ESPOROFAR BIOINDICADOR - CALOR MIDO

(Geobacillus stearothermophilus - CCCD B004) INTRODUO: Foram Joseph Lister (1867) e Ignaz Semelweis (1874) os primeiros cirurgies a desinfetarem as mos, o instrumental e campo operatrio de modo a evitar a infeco da ferida cirrgica, surgindo da a cirurgia antissptica, que nos dias atuais deu lugar cirurgia assptica, a qual se alcana, graas esterilizao por meios fsicos e qumicos de reas, instrumentais e campos operatrios. Esterilizao, portanto, o ato ou processo fsico ou qumico que destri ou elimina todas as formas de vida, especialmente microorganismos. A qualidade desta esterilizao hoje aferida atravs de indicadores qumicos e biolgicos de preferncia aos ltimos. O Geobacillus stearothermophilus, organismo gram-positivo esporulado, no patognico, graas sua termofilia utilizado no monitoramento e validao de ciclos de esterilizao por calor mido, realizados em equipamentos especficos denominados autoclaves. FINALIDADE DO PRODUTO: O produto tem como objetivo acompanhar o grau de esterilizao obtido de um lote ou carga submetida ao processo de esterilizao por calor mido (em autoclaves) e tendo como indicador um organismo vivo de alta resistncia trmica (esporos de Geobacillus stearothermophilus), sendo seu uso indicado em monitoria peridica de ciclos de esterilizao e na validao de autoclaves. Estudos indicam que os esporos de Geobacillus stearothermophilus so os mais indicados para o uso como indicadores biolgicos em ciclos de esterilizao por vapor de perxido de hidrognio (VPHP). OBTENO DO PRODUTO: Esporos bacterianos so obtidos atravs do crescimento em meio de cultivo apropriado, e aps, diludos e contados, so incorporados a fitas (6x25mm) de papel de filtro. As linhagens do organismo usado na obteno de bioindicadores so derivadas da CCCD (Coleo de Cultura Cefar Diagnstica), sendo compatveis as cepas padro internacionalmente reconhecidas. As especificao do organismo utilizado como bioindicador em processos de esterilizao por calor mido so: TABELA I Esporos Geobacillus stearothermophilus - CCCD B004 55-57C - Por 7 dias/incubao Processo de Esterilizao Valor "D" aproximado Vapor saturado 121C 1,5 minuto

INSTRUO DE USO: 1. Distribuir os envelopes ou frascos-ampola no equipamento de esterilizao, obedecendo a TABELA I, quanto ao organismo e processo de esterilizao recomendados. 2. FITAS - Recomenda-se posicionar uma unidade (envelope com fita) em cada canto da cmara interna do equipamento esterilizador, uma unidade no "ponto frio" da mesma, isto , local onde a temperatura no alcana sua plenitude, verificado por testes de avaliao feitos anteriormente e 1 unidade no meio da carga a ser esterilizada. Aps a esterilizao, retirar assepticamente as fitas contidas nos envelopes com auxilio de uma pina estril (ou flambada) e, em seguida, coloc-las em meio de cultivo ESPOROFAR CONTROLE 10mL, que um meio com indicador de azul de bromotimol, usando um frasco de meio para cada fita. Proceder da mesma forma com a fita controle (no esterilizada). Outro meio de cultivo recomendado o Peptona Casena Soja Caldo (TSB) 10mL em tubo ou frasco. Incubar as fitas conforme especificado na TABELA I. Meios contendo indicador, no caso o azul de bromotimol, facilitam a visualizao do resultado. 3. FRASCO-AMPOLA - Bioindicador completo, contendo em cada frasco, indicador azul de 6 bromotimol em meio de cultivo especial, mais G.stearothermophilus na concentrao de 10 esporos impregnados em fita. O meio de cultivo e a fita so separados por um aditivo isolante (OPASIL). Para validao do ciclo de esterilizao, posicionar 1 frasco contendo a fita de papel de filtro em cada canto da cmara interna da autoclave, 1 frasco no ponto frio da mesma e 1 frasco no meio da carga a ser esterilizada. Aps a esterilizao, os frascos-ampolas so agitados suavemente para o contato do meio com a fita de papel e levados imediatamente incubadora por tempo e temperatura especificados na TABELA I. NOTAS: a) O produto Esporofar - Bioindicador frasco - ampola no resiste a temperaturas superiores 130C, portanto, no deve ser utilizado para monitoramento de estufas e/ou fornos de esterilizao. b) A indicao do uso de esporos de Geobacillus stearothermophilus para validao de ciclos de esterilizao por vapor de perxido de hidrognio resultado de pesquisa bibliogrfica, no tendo a Cefar Diagnstica resultado de validao por este processo. A responsabilidade pelos parmetros de validao por este mtodo do usurio. 6 c) Todas as apresentaes Geobacillus stearothermophilus apresentam contagem entre 1 e 3 x10 UFC. 4. SUSPENSO - A suspenso salina de esporos de G. stearothermophilus, com contagem padronizada em 107 UFC/mL destina-se confeco de indicadores biolgicos, conforme padronizao do usurio. Para impregnao de fitas de papel de filtro, recomenda-se a inoculao, com auxlio de pipeta microltrica, de 0,1mL de suspenso em cada fita de forma a 6 resultar em uma populao de 10 esporos / fita. Para padronizao de bioindicadores em forma lquida, sugere-se o uso de salina ou meio de cultivo em caldo (p. ex. Peptona Casena Soja Caldo), observando-se a diluio requerida para a padronizao da populao de esporos. Variaes na padronizao da populao por unidade de bioindicador podem ser feitas a critrio do usurio, de acordo com a metodologia de validao adotada. INTERPRETAO DO RESULTADO: 1. No meio com indicador, a viragem da cor verde para o amarelo, indica um resultado POSITIVO (crescimento bacteriano), e a esterilizao ser considerada NO SATISFATRIA. Considera-se o resultado SATISFATRIO ou NEGATIVO se em at 7 dias de incubao na temperatura recomendada, o meio de cultivo no apresentar qualquer tipo de alterao visual, conforme determina compndios oficiais. 2. No meio sem indicador, o resultado positivo evidenciado pela turvao do mesmo. A esterilizao ser considerada SATISFATRIA, quando, at o 7o dia, o meio se mostrar transparente ou sem crescimento bacteriano. PRECAUES TCNICAS: Todo laboratrio de microbiologia deve funcionar sob gide de normas bem estabelecidas que possam prevenir no s os que trabalham nas reas de risco, como tambm aqueles que indiretamente a elas estejam relacionados. Cada rea da microbiologia deve ter o seu manual de boas prticas laboratoriais (BPL). DESCARTE Autoclavar 121C por 30 minutos todo o material usado no manuseio microbiolgico. CONTROLE DE QUALIDADE: Cada lote de bioindicador recebido e dentro do prazo de validade deve ser submetido a ensaios de controle de qualidade (esterilidade e eficincia). Para isto, deve o tcnico proceder da seguinte maneira: FITAS: Colocar uma fita no meio de ESPOROFAR CONTROLE ou TSB e incubar na temperatura recomendada. A viragem da cor do meio, no caso do ESPOROFAR CONTROLE, ou a turvao do meio de TSB, que poder se dar nas primeiras 24 horas indica a presena de organismos na fita. Recomenda-se ainda uma colorao pelo gram e contagem especficas. FRASCOS-AMPOLA: Incubar 1 frasco-ampola na temperatura de 55-57C (G.stearothermophilus). A viragem da cor do meio, que poder se dar nas primeiras 24 horas indica presena de organismos no meio. Recomenda-se ainda uma colorao pelo gram e contagens especficas. Para avaliao da eficincia, realiza-se o teste de SOBREVIVNCIA E MORTE, e os resultados mdios a serem obtidos so especificados na TABELA II. Para os ensaios de controle de qualidade, a Cefar poder fornecer metodologia mediante solicitao. TABELA II
FITAS: Esterilizao: Organismo: Meio de Cultivo: Incubao: Sobrevivncia: Morte: Vapor saturado 121C. Esporos de Geobacillus stearothermophilus. ESPOROFAR CONTROLE ou TSB. 55-57C. 5 minutos. 15 minutos. Vapor saturado 121C. Esporos de G. stearothermophilus. 55-57C. 5 minutos. 15 minutos.

FRASCOS-AMPOLA:

Esterilizao: Organismo: Incubao: Sobrevivncia: Morte:

CONCEITOS PARA VALIDAO: Esterilizao: Processo de eliminao de 99,9999% da populao de microorganismos viveis (esporos e formas vegetativas) de objetos de vidro, metal, tecidos, lquidos e produtos farmacuticos. Valor D (resistncia trmica dos esporos): o tempo, em minutos, sob condies especficas, necessrio para conseguir uma reduo logartmica (90%) na populao de microorganismos viveis. Mtodo de Spearman-Kaber: D = T/logNo. + 0,2507 T = tk d/2 (d/n. r n)

Onde: a) N: nmero inicial de esporos em cada amostra b) T: tempo mdio de esterilizao (tempo de morte) c) d: intervalo entre os tempos de aquecimento d) tk: primeiro intervalo de tempo onde todas as amostras apresentam crescimento negativo e) r: nmero de amostras que no apresentam crescimento a cada tempo de aquecimento em t1 e tk. f) n: nmero total de amostras a cada tempo O clculo do tempo de esterilizao define-se por: D x 6 - Tempo de ciclo mnimo para obteno de populao residual de 99,9999% (100). D x 12 - Tempo de ciclo mnimo para obteno de populao residual de 106 (NGE: Nvel de Garantia de Esterilidade). NOTA: o valor D de cada lote de bioindicador informado no Certificado de Performance que acompanha o produto. Valor Z (nvel de esterilidade): o nmero de graus em temperatura, sob condies especficas, necessrias para conseguir uma reduo logartmica no valor D. A partir do valor D do lote, usar o valor Z para predizer os parmetros de operao de ciclos com temperaturas diferentes de 121C.
Temperatura do ciclo (valor D) D 101.C: 150min D 111.C : 15min D 121.C: 1,5min D 131.C: 0,15min Tempo mnimo do ciclo (D x seis) 900 min 90 min 9 min 0,9 min Tempo mnimo do ciclo (D x 12) 1800 min 180 min 18 min 1,8 min

Valor F (letalidade): O grau de letalidade do ciclo a sua durao efetiva, em minutos, monitorado atravs do termopar (tempo equivalente a uma temperatura de referncia). 1 minuto a 121C equivale a 1 minuto a 121C 1 minuto a 120C equivale a 0,794 minuto a 121C 1 minuto a 119C equivale a 0,630 minuto a 121C NOTA: a) Trs minutos num processo com temperatura oscilante e / ou em queda foram equivalentes a 2,424 minutos a 121C. b) Para um ciclo terico de D x 12 (18min), a durao efetiva do ciclo pode ser maior ou menor que 18 minutos (parmetro analisado em validao atravs do uso de termopares). GARANTIA DE QUALIDADE: O desempenho dos produtos garantido pela Cefar Diagnstica Ltda. No caso do produto no apresentar o desempenho esperado, entrar em contato com o Servio de Assessoria Cientfica Cefar (SACC). LIMITAES TCNICAS: O produto perder sua finalidade se as recomendaes aqui especificadas no forem estritamente seguidas. ARMAZENAMENTO: Manter o produto, em qualquer apresentao, sob refrigerao entre temperaturas de 2-8C, ao abrigo da luz e umidade. Os produtos no devem ser congelados ( O esporofar ampola pode alterar a sua cor original ). NOTA: O produto, em qualquer apresentao, resiste a uma temperatura at 30C por um perodo de 15 dias, o que facilita seu transporte. Contudo, to logo tenha chegado a seu destino, manter na temperatura de armazenamento recomendada. APRESENTAO: 6 Fitas: Caixa com 100 unidades envelopadas individualmente. Cada unidade contm 10 esporos viveis (G. stearothermophilus); Kit: Caixa contendo 25 flaconetes com 3mL de caldo de cultivo e 25 fitas envelopadas individualmente (G. stearothermophilus); Esporofar Controle: Caixa com 10 frascos com 10mL de caldo de cultivo com indicador; Suspenso: Frasco contendo 10mL de suspenso salina com 107 esporos viveis / mL (G. stearothermophilus); Frascos-ampola: G. stearothermophilus, caixa com 10 unidades. Cada unidade contm 1 fita 6 impregnada com 10 esporos viveis e 2mL de meio de cultivo em Agar, separados por uma camada de aditivo isolante (OPASIL). NOTA: Este produto alterado na sua cor verde a amarelo em temperatura abaixo de 2C, contudo ao voltar na sua cor normal, ele no perde sua eficcia. VALIDADE: Mantidas as condies ideais de armazenamento, o produto tem validade de 2 anos, a contar da data da fabricao. A apresentao em frasco-ampola possui a validade de 06 meses, a contar da data da fabricao. SOMENTE PARA USO DIAGNSTICO IN VITRO REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS: 1. Culture of Biological Indicators of Sterilization Processes, 19-9; Clinical Microbiology Procedures Handbook, ASM, Vol. 2, 1.992. 2. Desinfection, Sterilization, and Preservation, Edited by Seymour S. Block, 4a Ed., USA, 1.991. 3. Farmacopia Brasileira, 4a Ed. 1a parte, 1.988. 4. Hoover, John E., Dispersing of Medication, Mack Publishing Company, 8a Ed., 1.976, p. 284288. 5. U.S. Pharmacopia, USP XXII, NF XVII, 1.990. 6.U.S. Pharmacopeia, USP XXVIII, NF XVIII, 2005. 7.Vessoni Penna, T.C. et al, Mtodos Gerais de Esterilizao. Revista de Alimentao e Nutrio, SP, 6 (21): 55-64, 1.985. 8.International Standard ISO 11138 Sterilization of health care products. Part 1: Biological indicators, General requirements. 2 ed., 2006-07. 9.International Standard ISO 11138 Sterilization of health care products. Part 3: Biological indicators for moist heat sterilization processes. 2 ed., 2006-07.

Cefar Diagnstica Ltda. Av. Eng. Alberto de Zagottis, 635 So Paulo SP CNPJ: 44.562.700/0001-45 Isento de Registro no MS de acordo com a RDC 206/06. Farm.Resp. Dr. Nelson Kioshi Higuti CRF SP n 18826 SAC (11) 5521.9244; e-mail: [email protected] Ind. Brasileira.

Dez/10

FRASCO-AMPOLA COM PATENTE EM PROCESSAMENTO