064-Ba1006 TDS Es

Referencia: 064-BA1006 Scharlau Microbiología - Ficha Técnica
Producto: Sabouraud 4% Dextrose Agar
Especificación
Medio para la enumeración y cultivo de hongos según el método armonizado de las farmacopeas y normas ISO.
Presentación
10 Frascos Encajado Caducidad Almacenamiento
Botella 125 ml 1 caja con 10 botellas de 125 ml. Tapón inyectable: 16 meses 8-25 ºC
con: 100 ± 3 ml tapón plástico con rosca. No se recomienda la
utilización de jeringas con agujas de diámetro
superior a 0,8 mm.
Composición
Composición (g/l):
D(+)-Glucosa...................................40,00
Peptona de caseína ....................... 5,00
Peptona de carne............................5,00
Agar.................................................15,0
Página 1 / 3 Fecha revisión:29/01/22

Descripción/Técnica
Descripción:
El Agar de Sabouraud Dextrosa es una modificación al clásico medio de Sabouraud para el cultivo de hongos. La formulación permite
un cultivo y diferenciación adecuados, ya que los aspectos morfológicos se mantienen con mayor regularidad.
La selectividad se debe a su bajo pH y la alta concentración de glucosa, que junto a una incubación a temperaturas relativamente bajas
(25-30°C), permiten favorecer el crecimiento de los hongos al mismo tiempo que dificultan el de las bacterias. Además, la especial
composición de la peptona, está estudiada para que suministre todos los requerimientos nutritivos nitrogenados a los hongos.
La fuerte reacción ácida del medio de Sabouraud hidroliza en parte el agar, por lo cual, se recomienda preparar el necesario y no
refundirlo, ya que cualquier sobrecalentamiento disminuye notablemente su capacidad de gelificación.
Si se desea una mayor selectividad, se pueden añadir diversos inhibidores después de la esterilización, cuando el medio aún está
fundido, e incluso, agentes indicadores para convertirlo en un medio diferencial. A continuación se ofrecen algunas de las mezclas
inhibidoras y diferenciales que se han empleado:
- Penicilina: A razón de 20.000 u/L favorece la selectividad del medio inhibiendo la mayor parte de bacterias.
- Penicilina y Estreptomicina: A razón de 20.000 u/L y 40.000 u/L respectivamente favorece el aislamiento de Histoplasma en perros.
- Penicilina y Neomicina: A razón de 20.000 u/L y 40 mg/L respectivamente se utiliza para el aislamiento de levaduras.
- Estreptomicina y Cloranfenicol: A razón de 40 mg/L y 500 mg/L respectivamente, para aislamiento de Trichophyton verrucosum.
- Colistina, Novobiocina y Cicloheximida: A razón de 8 mg/L, 0,1 mg/L y 30 mg/L respectivamente para aislamiento de Candida
albicans.
- Telurito potásico: A razón de 150 mg/L se utiliza para el aislamiento primario de hongos a partir de escamas y costras.
- Sulfato de cobre, Cristal Violeta y Verde Brillante: A razón de 500 mg/L, 2 mg/L y 5 mg/L respectivamente consigue una buena
inhibición bacteriana.
- Cloruro de Trifeniltretazolio (TTC): A razón de 100 mg/L se obtiene el medio de Pagano-Levín, con el que se puede diferenciar a
Candida albicans, que no se colorea, de las otras levaduras patógenas que toman colores desde el rosa al púrpura.
Técnica :
Recoger, diluir y preparar las muestras y volúmenes según requieran las normativas y especificaciones aplicadas y los resultados
previstos.
Fundir en microondas o baño maría y dispensar en placas a razón de 22 ml/placa aprox. una vez atemperado el medio a unos 50 ºC
aprox. Dejar solidificar en ambiente esteril.
Una vez sembradas las placas con cualquier método convencional, incubar aerobicamente a 20 - 25 ºC durante 48-72 horas hasta 5
días.
Proceder al recuento de todas las colonias aparecidas y considerar las diluciones realizadas para calcular la carga microbiana (hongos
y levaduras) en la muestra analizada.
Nota: Los medios sólidos pueden fundirse de diferentes maneras: autoclave, baño y si el cliente lo ve conveniente también el
microondas. Siempre que se escoja la opción del microondas es necesario tomar ciertas medidas de seguridad para evitar la rotura del
frasco o tubo, tales como aflojar el tapón y poner la botella o tubo en un baño maría dentro del microondas. Las temperaturas y tiempos
de fusión dependerán de la forma del envase, del volumen de medio y de la fuente calorífica. Deben evitarse tanto los
sobrecalentamientos como los calentamientos prolongados.

Control de Calidad
Control Físico/Químico
Color : Amarillo pajizo pH: 5,6 ± 0,2 a 25ºC
Control de Fertilidad
Fusión - Preparación Placas - Según metodos y monografias armonizados en farmacopeas e normas ISO
Siembra en espiral: rango práctico 50 -100 UFC (Productividad).
Metodología analítica acorde con ISO 11133:2014/A1:2018; A2:2020
Aerobiosis. Incubación 20-25ºC. ≤5 días.

Microorganismo Desarrollo
Candida albicans ATCC® 10231, WDCM 00054 Bueno (≥70%)
Aspergillus brasiliensis ATCC® 16404, WDCM 00053 Bueno (≥70%)
S. cerevisiae ATCC® 9763, WDCM 00058 Bueno (≥70%)
Control de Esterilidad
Incubación 48 horas a 30-35 ºC y 48 horas a 20-25 ºC: SIN CRECIMIENTO
Verificación a 7 días tras incubación en las mismas condiciones.
Bibliografia
· AJELLO, L. (1957) Cultural Methods for Human Pathogenic Fungi J. Chron. Dis. 5:545-551.
· COLIPA (1997) Guidelines on Microbial Quality Management (MQM). Brussels.
· EUROPEAN PHARMACOPOEIA 10.0 (2020) 10th ed. § 2.6.13. Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified
microorganisms. Harmonised Method. EDQM. Council of Europe. Strasbourg.
· GEORGE, L.K., AJELLO, L. & PAPAGEORGE, C. (1954) Use of Cycloheximide in the Selective Isolation of Fungi Pathogenic to Man. J.
Lab. Clin. Med, 44 (422-428).
· HANTSCHKE, D. (1968) Mykosen, 11, (769-778).
. ISO 11133:2014/ Adm 1:2018. Microbiology of food, animal feed and water. Preparation, production, storage and performance testing of
culture media.
· ISO 16212 Standard (2017) Cosmetics - Microbiology - Enumeration of yeast and mould.
· PAGANO, J. LEVIN, J.D. and TREJO, W. (1957-58) Diagnostic Medium for Differentiation of Species of Candida. Antibiotics Annual,137
-143.
· SABOURAUD, R. (1910) Les Teignes. Masson, Paris.
· USP 33 - NF 28 (2011) <62> Microbiological examination of non-sterile products: Test for specified microorganisms. Harmonised
Method. USP Corp. Inc. Rockville. MD. USA.

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Siembra en espiral: rango práctico 50 -100 UFC (Productividad).

Metodología analítica acorde con ISO 11133:2014/A1:2018; A2:2020

Aerobiosis. Incubación 20-25ºC. ≤5 días.

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