UNIVERSITE Pr Joseph Ki ZERBO

EXPOSE DE BIOCHIMIE

UFR : SDS

Dr SOUDRE

TSS
1
THEME: Exploration biochimique des
fonctions rénale

DOUAMBA Catherine

KONE Faridatou

KOURAOGO Moussa

OUATTARA M. Haoua
GROUPE 4
OUEDRAOGO W. Jean

SYLLA Aicha

TIONON W. Calèb

TARNAGDA Aurélie
2
 PLAN
INTRODUCTION

I) RAPPEL STRUCTURAL ET METABOLIQUE

1- STRUCTURE
-strucuture de creatinine
-structure de l’urée
-structure de cystatine C
la

2- METABOLISME
• métabolisme de créatinine
• métabolisme de l’urée

3
II) PARAMETRE BIOCHIMIQUE A EXPLORER ET LES METHODES DE DOSAGE
1. PARAMETRE BIOCHIMIQUE A EXPLORER
• Créatinine
• Urée
• Cystatine C
• calcium et phosphate
• acide urique
2) METHODE DE DOSAGE
Dosage de la créatinine
Dosage de l’urée
Dosage d’albumine
III) INTERPRETATION DES RESULTATS

CONCUSION
4
 INTRTODUCTION
• Chaque jour, les reins filtrent près de 200L de plasma, excrètent
dans l’urine des toxines provenant du foie ainsi que divers déchets
métaboliques comme l’urée et des ions en excès.

• Ils jouent donc un rôle comparable à celui d’une usine d’épuration

filtrant les eaux usées d’une ville.

• Les reins accomplissent différentes fonctions pour maintenir

l’équilibre du milieu interne de l’organisme (homéotasie)
5
 I - Rappel structurale et métabolique

1- Structure
Créatinine
• formule: C4H7N3O

6
 l’urée
• formule: CO(NH2)2

7
 Cystatine c
• elle comporte 120 acides aminés
• poids moleculaire est de 13 kiloDaltons
• Une protéine non glycosylé

8
 2- Métabolisme

créatinine

• produit de dégration et déshydration de la créatine dans le

muscle

• sécretée dans le plasma puis éliminée dans les urines

9
 H2 O

dégration de la créatine phosphate en hydrolyse de la créatine en créatinine

créatine
10
Urée

• formée dans le foi

• issue de la combinaison entre l’ammoniac et des radicales carbonés

• Les réactions conduisant à la formation de l'urée constituent la voie

métabolique dite de l'uréogénèse

 exclusivement hépatique.

11
12
 Notion de clairance

• La clairance d'une substance éliminée par le rein se définit comme le volume de

plasma épuré totalement de cette substance dans l'unité de temps.

• Plus la clairance est élevée, plus le « pouvoir d'épuration » du rein pour la

substance considérée est grand.

• C = UV/P
C = clairance rénale
U = concentration urinaire de la substance en mmol/L.
P = concentration plasmatique de la substance en mmol/L.
V = débit urinaire en ml/s.
13
 Correction en fonction de la surface corporelle

• C’est la surface externe de la peau recouvrant le corps.

• La formule UV/P est valable pour le sujet normal dont la surface corporelle
est voisine de 1,73 M2 .

• Chez l'enfant, le nourrisson ou dans d'autres conditions où la surface

corporelle s'éloigne fort de la normale (obésité, petite taille) il est plus
correct de tenir compte de cette dernière.

• Elle peut être calculée comme suit

• SC (m²) = [4 x Poids(kg) +7] / [Poids(kg) + 90]

14
 II- Paramètre biochimique à explorer et leurs méthodes de dosage

1) Exploration de paramètre biochimique

 Créatinine

• Eliminée dans les urines par filtration glomérulaire,

• n’est ni réabsorbée ni secrétée!

• Indépendante de l’état d’hydratation et de l’alimentation,

• Constitue le marqueur de choix pour l’évaluation de la fonction rénale

• la clairance de créatinine mésure directement la valeur de la DFG( Débit de

Filtration Glomérulaire) 15
 urée

oC’est le composé azoté le plus abondants de l’urine humaine

oSon dosage constittué un élément de l’évaluation du fonctionnement

du rein.
oSon élimination se fait par le rein par filtration glomérulaire et sa
réabsorption tubulaire est partielle et passive

16
  cystanine C

• Un inhibiteur des cystéines protéinases

• éliminer exclusivement par filtration glomérulaire

• sa production est constante dans l'organisme,

• Elle a une concentration plasmatique dépendant directement du taux de

filtration glomérulaire.

• Son dosage permet d’évaluer le Débit Filtration Glomérulaire(DFG)

• utilisée comme marqueur complémentaire à la créatinine sérique pour

l’évaluation de la fonction rénale 17
Acide urique

• Produit de dégradation des acides nucléique;

• Produits de dégradation des purines;

• également de la digestion de certains aliments

• Excrétion essentiellement rénale grâce a la filtration rénale

18
 METHODE DE DOSAGE
Dosage de l’urée
Phase préanalytique

prélèvement sanguin: de préference être à jeun;

eviter les repas trop riches en protéines

prélèvement urinaire: urines de 24h

19
 Méthodes enzymatiques
 Dosage enzymatique à l'uréase.
Détermination UV
• Urée + H2O -----(1)----> 2 NH3 + CO2
(1) uréase
alpha-cetoglutarate + NH3 -—(2)———> glutamate + NADH -------->+
NAD+ H20
(2) glutamo déshydrogénase
• Dans les conditions opératoires choisies, la vitesse de disparition du
NADH est proportionnelle à la concentration d'urée dans l'échantillon.
La lecture effectuée à 340 nm. 20
Dosage enzymatique à l'uréase couplée à une réaction colorée

Dosage enzymatique à l'uréase. Appareils à électrode

Dosage enzymatique utilisant la chimie sur support solide

AUTRES METHODES

Méthode à l'hypobromite

Méthode à la diacétylmonoxime
21
 Dosage de la créatinine

Réaction de Jaffé (Coloration picrique)

 conditions préanalytique:

prélèvement sanguin:pas besoin d’être à jeun;

prélèvement urinaire: urine de 24h, éviter tout effort physique

 La créatinine au contact d'un picrate alcalin donne une coloration orange.

 La lecture est effectuée à 510-530 nm.

 la vitesse formation de la coloration est proportionnel à la concentration en

créatinine 22
23
 Méthodes enzymatiques
 Méthode enzymatique lecture UV
créatinine----(1)--->créatine + ATP------(2)----> créatine phosphate+
ADP+phosphoénolpuryvate
1)créatininase
2)créatinine kinase

La cinétique décroissante de disparition du NADH suivie à 340 nm est

proportionnelle à la quantité de créatinine initiale présente.
24
 Action d'une oxydase spécifique

 Spectroréflectométrie

25
 DOSAGE DES URATES

• Son dosage repose sur la destruction spécifique de l'acide urique

par l'uricase, selon la réaction suivante suivie du dosage du
peroxyde formé :

Acide urique + 2H2O —uricase——> allantoïne + CO2 + H2O2.

H2O2 + chromogène incolore-----------> H2O + chromogéne coloré

26
 Dosage de albumine

• 90% des protéines urinaires

• la détection de faibles quantités d'albumine (microalbuminurie)

peut être réalisée par l'emploi de bandelettes spécifiques associant
de manière originale chromatographie et immunoenzymologie.

27
 Dosage de la cystatine c
• La méthode consiste en un dosage immunoturbidimétrique optimisé par l’emploi de
particules (PETIA, de l’anglais particle-enhanced turbidimetric immunoassay).

• Le réactif est un anticorps polyclonal de lapin anti-cystatine C humaine adsorbé sur des
particules de latex.

• L’agglutination de la cystatine C provenant d’un échantillon sérique aux particules anti-

cystatine C engendre la formation d’immunocomplexes insolubles qui modifient
l’absorbance du mélange réactionnel de façon proportionnelle à la quantité de cystatine C
présente

• La quantification se fait en comparant l’absorbance de l’échantillon à celle d’un étalon de

référence dont la concentration d’antigène est connue.
28
29
 III- INTERPRETATION
Interpretation de l’urée urinaire
Variations physiologique

• De l’âge : diminue chez les nourrissons (- 30 %) et augmente chez les

adultes de plus de 55 ans (+ 20 %) ;

• Du sexe : il est plus bas de 5 % chez la femme ;

• De la grossesse : il diminue de 30 à 60 % jusqu’au terme ;

• D’un effort prolongé : il augmente de 20 %

• D’un régime hyperprotidique : il augmente de 50 à 80 % ;

• D’un jeûne prolongé : il diminue fortement 30

taux normal de l’urée urinaire
Taux d’urée élevé dans les
urines
en cas d’atteintes rénales
dans toutes les situations
d’hypercatabolisme
(dégradation
anormalement exagérée
des protéines de
l’organisme).
31
 Interpretation de la créatinurie

Variations physiologiques

● L'effort et l'alimentation riche en protéines entraînent une

augmentation de la créatininurie d'environ 20 % ;

● Le jeûne prolongé, en présence de corps cétoniques (substances

produites lors de la dégradation des graisses par le foie), entraîne une

surestimation des taux ;

● La créatininurie diminue avec l'âge.

32
Résultats normaux (créatinine urinaire, la norme)

33
 Taux de créatinine élevé dans les urines

Un taux de créatinine urinaire élevé peut s’observer :

● chez les personnes souffrant d’un diabète sucré ;

● chez les personnes souffrant d’une hypothyroïdie ;

34
 Taux de créatinine bas dans les urines

●Cas d’insuffisance rénale ;

● Cas d’états de choc toxi-infectieux ;

● cas d’obstruction du tractus urinaire (adénome prostatique, coliques

néphrétiques).

● chez les personnes souffrant de glomérulonéphrite (infection au niveau du

rein) aiguë ou chronique ;

● dans les cas de polykystose rénale (apparition de kystes au niveau des reins).

● chez les personnes souffrant d’hyperthyroïdie. 35

créatinine sanguine
Résultats normaux
Variations physiologiques

• La créatininémie augmente
avec l'âge.

Certains médicaments modifient

le taux de créatinine dans le
sang

36
 Clairance de la créatinine calculée:
• L’estimation du DFG (et donc de la fonction rénale) peux également être
calculée:
Formule de Cockcroft:

• cl créat(ml/mn) = K x Poids(kg) x [140-âge(ans)] / Créatininémie (µmol/l)

• K = 1,05 chez la femme
• K = 1,25 chez l'homme
Interprétation:
• 80 -120 ml/mn normal
• 60- 80 ml/mn IR légère
• 30 -60 ml/mn IR modérée
• < 30ml/mn IR sévère
37
Interpretation de l’acide urique

• Valeur Normal : 200 à 400 µmol/L

• Son taux s'élève chez le goutteux et aussi en cas

• d'insuffisance rénale avancée.

38
Interpretation de la microalbuminurie

• Elle est spécifique d’une atteinte glomérulaire chez le diabétique

• C’est un marqueur de glomérulopathie diabétique débutante ;

• sa mesure doit être effectuée une fois par an chez les patients
atteints de diabète de type 1 ou 2.

• VN: 30-300mg/24h

39
Interpretation de la cystatine C plasmatique

• Dosage par immunoturbidimétrie

• VN = 0,5 à 0,96 mg/L

• La concentration sérique en Cystatine C est fortement augmentée en

cas d'insuffisance rénale grave.

• Le coût de son analyse limite considérablement son utilisation en

routine.

40
 INSUFFISANCE RENALE

• dimunition plus ou moins importante des fonctions du rein

• Deux types:

-chronique: destruction progressive et irréversible des reins

-aiguë : survenant de façon brutale

 réversible, s’installant souvent après une hémmoragie, intoxication

 le recours à la dialyse est indispensable

41
 CONCLUSION
• Le rein intervenant dans de nombreuses régulations.

• L’exploration biochimique de la fonction rénale est un examen incontournable dans

le contexte de consultation courant, en préopératoire ou dans le cadre des
urgencies medico-chirurgical.

• Elle permet de completer les données Clinique, radiologique, scintigraphique, et

histologique pour établir le diagnostique.

42
 SOURCES
• Blibliothèque: biochimie métabolique

• Biochimie clinique
Biochimie clinique.pdf

• Exploration de la fonction rénale ppt EXPLORATION DE LA FONCTION

RENALE

• www.passorptsanté.net

• Doctissimo Santé

43