Anticuerpos Irregulares

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BANCO DE SANGRE

Y
HEMOTERAPIA

DETECCION DE ANTICUERPOS IRREGULARES.


CELULAS PANTALLA. CELULAS PANEL
Mg. Luis Calderon Cumpa
PRUEBA
GLOBULAR

PRUEBA SERICA
DISCREPANCIAS ABO

CUANDO LAS
DETERMINACIONES
DIRECTA E INVERSA NO SE
COMPLEMENTAN O SE
CONTRADICEN
PRUEBA
DE
COMPATIBILIDAD
TYPE
SCREEN
PRUEBAS
CRUZADAS
INCOMPATIBLES
PRUEBAS
CRUZADAS
INCOMPATIBLES

ERRORES
PREANALITICOS
PRUEBAS
CRUZADAS.
PRUEBAS
PRETRANSFUSIONALES
PRUEBAS
CRUZADAS.
PRUEBAS
PRETRANSFUSIONALES

PASA A ESTUDIO
INMUNOHEMATOLOGICO
Grupo ABO Globular-serico

Factor Rh
PRUEBAS
Identificacion de anticuerpos irregulares: celulas
PRE
pantalla-celulas panel-autocontrol TRANSFUSIONALES.
ESTUDIO INMUNO
HEMATOLOGICO
Coombs Directo

Fenotipos de importancia: Rh y K
COMPLEJIDAD DEL BANCO
POSIBLE
INCOMPATIBILIDAD
DE SANGRE
LA CAPACIDAD INVERSION DEL BANCO DE
RESOLUTIVA DEL
CASO SE PUEDE SANGRE
DEBER A: EXPERTICIA DEL PERSONAL
ESTUDIOS
INMUNOHEMATOLOGICOS

LAS PRUEBAS SE IRAN PROCESANDO DE


ACUERDO A LOS RESULTADOS.

• DETERMINACION DE GRUPO ABO/RH , GRUPO


INVERSA O SERICO.
• COOMBS INDIRECTO DETECCION DE
ANTICUERPOS IRREGULARES CON CELULAS I, II
Y III
• IDENTIFICACION DE ANTICUERPOS
IRREGULARES.
• COOMBS DIRECTO.
• DETERMINACION DEL FENOTIPO RH : C,C,E,E,
KELL
ESTUDIOS
INMUNOHEMATOLOGICOS
LAS PRUEBAS SE IRAN
PROCESANDO DE ACUERDO A LOS
RESULTADOS.

 DETERMINACION DEL FENOTIPO


EXTENDIDO: FYA, FYB, JKA, JKB, S, S, M,N,
KPA, KPB, P, LUA, LUB
 PRUEBAS CRUZADAS A 37º ( EN CASO DE
AUTOAGLUTINACION)
 .PRUEBAS CRUZADAS CON UNIDADES
FENOTIPADAS, ES DECIR, QUE NO
PRESENTEN EL ANTIGENO CONTRA EL
ANTICUERPO IDENTIFICADO O CON EL
FENOTIPO COMPATIBLE AL PACIENTE.
PASOS EN LA
RESOLUCION DE LA
PRUEBA CRUZADA
INCOMPATIBLE IN
VITRO
EL RECURSO HUMANO EN LA
RESOLUCION DE PROBLEMAS DE
INCOMPATIBILIDAD

* Destreza y experiencia del técnico.


* Recursos y facilidades del que dispone.
* Proceder en forma lógica y práctica.
* Disponer de un manual de procedimientos.
* Evaluación de la historia clínica.
* Resolución de las discrepancias.
CONFIRMAR PRESENCIA DE
DISCREPANCIAS SEROLOGICAS

* Estudio de los grupos ABO – Rh


durante la hospitalización
* Conservar resultados tiempo no menor de 5
años
- Discrepancias ABO-Rh
- Anticuerpos Irregulares
- Reacciones post-transfusionales
DESCARTAR ERRORES
HUMANOS
RELACIONADOS CON
FACTORES SEROLOGICOS

1.- Relacionada con el Antígeno


- Pérdida o debilidad
- Antígenos extras y/o bloqueo de epitopes
2.- Relacionada con el Anticuerpo
- Debilidad o supresión
- Anticuerpos no esperados. Artefactos
3.- Relacionada con los Reactivos
- Uso Incorrecto
- Vencidos o inactivados
- Contaminados
PROCEDIMIENTOS BASICOS EN LA
IDENTIFICACION DE RESULTADOS
INCOMPATIBLES
REVISIÓN DE LA HISTORIA CLÍNICA
DATOS CLÍNICOS

Antecedentes personales: edad, sexo, raza,


gestaciones, transplante de órganos sólidos,
intervenciones quirúrgicas etc.

Historia transfusional : número y fecha de


transfusiones ( de los 3 ultimos meses),incluyendo
globulina humana anti-D , productos plasmáticos,
expansores plasmáticos , concentrados
plaquetarios etc.
PROCEDIMIENTOS BASICOS EN LA
IDENTIFICACION DE RESULTADOS
INCOMPATIBLES

REVISIÓN DE LA HISTORIA CLÍNICA


DATOS CLÍNICOS

REGISTROS DEL BANCO DE SANGRE :


CONFIRMAR VARIACIONES EN LAS
DETERMINACIONES ABO Y RH ,
ANTICUERPOS IRREGULARES.ETC.
CONSERVAR VARIOS AÑOS LOS
REGISTROS EN CASOS DE
DISCREPANCIAS.
PROCEDIMIENTOS BASICOS EN LA
IDENTIFICACION DEL RESULTADO
ANORMAL

REVISIÓN DE LA HISTORIA CLINICA

ANTECEDENTES OBSTÉTRICOS : N°
DE EMBARAZOS, ABORTOS , ÓBITOS,
PARTOS, CESÁREAS, ICTERICIA
NEONATAL ETC. INDAGAR
ADMINISTRACIÓN PRE-NATAL O
POST-NATAL DE ANTI-D.
INGESTA DE MEDICAMENTOS EN
FORMA CRÓNICA, TCD POSITIVO,
INCLUSO AHÍ.
DIAGNÓSTICO CLÍNICO DEL
PACIENTE, QUE INCLUYE ESTUDIO
LA PRUEBA CRUZADA
INCOMPATIBLE

FRECUENCIA : 0.2 A 2%
IMPORTANCIA EN :
 PACIENTES CRÍTICOS
 REQUERIMIENTO UNIDADES
 SOLUCIÓN RÁPIDA
 DEPENDE DESTREZA Y EXPERIENCIA
EVALUACIÓN
 HISTORIA CLÍNICA MAS EL ESTUDIO
SEROLOGICO
POSIBILIDADES EN LOS
RESULTADOS DE LAS
PRUEBA
INCOMPATIBLES
DEMOSTRAR SI EL
ANTICUERPO CAUSANTE DE LA
INCOMPATIBILIDAD ES UN ALO
O AUTO - ANTICUERPO

1.- AUTOCONTROL NEGATIVO EN


PRESENCIA DE ALO -
ANTICUERPOS
(EXCEPCIÓN: TRANSFUSIÓN
RECIENTE DE GR
INCOMPATIBLES)

2.- Autocontrol positivo: Auto - Anticuerpos (TCD +)


FASE EN QUE SE PRODUJO LA
REACCION DE AGLUTINACION

1.- Fase I: Centrifugación Inmediata


Autocontrol y Pantallas I -II-III negativas
* Fuerte aglutinación o hemólisis:
Incompatibilidad ABO
* Receptor A2 o A2B con Anti-A1

2.- Fase II y III: Albúmina y/o AGH


Autocontrol Negativo y Pantallas I-II-III positivas:
* Alo - Anticuerpos caliente
PORCENTAJE DE DONANTES INCOMPATIBLES

1.- Pruebas cruzadas incompatibles, P I - II-III


positivas y AC negativo
* Alo - Anticuerpos contra Ags. de alta incidencia
* Múltiples anticuerpos
( Cruzar suero paciente con GR de hermanos o familiares )

2.- Un solo donante incompatible, P I – II- III y


AC
negativos
* Anticuerpo contra Ag. de baja incidencia
( Laboratorio de referencia )
*TCD + en el donante
( No usar la unidad )
INTENSIDAD DE LAS
REACCIONES
DE AGLUTINACION

1.- Reacciones de Aglutinación diferentes


* Mezcla de anticuerpos
* Efecto de dosis: Anti-M, Anti-C, Anti-E,
Anti-c, Anti-e, Anti-Jka, Anti-Jkb

2.- Reacciones de Aglutinación uniformes


* Uno o varios anticuerpos con alto título
PRUEBA CRUZADA INCOMPATIBLE
+ AC POSITIVO (TCD POSITIVO)
+ PANTALLA I – II-III POSITIVAS

AUTO - ANTICUERPO
REACCIONA CON CELULAS AUTOLOGAS Y EXTRAÑAS
RECEPTOR CON TCD POSITIVO
SIN ANTICUERPOS IRREGULARES
DEMOSTRABLES EN EL SUERO

1.- AHAI con insuficientes Auto-Anticuerpos circulantes

2.- Transfusión previa: Reacción hemolítica tardía

3.- Efecto de drogas


* Revisar historia clínica: Dosis y tiempo de tratamiento
* El eluato de los GR solo aglutina las células tratadas
con el antibiótico sensibilizante
PRUEBA CRUZADA Y PANTALLAS I – II-III
INCOMPATIBLES EN LAS TRES FASES,
PERO AC (TCD) NEGATIVO

1.- Mezcla de anticuerpos fríos y calientes

2.- Anticuerpo frío fijador de complemento


ANORMALIDADES EN EL
SUERO DEL PACIENTE
FENOMENO DE ROULEAUX

1.- Causas extrínsecas


* Administración de dextranos
* Expansores plasmáticos
* Material radiográfico de contraste

2.- Causas Intrínsecas


* Mieloma múltiple
* Macroglobulinemia
* Sarcoidosis
ANTICUERPOS CLINICAMENTE SIGNIFICATIVOS
Generalmente reaccionan a 37ºC
Causan, la mayoria de las veces, reaccion
transfusional hemolitica.
Los mas frecuentes encontrados son :
ABO, Rh, Kell, Kidd, Duffy y SsU

ANTICUERPOS SIN IMPORTANCIA CLINICA


Generalmente activos a temperaturas
abajo de 25ºC
No causan destrucción celular in vivo
Los mas frecuentes encontrados son :
17/05/2023
MN, P, Lewis, Lutheran y Wright
FASES DE LA PRUEBA DE COMPATIBILIDAD

D -E-c
a b
Le - Le

17/05/2023
REACTIVOS UTILIZADOS PARA LA
INVESTIGACION DE ANTICUERPOS

 Hematíes Genética  Rx de Estimulo o


Conocida Potenciadores
 Células Pantalla
 Albúmina bovina
 Células Panel
 LISS
 Células dirigidas
 Enzimas
 ANTIGLOBULINAS
 PEG
 Poli- Mono especifico
 Polibrene
DETECCION DE ANTICUERPOS
Alb Bov
I I I

II 37ºC
Salino Fase AGH
Existen varias
metodologías para la
determinación de posibles
anticuerpos irregulares:
El método de tubo de
ensayo convencional
(MTC) y
los métodos de
microcolumna de gel y
fase sólida más sensibles.
En el MTC los glóbulos rojos del
donante se enfrentan con el
suero del paciente. Se somete a
varias fases, se lavan con
solución salina para eliminar
todos los interferentes, y se
agrega AHG. Se centrifuga y se
observa la reacción que se
clasifica en una escala de 0 que
indica que no hay aglutinación a
4+ que indica aglutinación
sólida.
En el método de microcolumna
de gel, los RBC se filtran a
través de una matriz gelatinosa
mezclada con reactivos AHG.
El gel atrapa los glóbulos rojos
aglutinados con la posible
presencia de anticuerpos
irregulares y los glóbulos rojos
no aglutinados que pasan a
través de la columna.
Los ensayos en fase
sólida utilizan la
adherencia de los RBC
a un pozo como punto
final, lo que permite
interpretar los
resultados utilizando un
espectrofotómetro de
forma automatizada.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS :
CELULAS PANTALLA
NEGATIVO:
LA REACCION NEGATIVA EN TODAS LAS INDICA LA AUSENCIA DE
ANTICUERPOS IRREGULARES.
POSITIVO
LA REACCION POSITIVA EN 1, 2 o ALGUNA DE LAS 3 CELULAS Y UN
AUTOCONTROL NEGATIVO NOS HACE PENSAR EN LA PRESENCIA DE
ALOANTICUERPO
CUANDO HAY UNA REACCION POSITIVA EN TODAS LAS CELULAS PANTALLA
MAS EL AUTOCONTROL , PUEDE SER DEBIDO A UN AUTOANTICUERPO

17/05/2023
En que fase(s) ocurrió la reacción
Autocontrol Positivo / Negativo
Todas las celulas reaccionaron : igual/diferente, fase,
fuerza
Reaccion real, hemólisis
IDENTIFICACIÓN
DE Determinar su especificidad del Ac (s)
ANTICUERPOS Se diseña un protocolo: acorde aCelulas I-II o I, II y
III
Evaluar características : Rango térmico, reactivo en
uso, clase Ac, hemólisis, etc.
Conocer : antecedentes, Hcl, Dx.
Utilizar panel de células A, B y/o C.
ANÁLISIS DE RESULTADOS
DE CÉLULAS PANEL
PRIMERO
1. AUTOCONTROL POSITIVO: AUTOANTICUERPO
2. AUTOCONTROL NEGATIVO: ALOANTICUERPO

SEGUNDO
COMPORTAMIENTO TÉRMICO DEL ANTICUERPO
3. REACCIONA HASTA ALBÚMINA: ANTICUERPO FRIO
4. REACCIONA DESDE ALBÚMINA: ANTICUERPO CALIENTE

TERCERO
ESPECIFICIDAD DEL ANTICUERPO
46
EFECTO DE DOSIS

CÉLULA HOMOCIGOTA
REACCIONA MEJOR
Fy, Kidd, M, N, S, C, c, E, e

CÉLULA HETEROCIGOTA
REACCIONA MÁS DÉBIL
47
ANTIGRAMA - CELULAS PANEL
Rh Kell Duffy Jkidd Lewis P MNSs Lu Procedimiento

Genotipo

Albúmina
Donante
VIAL

T amb.
C.Inm.

37ºC
AGH
D C E c e F Cw K k Fy a Fy b JKa JKb Lea Leb P1 M N S s Lua
1 112343 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + + + 0 + 0 + 0
2 234345 R1R1 + + 0 0 + 0 0 + + 0 + + 0 + 0 0 + 0 + + +
3 224232 R2R2 + 0 + + 0 0 0 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 + 0
4 224455 Ro r + 0 0 + + + 0 0 + 0 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0
5 435356 r'r 0 + 0 + + + 0 0 + 0 + + + + 0 + + 0 + 0 0
6 454353 r''r 0 0 + + + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 + 0 0
7 435321 rr 0 0 0 + + + 0 + + 0 + + + + + + + + + + 0
8 123456 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + 0 + + + 0 0 + + 0 + 0
9 123451 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + + 0 + + 0 + + 0 + 0 0
10 123567 rr 0 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + +
48
Autocontrol
ANTIGRAMA - CELULAS PANEL
Rh Kell Duffy Jkidd Lewis P MNSs Lu Procedimiento

Genotipo

Albúmina
Donante
VIAL

T amb.
C.Inm.

AGH
37ºC
D C E c e F Cw K k Fy a Fy b JKa JKb Lea Leb P1 M N S s Lua
1 112343 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + + + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
2 234345 R1R1 + + 0 0 + 0 0 + + 0 + + 0 + 0 0 + 0 + + + + + + 0 0
3 224232 R2R2 + 0 + + 0 0 0 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
4 224455 Ro r + 0 0 + + + 0 0 + 0 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
5 435356 r'r 0 + 0 + + + 0 0 + 0 + + + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0
6 454353 r''r 0 0 + + + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0
7 435321 rr 0 0 0 + + + 0 + + 0 + + + + + + + + + + 0 + + + 0 0
8 123456 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + 0 + + + 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 0
9 123451 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + + 0 + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0
10 123567 rr 0 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + + + + + 0 0
49
Autocontrol 0 0 0 0 0
• SE USAN LAS CÉLULAS QUE NO HAN
REACCIONADO (LAS NEGATIVAS)

PROTOCOLO • SE DESCARTA TODAS AQUELLAS


PARA ESPECIFICIDADES CUYO ANTICUERPO DEBIÓ
REACCIONAR POR CONTENER EL ANTÍGENO
DETERMINAR
LA
• SE ANOTAN LAS PROBABLES ESPECIFICIDADES
ESPECIFICIDAD
DEL
• SI SON ALOANTICUERPOS EL PACIENTE NO DEBE
ANTICUERPO CONTENER LOS ANTÍGENOS
CORRESPONDIENTES

50
ALOANTICUERPO
SI SE DETECTA UN ALOANTICUERPO SE
PROCEDE A FENOTIPIFICAR EL GRUPO
SANGUÍNEO DEL CASO PROBLEMA, POR
EJEMPLO SI SE SOSPECHA DE UN ANTIKELL, AL
REALIZAR EL GRUPO KELL A LA PACIENTE ESTE
SERÁ NEGATIVO

AUTOANTICUERPO
SI SE DETECTA UN AUTOANTICUERPO SE
PROCEDE A FENOTIPIFICAR EL GRUPO
SANGUÍNEO DEL CASO PROBLEMA, POR
EJEMPLO SI SE SOSPECHA DE UN
AUTOANTIKELL, AL REALIZAR EL GRUPO KELL
A LA PACIENTE ESTE SERÁ POSITIVO
51
MÉTODOS PARA LA DETECCIÓN E
IDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS
IRREGULARES

Todos los protocolos de investigación de


anticuerpos deben iniciarse con el grupo sanguíneo
ABO y Rh D, la investigación de anticuerpos
irregulares libres en suero debe realizarse por lo
menos con dos técnicas, la primera siempre será la
salina llevada hasta la fase de Coombs, ya que en la
mayoría de los casos permite diferenciar la IgM en
su fase rápida, a 22 y 37 ºC de la IgG en su fase de
Coombs. Una segunda técnica puede ser un medio
hiperproteico como la albúmina, o enzimas como
bromelina o LISS, siendo esta última la más eficaz.
(Alcaraz-López J., 2005)
DETECCIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES
Existen diferentes elementos o factores que influyen en la reacción antígeno - anticuerpo y que
deben conocerse para utilizarlos adecuadamente en la búsqueda de anticuerpos irregulares:

CONDICIÓN MECANISMOS
Prueba de Coombs Permite evidenciar anticuerpos incompletos o sensibilizantes.
Soluciones de baja Reducen la barrera electrostática facilitando la reacción antígeno - anticuerpo.
fuerza
iónica:

Enzimas Potencializan la reacción antígeno - anticuerpo reduciendo la superficie de carga y


removiendo estructuras que interfieren en el acceso de los moléculas del
anticuerpo

Centrifugación Acelera la reacción antígeno - anticuerpo, por la fuerza que produce la misma.
Temperatura Afecta la reacción antígeno-anticuerpo de acuerdo con la temperatura óptima de reacción:
4 a 22 ºC para los fríos, 37 ºC para los calientes.
AUTOCONTROL
ES IMPORTANTE CONOCER CÓMO REACCIONA EL SUERO
PROBLEMA CON LOS ERITROCITOS AUTÓLOGOS. ESTO AYUDA A
DETERMINAR SI ESTÁN PRESENTES LOS ALOANTICUERPOS O
AUTOANTICUERPOS O AMBOS.

La presencia de hematíes del donante recubierto


de aloanticuerpos dará lugar a un autocontrol
positivo.
Esto puede interpretarse erróneamente debido a
la acción de autoanticuerpos.
HEMATÍES
REACTIVOS
EL SUERO
PROBLEMA DEBE
ANALIZARSE
SIGUIENDO LAS
TÉCNICAS
DESEADAS CON
PANEL DE 8 o MÁS
Para que sea eficaz un panel de hematíes reactivos MUESTRAS DE
HEMATÍES DEL
deben permitir identificar con confianza aquellos GRUPO “O” CON
aloanticuerpos clínicamente significativos que se FENOTIPO DE
GRUPO SANGUÍNEO
detectan con mayor frecuencia, como anti D, anti CONOCIDO.
E, anti K y anti Fyª.
TÉCNICAS ENZIMÁTICAS
Las técnicas enzimáticas ofrecen
ventajas para la identificación de
anticuerpos. Algunos anticuerpos,
como los anticuerpos Rh y ciertos
tipos de anti-Leª y anti JKª fijadores
de complemento potencian su
reactividad en las pruebas
enzimáticas. En cambio, el
tratamiento enzimático desnaturaliza
algunos antígenos de grupo sanguíneo,
especialmente M, N, S, Fyª y Fyb por
lo tanto la hemolisis y la pérdida a la
potenciación de la reactividad del
anticuerpo en las pruebas enzimáticas
son pistas útiles para la identificación
de anticuerpos.
ENZIMAS PROTEOLITICAS

No debe usarse con G Rojos Papaina : Papaya


TCD+
Ficina : Higo
Bromelina : Piña
Aumenta :Rh, JK, P, I, Le
Tripsina : Estomago de cerdo .
Destruye : Fy, MN, Xga
Neuroaminidasa.
Pronasa.
Acs fríos : aumenta actividad
hemolitico
TÉCNICAS DE POTENCIACIÓN
Cuando un patrón de reacciones débiles no refleje ninguna especificidad, o
cuando se sospeche la presencia de un anticuerpo, pero no puede
demostrarse puede ser útil emplear algunos de los siguientes métodos.
  Soluciones potenciadoras
Algunos anticuerpos de grupo sanguíneo
reaccionan mejor en pruebas que utilizan solución de LISS.
Reactivo con grupo tiol
Los reactivos con grupo tiol, como el ditiotreitol (DTT) y el 2-
mercaptoetanol (2- ME) escinden los puentes disulfuro dispuestos entre las
subunidades de las moléculas de IgM.
TITULACIÓN
El titulo de anticuerpo se determina normalmente utilizando
una serie de diluciones dobles del suero frente a muestras de
hematíes seleccionados los resultados son la expresión reciproca
de la dilución máxima del suero que produce una aglutinación
microscópica, el titulo da una idea aproximada de la cantidad
relativa de anticuerpo presente en el suero, o de la intensidad de
la expresión del antígeno en los hematíes.
Técnica en Albúmina
En esta técnica se procede de forma parecida a la
técnica en solución salina, omitiendo el paso de la
incubación a 22 °C.
Se agrega en cada tubo dos gotas de albumina.
algunos anticuerpos Rh reaccionan en solución
salina como aglutininas, la mayoría de ellos
reacciona mejor en sistemas antiglobulínicos ricos
en proteínas o enzimáticos. Aun los sueros que
contienen anti D potentes en solución salina suelen
ser reactivos en diluciones mayores en las pruebas
antiglobulínicos. Algunos inmunohematólogos
consideran que las técnicas enzimáticas son muy
útiles para detectar anticuerpos Rh débiles o en
desarrollo.
TÉCNICA DE GEL:

DEFINICION
 
Se determina la presencia o ausencia de los antígenos de los sistemas
de grupo sanguíneo: Rh, Kell, Duffy, Lewis, Luteran, MNS, etc. en la
superficie de los hematíes del paciente.
 
MATERIAL:
- Pipeta automática de 25 ul.
- Incubador para tarjetas de gel. Centrífuga para tarjetas de
gel.
 
MUESTRA: Suero o plasma
 
REACTIVOS:

Tarjeta Liss/Coombs microcolumnas I-II-III. Panel


eritrocitario (hematíes en suspensión al 0.8% Viales I-
II-III: hematíes sin tratar.
PROCEDIMIENTO
•  Rotular una tarjeta con los datos del paciente. Destapar los tres pocillos.
• Agregar 50 ul (1 gota) de cada vial de hematíes del panel eritrocitario, en el pocillo
correspondiente de la tarjeta.
• Añadir a cada pocillo 25 ul del suero o plasma de la sangre a investigar.
Incubar durante 15 minutos a 37 ºC.
Centrifugar durante 10 minutos.
Leer los resultados y anotarlos en la Hoja de Trabajo.
LECTURA DE RESULTADOS:
INTERPRETACIÓN
 
Presencia de hemólisis en el sobrenadante (falso negativo)
En caso de aparecer reacción positiva en alguno de los microtubos debe
anotarse la intensidad ( en cruces) en la casilla correspondiente de la
Hoja de Trabajo.
En caso de reacción positiva deben anotarse los resultados en las hojas
de fenotipos que acompañan al panel eritrocitario.
Anotar también el nombre, grupo sanguíneo del paciente y fecha.
Toda prueba positiva obliga a la realización de una Identificación de
anticuerpos.
OBSERVACIONES Y SUGERENCIAS
 
1.Dejar que todas las muestras y reactivos adquieran la temperatura ambiente antes de ser
usados.
2.Es aconsejable preincubar las tarjetas a 37ºC antes de ser usadas.
3.Homogenizar las suspensiones de hematíes antes de utilizarlas.
4.Dispensar el suero con la pipeta-dispensadora apoyando la punta en la pared del pocillo
para añadir la muestra.
5.Para la obtención del suero el coagulo debe estar bién centrifugado, La muestra de plasma o
suero debe ser reciente.
6.Si se conserva en nevera a 2-8ºC puede demorarse hasta 48 horas. Si va a transcurrir más
tiempo entre la extracción de la muestra y la realización del escrutinio se recomienda
mantenerla congelada a - 20ºC.
IDENTIFICACIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES - ¿CÓMO?

Antecedentes
Sexo, raza, edad transfusionales
Tener en cuenta:
Diagnóstico Tratamiento

Conocido Desconocido
Pruebas
(reactivos) (muestra)

Detección e Identificación de Paneles


Suero
Anticuerpos globulares

Reactivos
Tipificación eritrocitaria Hematíes
séricos
PANEL DE IDENTIFICACIÓN
TECNICA DE IDENTIFICACIÓN
FASE SALINA
2 GOTAS DE SUERO PROBLEMA + 1 GOTA DE GR DEL REACTIVO PANEL, EN CADA UNO DE LOS TUBOS ROTULADOS.
EN EL TUBO PARA EL AUTOCONTROL COLOCAR 1 GOTA DE GR AL 5% DEL PROPIO PACIENTE, MEZCLAR, CENTRIFUGAR Y
LEER

FASE TÉRMICA O ALBÚMINA


2 GOTAS DE ALBÚMINA AL 22% E INCUBAR (37°C X 30’).
CENTRIFUGAR Y LEER.

Fase Coombs o AGH


Lavar 3 veces con SSF 0.9%. Decantar.
2 gotas de suero Coombs (AGH).
Centrifugar, leer e interpretar.
Si es negativo, adicionar 1 gota de Célula Control Coombs.
ANÁLISIS DE RESULTADOS DE CÉLULAS PANEL
PRIMERO
1. AUTOCONTROL POSITIVO: AUTOANTICUERPO
2. AUTOCONTROL NEGATIVO: ALOANTICUERPO
SEGUNDO: COMPORTAMIENTO TÉRMICO DEL ANTICUERPO
1. REACCIONA HASTA ALBÚMINA: ANTICUERPO FRIO
2. REACCIONA DESDE ALBÚMINA: ANTICUERPO CALIENTE
TERCERO: ESPECIFICIDAD DEL ANTICUERPO
CASO 1
Paciente femenino de 37 años, natural de Ancash, ocupación domestica.
Antecedentes: Gestaciones: 1 (hace 15 años)
Postparto recibió una transfusión de glóbulos rojos (Huaraz)
Sera sometida a intervención quirúrgica: Cardiopatía Congénita

I.- GRUPO SANGUINEO ABO / Rh


PRUEBA GLOBULAR PRUEBA SERICA

Anti A Anti B Anti A,B Lec A1 Anti D C Rh Cel. A Cel. B Cel. O

0 4+ 4+ - 4+ - 4+ 0 0

Conclusión: Sist. ABO “B” Factor RH: Positivo

B B
Ag.
Anti A
D
Ag. D
17/05/2023
CASO 1
Paciente femenino de 37 años, natural de Ancash, ocupación domestica.
Antecedentes: Gestaciones: 1 (hace 15 años)
Postparto recibió una transfusión de glóbulos rojos (Huaraz)
Sera sometida a intervención quirúrgica: Cardiopatía Congénita
I.- GRUPO SANGUINEO ABO / Rh: “B” Positivo
II.- ESTUDIO FENOTIPOS DE GRUPO SANGUINEO: D C E c

FENOTIPOS SISTEMA RH + K Método: Gel Tubo

D C E c e K Ctl

4+ 4+ 4+ 4+ 0 0 0

FENOTIPOS DE OTROS SISTEMAS Método: Gel Tubo

Cw k Kpa Kpb Jsa Jsb Fya Fyb Jka Jkb Lea Leb Lua Lub P1 M N S s Dia

0 3+ - - - - 4+ 0 3+ 0 0 0 4+ - 3+ 0 4+ 0 4+ 0
CASO 1
Paciente femenino de 37 años, natural de Ancash, ocupación domestica.
Antecedentes: Gestaciones: 1 (hace 15 años)
Postparto recibió una transfusión de glóbulos rojos (Huaraz)
Sera sometida a intervención quirúrgica: Cardiopatía Congénita

I.- GRUPO SANGUINEO ABO / Rh: “B” Positivo

II.- ESTUDIO FENOTIPOS DE GRUPO SANGUINEO: D C E c

III.- TEST DE COOMBS DIRECTO: Negativo

IgG IgM IgA C3d C3c Ctl

0 0 0 0 0 0 Método: Gel Tubo

17/05/2023
CASO 1
Paciente femenino de 37 años, natural de Ancash, ocupación domestica.
Antecedentes: Gestaciones: 1 (hace 15 años)
Postparto recibió una transfusión de glóbulos rojos (Huaraz)
Sera sometida a intervención quirúrgica: Cardiopatía Congénita

I.- GRUPO SANGUINEO ABO / Rh: “B” Positivo


II.- ESTUDIO FENOTIPOS DE GRUPO SANGUINEO: D C E c
III.- TEST DE COOMBS DIRECTO: Negativo
IV.- TAMIZAJE Y/O RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGURALES

(Coombs Indirecto): ……………..


CI TA ALB 37°C AGH CCC
I 0 0 0 0 2+ -
II 0 0 0 0 0 2+
II 0 0 0 0 2+ .
I 0 0
AC 0 0 0 2+
17/05/2023
CASO 1
Paciente femenino de 37 años, natural de Ancash, ocupación domestica.
Antecedentes: Gestaciones: 1 (hace 15 años). Postparto recibió una
transfusión de glóbulos rojos (Huaraz). Sera sometida a intervención
quirúrgica: Cardiopatía Congénita

I.- GRUPO SANGUINEO ABO / Rh: “B” Positivo


II.- ESTUDIO FENOTIPOS DE GRUPO SANGUINEO: D C E c
III.- TEST DE COOMBS DIRECTO: Negativo
IV.- TAMIZAJE Y/O RASTREO DE ANTICUERPOS
IRREGURALES
(Coombs Indirecto): Alo anticuerpo inmune
CI TA ALB 37°C AGH C.C.C.
I 0 0 0 0 2+ 0
II 0 0 0 0 0 2+
III 0 0 0 0 2+ 0
*
AC 0 0 0 0 0 2+

17/05/2023
17/05/2023
DETECCION DE ANTICUERPOS
IRREGULARES

Grupo Sanguíneo Rh MNSs P Lewis Kell Duffy Kidd Sex-L Diego Jr REACCIONES
a b a
Rh Code D C E c e M N S s P1 Lea Leb K k Fya Fyb Jka Jkb Xga Di Di Jr CI ALB 37º AGH CCC

1 R1R1 B5161 + + 0 0 + + 0 + + + 0 0 + + + 0 + 0 + + + + 0 0 2+ 2+ --
2 R2R2 C2421 + 0 + + 0 0 + 0 + + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 0 0 0 2+
3 rr N2262 0 0 0 + + + + 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 + + 0 + + 0 0 2+ 2+ --

Estas células de rastreo detectan algún


anticuerpo?
Podría precisar cual o cuales?
17/05/2023
CI T A ALB 37 Coo C.C.
°C C.

0 0 0 0 2+ --

0 0 0 0 2+ --

0 0 0 0 0 2+

0 0 0 0 2+ --

0 0 0 0 2+ --

0 0 0 0 2+ --

0 0 0 0 2+ --

0 0 0 0 2+ --

0 0 0 0 2+ --

0 0 0 0 2+ --
17/05/2023
0 0 0 0 0 2+
CASO 1
Paciente femenino de 37 años, natural de Ancash, ocupación domestica.
Antecedentes: Gestaciones: 1 (hace 15 años). Postparto recibió una
transfusión de glóbulos rojos (Huaraz). Sera sometida a intervención
quirúrgica: Cardiopatía Congénita

I.- GRUPO SANGUINEO ABO / Rh: “B” Positivo


II.- ESTUDIO FENOTIPOS DE GRUPO SANGUINEO: D C E c
Dia: Neg
III.- TEST DE COOMBS DIRECTO: Negativo
IV.- TAMIZAJE Y/O RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGURALES

Coombs Indirecto : Alo anticuerpo inmune de importancia clinica


Especificidad : Anti e (Sistema Rh)
Titulo : 32 Dils.

B
Anti e
D
17/05/2023
ANTIGRAMA - CELULAS PANEL
Rh Kell Duffy Jkidd Lewis P MNSs Lu Procedimiento

Genotipo

Albúmina
Donante
VIAL

T amb.
C.Inm.

37ºC
AG H
D C E c e F Cw K k Fy a Fy b JKa JKb Lea Leb P1 M N S s Lua
1 112343 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + + + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
2 234345 R1R1 + + 0 0 + 0 0 + + 0 + + 0 + 0 0 + 0 + + + + + + 0 0
3 224232 R2R2 + 0 + + 0 0 0 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
4 224455 Ro r + 0 0 + + + 0 0 + 0 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
5 435356 r'r 0 + 0 + + + 0 0 + 0 + + + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0
6 454353 r''r 0 0 + + + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0
7 435321 rr 0 0 0 + + + 0 + + 0 + + + + + + + + + + 0 + + + 0 0
8 123456 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + 0 + + + 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 0
9 123451 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + + 0 + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0
10 123567 rr 0 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + + + + + 0 0
Autocontrol 0 0 0 0 0
ESPECIFICIDAD: CON LA CÉLULA PANTALLA 1 PODEMOS DECIR QUE NO ES ANTI D PORQUE TENIENDO
EL ANTÍGENO D NO REACCIONÓ, TAMPOCO ES ANTI C, ANTI e, ANTI CW, ANTI k, ANTI Fy, ANTI JKIDD, ANTI
LEWIS, ANTI P1, ANTI N, ANTI s
ANTIGRAMA - CELULAS PANEL
Rh Kell Duffy Jkidd Lewis P MNSs Lu Procedimiento

Genotipo

Albúmina
Donante
VIAL

T amb.
C.Inm.

37ºC
AGH
D C E c e F Cw K k Fy a Fy b JKa JKb Lea Leb P1 M N S s Lua
1 112343 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + + + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
2 234345 R1R1 + + 0 0 + 0 0 + + 0 + + 0 + 0 0 + 0 + + + + + + 0 0
3 224232 R2R2 + 0 + + 0 0 0 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
4 224455 Ro r + 0 0 + + + 0 0 + 0 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
5 435356 r'r 0 + 0 + + + 0 0 + 0 + + + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0
6 454353 r''r 0 0 + + + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0
7 435321 rr 0 0 0 + + + 0 + + 0 + + + + + + + + + + 0 + + + 0 0
8 123456 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + 0 + + + 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 0
9 123451 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + + 0 + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0
10 123567 rr 0 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + + + + + 0 0
Autocontrol 0 0 0 0 0
ALOANTICUERPO FRIO (ANTI M)

ANTIGRAMA - CELULAS PANEL


Rh Kell Duffy Jkidd Lewis P MNSs Lu Procedimiento

Genotipo

Albúmina
Donante
VIAL

T amb.
C.Inm.

37ºC
AGH
D C E c e F Cw K k Fy a Fy b JKa JKb Lea Leb P1 M N S s Lua
1 112343 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + + + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
2 234345 R1R1 + + 0 0 + 0 0 + + 0 + + 0 + 0 0 + 0 + + + + + + 0 0
3 224232 R2R2 + 0 + + 0 0 0 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
4 224455 Ro r + 0 0 + + + 0 0 + 0 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
5 435356 r'r 0 + 0 + + + 0 0 + 0 + + + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0
6 454353 r''r 0 0 + + + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0
7 435321 rr 0 0 0 + + + 0 + + 0 + + + + + + + + + + 0 + + + 0 0
8 123456 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + 0 + + + 0 0 + + 0 + 0 + + + 0 0
9 123451 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + + 0 + + 0 + + 0 + 0 0 + + + 0 0
10 123567 rr 0 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + + + + + 0 0
Autocontrol 0 0 0 0 0
ALOANTICUERPO FRIO (ANTI M)

ANTIGRAMA - CELULAS PANEL


Rh Kell Duffy Jkidd Lewis P MNSs Lu Procedimiento

Genotipo

Albúmina
Donante
VIAL

T amb.
C.Inm.

AG H
37ºC
D C E c e F Cw K k Fy a Fy b JKa JKb Lea Leb P1 M N S s Lua
1 112343 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + + + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
2 234345 R1R1 + + 0 0 + 0 0 + + 0 + + 0 + 0 0 + 0 + + + 0 + + 0 0
3 224232 R2R2 + 0 + + 0 0 0 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
4 224455 Ro r + 0 0 + + + 0 0 + 0 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 0
5 435356 r'r 0 + 0 + + + 0 0 + 0 + + + + 0 + + 0 + 0 0 0 + + 0 0
6 454353 r''r 0 0 + + + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 + 0 0 0 + + 0 0
7 435321 rr 0 0 0 + + + 0 + + 0 + + + + + + + + + + 0 0 + + 0 0
8 123456 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + 0 + + + 0 0 + + 0 + 0 0 + + 0 0
9 123451 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + + 0 + + 0 + + 0 + 0 0 0 + + 0 0
10 123567 rr 0 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + + 0 + + 0 0
Autocontrol 0 0 0 0 0
AUTOANTICUERPO CALIENTE, AUTOANTI D

ANTIGRAMA - CELULAS PANEL


Rh Kell Duffy Jkidd Lewis P MNSs Lu Procedimiento
Genotipo

Albúmina
Donante
VIAL

T amb.
C.Inm.

37ºC
AG H
D C E c e F Cw K k Fy a Fy b JKa JKb Lea Leb P1 M N S s Lua
1 112343 R1R1 + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + + + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 +
2 234345 R1R1 + + 0 0 + 0 0 + + 0 + + 0 + 0 0 + 0 + + + 0 0 0 0 +
3 224232 R2R2 + 0 + + 0 0 0 0 + + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 +
4 224455 Ro r + 0 0 + + + 0 0 + 0 0 + + + 0 + 0 + 0 + 0 0 0 0 0 +
5 435356 r'r 0 + 0 + + + 0 0 + 0 + + + + 0 + + 0 + 0 0 0 0 0 0 0
6 454353 r''r 0 0 + + + + 0 0 + + + + + + 0 + + 0 + 0 0 0 0 0 0 0
7 435321 rr 0 0 0 + + + 0 + + 0 + + + + + + + + + + 0 0 0 0 0 0
8 123456 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + 0 + + + 0 0 + + 0 + 0 0 0 0 0 0
9 123451 rr 0 0 0 + + + 0 0 + + + 0 + + 0 + + 0 + 0 0 0 0 0 0 0
10 123567 rr 0 0 0 + + + 0 0 + 0 + 0 + + + + + + 0 + + 0 0 0 0 0
Autocontrol 0 0 0 0 +
 Complejidad del Banco de
POSIBLE Sangre
INCOMPATIBILIDAD
LA CAPACIDAD  Inversion del Banco de
RESOLUTIVA DEL Sangre
CASO SE PUEDE
DEBER A:  Experticia del Personal
Nuevos tiempos

Nuevas Competencias
Nuevas modalidades de aprendizaje

Gracias por su atención …

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