GENÉTICA MOLECULAR:

DEL ADN A LAS PROTEÍNAS

(Tema 15)
EvAU
• Genética Molecular
• Replicación: enzimas y proteínas implicadas. Burbujas y horquillas de replicación.
Hebra conductora, hebra retardada, cebador o primer, fragmentos de Okazaki. Concepto
de telómeros y telomerasas.
• Características del código genético. Importancia del código.
• Transcripción. Enzimas implicadas. Fases: iniciación, elongación, terminación y
maduración. Exones e intrones.
• Concepto de retrotranscripción.
• Traducción: elementos implicados. Polisomas. Activación de los ARNt. Iniciación,
elongación y terminación. Concepto de codones de inicio y codones mudos o de parada.
Genética molecular
• Se encarga del estudio de la estructura y función de los genes a nivel
molecular, para ello es necesario contestar a:
• ¿Qué son los genes?
• ¿Qué información contienen?
• ¿Cómo se expresa (se traduce) la información contenida en los genes?
• Gracias a la I.G. sabemos que:
• Un gen es la unidad física y funcional de la herencia que se transmite de una
generación a la siguiente.
• Los genes están compuestos por ADN y prácticamente todos ellos proporcionan la
información para confección una proteína específica.
• El ADN se replica y heredamos copias del ADN paterno y materno, en cuyas
moléculas se encuentran los genes.
• Cada gen tiene una localización concreta en un determinado cromosoma, y el
conjunto de todos los genes, contenidos en todos los cromosomas, constituye el
genoma.
• Los genes poseen mensajes codificados y cuando se expresan (se transcriben y se
traducen) se forman las proteínas que ejecutan las órdenes del genotipo y ponen de
manifiesto los caracteres heredados (el fenotipo)
¿EL ADN, PORTADOR DEL
MENSAJE GENÉTICO?
Experimentos y conclusiones
CONFIRMACIÓN DEL ADN COMO PORTADOR DE
LA INFORMACIÓN GENÉTICA.

• A principios del siglo XX se sabía que los genes estaban en los

cromosomas, y que éstos están formados por ADN y
proteínas. La confirmación de que los genes se encuentran
en el ADN y no en las proteínas se debió a varios
experimentos:
• 1) Experimentos de Griffith.
• 2) Experimentos de Avery, MacLeod y MacCarthy.
• 3) Experimentos de Hershey y Chase.
1) Experimentos de Griffith.(1928)
OBJETIVO Vacuna contra la neumonía causada por Streptococcus neumoniae.
CEPA S CEPA R
Virulenta muerte en NO Virulenta ratones
ratones vivos
Con cápsula Sin cápsula
CONCLUSIÓN: dedujo que las bacterias S virulentas muertas podían transmitir un “factor
transformante” a las R, convirtiéndolas en patógenas. La presencia de este factor
transformante daba lugar a que las bacterias R vivas sintetizaran la cápsula polisacárida
convirtiéndose en bacterias virulentas (S).
2) Experimentos de Avery, MacLeod y
MacCarthy. 1944
OBJETIVO Confirmar la naturaleza de la molécula transformante
1. Cultivo de cepas S
2. Purificación del principio
transformante.
3. Análisis del principio transformante.

CONCLUSIONES:
•La sustancia purificada negativo en las pruebas químicas conocidas para
detectar proteínas, pero un resultado fuertemente positivo en un examen
químico conocido para detectar ADN.
•La composición elemental del principio transformante purificado era muy
semejante a la del ADN en su proporción de nitrógeno y fósforo.
•Enzimas que degradan proteínas y ARN tenían poco efecto sobre el principio
transformante, pero las enzimas capaces de degradar ADN eliminaban la
actividad transformante.
3) Experimentos de Hershey y Chase. 1952
OBJETIVO Confirmar al ADN como molécula
transformante.
Conclusiones de los experimentos
Una vez publicada la estructura molecular del ADN por Watson y Crick (1953), doble
hélice de ADN, se asumió:
•La capacidad del ADN para contener la información codificada en un idioma de 4 letras
(4 nucleótidos): el código genético.
•Los genes no tienen acción directa sobre el funcionamiento del organismo (no
transporta oxígeno…)., sino que se traducen en proteínas, verdaderas ejecutoras del
código genético.
- El ADN tiene la capacidad replicarse para transmitirse a la descendencia.

DNA RNA Proteínas

◆ DNA: 3' ACC AAA CCG AGT
◆ mRNA:5' UGG UUU GGC UCA
◆ Proteina: Trp Phe Gly Ser
Dogma Central: del gen a la proteína
El modelo que explica los mecanismo que ocurren para la transmisión de la
información desde el gen a la proteína se conoce como:

El dogma central de la Biología

Traducción
Estructura del genoma
El flujo de la información genética.
Ciclo vital de un retrovirus
LA EXPRESIÓN DE LOS GENES
Transcurre en dos etapas:
✔ Transcripción
✔ Traducción .
▪Hay genes que se transcriben (a ARN) y
traducen (a proteínas).
▪Hay genes que solo se transcriben, forman
los ARNt o ARNr.
▪Hay secuencias génicas reguladoras, que
ni se transcriben ni se traducen, pero de
gran importancia
Transcripción

Traducció
n
TRANSCRIPCIÓN
▪ Mecanismo de expresión génica, en el que se transfiere la información del ADN, al
lenguaje del ARN, es decir, se sintetiza una molécula de ARN.
▪ En eucariotas, todos los ARN se sintetizan en el núcleo y luego es exportan al
citoplasma, a través de los poros nucleares.
▪ También hay transcripción en mitocondrias y cloroplastos ya que ambos orgánulos
poseen ADN propio.
TRANSCRIPCIÓN
INTERVIENEN:
▪ Una cadena de ADN que actúa de
molde CODIFICADORA que se lee
en dirección 3’ →5’; por tanto la
cadena de ARN transcrito crece en
sentido 5’ →3’.
▪ Ribonucleótidos trifosfato de A, G,
C, U (ATP, GTP, CTP y UTP) se unen
mediante enlaces éster entre el OH
en posición 3’ del último nucleótido
colocado y el acido fosfórico del
extremo 5’ del nuevo nucleótido. Ocurre en tres fases:
▪Iniciación
▪Elongación
▪ Enzimas ARN-polimerasas (una en los ▪Terminación
procariotas, tres en los eucariotas, I, II y III)

EN EUCARIOTAS, tras estas etapas se obtiene un ARNm primario

o pre-ARNm que no es funcional y debe madurar antes de
abandonar el nucleo (maduración de ARN: 4º etapa)
TRANSCRIPCIÓN: ARN-polimerasa II
ARN–polimerasa II o transcriptasa cataliza la polimerización de los ribonucleótidos
según la especificidad del apareamiento entre bases. Para ello debe:
▪ Unirse a la cadena de ADN reconoce las secuencias promotoras (en el ADN).
▪ Presencia de factores de transcripción (en eucariotas), proteínas que estabilizan la
unión.
▪ Leer la hebra molde (de ADN) en sentido 3’ →5’ y seleccionar el ribonucleótido
trifosfato complementario.
▪ Catalizar la formación del enlace éster entre los nucleótidos mediante hidrólisis de
un pirofosfato (entre el OH en posición 3’ del último nucleótido colocado y el ácido fosfórico del
extremo 5’ del nuevo nucleótido)
▪ Reconocer las secuencias de terminación (en el ADN) que indican fin de la
transcripción.
 Para que la ARN polimerasa II comience a
1º Etapa: INICIACIÓN transcribir requiere (EUCARIOTAS):

PROMOTOR
Región del ADN anterior al punto
de inicio de la transcripción.
Punto de unión de la ARN
polimerasa.
Señala la cadena codificadora

FACTORES DE
TRANSCRIPCIÓN
Se fijan en el promotor
sirviendo de reconocimiento a
la ARN polimerasa II para
comenzar la transcripción.

La ARN polimerasa abre la doble hélice burbuja de transcripción en la que se pueden

incorporar los ribonucleótidos que se van a unir para constituir el ARN.
2º Etapa: ELONGACIÓN
La ARN-polimerasa II recorre la hebra molde (de ADN) en sentido 3’ 5’, añadiendo los
ribonucleótidos adecuados, haciendo que la cadena de ARN crezca en dirección 5‘-3'.
(Velocidad aproximada 30 nucleot/s)

La enzima selecciona el ribonucleótido trifosfato complementario a la base del

ADN molde y lo une mediante un enlace éster liberándose un resto de PPi en cada
unión.
2º Etapa: ELONGACIÓN

ARNpolimerasa

T A C G A A C C G T T G C A C A T C
A U G C U U G G C A A C G U G
3º Etapa: TERMINACIÓN
El ARN polimerasa reconoce en el ADN unas señales de terminación que indican el final de
la transcripción secuencias TTATTT. Esto implica el cierre de la burbuja de transcripción
formada en el ADN y la separación de la ARN polimerasa del ARN transcrito
Modificaciones ARN eucariota
• Cuando se produce inicialmente un transcrito de ARN en una célula
eucariota, se considera un pre-ARNm y se debe procesar para obtener
un ARN mensajero (ARNm).
• Adición en 5‘ de la caperuza de metil–guanosina trifosfato (metil-GTP). Se
realiza poco después de iniciada la transcripción. FUNCIÓN proteger al
ARNm del ataque de nucleasas del núcleo, lugar de reconocimiento de los
ribosomas (traducción).
• Adición en 3’ de la cola poliA poliA‑polimerasa añade en 3’ (150-250)
ribonucleótidos de adenina,. FUNCIÓN protectora y transporte fuera del
núcleo.
 Atrás

Caperuza 5’ Metil-GTP

ARNpolimerasa

T A C G A A C C G T T G C A C A T C
A U G C U U G G C A A C G U G

m-GTP
 Atrás

Cola poli-A 3’

poliA-polimerasa

m-GTP A U G C U C G U G U A G A A A A A

ARNm precursor
 Maduración del ARN EUCARIOTA
S
PROCARIOT
• el ADN contiene secuencias codificadoras de
AS
proteína (exones) y secuencias no condificadoras
• ARNm transcrito para producir (intrones) se transcribe a un transcrito primario o
proteínas Traducción directa ARN heterogéneo.
(NO MADURACIÓN) SPLICING
• ADN que codifica los ARNt y Mecanismo de corte y
ARNr da lugar a largas cadenas pegado
con numerosas copias de las • Los intrones (secuencias reguladoras) se eliminan y
secuencias (ARN primario) se se unen los exones dando lugar a un ARNm
corta en fragmentos más funcional para la síntesis de proteínas.
pequeños por ARNasas. • ESPLICEOSOMA. Complejo enzimático.

SPLICING ALTERNATIVO Los intrones

tienen un papel regulador del proceso de
splicing.
Un mismo ARN primario puede madurar de
diferente manera produciendo que de un
mismo gen transcrito se obtengan distintas
proteínas.
EL CÓDIGO GENÉTICO
Si la hebra molde en el DNA es:
T-A-C-C-T-T-A-A-C-C-G-G-T-T
El RNA m se transcribe en:
A-U-G-G-A-A-U-U-G-G-C-C-A-A
Traducción al idioma de las proteínas:
Met – Glu – Leu – Ala
Pero:
¿Cómo se puede pasar de un idioma a otro?
¿Cómo podemos obtener los 20 aa a partir de la
combinación de 4 nucleótidos?
El código genético. Un poco de
historia
Establece las correspondencias entre las secuencias de bases de los nucleótidos del
ARNm y los aa que componen las proteínas.
Crick demostró que los aa se codifican a partir de una secuencia de tres
nucleótidos sucesivos contenidos en el ARNm codón o triplete.

El RNAm
A-U-G-G-A-A-U-U-G-G-C-C-A-A
Proteínas:
Met – Glu – Leu – Ala –
De los 64 codones posibles, tres son
codones terminales o sin sentido que
marcan el fin de la cadena
polipéptido. Son: UAG, UAA y UGA.
 El código genético. Un poco de
historia Polinucleotido fosforilasa síntesis ARN
sin molde de ADN (poliU)

1959 el Premio Nobel de Fisiología y

Medicina, por sus descubrimientos
sobre el mecanismo de la síntesis
biológica del ácido ribonucleico
(ARN) y del ácido
desoxirribonucleico (ADN).
El código genético. Características
• UNIVERSAL es utilizado por todos los tipos de organismos. (en mitocondrias algunos tripletes
tienen distinto significado).
• DEGENERADO número de tripletes (64) es superior al número de aa que existen en las
proteínas (20). Algunos aminoácidos deben ser codificados por dos o más tripletes distintos
(“condones sinónimos”). Ventaja: mutaciones que afectan a una sola base.
• Existen tripletes sin sentido, de paro, stop (no codifican ningún aa, sino que marcan el final de
la secuencia a traducir) UAA, UAG UGA
• NO ES AMBIGUO. Un codón un aa.

• El triplete o codón de iniciación AUG, aa metionina.

• NO SOLAPADO tripletes dispuestos en el ARNm uno a
continuación de otro si compartir ninguna base. Y se
leen en sentido 5’ 3’ desde el codón de iniciación,
AUG, hasta el de terminación (UAA, UAG UGA).
• Posibilidad de varias fases de lectura. Sólo en algunos
bacteriófagos con varios puntos de iniciación que
sintetizan más de un polipéptido.
• Existe un código regulatorio que especifica secuencias
de reconocimiento de factores de transcripción, es
decir, actúan regulando la expresión génica (duones)
Traducción
Síntesis de una secuencia de aminoácidos de una proteína siguiendo el mensaje
contenido en el ARNm. LUGAR CITOPLASMA
Participan en este proceso:
✔ ARNm (mensajero): contiene la información genética (del ADN) y la transporta
hasta los ribosomas.
✔ Los ribosomas leen el mensaje codificado en el ARNm. El ARNr (ribosómico):
forma parte de los ribosomas (junto a proteínas).
✔ ARNt (transferente): transporta específicamente (según el par codón-anticodón)
los aminoácidos hasta el complejo ARNm-ribosoma.
✔20 aminoácidos.
✔Diversos factores y enzimas de
traducción.

FASES:
▪ Activación de los aminoácidos.
▪ Traducción: consta de iniciación,
elongación y terminación.
Traducción
En el ribosoma encontramos tres lugares diferentes de unión de los ARNt: el sitio P (peptidil),
donde se localiza la cadena peptídica en formación, el sitio A (aminoacil), donde entran los aa
que se van a unir a la cadena proteica, y el sitio E, donde se sitúa el ARNt antes de salir del
ribosoma.
 Zona de unión al
ARN transferente: 5’ P aminoácido

Zona de unión al
ribosoma.

Zona de unión a la
enzima que lo une al
aminoácido. Brazo T

Brazo D

Brazo A
Anticodón
Zona de unión al ARNm.
1ª FASE: Activación de los
aminoácidos
OBJETIVO: unión de un determinado aminoácido con su ARNt específico.
• Enlace grupo hidroxilo (OH) libre del extremo 3’ del ARNt (CCA) y el grupo
carboxílico (-COOH) del aminoácido con gasto de ATP (endergónica).
aa + ATP + Enz aa-AMP-Enz
+ PPi
• Enzima aminoacil-ARNt-sintetasa (al menos 1 enzima diferente para cada aa).
Se origina así el complejo aminoacil-ARNt (aa+ARNt).

aa-AMP-Enz + ARNt aa-ARNt + Enz +

AMP
• Unión específica de cada aa-ARNt en función del anticodón del ARNt y el codón
del ARNm. Cada tRNA es único y puede adherirse a sólo un aminoácido. Cada
tRNA tiene un anticodón único
Traducción: 1º Etapa: ACTIVACIÓN

Un ARNt según su anticodón sólo

puede transferir un aa concreto,
pero un aminoácido puede ser
transportado por más de un ARNt.
2º Etapa: TRADUCCIÓN.
INICIACIÓN, “comienzo” el ribosoma se
une con el ARNm y el primer ARNt para que pueda
comenzar la traducción, formando el complejo de
iniciación ( ribosoma + ARNm + aa-ARNt)
FASES:
1. La subunidad pequeña del ARNr (40 S en
eucariotas) se unen al ARNm gracias a
factores de iniciación y GTP. La subunidad se
desplaza por el mensajero hasta llegar al
codón de iniciación AUG.
2. Unión a ese codón de iniciación del ARNt con
el aa metionina (ARNt-met)
(N-formil-metionina en procariotas).
3. La subunidad mayor del ribosoma (60S) se une
al la subunidad pequeña y al ARNt-met,
quedando formado el complejo de iniciación
80S o complejo ribosomal. (El ARNt-met
ocupa el lugar P del ribosoma). El sitio A está
libre para que un nuevo ARNt incorpore el aa
siguiente.
 2º Etapa: Iniciación. A ese complejo se les unirá el
aa-ARNt (metionina-ARNt en
2º eucariotas o
N-formil-metionina-ARNt en
procariotas) que correponde al
anticodón del ARNt.

1º
3º

La subunidad pequeña del Se liberan los factores de

ARNr gracias a factores de iniciación y la subunidad
iniciación y GTP se unen al mayor del ribosoma se une
ARNm y se desplaza hasta al la subunidad pequeña y al
llegar al codón de iniciación ARNt-met, quedando
AUG . formado el complejo de
iniciación (80S o 60s) o
complejo ribosomal.
 2ºEtapa: TRADUCCIÓN.
ELONGACIÓN “desarrollo” entrada sucesiva de complejos
aa-ARNt en el lugar A del ribosoma y formación de enlace peptídico
entre los aa.
NECESARIOS factores de elongación y la energía es suministrada
por GTP.
FASES:
1. Entrada de aa2-ARNt en el lugar A del ribosoma.
2. Formación del enlace peptídico: Una vez ocupados los lugares P y
A del ribosoma. La peptidil –transferasa genera el enlace
peptídico entre los dos aa (COOH del primer aa y NH2 del
segundo aa), el dipéptido unido al 2º ARNt queda situado en el
sitio A.
3. Traslocación el ribosoma se desplaza en sentido 5’ 3’ por el
ARNm modificando el complejo:
▪ El ARNt-met localizado en el lugar P pasa a ocupar el lugar E o de salida
▪ El aa 2-ARNt localizado en el lugar A pasa a ocupar el lugar P
▪ El lugar A del ribosoma quedará libre la recibir a un nuevo aa-ARNt, que
provocará la salida del primer aa-ARNT localizado en el lugar E
2º Etapa: TRADUCCIÓN.
TERMINACIÓN cuando al traslocarse el
ribosoma se sitúe sobre un codón o triplete
de terminación o STOP (UAA, UGA, UAG).
• Los factores de liberación (uno en eucariotas y 3
en procariotas) se une a ese codón del sitio A
impidiendo la entrada del aminoacil-ARNt.
• El factor de liberación provoca la hidrólisis del
enlace entre el péptido y el ARNt que lo
transporta, liberando el polipéptido del ribosoma.
• Las subunidades del ribosoma quedan libres en el
citoplasma.
• El ARNm queda libre y puede ser traducido de
nuevo.
• Tanto en pro como en eucariotas, si el ARNm a
traducir es suficientemente largo puede ser leído
por más de un ribosoma a la vez polirribosomas
o polisomas, lo que permite que las células
sinteticen rápidamente muchas copias de un
mismo polipéptido.
Regulación de la Expresión Génica
• OBJETIVO modificar la actividad metabólica o en el comportamiento celular.
¿Cómo?
✔ Modificando la actividad de ciertas enzimas
✔ Regulando su concentración

PROCARIOTAS EUCARIOTAS
• NÚCLEO
OPERÓN 1. control de la cromatina
Conjunto de genes (PRETRANSCRIPCIONAL)
estructurales sometido a 2. Transcripción
factores de control 3. Maduración del ARN
(POSTRANSCRICIONAL)
• CITOPLASMA
(POSTRANSCRICIONAL)
•Control en el transporte al citoplasma
•Degradación del ARNm
•Modificación después de traducción
(procesamiento de las proteínas ya
sintetizadas).
Regulación dela expresión génica: Operón
LAC
Regulación dela expresión génica: Operón
LAC
Regulación dela expresión génica: Operón
LAC