Papanicolau

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I

Métodos de coloración mas importantes. Papanicolau, Hematoxilina y


Tema:
Eosina. Tipos de entrevista para los exámenes citológicos.
Generalidades sobre la obtención, prefijación y transporte e invio de
muestras.

Introducción
En este trabajo esta con sudor y sangre

INTRODUCCION
La citología es una disciplina que estudia las células, especialmente

las características morfológicas de las células desprendidas de los tejidos

del cuerpo. Uno de los componentes clave en citología es la correcta

obtención, procesamiento y análisis de las muestras celulares. Para facilitar

la identificación y evaluación de las células, se utilizan diversos métodos de

coloración que resaltan las estructuras celulares y permiten una evaluación

precisa. Esta monografía abordará los métodos de coloración más

importantes, como la tinción de Papanicolaou, la tinción de Hematoxilina y

Eosina, además de discutir los tipos de entrevistas para los exámenes

citológicos, así como las generalidades sobre la obtención, prefijación,

transporte y envío de muestras.

INDICE
MÉTODO DE COLORACIÓN
Antes de la aplicación del método, se debe verificar la fecha de
vencimiento de las sustancias y reactivos por utilizar.
Una vez fijado el extendido, se inicia el proceso sumergiendo en:
a) Alcohol corriente al 96% por 10 segundos, cuando la muestra ha
sido fijada en alcohol 96°.
Alcohol corriente al 96% por 5 minutos, cuando la muestra ha sido
fijada en forma de cubierta.
b) b) Lavar con abundante agua de caño.

Luego sumergir en:


a) Hematoxilina por 1 a 3 minutos.
b) Lavar con abundante agua de caño.
c) Sumergir en solución acuosa de HCL al 0,5% de 1 a 4 veces
hasta que empiece a cambiar de color.
d) Lavar con abundante agua de caño.
e) Sumergir en agua amoniacal al 0,5%.
f) Lavar con abundante agua de caño.

Secar cuidadosamente el exceso de agua con gasa por los bordes


sin tocar el frotis, luego sumergir en:

a) Alcohol corriente al 96% por 10 segundos.


b) Orange G por 2 minutos.
c) Alcohol corriente al 96% por 5 segundos.
d) Alcohol corriente al 96% por 5 segundos.
e) EA-36 por 2 minutos.

Luego deshidratar sucesivamente en:


a) Alcohol corriente al 96% por 5 segundos.
b) Alcohol corriente al 96% por 5 segundos.
c) Alcohol absoluto por 10 segundos.
d) Alcohol absoluto por 10 segundos.

Luego sumergir sucesivamente en:


a) Xilol o neoclear por 10 segundos.
b) Xilol o neoclear por 10 segundos.
c) Xilol o neoclear por 10 segundos.

MÉTODO DE MONTAJE
Para el montaje sobre la lámina portaobjeto, aún húmeda, usar unas
gotas de bálsamo de Canadá y cubrir con laminilla o con resina sintética
previo secado de la lámina portaobjeto. En caso de aplicar líquido de
montaje sobre el frotis, no se requiere el uso de laminilla cubreobjeto.

RESULTADOS DE TINCIÓN
Núcleos: La función del colorante nuclear es dar coloración perfecta al
núcleo, colorear al mínimo el citoplasma y no cambiar en el transcurso
de la coloración citoplasmática.
La cromatina y la membrana nuclear toman el color azul oscuro o
púrpura mientras el nucléolo obtiene el color rojo, rosado o naranja .

Citoplasma: La función del colorante citoplasmático es permitir la neta


diferenciación entre células eosinofilias y cianófilas, sin dar matices
intermedios; dar una coloración homogénea, estable y transparente y no
disminuir la coloración del núcleo a causa de una excesiva acidez.
El citoplasma presenta el color amarillo o naranja, si hay presencia de
queratina. Caso contrario el color varía de verde, azul o gris.

ANOTACIONES IMPORTANTES PARA TENER EN CUENTA


La coloración de Papanicolaou puede suspenderse solamente en los
alcoholes al 95% o en el xilol, aunque un aumento en el tiempo de los
alcoholes puede dar citoplasma pálido.
El nivel de los colorantes y alcoholes debe cubrir toda la placa.
Los colorantes nuclear y citoplasmático deben cambiarse
aproximadamente cada 2000 láminas.
Los alcoholes, el xilol y los colorantes deben filtrarse con frecuencia,
para evitar contaminación.
La hematoxilina debe filtrarse cada que presente un precipitado
metálico, para evitar que se forme un pigmento café, lo cual impide la
visualización de las células.
Descartar el xilol si toma color o se vuelve lechoso.
Las láminas deben enjuagarse muy bien en alcohol al 70% para quitar
el exceso de NH3 y evitar así la decoloración posterior.
La preparación de colorantes (solución madre) debe hacerse con alcohol
etílico puro.
Guardar los colorantes en frasco oscuro.
Los alcoholes utilizados en el proceso de la coloración pueden
prepararse con el alcohol isopropílico; es más económico.
Las modificaciones de la coloración de Papanicolaou se basan
principalmente en la reducción en el número de alcoholes, la
preparación de las soluciones y los tiempos utilizados; esto se ajusta en
cada laboratorio hasta obtener la coloración deseada

Tipos de Entrevistas para los Exámenes Citológicos


Las entrevistas para exámenes citológicos son fundamentales para
obtener información relevante que pueda influir en la interpretación de
los resultados. Existen diferentes tipos de entrevistas dependiendo del
contexto clínico:

1. *Entrevista Directa*:
- *Contexto*: Se realiza directamente con el paciente antes de la
recolección de la muestra.
- *Objetivo*: Obtener información relevante como antecedentes de
infecciones, antecedentes ginecológicos, factores de riesgo (como la
actividad sexual, uso de anticonceptivos, tabaquismo, etc.).
- *Aplicación*: Es esencial en la citología cervical, donde los
antecedentes de infecciones por VPH y otros factores pueden influir en
los resultados.

2. *Entrevista Clínica Completa*:


- *Contexto*: Involucra una historia clínica detallada.
- *Objetivo*: Obtener un panorama completo de la salud del paciente,
incluyendo historia familiar, historial médico general, y antecedentes de
enfermedades.
- *Aplicación*: Utilizada en casos complejos donde la citología es parte
de un estudio más amplio, como en estudios para cáncer de mama o
pulmón.

3. *Entrevista de Seguimiento*:
- *Contexto*: Realizada después de un examen citológico inicial.
- *Objetivo*: Evaluar la respuesta a un tratamiento, verificar la
recurrencia de una enfermedad o investigar hallazgos anormales
previos.
- *Aplicación*: Común en pacientes que han tenido resultados
anormales en pruebas citológicas previas.
Generalidades sobre la Obtención, Prefijación, Transporte
y Envío de Muestras

1. *Obtención de la Muestra*:
- *Descripción*: La correcta recolección de la muestra es crucial para
obtener resultados diagnósticos precisos. La obtención puede variar
según el tipo de citología:
- *Citología Cervical*: Recolección de células del cuello uterino
utilizando espátulas, cepillos o hisopos.
- *Citología de Líquidos Corporales*: Recolección de líquidos como
orina, líquido pleural, líquido cefalorraquídeo, entre otros.

2. *Prefijación*:
- *Descripción*: La fijación rápida de las muestras es esencial para
preservar las características morfológicas de las células.
- *Métodos*:
- *Alcohol etílico al 95%*: Es el fijador más común utilizado para
citologías, proporcionando una preservación adecuada de las células.
- *Fijadores comerciales*: Existen productos especializados que
permiten una fijación y transporte más seguros.

3. *Transporte y Envío de Muestras*:


- *Descripción*: Las muestras deben ser transportadas de manera que
se mantengan en condiciones óptimas para su análisis.
- *Consideraciones*:
- *Temperatura*: Algunas muestras requieren ser transportadas en
frío (2-8°C) para evitar la degradación celular.
- *Tiempo*: El transporte debe realizarse lo más rápidamente posible,
especialmente para muestras que son sensibles a la descomposición.
- *Contenedores*: Las muestras deben colocarse en contenedores
estériles y bien cerrados para evitar la contaminación.

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