baja y un resultado negativo no puede
    descartar la enfermedad, sobre todo en las
    formas crónicas en las que los cultivos
    negativos son frecuentes.
    Características
    El género Brucella está formado por bacilos gramnegativos
    pequeños, inmóviles y aerobios, de crecimiento lento.

    Brucella melitensis afecta fundamentalmente a cabras y


    ovejas, pero puede afectar a bóvidos y cerdos

    Brucella abortus es el microorganismo implicado con mayor


    frecuencia en la brucelosis bovina

    Brucella suis afecta primariamente al ganado porcino. Las


    tres especies menores (Brucella neotomae, Brucella ovis y
    Brucella canis), no revisten importancia en patología
    humana.
    MUESTRAS
    Hemocultivo
    leche: infección en uno o
    Producto de abortos:
    más cuarterones de la
    Membranas fetales, Fetos
    ubre, se toma 20 mL
    abortados, placenta.
    aprox. de cada pezón.
    Animales sacrificados:
    Exudado vaginal: Se
    tejido reticuloendotelial
    encuentran durante las 6
    (bazo, hígado, ganglios
    semanas siguientes al
    linfáticos, médula ósea),
    parto o aborto, se
    útero grávido o puerperal
    obtiene por escobillon.
    y ubres.
    Medio Bifásico clásico Ruiz
    Aislamiento Castañeda, emplea fase sólida y
    líquida; en procesos agudos tras
    incubación de 2 a 4 días se
    Suele obtenerse por observa en fase sólida pequeñas
    hemocultivo, cultivo de colonias que se deslizan por el
    médula ósea o raramente agar similares a lágrimas de
    por cultivo de líquido cera.
    cefalorraquídeo, líquido
    articular, exudado
    purulento.
    Se emplean sistemas como VITAL
    (bioMérieux), BACTEC
    (Becton-Dickinson) y BACT/ALERT
    (Organon Teknika), resultando ser
    el sistema BACTEC el más eficaz,
    capaz de detectar la presencia
    del microorganismo tras 3 a 5
    días de incubación
    MEDIOS DE CULTIVO
    Se recomiendan como medios de
    Para el aislamiento y la
    cultivo básicos (no selectivos)
    reproducción de las brucelas son
    que esten suplementados con
    preferibles medios sólidos, que
    suero (5%) :
    facilitan la identificación y el
    aislamiento de las colonias y
    ● Medio bifásico Ruiz
    dificultan la disociación. Para
    Castañeda (Hemocultivo)
    cultivar líquidos, especialmente
    ● agar-dextrosa con suero
    sangre, los medias líquidos
    ● agar-triptosa con suero
    ofrecen la ventaja de que permiten
    ● agar-tripticasa-soja
    sembrar mayores cantidades que los
    sólidos.
    Características de colonias en
    cultivo
    Colonias que suelen ser visibles al 3er dia, la placas
    se examina hasta el 4to o 5to dia cuando son
    redondeadas, con borde liso.

    En medios selectivos la proliferación es mas lenta; a


    veces no crece mas que una colonia por placa, al ver
    la placa a contraluz se ven las colonias translúcidas
    y color ámbar pálido.
    Colonias de Brucella canis en agar tripticasa soya con 5% de suero bovino,
    incubadas a 37° C por 72 h. Se observan colonias pequeñas y traslúcidas. Cepa
    aislada de orina de un perro aparentemente sano
    AGAR BRUCELLA
    Enriquecido con un 5% de sangre de
    caballo, fue diseñado originariamente
    para el aislamiento de Brucella spp.La
    bacteria crece lentamente, necesitando
    un mínimo de 3 días hasta 2 semanas. La
    temperatura óptima de incubación del
    cultivo es de 35ºC. Son aerobios
    estrictos.

    Las colonias pueden ser


    traslúcidas o presentar un aspecto
    opaco, granular y pegajoso. La
    morfología está determinada por el
    Ag O del lipopolisacárido de la
    pared celular
    Otros medios a emplear como selectivos

    ● Agar-dextrosa con glicerina(2:1)


    ● Agar-infusión patata
    ● Agar-dextrosa con suero
    ● Medio Kuzdas y Morse: a 1 L de base 100 mg de
    cicloheximida (fungistático) 25000 UI de bacitracina
    activa y 6000 UI polimixina B, mas adición de violeta de
    etilo (sin embargo hay cepas de brucellas spp. sensibles
    a los colorantes y no se desarrollan)
    Cultivo por muestra
    Leche: (Prueba del anillo se debe separar muestra); antes
    del cultivo se centrifuga la leche, en la placa de agar se
    siembra extendiendo una mezcla de nata y sedimento con asa
    grande por método masivo.

    Exudado vaginal: Se flame el extremo que no penetra la vulva


    se extra el escobillón, este se frota en la superficie del
    medio.
    Hemocultivo: Se emplean 10 mL de sangre y se emplea frasco
    de hemocultivo de Ruiz Castañeda, se agita suavemente,
    incubación vertical.

    Membranas fetales: Se lava antes del cultivo (suelen estar


    muy contaminados) con solucion salina esteril ~3 lavados,
    después de los lavados se cortan en trozos y se frotan sobre
    la superficie del medio

    Fetos abortados: Se extiende el material gástrico sobre la


    superficie de la placa de cultivo con asa o escobillón,
    tejidos y meconio se frotan sobre el medio.
    Tinciones
    Tinción de Gram: Bacilos o
    cocobacilos Gram negativos.

    Método de Koster modificado o


    STAMP: Tinción para detectar
    especies de Brucella en tejidos de
    mamíferos. Se utiliza safranina
    como colorante de las
    preparaciones.

    Método de Ziehl-Neelsen modificado:


    Brucella teñidas de rojo sobre
    fondo azul, en membranas fetales
    se observan agrupadas en racimos.
    ¿qué hacer
    en el
    laboratorio?
    Reacción de Reacción de Indol
    catalasa, oxidasa y Voges Proskauer
    y ureasa positiva. negativa
    Diagnóstico diferencial
    Bordetella bronchiseptica: tejidos de cobayo, diferenciación
    por estructura Ag’s , uso de CS y motilidad en medio.

    Vibrio fetus: (Campylobacter fetus) móvil y morfología en


    coma.

    Moraxella y Acinetobacter: No fermentación de glucosa,


    diplococos y pueden ser encapsulados, pueden o no oxidar la
    glucosa, negativos para ureasa y nitratos. (no distinción
    fácil de Brucella)

    Yersinia enterocolitica tipo IX: Diferenciación fermenta la


    glucosa, motilidad a 22 °C y mayor tamaño morfológico.
    REFERENCIAS
    Alton G, Jones L, Pietz D. las técnicas de laboratorio para
    brucelosis. 2da ed. FAO OMS; Consultado: 10 Septiembre 2019.

    También podría gustarte