Práctica 12
Práctica 12
Práctica 12
FUNDAMENTO
Para entender bien el funcionamiento de la PCR hay que estudiar en profundidad cuatro aspectos:
-la composición de la mezcla de reacción. -la programación del termociclador.
-la preparación de las muestras. -el análisis de los productos amplificados.
En esta práctica nos centraremos en la programación del termociclador.
MATERIALES
-Termociclador Gene Q Thermal Cycler TC-24/h(b).
PROGRAMA
2. Al encenderlo se oirán dos pitidos y aparecerá en la pantalla Self testing. Este proceso puede durar 2-4
minutos.
3. Coloca los tubos Eppendorf de capacidad 0,2 ml en los pocillos.
4. Si ya tenemos la programación de la PCR guardada en el equipo debemos pulsar File elegir el
programa adecuado y pulsar Run.
5. Si no tenemos el programa guardado vamos a crear uno nuevo siguiendo las siguientes instrucciones:
a) Pulsar File (F1) New file (F1), aparecerá una pantalla con 6 segmentos como la de la imagen
b) Comenzamos en el primer segmento y elegimos temperatura y tiempo, para ello navegamos con las
flechas y escribimos con los números.
c) Pulsar +Seg (F1) y nos permitirá configurar el segmento siguiente de la misma manera.
f) Para finalizar pulsamos Save/Run (F5) y nos pedirá indicar un usuario (User) y nombre del archivo (File
name), para escribir debemos utilizar el teclado numérico pulsando hasta que salga la letra deseada y
cambiando de espacio con la flecha derecha.
6. Cuando esté en funcionamiento nos indicará en qué fase se encuentra y el tiempo restante (Remaining
time).
ATENCIÓN: este tiempo es aproximado, siempre va a ser mayor que el indicado.
7. Al finalizar el proceso abrir la tapa y extraer lo antes posible los tubos de las muestras, se deberán
mantener en nevera en caso de que no se pueda realizar la electroforesis o el proceso que corresponda
en ese momento.