1 - Analisis Microbiologico Del Aire

Instituto Tecnolgico de
Acapulco
Departamento de Ingeniera
Qumica y Bioqumica
Microbiologa en Alimentos
M.C Miguel ngel Daz Alday
Anlisis Microbiolgico del Aire
Alumno: Guillermo Sustegui Vargas
03/01/2016
La microbiologa del aire tiene sus inicios en el siglo XIX, con Pasteur y
Miquel quienes disearon mtodos para estudiar los microorganismos en el aire y
descubrir la causa de algunas enfermedades, pero no es hasta mediados del siglo
XX, cuando se entiende la importancia de conocer cmo se propagaban las
infecciones respiratorias.1 La Calidad del aire interior puede ser afectada por
gases, (monxido de carbono, radn, compuestos orgnicos voltiles), material
particulado, microbios contaminantes (moho, bacterias) o cualquier material o
factor estresante de energa que puede inducir a condiciones adversas para la
salud.2
Una de las herramientas ms utilizadas para el monitoreo es el anlisis
microbiolgico, usado en el control de calidad en diversos procesos productivos,
el cual permite determinar los focos de contaminacin por los cuales se puede
generar un producto deficiente. Adems estos anlisis se realizan de manera
rutinaria en muchas empresas para determinar la aptitud en los productos
generados.3
El control microbiolgico del aire se integra como parte del proceso de
aseguramiento de la calidad. Para llevar a cabo este anlisis debemos establecer
previamente:
El mtodo de muestreo que se va a utilizar
Los microorganismos que se desean aislar y cuantificar
Los lugares de muestreo
La posicin del muestreado
1 http://repositorio.utp.edu.co/dspace/bitstream/11059/3889/1/579078H557.pdf
2 https://es.wikipedia.org/wiki/Calidad_del_aire_interior
3 Thermo SCIENTIFIC, Oxoid Microbiology Products
Nmero de muestras en cada punto

Frecuencia de los muestreos Todos estos puntos dependen de las
caractersticas especficas del ambiente que se pretende evaluar.
La importancia del mtodo recae en un anlisis comparativo de los
resultados obtenidos para de esta manera realizar una medicin estadstica de los
microorganismos obtenidos, el criterio de valoracin de los resultados por el
mtodo que se haya elegido debe ir sujeto a los parmetros de las normas ISO o
NOM. El acopio de datos en este sentido y la calidad del producto final, nos
ayudar a crear nuestros propios criterios de valoracin. 4
TECNICAS DE MUESTRO AMBIENTAL PARA CALIDAD DEL AIRE
DETERMINACIN DE UN VOLUMEN PTIMO DE MUESTREO
El volumen de aire tomado debe ser suficiente para ser representativo de la zona
controlada en un momento determinado. Sin embargo, la muestra no debe ser
demasiado importante respecto al volumen total de la zona controlada. La muestra
podra entonces modificar el nivel de contaminacin del aire, por el efecto
depurador de la toma, y por el riesgo de reciclado del aire ya tomado. En sntesis,
la muestra debe ser adaptada segn el nivel de contaminacin del local, para
permitir un conteo significativo y cmodo en el medio de cultivo.
SEDIMENTACIN O MTODO DE GRAVEDAD
Es el mtodo ms rudimentario de medicin de microorganismos en el
ambiente. Consiste en la exposicin de placas de Petri al ambiente durante un
cierto tiempo.
Este mtodo tiene la ventaja de que se puede realizar en todas las
condiciones habituales de trabajo y en tiempo real, es el ms econmico y
requiere muy poco tiempo de dedicacin. El resultado ha de expresarse como:
u.f.c (unidades formadoras de colonias) /cm 2/hora (no puede referirse a un
4 http://www.cienytech.com/catalogos/Microbiologia/Controlsup.pdf
volumen de aire, por lo que los resultados no pueden ser cuantitativos/volumen de

aire, pero si comparativos). Los tiempos de exposicin no deben ser
extremadamente largos para evitar que se reseque la superficie de la placa. 4
Se utilizan placas de Petri estndares de 90 mm de dimetro y los medios

ms utilizados son:
B) Agar Rosa de Bengala o Agar de Sabouraud cloranfenicol para el recuento
de hongos (Ref. 064-PA0038 o 064-PA0026, para placas preparadas y ref. 1-301 o
1-166 para el medio deshidratado).
C) Agar de Triptona y Soja (T.S.A) para el recuento de aerobios (ref. 064PA0031, para placas preparadas y ref. 1-200 para el medio deshidratado).
IMPACTACIN
Un volumen determinado de aire se impacta sobre un medio de cultivo
slido. Existen varios equipos basados en este mtodo:
1. Recolector de Andersen 6 niveles
2. Recolector de Andersen 1 nivel
3. Recolector de hendidura CASELLA
4. Recolector RCS (Reuter Centrifugal System)
5. Muestreador SAS (Surface Air System)
Este mtodo es el ms costoso en cuanto a material y a mantenimiento.

Requiere formacin del analista y su presencia durante el muestreo, por lo que, en
el ambiente, se incluyen variables distintas a las habituales en tiempo real.
Disminuye el tiempo de recogida de la muestra. En muestreos prolongados y en
condiciones de sequedad y altas temperaturas puede desecarse el medio de
cultivo. Los muestreadores SAS estn preparados para trabajar con placas de
Rodac estndar o placa de 90 mm, sin embargo otros requieren material especial,
que slo suministra el mismo proveedor que vende el equipo. 4
EVALUACIN DEL MEDIO DE CULTIVO (PRUEBA ECOMETRCA)
Para evaluar un medio de cultivo se realiza frecuentemente una tcnica
llamada Mtodo Ecomtrico, el cual fue descrito por Mosselt et al., 1983, y que
permite medir la Productividad que es la capacidad de los medios de cultivo para
favorecer el crecimiento y desarrollo de un microorganismo, esta caracterstica se
determina a travs de la comparacin que se realiza entre el medio por evaluar y
un medio control. Otro aspecto es la Selectividad referida a la resistencia que
genera el medio de cultivo a la colonizacin por microorganismos interferentes o
indeseados.5
Representacin grfica de marcaje y siembra en mtodo Ecomtrico
5 Mossel, D.A.A. Microbiologa de los alimentos, 2 edicin, Acribia, Zaragoza,Espaa, 2003, 703.
Realizar el mismo procedimiento tanto para el medio de prueba como el

medio de referencia, al realizar esto se verifica la productividad del medio y, con el
ensayo del microorganismo interferente, se determinara la selectividad.
Si hay crecimiento en las cinco estras de los cuatro cuadrantes y la estra central,
el ndice de crecimiento tiene un valor de 5.
Criterios de aceptacin:
555-000
555-000
555-000
Prueba de Selectividad en Agares selectivos
La prueba de selectividad se evala con el mtodo Ecomtrico determinando la
inhibicin o crecimiento de los microorganismos de prueba as como la morfologa
colonial.
Prueba Ecomtrica de Agar xilosa lisina desoxicolato, se sembraron tres

cepas que crecen en el medio de cultivo (S. typhimurium, S. enteritidis y C.
freundii) y tres cepas que son inhibidas (S. aureus, S. epidermidis y B.
subtilis).
Informe de Control de calidad

El informe como mnimo debe contener nombre del medio de cultivo
evaluado, nmero de lote de medio evaluado, fecha de realizacin del anlisis,
cepa usada (gnero y especie del microorganismo, y clave), medio de referencia
usado para evaluar la productividad, los resultados de productividad, selectividad,
promocin de crecimiento, prueba ecomtrica, porciento de recuperacin
bacteriana, prueba de esterilidad y pH.
Este tipo de anlisis son muy importantes conociendo la gran
responsabilidad que tienen los laboratorios de microbiologa al dar un dictamen
final, se hace necesario realizar pruebas de verificacin que certifiquen el perfecto
estado de los equipos, materiales, y reactivos que se usan a la hora de ejecutar
dichos anlisis, como lo son las pruebas ecomtricas y esas respaldadas por la
normatividad necesaria.
Adems los resultados de estas pruebas y mtodos nos van a permitir tomar
acciones necesarias de limpieza y manipulacin para que nuestro proceso
contine con la inocuidad y la calidad que la empresa, la normatividad y el
comprador exigen.
Bibliografa
(s.f.). Recuperado el 1 de Febrero de 2016, de
http://repositorio.utp.edu.co/dspace/bitstream/11059/3889/1/579078H557.pdf
(s.f.). Recuperado el 30 de Enero de 2016, de
https://es.wikipedia.org/wiki/Calidad_del_aire_interior
(s.f.). Recuperado el 1 de Febrero de 2016, de Thermo SCIENTIFIC, Oxoid
Microbiology Products
(s.f.). Recuperado el 31 de Enero de 2016, de
http://www.cienytech.com/catalogos/Microbiologia/Controlsup.pdf
(s.f.). Recuperado el 31 de Enero de 2016, de Mossel, D.A.A. Microbiologa
de los alimentos, 2 edicin, Acribia, Zaragoza,Espaa, 2003, 703.

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volumen de aire, por lo que los resultados no pueden ser cuantitativos/volumen de

Se utilizan placas de Petri estndares de 90 mm de dimetro y los medios

Este mtodo es el ms costoso en cuanto a material y a mantenimiento.

Realizar el mismo procedimiento tanto para el medio de prueba como el

Prueba Ecomtrica de Agar xilosa lisina desoxicolato, se sembraron tres

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