CÂMPUS DE ARAÇATUBA – FACULDADE DE ODONTOLOGIA

DISCIPLINA DE DENTÍSTICA

CLAREAMENTO DENTÁRIO COM LED VIOLETA:

EFEITOS NA ALTERAÇÃO CROMÁTICA, RESISTÊNCIA
DE UNIÃO, NANODUREZA DA CAMADA HÍBRIDA E
RESISTÊNCIA DO COLÁGENO

Araçatuba
2019

1
 Ana Carolina Souza Barboza

CLAREAMENTO DENTÁRIO COM LED VIOLETA:

EFEITOS NA ALTERAÇÃO CROMÁTICA, RESISTÊNCIA
DE UNIÃO, PROPRIEDADES MECÂNICAS DA CAMADA
HÍBRIDA E RESISTÊNCIA DO COLÁGENO

ARAÇATUBA - SP
2019

2
 Ana Carolina Souza Barboza

CLAREAMENTO DENTÁRIO COM LED VIOLETA:

EFEITOS NA ALTERAÇÃO CROMÁTICA, RESISTÊNCIA
DE UNIÃO, NANODUREZA DA CAMADA HÍBRIDA E
RESISTÊNCIA DO COLÁGENO

Dissertação apresentada à Faculdade de

Odontologia, Campus de Araçatuba, da
Universidade Estadual Paulista “Júlio de
Mesquita Filho”, como parte integrante
dos requisitos para obtenção do título de
MESTRE, pelo Programa de Pós-Graduação
em Odontologia, área de Concentração em
Dentística.

Orientador: Prof. Adj. André Luiz Fraga Briso

Co-orientador: Prof. Adj. Paulo Henrique dos Santos

ARAÇATUBA - SP
2019

3
 Catalogação na Publicação (CIP)

Diretoria Técnica de Biblioteca e Documentação – FOA / UNESP

Barboza, Ana Carolina Souza.

B239c Clareamento dentário com LED violeta : efeitos na
alteração cromática, resistência de união, nanodureza da
camada híbrida e resistência do colágeno / Ana Carolina
Souza Barboza. - Araçatuba, 2019
86 f. : il. ; tab.

Dissertação (Mestrado) – Universidade Estadual Paulista,

Faculdade de Odontologia de Araçatuba
Orientador: Prof. André Luis Fraga Briso
Coorientador: Prof. Paulo Henrique dos Santos

1. Clareamento dental 2. Dureza 3. Colágeno I. Título

Black D2
CDD 617.6

Claudio Hideo Matsumoto – CRB-8/5550

4
Dedicatória
5
À Deus,
Representa tudo em minha vida, sem o seu Espírito nada faz sentido!
O Senhor me deu própositos, alegrias e me mostrou que sua graça me basta.
Hoje eu consigo entender profundamente o que isso significa, tudo e todos
que eu amo podem passar, mas se a sua presença permanecer em mim, eu
serei feliz. Obrigada por ser o meu pai, e por me direcionar no caminho dos
meus sonhos. Eu te amo de todo o meu coração.

Aos meus pais,

Adeilson Cézar Barboza (in memorian) e Luciana Souza Barboza,
Obrigada por sonharem com meu futuro, nunca medirem esforços
para me ver crescer, serei eternamente grata pela confiança que depositaram
em mim, e por serem meus maiores exemplos de vida, de amor e fé.
Pai, hoje você não está aqui, mas pôde ver parte dos meus sonhos se
realizarem, e um dia, por causa de seus ensinamentos, sei que nos
reencontraremos juntos de Deus, nosso Senhor. A falta que me faz é muito
grande, e sempre vou imaginar como seria se você tivesse visto minha
formatura, meu casamento, meu mestrado, como seria se meus futuros filhos
convivessem com você ... Não tem um dia que eu não pense em você, mas você
me ensinou que a vida eterna é mais importante do que essa, e hoje consigo
continuar por também acreditar nisso. Me apego naquele verso que diz:
“Nem olhos viram, nem ouvidos ouviram, nem jamais penetrou o coração

6
humano, o que Deus tem preparado para aqueles que O amam.” 1 Coríntios
2.9 Eu te amo muito.
Minha mãe, obrigada por sempre estar comigo, agradeço por ser
minha melhor amiga e acreditar em mim, mais do que eu mesma. Você é
muito forte e uma pessoa que eu admiro demais, é firme, resiliente, e sempre
faz tudo por nós. Eu te amo muito. Agradeço a Deus por você ser tão boa, e
por termos um relacionamento tão próximo.

Ao meu irmão,
Murilo Cézar
Por sempre me ajudar, compartilhar os momentos bons e difíceis, e
por ser meu amigo, além de irmão. Você foi o maior presente de Deus em
minha vida, meu primeiro grande sonho realizado.

Ao meu marido,
Isak Haber
Obrigada por todo apoio e confiança, pela amizade e amor que me
proporcionou desde que nos conhecemos, agradeço por escolher viver e
sonhar comigo o nosso futuro. Eu te amo, e sou muito feliz por poder passar
essa vida com você.

Aos meus avós,

7
 João e Osmarina - Edson e Aparecida,
Obrigada por sempre fazerem de tudo para me ver feliz, por me
tratarem com tanto amor e dedicação, cada um com sua característica, mas
sempre fazendo o possível e o impossível para me agradar. Amo muito vocês.
Agradeço a Deus pela família que tenho.

Aos meus familiares,

Tios, tias, primos e amigos pela força, apoio e palavras de afirmação
que me deram e assim sempre me incentivaram. Em minha vida vocês tias
são como mãe, tios como pai, e primos como irmãos.

Ao meu padrasto,
Miguel Fernandes
Você chegou em nossa família para somar, obrigada pelo homem bom
que é para todos nós.

8
Agradecimentos Especiais
9
Ao meu orientador,
André Luiz Fraga Briso
Agradeço de coração pela oportunidade de fazer parte de sua equipe,
pela paciência em ensinar e por ser um orientador tão próximo e disponível
para ajudar. Eu o admiro muito por sua competência e inteligência, o senhor
é um grande professor, pesquisador, profissional e incentivador. Obrigada
por tudo!

Ao meu co-orientador,
Paulo Henrique dos Santos
Obrigada professor por sempre podermos contar com o senhor, pela
disponibilidade em acrescentar conhecimento em nossos projetos e nos
ajudar sempre que preciso.

À professora Ticiane Cestari Fagundes Tozzi,

Minha primeira orientadora, agradeço pela oportunidade de me
orientar durante a iniciação científica, pela sensibilidade que teve por mim e
minha família em momentos difíceis. Eu tenho um carinho muito especial
pela senhora, além de grande admiração pela profissional que é, obrigada
por tudo!

Aos meus amigos de pós graduação,

10
 Mariana Moda
Está comigo desde a graduação, por isso foi minha primeira grande
amiga na pós. Agradeço por sua amizade, apoio e ajuda, saiba que aprendi
muito com você, seu potencial é enorme e sei que onde você quiser chegar,
você chegará. Muito sucesso minha amiga.

Marjorie Gallinari
Basicamente a líder das brisetes, uma pessoa incrível e com grandes
talentos, que sempre tem algo a acrescentar seja nas pesquisar ou na vida
pessoal. Você é uma grande amiga, sentirei sua falta em Araçatuba, mas
torço para que você viva muito mais do que tudo que sonhou!

Morganna Almeida
Sempre muito parceira e disposta a ajudar a todos que precisam, não
só no departamento de pesquisa como na vida, você é muito especial e
querida por mim e por minha família. Te desejo todo sucesso e alegria nessa
nova fase que está iniciando em sua vida.

Ao eterno M1 (Caio Pavani, Isis Hoshino e Glívia Queiroz)

11
 Foi muito bom conviver e trabalhar com vocês, obrigada pelos casos de
pacientes, fotos e aulas que fizemos juntos, aprendi muito com vocês, tenho
muito carinho por todos e desejo muito sucesso.

Às novas Brisetes (Lara, Lívia e Sibele)

Amigas doces e especiais, vocês vieram pala alegrar ainda mais o
departamento e fortalecer a equipe. Gosto muito de vocês!

À querida IC Luana do Vale

Obrigada por sempre poder contar realmente com você, te admiro por
sua competência e responsabilidade, você foi de grande contribuição para a
realização dos projetos que participamos, sempre muito engajada em dar o
seu melhor e fazer tudo dar certo, mesmo que fosse necessário repetir os
testes quatro vezes. Você será recompensada, pela vida e por Deus. Gosto
muito de você, minha amiga.

Aos colegas Diego Mardegan, Fernanda Ramos e Fabrício Guarnieri

Obrigada pela amizade, convivência e disposição em ajudar, sempre
que precisarem podem contar comigo.

Aos doutorandos Henrico Strazzi e Bruna Reis

12
 Agradeço pela contribuição e ajuda que me ofereceram para a
execução do meu projeto. Gosto muito de vocês e desejo muito sucesso,
profissional e pessoal.

13
Agradecimentos
14
À Faculdade de Odontologia do Campus de Araçatuba - UNESP, ao diretor
Prof. Tit Wilson Roberto Poi, e ao vice-diretor Prof. Associado João Eduardo
Gomes Filho, pela gentileza e atenção com que nos recebem.

Ao coordenador do curso de Pós-Graduação em Odontologia, Prof. Associado

André Luiz Fraga Briso, que é também meu orientador, pelo seu empenho
para que possamos ter uma formação de pós-graduação de excelência.

À Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP), pela

concessão da bolsa de mestrado (processo nº 2017/07000-7) e por todo
suporte financeiro indispensável para realização deste trabalho.

Às funcionárias da Seção de Pós-Graduação, Cristiane Lui, Lilian Mada e

Valéria Zagato, por todo o suporte, paciência e atenção com que nos tratam.

Aos bibliotecários, por estarem sempre dispostos a nos ajudar. Obrigada por
todo o valioso apoio prestado.

A todos professores do curso de Pós-Graduação, pela oportunidade de

aprendizado constantes.

15
Aos alunos da turma de pós-graduação em Odontologia, pelas experiências
compartilhadas ao longo de todo o curso.

Aos professores da disciplina de Dentísitca,

Prof. Dr. André Luiz Fraga Briso, Prof. Dr. Renato Herman Sundfeld, Prof.
Dr. Ricardo Coelho Okida, Prof. Dr. Sílvio José Mauro, Profa. Dra. Ticiane
Cestari Fagundes. Muito obrigada por ter o privilégio de conviver e aprender
com cada um de vocês.

Ao funcionários do Departamento de Odontologia Restauradora, Nelci Vieira,

Peterson Moura, Jorge Trevelim e Carlos Suetake. Pela convivência durante
essa caminhada, por sempre estarem dispostos a nos ajudar, por fazer nossos
dias mais agradáveis. Muito obrigada!

Ao Departamento de Odontologia Restauradora, e todos que fazem parte

desse departamento, tornando um lugar agradável de se trabalhar e
conviver.

Aos Prof. Associado Alberto Carlos Botazzo Delbem, do programa de Pós-

graduação em Ciência Odontológica, pela autorização para que eu pudesse
utilizar instrumentais do laboratório de Odontopediatria. Muito obrigada!

16
Ao Dr. André Assmann, do Departamento de física da Universidade
Estadual de Ponta Grossa – UEPG, técnico responsável pelo equipamento
Nanoindenter, pelo auxílio na execução do teste de nanoindentação e
módulo de elasticidade da camada híbrida, e toda a atenção e suporte
prestados, de suma importância para a realização deste trabalho.

Ao Laboratório de Microscopia Eletrônica, da Faculdade de Engenharia de

Ilha Solteira – UNESP, pela disponibilidade na realização da microscopia
eletrônica de varredura, tão importante nesse trabalho.

À professora Cristina de Mattos Pimenta Vidal, da Universidade de Illinois,

Chicago, pelo auxílio durante a definição da metodologia empregada no teste
de resistência coesiva do colágeno. Obrigada pela atenção, reuniões via Skype
e disposição em nos ajudar.

Aos professores da banca de qualificação, representada pelo Profa. Adj. Maria

Cristina Rosefini e Profa. Ass. Dra. Ticiane Cestari Fagundes. Muito obrigada
por terem aceito meu convite e contribuído com o trabalho apresentado

Aos professores da banca examinadora, representada pelo professor Renato

Herman Sundfeld da Faculdade de Odontologia de Araçatuba (UNESP) e
Professora Larissa Sgarbosa Araújo Matuda da Faculdade de

17
Odontologia de Presidente Prudente (UNOESTE). Agradeço por terem aceito
o convite e pelas considerações enriquecedoras para o trabalho.

18
Epígrafe

19
“Porque sou eu que conheço os planos que tenho para vocês, diz o
Senhor, planos de fazê-los prosperar e não de lhes causar dano,
planos de dar-lhes um futuro cheio de esperança.”
Jeremias 29:11

20
Resumo

21
BARBOZA,A.C.S.Clareamento dentário com LED violeta: Efeitos na alteração cromática,
resistência de união, nanodureza da camada híbrida e resistência do colágeno
[Dissertação]. Faculdade de Odontologia de Araçatuba, Universidade Estadual Paulista “Júlio
de Mesquita Filho”; Araçatuba, 2019.

Resumo
O propósito deste projeto foi investigar a alteração cromática, resistência de união de

restaurações resinosas à dentina, bem como analisar nanodureza da camada híbrida e a

resistência coesiva do colágeno dentinário, após realização de diferentes técnicas

clareadoras. Para tanto, 75 dentes bovinos foram aleatoriamente distribuídos: Grupo

controle; Grupo LED e Grupo GEL. Em seguida, 45 dentes (n=15) foram destinados à

análise da alteração cromática, sendo posteriormente preparados, restaurados e

seccionados em palitos. Metade das amostras foram submetidas aos testes de resistência

de união e propriedades mecânicas da camada híbrida, o restante sofreu 10000 ciclos

térmicos antes das avaliações. Os 30 dentes remanescentes foram empregados na análise

da resistência coesiva do colágeno (n=10), que foi realizada imediatamente após a

realização dos tratamentos clareadores, bem como após a ação da colagenase. Os dados

obtidos da cor, resistência de união, propriedades mecânicas e resistência coesiva do

colágeno foram analisados quanto à normalidade utilizando o teste Shapiro-Wilk e

submetidos ao teste ANOVA dois fatores com medidas repetidas e pós teste de Tukey

(α=0,05). Houve alteração cromática em Grupo LED e GEL, com maiores alterações de

∆E, ∆L e ∆b em GEL. No teste de adesão somente a termociclagem interferiu nos

resultados, apresentando menores valores em todos os grupos. Valores de nanodureza e

módulo de elasticidade permaneceram inalterados após os tratamentos (p>0,05),

enquanto que no teste de resistência coesiva do colágeno, na análise imediata o Grupo

GEL apresentou diferença do controle, apresentando menores valores, sendo LED

semelhante à ambos. Avaliando os grupos após degradação enzimática, observa-se o

22
mesmo comportamento. Todos os grupos sofreram influência da degradação enzimática

(p<0,05), com menores valores de resistência após o desafio. Portanto, o emprego do

LED violeta apresentou alteração cromática, porém, em menor intensidade que o uso de

géis à base de peróxidos. Não houve alterações nas propriedades mecânicas e adesivas,

no entanto, houve menor resistência coesiva do colágeno após o tratamento com gel,

bem como, após degradação enzimática em todos os grupos avaliados.

Palavras – chave: Clareamento Dental, dureza, colágeno.

23
Abstract

24
BARBOZA, A.C.S. Dental bleaching with violet light: Effects on color change, bonding
strength, nanohardness of hybrid layer and collagen strength. [Dissertação]. Faculdade de
Odontologia de Araçatuba, Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”;
Araçatuba, 2019.

Abstract

The aim of this project was to investigate the chromatic alteration, bond strength of

dentin resin restorations, as well as to analyze the nanohardness of the hybrid layer and

the cohesive strength of dentin collagen, after performing different bleaching

techniques. For this, 75 bovine teeth were randomly distributed: Control group; LED

Group and GEL Group. Then, 45 teeth (n = 15) were destined to the analysis of the

color change, being subsequently prepared, restored and sectioned on sticks. Half of the

samples were submitted to the bond strength and mechanical properties tests of the

hybrid layer, the remaining 10000 thermal cycles before the evaluations. The remaining

30 teeth were used to analyze collagen cohesive resistance (n = 10), which was

performed immediately after bleaching treatments, as well as after collagenase action.

The data obtained on color, bond strength, mechanical properties and collagen cohesive

resistance were analyzed for normality using the Shapiro-Wilk test and submitted to the

two-way ANOVA test with repeated measures and Tukey test (α = 0.05). . There was

chromatic alteration in LED and GEL Group, with larger alterations of ∆E, ∆L and ∆b

in GEL. In the adhesion test only thermocycling interfered in the results, presenting

lower values in all groups. Nanohardness and modulus of elasticity values remained

unchanged after the treatments (p> 0.05), while in the collagen cohesive resistance test,

in the immediate analysis the GEL Group presented a control difference, presenting

25
lower values, being \LED similar to both. . Evaluating the groups after enzymatic

degradation, the same behavior is observed. All groups were influenced by enzymatic

degradation (p <0.05), with lower resistance values after challenge. Therefore, the use

of violet LED showed chromatic alteration, however, to a lesser extent than the use of

peroxide-based gels. There were no changes in mechanical and adhesive properties,

however, there was less cohesive collagen resistance after gel treatment, as well as after

enzymatic degradation in all groups evaluated. after enzymatic degradation in all groups

evaluated.

Keywords: Tooth bleaching, Hardness, Collagen.

26
27
 Listas e Sumário

Lista de Figuras

Figura 1. (A) Secção transversal do dente bovino na junção amelocementária para

separação da coroa e raiz (B) Coroa dentária. 43
Figura 2. Espécimes representativos dos grupos de estudo: (A) Grupo I- Controle; (B)
Grupo II- LED violeta; (C) Grupo III- Gel clareador. 45
Figura 3. (A e B) Espécime com sua respectiva moldeira individual. (C) Aparelho
espectrofotômetro Easyshade (Vita-Zahnfabrik, Alemanha), no modo de cores CIE
L*a*b*. 46

Figura 4. Sequência restauradora utilizada no preparo das amostras 48

Figura 5. (A) Espécime posicionado em base de acrílico perpendicular ao disco em
cortadeira metalográfica, Isomet 1000 (Buehler, Lake Bluff, IL, EUA); (B) Palitos
obtidos após secções transversais e horizontais 49
Figura 6. (A) Palito posicionado em stubs metálicos para serem submetidos à
microtração; (B) máquina de ensaios universal Odeme Microtensile OM 100 (Odeme
Dental Research, Luzerna, SC, Brasil). 50
Figura 7. (A) Matriz metálica utilizada para embutir as amostras em resina; (B) Bloco
de resina com palitos posicionados em seu interior; (C) Lixas para polimento, com
granulações 320, 600, 800 e 1200, respectivamente; (D) Soluções diamantandas de 6, 3,
1 e 0.5μm (Buehler, Lake Bluff, IL, EUA). 52

Figura 8. (A) Amostras em forma de ampulhetas sendo desmineralizadas na região

central com ácido fosfórico 37%. (B) Rx dos espécimes após desmineralização .54
Figura 9. (A) Fatia posicionada em stubs metálicos utilizando cola à base de
cianocrilato (Zapit, Dental Ventures of America, Corona, CA) (B) Fatia de dentina
tracionada em máquina de ensaio universal Odeme Microtensile OM 100 (Odeme
Dental Research, Luzerna, SC, Brasil). 54
Figura 10. Microscopia eletrônica de varredura do espécime do grupo GIII do teste
realizado em dentina, antes da ciclagem térmica. Observa-se que houve fratura coesiva
em dentina, podendo observar os túbulos dentinários (seta). Aumento de 1000x. 63

28
Figura 11. Microscopia eletrônica de varredura do espécime do grupo GI do teste
realizado em dentina, após ciclagem térmica. Observa-se que houve fratura adesiva,
podendo ser observada a presença de túbulos dentinários preenchidos por tags resinosos
(seta). Aumento de 1000x. 63

Figura 12. Imagem representativa da interface adesiva de um espécime do grupo GI,

destinado ao teste de nanodureza. Regiões numeradas representam o local de realização
da nanoindentação (camada híbrida), asterisco representa dentina, podendo observar os
túbulos dentinários, enquanto que a seta está indicando o material restaurador. Aumento
de 1000x. 65

Figura 13. Microscopia eletrônica de varredura do espécime de dentina

desmineralizado e clareado, antes da degradação enzimática com colagenase bacteriana,
sendo possível observar a malha de colágeno. Aumento de 2000x. 66

29
 Lista de Tabelas

Tabela 1. Média e desvio padrão da variação de cor (∆E), em diferentes tempos analisados. 59

Tabela 2. Média e desvio padrão dos valores de ∆L, em diferentes tempos analisados. 60

Tabela 3. Média e desvio padrão dos valores de ∆a*, ao longo do experimento. 60

Tabela 4. Média e desvio padrão dos valores de ∆b*, em diferentes tempos analisados. 61
Tabela 5. Valores de média e desvio padrão da resistência de união, através do teste de
microtração, antes e após termociclagem. 61

Tabela 6. Valores de média e desvio padrão da nanodureza, antes e após termociclagem. 64

Tabela 7. Valores de média e desvio padrão do módulo de elasticidade, antes e após
termociclagem. 64

Tabela 8. Valores de média e desvio padrão da resistência do colágeno dentinário, antes

e após degradação enzimática, utilizando colagenase bacteriana. 66

30
 Lista de Gráficos

Gráfico 1. Representação gráfica da incidência (%) dos tipos de fraturas observadas nos
grupos de tratamentos nos testes em dentina, antes da termociclagem. 62

Gráfico 2. Representação gráfica da incidência (%) dos tipos de fraturas observadas nos

grupos de tratamentos nos testes em dentina, após termociclagem. 62

31
 Lista de Fluxograma
Fluxograma 1. Distribuição dos dentes de acordo com os tratamentos e análises. 42

32
 Lista de abreviaturas, símbolos e siglas
ºC = grau Celsius
∆= delta
± = mais ou menos
% = percentagem
X = vezes
μL= microlitro
μm = micrômetro
μN= micronewton
A= área
ANOVA = Análise da variância
Ass = Assistente
CEP = Comitê de Ética e Pesquisa
Cm= centímetros
Dr = Doutor
Dra = Doutora
Er= módulo de elasticidade
EROs= espécies reativas de oxigênio
EUA = Estados Unidos da América
et al. = e colaboradores
F= carga
g= grama
H= dureza
L= Litro
Ltda = limitada
MEV = Microscopia Eletrônica de Varredura
mL= mililitros
mm = milímetro (unidade de medida equivalente a 10-3m)
mmol= milimol
MMP = metaloproteinase
Mn = MiliNewtons
min = minutos
MPa = Megapascal
MW= megawatt
n= número de amostras
N= newton
n° = número
nm = nanômetro
Prof. = Professor

33
Profa = Professora
RC= resistência do colágeno
RJ = Rio de Janeiro
Rpm = rotações por minuto
Ru= resistência de união
s = segundo
SP = São Paulo
UNESP = Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”

Sumário

Resumo 21
Abstract 24
1. Introdução 35
2. Materiais e Método 40
3. Análise Estatística 56
4. Resultados 58
5. Discussão 67
6. Conclusão 76
Referências Bibliográficas 82
Anexos 90

34
35
 1.Introdução

Introdução

A Odontologia moderna tem desenvolvido técnicas e materiais capazes de suprir

a necessidade que temos em proporcionar sorrisos perfeitos. É considerável o número

de pessoas que se submetem a diferentes tratamentos odontológicos, objetivando

melhorar a aparência do sorriso, deixando os dentes claros, alinhados e harmônicos.

Dentre os tratamentos mais procurados, destaca-se o clareamento dentário, sendo

considerado uma opção esteticamente eficiente, realizado em um tempo relativamente

curto e com baixo custo. 1

A técnica do clareamento dental consiste em remover pigmentações intrínsecas

localizadas, principalmente, no tecido dentinário, que devido à translucidez do esmalte

dentário compromete a estética do sorriso.2 Dentre as principais formas de se obter o

clareamento dentário, destaca-se a técnica caseira (at home) e a realizada em consultório

pelo profissional (in office).3; 4; 5

Independente da técnica, o mecanismo de ação dos produtos clareadores baseia-

se na permeação do peróxido de hidrogênio e de Espécies Reativas de Oxigênio (EROs)

através do esmalte e da dentina, seguido de suas reações com moléculas cromóforas

clivando-as, alterando suas configurações e propriedades ópticas, o que resulta na

percepção de um dente mais claro, uma vez que a reflexão de luz se torna maior que sua

36
absorção.5; 6; 7
Apesar do clareamento dentário ser considerado um tratamento bem

aceito por profissionais e pacientes, existem efeitos colaterais que devem ser

considerados, uma vez que o peróxido apresenta ação inespecífica, não se limitando às

moléculas cromóforas, atingindo também a polpa dentária, o que pode resultar em danos

teciduais.8; 9; 10; 11 Neste contexto, tem sido reportado que as técnicas clareadoras podem

estar associadas desde a ocorrência de hipersensibilidade transitória e leve, até uma

inflamação severa ou mesmo a necrose tecidual.12; 13; 14; 15

Mesmo assim, algumas terapias utilizadas preconizam a associação do uso de

géis à diferentes fontes luminosas, com o intuito de aumentar a eficácia do tratamento

clareador.8; 13 Essas associações são realizadas diante da hipótese de que parte da luz

incidente no produto clareador seja convertida em calor, intensificando a liberação de

EROs, o que promoveria maior eficácia da técnica.16; 17 No entanto, essas associações

podem potencializar em demasia ação do EROs e estimular uma exagerada difusão dos

produtos pelos tecidos, aumentando a intensidade dos efeitos colaterais. 8; 18

Além dos efeitos mencionados, os diferentes tratamentos clareadores também

influenciam negativamente a adesão de materiais resinosos na estrutura recém

clareada.19; 20
Vários autores defendem que dentes clareados somente podem receber

tratamento restaurador após um período de espera, que varia de 7 a 21 dias em razão da

presença de grande quantidade de oxigênio na estrutura dentária, o que comprometeria a

polimerização dos materiais resinosos, reduzindo o comprimento dos tags, bem como a

resistência de união ao esmalte e à dentina.21; 22; 23; 24

Metaloproteinases da dentina

(MMPs) produzem degradação do colágeno na interface dentina-resina, comprometendo

a eficácia das restaurações, essas MMPs são endopeptidases estruturais que contribuem

para a organização e mineralização da matriz da dentina. A relação entre a atividade

37
colagenolítica da MMP na dentina e a aplicação do agente clareador pode ser um fator

que contribui para redução da adesão na dentina clareadatoledano 2011 (50).

Desta forma, a possibilidade de clarear dentes com o emprego reduzido ou sem a

utilização de peróxidos significaria a quebra de um paradigma e seria revolucionária na

odontologia estética, pois os efeitos colaterais anteriormente apresentados poderiam ser

pronunciadamente reduzidos.

Neste contexto, uma nova tecnologia baseada na utilização do LED violeta tem

sido proposta. 25 Esta fonte portátil de luz assemelha-se aos equipamentos normalmente

empregados no consultório odontológico, no entanto, emite luz com comprimento de

onda de 405 a 410 nm, o que coincide com o pico de absorção dos pigmentos. Desta

forma, a estrutura pigmentada, que é altamente receptora da luz, poderia interagir

seletivamente com a irradiação violeta, promovendo a quebra das moléculas

cromóforas, caracterizando um clareamento por um processo físico. 25; 26

Em 2019, Gallinari e colaboradores 27 analisaram “in vitro” a alteração cromática

proporcionada pelo emprego do LED violeta. Os resultados demonstram que o emprego

do LED Violeta poderia ser vantajoso, principalmente quando associado ao uso de

peróxidos com concentrações inferiores a 17,5%. Embora ainda não seja possível

afirmar, este resultado pode significar um avanço técnico da terapia clareadora, uma vez

que resultados estéticos satisfatórios poderão ser obtidos com um menor estresse

oxidativo.

Apesar de altamente promissor, a utilização do LED violeta deve ser precedido

de muitos estudos. Por atuar diretamente nas moléculas pigmentantes, esta fonte poderia

também interferir em outras moléculas orgânicas presentes na estrutura dentária? A

38
eventual alteração do colágeno poderia influenciar na qualidade da adesão nos

procedimentos restauradores?

Sendo assim, o objetivo deste projeto foi investigar o efeito clareador e a

resistência de união de restaurações resinosas à dentina, após realização de diferentes

técnicas clareadoras (utilização do LED violeta e gel clareador 35%), bem como

analisar a nanodureza da camada híbrida e a resistência coesiva do colágeno dentinário

por meio de teste de microtração.

Portanto, as hipóteses nulas analisadas são:

1- A técnica clareadora não influenciaria na alteração cromática;

2- A técnica clareadora não influenciaria a resistência de união por meio do teste de

microtração, antes e após o desafio térmico;

3- A técnica clareadora não influenciaria a nanodureza e módulo de elasticidade da

camada híbrida, antes e após o desafio térmico;

4- A técnica clareadora não influenciaria a resistência coesiva do colágeno, antes e

após degradação enzimática;

39
40
 2.Material e Método
Material e Método

Previamente à realização da etapa experimental, o projeto foi submetido

à Comissão de Ética no Uso de Animais – CEUA para apreciação, com protocolo de

número: 00417/2017.

2.1 Delineamento Experimental

2.1.1 Variáveis de resposta: Resistência de união, nanodureza/módulo de

elasticidade da camada híbrida e resistência coesiva do colágeno dentinário.

Fatores em estudo: (1) Técnica Clareadora em três níveis (Controle, clareamento

com LED violeta e clareamento com gel de peróxido de hidrogênio a 35%; (2) Tempo

de análise em dois níveis (inicial e pós-degradação).

2.1.2 Variável de resposta: Eficácia Clareadora.

41
 Fatores em estudo: (1) Técnica Clareadora em três níveis (Controle, clareamento

com LED violeta e clareamento com gel de peróxido de hidrogênio a 35%; (2) Tempo

de análise em 3 níveis (inicial, 7 e 21 dias pós-clareamento).

A amostragem foi de 75 dentes bovinos, sendo 45 (n=15) destinados à análise

de alteração cromática, aos testes de resistência de união e nanodureza da camada

híbrida. Os 30 dentes restantes (n=10) foram destinados à análise da resistência coesiva

do colágeno. Metade das amostras foram destinadas à análise pós degradação, conforme

ilustrado a seguir:

Fluxograma 1. Distribuição dos dentes de acordo com os tratamentos e análises.

2.2 Obtenção dos dentes:

Foram selecionados incisivos bovinos recém-extraídos, que foram limpos com

curetas periodontais para remoção de todo tecido aderido. Foram excluídos dentes

42
apresentando trincas, fraturas e pigmentações extrínsecas, resultando em 125 dentes

hígidos, que foram submetidos à profilaxia com auxílio de pedra pomes e água. Na

sequência, utilizando discos diamantados dupla-face (KG Sorensen, Cotia, SP, Brasil),

montados em peça reta, foi realizada secção transversal do dente, separando a coroa da

raiz ao nível da junção amelocementária. Posteriormente, os tecidos pulpares foram

removidos e os dentes armazenados em solução de Timol a 0,1%, pH neutro, a 4°C, até

o momento de suas utilizações.

A B

Figura 1.(A) Secção transversal do dente bovino na junção amelocementária para

separação da coroa e raiz; (B) Coroa dentária

2.2.1 Seleção dos dentes segundo a sua luminosidade (valor de L)

Após a seleção inicial, os dentes foram submetidos à análise da luminosidade

(valor de L), utilizando o aparelho espectrofotométrico Easyshade (Vita-Zahnfabrik,

Alemanha), no modo de cores CIE L*a*b*, que permite a especificação de percepções

de cores em modelo tridimensionais. Obtidos os valores L, foi calculada a média de

toda a amostragem sendo selecionados inicialmente 75 dentes que apresentaram valores

de L mais próximos da média, respeitando a tolerância de 5%. 2

Objetivando a obtenção de uma superfície plana, as faces palatinas das coroas

dentárias foram incluídas em cilindros de resina acrílica (JET, Artigos Odontológicos

43
Clássico Ltda, Campo Limpo Paulista, SP, Brasil), mantendo as faces vestibulares

expostas e paralelas à base do cilindro, para que a superfície de esmalte fosse polida.

Posteriormente, os blocos de resina contendo as coroas dentárias foram posicionados

em politriz automática, Aropol E (Arotec Ind. e Com. Ltda, Cotia, São Paulo, Brasil),

que atuou com lixas de carbeto de silício de granulação 600 (Extec Corp., Enfield, CT,

EUA), sob refrigeração a água, até ocorrer a planificação da superfície do esmalte, para

a realização dos tratamentos. Então, os dentes foram divididos de acordo com os grupos

experimentais (n=15).

2.2.2 Grupos Experimentais

GI (controle) – As amostras destinadas a este grupo não foram submetidas ao

tratamento clareador, permanecendo armazenadas em câmara umidificadora a 37o C.

GII (LED violeta) – Os dentes (n=15) destinados a este grupo, foram

submetidos ao tratamento clareador empregando unicamente o LED Violeta

(Fotoclareador Bright Maxx Whitening, MMOptics Ltda., São Carlos, SP, Brasil), que

emite luz com comprimento de onda de 405-410 nm. A parte ativa do aparelho foi

acoplada ao suporte que acompanha o produto, mantendo a fonte luminosa à

aproximadamente 8 mm da superfície dentária e com ângulo próximo a 90°. Na

sequência o aparelho foi acionado, permanecendo ligado por 45 minutos por sessão,

com emissão direta de luz. Foram realizadas 3 sessões clareadoras, sendo uma a cada 7

dias.

GIII (Gel Clareador) - Os 15 dentes foram submetidos à técnica clareadora

convencional com gel clareador à base de peróxido de hidrogênio a 35% (Whiteness HP

Maxx - FGM Produtos Odontológicos, Joinville, SC, Brasil). Após a sua manipulação

(3 gotas de peróxido de hidrogênio 35%, para uma gota de agente espessante) seguindo

44
as recomendações de uso do fabricante, o produto foi aspirado por uma micropipeta de

líquidos viscosos (Microman M100E, Gilson, Middleton, WI) e 200 µL foram

depositados na superfície do esmalte, permanecendo em contato com o tecido dentário

por 15 minutos. Posteriormente, a superfície foi limpa com sugadores e papel

absorvente e duas novas aplicações foram efetuadas, totalizando 45 minutos de

exposição ao gel clareador. O procedimento foi repetido por 3 vezes com intervalo de 7

dias entre as sessões.

Figura 2. Espécimes representativos dos grupos de estudo: (A) Grupo I- Controle; (B)

Grupo II- LED violeta; (C) Grupo III- Gel clareador.

2.3 Preparo das amostras e Métodos de análise

2.3.1 Análise da cor

Com o intuito de padronizar o local da leitura de cor, foi confeccionada uma

moldeira individual com auxílio de placas de copolímero Etileno/Acetato de Vinila

(FGM Produtos Odontológicos, Joinville, Santa Catarina, Brasil) e plastificadora à

vácuo Plastvac P7 (Bio-Art Equipamentos Odontológicos Ltda., São Carlos, São Paulo,

Brasil). Após a sua confecção foi realizada uma perfuração na placa no local

correspondente à altura do terço médio da coroa do dente bovino, respeitando o

diâmetro da ponta do espectrofotômetro EasyShade.

45
 Foram realizadas quatro análises de cor de acordo com a realização dos

tratamentos:

T0 - análise inicial da cor dos dentes;

T1- Realizada imediatamente após a 1 sessão do clareamento com LED (GII) e 1 sessão

do clareamento convencional (GIII);

T2- Realizada após 7 dias, ou seja após 2 sessões do clareamento com LED (GII) e 2

sessões do clareamento convencional (GIII);

T3- Realizada após 14 dias, ou seja após 3 sessões do clareamento com LED (GII) e 3

sessões do clareamento convencional (GIII);

A B C

Figura 3. (A e B) Espécime com sua respectiva moldeira individual. (C)

Aparelho espectrofotômetro Easyshade (Vita-Zahnfabrik, Alemanha), no modo
de cores CIE L*a*b*.

2.4 Resistência de união, nanodureza da camada híbrida e envelhecimento

Após a análise da cor nos diferentes grupos experimentais, foram realizados

desgastes com lixa de granulação 600 até exposição de tecido dentinário. Na sequência,

foram realizados os procedimentos restauradores, objetivando a realização do teste de

resistência de união e nanodureza da camada híbrida.

46
 Objetivando a obtenção de uma superfície dentinária plana, as faces palatinas das

coroas dentárias foram incluídas em cilindros de resina acrílica (JET, Artigos

Odontológicos Clássico Ltda, Campo Limpo Paulista, SP, Brasil), mantendo as faces

vestibulares expostas e paralelas à base do cilindro, para que a superfície de esmalte fosse

removida. Destaca-se que uma canaleta foi confeccionada na base dos cilindros de resina

para posterior utilização durante o preparo dentário. Posteriormente, os blocos de resina

contendo as coroas dentárias foram posicionados em politriz automática, Aropol E (Arotec

Ind. e Com. Ltda, Cotia, São Paulo, Brasil), que atuou com lixas de óxido de alumínio de

granulação 600 (Extec Corp., Enfield, CT, EUA), sob refrigeração a água, até ocorrer a

exposição de tecido dentinário. Neste momento, objetivando a padronização da

profundidade do desgaste, a distância entre o centro do tecido dentinário exposto e a base da

resina acrílica foi aferida com auxílio de um paquímetro digital (Mitutoyo Corporation,

Tóquio, Japão), posicionado na canaleta anteriormente descrita. Na sequência foi realizado

um cuidadoso desgaste, monitorado seguidamente com o paquímetro, até alcançar a

profundidade de 1,0 mm além da união amelo-dentinária.

Logo após, foi realizada profilaxia dental seguida do condicionamento com

ácido fosfórico a 37% (DENTSPLY Indústria e comercio Ltda – Petropolis/RJ- Brasil)

por 15 segundos. A seguir, a superfície foi lavada com jato de ar/água, sendo

suavemente seca com jatos de ar, mantendo a umidade inerente ao tecido dentinário. O

sistema adesivo Prime & Bond 2.1 (DENTSPLY Indústria e comércio Ltda –

Petropolis/RJ- Brasil) foi aplicado conforme as recomendações do fabricante, ou seja,

duas camadas consecutivas de adesivo na região condicionada. Após

F 15 segundos, foi
aplicado jatos suaves de ar para evaporação do solvente e o material foi fotoativado por
D10 segundos utilizando o aparelho VALO LED (Ultradent, South Jordan – Utah, EUA),

que atuou com 1800 mW/cm2. Posteriormente foi fixada no centro da face vestibular da

coroa uma matriz de silicone de 8mm de diâmetro por 3 mm de largura, a 2 mm da

47
junção amelocementária das coroas, e a resina composta TPH Spectrum (DENTSPLY

Industria e comercio Ltda – Petropolis/RJ- Brasil) foi inserida em seu interior na forma

incremental, sendo fotoativada por 40 segundos. Por fim, a matriz plástica foi

cuidadosamente removida.

A B C

D E F

Figura 4. Sequência restauradora utilizada no preparo das amostras:

(A) Espécime planificado até nível de dentina para receber procedimento restaurador;
(B) Tratamento superficial com ácido fosfórico a 37% por 15 segundos.
(C) Aplicação do sistema adesivo Prime & Bond 2.1;
(D) Fotoativação do adesivo com fonte de luz halógena por 20 segundos;
(E) Posicionamento da matriz de silicone e resina composta inserida;
(F) Aspecto final do espécime restaurado.

48
 Na sequência, os dentes restaurados foram fixados em placas de acrílico com

cera pegajosa e posicionados em cortadeira metalográfica, Isomet 1000 (Buehler, Lake

Bluff, IL, EUA), para serem submetidos a 3 cortes seriados no sentido inciso-cervical, e

mesio-distal, perpendiculares à interface de união dente/resina, empregando velocidade

de 250 rpm, sob refrigeração a água, obtendo-se 8 palitos por dente.

Inicialmente, 4 palitos foram destinados aos testes imediatos e, o remanescente,

aos testes pós-ciclagem térmica. Dos 4 palitos destinados aos testes iniciais, três foram

utilizados no teste de resistência adesiva e 1 ao teste de nanodureza. Da mesma forma,

após ciclagem térmica, três palitos foram destinados ao teste de resistência adesiva e 1

para nanodureza da camada híbrida.

A B

Figura 5. (A) Espécime posicionado em base de acrílico perpendicular ao disco

em cortadeira metalográfica, Isomet 1000 (Buehler, Lake Bluff, IL, EUA); (B) Palitos

obtidos após secções transversais e horizontais.

2.4.1 Avaliação da resistência à microtração

As amostras foram posicionadas em um dispositivo de alumínio bipartido

(Figura 6), contendo uma trilha central para o posicionamento dos palitos. Essa trilha

em formato de V é produzida pelo mesmo fabricante da máquina de ensaio e garante

maior retenção do espécime para o teste. Para isto, as extremidades dos palitos foram

49
cuidadosamente fixadas no dispositivo, utilizando cola à base de cianocrilato (Zapit,

Dental Ventures of America, Corona, CA), de tal forma que a interface adesiva ficasse

sem qualquer material fixador. Foi adicionado sobre a cola uma gota de acelerador

específico (Zip Kicker, Washington, EUA), foi utilizada uma pinça para inserção do

produto. Posteriormente, os dispositivos contendo os palitos colados foram montados

em máquina de microtração Odeme Microtensile OM 100 (Odeme Dental Research,

Luzerna, SC, Brasil)28, que atuou com velocidade de 0.7mm/min para avaliação da

resistência de união (Mpa) (Figura 6B). Os valores de resistência de união foram

obtidos em Mpa por meio da fórmula:

Ru = (F/A). Onde RU = resistência de União, F = carga necessária para fraturar o

espécime (N), A = área da interface de união em mm.

A B

Figura 6. (A) Palito posicionado em stubs metálicos para serem submetidos à

microtração; (B) máquina de microtraçao Odeme Microtensile OM 100 (Odeme Dental

Research, Luzerna, SC, Brasil).

2.4.2 Avaliação do padrão de fratura

Após a ruptura, os palitos foram analisados em lupa estereoscópica (Carl Zeiss,

Oberkochen, Alemanha) com aumento de 40X, para identificar seu modo de fratura,

classificados em: A - fratura coesiva na dentina; B – fratura na interface adesiva; C -

50
fratura coesiva na resina; D - fratura mista, ou seja, fratura na interface adesiva com

envolvimento coesivo de dentina e/ou resina.

Palitos representativos dos padrões de fratura foram selecionados para

observação em microscopia eletrônica de varredura (MEV). Os espécimes selecionados

para análise em MEV foram posicionados em stubs, mantendo as áreas envolvidas nas

fraturas voltadas para cima. Em seguida, foram metalizados com ouro (Balzers SCD-

050 sputter coater, OC Oerlikon Corporation AG, Pfäffikon, Suíça) e levados à

microscopia eletrônica de varredura (EVO LS-15, Carl Zeiss, Oberkochen, Alemanha)

sob aumento de 1000x para a realização das imagens representativas.

2.4.3 Avaliação da dureza e módulo de elasticidade da camada híbrida

Os palitos destinados para estas análises foram individualmente embutidos em

resina acrílica incolor e após a polimerização, foram submetidos ao polimento

utilizando lixas de óxido de alumínio (Extec Corp., Enfield, CT, EUA) de granulação

320, 600, 800 e 1200, além das soluções diamantandas de 6, 3, 1 e 0.5μm (Buehler,

Lake Bluff, IL, EUA) utilizadas em feltro. Após o preparo das amostras, as mesmas

foram armazenadas por 3 dias até a realização do teste.

51
 A B

C D

Figura 7. (A) Matriz metálica utilizada para embutir as amostras em resina; (B) Bloco
de resina contendo palitos incluídos; (C) Lixas para polimento, com granulações 320,
600, 800 e 1200, respectivamente; (D) Soluções diamantandas de 6, 3, 1 e 0.5μm em
feltro (Buehler, Lake Bluff, IL, EUA).

A superfície preparada foi levada ao nanodurômetro Triboindenter (Hysitron

Inc, Minneapolis, MN) para verificação da nanodureza (H) e módulo de elasticidade

(Er), sob ação de carga de 1000μN, aplicada durante 5 segundos, seguida pela

manutenção de carga máxima por 2 segundos adicionais e remoção da carga durante 5

segundos (5-2-5). Tal protocolo permite que a deformação do material não interfira no

cálculo do módulo de elasticidade.29 A ponta indentadora utilizada foi a piramidal

Berkovich, sendo realizadas cinco indentações em cada amostra. Os valores de dureza

(H) e módulo de elasticidade (Er) foram calculados baseados na curva tensão-

deformação de acordo com a seguinte equação matemática 30:

Er = S √π / 2 √A

52
Onde S é a rigidez do segmento inicial de remoção da carga e A é a área de contato

projetada entre a ponta indentadora e a amostra no pico máximo de força.

H = Pmax / A

Onde Pmax é a carga máxima e A é a área de contato projetada como descrita no

cálculo do módulo de elasticidade.

2.4.5 Ciclagem térmica

Os palitos destinados aos testes tardios foram submetidos ao envelhecimento,

31
utilizando 10.000 ciclos térmicos, com banhos de água a temperaturas de 5° e 55°C,

com tempo de permanência de 30 segundos, em máquina de ciclagem térmica Modelo

521-4D (Nova Ética Ind., Com e Serv Ltda, Vargem Grande Paulista – SP, Brasil). Na

sequência foram avaliados quanto à resistência de união (3 palitos) e nanodureza da

camada híbrida (1 palito).

2.5 Resistência Coesiva do colágeno

Após a realização dos tratamentos clareadores e controle, os trinta dentes (n=10)

foram seccionados no sentido inciso-cervical, obtendo-se aproximadamente 4 fatias de

aproximadamente 1mm. Para tanto, foi utilizado um disco diamantado em baixa

velocidade (Isomet, Buehler Ltd., Lake Bluff, IL, EUA), sob refrigeração de água.

Posteriormente, as fatias foram submetidas a um cuidadoso desgaste da região central

com uma ponta diamantada #1014 (KG Sorensen, Cotia, São Paulo, Brasil), obtendo
32
forma de ampulheta com dimensões de 1x1 mm. Posteriormente, todas as amostras

tiveram a região central desmineralizadas em ácido fosfórico 37% durante 24 horas,

32; 33
sendo posteriormente lavados com água deionizada por 10 minutos. Duas fatias

provenientes de cada dente foram destinados à avaliação imediata, por meio do teste de

microtração.

53
 Figura 8. (A) Amostras em forma de ampulhetas sendo desmineralizadas na
região central com ácido fosfórico 37%. (B) Rx dos espécimes após
desmineralização.

2.5.1 Microtração do colágeno

As fatias foram fixadas a um dispositivo metálico, semelhante ao descrito no

teste de microtração, utilizando cola a base de cianoacrilato (Zapit, Dental Ventures of

America, Corona, CA), sendo posteriormente posicionados em máquina de microtração,

Odeme Microtensile OM 100 (Odeme Dental Research, Luzerna, SC, Brasil) a

velocidade de 0.7mm por minuto para avaliação da resistência coesiva do colágeno

(MPa), por meio da fórmula:

Ru = (F/A)

Onde RC = resistência do colágeno, F = carga necessária para ruptura do

espécime (N), A = área da seção em mm2.

A B

54
Figura 9 – (A) Fatia posicionada em stubs metálicos utilizando cola à base de
cianocrilato (Zapit, Dental Ventures of America, Corona, CA) (B) Fatia de dentina
tracionada em máquina de ensaio universal Odeme Microtensile OM 100 (Odeme
Dental Research, Luzerna, SC, Brasil).

2.5.2 Degradação enzimática (Colagenase)

As duas fatias restantes, já desmineralizadas, foram individualmente degradadas

com 2 ml de colagenase bacteriana derivada de Clostridium histolyticum (7,5 L / 1 mL)

em meio de incubação (50 mmol / L de HEPES, 1,5 mmol / L CaCl2, 2H2O, 150 mmol

/ L de NaCl, e 3 mmol / l de NaN3, pH 7,2) com agitação 120 rpm a 37◦C durante 24
33; 34
horas. Após o preparo, as amostras foram analisadas por meio do teste de

microtração e submetidas à avaliação do padrão de fratura, como descrito

anteriormente, porém, com aumento de 2000x.

55
3.Análise estatística

56
Análise Estatística

A análise estatística foi realizada através do software SigmaPlot 12.0. Os dados

foram analisados quanto à normalidade utilizando o teste Shapiro-Wilk. Os dados de cor

superficial, resistência de união, propriedades mecânicas e resistência à tração do

colágeno foram submetidos ao teste ANOVA dois fatores medidas repetidas e pós teste

de Tukey para múltipla comparação entre as médias (α=0,05).

57
4.Resultados

58
Resultados

- Alteração Cromática

A tabela 1 apresenta os valores de alteração cromática nos diferentes tempos de análise.

Observa-se que o grupo controle não apresentou alteração ao longo do tratamento (p>

0,05), enquanto que os tratamentos com LED e gel clareador proporcionaram alterações

cromáticas contínuas e crescentes até o fim do experimento. Ao comparar os diferentes

tratamentos, pode-se observar que em todos os tempos o grupo Gel apresentou os

maiores valores de ∆E, o LED apresentou valores intermediários, ambos diferindo

estatisticamente do Controle (p<0,05).

Tabela 1. Média e desvio padrão da variação de cor (∆E), em diferentes tempos

analisados.

∆E
T1 T2 T3
CONTROLE 1,53(1,54) Ca 2,47(1,42) Ca 2,0(2,29) Ca
LED 3,25(1,31) Bb 4,15(1,78) Bab 4,82(1,58) Ba
GEL 6,50(1,42) Ac 9,17(1,86) Ab 10,67(3,26) Aa

Letras distintas, maiúsculas entre linhas e minúsculas entre as colunas, indicam diferenças
estatisticamente significantes (p<0,05).

Em relação ao valores de ∆L, a tabela 2 mostra que o grupo controle permaneceu

inalterado durante todo o experimento. Os grupos LED e GEL aumentaram a

luminosidade gradualmente, mas somente em T3 diferiram de T1. A comparação entre

os grupos mostrou que em T1 todos os tratamentos proporcionaram resultados

semelhantes (p> 0,05). Em T2, os grupos que receberam algum tipo de tratamento

clareador (LED e GEL) apresentaram tendência de aumentar a luminosidade, no entanto

somente o tratamento com Gel diferiu estatisticamente do grupo controle (p< 0,05). Já

59
em T3, todos os grupos apresentaram diferença estatística, com GEL apresentando

maior alteração, seguido de LED e controle (p<0,05).

Tabela 2. Média e desvio padrão dos valores de ∆L, em diferentes tempos analisados.

∆L
T1 T2 T3
CONTROLE -0,12(0,94) Aa -0,26(2,46) Ba 0,13(1,03) Ca
LED 1,26(1,80) Ab 1,49(2,16) ABab 2,65(1,89) Ba
GEL 1,94(2,59) Ab 2,68(3,45) Ab 5,51(3,56) Aa

Letras distintas, maiúsculas entre linhas e minúsculas entre colunas, indicam diferenças estatisticamente
significantes (p<0,05).

Com relação aos valores de ∆a*, na tabela 3 pode-se observar que somente o

grupo GEL oscilou ao longo do tempo, apresentando em T3 o maior valor, sendo

estatisticamente diferente de T2 e T1 (p< 0,05). A comparação entre os grupos mostrou

que em T1 e em T2 o grupo LED gerou maiores valores de ∆a. Em T3, os grupos LED e

GEL apresentaram maiores valores, diferindo do controle p<0,05).

Tabela 3. Média e desvio padrão dos valores de ∆a*, ao longo do experimento.

∆A*
T1 T2 T3
CONTROLE -0,16(0,25) Ba -0,1(0,47) Ba 0,26(0,81) Ba
LED 1,67(1,13) Aa 2,22(1,11) Aa 1,94(1,36) Aa
GEL -0,73(0,81) Bc -0,14(1,06) Bb 2,08(1,86) Aa

Letras distintas, maiúsculas entre linhas e minúsculas entre colunas, indicam diferenças estatisticamente
significantes (p<0,05).

Com relação à análise dos valores de delta b*, observou-se que o grupo controle

apresentou menores valores em T1, diferindo estatisticamente em T2. Os grupos LED e

GEL apresentaram tendência de diminuição dos valores de acordo com o tempo

60
analisado, porém, somente o grupo GEL diferiu estatisticamente entre T1 e T2(p<0,05)

(Tabela 4). Avaliando os tratamentos propostos, observa-se que em todos os tempos,

apenas o grupo GEL apresentou diferença estatística com relação aos demais (p<0,05).

Tabela 4. Média e desvio padrão dos valores de ∆b*, em diferentes tempos analisados.

∆B*
T1 T2 T3
CONTROLE -0,6(1,35) Ab 1,34(2,14) Aa 0,27(1,10) Aab
LED 1,16(1,52) Aa 1,54(2,34) Aa 0,32(3,19) Aa
GEL -5,24(2,39) Ba -7,75(2,89) Bb -7,68(3,01) Bb

Letras distintas, maiúsculas entre linhas e minúsculas entre colunas, indicam diferenças estatisticamente
significantes (p<0,05).

- Resistência de união

A tabela 5 mostra os valores de resistência de união em superfície dentinária,

antes e após termociclagem. Comparando os diferentes grupos constata-se que todos

foram estatisticamente semelhantes, antes e após a termociclagem (p> 0,05). Também

foi observado que todos os grupos sofreram influência da termociclagem, apresentando

menores valores após o desafio (p< 0,05).

Tabela 5. Valores de média e desvio padrão da resistência de união, através do teste de

microtração, antes e após termociclagem.

CONTROLE LED GEL

ANTES 28,45 (4,26) Aa 28,47 (7,15) Aa 25,05 (4,76) Aa

TERMOCICLAGEM

APÓS 18,01 (7,25) Ba 17,95 (8,24) Ba 16,27 (7,31) Ba

TERMOCIGAEM
Letras distintas, maiúsculas entre linhas e minúsculas entre colunas, indicam diferenças estatisticamente
significantes (p<0,05).

61
 Padrão de fratura
O Gráfico 1 mostra a distribuição das falhas nos testes realizados em dentina,

antes e após termociclagem. Observa-se que o padrão de fratura mais frequente nos

grupos controle e LED foi adesiva (38,33% e 50%, respectivamente) (Figura 10). No

grupo GEL o padrão de fratura mais frequente foi mista (33%), antes da termociclagem.

Após desafio térmico, observa-se que em todos os grupos o padrão de fratura

mais frequente foi adesiva (Figura 11).

120%

100%

80%
Mista
60% Coesiva Resina
Adesiva
40%
Coesiva Esmalte
20%

0%
G G LED G GEL G G LED G GEL
Controle Controle

62
 Figura 10. Microscopia eletrônica de varredura do espécime do grupo GIII do
teste realizado em dentina, antes da ciclagem térmica. Observa-se que houve
fratura coesiva em dentina, podendo observar os túbulos dentinários (seta).
Aumento de 1000x.

Figura 11. Microscopia eletrônica de varredura do espécime do grupo GI do

teste realizado em dentina, após ciclagem térmica. Observa-se que houve fratura
adesiva, podendo ser observada a presença de túbulos dentinários preenchidos
por tags resinosos (seta). Aumento de 1000x.

- Nanodureza e Módulo de Elasticidade

Com relação aos valores de nanodureza da camada híbrida (Tabela 6) e módulo

de elasticidade (Tabela 7), pode-se observar nenhum tratamento resultou em diferença

estatística entre os grupos e entre os tempos, antes e após a termociclagem (p> 0,05).

Tabela 6. Valores de média e desvio padrão da nanodureza, antes e após

termociclagem.

63
 CONTROLE LED GEL

ANTES 0,28 ± 0,11 Aa 0,24 ± 0,07 Aa 0,21 ± 0,21 Aa

TERMOCICLAGEM

APÓS 0,30 ± 0,10 Aa 0,28 ± 0,12 Aa 0,26 ± 0,26 Aa

TERMOCICLAGEM
Letras distintas, maiúsculas entre linhas e minúsculas entre colunas, indicam diferenças estatisticamente
significantes (p<0,05).

Tabela 7. Valores de média e desvio padrão do módulo de elasticidade, antes e após

termociclagem.

CONTROLE LED GEL

ANTES 7,06 ± 1,20 Aa 7,51 ± 1,09 Aa 6,78 ± 0,81 Aa

TERMOCICLAGEM
APÓS 9,05 ± 1,25 Aa 7,59 ± 2,60 Aa 7,67 ± 1,53 Aa
TERMOCICLAGEM
Letras distintas, maiúsculas entre linhas e minúsculas entre colunas, indicam diferenças estatisticamente
significantes (p<0,05).

64
 Figura 12. Imagem representativa da interface adesiva de um espécime do
grupo GI, destinado ao teste de nanodureza. Regiões numeradas representam o
local de realização da nanoindentação (camada híbrida), asterisco representa
dentina, podendo observar os túbulos dentinários, enquanto que a seta está
indicando o material restaurador. Aumento de 1000x.

- Resistência coesiva do colágeno

Analisando a tabela 8 pode-se observar que, antes do desafio proposto, o grupo

GEL apresentou os menores valores de resistência, diferindo do controle. Já o grupo

LED apresentou resultados intermediários, sendo semelhante aos dois tratamentos (GEL

e controle) (p<0,05). Após a degradação enzimática, pode-se observar que os grupos

apresentaram o mesmo comportamento, caracterizado pela redução significativa nos

valores de resistência no grupo GEL. Na comparação antes e após a degradação, pode-

se observar que houve uma diminuição nos valores de resistência coesiva do colágeno

para todos os grupos (p< 0,05).

Tabela 8. Valores de média e desvio padrão da resistência do colágeno

dentinário, antes e após degradação enzimática, utilizando colagenase bacteriana.

CONTROLE LED GEL

ANTES 71,78 ± 0,29 Aa 66,44 ± 2,13 Aab 57,67 ± 1,99 Ab

DEGRADAÇÃO

APÓS 20,41 ± 7,15 Ba 11,94 ± 2,40 Bab 7,59 ± 1,74 Bb

DEGRADAÇÃO

Letras distintas, maiúsculas entre linhas e minúsculas entre colunas, indicam diferenças estatisticamente
significantes (p<0,05).

65
Figura 13. Microscopia eletrônica de varredura do espécime de dentina
desmineralizado e clareado, antes da degradação enzimática com colagenase
bacteriana, sendo possível observar a malha de colágeno exposta. Aumento de
2000x.

66
 5.Discussão
Discussão

Recentemente foi proposta uma nova forma de tratamento clareador,

baseada no emprego do LED violeta, que teoricamente dispensaria o uso de géis à base

de peróxidos. 25; 26 Esta nova possibilidade de tratamento, se efetiva, representaria um

avanço importante na Odontologia, uma vez que mudaria os protocolos baseados no

67
emprego de géis contendo altas concentrações de peróxido e seus respectivos efeitos
11; 12
colaterais.

Para a análise da eficácia clareadora promovida por esta nova tecnologia, bem

como pela técnica clareadora tradicional, empregou-se um espectofotômetro com

parâmetros CIE Lab, que tem sido considerado um método preciso e eficaz para a
36
determinação de cor de unidades dentárias. No presente estudo foram obtidos

resultados distintos entre as técnicas, que representaram diferentes níveis de alteração

cromática, negando a primeira hipótese nula deste trabalho.

Analisando o ∆E, que representa a variação de cor ao longo do tempo, observa-

se que apesar do gel proporcionar maior alteração cromática, o LED também apresentou

efetividade, já que ambos ultrapassaram a variação de 3,3, valor considerado

visualmente detectável. 27 Os resultados das análises de alteração cromática corroboram

com os observados nos casos clínicos apresentados até o presente momento utilizando

peróxidos de baixas concentrações ou até mesmo o uso isolado da luz. 26; 37; 38

Ao analisar as coordenadas separadamente, destaque deve ser dado ao aumento

significativo nos valores de L e diminuição nos valores de b* que foram observados

para o grupo tratado com gel. Vale ressaltar que o aumento de L indica um aumento no

brilho da amostra, enquanto que a redução de b* indica que houve uma diminuição em

tons amarelados, com predominância azulada. Estes resultados comprovam que houve

um efeito clareador, para tanto, os parâmetros (∆L e ∆b*) devem ser essencialmente

considerados.39 Sabe-se que a alteração cromática proveniente de géis à base de

peróxidos é resultado da permeação de Espécies Reativas de Oxigênio (EROs) no tecido

dentário, seguido de suas reações com moléculas cromóforas, promovendo clivagem e

alterando suas propriedades ópticas. Analisando a variação de cor ao longo do tempo,

pode-se observar que houve saturação do substrato promovida pelo gel após segunda
68
sessão, o que de certa forma difere dos dados anteriormente publicados, em que a

saturação cromática ocorreu após três sessões de clareamento. 9; 27

No estudo de Gallinari e colaboradores 27, o uso do LED apresentou maior efeito

clareador, esse efeito pode estar associado à pigmentação prévia das amostras com chá

preto, indicando maior alteração cromática devido à quebra das moléculas pigmentantes

provenientes do chá, bem como a necessidade de maior número de sessões clareadoras

para ocorrer a saturação da amostra, independente da técnica utilizada.

O grupo LED apresentou a mesma tendência de clareamento discutida

anteriormente, embora tenha mostrado menor intensidade se comparado ao grupo gel.

Analisando a coordenada L, observa-se que houve um aumento no brilho de superfície,

e apesar de não apresentar diferença estatística, houve diminuição dos valores da

coordenada b* ao longo do tempo. Provavelmente essas alterações ocorreram devido à

quebra de moléculas de pigmento, que são fotorreceptoras e, portanto, altamente

25
reativas à luz. Os comprimentos de onda do LED violeta (405-410 nm) coincidem

com o pico de absorção das moléculas de pigmento presentes na estrutura dentária, o

que pode resultar na quebra ou instabilidade molecular dos agentes cromógenos,

26
proporcionando um efeito clareador mediante um processo físico de fotólise. Por

outro lado, as características da luz também limita a sua ação nas camadas superficiais,

deixando de atuar nas camadas mais profundas do tecido dentinário, onde quantidade

substancial dos pigmentos se concentram. Estas características de uma fonte luminosa

com este comprimento de onda explicam a enorme diferença que existe na eficácia das

técnicas.

Com relação ao teste de adesão, após a conclusão dos tratamentos clareadores é

comum a necessidade de substituir restaurações estéticas pré-existentes, uma vez que a

alteração cromática produzida pela terapia clareadora ocorre de forma mais pronunciada
69
 20; 42
no tecido dentário, deixando as restaurações destacadas na cavidade bucal. No

entanto, a literatura mostra que o tratamento clareador à base de peróxidos proporciona

alterações no substrato, bem como saturam o tecido dental de oxigênio, o que

compromete a adesão de restaurações realizadas imediatamente após a conclusão do

tratamento clareador. 22; 23; 24; 35; 40

Na análise inicial observou-se que todos os grupos foram estatisticamente

semelhantes, demonstrando que nenhum dos tratamentos clareadores influenciou nos

valores de resistência adesiva imediatamente após a realização das restaurações. Alguns

autores relatam que o dano causado pelo agente clareador na resistência de união é mais

severo em esmalte do que em dentina, uma vez que a dentina bovina apresenta túbulos
41; 42;43
maiores, facilitando a interação com o sistema adesivo. Ainda neste contexto,

Nakamichi et al.44 afirmaram que a adesão obtida na dentina profunda seria mais

influenciada pelo tratamento clareador do que na proximidade da junção

amelodentinária. Assim, os resultados encontrados poderiam ser explicados pela

remoção do tecido (esmalte) que manteve contato direto com o produto clareador,

limitando-se à dentina superficial.

Tamura e colaboradores45 constataram que o tratamento clareador pode alterar o

conteúdo orgânico e as propriedades mecânicas da dentina, sendo o seu efeito na

adesão, mesmo que existente, secundário. Isso ocorre devido ação de enzimas

proteolíticas, como a pepsina, que promovem dissolução da matriz orgânica através de

processos bioquímicos, acentuando a degradação dentinária. Estes dados, de certa

forma, corroboram com os nossos achados, uma vez que houve redução na resistência

coesiva da dentina nos grupos submetidos aos protocolos clareadores, como ilustrado na

Figura 10.

70
 Os resultados obtidos após a termociclagem mostraram uma redução

significativa nos valores de resistência adesiva em todos os grupos analisados, negando

a segunda hipótese nula deste trabalho. Estudos realizados em dentina mostram que

além da diferença de expansão térmica e hidrólise na camada híbrida, pode ocorrer a

degradação do colágeno desnudo pela enzima metaloproteinase MMP, o que explica

essa redução dos valores após o desafio térmico. Sangwichit et al31, avaliaram a

resistência de união em dentina e a micromorfologia da interface após termociclagem, e

constataram a presença de nanoinfiltração e degradação da camada híbrida, resultando

em enfraquecimento desta interface. Este fenômeno explica a maior ocorrência de falhas

adesivas em todos os grupos o desafio térmico, como pode ser observado na Figura 11.

Com relação às variáveis de resposta, nanodureza e módulo de elasticidade, não

houve alterações após os tratamentos propostos, sendo aceita a terceira hipótese nula. A

nanodureza tem sido aplicada para avaliar a degradação superficial de materiais e o grau

de mineralização dos tecidos. Sendo assim, o teste de nanoindentação foi introduzido

como um método confiável para estudar as mudanças nas propriedades mecânicas das

superfícies analisadas.46

46
Abe e colaboradores avaliaram a nanodureza de diferentes substratos, após o

tratamento clareador comparando quatro diferentes géis, e constataram que não houve

diminuição nos valores de nanodureza das superfícies tratadas com três composições

desses géis, inclusive com o produto a base de peróxido de hidrogênio a 35%, utilizado

também no presente estudo. Ressalta-se, porém, que as amostras submetidas ao agente

clareador Pola Office, que apresenta pH consideravelmente mais ácido, apresentou

redução considerável nos valores da nanodureza da camada híbrida. Este fato indica que

esta propriedade pode estar diretamente ligada ao pH do produto utilizado no

procedimento clareador.

71
 Apesar de não haver diferença estatística após termociclagem foi observado uma

tendência de aumento da nanodureza em todos os grupos. Isso pode ser explicado pela

permanência de fibrilas de colágeno expostas na interface adesiva, que podem ser

reforçadas por cristais de apatita de uma fase amorfa por meio de uma reação Ca/P que

ocorrem em baixas temperaturas. 47

Neste contexto, Toledano e colaboradores48 também observaram novos

segmentos minerais na camada híbrida após termociclagem, com diminuição das

porosidades, conferindo maior integridade da região, devido a reação Ca/P, que ocorre

concomitantemente ao estresse térmico até gerar esse ajuste mineral.

Analisando os valores de resistência coesiva do colágeno, foram observadas

alterações na estrutura dentinária no grupo tratado com Gel, bem como redução nos

valores de resistência coesiva em todos os grupos após degradação enzimática, negando

a quarta hipótese nula do presente estudo.

Quando analisado o desempenho do grupo tratado com peróxido, constatou-se

redução significativa dos valores de resistência coesiva do colágeno, corroborando com

vários estudos prévios.48; 49

Este fato relaciona-se com a degradação do colágeno

mediada pelas MMP na dentina, que se intensifica quando os espécimes são

50
desmineralizados com ácido fosfórico, expondo fibrilas de colágeno, como pode ser

observado na Figura 13. Isso pode ocorrer pela desnaturação de proteínas dos agentes

oxidantes presentes nos géis clareadores, bem como alteração da estrutura química da

dentina por meio de um desequilíbrio nos níveis de Ca/P, já que as reações dos radicais

livres não são específicas e podem reagir com estruturas orgânicas. 49

Apesar do LED não diferir do controle, nota-se uma tendência de redução dos

valores de resistência no grupo que foi irradiado com LED Violeta, podendo promover

72
maior comprometimento das estruturas orgânicas se empregar posologias mais intensas.

Uma possível alteração na superfície pode ter sido consequência da irradiação direta do

LED violeta no substrato, com consequente aumento da temperatura na superfície

dental. Por ser uma tecnologia recente faltam dados na literatura sobre sua influência em

conteúdos orgânicos e inorgânicos, porém, dados ainda não publicados provenientes

deste grupo de pesquisa confirmam que o LED violeta promove um considerável

aquecimento na superfície dentária. Vale destacar que a irradiação ocorreu sobre

esmalte, e a superfície avaliada foi a dentina após desgaste do esmalte dentário, sendo

assim, o tecido com maiores alterações pode ter sido removido após o desgaste

realizado.

Nota-se que a degradação enzimática interferiu significativamente na integridade

e estabilidade do colágeno, esse efeito pode estar associado à liberação de enzimas

relevantes na degradação do colágeno, como a MMP-2 que tem maior atividade contra

colágenos fibrilares, e MMP-8 derivada de odontoblastos, que é a enzima com maior

51
atividade colagenolítica em dentina. Como consequência, ocorre a liberação do

aminoácido hidroxiprolina, já que as moléculas de colágeno são formadas por uma

33
sequência de aminoácidos compostos geralmente por prolina e hidroxiprolina.
51
Priyadarshini BM e colaboradores avaliaram que a liberação de hidroxiprolina pode

ser usada para representar a concentração de colágeno tecidual, de modo que uma

menor liberação de hidroxiprolina indica maior conteúdo de colágeno, bem como a

resistência do substrato, visto que esse composto está diretamente relacionado a

estrutura do colágeno.

Vale destacar que por se tratar de uma nova tecnologia e de um tema ainda não

explorado na literatura, este estudo foi realizado em triplicata, com diferentes lotes de

dentes, objetivando apresentar resultados confiáveis.

73
 Embora o presente estudo apresente limitações por se tratar de um estudo in

vitro, os resultados obtidos contribuem no entendimento de como a luz LED violeta

influencia na alteração cromática. No entanto, mais estudos são necessários para

comprovar tais resultados, uma vez que se trata de uma nova tecnologia.

74
 Conclusão

Conclusão

Portanto, podemos concluir que:

75
a) O emprego do Led violeta isoladamente promoveu significativa alteração

cromática, porém a utilização de peróxido de hidrogênio 35% apresentou

efeitos mais intensos;

b) Tratamento clareador utilizando LED violeta e peróxido de hidrogênio 35%

não influenciaram na adesão de materiais restauradores em dentina;

c) As propriedades mecânicas da camada híbrida não foram alteradas após

tratamento clareador utilizando LED violeta e peróxido de hidrogênio 35%;

d) Na avaliação da resistência coesiva do colágeno, foi observado alterações na

estrutura dentinária no grupo tratado com Gel, bem como a influência da

degradação enzimática em todos os grupos estudados.

76
 Referências Bibliográficas

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83
Anexos

84
ANEXO I – Certificado Comitê de ética Animal

85
 Anexo II – Normas da Revista (Operative Dentistry)

Link para acessar as normas: https://www.jopdent.com/authors/authors.php

86