Hajna Kligler1
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LE MILIEU HAJNA-KLIGER
1. Intrt
Ce milieu didentification permet de mettre en vidence :
la fermentation du glucose avec ou sans production de gaz
la dgradation du lactose
la production de H2S
Il permet aussi la recherche de la -galactosidase en 2me jour.
2. Composition
Composant
Quantit (g/L)
Rle
15
Chlorure de sodium
Maintien de lisotonie
Thiosulfate de sodium
Citrate ferrique
Lactose
Glucose
Rouge de phnol
0,3
0,2
10
1
0,0024
Agar
11
pH
7,1
3. Principe
Mise en vidence de la dgradation du glucose et du lactose
Ce milieu contient deux glucides, le glucose et le lactose prsents des concentrations
diffrentes : [glucose] < [lactose]
le glucose est toujours utilis en premier par la bactrie, jusqu puisement car le
glucose inhibe les enzymes ncessaires lutilisation du lactose.
Il y a ventuellement production de gaz (H2 ou CO2) plus ou moins abondants formant des
bulles ou dcollant la glose.
sur la pente, en arobiose, le glucose est dgrad par voie oxydative. Lacidification
produite sera donc faible, dautant que la quantit de glucose prsente est faible.
Deux cas peuvent alors se prsenter :
o la bactrie ne peut pas dgrader le lactose : lorsque le glucose est puis,
elle dgrade alors les peptones entranant la formation de produits basiques.
Lalcalinisation est rvle par le virage de lindicateur color (le rouge de
phnol) sa teinte basique (rouge).
o la bactrie peut utiliser le lactose : aprs puisement du glucose, elle
dgrade le lactose, entranant ainsi la formation de produits acides en grande
quantit. Dans ce cas, lindicateur de pH reste sa teinte acide au niveau de la
pente.
Remarque : une bactrie glucose est forcment lactose -.
1re STL
4. Technique densemencement
Zone du tube
Caractre
recherch
Observation
Culot
jaune
Interprtation
Acidification du culot
Glucose
Culot
couleur
inchange
Pente
rouge
Pente
(arobiose)
Culot
(anarobiose)
Conclusion
Lactose
Pente
jaune
Le lactose a t utilis.
Acidification de la pente
La bactrie est dite lactose +
Production
de gaz
Culot ou
jonction
pente culot
Production
dH2S
Prsence de bulles
Production de gaz
Absence de bulle
Prsence dun
prcipit noir
La bactrie a rduit le
thiosulfate de sodium en
H2S qui a form un prcipit
noir avec le fer III
Absence de
prcipit noir