105

15. TRANSCRIPCIÓN

O. Borsani, M. Sotelo y J. Monza

Revisado por la Dra. Sabina Vidal, Laboratorio de Biología
Molecular Vegetal, Instituto de Química Biológica,
Facultad de Ciencias, UdelaR.

1. La transcripción corresponde a la sínte- 2. La transcripción involucra una enzima,

sis de ARN sustratos y ADN molde pautado

Las células necesitan producir proteínas a partir • La enzima que cataliza la reacción de polime-
de la información genética contenida en su ADN rización entre nucleótidos trifosfato (NTP) es
y para esto son necesarios dos procesos: la trans- la ARN polimerasa (ARN pol). Esta enzima re-
cripción y la traducción. (Fig. 1) quiere de un ADN molde y de los sustratos, que
son los ribonucleótidos ATP, GTP, UTP y CTP.
• A diferencia de la ADN polimerasa (ADN pol),
la ARN pol no necesita de un cebador para
iniciar la síntesis de ARN, es decir, la trans-
cripción.
• Al igual que en la replicación, en la transcrip-
ción el ADN es leído desde el extremo 3’ al
extremo 5’, pero el ARN complementario se
va sintetizando en la dirección 5´a 3´. De esa
forma, los ribonucleótidos se van agregando en
Figura 1. Transcripción y duplicación del ADN. La dupli-
el extremo 3´OH libre del ribonucleótido pre-
cación del ADN (replicación) conlleva a moléculas idénticas
a la que le dio origen: la información se duplica. La transcrip-
cedente, formando enlaces fosfodiéster entre
ción genera ARN a partir de ADN: los genes se expresan. ellos, según se muestra en la figura 2.

• La transcripción es un proceso enzimático que

consiste en sintetizar a los diferentes tipos de mo-
léculas de ARN (mensajero, ribosomal y de trans-
ferencia) a partir de una región definida de ADN.

• Cada región de ADN que se transcribe es un

gen. Si el gen transcripto corresponde a una
proteína, el resultado de la transcripción es
ARN mensajero (ARNm), que luego puede ser
traducido a una proteína.

• Cada gen está pautado por secuencias específi-

cas que flanquean el molde y marcan el princi-
pio y el fin.

• En general, la mayoría de los genes no se trans-

criben de manera permanente: la transcripción
está regulada según la necesidad del producto
del gen en cuestión.
Figura 2. Formación de un enlace fosfodiester entre el
+ Observe que la transcripción corresponde a la grupo OH 3´y el grupo fosfato 5´de ribonucleótidos tri-
primera etapa en la expresión de los genes (Fig. 1). fosfato para formar una hebra de ARN.
106

• Los procariotas tienen una ARN pol, mientras • En procariotas los promotores constan de 40 a
que los eucariotas tienen tres tipos, la ARN pol 60 pb, que incluyen secuencias de 6 pb idénti-
I que transcribe genes que codifican el ARN ri- cas o similares a TATAAT. La comparación de
bosomal (ARNr), la ARN pol II que transcribe secuencias de promotores bacterianos ha pues-
genes que codifican para proteínas y forman el to de manifiesto similitudes en dos secuencias
ARN mensajero (ARNm) y la ARN pol III que cortas centradas alrededor de las posiciones
transcribe genes que codifican para ARN de -10 y -35, denominadas secuencia consenso
transferencia (ARNt). (Fig. 3).

• En la transcripción, frente a una base A (adeni-

na) del ADN la ARNpol incorpora un NTP con
la base U (uracilo): los ARN no tienen T.

• La ARN pol carece de actividad exonucleasa

capaz de corregir errores. Cuando se produce
un error (con una frecuencia de uno cada 104 ó
105 nucleótidos incorporados) los ribonucleóti-
dos incorrectos no se remueven. Como a partir
de un gen se producen muchas copias de ARN
y todos finalmente son degradados y reempla-
zados, un error en una molécula de ARN gene-
ralmente no tiene consecuencias para la célula.

• Además de la ARN pol hay otras moléculas que

intervienen en la transcripción. Por ejemplo
en procariotas hay diferentes proteínas llama-
das factores sigma que se unen a la ARN pol
y determinan su unión a los distintos promo-
tores. Los eucariotas utilizan otras proteínas
llamadas factores de transcripción que ayudan
a la ARN pol a unirse al ADN. Los factores de
transcripción se unen primero al ADN y luego
la ARN pol a ellos para formar el complejo de
iniciación de la transcripción. Figura 3. Promotores de diferentes genes en procariotas.
Las similitudes en las secuencias de promotores bacterianos
se encuentran alrededor de las posiciones -10 y -35 del inicio
de transcripción. Las secuencias no son idénticas en todos
3. La transcripción consta de tres etapas: los promotores, pero hay nucleótidos que se encuentran con
iniciación, elongación y terminación mayor frecuencia que otros en determinadas posiciones. La
secuencia generada por estos nucleótidos más frecuentes se
En procariotas y eucariotas se definen las mis- denomina secuencia consenso.
mas etapas en la transcripción, sin embargo la
maquinaria involucrada y los mecanismos regu- • Las secuencias de los promotores eucariotas
latorios de cada una presentan diferencias entre son más variables que las de procariotas. A pe-
ambos tipos celulares. sar de ello, muchos promotores de genes que
codifican para proteínas tienen una secuencia
3.1 Iniciación similar: un elemento llamado TATA box, loca-
• Los promotores son secuencias específicas de lizado en la posición -25 a -30 pb aproxima-
ADN que pautan la hebra de ADN a ser trans- damente, y otro elemento (TFIIB), localizado
cripta, es decir el molde y el inicio de la trans- a -35 pb del sitio de inicio de la transcripción.
cripción (sitio +1). Además, los eucariotas poseen secuencias de-
 107

nominadas enhancers que aumentan la efi- misma, hace que la interacción entre el ARN y
ciencia de la transcripción y pueden localizarse la ARNpol se desestabilice facilitando la diso-
a cientos o miles de pb del sitio de inicio de la ciación del transcripto.
transcripción.
• En eucariotas la transcripción termina una vez
• Cuando ocurren mutaciones en esas secuen- que se transcribe la secuencia llamada de po-
cias conservadas se puede afectar la función liadenilación (AAUAAA). El transcripto es libe-
del promotor y la eficiencia de la unión con la rado cuando la ARNpol pasa esta secuencia de
ARNpol, y a consecuencia la expresión del gen unas 30 pb, aunque el sitio de terminación no
en cuestión. es tan definido como en procariotas.

• Para que la ARN pol sintetice ARN, el dúplex

de ADN debe desenrollarse en una distancia
corta (unas 17 pb) formando una “burbuja” de
transcripción. Una vez añadidos los 2 primeros
nucleótidos se considera finalizada la inicia-
ción de la transcripción.

3.2 Elongación
Durante la elongación la ARN pol añade ribonu-
cleótidos complementarios al ADN, denomina-
dos genéricamente NTP (ATP, GTP, CTP y UTP)
a una velocidad de 40 nucleótidos por segundo.
Figura 4. Horquilla del ARN. Esta estructura determina el
• El extremo en crecimiento de la nueva cadena fin de la transcripción. Las bases autocomplementarias per-
de ARN se aparea temporalmente con el ADN miten que se forme la horquilla. Varios U facilitan la sepa-
molde para formar una doble hélice híbrida ración ADN-ARN dado que entre A y U se dan dos puentes
ADN-ARN (de unas 8 bases de longitud). El de H.
ARN en este dúplex híbrido se despega poco
después de su formación y se restablece el dú- 4. En eucariotas el transcripto primario
plex de ADN. de ARNm es procesado
El transcripto primario, es decir, el ARNm recién
• La ARN pol tiene la capacidad de añadir nu- sintetizado, es liberado en núcleo de las células,
cleótidos al ARN en crecimiento sin disociar- donde es modificado antes de ser exportado al
se del ADN molde. Sin embargo, al encontrar citoplasma donde va a ser traducido a proteínas.
ciertas secuencias en el ADN se pueden produ- A este proceso se le conoce como maduración del
cir pausas en la síntesis del ARN. ARN y consiste en:
3.3 Terminación 1. Adición de la caperuza 5´. Se adiciona un nu-
La terminación de la transcripción ocurre cuan- cleótido de guanina modificado con un grupo
do la ARN pol llega a una secuencia de ADN que metilo en el extremo 5´ del ARNm. Esta adi-
pauta el fin del proceso. ción se realiza cuando el transcripto en creci-
miento tiene unos 20 nucleótidos de longitud.
• En procariotas la pauta de terminación está
2.Poliadenilación. Se añaden 200 a 250 adeninas
dada por una secuencia de bases autocomple-
al extremo 3’ formando la cadena poli-A, que
mentaria que hace que el ARN se pliegue y for-
sirve para retardar la hidrólisis del ARN por las
me una estructura en horquilla (Fig. 4).
endonucleasas, entre otras cosas.
• Esta estructura combinada con un aparea- 3. Posteriormente ocurre una etapa adicional que
miento débil de bases antes y después de la involucra la maduración del ARN recién sinteti-
108

zado. El splicing (corte y empalme) consiste en • Otros genes se expresan cuando sus produc-
el corte y eliminación de segmentos del ARNm tos son necesarios, y cuando no lo son dejan
(intrones) que no participan en la síntesis de de hacerlo. Estos genes corresponden gene-
proteínas, y el empalme de segmentos (exones) ralmente a sistemas adaptativos, necesarios
que codifican para sintetizar la proteína (Fig. para que la célula se ajuste a determinada si-
5). Este proceso reduce la longitud de la hebra tuación.
de ARNm significativamente. La enzima encar-
gada de catalizar estas reacciones es la snRNA La regulación transcripcional se hace de manera
(small nuclear ribonucleoprotein particles). diferente en procariotas y eucariotas, pero la ló-
gica es la misma.
5. Regulación de la trascripción
Para que las células puedan adaptar su metabolis- 5.1 Regulación de la transcripción en pro-
mo a condiciones intra o extracelulares cambian- cariotas
tes, la expresión de los genes debe estar regulada. 5.1.1 Sistemas inducibles: Operón lactosa
Un mecanismo de control común es la regulación El operón lactosa, descrito por Jacob y Monod
a nivel de la transcripción de los genes. en la década del 50 en E. coli, es un ejemplo típi-
co de regulación de la transcripción en bacterias,
• Los genes que codifican enzimas que participan que reúne mecanismos de regulación positiva y
en procesos celulares que son necesarios de ma- negativa. Estos autores propusieron que un gru-
nera permanente, se expresan de manera conti- po de genes forman una unidad funcional, a la
nua. Es decir, su expresión es constitutiva. que denominaron operón.

Figura 5. Secuencia de los pasos para obtener un ARNm maduro en eucariotas. Al ARNm transcripto primario se le adiciona
una caperuza en el extremo 5´y posteriormente es poliadenilado en el extremo 3´. Los intrones son escindidos y los exones
empalmados para formar el ARNm maduro. UTH (antransated region) región no traducida.
 109

Cuando E. coli crece en ausencia de lactosa, hay poca sa al interior de la bacteria y la tiogalactósido
cantidad de la enzima β galactosidasa en la célula. transacetilasa. Estos genes se disponen en la
Sin embargo cuando se agrega lactosa al medio, el misma unidad transcripcional, es decir, se ex-
sustrato de la enzima, la cantidad de esta aumenta presan como un único ARNm.
rápidamente: el gen que la codifica se induce.
• Operador (O), situado entre el P y los genes E
corresponde a una secuencia de bases recono-
El operón lac está constituido por: cida por la proteína represora.
• Promotor (P), que localiza antes de los genes • Gen regulador (R), consta de un P y un E y co-
estructurales y corresponde a la región con una difica a la proteína reguladora (r), represora en
secuencia de bases que reconoce la ARNpol. esta caso, que reconoce la secuencia de bases y
se une al O.
• Genes estructurales (E), los genes estructu-
rales Z, Y, A codifican respectivamente para • Inductor (i), en este caso la lactosa, se une a
la β galactosidasa que hidroliza la lactosa, la la proteína r y permite que se transcriban los
galactósido permeasa que transporta la lacto- genes E.

Figura 6. Modelo del Operón Lactosa. A. El gen regulador consta de un promotor (P) y una región estructural (E) y codifica
para una proteína represora (r), que reconoce la secuencia de bases del operador (O). El O se encuentra entre el P del gen
regulado y los genes E (Z, Y, A). B. En ausencia de lactosa la proteína r está unida al O, lo que impide la transcripción. C. Si
se agrega lactosa (i), esta se une a la proteína r que cambia su conformación y se libera de la región O. Así la ARN pol puede
transcribir a los genes E.
110

Figura 7 Operón triptofano. En ausencia o poca cantidad de trp, el gen se transcribe porque la proteína represora, producto
del gen regulador, no se une al operador (O). Cuando hay trp (inductor) éste se une a la proteína r que reconoce al O, impi-
diendo la trancripción.
• El operón lac también puede ser regulado por • Promotor (P) y operador (O), que conforman
la glucosa. Cuando las concentraciones de glu- la región reguladora, corresponden al sitio de
cosa son bajas, se produce la activación de la unión de la ARN pol y del represor respectiva-
transcripción. El control es ejercido a través mente.
del AMP cíclico (AMPc). El AMPc se une a la
proteína receptora de AMPc (CRP) que al cam- • Gen regulador (R), que se localiza próxima a
biar su conformación se une al promotor del los genes estructurales, consta de un P y el E
operón incrementando la afinidad de la AR- que codifica a la proteína reguladora.
Npol por el mismo.
• Proteína reguladora (r), conformada por mo-
• Otros operones relacionados a vías catabólicas nómeros que se unen para hacerla funcional
para obtener energía, como el operón maltosa en presencia de trp. Esta proteína reconoce la
y arabinosa, se regulan de la misma manera. secuencia de bases del O y unida al trp (co-re-
presor) inactiva la transcripción.
• Los genes estructurales del operón lac (Z, Y,
A) se transcriben en un único ARNm. Estos • Los operones represibles son comunes en la re-
ARNm bacterianos son policistrónicos, porque gulación de vías biosintéticas, y se denominan
codifican más de una proteína. así porque un intermediario de la vía, reprime
la transcripción cuando el producto de la mis-
5.1.2 Sistema reprimible: Operón tripto- ma está disponible.
fano
Los genes reprimibles se expresan en ausencia + Observe que la principal diferencia entre el
de activador, pero dejan de hacerlo en presen- operón inducible lac y el reprimible trp, es que
cia de un represor. Los operones que codifican en este último el represor reconoce al operador
enzimas de encargadas de la biosíntesis de los cuando está unido a trp (inductor).
aminoácidos histidina (his) y triptofano (trp) son
ejemplos de este tipo de regulación.
Al finalizar la preparación del tema será
capaz de:
El operón se expresa en ausencia de trp, o cuan-
do sus niveles son muy bajos (Fig. 7). 1. Describir el proceso de transcripción a través
de sus requerimientos y productos.
+ Observe que en esencia, el operón trp es se-
mejante al operón lac, y está constituido, según 2. Diferenciar la estructura de genes de expre-
se muestra en la figura 7, por: sión constitutiva y adaptativa.
3. Explicar la expresión diferencial de genes se-
• Genes estructurales (E), en un total de cinco gún su promotor.
(trpEDCB y A), codifican para cinco proteínas
que forman tres enzimas que participan en la 4. Relacionar la regulación de la transcripción
síntesis de trp. con la expresión de un gen.