UNESSCO‐NIGERIA

A TECHNICAL & VOCATIONNAL   
EDUCAATION REVITTALISATION P
PROJECT‐PHA
ASE II 

NATTIONALL DIPLO
OMA IN  
SCIENCE LA
ABORA
ATORY TTECHNO
OLOGY 

   

 
M
MAINTE NANCEE OF SC
CIENCEE AND EELECTR
RONIC EQUIP
PMENTT
 
COURSE C
CODE: STP 221
 
YEAR II‐‐ SEMESTTER II 
TH
HEORY 
Version 1:: Decembe
er 2008 
   

1 
 
 List of Content

WEEK1  INTRODUCTION …………………………………………………………………………………………..3 

WEEK 2  PLANNED MAINTENANCE SCHEME…………………………………………………………….7 

WEEK 3  MULTIMETER …………………………………………………………………………………………….10 

WEEK 4             Resistors AND INDUCTORS………………………………………………………………………..14 

WEEK 5  DIODES………………………………………………………………………………………………………19 

WEEK 6  RESISTORS…………………………………………………………………………………………………24 

WEEK 7  COMPONENTS TESTING USING A MULTIMETER…………………………………………26 

WEEK 8  SOLDERING TECHNIQUE…………………………………………………………………………….30 

WEEK 9  THE BASIC DE‐SOLDERING GUIDE ……………………………………………………………..32 

WEEK 10  CIRCUIT BOARDS……………………………………………………………………………………….36 

WEEK 11  FAULT FINDING ON ELECTRONIC INSTRUMENTS AND    SYSTEMS …………….43 

WEEK 12  MECHANICAL STIRRERS……………………………………………………………………………..50 

WEEK 13  FLAME PHOTOMETRY………………………………………………………………………………..59 

WEEK 14  BASIC PRINCIPLE OF SPECTROPHOTOMETERS……………………………………………65 

WEEK 15  PROPER USE AND CALIBRATION OF UV‐VISIBLE SPECTROPHOTOMETER….76 

   

2 
 
 WEEK 1 

1.0   INTRODUCTION 

Any electronic instrument or piece of equipment can be considered as a system. 

  A system can be defined as “anything formed of component parts connected together to 
make a regular and complete whole”. 

  An  instrument  or  piece  of  equipment  can  have  sub‐systems  made  in  blocks  to  perform 
specific functions. These sub‐systems are made‐up of electronic circuits, which are forms of 
electronic/electrical or electromechanical component parts. 

  The failure of a component in an equipment may lead to the failure of the system. Failure is 
said  to  be  the  inability  of  a  system  to  perform  its  required  function.    The  need  for 
continuous performance of an equipment requires that it is given regular maintenance. It 
is, therefore imperative that the meaning of maintenance is well understood. 

1.1  MAINTENANCE 

This is all the activities carried out on an equipment in  terms of proper  installation, good 
servicing,  routine  checks,  repairs  and  replacement  of  faulty  parts  in  order  for  such 
equipment to give off its best throughout its useful life. 

Every  item  has  its  own  operational  characteristics  which  it  must  posses  or  exhibit  in  the 
course of its use. A termination in the characteristics under working condition is considered 
as fault and this may be due to lack of proper maintenance. 

An equipment or instrument is considered to have failed under any of these conditions: 

a. when it becomes completely inoperative 
b. when it is still in operation but unable to perform the required function any longer    
c. When it becomes unsafe for its continued use. 
 

3 
 
 

1.1.1  Classification of Maintenance 

There  are  two  major  categories  of  maintenance  and  these  are:  preventive  maintenance  and 
corrective maintenance. 

1.1.2  Preventive Maintenance 

This is the practice or arrangement whereby a piece of equipment  or instrument are regularly 
checked,  oiled,  greased  or  cleaned  according  to  manufacturers  specification  for  effective 
performance. 

This maintenance method is normally carried out at a specified time of a year and in that case 
the entire working system is shut down. Fund is normally provided to ensure that spare parts 
and some other materials meant for such maintenance are provided. 

The essence of this form of maintenance is to ensure that the equipment does not break down 
and thus performs to specification. 

1.1.3  Corrective Maintenance 

This  method  is  applied  to  an  equipment  that  has  failed  and  thus  broken  down  due  to  either 

improper  operations  or  a  defective  part.    It  is  concerned  with  the  detection,  location  and 

repairs  of  faults  as  they  occur.  This  requires  a  good  understanding  of  system  fault  location 

methods in addition to an understanding of overall system and circuit operation.  

1.2  Maintenance Strategy  

This is a plan or scheme put in place by a person responsible for maintenance to ensure that 

the exercise is effectively carried out and does not result in the total breakdown of activities in 

an organization. 

4 
 
 

If carefully constructed it will help in applying maintenance practices which will most effectively 

care  for  the  equipment.  This  will  prolong  the  working  life  of  the  equipment  and  reduce  the 

need for spare parts. 

1.3  Types Of Maintenance  

The maintenance style adopted in an organization depends on the equipment, nature of work 
within  the  organization,  availability  of  fund  and  spares  and  the  presence  of  the  required 
technical personnel. 

There are five different types of maintenance and these are as follows: 

1.  Fixed Time Maintenance 

This  is  servicing  of  an  equipment  periodically  at  regular  intervals.  The  particular  maintenance 
requirements will probably vary with the level of service. For example the requirements for 12 
monthly service will be different for those for 3 monthly. 

2.  Condition Based Maintenance   

This type of maintenance requires the use of human senses to know when it is needed. 

In the cause of operating an equipment one may see signs of smoking, electrical sparks, feel for 

excessive  heated,  smells  for  signs  of  burning  and  some  others.  The  condition  at  which  the 

equipment  is  will  necessitate  that  it  should  be  opened  up  immediately  for  maintenance.  This 

act will assist in preventing further damage. 

Some  more  complex  systems  have  sensing  devices  built  in  to  them,  and  alarm  systems  to 

detect variation from the norm. 

5 
 
3.  Opportunity Based Maintenance  

This is carried out when an equipment is opened  up for repairs  and this opportunity is used to 

do any other maintenance tasks which are due in the near future, such as routine servicing and 

the replacement of any parts which are at the end of their useful life. Also, the opportunity can 

be used to replace a broken part which had occurred before opening the equipment but had no 

effect in its operation. 

4.  Design‐Out Maintenance  

This maintenance type is used on an equipment which has a part that is failing regularly due to 

an  apparent  design  weakness.  It  may  be  possible  to  upgrade  the  weak  part  and  effectively 

change the design for the better.  

If  a  particular  part  is  not  available  one  may  be  able  to  change  the  design  to  allow  a  more 

common  part  to  be  used.  In  spectrophotometry,  for  example,  it  may  be  possible  to  modify  a 

simple car headlamp bulb to enable it to function as a tungsten source. 

5.  Operate To Failure Maintenance 

These are cases whereby an equipment is not given general routine care but it is allowed to fail 

before any other maintenance is attempted. This is widely used on electronic equipment which 

normally  are  not  just  taken  to  a  mechanic  for  servicing  while  still  functional.  They  are  only 

opened up when they have broken down. This means that an equipment is operated to failure 

before it is opened up for maintenance. 

6 
 
 WEEK 2 

2.1    PLANNED MAINTENANCE SCHEME 

This is a strategy that is put in place to ensure that all equipment receive the most appropriate
type of maintenance at the right time.

It can be defined as “work carried out with forethought control and records”.

The planned maintenance policy for any organization must be carefully considered and planned
in advance. It must include records which are complied and maintained to measure the result of
maintenance and to serve as a guide to the future planning.

2.2 Establishing A Planned Maintenance Scheme

1. Take inventory of all items to be maintained. Reference each item with a letter to

indicate its location

A simple exercise book may be used with each item having its own page in the book, or a

card system may be employed with each item having its own card. The entry should

include all relevant technical details on the item.

2. Describe the maintenance tasks which are to be performed. This may be achieved by

listing the tasks to be completed at each scheduled maintenance point. This is normally

done in a maintenance Record Card.

3. Finally, wherever any maintenance is carried out on a piece of equipment a record of

what has been done must be kept. This may be a form of job report specifying date, fault

detected, cause.

7 
 
2.3 Equipment Failure

An equipment is made up of electronic components or a combination of electronic and

electromechanical parts. When a component fails or a part is damaged, it leads to a failure
of the equipment or system.

The failure rate of an equipment may be influenced by different weighting factors,

depending on the environmental and operating conditions, in which on equipment is put to
use.

2.4 Environmental Stresses

Environmental stresses on equipment may be due to effect of factors which are external to the
equipment such as the weather (atmospheric pressure, wind temperature, humidity, e.t.c), sea
water and so on.

Any equipment which operates outdoors cannot escape the full effects of the weather in its
locality.

2.4.1 Remedy

Most of the effects that are due to environmental conditions can be remedied by providing
adequate ventilation or through forced air-cooling.

2.5 Operating Stresses

These effects may be due to the operating conditions to which an equipment is exposed. Some of
the operating conditions that can cause damages to equipment are voltage surges, current surges
and frequency changes. These problems can be minimized by the use of protective devices in the
equipment.

2.6 Operator Failure

This is the inability of a person in charge of an equipment to operate it correctly so as to give the
required performance.

8 
 
This failure can be due to the person having an inadequate knowledge of the procedures for
operating such equipment. The incorrect operation of an equipment can lead to its total
breakdown.

Operator failure can be minimize by providing adequate training to a person in charge of an

equipment. Also, no any unauthorized person should be allowed to handle an equipment.

This is a period of time during which an equipment is not working.

Downtime occurs in an equipment due to conditions such as those of environmental stresses,

operating stresses and manufacturing defects. It may also be due to an equipment being shut
sown for a routine maintenance.

2.7 Malfunction

An equipment is said to be malfunctioning if it fails to work correctly. This may be due to

improper operation procedure, bad alignment of the parts, partial damage to some parts or
components and operational stresses.

Whenever this occurs a skilled person should consulted for advice and possible remedy.

   

9 
 
 WEEK 3 

3.1  Multimeter 

There are two main types of multimeter, analogue and digital multimeter, both devices are able 
to measure the Resistance in ohm (Ω) , electric current in Ampere (A) and electric voltages in 
volt (V). 
 
3.1.1  Analogue Multimeters 
 
Analogue meters take a little power from the circuit under test to operate their pointer. They 
/V or they may upset the circuit under test and must have a high sensitivity of at least 20k give 
an incorrect reading.  
 
Batteries inside the meter provide power for the resistance ranges, they will last several years 
but you should avoid leaving the meter set to a resistance range in case the leads touch 
accidentally and run the battery flat. 
Typical ranges for analogue multimeters like the one illustrated:  
(The voltage and current values given are the maximum reading 
on each range) 
• DC Voltage: 0.5V, 2.5V, 10V, 50V, 250V, 1000V. 
• AC Voltage: 10V, 50V, 250V, 1000V. 
• DC Current: 50μA, 2.5mA, 25mA, 250mA. 
A high current range is often missing from this type of meter. 
• AC Current: None. (You are unlikely to need to measure this). 
• Resistance: 20 , 200 , 2k , 20k , 200k . 
These resistance values are in the middle of the scale for each 
range. 
• 
It is a good idea to leave an analogue multimeter set to a DC  Analogue Multimeter 1
voltage range such as 10V when not in use. It is less likely to be 
damaged by careless use on this range, and there is a good chance 
that it will be the range you need to use next anyway! 
 
3.1.2  Digital Multimeters 
All digital meters contain a battery to power the display so they use 
virtually no power from the circuit under test. This means that on 
their DC voltage ranges they have a very high resistance (usually 
called input impedance) of 1M or more, usually 10M , and they are 
very unlikely to affect the circuit under test. 

10 
 
Digital Multimeter
Typical ranges for digital multimeters like the one illustrated: (the values given are the 
maximum reading on each range) 
• DC Voltage: 200mV, 2000mV, 20V, 200V, 600V. 
• AC Voltage: 200V, 600V.  
• DC Current: 200μA, 2000μA, 20mA, 200mA, 10A*. 
*The 10A range is usually unfused and connected via a special socket. 
• AC Current: None. (You are unlikely to need to measure this). 
• Resistance: 200 , 2000 , 20k , 200k , 2000k , Diode 
Test. 
Digital meters have a special diode test setting because their resistance ranges cannot be used 
to test diodes and other semiconductors. 
 
 
3.1.3  The Oscilloscope 
 
The oscilloscope is basically a graph‐displaying device ‐ it draws a graph of an electrical signal. In 
most applications the graph shows how signals change over time: the vertical (Y) axis 
represents voltage and the horizontal (X) axis represents time. The intensity or brightness of the 
display is sometimes called the Z axis.  
This simple graph can tell you many things about a signal. Here are a few: 
• You can determine the time and 
voltage values of a signal. 
• You can calculate the frequency of an 
oscillating signal.  
• You can see the "moving parts" of a 
circuit represented by the signal. 
• You can tell if a malfunctioning 
component is distorting the signal. 
• You can find out how much of a signal  
is direct current (DC) or alternating  Osciloscope 1
current (AC). 
• You can tell how much of the signal is noise and whether the noise is changing with 
time. 
   

11 
 
3.3  Wire Cutters, Clippers, Nippers 
 
These wire cutters are small and accurate. Great for cutting clipping, and 
nipping, small diameter wires and component leads.  
These precision flush cutting nippers wire cutters / clippers help you clip 
leads as close to the board surface as you want or need to. 
3.4  SOLDERING TOOLS  
Many types of soldering tools are in use today. Some of the more 
common types are the soldering iron, soldering gun, resistance soldering 
set, and pencil iron. The following discussion will provide you with a working knowledge of 
these tools. 
 
3.4.1  Soldering Irons 
Some common types of hand soldering irons are shown in figure 2‐28. All high‐quality soldering 
irons operate in the temperature range of 500 to 600°F. 
Eve n the 25‐watt midget irons produce this temperature. 
The important difference in iron sizes is not temperature, 
but thermal inertia. Thermal inertia is the capacity of the 
iron to generate and maintain a satisfactory soldering 
temperature while giving up heat to the joint to be 
soldered. Although it is not practical to solder large 
conductors with the 25‐watt iron, this iron is quite suitable 
for replacing a half‐watt resistor in an electronic circuit or soldering a miniature connector. One 
advantage of using a small iron for small work is that it is light and easy to handle and has a 
small tip that is easily used in close places. Even though its temperature is high enough, a 
midget iron does not have the thermal inertia to solder large conductors. 
 
   

12 
 
3.4.2  Screw Drivers 
A screw driver is used to tighten or remove screws from electrical and household components. 
There are two major types of screw drivers: Flat head screw driver 
and Star screw drivers. There are other types of screw drivers for 
different types of screws.  

3.4.3   Spanner 

A wrench or spanner is a tool used to provide a mechanical advantage in applying torque to 
turn bolts, nuts or other hard‐to‐turn items. The first wrench was patented in 
1835 by Solymon Merrick.  

A spanner refers to a specialized wrench with a series of pins or tabs around 
the circumference. The most common shapes are called open‐end 
wrench and box‐end wrench. 

3.4.4  Allen Keys 

The Allen key is an everyday tool that goes by many names. 
Commonly known as a hex key, Allen wrench, zeta key, or hex head, 
the Allen key is a six‐sided tool used as a driver for screws, bolts, and 
other fasteners designed to fit the tool. The name "Allen wrench" 
came from the Allen Company, a Hartford, Connecticut based 
manufacturer who produced the tool. Since then, the tool has gone by 
many names as numerous manufacturers have produced variations of the wrench.  

The Allen key comes in several different shapes and sizes, but the most typical shape for 
an Allen key is an L‐shape. This allows the user to take advantage of the wrench’s reach –‐ while 
using the longer arm of the L‐shape. 

   

13 
 
 WEEK 4: 

4. Resistors 

4.1 Resistivity 
While resistance is an electrical quantity, resistivity is a physical property of materials, which is 
used to produce resistance. 
 
R
 
Resistor Symbol
4.2  Inductor  
 
Definition 
An inductor is a passive electrical device that stores energy in a magnetic field, typically by 
combining the effects of many loops of electric current. 

 
The electrical symbol for an inductor is  
 
 

Inductor Color Code 

14 
 
  

 
 
4.3  Capacitors 
 
Function 
Capacitors store electric charge. They are used with resistors in timing circuits because it takes 
time for a capacitor to fill with charge. They are used to smooth varying DC supplies by acting as 
a reservoir of charge. They are also used in filter circuits because capacitors easily pass AC 
(changing) signals but they block DC (constant) signals. 
 
4.3.1  Capacitance 
 
This is a measure of a capacitor's ability to store charge. A large capacitance means that more 
charge can be stored. Capacitance is measured in farads, symbol F. However 1F is very large, so 
prefixes are used to show the smaller values. 
Three prefixes (multipliers) are used, μ (micro), n (nano) and p (pico): 
• μ means 10‐6 (millionth), so 1000000μF = 1F 
• n means 10‐9 (thousand‐millionth), so 1000nF = 1μF 
• p means 10‐12 (million‐millionth), so 1000pF = 1nF 
There are many types of capacitor but they can be split into two groups, polarised and 

15 
 
unpolarised. Each group has its own circuit symbol. 
4.3.2  Polarised capacitors (large values, 1μF +) 
These types of capacitors must be connected the correct way round, at least one of their leads 
will be marked + or ‐. 
 
+  ‐
 

4.3.3  Unpolarised capacitors (small values, up to 1μF) 
 
Small value capacitors are unpolarised and may be connected either way round. They are not 
damaged by heat when soldering, except for one unusual type (polystyrene). They have high 
voltage ratings of at least 50V, usually 250V or so. It can be difficult to find the values of these 
small capacitors because there are many types of them and several different labeling systems! 
 

       
Many small value capacitors have their value printed but without a multiplier, so you need to 
use experience to work out what the multiplier should be! 
For example 0.1 means 0.1μF = 100nF. 
Sometimes the multiplier is used in place of the decimal point: 
For example: 4n7 means 4.7nF. 
Capacitor Number Code 
A number code is often used on small capacitors where printing is difficult: 
• the 1st number is the 1st digit, 
• the 2nd number is the 2nd digit, 
• the 3rd number is the number of zeros to give the capacitance in pF. 
• Ignore any letters ‐ they just indicate tolerance and voltage rating. 
For example: 102 means 1000pF = 1nF (not 102pF!) 
For example: 472J means 4700pF = 4.7nF (J means 5% tolerance).  

4.3.4  Capacitor Colour Code 
A colour code was used on polyester capacitors for many years. It is now obsolete, but of 
course there are many still around. The colours should be read like the resistor code, the top 
three colour bands giving the value in pF. 
Ignore the 4th band (tolerance) and 5th band (voltage rating). 
For example: 
brown, black, orange means 10000pF = 10nF = 0.01μF. 

16 
 
Note that there are no gaps between the colour bands, so 2 identical bands actually appear as a 
wide band. 
For example: 
wide red, yellow means 220nF = 0.22μF. 
Polystyrene Capacitors 
This type is rarely used now. Their value (in pF) is normally printed without units. 
Polystyrene capacitors can be damaged by heat when soldering (it melts the polystyrene!) so 
you should use a heat sink (such as a crocodile clip). Clip the heat sink to the lead between the 
capacitor and the joint. 
Colour Code 
 
 
  Colour Code
 
Colour Number
 
 
  0
 
  Brown 1
  Red 2
  Orange 3
  Yellow 4
 
  Green 5
  Blue 6
  Violet 7
  Grey 8
  White 9
Variable  capacitors 
 
Variable capacitors are mostly used in radio tuning circuits and they 
are sometimes called 'tuning capacitors'. They have very small 
capacitance values, typically between 100pF and 500Pf (100pF = 
0.0001μF). The type illustrated usually has trimmers built in (for making small adjustments ‐ see 
below) as well as the main variable capacitor. 
Many variable capacitors have very short spindles which are not 
suitable for the standard knobs used for variable resistors and 
rotary switches. It would be wise to check that a suitable knob is 
available before ordering a variable capacitor. 
Variable capacitors are not normally used in timing circuits because  Variable Capacitor Symbol
their capacitance is too small to be practical and the range of values available is very limited. 
Instead timing circuits use a fixed capacitor and a variable resistor if it is necessary to vary the 
time period. 
 

17 
 
 
Trimmer capacitors 
 
Trimmer capacitors (trimmers) are miniature variable capacitors.  
They are designed to be mounted directly onto the circuit board and 
adjusted only when the circuit is built. 
A small screwdriver or similar tool is required to adjust trimmers. The  Trimmer Capacitor 

process of adjusting them requires patience because the presence of your 

hand and the tool will slightly change the  capacitance of the circuit in the  Trimmer Capacitor Symbol 
region of the trimmer! 
 
What do capacitors look like? 
In figure 4 we have a photo of a 
selection of fixed and variable 
capacitors. The upper capacitor is a 
variable capacitor. Down the left hand 
side we have a number of electrolytic 
capacitors.   
 
The red capacitor in the lower left is a 
tag tantalum type of greater tolerance 
and high stability. The yellow is a 
metallised polypropylene film type 
while the green ones at the right are 
the popular polyester types 
"Greencaps". 
In the middle are silver mica 
capacitors which I personally think are  Figure 4 ‐ a selection of fixed and variable capacitors
somewhat over rated although these 
were 1% tolerance types. At the upper right is a 25 pF beehive trimmer. 
 

   

18 
 
 WEEK 5 

DIODES 

5.1  Function 
Diodes allow electricity to flow in only one direction. The arrow 
of the circuit symbol shows the direction in which the current can 
flow. Diodes are the electrical version of a valve and early diodes 
were actually called valves. 
Silicon diodes are the most common and cheapest, and have a 
forward voltage drop of about 0.7 volts. Germanium diodes have a forward voltage drop of 
about 0.2 volt. Germanium diodes, though, are typically much more expensive than silicon 
diodes; luckily, they're salvageable from lots of circuit boards. 
 
5.2  Forward Voltage Drop 
Electricity uses up a little energy pushing its way through the diode, rather like a person pushing 
through a door with a spring. This means that there is a small voltage across a conducting 
diode, it is called the forward voltage drop and is about 0.7V for all normal diodes which are 
made from silicon. The forward voltage drop of a diode is almost constant whatever the current 
passing through the diode so they have a very steep characteristic (current voltage graph). 
  Current I 

 
0.7 V  Voltage V 
 
5.3  Reverse Voltage 

19 
 
When a reverse voltage is applied a perfect diode does not conduct, but all real diodes leak a 
very tiny current of a few μA or less. This can be ignored in most circuits because it will be very 
much smaller than the current flowing in the forward direction. However, all diodes have a 
maximum reverse voltage (usually 50V or more) and if this is exceeded the diode will fail and 
pass a large current in the reverse direction, this is called breakdown. 
Ordinary diodes can be split into two types: Signal diodes which pass small currents of 
100mA or less and Rectifier diodes which can pass large currents. In addition there are LEDs 
(which have their own page) and Zener diodes 

5.4  Zener diodes 
 
Zener diodes are used to maintain a fixed voltage. They are designed to 'breakdown' in a 
reliable and non‐destruc tive way so that they can be used in reverse to maintain a fixed 
current. 
 
  Forward 
 
 
  k
a 
 
 
  a = anode, k = cathode
  Reverse 
 
 
zener diode characteristics
 
5.5  Photodiodes  
 
All P‐N junctions are light sensitive; photodiodes are just P‐N junctions that are designed to 
optimize this effect. Photodiodes can be used two ways ‐‐ in a photovoltaic (here it becomes a 
current source when illuminated ‐‐ see solar cell), or photoconductive role.  
 
   
a  k 
 

20 
 
To use a photodiode in its photoconductive mode, the photodiode is reverse‐biased; the 
photodiode will then allow a current to flow when it is illuminated.  
 
   

21 
 
5.6  Light‐Emitting Diodes (LEDs) 
 
All diodes emit some light when forward‐biased. LEDs are made from a special semiconductor 
(like gallium arsenide phosphide) which optimizes this light output. Unlike light bulbs, LEDs 
rarely burn out unless their current limit is passed.  
 
  a  k 
   
 
  LED Symbol
 
 
 
 
 
  LED 1
When current is flowing through an LED the voltage on the positive leg is about 1.4 volts higher 
than the voltage on the negative side (this varies with LED type ‐‐ infrared LEDs have a lower 
forward voltage requirement, others may need up to 1.8 V). Remember that there is very little 
resistance to limit the current, so a resistor must be used in series with the LED to avoid 
destroying it (note, though, that some panel‐mount LEDs come from the factory with a current‐
limiting resistor soldered to them). 
Also note that LEDs can be used as photodiodes (tho' their sensitivity is relatively low, so 
they're only useable this way in very bright conditions).  
 
5.7  Transistor  
 
The transistor is a solid state semiconductor device 
which can be used for amplification, switching, voltage 
stabilization, signal modulation and many other 
functions. It acts as a variable valve which, based on its 
input current (BJT) or input voltage (FET), allows a 
precise amount of current to flow through it from the circuit's voltage supply.  
 

22 
 
 
5.7.1    Bipolar junction transistor (BJT) 
 
A bipolar junction transistor (BJT) is a type of transistor, an amplifying or switching device 
constructed of doped semiconductors that employs both 
types of charge carriers: electrons and holes. The BJT is a 
three layer sandwich of differently doped sections, either 
Ntype| P‐type|N‐type  (NPN transistors) or P‐type|N‐type|P‐
type (PNP transistors). The center layer is called the base of 
the transistor and is made from lightly doped, high resistivity 
material. By varying the current into the base terminal, the 
current allowed to flow between the emitter and a third 
terminal known as the collector(which are both heavily 
doped and hence low resistivity regions) can be varied. This 
effect can be used to amplify the input current. BJTs can be 
thought of as current‐controlled current sources and are 
usually characterized as current amplifiers. Early  transistors 
were made from germanium but most modern BJTs are made 
from silicon.  
 
 
 
5.7.2  Junction Transistors 
A junction transistor consists of a thin piece of one type of semiconductor material between 
two thicker layers of the opposite type. For example, if the middle layer is p‐type, the outside 
layers must be n‐type. Such a transistor is an NPN transistor. One of the outside layers is called 
the emitter, and the other is known as the collector. The middle layer is the base. The places 
where the emitter joins the base and the base joins the collector are called junctions.  
 
Collector  Emitter Collector Emitter
  P n P   n P nP

Base  23  Base

 
 WEEK 6 

6.0  RESISTORS 
6.1  The Color Code 
In former times all resistors were labeled with figures indicating their values. These figures were 
substituted by color rings which indicate the value and the tolerance. The reasons were: 
• Cheaper application of the labeling 
• increasing miniaturization left no room for figures 
• Figures cannot be read when on the bottom side of the element. 
 
 
Colour  Value  Multiplier  Tolerance 
Black  0  100=1   
Brown  1  101 = 10   
Red  2  102 = 100   
Orange  3  103 = 1K   
Yellow  4  104 = 10K   
Green  5  105 = 100K   
Blue  6  106 = 1M   
Violet  7     
Grey  8     
White  9     
Gold    10‐1 = 0.1  5% 
Silver    10‐2 = 0.01  10% 
None      20% 
 
The international color code defines the corresponding values of each color. 
Values with a tolerance between 20% and 5% can be specified by 2 significant numbers. 
Therefore such resistors will have 
• two color rings for the value 
• one color ring for the multiplier 
• one color ring for the tolerance (none for 20%). 
5% and 10% tolerance resistors have 4 color rings. 

24 
 
The last ring is gold o
or silver. 
with smaller ttolerances (2
Values w 2% and 1%) require threee significantt numbers. TTherefore su
uch 
resistor w
will have 
• three ccolor rings fo
or the value 
• one collor ring for the multiplieer 
• one collor ring for the tolerancee. 
1% and 2
2% tolerance
e resistors h
have 5 colou
ur rings. The last ring is b
brown or red
d. 
 
 
4 colou
ur rings for 5
5% and 10%  5 colour ringss for 1% and
d 2% 
  Toleran
nce resistorss  To
olerance ressistors 

   
 

25 
 
 WEEK 7 

7.0  COMPONENTS TESTING USING A MULTIMETER

7.1  Measuring Resistance Value 
 
• To measure resistance you must connect the test leads to the 
sockets labelled 'COM' and 'Ω'.  
• Adjust the function selector switch to measure Resistance Ohms 
(Ω). 
• Without anything connected between the test leads the display 
will give an out of range indication (1 or OL) to show that the 
resistance is too large to measure or open circuit.  probes are not 
connected to circuit) 
• To check the meter is working touch the leads together and the 
display should read 0.0 Ω. It may read slightly higher, e.g. 0.3 Ω. 
This is the resistance of the test leads themselves. 
• Connect the probes of the multimeter across a resistor and measure the resistance as 
shown below. 

 
 
 
 
 
 

26 
 
 7.2    Measurement of Diode Resistance 

• Pick a diode among the components provided 

• Set  the  multimeter  to  the  highest  resistance  range  and  adjust  for  zero  by  touching 

the two leads together and turning the zero adjuster. 

• Connect the P‐side of the diode to the positive terminal and the 

• N‐side to the negative terminal. 

• What is your observation? 

• Reverse the connections to the diode and again record the resistance 

• State your observation and whether or not this is expected. 

You should find that: 

• A higher voltage is needed to make a silicon diode conduct; and  

• A higher current is passed by the silicon diode than by the germanium diode. 

27 
 
 Note: The reverse current is obtained when the diode is reversed biased and is usually very 

much  smaller  than  the  forward  current.  For  silicon  diodes,  this  is  in  the  region  of  micro‐

amperes and for germanium diodes, nano‐amperes. If the reverse voltage becomes too high, 

then the diode will break down and there will be a sudden dramatic increase in the reverse 

current. It is observed that the graphs for diodes are curves, which means that they do not 

obey ohm’s law and are therefore non‐ohmic in behavior. 

 
7.3  Measurement of Transistor Resistance 

• Connect the red terminal of the multimeter to base and black to collector and record 
the resistance value.  
• With  the  red  terminal  on  the  base,  connect  the  black  terminal  to  the  emitter  and 
note your result. 
• Change the black terminal to base and then the red terminal to collector. Note your 
reading. 
• Now  connect  the    red  terminal  to  collector  and  black    terminal  to  emitter    and 
record the resistance 
• Reverse your connection to bring to the black terminal. Note your reading.  

28 
 
  
 

You should find that: 

• The base‐emitter and the base collector junctions give a high resistance reading for the 
 n‐p‐n transistor and a low resistance reading for the p‐n‐p transistor when the base is 
negative and the collector/emitter is positive. In the case of the npn transistor, the two 
junctions are reversed biased and for the pnp transistor, the two junctions are forward 
biased. 
• When the multimeter is connected to the collector and the emitter of both transistors, a 
high resistance is obtained whatever the polarity of the leads. This is because the two 
np junctions making up the transistor are arranged so that a voltage between the 
collector and the emitter causes one of the junctions to be forward biased and the other 
to be reversed biased, the reverse biased junction resulting in the high resistance 
reading between the collector and emitter. 
• This method can be used to test the conditions of all transistors. 

   

29 
 
 WEEK 8 

8.0    SOLDERING TECHNIQUE 
8.1    The Basic Soldering Guide  
 
Soldering is a delicate manual skill which only comes with practice. Remember that your 
ability to solder effectively will determine directly how well the prototype or product 
functions during its lifespan. Poor soldering can be an expensive business ‐ causing 
product failure and downtime, engineer's maintenance time and customer dissatisfaction. 
At hobbyist level, bad soldering technique can be a cause of major disappointment which 
damages your confidence. It needn't be like that: soldering is really easy to learn, and like 
learning to ride a bike, once mastered is never forgotten! 
These photos illustrate the basic steps in making a perfect solder joint on a p.c.b. If you're 
a beginner, our advice is that it's best to practice your soldering technique using some 
clean, new parts with perhaps some new stripboard (protoboard). Be sure to avoid using 
old, dirty parts; these can be difficult if not impossible to solder. The new Basic 
Desoldering Guide is a photo sequence illustrating the use of solder pumps and braid, and 
a few genuine examples (honest) of bad soldering.  
 

1. Boards must be clean to begin with, especially if they're 
not previously "tinned" with solder. Clean the copper 
tracks using e.g. an abrasive rubber block  
 
2. Clean the iron "bit" (tip) using a damp sponge.  
 
 
 
 
3. A useful product is Multicore's Tip Tinner Cleaner (TTC) – a 
15 gramme tin of special paste which cleans and "tins" the 
iron, in one go.  
 
 
 

30 
 
 
4. Insert components and splay the leads so that the part is held in 
place.  
 
 
 
 
5. It's usually best to snip the wires to length prior to soldering. This 
helps prevent transmitting mechanical shocks to the copper foil.  
 
 
 
 
6. Apply a clean iron tip to the copper and the lead, in order to heat both 
items at the same time.  
 
 
 
 
 
7. Continue heating and apply a few millimeters of solder. Remove the 
iron and allow the solder joint to cool naturally.  
 
 
 
 
 
8. It only takes a second or two, to make the perfect joint, which should 
be nice and shiny. Check the Guide for troubleshooting help.  
 
 
 
 
9. An example of a "dry" joint ‐ the solder failed to flow, and instead 
beaded to form globules around the wire.  
 
 
 
 
 
 
 

31 
 
 WEEK 9 

9.0  THE BASIC DE‐SOLDERING GUIDE 

De‐soldering is required when electronic components need to be removed from a circuit, 
usually because they are faulty. It may sometimes be necessary during testing or assembly, 
if a wrong part has been fitted or a modification has to be made. In the field, it's not 
uncommon for faulty components to be swapped out, or poor joints (perhaps "dry" joints) 
to need remaking properly, months or years after manufacture. Experienced engineers can 
often diagnose a particular faulty joint immediately, because they may have seen the same 
problem on similar equipment before, especially if it has a "reputation". A proper 
desoldering technique can soon be acquired with practice ‐ all you need to do is buy some 
scrap boards to have a go with, and desolder to your heart's content! 
The next photo sequence illustrates the basic steps for desoldering a printed circuit board, 
in order to remove a faulty part. Both a desoldering pump as well as desolder braid are 
illustrated.  
 
1‐ The two solder joints to be desoldered, to enable a faulty 
component to be removed.  
 
 
 
2‐ If using a desoldering pump, apply the iron first to melt the 
solder (1‐2 seconds). Ensure the pump is 'primed' and ready 
to go...  
 
 

32 
 
 3. The nozzle of the desoldering pump is applied to the molten 
solder and the spring‐loaded plunger is then released, 
drawing the solder up into the pump. Repeat if needed.  
 
 
 
4. The first joint, now desoldered. The second joint will be 
desoldered using braid...  
 
 
5. Select a suitable width of braid, and press it down onto 
the COLD joint using the hot tip of the iron.  
 
 
 
 
6. Molten solder is drawn up by capillary action into the 
braid. Care not to overheat, or 'drag whiskers' of solder 
over the board, nor let the braid solidify on the joint!  
 
 
 
7. The component dropped out of the board after 
desoldering. Sometimes, it may need persuading with 
pliers....  
 
 
8. Close‐up shot of both joints, now desoldered and ready 
for the replacement part to be fitted.  

33 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
9.1  Bad Soldering 
These are all genuine examples which have not been 
retouched or reworked in any way. 
1‐ Tenfold excess of solder, and (extreme left) incomplete joint 
with poor coverage. There is no need to add more solder "for 
luck".  
 
2‐ One example of several dry joints found within a commercial 
PSU adaptor for a computer peripheral.  
 
 
 
 
3. This joint looks somewhat suspect as well...  
 
 
 
4. A close‐up reveals the terrible standard of soldering (and 
quality control), with a fracture visible on this ground/ earth 
joint.  
 

34 
 
 5. How not to make a mains voltage soldered joint. This went "dry" and starting arcing, 
nearly zapping the equipment. It is also a fire hazard.  
 
 
6. The same mains connection, the wire merely being 'tacked on' 
with a blob of solder.  
 

   

   

35 
 
 WEEK10 

CIRCUIT BOARDS 

Matrix Boards  

These  are  used  in  design  and  development  of  circuits. 

Since  components  are  laid  out  in  the  same  way  as  the 

circuit diagram it is a simple matter to trace components 

and alterations can be easily made. 

Method of Construction 

• Draw  a  grid  on  a  piece of  paper.  The  distance 

between  the  line  intersections  should  be  the 
same  as  the  distance  between  holes  on  the 
matrix board. 
• Draw  the  components  to  scale  on  to  the  grid, 
marking  the  positions  of  any  terminal  pins.  
The  appearance  of  the  drawing  should  be 
similar to the circuit diagram. 
 

   

36 
 
Strip Boards 

These are used in the design and development of circuits. This 

method allows design alterations to be incorporated readily.  

Method of construction  

• Letter each horizontal link. 
• Note: Sometimes it is possible to letter two horizontal 
links by the same letter. 
• Shade  alternate  rows  on  lined  paper  to  represent  the 
number of horizontal links already determined. 
• Draw  onto  the  paper  the  components  in  the 
approximate positions they will take up on the finished 
strip board. 
• Mark any necessary breaks in copper tracks. 
• Insert  components  into  strip  board  working  to  the 
prepared drawing. 

   

37 
 
Printed Circuit Boards 

When a circuit has been finally proved it may be converted into a printed circuit which can be 

manufactured in quantity. 

Method of construction  

• From the circuit diagram, draw the copper pattern on a sheet of paper. The paper 
should be the same size as the copper‐clad board.  
•  Clean the surface of the copper clad‐board with household cleaning powder. Wash 
thoroughly and dry. 
• Trace  the  outline  of  the  copper  pattern  onto  the  copper‐clad  board  using  carbon 
paper. 
• Using  a  small  paint  brush,  paint  in  the  outline  on  the  copper  clad  board  with  acid 
resist ink. Etch resist pens are also available for this purpose. 
• Allow acid resist ink to dry  
• When  the  resisted  image  is  thoroughly  dry,  etch  away  the  unwanted  copper  using 
copper etchant. The etchant used is ferric chloride or cupric chloride diluted in water 
and warmed to an approximate temperature of 270C (800F).    It is important that air 
comes into contact with the copper surface to enable a better etching action to take 
place.  This  can  be  done  by  gently  agitating  the  etching  container.  When  etching  is 
complete, wash the board thoroughly in running water to remove all traces of the 
acid. 
• Dry the board 
• Remove the acid resist ink using a resist ink solvent by swabbing the surface. 
• Wash and dry the board. 
• Preserve the copper pattern by brushing on a preservative flux. Allow to dry.  
• Drill appropriate holes in the circuit. 
• Assemble components to board and solder 

38 
 
 • Inspect for excess solder and other faults.    
   

Preparation of a printed circuit board

39 
 
Breadboard 

The  term  “breadboard”  is  one 

that  is  likely  to  be  a  little 

confusing  to  beginners,  but  it 

simply  means  a  board  on  which 

electronic  circuits  can  be  built 

and  tested.  Modern  breadboards  are  almost  invariably  of  the 

solderless  type,  where  components  are  simply  plugged  in  and 

unplugged  as  desired.  Apart  from  the  obvious  advantage  of 

enabling  circuit  changes  to  be  rapidly  made  when 

experimenting, it also enables components to be reused almost 

indefinitely.  Components  will  in  fact  eventually  wear  out 

because the leadout wires will need to be reformed slightly to 

fit  into  new  layouts,  and  the  leadout  wires  eventually  suffer 

from metal fatigue and break off (usually close to the body of 

the  component  so  that  it  becomes  useless).  This  can  be 

overcome  though  by  only  using  components  for  breadboaring 

for a limited period of time, and then using them in finished projects and getting a new stock of 

breadboarding components. 

Although the term “breadboard” may seem inexplicable; it is probably derived from the early 

days  of  electronics  when  valued  circuits  were  normally  prototyped  on  a  large  wooden  board 

40 
 
(like a breadboard) into which nails were hammered. Components were then connected to the 

nails and additional wires were sued to connect the components in the desired fashion. Some 

finished equipment actually used this method of construction. A variation on this type of board 

was  to  use  screw  terminals  that  no  soldering  was  necessary;  the  original  solderless 

breadboards, in fact!   

Modern  breadboards  are  much  simpler  and  easier  to  use,  and  apart  from  being  useful  to 

experienced electronic engineers working on prototype designs, they also have attractions for 

beginners.  One  is  simply  that  they  are  very  easy  to  use,  and  anyone  can  plug  in  and  remove 

components from a solderless breadboard; no previous experience of electronics construction 

being necessary. When the inevitable mistakes in the component layout do occur, it is an easy 

matter  to  check  through  the  layout  and  remedy  the  errors  since  no  awkward  desoldering  is 

necessary.  It is also easy to quickly build and experiment with a number of projects at low cost 

with everything involved being reusable, including the breadboard. 

Numbers are used to identify the horizontal rows of holes and letters are employed to identify 

the  vertical  rows  of  holes.  In  order  to  make  it  easier  to  copy  component  layouts,  the 

identification letters and some of the numbers are marked on the layout diagrams and on the 

verobloc itself. 

In figure 1 lines are used between holes to show how they are internally interconnected and, 

for  example,  all  the  holes  in  row  “A”  are  connected  together.  The  rows  of  holes  around  the 

periphery of the board are mainly used to carry the two supply lines. The spacing of the holes is 

41 
 
such that most integrated circuits can be plugged straight into the board without the need for 

any special adaptors. 

Controls and some other components do not plug straight into the board, but are mounted off‐

board  on  a  mounting  bracket  of  some  kind,  and  connected  to  the  board  via  single  core 

insulated  leads.  Multistrand  wire  is  normally  used  interconnecting  wires  of  this  type,  but 

multistrand wire can be difficult to connect to a solderless breadboard as the strands tend to 

splay  as  the  wire  is  pushed  into  the  board.  If  you  have  soldering  equipment  this  can  be 

overcome by tinning the end of multistrand leads with solder, but it is otherwise better to use 

single strand wire. Any PVC‐covered type that is not unusually thick or thin should be suitable 

(i.e. about 22 SWG).                                                             

   

42 
 
 WEEK 11 

FAULT FINDING ON ELECTRONIC INSTRUMENTS AND SYSTEMS 

The previous sections dealt with component failures and simple component testing, and the 
following chapters are concerned with actual component faults in one portion of a complete 
instrument, in other words for example in the power supply or the oscillator section of an 
instrument. However, when a complete instrument is returned for repair, the service engineer 
must first locate which block of the instrument is faulty before he can locate the actual  
component that has failed. There are various methods used to narrow down the fault to one 
block, but before these are discussed, it is useful to consider some fairly obvious but often 
overlooked points:  

(1)   The  service  engineer  must  have  a  MAINTENANCE  MANUAL  with  up‐to‐date  circuit 
diagrams. This manual should also give the figures of the performance specification.  

(2)  The  engineer  must  have  all  the  necessary  TEST  EQUIPMENT.  Usually  a  list  of 
instruments and any special instructions are in the maintenance manual.  

The engineer then has to DEFINE THE FAULT ACCURATELY. This point is most important. 
It  is  no  good  trying  to  locate  a  fault  that  is  vaguely  defined.  The  symptoms  must  be 
accurately  noted  and  this  means  that  a  functional  test  must  ‘be  made  on  the 
instrument.  

For example consider that a signal generator has been returned for repair with a suspect power 
supply failure. Before taking off the cover and checking power supply lines, the service engineer 
would  

(a)  check the mains fuses and if not blown  

43 
 
(b)   check for sine wave output on all ranges,  

(c)   then  make  notes  of  the  fault  symptoms.  The  complete  circuit  of  most  electronic 
instruments  can  be  broken  down  into  a  series  of  functional  blocks;  for  example  in  a 
general purpose sine wave generator these would be power supply, variable sine wave 
oscillator, buffer amplifier, and output attenuator. By treating the instrument in blocks, 
rather than as a whole, it is possible to narrow down the search for a faulty component 
first  of  all  to  one  block,  then  by  measurements  within  that  block  to  locate  the  actual 
faulty component. The methods used to decide which block is faulty are 

  (a)  Input to output (or beginning to end). 

  (b)  Output to input 

  (c)  Random 

  (d)  Half‐split 

All of these have their particular advantages and uses. The RANDOM METHOD, which implies a 
totally non‐systematic approach, is rarely used. A stth9d based on the reliability of components 
can  also  a  used  when  there  is  a  wealth  of  service  knowledge  and  experience  concerning  a 
particular  instrument.  For  service  engineer  might  make  the  reasonable  n  that,  because  a 
particular electrolytic capacitor has been at fault in 60% of the instruments recently returned, it 
is a strong possibility that the next instrument also has a faulty electrolytic capacitor. He would 
naturally  check  this  first,  and  in  most  cases  save  valuable  service  time.  It  must  be  stressed, 
however,  that  this  method  depends  upon  the  availability  of  a  large  amount  of  data  on  the  , 
reliability of the various components within an Instrument. Most service engineers would use a 
logical systematic approach to system fault location.  

The  INPUT  TO  OUTPUT  and  OUTPUT  TO  INPUT  methods  are  examples  of  this  systematic 
approach. The method is fairly obvious. A suitable input signal (if required) is injected into the 
input block and then measurements are made sequentially at the output of each block in turn, 
working either from the input towards the output or from the output back to the input, until 

44 
 
the  faulty  block  is  located.  This  logical  method  is  the  one  most  service  engineers  use  on 
equipment containing a limited number of blocks.  

The  HALF‐SPLIT  method  is  very  powerful  in  locating  faults  in  instruments  made  up  of  a  large 
number of blocks in series. Take for example a superhet radio receiver shown in block diagram 
form In Fig. Since there are eight blocks it is possible to divide the circuit in half, test that half, 
decide which half is working correctly, then split the nonfunctioning section into half again to 
locate the fault. An example is the best way of really understanding the method. Assume that a 
fault exists in the demodulator of the receiver, the sequence of tests would be as follows:  

(a)   Split  in  half,  inject  signal  into  the  input  of  (1)  (the  aerial  circuit),  and  check  output  at 
(4)(IF). Output correct. Therefore the fault is somewhere in blocks (5) to (8).  

(b)   Split blocks (5) to (8) in half by checking output of (6). Input signal can be left at (1). No 
output.  

(c)  Leaving  signal  at  (1),  check  output  from  (5).  Output  should  be  correct,  indicating  that 
the faulty block is (6), the demodulator.  

You can try this method for yourself by assuming that the fault is in block (3) for example, and 
you will find that the number of checks necessary to locate the fault is still three. On average, 
four tests would be required by using the input to output technique. The half‐split method is 
most  useful  when  the  number  of  components  or  blocks  in  series  is  very  large,  for  example 
where  several  series  plug  and  socket  connections  are  used,  or  for  heater  chains  in  valve 
equipment.  There  are,  however,  several  assumptions  made  for  the  half‐split:  (a)  that  all 
components are equally reliable; (b) that it is possible and practical to make measurements at 
the desired point; and (c) that all checks are similar and take the same amount of time. These 
assumptions will not always be valid and it is up to the service engineer to then decide the best 
method of approach.  

The half‐split method can also be easily complicated by 

45 
 
(a) An odd number of series units.  

(b) Divergence: outputs from one block feeding two or more units.  

(c) Convergence: two or more inputs being necessary for the correct operation of one unit.  

(d)  Feedback:  which  may  be  used  to  modify  the  characteristics  of  the  unit  or  in  fact  be  a 
sustaining network for an oscillator.  

When  using  any  of  the  methods  as  described,  try  and  use  the  method,  or  a  combination  of 
them, that will locate the faulty block in a system in the shortest possible time. 

Centrifuge 

Centrifugation is one of the methods used for separation of liquid mixtures of substances e.g. 
colloidal substances or any liquid suspension. Centrifuge is the mechanical device that employs 
concept of centrifugation. 

A centrifuge is made up of the following mechanical parts. 

1.   A big chamber housing a rotor with a rotor head firmly fixed to its top. 

2.   A set of centrifuge tubes/cups arranged in a specific order on the rotor head. 

3.   A massive lid to close the chamber when the instrument is being used. 

4.   Some  centrifuges  have  devices  for  measuring  the  speed  of  the  moving  rotor 
(Tacometer). 

5.   A Speed control device. 

6.   A timer. 

46 
 
Operational Guidelines 

1.   With the instrument unplugged from the mains socket. 

   (a)   Return speed control knob and the timer to zero setting 

  (b)   Select the appropriate rotor head to use and fix it firmly on the rotor. 

(c)   Weigh  the  centrifuge  cups/tubes  and  balance  them  up  to  give  equal  weights 
(Always use the recommended tubes that the manufacturers sent along with the 
instrument) 

(d)   Measure  out  equal  volumes  of  test  samples  into  the  tubes  using  a  calibrated 
pipette. 

(e)   Arrange the cups/tubes on the rotor head such that equal numbers are made to 
face each other to balance the weight. 

(f)   Close the lid tightly. 

(g)   Plug the instrument to the mains and switch on the power. 

(h)   Turn on timer to desired time. 

(i)   Starting from low speed gradually increase the speed to desired limit. 

(j)   At the end of centrifugation when the instrument switches off by itself, allow the 
speed meter to return to zero. 

(k)   Unplug the instrument, open the lid and bring out centrifuge tubes and decant 
supernatant solution. 

(l)   The solid residue at the bottom of the cups can also be removed.  

(m)   Clean the cups properly and arrange them neatly to dry in their containers. 

(n)   Clean the centrifuge inner chamber first with wet duster and then with dry one. 

47 
 
 

Maintenance 

1. The  centrifuge  inner chamber  must  be  properly  cleaned  after  every  use.  The  chamber 
must not be allowed to rust hence it should be painted about once or twice a year. 
2. The centrifuge tubes must be properly balanced before use and the liquid suspension to 
be  centrifuged  must  be  properly  shaken  to  make  them  homogenous  before  equal 
volumes of test solutions are pipetted into the tubes. Where this is not done unbearable 
vibration results which can lead to damage of the rotor shaft. 
3. The tubes must be arranged such that equal numbers are made to face each other. 
4. The  tubes  must  be  properly  washed  and  mopped  dry  using  a  clean  duster  before 
storage. 
5. The centrifuge should not be moved about while it is spinning. 
6. From time to time the circuitry parts should be reached and cleaned of dusts and spider 
webs. 
7. A centrifuge should not be put in a hot environment since this can adversely affect its 
electronic components – it should be put in an air conditioned room. 
8. Centrifuge always should be covered with a dust cover made from white cloth and not 
polythene material. 
9. Electrical fuse of correct rating should always be used on the electrical plug to prevent 
damage to the instrument. 
10. The uninterrupted power supply (UPS) should always be used on the electrical plug to 
prevent damage to the instrument. 
11. Centrifuge tubes should not be filled to the brim with test samples to prevent spillage on 
the inner chamber of the instrument. 
12. Centrifuge  tubes  should  be  handled  with  care  to  prevent  them  from  being  knocked 
against hard objects that can inflict dents on them. 

48 
 
 13. Rotor head should always be securely screwed tight to the rotor. Failure of which may 
lead  to  fatal  accident  and  untold  damage  to  the  instrument  caused  by  its  unexpected 
detachment from the rotor while spinning.  
14. Centrifuge  should  not  be  placed  on  the  same  work‐bench  with  other  sensitive 
instruments to prevent transmission of vibration from it to them. 
15. The instrument lid should be shut before the instrument is connected to the mains and 
the lid should not be opened while instrument is still spinning. 
    Trouble Shooting 

              PROBLEMS                      REMEDY 
1.  Instrument  does  not  work  when  1.   Check line voltage. 
connected to the line voltage.  2.   Check plug fuse. 
3.   Test continuity of the power line to the 
instrument 
4.   Check contact brushes  
2.    Instrument  shows  no  speed  increase  1.   Faulty speed rotary potentiometer 
even  when  speed  control  is  moved  to 
maximum. 
3.  Unsmooth  speed  movement  of  1.      Weight  imbalance  of  the  tubes  – 
instrument with unusual sound.  Rearrange  the  tubes  and  make  sure  that 
equal  volumes  of  the  samples  are 
measured into them.    
 

   

49 
 
 WEEK 12 

            (MECHANICAL STIRRERS) 

A  stirrer  is  a  simple  mechanical  device  used  to  homogenize  solutions.  It  can  also  be  used  to 
speed  up  the  detachment  of  ions  of  elements  which  are  loosely  attached  to  some  solid 
substances  when  such  substances  are  put  in  solution  e.g.  Exchangeable  captions  can  go  into 
solution faster when a soil sample in a solution of IN neutral Ammonium Acetate is stirred with 
a mechanical stirrer. 

       

      A SINGLE‐STIRRER MOTOR 

This type of stirrer consists of a rotor shaft passing through a strong magnetic field that causes 
the rotor to rotate. At the end of the rotor shaft there is a stirrer blade which does the stirring 
as the rotor rotates. The motor is comprises a magnet and a conductor wound round a magnet 
with several loops. 

When  a  current  is  passed  through  the  conductor  in  this  arrangement  a  rotating  effect  is 
produced which moves the rotor that does the stirring. The more the current passed the more 
the rotating effect on the rotor. The motor‐rotor assembly is called a mechanical stirrer and it is 
mounted on a heavy iron stand having a small hook at the centre to hold a stirrer cup in place. 

      A MULTI‐STIRRER 

This  device  has  a  single  motor  but  many  stirrer  rods.  Each  rod  is  fixed  to  a  plastic  disc  with 
separated edges arranged to contact each other through the edges. Thus when a stirrer shaft 
moves  other  shaft  also  move  together  with  it.  A  multi  stirrer  also  has  a  timer  and  a  washer 
attachment. The whole machine is mounted on Aluminum gadget with a simple device to move 
sample cups already arranged in sets of eleven in special containers up and down the level of 
stirrer blades. The machine can stir thirty three samples at a time. 

50 
 
 

       OPERATIONAL GUIDELINES 

1.   Set timer of the instrument to zero and motor at off. 

2.   Weigh 5gm sample into each of the cups arranged on aluminum tray. 

3.   Add 25ml of extracting solution e.g. IN neutral Ammonium Acetate to each of the cups 
with a dispenser. 

4.   Place  sample  tray  below  the  stirrer  blades  with  the  aid  of  a  metal  handle  at  the  right 
hand side of the aluminum gadget. There is a click sound when right position is reached. 

5.   Move  sample  tray  up  to  meet  the  stirrer  blades  with  the aid  of  a  metal  handle at the 
right side of the aluminum gadget. There is a click sound when right position is reached. 

6.   Through  a  240V  –  115V  step‐down  transformer,  connect  the  instrument  to  the  mains 
power supply. 

7.   Set timer to 15 minutes and switch on the motor. 

8.   At the expiration of 15 minutes, the instrument switches off automatically. 

9.   Lower the sample cups and filter samples into clean containers. 

10.   Rinse off soil particles from the stirrer blades properly with distilled water. 

11.   Switch off the motor and disconnect instrument from the power supply. 

51 
 
 MAINTENANCE 

(i)   As water is a good conductor of electricity, no liquid substance should be allowed to get 
into the electric motor. Water causes short circuiting which can lead to the damage of 
the motor. It can also cause electrocution of the user. 

(ii)   In  the  case  of  a  multi‐stirrer,  the  stirrer  blades  are  made  of  plastic  material  and 
therefore fragile. It should always be gently treated. 

(iii)   It should always be covered by dust cover made of white cloth. 

(iv)   The instrument should be cleaned before and after use. 

(v)   No other cups should be used as a substitute for the recommended ones for a particular 
stirrer. 

(vi)   Do not spin without a stirrer cup lest an innocent somebody passing by, perhaps holding 
a duster or cloth gets hooked by the moving blades thereby inflicting injuries on him and 
damage to the instrument. 

(vii)   The electric motor should be occasionally opened to be cleaned of dust and spider webs 
that can cause break in electrical contacts. 

(viii)   Where Boris is used, occasional greasing or oiling is necessary. 

(ix)   Mechanical  stirrers  should  not  be  operated  near  a  hot  object  or  environment  as  the 
magnet inside the motor get destroyed under such condition. 

(x)   Instrument should be kept in an air‐conditioned instrument room properly fortified to 
prevent burglary or theft. 

52 
 
  

TROUBLE SHOOTING 

             PROBLEMS                   REMEDY 
1.  Instrument  does  not  work  when  1. Check the power line for any fault. 
connected to the mains.  2. Test fuse in the plug for open circuit. 
3. Check continuity of the connecting leads 
to the instrument for any break. 
4.  Check  the  carbon  brushes  for  loose 
contacts. 
2. Stirrer blades move slowly.  1. Stiff Boris. Apply grease or oil or change 
the Boris. 
2.  Check  Voltage  across  the  mains  power 
line for low voltage. 
3.  Check  the  speed  control  for  any  faults. 
Change if necessary. 
3.  User  experiences  electrical  shocks  on  1.  There  is  electrical  leakage.  Do 
the  body  of  the  instrument  when  been  resistances  test  between  positive  and 
used.  negative  leads  and  also  between  positive 
lead  and  the  body  of  the  instrument. 
Change the motor. 
 

   

53 
 
 SHAKERS 

Shakers  are  equipments  used  in  soil  and  plant laboratory  to  either mix  or  separate  solutions. 
The kind to use depends on what is to be done.  

Examples are: 

(a) TEST TUBE SHAKERS 
These are shakers used mainly to separate solutions on test tubes. Example includes 
orbital shakers or those with circular or horizontal motions. Whatever the direction 
of rotation, the work done is the same. 

     (b)        MAGNETIC STIRRERS 

Usually  magnetic  stirrers  come  with  heating  mantle  or  plate  but  there  are  some 
stirrers that don’t come with heaters. Testator has a sample in the market. 

     (c)        HOMOGENIZER   

These are single stirrers used in mixing soil samples in solutions. They usually come 
with a stand and clamp (see attached diagram). 

     (d)        MIXERS 

                Mixers are commonly used in biochemistry and food laboratories. 

COMPONENTS 

Most shakers usually have the following components: 

• Time control or Timer. 
• Temperature control. 
• Stirring‐speed control. 
 

54 
 
OPERATION 

Shakers  should  be  placed  on  a  level  and  smooth  surface  so  that  it  stands  firm.  This  is  very 
important to prevent spilling during operation at high shaking frequencies. 

For Orbital Shakers, when working with Petri dishes or object slides, the clamping strips should 
be removed. Always adjust the speed control to minimum shaking frequency before putting the 
device  into  operation  by  actuating  the  mains  switch.  When  this  is  done,  the  drive  is  treated 
gently and possible spilling of liquid from sudden motion is prevented. The speed control can 
then be adjusted to desired speed. Having completed the shaking process, the speed control is 
then turned back to minimum frequency and the mains switch (ON ‐ OFF Switch) turned off. 

NOTE 

• Most  shakers  have  overload  protection.  They  usually  come  from  in‐form  of  fuses 
with very low amperage. 
• Shakers should be protected against water spillage or splashing.  This is because of 
the motor it incorporates. 
FAULT FINDING 

There are a few potential areas where fault can occur. Such areas include  

• The power supply 
• Temperature control 
• Stirring Speed control 
SYMPTONS  

The shaker does not work check. 

• The power supply from the main socket fuses 
• The connection wire. 
• The ON/OFF switch 
• The Time control – TIMER 

55 
 
 • The temperature control. 
 

SYMPTONS  

The shaker speed is incorrect check; 

• The established speed 
• The motor 
• The stirrer in the solution 
 

SYMPTONS  

The temperature is incorrect check; 

• The established temperature. 
• The temperature sensor. 
 

MAINTENANCE  

All shakers should be placed in a dusty free area on a solid table. When they are not in use, they 
should have a dust cover sheet (don’t use plastic dust cover). Where shakers are placed should 
be vibration free and should be cleaned up regularly. 

56 
 
 SHAKERS 

DIFFERENT TYPES OF SHAKERS  

• Shakers for Test tubes  . 
 

Shakers with horizontal motion (below) 

57 
 
  
   
58 
 
 WEEK 13 

FLAME PHOTOMETRY 

The basic principles of flame emission are well known. 

1. A sample in liquid form is presented to a nebuliser which delivers a quantity of the 
sample as a fine aerosol into a mixing chamber where it is combined and mixed with 
a fuel. 
2. The  mixture  of  aerosol  and  fuel  is  directed  to  a  burner  where  it  is  ignited  and 
allowed to burn. 
3. The  flame  is  positioned  in  a  simple  optical  chamber  where  the  emission  from  the 
flame  is  collected  and  directed  through  an  optical  filter  system  and  onto  a  light 
direction device. 
4. The  intensity  of  the  light  falling  on  the  detector  is  measured  and  displayed  on  a 
meter. 
5. Br  selection  of  a  suitable  filter  and  calibration  of  the  FES  with  known  standard 
solutions the instrument is calibrated and set up to read unknown samples. 
In it’s simplest form the layout of our FES is shown on the next page. 

Measurement of Detection Limit 

The measurement of the detection limit involves the preparation of standards of the required 
element to first determine the limit of linearity of that element with the FES set up in the most 
sensitive mode. 

One standard is then taken within the linear portion of the curve near the baseline and a series 
of readings taken for that standard (10 or more) and recorded. 

The standard deviation (SD) is then calculated for these readings from which the detection limit 
is calculated by:‐ 

1st  column    reading (in concentration) 

2nd column    difference of readings from mean result 

59 
 
3rd column    squares of differences (plus or minus) 

Sum the squares, divide by the number of readings minus 1 (n‐1) 

Calculated the square root – this is the SD 

  Detection limit + SD × 2 

 
SETTING UP AND RUNNING FES 

The  setting  up  and  running  of  FES  instruments  is  quite  straight  forward  and  the  suppliers  or 
manufacturers of the instrument will often include a comprehensive set of instructions. 

But in order to ensure that the FES is operating correctly and accurately for the particular type 
of  analysis  being  done  it  is  advisable  to  make  a  check  list  of  setting  up  and  shutting  down 

60 
 
 instructions which can be referred to each time the FES is used. This check will also ensure that 
the equipment is used correctly, safely and with suitable regard for the care of the instrument. 

The check list should also include instructions for routine maintenance (e.g. nebuliser cleaning) 
which is carried out on a regular basis. 

Detection limits 

The  determination  of  detection  limits  and  the  limit  of  linearity  for  a  particular  element  are 
useful exercises. They will show how well the instrument is performing and if it has been set up 
correctly for use. 

Factors  affecting  the  detection  limit  and  hence  the  sensitivity  will  include  the  degree  of  skill 
exercised by the operator as well as the particular element being determined. 

In the flame individual atoms absorb energy and depending on the amount of energy available 
and  the  element  in  question  a  degree  of  ionization  occurs.  The  hotter  the  flame  the  more 
ionization will take place. 

Some  elements  are  more  easily  ionized  than  others  and  if  we  consider  potassium  and 
magnesium is much more easily ionized than magnesium and is more sensitive in FES. 

As you might expect in AAS the reverse is true; magnesium is about 5 times more sensitive than 
potassium  in  the  absorption  mode  because  potassium  is  more  easily  ionized  and  has  fewer 
atoms in the ground state at any given flame temperature. 

Necessary services 

There are a number of requirements necessary to operates a FES 

1.  Fuel.  This  can  be  anything  from  Liquid  Petroleum  Gas  (LPG)  to  Acetylene  depending  on 
the type of instrument and the burner used. More common is bottled Butane or Propane. 

2.  Oxidant. Usually air, either bottled or more commonly supplied by a compressor. 

3.  Electricity. A steady mains supply is ideal but a portable generator can be used when the 
mains is unreliable. 

4.  Ventilation. This is a very important requirement. Products of combustion from the flame 
are usually toxic and an efficient ventilation (forced air) system is necessary. 

61 
 
The  potentials  danger  of  a  gas  explosion  is  always  present  and  great  care  must  always  be 
exercised when using instruments of this type. 

As with all instruments which have an integral electronic system it is worth mentioning that it is 
wise to keep humidity in the room where the FES is used down to a minimum. The installation 
of  a  de‐humidifier  is  good  investment  if  long  term,  trouble  free  operation  of  the  FES  is  to  be 
expected. 

The  air  compressor  will  need  routine  maintenance  and  the  manufacturers  will  often  supply  a 
timetable for regular attention. 

If the compressor is an oil‐free type the only work needed is to regularly drain the reservoir so 
that condensed water does not build up. This is usually a weekly job in all but the areas of high 
humility. 

The air input filter should also be regularly inspected and cleaned or replaced. 

If  the  compressor  does  use  oil  this  must  be  changed  at  the  stipulated  intervals  if  long  term 
trouble free running is to be expected. 

The  electronic  areas  do  not  require  regular  maintenance  and  the  only  way  to  protect 
components in any system is by correct usage and control of the environment to minimize dust, 
heat, humidity and vibration. 

LIMITATIONS 

In all emission techniques the sample is somehow excited by giving it enough energy to raise 
the  atom  of  the  element  we  are  interested  in  to  a  higher  energy  level.  As  the  sample  passes 
through  the  flame  the  energy  gained  is  released  from  the  atom  in  the  form  of  radiation  of 
specific wavelength for that element. 

Although  the  techniques  has  much  in  it’s  favour  because  of  the  simplicity  of  the  equipment, 
and the relative cost there are drawbacks which cannot be ignored. 

Firstly,  in  a  complex  sample,  as  most  soil  or  plant  extracts  are,  the  radiation  released  by  the 
sample can also contain radiation from other elements which may interfere with the element 
which we are interested in. 

It is possible to reduce or sometimes eliminate this unwanted radiation altogether by selection 
of a suitable interference filter, but it is often a source of error in FES. 

62 
 
In  more  sophisticated  FES  instruments  the  radiation  of  interest  is  selected  using  a 
monochromator and this helps to minimize spectral interference. 

But it is not possible to eliminate the problem altogether and in some cases it maybe necessary 
to perform chemical separation on the samples before an accurate determination can be done. 

Secondly, the number of elements which can easily be determined by this technique is limited 
and most laboratories limit their determinations to sodium, potassium and calcium. 

Preparation of Standard Solutions 

 As  in  all  analytical  work  the  preparation  of  accurate  standard  solutions  are  of  primary 
importance.  All  results  depend  on  correctly  prepared  standards  no  matter  how  sophisticated 
the  FES  is.  If  the  standards  are  correctly  prepared  the  unknown  extracts  will  be  incorrectly 
determined. 

The range of the element of interest to be determined using FES will depend on the type and 
temperature of the flame used. A typical working curve for FES will initially describes a straight 
line;  that  is  the  concentration  of  the  element  in  solution  will  be  directly  proportional  to  the 
emission from the flame and the output of the detector as read on the readout meter. 

Beyond the limit of linearity the curve will begin to bend and the emission output as seen on 
the meter will become progressively less linear. This effect is known as self absorption. 

More sophisticated FES, particularly those with computer generated curve correction programs, 
will be able to handle a certain amount of curvature but for practical reasons t is easier to set 
up the FES to measure in the linear portion of the curve. 

This  generally  means  that  there  will  be  a  good  deal  of  preparative  work  in  the  laboratory 
diluting the samples etc. before measurements can be made. 

Unlike  AAS  it  is  not  usually  possible  to  change  the  conditions  in  any  way  to  minimize  this 
problem and the working range of any element is not very flexible. 

The  generation  of  a  “fresh”  working  curve,  or  straight  line,  is  necessary  each  day.  Various 
conditions  will  change  the  slope  of  the  curve  as  small  differences  in  working  conditions  also 
change from day to day. 

63 
 
Routine Maintenance 

The level of routine maintenance required by the FES is quite limited and is largely confined to 
the combustion chamber area and the capital system. 

As a daily exercise after analysis has been completed the practice of aspirating a good quantity 
of distilled or demineralised water after use, with the flame still alight, will reduce the need for 
frequent complete dismantling of the nebuliser and mixing chamber for cleaning. 

Nevertheless, it is a good plan to establish a regular timetable for this work and ideally keep a 
record of the work done and the date. 

This will help to ensure trouble free running of the FES for long periods. There is no doubt that 
one of the main causes of trouble with FES and AAS centres around the combustion chamber 
and more often than not is the nebuliser. 

The optical system should cause far less trouble in the short term but an annual or twice annual 
cleaning programme is recommended. 

Great care must be taken when the optical system is cleaned and only mild solutions and non‐
abrasive materials can be used for all lenses and mirrors. 

It is better if the optical system can be cleaned in situ; any removal of lenses or mirrors from 
the instrument should only be done if it  is absolutely impossible to clean them where they are. 

Re‐alignment of even the simplest of optical systems is quite difficult and should be avoided if 
at all possible. 

The burner should be cleaned regularly to remove crystalline material and sooty deposits from 
the head, and again the use of abrasive materials for this task is not recommended even if the 
deposits are difficult remove. 

It  is  usually  sufficient  to  soak  the  burner  overnight  in  a  mild  detergent  for  all  but  the  most 
persistent deposits to be removed. 

Another  area  where  cleaning  may  be  necessary  is  the  point  at  which  the  fuel  line  enters  the 
mixing  chamber.  Qualities  of  fuels  vary  and  sometimes  substantial  deposits  build  up  and  will 
partially restrict the flow of fuel into the mixing chamber. 

   

64 
 
 WEEK 14 

BASIC PRINCIPLE OF SPECTROPHOTOMETERS 
1.  THE NATURE OF LIGHT 

  Colours are one means by which we identify materials around us.  “White” light, like 
sunlight is made up of a mixture of colours.  One way of finding out the different colours that 
make up white light is by passing a beam of the light through a glass prism.  The light is 
immediately dispersed into the seven colours of the rainbow – red, orange, yellow, green, blue, 
indigo and violet. 

                     

  The phenomeanon of colour is the result of selective absorption of different portions of 
the white light.  So the hibiscus flower is seen to be red because it absorbs all other colours of 
light but reflects the red portion of light. 

  Light that consists of more than one colour (e.g. sunlight) is referred to as a 
polychromatic light.  Light that consists of only one colour is called a monochromatic light. 

  Light can also be viewed from the electromagnetic point of view.  Here, light is 
considered to be a wavelike flow of electromagnetic energy, looking more like the waves of the 
sea.  Each wave has a characteristic length i.e. the distance from one crest to the next.  The 
wavelength is usually represented by the symbol  λ  (lambda).  The wavelength of visible light 
ranges from 360 – 700 nanometers (nm).  One nanometer is 1 x 10 ‐9m.  U.V. light has 
wazvelength between 200 – 360nm. 

65 
 
  The frequency ( ‫ﬠ‬ ) of any wave is the number of waves that pass a fixed per second, and 
the velocity (c) is the distance a wave travels per second. 

        λ   

  All electromagnetic waves travel at constant velocity which is the speed of light (3 x 
3
10 m/sec in vacuum).  There is a mathematical relationship between the frequency ( ‫ﬠ‬ ), the 
velocity (c) and the wavelength ( λ ) of any wave. 

C  =  λ ‫ﬠ‬ 

Light can also be considered as small particles of energy called photons.  Each photon carries a 
definite amount of energy.  This energy (E) is directly proportional to the frequency ( ‫ﬠ‬ ) .  E  ‐   2
h‫ﬠ‬  where h  =  planks constant.  The intensity of the light is proportional to the number of 
photons crossing a unit area per second. 

  Before any atom or molecule can absorb a photon of light, that photon must have the 
exact amount of energy required for electron transition in the atom/molecule.  If the energy of 
the photon is not sufficient, the photon will rebound. 

  With this basic understanding of the behaviour of light, we will now try to see the 
principles of spectrophotometry. 

2.  SPECTROPHOTOMETRY 

  The term spectrophotometry is used to describe the measurement of the amount of 
visible or U.V. light absorbed by a sample at a specified wavelength.  It is very essential to state 
the wavelength because samples absorb lights of different wavelengths differently.  The 
selection of appropriate wavelength of light to use is a very important step in colorimetric 
analysis.  During the practical sessions, we shall see how to determine the appropriate 
wavelength at which any colorimetric analysis can be done. 

66 
 
  The units used in the measurement of light in spectrophotometry are transmittance (T) 
or absorbance (A).  When a monochromatic light is passed through the sample compartment in 
the absence of a sample, all the light goes through the compartment.  In other words, 100% of 
the light (theoretically speaking) is transmitted through the sample compartment. 

  3

The term absorbance (A) is defined as the logarithm of I/Io   

Absorbance (A)     =  log (I/Io) 

WE can see the relationship between % transmission and absorbance. 

    A    =    2    ‐    log (%   T) 

  The Beer‐Lambert Law helps us to relate the absorbance of a sample to the molar 
concentration of the sample.  The law states that absorbance is directly proportional to the 
sample concentration (mol/l) and the path length of light through the sample (b) 

    A  =  abc 

Where 

  A  =  Absorbance 

  a  =  a constant = molar absorptivity 

  b  =  length of light path intercepted by sample 

  c  =  concentration of absorbing species 

67 
 
The linear relationship between ‘A’ and concentration of absorbing species (c) make 
absorbance the more useful measure than transmittance. 

3.  SPECTROPHOTOMETER 

(a)  Basic Components 

  Essentially, all spectrophotometers consist of four basic components.  These are 

i. The light source 
ii. The monochromator 
iii. The sample cell 
iv. The detector and readout device. 
 

 
The Light Source: 

  Usually a strong source of polychromatic light is used.  The most common source of light 
in the visible spectrum is the tungsten filament lamp.  This lamp is able to produce light within 
the spectrum 350 – 650nm.  For U.V. spectrophotometers, the deuterium lamp or hydrogen 
lamp is used. 

  The light beams are usually directed with the aid of optical mirrors to the 
monochromator. 

The Monochromator: 

  The monochromator is usually an assembly of some lenses and a light dispersing 
surface.  In very old instruments, the light dispersion is done with glass prism.  Newer 
instruments use diffraction gratings.  The diffraction grating is a reflective surface containing 
very many precision cut groves. 

68 
 
  The light from the source enters the monochromator through an entrance slit.  The light 
is then focused on the grating.  By adjusting the grating only light of selected wavelength comes 
out of through a narrow exit slit.  The wavelength control knob is usually connected to the 
grating. 

The Sample Cell: 

  This usually consist of a hallow compartment made to contain the sample tube or 
cuvette.  There are two common shapes of cuvettes.  The test‐tube type and the rectangular 
type. 

  Also in the sample cell, there may be devices for ensuring that light does not pass 
through the detector except when a cuvette is placed inside.  Selection of cuvettees is very 
important.  Cuvettes made of optical glass are good for use in the visible region but not for U.V. 
light as the glass absorvbs light in the U.V. region.  Quartz cuvettes are recommended for use in 
the U.V. region.  Avoid scratching the optical surfaces of the cuvette.  Always wipe them clean 
with soft tissues.  Be sure to position them correctly always in the sample cell.  Some sample 
cells have slots for up to 4 cuvettes at a time and another slot for the blank.  These are made to 
increase speed of determinations. 

The Detector and Readout device: 

  The light from the sample cell is usually directed to a photo sensitive device called the 
phototube.  The phototube generates electrical signals which is proportional to the intensity of 
light falling on it.  The electrical signal thus generated caused deflection of the needle in the 
electronic readout device or moves the pen of your chart recorder.  Usually there is some 
amplification of the electric signal between the phototube and the final readout device. 

(b)  Operation of Spectrophotometers 

  The best procedure for operating any instrument, spectrophotometers inclusive, is to 
follow the manufacturers instructions.  Attempts will only be made here to highlight some 
critical steps and necessary precautionary measures to ensure accurate, repeatable readings.  
The full procedure will be demonstrated during the practical sessions on spectrophotometers.  
The procedure for operation can be summarized as follows: 

69 
 
 5
 

Preambles:: 

  Ensure you have prepared your standard solutions of known concentration.  The voltage 
requirement and settings should be checked. 

Step 1.   Switch on the power supply and allow the instrument to warm up for at least  
    20minutes. 

Step 2.   If the wavelength for the procedure is already established, rotate the 
wavelength       selector to the appropriate position. 

Step 3.   With the sample cell empty and closed, adjust the amplifier control knob so that 
the     needle in the meter reads zero %T. 

Step 4.   Insert  the  cuvette  containing  the  blank  or  reference  solution  (usually  distilled 
Water in the sample cell.  Close the sample cell and adjust the transmittance to 
read 100%T.      Ensure that you retain one cuvette for the blank readings 
only.  Ensure that this setting    is  redone  every  time  you  change  the 
wavelength. 

Step 5.   Now we are ready to read the % transmittance of our standard solutions.  The  
    standard solutions are put in the sample cuvette and inserted into the sample 
cell.  The     sample cell is covered to avoid stray light during all readings.  The %T of 
the       standards can then be read off from the readout.  Most readouts are 
graduated in both     absorbance and %T scales so that the absorbance can be read 
straight way. 

Step 6.   Plot a calibration curve of absorbance Vs concentration 

       

70 
 
 
The absorbance readings from the unknown samples can be matched with their corresponding 
concentration from the calibration curves. 

  Finally, be sure to clean up the instrument and switch it off at the end of your analysis.  
The cuvettes should be thoroughly rinsed with appropriate solution, preferably water.  Never 
use sodium hydroxide or chromic acid to clean the cuvettes as these will etch the optical 
surfaces. 

4.  ATOMIC ABSORPTION/EMISSION SPECTROPHOTOMETERS 

  This class will not be complete without mention of other spectrophotometric analysis.   6
AAS’s are simply analytical devices which utilize the basic principles of atomic spectroscopy for 
qualitative determination of elements of interest.  To have a good knowledge of how these 
devices work, we need to understand some of the basic concepts of the atom. 

  The atom is made up of a positively charged nucleus surrounded by negatively charged 
electrons.  The electrons are normally in orbital positions in an orderly and predictable way.  
These orbitals may be seen as specific energy levels. 

  If sufficient external energy is applied to the atom, the energy could be absorbed  

   

by the atom causing an outer electron to be promoted to a less stable configuration.  This is 
called the “excited state” of the atom.  In order to maintain its stability, the electron is forced to 
return to its original state (ground state) by emitting some radiant energy equivalent in 
magnitude to the amount absorbed during excitation.  The wavelength ( λ ) of the emitted 
radiant energy has direct relationship with the electronic transition that occurred.  As every 
element has its own peculiar electronic configuration, the wavelength of light emitted is unique 
for each particular element. 

71 
 
 For large complex atoms, several electronic transitions are possible when the atom is 
excited.  As the atom returns to its ground star two or more different emissions may occur 
depending on the electronic transition that takes place.  The principles of atomic emission is 
what is utilized in flame photometry. 

         Excited States           λ 

                      ~ λ 

                       

Ground state        Ground state atom            Light Energy  7

Atom          atom 

  When light of the appropriate wavelength is made to impinge on a ground state atom, 
the atom may absorb the light and become excited.  This process is called atomic absorption 
and is utilized in atomic absorption spectrophotometry (AAS).  The relationship between flame 
photometry and atomic absorption spectrophotometry is evident.  In flame photometry the 
light energy emitted in the decay process is measured, where as in AAS, it is the light energy 
absorbed in the excitation process that is measured. 

4a.  FLAME PHOTOMETRY 

  In flame photometry, the sample, which must be in solution, is sprayed into a flame.  
This spraying is achieved with the help of a nebuliser.  The flame must be hot enough to 
vaporize, atomize and excited the atoms in sample.  The excited atoms of our element of 
interest then emit their characteristic light.  This light of specific wavelength is separated from 
all other emitted light with the help of a monochromator or optical filter.  The separated light 
now falls on the detector.  The detector is usually a photomultiplier tube that converts light 
energy to electrical signals.  The electrical signals thus generated are directed to a readout 
device.  The measurements can be directly related to the concentration of the element of 
interest by comparing with measured intensities of a series of standard solutions of that 
element.  The figure below shows a simple illustration of the basic components of the flame 
photometer. 

72 
 
 

  In soil and plant analytical laboratories the flame emission technique is commonly used 
for the determination of NA, K and Ca. 

4b.  ATOMIC ABSORPTION SPECTROPHOTOMETRY (AAS) 

  The AAS has three functional units.  These are (1)  the light source (2)  the sample cell 
and (3)  the detection and measuring unit.  We shall now consider these in greater detail. 

The Light Sources: 

  A light source which emits sharp atomic lines of the element to be determined is 
required.  The hollow cathode lamp is the most commonly used.  The figure below shows how 
the lamp is constructed.  The cathode of the lamp is a hollowed‐out cylinder of the metal whose 
spectrum is to be produced.  The anode and the cathode are sealed in a glass cylinder filled 
with an inert gas like neon or argon.  A window transparent to the radiation is fused to the end 
of the cylinder.  When electric current is applied to the lamp, the fill gas atoms are ionized 
positively.  These ions accelerate through the electrical field and collide with the negatively 
charge cathode.  This collision caused atoms to the metal ion to be dislodged from the cathode.  
This process is referred to as “sputtering”.  The dislodged metal atoms are excited to emission 
through impact with the full gas ions.  As the cathode of the hollow cathode lamp is made of 
high purity metal, the emission spectrum produced are also usually pure.  Sometimes, the 
cathode is made of metal alloys, resulting in multielement lamp.  Each lamp has an optimum 
operating current which is usually indicated on the lamp.  8

  The light source for absorption is usually modulated in order to achieve selective 
amplification of the lamp emission signal.  The modulation is achieved either mechanically by a 
rotating chapter or by electronic pulsation. 

  Apart from the hollow cathode lamp, the electrode‐less discharged lamp (EDL) may be 
used. 

73 
 
The Sample Cell 

  In the AAS, the sample call consists essentially of the premix burner system.  The sample 
cell is supposed to produce ground state atoms in the optical path of the instrument.  Apart 
from the premix burner, the graphite furnace, sampling boats and hydride generation are other 
sampling systems. 

  The diagram below illustrates the common premix burner system.  The sample solution 
is aspirated through the nebulizer and sprayed fuel gas and oxidant are introduced through the 
appropriate inlets.  Large sample droplets which are unable to flow around the spoiler fall to 
the bottom of the champer from where they flow our through the drain.  The nebulizer is 
usually adjustable to allow for various sample solution systems.  The burner heads are made of 
titanium which is extremely resistant to head and corrosion.  Different types and sizes of burner 
heads exists to meet flame requirements. 

Detection and Measurement Unit 

  This unit consists of the monochromator, the detector, some electronic components 
and the readout. 

  The monochromator is used to disperse the various wavelights of light which are 
emitted from the source so as to isolate the spectral line of interest.  In the monochromator 
you normally have one inlet for the radiation and an exit for the selected spectral line.  
Dispersion of the source light is done with the help of a diffraction grating.  The diffraction 
grating is a reflective surface with many fine parallel lines ruled very close together.  It deflects 
different wavelengths of light at different angles.  With the help of high quality optical mirrors, 
the spectral line of interest is directed through the exit slit to the detector or photomultiplier 
tube.  (See illustration). 

MONOCHROMATOR 

 
74 
 
  The function of the photomultiplier tube and the readout device are as treated in 
section 3a. 

  The details of the operations and troubleshooting of FF & AAS will be handled in the 
practical sessions. 

   

   

75 
 
 WEEK 15 

PROPER USE AND CALIBRATION OF UV‐VISIBLE 

SPECTROPHOTOMETER 

I  see    “proper  use  of  a  spectrophotometer  ”  as  deriving  maximum  benefits  in  using  a 

spectrophotometer.  This  you  cannot  achieve  without  meeting  obvious  conditions:  I  am 

therefore going to address the topic from two or three angles:  

1. The nature of equipment  

2. Materials and method and 

3. Operational tactics with a summary of maintenance checks. 

1. THE SPECTROPHOTOMETER: 

Chief  uses:    An  Spectrophotometer:  An  analytical  instrument  commonly  used  in  physico‐

chemical labs to make quantitative and quantitative analysis of specimen materials in the UV, 

visible spectral range, finds much scope for its service in such fields as medicine, clinical exams, 

Biochem,  petro‐chemical  industry  environmental  protection  and  quality  control.  Working 

conditions: 

1. Should  be  installed  in  a  dry  room  with  the  temp.  kept  between  5oC  and  35oC  and 

relative humidity under 85%. 

2.  While in use, instrument should be placed on a solid, smooth working table, free from 

shocks or vibrations 

3. Strong illumination and direct exposure to sunlight should be avoided. 

76 
 
 4. Keep far away from any high intensity magnetic field, electric field or electric equipment 

that produces high‐frequency waves  

5. No  airflow,  e.g.,  produced  by  an  electric  fan  should  be  directed  straight  towards  the 

instrument. 

6. Do  not  use  the  instrument  in  a  place  where  there  is  H2S,  fluorine  sulphite  or  other 

corrosive gases. 

2. SPECTROPHOTOMETRY 

  The  term  spectrophotometry  is  used  to  describe  the  measurement  of  the  amount  of 

visible or U.V. light absorbed by a sample at a specified wavelength. It is very essential to state 

the  wavelength  because  samples  absorb  lights  of  different  wavelengths  differently.  The 

selection  of  appropriate  wavelength  of  light  to  use  is  a  very  important  step  in  colorimetric 

analysis.  During  the  practical  sessions,  we  shall  see  how  to  determine  the  appropriate 

wavelength at which any colorimetric analysis can be done. 

  The units used in the measurement of light in spectrophotometry are transmittance (T) 

or absorbance (A). When a monochromatic light is passed through the sample compartment in 

the absence of a sample, all the light goes through the compartment. In other words, 100% of 

the light (theoretically speaking) is transmitted through the sample compartment. 

   

I o                                I 
Monochromatic 

77 
 
light 

                                                                  Colourless solution (e.g. H2O)   

  

                      Initial intensity Io = final intensity I   

    However, when there is a coloured sample in the sample compartment, some of the light is 

absorbed by the sample. This means that the intensity of the light after it has passed through 

the sample is reduced. If we call the initial intensity of the light Io, and the final intensity after 

passing through the sample I, then: 

Transmittance (T)  =               1        

  Io   

% T =   1  X  100O 

    Io 

I o                             I < Io 
Monochromatic 

light 

                                                              

                                                        Coloured sample    

78 
 
The term absorbance (A) is defined as the logarithm of I/ Io    

  The  Beer  –  Lambert  Law  helps  us  to  relate  the  absorbance  of  a  sample  to  the  molar 

concentration  of  the  sample.  The  law  states  that  absorbance  is  directly  proportional  to  the 

sample concentration (mol/I) and the path length of light through the sample (b). 

      A  = abc 

Where  

A = Absorbance 

a = a constant = molar absorptivity 

b = length of light path intercepted by sample 

c  = concentration of absorbing  species 

  The linear relationship between Absorbance ‘A’ and concentration of absorbing species 

(c) makes absorbance the more useful measure than transmittance. 

2. THE SPECTROPHOTOMETER   

a. Basic Components 

  Essentially, all spectrophotometers consist of four basic components. These are 

i. The light source 

ii. The monochromator 

79 
 
 iii. The sample Cell 

iv. The detector and readout device. 

Light source  monochromator     sample cell      detector & Readout 

PARTS OF THE SPECTROPHOTOMETER 
  The spectrophotometer can always be subdivided into two major sections: 

• The optical 

• The electronic part 

OPTICAL PART 
White light from the source bulb is concentrated: 

   

The concentrated light beam is diffracted: 

80 
 
   

                        White 

                                                    Red 

                                                   Green 

                                                    Violet 

The intensity of the monochromatic light is adjusted 

The light beam passes through the sample and its intensity is measured by the phototube: 

81 
 
  

THE ELECTRONIC PART 
The spectronic 20 has 

• Two power supplies 

• The light source 

• The photodetector 

• The signal amplifier 

• The meter readout 

  POWER   POWER
SUPPLY SUPPLY
 

 SOURCES PHOTO- AMPLI- METER

LAMP DETECTOR FIER
 

SINGLE‐BEAM VERSUS DOUBLE‐BEAM OPERATION 
 (SEE DIAGRAM BELOW) 

   

Two  basic  instrument  designs  are  employed  in  commercial  spectrophotometers.  One  design 

uses only a single beam, whereas the other provides a double beam.  

82 
 
Single‐Beam  Operation.  A  beam  of  radiation  from  the  source  enters  the  monochromator 

where it is dispersed by a prism or a grating. As the dispersing element is rotated, the various 

resolved bands of radiation re focused at the exit slit. The radiation then passes through the cell 

and on to a detector. The instrument is calibrated (0% and 100%T) and used by the methods 

just described.  

  The  single‐beam  method  requires  stable,  high  quality  components  in  the  source, 

detector, and amplifier for high precision measurements. The instrumental parameters cannot 

fluctuate between the time of 100% T calibration with the “blank” and the determination of the 

transmittance of the sample. Direct‐reading instruments using meters give immediate readout 

with  an  accuracy  of  +1  to  3%  in  transmittance.  The  null‐point  readout  design  is  considerably 

more accurate (+0.2% in transmittance), but more expensive. Unless high accuracy is required, 

the  meter  readout  instruments  are  quite  satisfactory.  Single‐beam  instruments  are  recording 

because of the necessity of calibration at each wavelength. 

Double‐Beam Operation. Double‐ beam instruments employ some type of beam splitter prior 

to the sample cells. One beam is directed through the “blank” cell (or reference cell) and the 

other beam through the sample cell. The two beams are then compared either continuously or 

alternately many times a second. Thus, in the double‐beam design, fluctuations in the source 

intensity, the detector response and amplifier gain are compensated for by observing the ratio 

signal between “blank” and sample. As might be expected, double‐beam instruments are more 

sophisticated  electronically  and  mechanically  than  the  single‐beam  designs  and  consequently 

are more expensive. 

83 
 
  In ultraviolet‐visible double‐beam spectrophotometers, the beam splitting occurs after 

the  monochromator;  front  surface  mirrors  and,  more  commonly,  rotating  sector  mirrors  are 

used.  The  rotating  sector  mirror  alternately  passes  and  reflects  the  beam  several  times  a 

second and thus splits the beam and also chops it. This chopped radiation is used as the input 

source  for  a‐c  amplifiers,  which  provide  amplification  stability.  An  electronic  null‐readout 

system is employed in this type of instrument. One of these designs is shown schematically in 

Figure 10‐12. The reference and sample beams alternately reach the detector at intervals which 

depend on the rotational frequencies of the choppers. The instrument records the ratio of the 

reference and sample signal. If the radiant powers of both of the beams are the same, the a‐c 

amplifier generates no output signal. If the radiant powers of the two beams are different, the 

imbalance signal activates a servomotor which drives a potentiometric recorder such that the 

imbalance  signal  is  “electronically  nulled”  by  the  recorder.  The  electrical  bridge  of  the 

potentiometric recorder is calibrated in terms of percent transmittance of the sample and thus 

the position of the bridge balance point is used to determine percent transmittance. 

                    Blank 

        Mirror              mirror    

             

                                     Sample 

  Detector   a‐c  Potentiom

84  etric 
  Mono‐ Amplifier  
Recorder  
chromator 
 

Lamp                       Chopper1   Chopper 2 

THE LIGHT SOURCE: 

  Usually a strong source of polychromatic light is used. The most common source of light 

in the visible spectrum is the tungsten filament lamp. This lamp is able to produce light within 

the  spectrum  350  –  650  nm.  For  U.V.  spectrophotometers,  the  deuterium  lamp  or  hydrogen 

lamp is used. 

The  light  beams  are  usually  directed  with  the  aid  of  optical  mirrors  to  the 

monochromator. 

THE MONOCHROMATOR: 

The  monochromator  is  usually  an  assembly  of  some  lenses  and  a  light‐dispersing 

surface.  In  very  old  instruments,  the  light  dispersion  is  done  with  glass  prism.  Newer 

instruments  use  diffraction  gratings.  The  diffraction  grating  is  a  reflective  surface  containing 

very many precision cut groves. 

The light from the source enters the monochromator through an entrance slit. The light 

is then focused on the grating. By adjusting the grating only light of selected wavelength comes 

out through a narrow exit slit. The wavelength control knob is usually connected to the grating. 

85 
 
 (see Diagram on page 5) 

The Sample Cell: 

  This  usually  consists  of  a  hollow  compartment  made  to  contain  the  sample  tube  or 

cuvette.  There  are  two  common  shapes  of  cuvettes.  The  test‐tube  type  and  the  rectangular 

type. 

  Also  in  the  sample  cell,  there  may  be  devices  for  ensuring  that  light  does  not  pass 

through  to  the  detector  except  when  a  cuvette  is  placed  inside.  Selection  of  cuvettes  is  very 

important. Cuvettes made of optical glass are good for use in the visible region but not for U.V. 

light as the glass absorbs light in the U.V. region. Quartz cuvettes are recommended for use in 

the U.V. region. Avoid scratching the optical surfaces of the cuvette. Always wipe them clean 

with  soft  tissues.  Be  sure  to  wipe  them  clean  with  soft  tissues.  Be  sure  to  position  them 

correctly always in the sample cell. Some sample cells have slots for up to 4 cuvettes at a time 

and another slot for the blank. These are made to increase speed of determinations. 

The Detector and Readout Device: 

  The light from the sample cell is usually directed to a photo sensitive device called the 

phototube. The phototube generates electrical signals, which is proportional to the intensity of 

light  falling  on  it.  The  electrical  signal  thus  generated  causes  deflection  of  the  needle  in  the 

electronic  readout  device  or  moves  the  pen  of  your  chart  recorder.  Usually  there  is  some 

amplification of the electric signal between the phototube and the final readout device.  

86 
 
2. Operation of Spectrophotometers 

The  best  procedure  for  operating  any  instrument,  spectrophotometers  inclusive,  is  to 

follow  the  manufacturers  instructions.  Attempts  will  only  be  made  here  to  highlight  some 

critical  steps  and  necessary  precautionary  measures  to  ensure  accurate,  repeatable  readings. 

The full procedure will be demonstrated during the practical sessions on spectrophotometers. 

The procedure for operation can be summarized as follows: 

Preambles: 

  Ensure you have prepared your standard solutions of known concentration. The voltage 

requirement and settings should be checked. 

Step 1.   Switch on the power supply and allow the instrument to warm up for at least 20 

minutes. 

Step 2.  If  the  wavelength  for  the  procedure  is  already  established,  rotate  the 

wavelength selector to the appropriate position. 

Step 3.   With  the  sample  cell  emptied  and  closed,  adjust  the  amplifier  control  knob  so 

that the needle in the meter reads zero % T 

Step 4.   Insert the cuvette containing the blank or reference solution (usually extraction 

solution) in the sample cell. Close the sample cell ad adjust the transmittance to 

read  100%  T.  Ensure  that  you  retain  one  cuvette  for  the  blank  readings  only. 

Ensure that this setting is redone every time you change the wavelength. 

87 
 
Step 5.   Now  we  are  ready  to  read  the  %  transmittance  of  our  standard  solutions.  The 

standard solutions are put in the same cuvette and inserted into the stray light 

during  all  readings.  The  %  T  of  the  standards  can  then  be  read  off  from  the 

readout. Most readouts are graduated in both absorbance can be read straight 

way. 

Step 6.   Plot a calibration curve of absorbance Vs concentration 

                             Abs 

1.0‐                                 x 

. 3 ‐                                 x 

. 6 ‐                          x 

. 4 ‐                 x    

. 2 ‐    x  

. 0 –                                                         CONC. 

   2  4  6  8  10 

                                             

88 
 
The absorbance readings from the unknown samples can be matched with their corresponding 
concentration from the calibration curves. 

 Finally, be sure to clean up the instrument and switch it off at the end of your analysis. 
The cuvettes should be thoroughly rinsed with appropriate solution, preferably water. Never 
use sodium hydroxide or chromic acid to clean the cuvettes as these will etch the optical 
surfaces.  

DESIRABLE AND UNDESIRABLE COLORIMETRIC PROPERTIES. 
Many  instances  arise  in  which  the  substance  being  analyzed  does  not  possess 

properties,  which  are  conducive  to  accurate  optical  measurement.  Such  a  substance  must  be 

converted,  by  reaction  with  some  suitable  chromogenic  reagent,  into  a  new  species  having 

desirable properties before a direct analysis can be made. The colour producing reaction may 

be illustrated by the equation: sample + chromogenic reagent          product  

Whether the sample is colored itself or requires addition of a color‐forming reagent, the 

solution intended for colorimetric measurement should ideally posses these five properties: 

1. Stability  for  sufficient  time  to  permit  accurate  measurement.  Instability,  which  usually 

results in fading, is sometimes the result of air oxidation, photochemical decomposition, 

effects of acidity, temperature, solvents, or other conditions. Sometimes, by modifying 

the conditions, greater stability can be obtained. 

2. Intense color (large extinction coefficient). This can be controlled by altering the solvent, 

in many cases, and by selecting a reagent of suitable sensitivity. 

3. Freedom from effects of minor variations in pH, temperature, or other conditions. 

4. Solubility of the colored product. 

89 
 
When a color‐ forming reagent is needed, the reagent selected should possess as many of the 

following properties as possible: 

1. Stability in solution. Reagents which deteriorate in few hours, ferment, or develop mold 

on storage usually have to be prepared frequently and a new calibration curve must be 

obtained for each new batch of reagent. 

2. Rapid color development. 

3. Stoichiometric reaction with the desired constituent. If the reaction goes to completion, 

the  exact  amount  of  reagent  added,  if  colorless,  is  not  critical,  and  an  excess  may  be 

used  to  allow  for  a  wide  range  of  concentrations  and  possible  interference  by  side 

reactions  which  consume  the  reagent.  The  colored  product  itself  obeys  Beer’s  Law. 

Sometimes,  when  unfavorable  equilibrium  conditions  exist,  a  large  excess  of  reagent 

may be added to shift the equilibrium to the desired direction. 

4. Transparency  (an  extinction  coefficient  of  zero)  in  the  spectral  region  involved  in  the 

measurement. 

5. Selectivity or specificity, so that the color is a measure of the desired constituent only. 

6. Freedom from interference by other constituents which might convert the reagents or 

desired  constituent  to  an  unreactive  form  or  complex  leading  to  incomplete  color 

development. 

7. Capacity  to  function  in  the  all‐round  best  solvent.  The  choice  of  solvent  in  which  to 

make a color measurement is sometimes an important consideration 

90 
 
   

91 
 
CALIBRATION OF A SPECTROPHOTOMETER 

  Essentially there are two types of calibration in vogue 

Definition 1: ‐ Calibration is determining the value of the deviations of an instrument from an 

applicable standard. This calibration is to be distinguished from the calibration of an instrument 

for each measurement. For this type the relevant calibration recess are: 

- Pre‐set values and tolerated deviations 

- Frequency of calibration  

- What calibration standards are used 

- Relation to national or international standards 

- Environmental conditions during calibration 

- Measures to minimize shifts in adjustment. 

This  type  of  calibration  becomes  necessary  (a)  when  a  new  instrument  ins  installed  (b)  after 

months of operation and after a long time of use (c) after it is moved from previous installation 

or  (d)  after  it  has  undergone  repairs,  ‐  as  its  performance  index  may  have  changed.  The 

instrument should be shacked for its wavelength accuracy. Each brand of instrument may have 

its  modality  for  calibration  of  wavelength  accuracy.  For  instance,  spectrophotometer  752N  is 

checked  for  its  wavelength  by  a  point‐to‐point  method  against  the  two  characteristic 

absorption  peaks  of  a  didymium  filter‐529nm  and  808nm.  In  case  the  point‐to‐point 

measurement shows a wavelength different from the peak wavelength of the didymium filter 

(maximum  permissible  error  is  +  2nm),  remove  the  wavelength  knob,  loosen  the  three 

positioning  screws  on  the  wavelength  dial,  adjust  the  dial  pointer,  to  the  characteristic 

absorption peak wavelength value, and tighten the screws. 

92 
 
 

DEFINITION 2  

  The  other  type  of  calibration  usually  is  an  operation  to  make  instrument  sufficiently 

accurate for the measurement it is intended for (this operation is also called standardization). It 

is  carried  out  batchwise  using  serial  dilution  of  stock  standard  solution  of  parameter  to  be 

determined  as  specified  in  the  various  analytical  methods.  The  essence  of  instrument 

calibration  is  to  assure  that  reliable  and  repeated  readings  are  obtained.  Relevant  calibration 

items are:  

- A series of standards of known concentration, in say, mg/litre or 100 cm3 

- A good graph sheet with which to plot a calibration curve. Suitable quantities of the 

constituent  are  taken  and  treated  in  the  same  way  as  the  sample  solution  for  the 

development  of  colour.  Percentage  transmission  (or  optical  density)  of  the  colored 

solution is measured at the optimum wavelength 

The  optical  density  (logIo/I1)  is  plotted  against  the  concentration;  a  straight  live  plot  is 

obtained if Beer’s law is obeyed. The curve may then be used for future determinations of the 

constituent  under  the  same  experimental  conditions.  When  the  optical  density  is  directly 

proportional to the concentration, only a few points are required to establish the live: when the 

relation  is  not  linear,  a  greater  member  of  points  will  generally  be  necessary.  The  standard 

curve  should  be  checked  at  intervals.  While  a  fresh  one  is  prepared  whenever  a  new  stock 

standard solution is prepared. 

93 
 
  

abs 

1.o                                                                   x 

0.8                                                     x 

0.6                                        x                 

0.4                           x                      

0.2               x 

  o            CONC. Mg/L 

                                                 

PERFORMANCE  CHECK  AND  MOST  COMMON  PROBLEMS  OF  A  TYPICAL 

SPECTROPHOTOMETER SPECTRONIC 20 

PROCEDURE  FUNCTIONAL   FAULTY  CORRECTIONS 

Turn on the  Fan operates.  Fan does not operate.  * Check mains supply. 
instrument.  * Check fan winding. 
* Check voltage across fan 
(11ov). 
* Replace fan. 

94 
 
 Source lamp lights.  Source lamp does not  * Check wiring to the lamp 
light.  and to the circuit board. 
* Check voltage across the 
lamp 
* Replace the source light. 
Remove eventual  The meter can be  The meter cannot be  * Check free movement of 
sample and set the  set to zero.  set to zero.  the occluder. 
meter to zero.  * Check the DC‐voltage 
  supply circuit. 
  * Check the zero set 
  potentiometer. 
* Check leaks of light 
  * Check the phototube. 
  0% transmittance is  * Check the dc voltage 
  0% transmittance  not stable  supply circuit. 
is stable  * Check power supply to 
  the phototube. 
* Check stability without 
  the phototube. 
* Check the phototube. 
Set wavelength to  100%T can be set.  100%T cannot be set.  * Check power supply 
circuit. 
340nm, set meter to  * Check phototube. 
* Check lamp voltage. 
100%T  * Check cleanliness of 
optical parts. 
   

  100% T is stable  100%T is not stable  * Change location of 

instrument. 
* Check stability of the 
voltage across the lamp. 
* Check phototube. 

Set wavelength to  100%T can be set  100%T cannot be set is  * Check phototube. 

600nm and 100%  and is stable.  not stable.    * Search on circuit board. 

95 
 
Check wavelength  Wavelength  Wavelength calibration  Adjust the wavelength 
accuracy.  accuracy is within  error is not constant  cam screw until the error 
the specifications.  over the whole range.  is constant. 
 

Wavelength calibration  Adjust the wavelength dial 
error is constant over  with respect to the 
the whole range.  wavelength cam. 
 

  Construction and Testing of a Single Stage Amplifier. 

MATERIALS:  Circuit board, 12V dc Power Supply, Oscilloscope, Signal Generator, Digital meter 

and Components.   

CIRCUIT DIAGRAM:  

96 
 
METHOD: 

1. Construct the circuit shown in figure 9 on a board. 

2. Apply 12V dc to the circuit with  the switch ,positions as shown in figure 9 

3. Measure the dc voltages at the collector, base and emitter  of the transistor TR1 

4. Record these voltages in your table of results. 

5. Calculate the expected values at the collector, base and emitter of TR1. 

6. Compare these calculated values with the experimental results. 

7. Apply a 10KHZ 30mV peak – peak signal to the input of the amplifier. 

8. Measure the output voltage (Vout) and calculate the voltage gain (Av) 

9. Adjust  the  signal  frequency  to  obtain  the  lower  and  upper  cut‐off  frequencies  (F1 

and F2). 

10. Calculate the bandwidth and record it in your table of results. 

11. Switch in the 10KΏ  resistor in  place of R3 and  comment on the results obtained 

12. Switch in the 180KΏ resistor  in place of R1 and comment on the results obtained 

13. Switch  C2  out  of  the  circuit  and  measure  the  output  voltage  and  gain  of  the 

amplifier. 

14. Switch back to the original values of R1 and R3 (82KΏ and 3.3 KΏ) and measure the 

output voltage and gain. 

15. Comment  on  the results obtained  in steps 13 and 14 

16. Connect the oscilloscope to the TR1 emitter and observe the wave form with C2 in 

and out of circuit. Comment on the results obtained. 

97