L’HEMOCULTURE

MALICK FAYE IDE/MASTER II SST

 INTRODUCTION
• Le souci de l'équipe médicale est l'efficacité des soins.

• En infectiologie, cette efficacité consiste, en partie, à isoler le germe

responsable pour prescrire l'antibiotique adéquat.

• La bactériologie à pour mission d'identifier le ou les agents

infectieux, à l'examen direct et par culture, et de tester sa sensibilité
aux antibiotiques.
L'hémoculture (hémo=sang, culture) consiste à mettre le sang dans
un milieu de culture approprié favorisant la pousse des bactéries
présentes, afin d'être identifier.
Le nombre de demande d'hémoculture ne cessent d'augmenter en
pratique médicale car il est garant du diagnostic (isolement du
germe responsable) et du traitement (le test de sensibilité aux
antibiotiques).
 GENERALITES
Le sang est un milieu essentiellement stérile doué d’un pouvoir
bactéricide lui permettant dans une certaine mesure de lutter
contre l’intrusion de certains germes pathogènes.

Il est classique d’admettre cliniquement une bactériémie est le

passage transitoire et bénin de bactéries dans le sang.

Ces bactéries sont éliminées par le système endothélial.

La bactériémie appelée septicémie avec multiplication plus active
des germes est due à une décharge bactérienne à partir de gîtes
locaux infectés ou au cours de certains pathologies infectieuses.
Ce passage dans le sang se fait par le système lymphatique.
Ces bactéries peuvent aussi gîter dans le système circulatoire
(endocardite, thrombophlébite)
 OBJECTIF :

L’objectif est le diagnostic d’un sepsis avec une bactériémie

et pronostiquer le degré de dissémination.
 DEFINITION
L'hémoculture est un prélèvement sanguin stérile pour étude
bactériologique, dont la culture va permettre la mise en évidence de
la présence de germes aérobies et ou anaérobies.

Il permet donc de poser un diagnostic pour savoir si l'état est

septicémique ou bactériémie.
 Germes aérobies : germes ayant besoin d'oxygène pour se développer.
 Le flacon aérobie doit contenir un peu d'air pour permettre la culture des
germes aérobies, si le prélèvement ne permet pas l'introduction d'air dans le
flacon, il faut injecter un peu d'air dans celui-ci à la fin du recueil.
 Germes anaérobie : germes n'ayant pas besoin d'oxygène pour se
développer.
 Le flacon anaérobie ne doit pas contenir d'air pendant et après le
prélèvement.
Cadre législatif
 Soin infirmier sur prescription médicale :
 INDICATIONS
• Suspicion de fièvre typhoïde avant le10 eme jour.
• Fièvre inexpliquée chez la femme enceinte.
• Fièvre inexpliquée en période post partum.
• Fièvre inexpliquée chez un malade pressentant une cardiopathie.
• Fièvre persistante ne cédant pas aux antipalustes
• Fièvre chez un immunodéprimé.
• Fièvre chez un patient présentant des lésions cutanées
• - Devant un choc septique
• Bilan infectieux.
• Réalisation d'un antibiogramme.
 CONTRE INDICATIONS
• Bras perfusé
• - Présence d'une fistule artério-veineuse
• - Patient sous traitement antibiotique
 BUT

• Confirmer le diagnostic de septicémie

• - Identifier le germe en cause

• - Réaliser un antibiogramme

• Prescrire l'antibiotique qui agit sur le germe en cause.

 LES CONDITIONS A RESPECTER POUR REALISER UN
PRELEVEMENT D'HEMOCULTURE DE QUALITE

• Réaliser un prélèvement de qualité ; c'est le préalable

essentiel à tout examen en bactériologie

• Le prélèvement de sang pour hémoculture doit satisfaire à

plusieurs critères ou exigences :
A quel moment réaliser des hémocultures ?
Les hémocultures doivent être réalisées au moment d’une décharge bactérienne
se manifestant par :
•la présence d’une fièvre d’origine indéterminée (température > 38.5°) ;
•la présence d’une hypothermie marquant un état infectieux grave
•la présence de frissons (la prise de paracétamol pourra masquer la fièvre mais
les frissons signeront alors un possible état septique) ;
•signes cliniques faisant suspecter un sepsis sévère ou un choc septique.
 Eviter les contaminants et travailler en sécurité
L'asepsie de la peau doit se faire successivement avec de l'alcool à
70% puis un produit iodé en respectant le temps de contact (1 à 2
minutes)
La désinfection du capuchon du flacon d'hémoculture par l'alcool à
70% Bétadine iodé
La ponction veineuse est la seule méthode fiable pour prélever du
sang en vue de la culture.
 Utiliser deux milieux de cultures différents :
À chaque prélèvement d'hémoculture on doit préparer deux flacons,
l'un incube en aérobiose, l'autre en anaérobiose.
Ces deux milieux biologique ont pour but de cultiver les germes et
d'améliorer la chance de les détecter précocement, a condition de
doubler le volume du sang inoculé, ce qui accroit la sensibilité de
l'hémoculture.
 Choisir le meilleur site de ponction :
Au pli du coude : en veineux périphérique direct
 Prélever une quantité de sang suffisante
Il existe une relation directe entre le volume de sang inoculé dans les
flacons d'hémoculture et le rendement de la technique.
Un volume de 20 ml de sang prélevé augmente le pourcentage de
positivité de 30% comparativement à un volume de 10 ml qui est le
minimum souhaitable chez l'adulte.
Ainsi l'augmentation du volume du sang inoculé dans les flacons
augmente la sensibilité de la détection de la productivité par un
automate.
Chez l'enfant il suffit de prélever 3 à 5ml, 1à2 ml chez le nouveau né
car la densité des bactéries dans le sang est plus importante que chez
l'adulte
 Acheminer les flacons au laboratoire :
Température :
Il faut transporter les hémocultures à une température comprise
entre 34 =°C à 37=°C
· Milieu de transport :
Pour les services ne possédant pas d'étuve, acheminer le
prélèvement le plus rapidement possible au laboratoire dans une
boîte isotherme ou dans du coton cardé ,pour maintenir la
température
Faire les transmissions écrites et orales.
Délai de transport :
C'est l'un des conditions nécessaires car le facteur temps joue un
rôle important dans la cinétique de multiplication des bactéries.
Donc il faut amener les flacons d'hémoculture immédiatement au
laboratoire dans un délai inférieur à 2h
 MATERIEL
• Flacons d'hémocultures pour différencier les germes :

• 1 flacon d'hémoculture aérobie : germes ayant besoin d'oxygène pour se

développer.

• 1 flacon d'hémoculture anaérobie : germes n'ayant pas besoin d'oxygène

pour se développer.

• Un dispositif de prélèvement (Corps de pompe à usage unique stérile si

possible.
Aiguille épicrânienne équipée d'une tubulure et d'un
adaptateur au corps de pompe ou aiguille de prélèvement
s'adaptant au corps de pompe).
Garrot propre et décontaminé
Plateaux propre et décontaminé.
Protection papier absorbante à usage unique.
Sparadrap.
 Produits pour l’antisepsie :
 Respecter les mêmes gammes de produit : polyvidone
iodée ou chlorexidine.
 Savon antiseptique.
 Sérum physiologique ou eau stérile.
 Antiseptique dermique.
 Gants stériles à usage unique.
 Compresses stériles.
 Etiquettes laboratoire d'identification patient.
 Bons d'analyses laboratoire, avec pochette de transport.
 Sac à élimination des déchets.
 Conteneur à déchets contaminés piquants et tranchants.
 Désinfectant de surface et chiffonnette.
 Nécessaire à l'hygiène des mains.
 REALISATION DU SOIN
• Préparation du patient
• 1. Vérifier l'identité du malade
• 2. Prévenir et informer le patient sur la nature de l'examen
• 3. Vérifier si le malade est perfusé ou présente une fistule
• 4. Vérifier la température du malade
• 5. Installer confortablement le patient et effectuer un premier
repérage de la veine à ponctionner
6.Vérifier la prescription médicale.
7.Installer le matériel après vérification des dates de péremptions et
de l'intégrité des emballages.
8.Installation sur une surface propre et désinfectée au préalable.
9.Installer le réniforme et le container à déchets contaminés piquants
loin du matériel propre.
10.Respecter le triangle d'hygiène, de sécurité et d'ergonomie :
Propre (matériel) – Patient – Sale (poubelles).
 PREPARATION
• Mettre la protection sous la zone de ponction.
• Effectuer un lavage antiseptique des mains ou effectuer un traitement hygiénique des
mains par frictions avec une solution hydro-alcoolique : hygiène des mains.
• Mettre les gants stériles.
• Pratiquer une antisepsie de la peau en 4 temps :
• Procéder en partant du bas (de la main) et en allant vers le haut (vers le cœur) ce qui
permet de désinfecter sous les poils.
• Aller de l'extérieur vers l'intérieur = faire un côté, l'autre côté et terminer par le milieu
(site de ponction).
• Ne jamais repasser à un même endroit.
 Utiliser une compresse par passage puis la jeter dans le sac à
déchets.
 Respecter le temps de contact de l'antiseptique.
 Nettoyer avec le savon antiseptique.
 Rincer avec le sérum physiologique ou l'eau stérile.
 Sécher avec des compresses stériles sèches.
 Appliquer l'antiseptique dermique.
 Adapter l'aiguille sur le corps de pompe en le maintenant avec
une compresse stérile pour ne pas se déstériliser si utilisation
d'un corps de pompe non stérile.
 PRELEVEMENT
• Diriger le biseau de l'aiguille vers le haut : ce qui facilite la ponction et diminue
l'acte douleur.
• Maintenir la veine et la ponctionner.
• De la main non dominante maintenir l'aiguille, et de la main dominante, insérer
les flacons dans le corps de pompe :
• Prélever en premier le sang dans le flacon aérobie : puisque l'aiguille et la
tubulure contiennent de l'air, ce qui permettra aux germes aérobies de se
développer. En l'absence d'introduction d'air dans le flacon lors du prélèvement,
il faut injecter un peu d'air dans celui-ci à la fin du recueil.
• Prélever en second le sang dans le flacon anaérobie.
 Tout en maintenant l'aiguille, desserrer le garrot d'une main.
 Placer une compresse imbibée d'antiseptique sur le point de ponction.
 Retirer l'aiguille et comprimer le point de ponction pour éviter un hématome.
 Jeter immédiatement l'aiguille et le corps de pompe.
 Enlever et jeter les gants.
 Mettre une compresse propre et un sparadrap sur le point de ponction.
 Eliminer les déchets et désinfecter le matériel utilisé.
Effectuer un lavage simple des mains ou effectuer un traitement hygiénique des
mains par frictions avec une solution hydro-alcoolique : hygiène des mains.
 Noter le soin avec la température du patient dans la feuille de
surveillance
 Vérifier la concordance des étiquettes et de l'identité du patient puis
étiqueter le flacon, remplir les bons d'analyse et acheminer les
flacons au laboratoire d'analyse ou en les ranger à l'intérieur d'une
étuve (37°C) à défaut de l'acheminement immédiat.
 Transmission : heure de prélèvement, nombres de prélèvements
(n°1, n°2, n°3,...), types de flacons prélevés, température du patient,
réactions du patient.
 RESULTAT :
La majorité des hémocultures se positivent dans les heures ou les jours qui
suivent (2 à 5 maximum).
Il peut exister des fausses négativités, c'est pourquoi il vaut mieux effectuer
plusieurs prélèvements.
Les causes d'échec peuvent être dues soit à des prélèvements tardifs au cours de
la maladie, soit à une quantité de sang insuffisante dans les flacons, le malade a
déjà reçu un anti infectieux.
 LES INCIDENTS ET LES ACCIDENTS
Chez les personnes soignant
• · Accident d'exposition au sang AES
Chez les personnes soignées
• Douleur
• · Présence d'hématome aux points de ponction
• · Des saignements au niveau de site de prélèvement
• · Malaise vagal
Pour la qualité des prélèvements de l'hémoculture
• · Le prélèvement doit être absolument stérile, lors que les souillures rendaient le
prélèvement inexploitable.
• · La pénétration d'air dans les flacons anaérobies détruit l'objet de recherche
 REGLES A OBSERVER:PRECAUTIONS
• Une hémoculture doit être pratiquée avec des mesures d’asepsies rigoureuses.

• Par un opérateur compétent assisté d’une aide préparé à cet effet

• De préférence avant tout traitement antibiotique ou aux sulfamides. Si le

traitement est déjà entamé ouvrir une fenêtre thérapeutique de 48 à 72h sauf
en cas d’urgence.

• Dans les deux cas il faut toujours signaler le laboratoire sur le traitement déjà
entamé
-Faire le prélèvement le plus tôt possible dans l’évolution des maladies pour
éviter
Les résultats faussement négatifs car la décharge bactérienne n’est pas
permanente
Et peut être entravée par les antibiotiques ou les anticorps.
-Lorsque la fièvre est discontinue faire les prélèvements au moment des pics
Thermiques et au cours des frissons.
-Lorsque la fièvre est discontinue mais la température ne peut atteindre 38°c
(maladie d’Osler) établir une courbe thermique horaire et faire trois (03)
Prélèvements par une heure d’intervalle.
-Lorsque la fièvre est continue le moment du prélèvement importe peu.
-Les prélèvements doivent être répétés ;le nombre idéal d’hémoculture étant
difficile a préciser. Selon certains biologistes une deuxième hémoculture est
positive dans
80% des cas, une troisième dans 89 à 99% des cas.
-Eviter les déplacements d’air au moment du prélèvement (fermer portes et
fenêtres,
Arrêter la ventilation et se déplacer au minimum réduire l’assistance au stricte
minimum)
Eviter de parler ou de tousser au moment du prélèvement, porter
un masque si disponible.
-La quantité de sang à prélever doit être égale au1/10 ème du
milieu de culture.
-De préférence faire la ponction chez :
L’adulte :au pli du coude
L’enfant :à la veine épicrânienne ou jugulaire externe (expert) ou
au talon chez le nourrisson ou à la veine fémorale
RECOMMADATIONS
Pour éviter les faux négatifs
• Prélever au moins 10 ml par flacon chez l’adulte et 2 ml chez
l’enfant pour permettre une détection optimale des micro-
organismes qui sont présents en faible densité dans le sang
notamment chez l’adulte (et donc éviter les faux négatifs).
• Réaliser au moins 2 à 3 séries d’hémocultures par 24h, espacer
les trains d’hémocultures de 15 à 30 minutes sur différents sites
anatomiques pour détecter l’ensemble des micro-organismes
incriminés et notamment les bactériémies intermittentes.
Pour éviter les faux positifs
•Importance de l’antiseptie avant le rélèvement : près de la moitié
des hémocultures positives sont de faux positifs.
•Éviter au maximum les prélèvements sur des dispositifs invasifs
type cathéter veineux central, artériel, chambre implantable ou
PICC line, voire sur une VVP car ces prélèvements augmentent de
façon significative la fréquence de faux positifs (dispositifs colonisés
par la flore cutanée).
 MERCI DE VOTRE ATTENTION

A MEDITER :
« L’ACCUEIL EST AU DEBUT ET A
LA FIN DE TOUT ACTE DE SOIN »