Universidad de San Carlos de Guatemala

Centro Universitario del Sur Occidente.

Ingeniería en Alimentos
Bioingeniería

Hoja de trabajo No. 4

Elaborado por: Carné:

Melany Lizeth Maldonado Avila 201644424

Presentado a:

Ing. Víctor Manuel Nájera Toledo

Viernes 12 de Agosto del 2022

 HOJA DE TRABAJO No. 4
1. Desarrollo y ejemplificación de la glucolisis por el camino Embden- Meyerhoff-
Parnas.

La glucólisis (del griego glycos:azúcar y lysis:ruptura), es la vía metabólica encargada de

oxidar o fermentar la glucosa y así obtener energía para la célula. Ésta consiste de 10
reacciones enzimáticas que convierten a la glucosa en dos moléculas de piruvato, la cual es
capaz de seguir otras vías metabólicas y así continuar entregando energía al organismo. [1]

Es la vía inicial del catabolismo (degradación) de carbohidratos, y tiene tres funciones

principales:

1. La generación de moléculas de alta energía (ATP y NADH) como fuente de energía

celular en procesos de respiración aeróbica (presencia de oxígeno) y anaeróbica
(ausencia de oxígeno).
2. La generación de Piruvato que pasará al Ciclo de Krebs, como parte de la respiración
aeróbica.
3. La producción de intermediarios de 6 y 3 carbonos, los que pueden ser ocupados por
otros procesos celulares.

Cuando hay ausencia de oxígeno (anoxia o hipoxia), luego que la glucosa ha pasado por este
proceso, el piruvato sufre de fermentación, una segunda vía de adquisición de energía que,
al igual que la glucólisis, es poco eficiente. El tipo de compuesto obtenido de la fermentación
suele variar con el tipo de organismo. En los animales, el piruvato fermenta a lactato y en
levadura, el piruvato fermenta a etanol.

En eucariotas y procariotas, la glucólisis ocurre en el citosol de la célula. En células

vegetales, algunas de las reacciones glucolíticas se encuentran también en el ciclo de Calvin,
que ocurre dentro de los cloroplastos. La amplia conservación de esta vía incluye los
organismos filogenéticamente más antiguos, y por esto se considera una de las vías
metabólicas más antiguas.
El tipo de glucólisis más común y más conocida es la vía de Embden-Meyerhoff, explicada
inicialmente por Gustav Embden y Otto Meyerhof. El término puede incluir vías alternativas,
como la vía de Embden-Meyerhoff. No obstante, Glucólisis será usada aquí como sinónimo
de la vía de Embden-Meyerhoff.

Reacción global de la glucólisis

+

Los productos de esta reacción, mostrados arriba, son utilizados por la célula en muchas
funciones:

• El ATP (Adenosín trifosfato) es la fuente de energía universal de la célula.

• NADH y H+, otorgan la capacidad de reducir otros compuestos pertenecientes a otras
vías metabólicas, o bien para sintetizar ATP.
• El piruvato es la molécula que seguirá oxidándose en el ciclo de Krebs, como parte
de la respiración aeróbica, donde dará origen a más moléculas NADH, que podrán
pasar a sintetizar ATP en la mitocondria.

El enlace éster-fosfato

Destino del Piruvato

Luego de que una molécula de glucosa se transforme en 2 moléculas de piruvato, las

condiciones del medio en que se encuentre determinarán la vía metabólica a seguir.

En organismos aeróbicos, el piruvato seguirá oxidándose por la enzima Piruvato

deshidrogenasa y el ciclo de Krebs, creando intermediarios como NAD+ y FAD. Estos
intermediarios no pueden cruzar la membrana mitocondrial, y por lo tanto, utilizan sistemas
de intercambio con otros compuestos llamados lanzaderas o shuttles. Los más conocidos son
el shuttle malato-aspartato y el shuttle glicerol-3-fosfato. Los intermediarios logran entregar
sus equivalentes[5] al interior de la membrana mitocondrial, y que luego pasarán por la cadena
de transporte de electrones, la cual los usarán para sintetizar ATP.

De ésta manera, se puede obtener 38 moles de ATP a partir de 1 mol de glucosa.

Sin embargo, cuando las células no posean mitocondrias (ej.: eritrocito) o cuando requieran
de grandes cantidades de ATP (ej.: El músculo al ejercitarse), el piruvato sufre de
fermentación que permite obtener 2 moles de ATP por un mol de glucosa, por lo tanto, ésta
vía es poco eficiente respecto a la fase aeróbica de la glucólisis.

El tipo de fermentación varía respecto al tipo de organismos: En levaduras, se

produce fermentación alcohólica, produciendo etanol y CO2 como producto final; y en
músculos, eritrocitos y algunos microorganismos se produce fermentación láctica, que da
como resultado ácido láctico o lactato.

Etapas de la glucolisis

La glucólisis se divide en dos partes principales y diez reacciones enzimáticas, las que se
describen a continuación.

Fase de Gasto de Energía (ATP)

Esta fase, aumenta la energía de los compuestos, para que pueda costear la rotura de una
molécula de glucosa en dos moléculas de gliceraldehido. Técnicamente hablando, esta fase
aumenta la energía libre de los metabolitos, y de esa forma facilitar la catálisis de glucosa en
gliceraldehído.

1er Paso: Hexoquinasa

La primera reacción de la glucólisis es la fosforilación de la glucosa, para activarla

(aumentar su energía) y así poder utilizarla en otros procesos cuando sea necesario. Esta
activación ocurre por la transferencia de un grupo fosfato del ATP, una reacción catalizada
por la enzima Hexoquinasa,[7] la cual puede fosforilar (añadir un grupo fosfato) a moléculas
similares a la Glucosa, como la fructosa y manosa.
 Glucosa + ATP Glucosa-6-fosfato + ADP

Las ventajas de fosforilar la glucosa son 2: La primera es hacer de la glucosa un metabolito

más reactivo, mencionado anteriormente, y la segunda ventaja es que la glucosa-6-fosfato no
puede cruzar la membrana celular -a diferencia de la glucosa-. De esta forma se evita la
pérdida de sustrato energético para la célula.

Técnicamente hablando, la Hexoquinasa solo fosforila las D-hexosas, y utiliza de sustrato

MgATP2-, ya que éste catión permite que el último fosfato del ATP (Fosfato gamma, γ-P o
Pγ) sea un blanco más fácil para el ataque nucleofílico que realiza el grupo hidroxilo (OH)
del sexto carbono de la glucosa, lo que es posible debido al Mg 2+ que apantalla las cargas de
los otros dos fosfatos.

Esta reacción posee un ΔG negativo.

2do Paso: Fosfohexosa isomerasa

Éste es un paso importante, puesto que acá se define la geometría molecular que afectará los
dos pasos críticos en la glucólisis: El próximo paso, que agregará un grupo fosfato al producto
de esta reacción, y el paso 4, cuando se creen dos moléculas de gliceraldehido que finalmente
serán las precursoras del piruvato.

Glucosa-6-fosfato Fructosa-6-fosfato
En esta reacción, la Glucosa-6-fosfato se isomeriza a Fructosa-6-fosfato, mediante la
enzima Fosfohexosa isomerasa. La isomerización ocurre en una reacción de 4 pasos, que
implica la apertura del anillo y un traspaso de protones a través de un intermediario cis-
enediol

Puesto que la energía libre de esta reacción es igual a +1,7 la reacción es no espontánea y se
debe acoplar.

3er paso: Fosfofructoquinasa

3. Fosforilación de la fructosa 6-fosfato en el carbono 1, con gasto de un ATP, a través de la

enzima Fosfofructoquinasa-1 (PFK1). También este fosfato tendrá una baja energía de
hidrólisis. Por el mismo motivo que en la primera reacción, el proceso es irreversible. El
nuevo producto se denominará Fructosa-1,6-Bisfosfato.

Fructosa-6-fosfato + ATP Fructosa-1,6-bifosfato + ADP

La irreversibilidad es importante, ya que la hace ser el punto de control de la glucólisis. Como

hay otros sustratos aparte de la glucosa que entran en la glucólisis, el punto de control no está
colocado en la primera reacción, sino en ésta. La fosfofructoquinasa tiene centros alostéricos,
sensibles a las concentraciones de intermediarios como citrato y ácidos grasos. Liberando
una enzima llamada fosfructocinasa-2 que fosforila en el carbono 2 y regula la reacción.

4to Paso: Aldolasa

La enzima Aldolasa (Fructosa-1,6-bifosfato aldolasa), mediante una condensación

aldólica reversible, rompe la fructosa-1,6-bifosfato en dos moléculas de tres carbonos
(triosas): Dihidroxiacetona fosfato y Gliceraldehído-3-fosfato. Existen dos tipos de Aldolasa,
las que difieren tanto en el tipo de organismos dónde se expresan, como en los intermediarios
de reacción.

Fructosa-1,6-bifosfato Dihidroxiacetona-fosfato + Gliceraldehido-3-fosfato

Esta reacción tiene una energía libre (ΔG) entre 20 a 25 kJ/mol, por lo tanto, en condiciones
estándar esta reacción no ocurre de manera espontánea. Sin embargo, en condiciones
intracelulares la energía libre es pequeña debido a la baja concentración de los sustratos, lo
que permite que esta reacción sea reversible.

5to Paso: Triosa-fosfato-Isomerasa

Puesto que sólo el Gliceraldehído-3-fosfato puede seguir los pasos restantes de la glucólisis,
la otra molécula generada por la reacción anterior (Dihidroxiacetona-fosfato) es isomerizada
(convertida) en Gliceraldehído-3-fosfato. Ésta reacción posee una energía libre en
condiciones estándar positiva, lo cual implicaría un proceso no favorecido, sin embargo al
igual que para la reacción 4, considerando las concentraciones intracelulares reales del
reactante y el producto, se encuentra que la Energía Libre total es negativa, por lo que la
dirección favorecida es hacia la formación de G3P.

Dihidroxiacetona-fosfato Gliceraldehido-3-fosfato
Éste es el último paso de la "Fase de Gasto de Energía". Sólo hemos gastado ATP en el
primer paso (Hexoquinasa) y el tercer paso (Fosfofructoquinasa-1). Cabe recordar que el 4to
paso (Aldolasa) genera una molécula de Gliceraldehído-3-fosfato, mientras que el 5to paso
genera una segunda molécula de éste. De acá en adelante, las reacciones a seguir ocurrirán
dos veces, debido a las 2 moléculas de gliceraldehido generadas de esta fase. Hasta esta
reacción hay intervención de energía (ATP)

Fase de beneficio Energético

6to Paso: Gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa

Se utiliza un fosfato inorgánico y una molécula de NAD+ para producir 1,3-Bifosfoglicerato

y una molécula de NADH + H+. Esta reacción la cataliza la gliceraldehído-3-fosfato
deshidrogenasa o GAP-deshidrogenasa.

Llama la atención que el fosfato se ha introducido sin utilizar ATP, sino aprovechando la
energía producida por la reacción redox. Ahora, el fosfato que se ha introducido si que tiene
una alta energía por lo que se podrá transferir al ATP. Esto se conoce como fosforilación a
nivel de sustrato.

Esta sexta reacción tiene una importancia capital en la regulación de la glucolisis; si el NAD+
consumido en formar NADH + H+ no se regenera, el ciclo glucolítico se verá comprometido
llegando incluso a detenerse. Una de las funciones principales de la vía fermentativa es oxidar
el NADH + H+ generado para así permitir a la ruta glucolítica continuar. En caso de haber
oxígeno, el NADH + H+ obtenido se destina a la cadena transportadora de electrones para la
obtención de energía.
7mo Paso: Fosfoglicerato quinasa

Se desfosforiliza el 1,3-bifosfoglicerato gracias a la fosfoglicerato quinasa, formándose una

molécula de ATP por cada una de 1,3-BPG y dando lugar al 3-fosfoglicerato.

8vo Paso: Fosfoglicerato mutasa

Se isomeriza el 3-fosfoglicerato procedente de la reacción anterior dando 2-fosfoglicerato, la

enzima que cataliza esta reacción es la Fosfoglicerato mutasa. Lo único que pasa aquí es el
cambio de posición del fosfato del C3 al C2. Son energías similares y por tanto reversibles,
con una variación de energía libre cercana a cero.

9no Paso: Enolasa

La enzima enolasa propicia la formación de un doble enlace en el 2-fosfoglicerato,

eliminando una molécula de agua formada por el hidrógeno del C2 y el OH del C3. El
resultado es el fosfoenolpiruvato.

10mo Paso: Piruvato quinasa

Desfosforilación del Fosfoenolpiruvato, obteniéndose piruvato y ATP. Reacción irreversible

mediada por la Piruvato quinasa.

La enzima Piruvato Quinasa es dependiente de magnesio y potasio. La energía libre es igual

a -31.4, por lo tanto, la reacción es favorable e irreversible. El rendimiento total de la
glucólisis de una sola glucosa(6C) es de 4 ATP (dos por cada gliceraldehido fosfato(3C) y 2
NADH (que dejarán los electrones H en la cadena de transporte de electrones para formar 3
ATP por cada electrón). Con la molécula de piruvato, mediante un paso de oxidación
intermedio llamado descarboxilación oxidativa, mediante el cual el piruvato pasa al interior
de la mitocondria, perdiendo CO2 y un electrón que oxida el NAD+, que pasa a ser NADH
más H+ y ganando un CoA-SH (coenzima A), formándose en Acetil CoA gracias a la enzima
piruvato deshidrogenasa, se puede entrar al Ciclo de Krebs (que, junto con la cadena de
transporte de electrones, se denomina respiración.

Obtención de Glucosa

Regulación enzimática

La glucólisis se regula enzimáticamente en los tres puntos irreversibles de esta ruta, esto es,
en la primera reacción (G -- >G-6P), por medio de la Hexoquinasa; En la tercera reacción (F-
6P --> F-1,6-BP) por medio de la PFK1 y en el último paso (PEP --> Piruvato) por la Piruvato
quinasa]].

• La hexoquinasa es un punto de regulación poco importante, ya que se inhibe cuando

hay mucho G-6P en músculo. Es un punto poco importante ya que el G-6P se utiliza
para otras vías.

HQ: Inhibe G-6P

• La PFK1 es la enzima principal de la regulación de la glucólisis, actúa como una llave

de agua, si está activa cataliza muchas reacciones y se obtiene más Fructosa 1,6
bifosfato, lo que permitirá a las enzimas siguientes transformar mucho piruvato. Si
está inhibida, se obtienen bajas concentraciones de producto y por lo tanto se obtiene
poco piruvato.

Esta enzima es controlada por regulación alostérica mediante: Por un lado, se activa gracias
a niveles energéticos elevados de ADP y AMP, inhibiéndose en abundancia de ATP y citrato,
y por otro se activa en presencia de un metabolito generado por la PFK2 que es la Fructosa-
2,6-Bisfosfato (F-2,6-BP)

La lógica de la inhibición y activación son las siguientes:

 • ATP: inhibe esta enzima pues si hay una alta concentración de ATP entonces la célula
no necesita generar más.
• Citrato: si hay una alta concentración de citrato entonces, se está llevando a cabo el
ciclo del ácido cítrico (o ciclo de Krebs) y este ciclo aporta mucha energía, entonces
no se necesita realizar glucólisis para obtener más ATP, ni piruvato.

• AMP, ADP: la alta concentración de estas moléculas implica que hay una carencia
de ATP, por lo que es necesario realizar glucólisis, para generar piruvato y energía.

PFK1: Inhibe: ATP - Activa: ADP, AMP y F-2,6-BP.

• La piruvatoquinasa se regula distintamente según el tejido en el que trabaje, pero en

hígado se inhibe en presencia de ATP y Acetil Coenzima-A (A-CoA), y se activa
gracias de nuevo ante la F-2,6-BP.