Manual Bio II 2023-1
Manual Bio II 2023-1
Manual Bio II 2023-1
Biología II
Manual de Laboratorio
Estudiante: ______________________________________
ID: _______________________________________________
Profesor(a): _____________________________________
Sección: ________ Horario: ______________________
2023-1
Reglas a seguir
1. Debe ser puntual a las prácticas de laboratorio. Todas las prácticas iniciaran a la hora
establecida en el horario. No se permitirá la entrada a los estudiantes que lleguen 15 minutos
después de iniciar el laboratorio.
2. Todos los estudiantes deben tener la bata de laboratorio. Los estudiantes que no posean la
bata no recibirán la práctica. La bata para el laboratorio de biología ha de ser blanca.
4. Todo desecho sólido debe ser descartado en los basureros y no en los fregaderos del
laboratorio.
7. No ingerir, tocar y oler directamente los reactivos utilizados en el laboratorio. Trate todos los
reactivos como peligrosos, cuidando no derramarlos ni echarlos sobre la piel. Cualquier
incidente reportarlo al profesor o al monitor inmediatamente.
8. Cualquier estudiante que sea encontrado haciendo fraude (material de apoyo, copiarse de un
compañero, etc.) en un examen de laboratorio se le anulara el examen sin derecho a
reposición.
Procedimiento General
Durante el laboratorio
1. Iniciado el laboratorio el profesor o monitor iniciara una evaluación de contenidos o
fogueo de manuales cerrados en el cual los estudiantes podrán participar para acumular
puntos de participación. El fogueo incluye todas las preguntas del manual, así como
material abarcado en el libro de Biología.
2. Terminado el fogueo iniciara la práctica con asesoría del profesor o monitor.
3. Una vez terminada la práctica se procederá a un pruebín de los contenidos revisados en el
laboratorio.
4. Durante cualquiera de las partes del laboratorio el monitor o profesor revisara los
manuales.
Evaluación
Los siguientes son modelos estándares de evaluación. La evaluación de las prácticas puede
ser modificada por el profesor(a):
Exámenes bisemanales 24 pts. (6 pts. c/u) Exámenes semanales 2.5 pts. c/u (20 pts.)
Participación oral 4 pts. Protocolos 1.5 pts. c/u (10 pts.)
Asistencia 2 pts.
Importante
• Los estudiantes no admitidos al LAB no tienen derecho a recibir el examen.
• Una vez concluida la semana de laboratorio no es posible reponer prácticas.
PRÁCTICA # 1: ADN, Cariotipo Humano, Cromosomas y Mitosis
El ADN fue aislado por Friedrich Miescher en 1869, utilizando el esperma de salmón y
de pus de heridas abiertas, y debido a que lo encontró solamente en los núcleos,
Miescher denominó a este compuesto como nucleína. A posteriori se lo cambió a
ácido nucleico y por último a ácido desoxirribonucleico (ADN).
~ 5 ~
El cariotipo humano, también llamado complemento cromosómico, es el conjunto de
cromosomas de una especie determinada. Su determinación se realiza observando
durante la metafase la dotación cromosómica de una célula, y la obtención de una
fotografía durante esta observación permite investigaciones genéticas sobre ese
individuo o esa especie, además de ordenar posteriormente los cromosomas según
criterios establecidos por el ‘International System for Human Cytogenetics
Nomenclatures’.
Mitosis
Objetivos
~ 6 ~
Capítulos del Libro de Biología
Solomon et al. 2013 [9na Edición]: Capítulo 10. Cromosomas, mitosis y meiosis: págs.
213-223 y Capítulo 12. ADN: Molécula portadora de la información genética: págs.
263-281.
Investigue y Estudie
Materiales
- Estudiante: bulbos de cebolla blanca con raíces (ver Parte 1. Preparación de las
raíces), lentejas, cuerda larga (3-5 metros), ablandador de carne.
- Laboratorio: orceína aceto-clorhídrica, agua destilada, NaCl 5%, ablandador de
carne, etanol, 30 ml de solución de sal al 1%, 5ml de solución jabonosa al 25%, 30
ml de alcohol etílico frío, cristal de reloj, pinzas, tijera, navaja, papel de filtro,
laminillas, portaobjetos, cubreobjetos, microscopio, plaquitas de mitosis, probeta,
beaker, tubo de ensayo, licuadora, colador, tubo de ensayo con tapa, taza
plástica, barra de madera para mezclar.
~ 7 ~
Para la casa
En el Laboratorio
Para obtener las raíces se colocan cebollas en frascos de agua de manera que no
queden sumergidas, pero que toquen la superficie del agua. Es conveniente que a las
cebollas se les eliminen las escamas externas para conseguir un desarrollo más rápido
de las raíces, y que cambien el agua todos los días, de esta manera se pueden
conseguir raíces en un período de 5 día.
~ 8 ~
Responda:
1. ¿Cuáles fases puedes observar?
2. ¿En cuál fase se distinguen mejor los cromosomas?
3. ¿Cuál es la fase más abundante en su preparación?
Calcule el índice mitótico (IM) utilizando los datos anteriores, de acuerdo a la siguiente
fórmula:
Para esta parte del laboratorio se necesitará una cuerda o hilo para simular la
membrana nuclear y tener a mano unas tijeras. Este debe ser lo bastante largo como
para rodear al menos 6 personas. Ahora todos los integrantes del laboratorio, sin
excepciones, van a actuar o simular el proceso de la mitosis en el aula de laboratorio.
A medida que vayan actuando todas las fases de la mitosis, deberán buscar la manera
de representar cada fase de la célula y cada evento que ocurre durante la división
celular.
~ 9 ~
Parte 3: Extracción de ADN casera
~ 10 ~
Parte 4: Extracción de ADN de las Células de la Mejilla Humana
~ 11 ~
PRÁCTICA # 2: Meiosis y Gametogénesis
Introducción
Antes de considerar los detalles de este proceso debemos conocer ciertos términos
que describen la constitución cromosómica en los núcleos de las células. A los
cromosomas en el núcleo de una célula sexual (óvulo; espermatozoide) se les aplican el
término haploide o simplemente n; mientras que aquellos presentes en el cigoto y en
células derivados de mitosis se le aplican el término diploide o 2n. Por ejemplo, un
óvulo humano antes de ser fecundado posee 23 cromosomas (n), mientras que el
cigoto tiene 46 cromosomas (2n). Estos 46 cromosomas existen en 23 pares, donde los
miembros de cada par son similares entre sí en cuanto a forma, tamaño y contenido
genético. Cada miembro de un par se considera homólogo del otro y no homólogo
con respecto a otros cromosomas. En el cigoto cada par de homólogos consiste de un
cromosoma que aportó el óvulo y otro que aportó el espermatozoide.
Los ovarios a partir de células llamadas ovogonios producen óvulos y los testículos a
partir de los espermatogonios producen espermatozoides. Fundamentalmente, el
proceso de meiosis es bien parecido en el testículo y en el ovario, aunque existen
ciertas diferencias en los detalles.
~ 12 ~
Objetivos
Solomon et al., 2013 [9na Edición]: Capítulo 10. Cromosomas, mitosis y meiosis: págs.
223-236 y Capítulo 50. Reproducción: págs. 1077-1096.
Investigue y Estudie
Materiales:
~ 13 ~
En el laboratorio
Para esta parte del laboratorio se necesitará un hilo para simular la membrana nuclear y
tener a mano unas tijeras. Este debe ser lo bastante largo como para rodear al menos
6 personas. Ahora todos los integrantes del laboratorio, sin excepciones, van a actuar
o simular el proceso de la meiosis en el aula de laboratorio.
1. Elija a una persona para ser el reportero. El trabajo de esta persona será el de ir
explicando lo que va ocurriendo.
2. Elija al menos, 4 estudiantes para interpretar los cromosomas, 2 estudiantes para
ser los centriolos y un estudiante para manipular la membrana nuclear. Los
estudiantes que sobren serán la membrana celular.
3. Si pueden graben un video del proceso.
A medida que vayan actuando todas las fases de la meiosis, deberán buscar la manera
de representar cada fase de la célula y cada evento que ocurre durante la división
celular.
~ 14 ~
Parte 2: Llena el siguiente cuadro con las diferencias entre mitosis y meiosis.
Mitosis Meiosis
Número de cromosomas
Entrecruzamiento
Apareamiento de
cromosomas homólogos
Número de divisiones
celulares
~ 15 ~
Parte 3: Dibuje las etapas de la meiosis e indique el nombre de cada etapa e incluya
las siguientes estructuras: dos cromosomas, centrómero, centríolos, centrosoma, huso
acromático y microtúbulos, citocinesis, entrecruzamiento, etc.
Profase I Profase II
Metafase I Metafase II
Anafase I Anafase II
Telofase I Telofase II
~ 16 ~
Parte 4: Use estos problemas para probar su comprensión de la meiosis.
~ 17 ~
PRÁCTICA # 3: Genética Mendeliana
Introducción
~ 18 ~
La generación parental (Generación P) para dos características puede ser representada
por los rasgos A = color y V = textura. A su vez la dominancia es representada por la
mayúscula o minúscula. Los genotipos de la generación parental serían = AAVV
(homocigótico dominante) x aavv (homocigótico recesivo). Por entrecruzamiento de
razas puras (siguiendo la 1era Ley), resultarían los siguientes gametos AAVV x aavv =
AaVv, AaVv, AaVv, AaVv.
Las unidades descritas por Mendel como Factor Hereditario recibieron el nombre de
genes. Durante los primeros decenios posteriores al redescubrimiento del trabajo de
Mendel, los genetistas empezaron por ampliar los principios de Mendel al
correlacionar la transmisión de información genética de generación en generación con
el comportamiento de los cromosomas durante la meiosis (Solomon et al., 2001). Los
genetistas estudian no sólo la transmisión de genes, sino también la expresión de la
información genética.
Objetivo
Solomon et al., 2013 [9na Edición]: Capítulo 11. Los principios básicos de la herencia:
págs. 237-262.
Investigue y Estudie
1. Definir los siguientes términos: gametos, gen, loci, alelo, alelos múltiples, alelos
dominantes, alelos recesivos, dominancia incompleta, codominancia, fenotipo,
genotipo, homocigote, heterocigote, di-híbrido, poli-híbrido.
2. Formule las leyes de Mendel en sus propias palabras.
3. ¿Qué son los genes mitocondriales y cómo se heredan?
4. ¿Qué es el pedigrí y cómo se interpreta?
5. ¿Qué es el factor Rh y cómo se hereda?
6. ¿Qué es el cuadro de Punnet y cómo se organiza?
~ 19 ~
Materiales
Para la casa
3. En el ser humano el color pardo de los ojos es dominante (A) sobre el color azul,
el cual es recesivo (a). Una pareja en la que el hombre tiene los ojos pardos y la
mujer ojos azules tienen dos hijos, uno de ellos es de ojos pardos y otro de ojos
azules. De acuerdo con esto determinar:
3.1 El genotipo del padre.
3.2 La probabilidad de que el tercer hijo sea de ojos azules.
~ 20 ~
Parte 2: Cruces di-híbridos
5. En los conejillos de india, el pelo negro (N) es dominante sobre el pelo blanco (n)
y el pelo rúvido es dominante (R) sobre el pelo liso (r). ¿Qué fenotipo tiene:
a) un macho Rrnn;
b) una hembra rrNn y
c) la generación F1?
En el laboratorio
7.1 ¿Cuáles son todos los posibles genotipos y fenotipos parentales para este
caso?
~ 21 ~
7.4 ¿Cuál será la probabilidad de que un hijo normal (sano) de estos padres sea
portador de la enfermedad?
8.2 Si se casa con una mujer normal cuya madre era albina.
~ 22 ~
11. El daltonismo rojo-verde es ligado al cromosoma Xd. Si una mujer daltónica (XdXd)
tiene hijos con un hombre normal (XY),
Parte 3: Epítasis
12. El color de pelo de los ratones es determinado por 2 genes que muestran
epítasis. La presencia de pigmento es expresada por medio de un alelo
dominante (NN o Nn) y la ausencia de color es representada por alelos recesivos
(nn). Si el color está presente, un segundo locus determina el color del pelo (AA
o Aa) por pelo agutí, y (aa) por pelo negro.
¿Qué proporción fenotípica y de genotipos esperan encontrar en las
generaciones F1 y F2 como resultado de un cruce entre un ratón AANN x
aann?
~ 23 ~
13. ¿Estos rasgos son dominantes o recesivos? ¿Por qué?
13.1 13.2
14. Albinismo:
~ 24 ~
Parte 5: Codominancia y alelos múltiples
15. Los grupos sanguíneos en los seres humanos (A, B, AB y O) son los resultados de 3
alelos para un gen en la población humana (IA, IB, i). Cada persona puede tener
solamente ___ alelos. De los siguientes cruces, indique los genotipos para la
generación F1 y en qué frecuencia se encuentran.
15.1 IA i x IB i 15.2 IA IB x IA i
16.2 ¿Qué pasa si una persona con un grupo sanguíneo A recibe sangre tipo B?
~ 25 ~
17. En un caso de paternidad ambiguo, Madame Jolie tiene sangre tipo A, y su hijo
sangre O. Madame Jolie tenía 2 amantes en el momento de la concepción.
Señor Pitt, de sangre tipo A y Señor Thornton, de sangre tipo AB. ¿Quién es
el padre y porqué?
~ 26 ~
PRÁCTICA # 4: Replicación, Transcripción y Traducción
Es el mecanismo que permite al ADN duplicarse (es decir, sintetizar una copia
idéntica). De esta manera de una molécula de ADN única, se obtienen dos o más
"clones" de la primera. Esta duplicación del material genético se produce de acuerdo
a un mecanismo semiconservativo, lo que indica que las dos cadenas complementarias
del ADN original, al separarse, sirven de molde cada una para la síntesis de una nueva
cadena complementaria de la cadena molde, de forma que cada nueva doble hélice
contiene una de las cadenas del ADN original. Gracias a la complementación entre las
bases que forman la secuencia de cada una de las cadenas, el ADN tiene la propiedad
de duplicarse idénticamente, lo que permite que la información genética se transmita
de una célula madre a las células hijas.
~ 27 ~
aproximadamente 99% idénticos en todos los seres humanos, pero ¡el 1% de variación
es muy importante! La variación en la secuencia de los nucleótidos produce alelos de
un mismo gen y los alelos producen variación a nivel proteínico. ¡Por esto no somos
todos idénticos!
Figura 1.
Izquierda: replicación del ADN. La doble hélice es desenrollada y cada hebra hace de
plantilla para la síntesis de la nueva cadena. El ADN polimerasa añade los nucleótidos
complementarios a los de la cadena original. Derecha: proceso de transcripción del
ARN mensajero y síntesis de proteínas.
Objetivo
Solomon et al., 2013 [9na Edición]: Capítulo 13. Expresión génica: págs. 282-306.
~ 28 ~
Investigue y Estudie
1. A su criterio, ¿cómo piensa usted que se lleva a cabo la duplicación del ADN, de
manera conservativa, semiconservativa o dispersiva? Consulte y describa el
experimento de Meselson y Stahl.
2. Explique el proceso de replicación, incluyendo las enzimas involucradas en este.
3. ¿Qué es una proteína? Diga algunos ejemplos de proteínas.
4. ¿Qué proteína es la encargada de romper los puentes de hidrógenos que unen
las dos hebras del ADN?
a) Primasa b) ADN polimerasa c) ARN polimerasa d) Helicasa
5. Explique el proceso de transcripción, incluyendo las enzimas involucradas en este.
6. ¿Qué es el TATA box? ¿Dónde se encuentra? ¿Para qué se usa?
7. Explique el proceso de traducción, incluyendo las enzimas involucradas en este.
8. ¿Qué es el ARNm, ARNr y ARNt? ¿Cuál es la función de cada uno?
9. ¿Qué es el factor de transcripción?
10. ¿Cuál es la función de los ribosomas? ¿Cuál es la diferencia entre la subunidad
mayor y la subunidad menor de un ribosoma?
Materiales
En el laboratorio
~ 29 ~
Fase No. 1: ___________________________
2. ¿Qué semejanzas y diferencias tiene este proceso con la replicación del ADN?
3. ¿Qué es un codón?
Tabla 1. Transcripción
Nucleótido Nucleótido
ADN ARN
A
G
C
T
~ 30 ~
Fase No. 2: ________________________
1. ¿Qué tipos de ARN se necesitan para esta fase? Dibújelos e identifique las partes
importantes.
2. ¿Qué es un anticodón?
~ 31 ~
5. ¿Para qué sirve la Tabla 3 y cómo se utiliza?
~ 32 ~
Parte 3: ¿Cómo el ADN determina los rasgos de un organismo?
En esta simulación, vamos a examinar el ADN de SNORKS, una especie nueva
descubierta en el planeta. Los snorks tienen solamente un cromosoma, con 9 genes.
Su misión es la de analizar los genes y determinar qué rasgos tiene el organismo
seleccionado y dibujar su identikit.
Para simplificar, las secuencias de los genes serán mucho más cortas que la de los
genes reales. Cada gen, tendrá 2 alelos.
~ 33 ~
Snicker Snork
AUG | GUC AGC AAA | UAC CCC GAA GAG AAA | CUC UUA AGU GCG | GCU GUU
GUG | CAU CAU | GUU UUU UAC | GAU AUC UUA CUG CCC ACC | AAU AAC AAU
GCC | UUU UCU CAC | UAA
Dibujo:
~ 34 ~
Snuffle Snork
AUG |GUA UCU AAA | GUU CUC ACU CCA AAG | CUU CUC CUC CCC | GUU GCG
GCU | CAU CAC | GUA UUU UAU | GAC AUU CUU CUG CCC ACA | AAU AAU AAU
GCA | UUC UCG CAC | UAA
Dibujo:
~ 35 ~
Snapple Snork
AUG | GUC AGC AAA | UAC CCC GAA GAA AAA | CUC UUA AGU GCG | GUU GCG
GCU | CAC AUU | UCU CCC GUA | GAU AUU CUC CUC CCC ACC | GUU AAU AAU
GCA | UUC UUU GGU | UAA
Dibujo:
~ 36 ~
Snoopy Snork
AUG | GUA UCC CUC | UAC CCC GAA GAG AAA | UUA UUG CUG CCC | GUG GCA
GCU | CAU AUU | UCU CCC GUA | GAC AUU CUU CUG CCC ACA | AAU AAC AAU
GCC | UUU UCU CAC | UAA
Dibujo:
~ 37 ~
PRÁCTICA # 5: Reproducción
Introducción
Objetivos
~ 38 ~
Capítulos del Libro de Biología
Solomon et al., 2013 [9na Edición]: Repasar Capítulo 50. Reproducción: págs. 1077-
1105.
Investigue y Estudie
Materiales
~ 39 ~
Para la casa
~ 40 ~
En el laboratorio
Figura 1.
Líneas de disección de ratón blanco de laboratorio.
Observe la anatomía interna del animal. ¿Qué estructuras, órganos y/o sistemas puede
identificar?
Figura 2.
Segundo paso de la disección de ratón blanco de laboratorio.
~ 41 ~
Proceder de la misma forma con la membrana transparente que lo cubre.
~ 42 ~
PRÁCTICA # 6: Embriología y Desarrollo Embrionario
Introducción
Los patrones básicos de desarrollo son notablemente similares en todos los animales,
en particular entre los vertebrados. Los estudios experimentales sobre el desarrollo de
los erizos de mar, los anfibios, las aves y los mamíferos han provisto un fundamento
sólido sobre la comprensión del desarrollo humano. No obstante, el estudio de los
embriones humanos en la etapa previa a la implantación fue posible con el
advenimiento, hace aproximadamente veinte años, de las técnicas de fecundación in
vitro (FIV) para el tratamiento de la infertilidad.
~ 43 ~
Figura 1.
Se muestran las 23 etapas de Carnegie
Las etapas de Carnegie se basan en el desarrollo morfológico externo y/o interno del
embrión vertebrado, y no son directamente dependientes de la edad o el tamaño. El
período embrionario humano se divide en 23 etapas de Carnegie. Los criterios más
allá de las características morfológicas incluyen la edad en días, el número de somitas
presentes y la longitud embrionaria. Estas etapas también se muestran en la película;
“Crecimiento humano de la etapa de Carnegie a través del período embrionario”.
Estas etapas se pueden aplicar a todos los vertebrados, y la mayoría de los embriones
vertebrados se desarrollan durante su período embrionario más o menos de la misma
manera, por lo que podemos comparar directamente la sincronización del desarrollo
para las diversas especies.
Objetivos
~ 44 ~
Capítulos del Libro de Biología
Solomon et al., 2013 [9na Edición]: Capítulo 51. Desarrollo animal: págs. 1106-1126.
Investigue y Estudie
1. ¿Qué es un embrión?
2. ¿Qué son las capas germinales?
3. Defina: mórula, blástula, gástrula, gastrulación, organogénesis, vérnix y lanugo.
4. ¿Qué órganos o estructuras derivan de cada una de las capas germinales?
5. Realicen una búsqueda sobre los principales eventos ocurridos durante el
desarrollo embrionario y fetal humano, desde la fecundación hasta el nacimiento,
y descríbanlos brevemente.
6. ¿Qué es el aborto y cómo se puede clasificar?
7. Investigue, ¿cómo se preservan los fetos o embriones post mortem para su
posterior estudio?
Materiales
Para la casa
Parte 1: https://vimeo.com/123351523
~ 45 ~
Parte 2. Documental: En el vientre materno (In the Womb; National Geographic
Society)
~ 46 ~
¿De dónde toma el embrión todo lo que necesita?
_______________________________________________________________________
¿A las cuántas semanas se forma el corazón?
_______________________________________________________________________
¿Qué es lo que activa a las pruebas caseras de embarazo?
_______________________________________________________________________
¿Por qué ocurre el paladar hendido?
_______________________________________________________________________
¿Qué porcentaje de nuestros genes nos hace humanos? _______________ ¿qué %
compartimos con perros? __________
¿A partir de cuántas semanas se le llama feto al embrión? ___________________ ¿qué
significa en latín? _________________
¿Qué sustituye al saco vitelino en la 8va semana?
_______________________________________________________________________
¿Qué es la placenta?
_______________________________________________________________________
¿Qué provoca la ola hormonal de los primeros meses de embarazo?
_______________________________________________________________________
¿Cuál es la función de la progesterona secretada durante el embarazo?
_______________________________________________________________________
¿Cuál es la importancia del movimiento del feto?
_______________________________________________________________________
¿Cuál es el máximo número de latidos que tiene el feto y ocurre a las 9 semanas?
_______________________________________________________________________
¿A partir de cuándo se realiza el primer ultrasonido (sonografía)?
_______________________________________________________________________
¿Explique cómo se forman las imágenes de ultrasonido?
_______________________________________________________________________
¿Por qué el ultrasonido no sirve para visualizar el estómago o intestino de un adulto?
_______________________________________________________________________
¿Qué tipo de imágenes compara el documental con el “telescopio Hubble” y son
capaces de dar imágenes en tiempo real del feto?
_______________________________________________________________________
¿Cuáles comportamientos se han podido ver en estas imágenes?
_______________________________________________________________________
¿Cuáles mellizos comparten el mismo saco amniótico y placenta?
_______________________________________________________________________
¿Cuántos tipos de células distintas se forman entre las 6 y 11 semanas?
_______________________________________________________________________
~ 47 ~
¿En qué trimestre es más alto el riesgo de aborto?
_______________________________________________________________________
¿Cuáles factores aumentan el riesgo de aborto?
_______________________________________________________________________
¿Qué porcentaje de óvulos fertilizados sobrevive el embarazo?
_______________________________________________________________________
¿Cuáles dos razones posibles se mencionan para que las manos se desarrollen antes
que los pies? __________________
¿Cuál es la razón evolutiva para que el feto humano tenga tanta fuerza de sujeción en
las manos? __________________
¿A partir de qué semana comienza a funcionar el sistema digestivo? ____________
¿qué traga el feto? _______________
¿A partir de qué semana aumentan las probabilidades de sobrevivir si nace prematuro
el feto? _____________________
¿En cuál trimestre aumenta más de peso el feto?
_______________________________________________________________________
¿Cuál es el único sentido que el feto no puede utilizar hasta que nace?
_______________________________________________________________________
¿De qué le sirve al feto el abrir y cerrar los ojos?
_______________________________________________________________________
¿Por qué el color de los ojos no se forma totalmente antes de nacer?
_______________________________________________________________________
¿Cuál es el sentido más desarrollado en el feto? _____________________ ¿Por qué?
_______________________________________________________________________
~ 48 ~
En el laboratorio
Nos trasladaremos a los laboratorios de medicina del INTEC para observar embriones
humanos reales.
Registro de fetos
~ 49 ~
PRÁCTICA # 7: Microbiología
Introducción
Las bacterias al igual que otros microorganismos requieren para su crecimiento de una
fuente de energía exógena y nutriente esenciales tales como son el agua, carbón,
nitrógeno, minerales y factores de crecimiento, además de las condiciones ambientales
apropiadas como son pH, temperatura, presión osmótica y oxígeno atmosférico.
Cuando las bacterias se cultivan en el laboratorio tales requerimientos se llenan con los
medios de cultivo los cuales pueden ser de muy variados tipos de acuerdo al
microorganismo que se desee estudiar. Muchos materiales naturales como jugos,
leche, vegetales y carnes pueden ser usados como bases para medios de cultivo.
El medio de cultivo puede ser líquido como los caldos, semisólido o sólido
dependiendo de la consistencia que adquiere el medio líquido al agregar diferentes
concentraciones de un solidificante como el agar, que es un extracto de algas marinas.
~ 50 ~
El agar no es utilizado como nutriente por la mayoría de las bacterias, así pues, actúa
solamente como solidificante. Se funde alrededor de 100° C y permanece líquido
hasta que se enfría de 42° a 43°C. La gelatina se puede usar también, pero con el
inconveniente de que funde a 25°C y puede ser hidrolizada por muchas bacterias.
Sintéticos: son aquellos medios preparados con alta pureza y en los cuales la
composición se conoce en forma precisa. Su uso es muy definido, por ejemplo, medios
para ensayo de vitaminas o para enriquecimiento.
Medios de cultivo de uso general: en este grupo se encuentran los medios que
contienen los nutrientes básicos y no contienen sustancias inhibitorias por lo que en
ellos pueden crecer una gran variedad de heterótrofos. Entre estos medios tenemos
agar de soya y tripticaseína, agar de Müller Hinton, agar nutritivo, etc.
Medios de cultivo diferencial: este tipo de medios es usado para distinguir entre
diferentes tipos de bacterias. Usualmente contienen colorantes o indicadores de pH
que darán un color característico a las colonias o virarán el color del medio de cultivo
de acuerdo al microorganismo que se trate.
~ 51 ~
de ciertos grupos de microorganismos. Se usan para aislar organismos particulares e
inhibir el crecimiento de los no deseados.
Entre los medios selectivos y diferenciales tenemos:
Agar de MacConkey: el cual contiene una mezcla de sales biliares que inhiben a los
microorganismos grampositivos, además de lactosa y como indicador rojo de fenol
para distinguir las bacterias que fermentan la lactosa de las que no lo hacen.
Agar EMB (eosina azul de metileno): mediante el azul de metileno y la eosina inhibe
los organismos grampositivos. Al mismo tiempo, al igual que el Agar de MacConkey,
permite diferenciar bacterias que fermentan la lactosa y/o a la sacarosa de las que no
lo hacen.
El agar de sal y manitol: por su alto contenido de NaCl (7.5%) inhibe a las bacterias
que no lo toleran, al mismo tiempo con el indicador rojo de fenol sirve para detectar la
fermentación del manitol. Se utiliza para el aislamiento y diferenciación del género
Staphylococcus.
Para disolver los medios de cultivo deshidratados se debe utilizar agua recién destilada
o desmineralizada con un pH lo más cercano posible a 7.0. El recipiente que se utilice
debe ser de preferencia un matraz Erlenmeyer con una capacidad mayor al volumen
de medio que se va a preparar para que se pueda agitar fácilmente. Los medios que
no contienen agar se pueden disolver fácilmente en agua fría o con un ligero
calentamiento, sin embargo, si el medio contiene agar o gelatina requerirá de
calentamiento.
~ 52 ~
Ajuste del pH
Esterilización
Los medios que van en tubo se pueden esterilizar directamente en los tubos; en el
caso de los medios en cajas de Petri se pueden esterilizar en tubos con el volumen
para vaciar una placa (aprox. 20 ml cada uno) o bien matraces para varias placas. Si en
las instrucciones del medio no se indica otra cosa, la esterilización se lleva a cabo en
autoclave a 121 grados Celsius por 15 minutos.
Objetivos
Solomon et al., 2013 [9na Edición]: Capítulo 24. Virus y agentes subvirales: págs. 501-
516 y Capítulo 25. Bacterias y arqueas: págs. 517-536.
~ 53 ~
Investigue y Estudie
1. ¿Qué es un microorganismo?
2. ¿En cuáles reinos se encuentran los microorganismos?
3. Mencione 2 o 3 características de los siguientes reinos: protistas, hongos,
bacterias, archaebacterias, animal, planta.
4. ¿A qué se le denomina tinción? ¿Qué tipos de tinción existen y para qué se
utilizan?
5. ¿Por qué se deben de esterilizar los medios de cultivo?
6. ¿Quién rompió con el paradigma de la generación espontánea y cuál otro
descubrimiento realizó?
7. ¿Cuáles son los principales microorganismos que afectan la salud humana?
8. ¿Cuál es la diferencia entre una bacteria y una archaebacteria?
Materiales
En el laboratorio
Parte 2: Cultivo
En cada una de las mesas de laboratorio encontrarán 3 placas de Petri con diferentes
medios de cultivo. A cada una de estas placas de Petri se les sembrará con un agente
diferente (como, por ejemplo, agua del baño, frotis de la meseta de la cafetería, frotis
de la meseta del baño, frotis del piso, entre otros). Una vez sembradas, estas placas
~ 54 ~
serán incubadas a temperatura ambiente en un área donde las condiciones
ambientales sean lo más estables posibles y cada 2 días se tomarán notas sobre lo
observado. Deben determinar si existe o no crecimiento de algún microorganismo y
describir lo observado.
Complete la tabla:
II. Composición:
~ 55 ~
Parte 3: Tinción de Gram
Posteriormente se trata con una disolución de yodo, que a su vez forma un complejo
con el cristal violeta insoluble en agua y sólo medianamente soluble en alcohol o
acetona. Las células se tratan después con alcohol para diferenciarlas: las células Gram
positivas retienen el complejo colorante-yodo, por lo que las vemos de color morado-
azules; y las células Gram negativas son decoloradas por el alcohol, por lo que se
hacen visibles mediante la coloración de contraste, en este caso la fucsina.
Figura 1.
Preparación de un frotis bacteriano.
~ 56 ~
Dibuje, describa y tabule lo observado en la
preparación:
~ 57 ~
PRÁCTICA # 8: Evolución
Introducción
Las presiones de selección son cualquier evento o condición que afecta la capacidad
de un individuo o población para sobrevivir y/o reproducirse. Los genotipos que dan
como resultado un rasgo beneficioso que aumentan la aptitud se somete a presión de
selección positiva, y los genotipos que resultan en un rasgo desventajoso que reduce
la aptitud sufren una presión de selección negativa.
Las mutaciones son cambios genéticos aleatorios que son causados por muchos
factores diferentes y que pueden dar lugar a rasgos perjudiciales, neutros o
beneficiosos en un individuo. Las mutaciones que pueden pasarse a la descendencia
pueden proporcionar nuevos genes para que actúe la selección natural. La
transferencia horizontal de genes es otro mecanismo que puede introducir nuevos
genes en un individuo o población. La transferencia horizontal de genes es el paso de
material genético entre individuos de diferentes especies. (Por ejemplo, algunos virus
insertan permanentemente su ADN viral en el ADN humano). A veces, el nuevo ADN
extraño puede pasarse a la descendencia, lo que proporciona nuevos genes para que
actúe la selección natural.
~ 58 ~
La deriva genética describe la eliminación aleatoria de un rasgo genético de una
población. Los mecanismos de deriva genética incluyen deriva aleatoria (también
conocida como "mala suerte"), el efecto de cuello de botella y el efecto fundador. La
aptitud del rasgo no influye en la deriva genética.
Por ejemplo, una población con 50% DD, 25% Dd y 25% dd puede expresarse como
0.5 + 0.25 + 0.25 = 1. El principio Hardy-Weinberg hace muchas suposiciones: asume
que la población es grande y estable, asume apareamiento aleatorio, y la ausencia de
mutaciones, ausencia de flujo genético y asume que no está ocurriendo selección
natural. Sin embargo, en la naturaleza, estas condiciones raramente existen.
Objetivos
- Calcular las frecuencias genotípicas y alélicas de una población.
- Identificar cuando una población se encuentra en equilibrio Hardy-Weinberg.
- Realizar simulaciones para observar los cambios en las frecuencias alélicas
ocasionados por la selección estabilizadora o negativa.
~ 59 ~
Capítulos del Libro de Biología
Solomon et al., 2013 [9na Edición]: Capítulo 19. Cambio evolutivo en poblaciones:
págs. 411-425.
Investigue y Estudie
Materiales
~ 60 ~
Para el Laboratorio
BB: B:
Bb: b:
bb:
~ 61 ~
Parte 2. Principio de Hardy-Weinberg
BB: B:
Bb: b:
bb:
~ 62 ~
Parte 3. Estableciendo 100% de presión de selección negativa
3. Sin mirar las cuentas en la Población 1, agite o mezcle las cuentas, seleccione
aleatoriamente 2 cuentas (alelos) del vaso de precipitado.
7. Repite los pasos 2 a 6 hasta que todas las cuentas hayan sido eliminadas de la
Población 1.
9. Repita los pasos 2-6 tres veces más generando Poblaciones 3-5.
~ 63 ~
Tabla 3
Frecuencias genotípicas
Bb b
bb
Total
Bb b
bb
Total
Bb b
bb
Total
Bb b
bb
Total
~ 64 ~
10. En el papel cuadriculado, grafica tus resultados e identifica:
~ 65 ~
Parte 4. Responda las siguientes preguntas sobre las simulaciones anteriores y el
gráfico.
1. Al simular una presión de selección negativa del 100%, ¿la frecuencia del alelo
recesivo aumentó o disminuyó? ¿Por qué?
2. Al simular una presión de selección positiva del 100%, ¿la frecuencia del alelo
recesivo aumentará o disminuirá? ¿Por qué?
3. Al simular una presión de selección negativa del 100%, ¿cómo cambiaron las
frecuencias alélicas tanto para el alelo dominante como para el alelo recesivo de
generación en generación? ¿Por qué?
~ 66 ~