Universidad Autónoma de Zacatecas

Área de Ciencias de la Salud

Unidad Académica de Ciencias Químicas
Químico Farmacéutico Biólogo

REPORTE DE PRÁCTICA DEL LABORATORIO DE

ANALISIS QUIMICO INSTRUMENTAL
(Química analítica III)

PRACTICA 3. CONSTRUCCION DE UNA CURVA DE CALIBRACION

Calderón Ríos N., López Arellano A., Martínez Hernández M.

Dra. Solís Recendez M. G.

4°Semestre Grupo “C” Programa educativo Q.F.B. UACQ, ACS,

Campus UAZ Siglo XXI, carretera Zacatecas-Guadalajara Km 6 s/n
ejido La Escondida Cp. 98160 Zacatecas Zac. Ciclo enero junio
2010
01 de marzo de 2010 – 02 de marzo 2010

RESUMEN

En esta practica obtuvimos los conocimientos necesarios para construir una curva de
calibración, para ello se efectúan diluciones de unas muestras de concentración
conocida y se produce su lectura y el consiguiente establecimiento de una función
matemática (regresión lineal)que relacione ambas; después, se lee el mismo carácter
en la muestra problema y, mediante la sustitución de la variable independiente
( absorbancia) de esa función, se obtiene la concentración de esta.

Palabras clave: Calibración, regresión lineal, precisión, exactitud, limites.

Introducción
Dentro de las metodologías analíticas, las determinaciones cuantitativas
tienen una especial relevancia en diversas actividades como la investigación,
docencia, industria farmacéutica, alimentaria, en diagnostico clínico, en
cuestiones ambientales, etc., donde la información ser4a utilizada para la toma
de decisiones. La obtención de una curva de calibración, nos permite
cuantificar la concentración de muestras problema con cierto grado de
certidumbre, es ahí donde la estadística y la química interaccionan para darle al
químico analítico las herramientas necesarias para asegurar la calidad de los
resultados generados en el proceso.
Los químicos necesitan parámetros de calidad, se enumeran los criterios
cuantitativos de funcionamiento de los instrumentos, criterios que se pueden
utilizar para decidir su un determinado método instrumental es o no adecuando
para resolver un problema analítico. Estas características se expresan en
términos numéricos.
Para un problema analítico dado, los parámetros de calidad permiten
reducir la elección de los instrumentos a tan solo unos pocos y entonces la
selección entre ellos ya se hace con los criterios cualitativos de funcionamiento.
Para los parámetros de calidad se debe de tomar en cuenta criterios
importantes como la precisión que el la reproductibilidad de resultados, es
decir, a obtener el mismo resultado todas las veces que se repita el evento,
pero la exactitud que también es un criterio toma en cuenta el acercamiento
posible al valor real o verdadero.
Para la determinación de errores sistemáticos o determinado de un
método analítico no s referimos al sesgo. Una propiedad de la analítica básica
es la robustez que describe la resistencia al cambio de respuesta cuando se
aplica independientemente a alícuotas de la misma muestra variando
ligeramente las condiciones experimentales.
Los errores que se sufren en el método analítico pueden ser causados
par la sensibilidad del instrumento, esto se refiere a la capacidad de diferenciar
pequeñas variaciones en la concentración del analito. Pero en caso de
cualquier error se puede verificar y detectar con la línea recta, esta linealidad
nos indica que tan alejados estamos del resultado correcto ya que es una
proporción directa. Para esta línea recta necesitamos la regresión lineal que es
un método matemático que grafica la variable dependiente contra la
independiente y el coeficiente de correlación que es un índice estadístico que
mide la relación lineal entre dos variables cuantitativas, en este caso la
concentración de un analito contra su absorbencia.
La selectividad de un método analítico indica el grado de ausencia de
interferencias con otras especies que contiene la matriz de la muestra,
desafortunadamente ningún método analítico esta libre de interferencias y con
frecuencia hay que realizar diversas etapas para disminuir sus efectos.
La curva de calibración es un método grafico donde encontramos la
absorbencia contra una concentración de un analito y en estas podemos
encontrar el limite de detección que es la mínimo concentración de un analito
que se puede detectar para un nivel de confianza dado, y el limite de
cuantificación o intervalo lineal que va desde la concentración mas pequeña a
la que se puede realizar en medidas cuantitativas hasta la concentración a la
que la curva de calibrado se desvía de la linealidad.
 Como se menciono anterior mente la regresión lineal es un método de
análisis de los datos que sirve para poner en evidencia las relaciones que
existen entre distintas variables. La regresión lineal se expresa de la siguiente
manera:

Donde m es la pendiente, b es la ordenada al origen y y es parte de las

abscisas.
La condición para la regresión lineal es elegir valores determinados para
los parámetros desconocidos, de modo que la ecuación quede completamente
especificada.
Los errores que podemos encontrar en determinaciones analíticas son
de dos tipos:
Errores determinados: que son aquellos cuya magnitud puede medirse y
eliminarse fácilmente ya que se conoce la causa. Esta clase de errores tiene el
mismo valor bajo cierta variedad de condiciones y permanece constante de una
determinación a otra.
Las causas de los errores determinados pueden ser instrumentales, de
reactivos con bajo grado de pureza y los errores del operador.
Errores indeterminados: la causa es desconocida son de pequeña
magnitud y se hacen evidentes por la diferencias en los valores obtenidos en
varias determinaciones, cuando las mediciones se llevan a cabo
cuidadosamente y bajo condiciones cercanas a lo ideal. No pueden se evitados
y por lo tanto es necesario medirlos.

Objetivo

El objetivo de este trabajo es adquirir los conocimientos necesarios para

elaborar una curva de calibrado partiendo de una serie de datos obtenidos
experimentalmente (absorbancias) mediante la utilización del
espectrofotómetro y utilizando una serie de herramientas estadísticas para
asegurar la confiabilidad de los datos. En este reporte se presenta de manera
sencilla la metodología para desarrollar la práctica.

Materiales y Métodos

Para realizar esta práctica fue necesario preparar previamente una

solución estandarizada de KMnO4 de concentración 0.005M y para esta
preparación tuvieron que pesarse 0.0394g del reactivo y agregarlos a un
matraz volumétrico de 50 ml que previamente contenía un poco de agua
destilada se disolvió bien y se aforo dejándose reposar una hora aprox.(a
oscuras), posteriormente se filtro y se guardo en un frasco ámbar tapado e
identificado, a continuación se procedió a preparar cinco soluciones diluidas de
KMnO4 tomando alícuotas de (0,1.0,1.25,1.5,1.75,2.0)ml de la solución madre
en diferentes matraces, y aforando cada una a 25ml con agua destilada,
después calculamos las nuevas concentraciones de KMnO 4 de cada una de las
diluciones utilizando la ecuación:C1V1=C2V2 , luego ya encendido el
espectrofotómetro lo ajustamos a una longitud de onda de 525nm y con lectura
para absorbancia; primeramente establecimos el matraz cero como la solución
blanco que contenía solo agua llenamos la celda para luz visible con el blanco
y calibramos a cero de absorbancia, luego tomamos en otra celda las
soluciones diluidas de los matraces 1-5(cada una por separado por supuesto) y
tomamos 3 lecturas de absorbancia de cada una calibrando con el blanco entre
cada lectura ,obtenemos el promedio de estas tres lecturas y lo utilizamos para
hacer la curva de calibración donde estos datos serán los puntos de las
ordenadas mientras que los datos de concentración(de permanganato de
potasio) ocuparan el lugar de las abscisas; ahora utilizando la calculadora
hacemos la regresión lineal para obtener los datos de la pendiente que será el
coeficiente de absortividad(ξ), la ordenada al origen(B) y el coeficiente de
regresión lineal(r).

Posteriormente se nos proporcionaron dos soluciones (problema) que

también contenían KMnO4 una de concentración desconocida y la otra cuya
concentración es de 0.3 mM, la cual fue preparada por la auxiliar del
laboratorio, llenamos la celda con un poco de solución muestra problema y
tomamos tres lecturas calibrando con el blanco entre cada una, también
hacemos lo mismo para la solución de concentración conocida y anotamos
nuestros resultados, obtenemos el promedio de las tres lecturas. Ahora
utilizando la ecuación de la ley de Beer despejamos para concentración
C=A-B/ξb y como previamente obtuvimos el valor de a y de la ordenada al
origen calculamos con ella la concentración de las soluciones problema, por
ultimo comparamos con la información que se nos proporciono sobre la
muestra. Ya terminado lo experimental realizamos los cálculos estadísticos
necesarios para verificar la confiabilidad de nuestros resultados.

Resultados
A continuación se presentan los resultados obtenidos de los cálculos
para las concentraciones y los datos de las lecturas de absorbancia obtenidas
en el espectrofotómetro para las soluciones diluidas de KMnO4

Tabla 3.1 soluciones para una curva de calibración

No. Solución H2O Concentración Absorbancias Absorbancia

Destilada de KMnO4 en
matraz “A” Aforar el matraz promedio
hasta Lectura1Lectura2
Lectura3

0 0ml 25ml 0M 0 0 0 0
1 1.0ml 25ml 0.0002M 0.443 0.445 0.444 0.444
2 1.25ml 25ml 0.00025M 0.490 0.490 0.490 0.490
3 1.5ml 25ml 0.0003M 0.638 0.636 0.637 0.637
4 1.75ml 25ml 0.00035M 0.834 0.834 0.834 0.834
5 2.0ml 25ml 0.0004M 0.936 0.936 0.936 0.936
 La siguiente gráfica muestra la curva de calibración que construimos a partir de los
datos de absorbancia en las ordenadas y la concentración en las abscisas para las
concentraciones de permanganato de potasio.

En la siguiente tabla se muestran los resultados que obtuvimos de las lecturas de absorbancia,
contiene también los datos que obtuvimos al calcular las concentraciones de KMnO4 en las
muestras problema.

Tabla 3.2 Muestra problema y estándar

Matraz Concentración de KMnO4 en el Absorbancia promedio

matraz

Muestra problema 3.9254mM 0.9143

Estàndar(0.3mM) 2.9615mM 0.6583

Porcentaje de error =1.3%

98.7% de confiabilidad

Discusion y conclusiones

Interpretando los resultados de las tablas y los datos de la curva nos

dimos cuenta que efectivamente con un coeficiente de regresión lineal de
0.9838 se cumple la ley de beer que es una línea recta, calculando la pendiente
de esta línea recta pudimos obtener el coeficiente de absortividad molar (ξ) de
el KMnO4 (2656) con el cual nos permitió sustituirlo en la ecuación de la ley de
beer y despejando para la concentración c calculamos las concentraciones de
las muestras problema obteniendo que la muestra problema contenía 3.9254
mili moles de KMnO4 y la muestra estándar contenía 2.9615mM del reactivo es
decir 98.7% de precisión al compararla con la muestra estándar.

Con lo cual concluimos que fue un buen trabajo, ya que se cumplió

nuestro objetivo de aprender a construir la curva de calibración y aprender a
manejar las formulas estadísticas para tener un trabajo de buena calidad.

Referencias

[1] Skoog A. D, Holler J. F, Nieman T .A. Principios de Análisis instrumental, 5a edición,

pp. 11-16 Grupo editorial Mc Graw Hill/ Interamericana de España, Aravaca (Madrid),
2001.