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    Tripanosomiasis Practica Lab

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    patrick cespedes
    La parasitología es la rama de la biología que estudia el fenómeno del parasitismo. Por un lado, estudia a los organismos vivos parásitos, ​ y la relación de ellos con sus hospedadores y el medio ambiente.

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    Tripanosomiasis Practica Lab

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    La parasitología es la rama de la biología que estudia el fenómeno del parasitismo. Por un lado, estudia a los organismos vivos parásitos, ​ y la relación de ellos con sus hospedadores y el medio ambiente.

    Título original

    TRIPANOSOMIASIS PRACTICA LAB

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    La parasitología es la rama de la biología que estudia el fenómeno del parasitismo. Por un lado, estudia a los organismos vivos parásitos, ​ y la relación de ellos con sus hospedadores y el medio ambiente.

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    La parasitología es la rama de la biología que estudia el fenómeno del parasitismo. Por un lado, estudia a los organismos vivos parásitos, ​ y la relación de ellos con sus hospedadores y el medio ambiente.

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    TRIPANOSOMIASIS

    AMERICANA
    DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO

    Dra. Claudia L. Valera M.


    INSECTOS HEMÍPTEROS
    •Subfamilia Triatominae
    • Triatoma infestans

    Conocidos popularmente como vinchucas, chinches,


    chinchorros y chirimachas, barbeiro.

    Infectado por un PROTOZOO


    •Trypanosoma cruzi

    •Por transfusiones de sangre.


    •Por transplantes de órgano.
    •De la madre al hijo, durante el
    embarazo.
    •Alimentos contaminados por los
    insectos vectores (excremento, orina).
    •El Chagas es casi 100% curable si se trata en
    sus etapas iniciales con los medicamentos:
    Benznidazol y Nifurtimox.

    •La enfermedad de Chagas es endémica en 21


    países de las Américas y afecta a un estimado de
    6 millones de personas.
    TRIPANOSOMIASIS AMERICANA:

    Tres etapas clínicas: Aguda, indeterminada y crónica.


    Período ventana (prepatente), cuando T.cruzi ingresa al
    organismo, abarca entre 7 a 15 días, después del cual recién se
    pueden detectar parásitos circulantes y posteriormente anticuerpos.

    Tres aspectos:
    Cuándo realizar un análisis,
    Qué análisis realizar,
    Cuáles son los objetivos del análisis, para evitar la realización de
    estudios parasitológicos y/o serológicos en un momento
    inadecuado.

    La consecuencia posibles falsos resultados negativos.


    MÉTODOS DIAGNÓSTICOS

    Pruebas directas e indirectas


    La elección del examen a realizar
    Depende de cada paciente.
    El método de transmisión.
    La fase de la enfermedad.

    Métodos directos
    La presencia del parásito es detectada mediante observación directa,
    indicados en fase aguda, detección del tripanosoma en fresco,
    métodos de concentración.
    Detectan el parásito en la sangre del paciente, suelen denominarse
    métodos parasitológicos, y la mayoría están basados en la
    microscopía.
    METODOS DIAGNÓSTICOS
     Métodos Indirectos Parasitológicos
     Xenodiagnóstico y el Hemocultivo
    Poca utilidad en la práctica en fase aguda
    La serología positiva es suficiente criterio para la confirmación
    diagnóstica en la fase crónica.
    La negatividad en la fase crónica se debe a la presencia intermitente
    del parásito en sangre.
     Métodos Serológicos
    Son la esencia del diagnóstico de la infección en la fase crónica.
    En una etapa inicial de la infección, los anticuerpos contra el T. cruzi
    son de la clase IgM, siendo reemplazados gradualmente por IgG
    XENODIAGNÓSTICO
    DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO

    La Organización Mundial de la Salud (OMS) recomienda dos pruebas


    basadas en diferentes principios y antígenos.
    En caso de discordancia se realiza una tercera prueba para confirmar la
    infección.
    Detección de anticuerpos IgG
     Técnicas indirectas más empleadas son: Inmunofluorescencia indirecta
    (IFI), Hemoaglutinación indirecta (HAI) y el Enzimoinmunoanálisis
    (ELISA).
     Estas pruebas de detección de anticuerpos son muy sensibles, pero su
    especificidad está limitada por su reactividad cruzada con anticuerpos
    de pacientes con otras parasitosis como Leishmaniasis (enfermedad
    con la misma distribución geográfica que la enfermedad de Chagas).
    Hemaglutinación indirecta (HAI)
    Se sensibilizan glóbulos rojos con antígeno del parásito.
    Basada en la propiedad que tienen las proteínas de adsorberse sobre la
    superficie de los glóbulos rojos de carnero o ave modificada químicamente.
    Si en el suero del paciente existen anticuerpos contra los antígenos del
    parásito, los glóbulos rojos se aglutinan.
    Se puede observar:
    Ensayo inmunoenzimático (ELISA)
    Permite observar la presencia de anticuerpos antiinmunoglobulinas
    ligados a una enzima que en presencia de su sustrato forma un
    producto colorido.
    Por la alta sensibilidad se recomienda como la primera prueba a
    realizar en el proceso de confirmación diagnóstica.
     PASOS GENERALES
    ELISA INDIRECTO
    1. Tapizado del pocillo con el Ag o Ac
    2. Adición de la muestra problema con la
    mezcla de Ags o Acs
    3. Unión del Ag o Ac especifico al Ag o Ac
    tapizado en el pocillo
    4. Lavado del pocillo para eliminar el exceso
    de Ag o Ac no unido
    5. Adición del Ac secundario marcado con la
    enzima
    6. Unión del Ac secundario al Ag o Ac
    7. Lavado del pocillo para eliminar el exceso
    de enzima no unida
    8. Adición del sustrato
    9. Unión del sustrato a la enzima
    10. Coloración
    INMUNOFLUORESCENCIA
     TIPOS:
     Inmunofluorescencia directa ID
    Usa un Ac marcado con el fluorocromo: Ac
    Primario (Ac 1°), el Ac marcado se une al Ag de
    membrana y se observa su fluorescencia al
    microscopio de luz UV.
    Se utiliza para la detección de antígenos en los
    microorganismos o los tejidos utilizando el
    anticuerpo primario marcado.
    La muestra problema donde se quiere
    determinar el microorganismo, bacteria o tejido
    se extiende en un porta, se añade el Ac
    marcado y tras lavado, se observa al
    microscopio de fluorescencia (un solo paso).
    INMUNOFLUORESENCIA
    INDIRECTA IFI

    Usa un Ac primario sin marcar que


    reacciona con el Ag de interés, luego un Ac
    secundario (Ac 2°) marcado se une al Ac1°
    y puede ser detectado por fluorescencia.
    Se usa para la detección de anticuerpos en
    suero
    La detección tiene mayor sensibilidad (que
    la directa) por presentar una mayor
    amplificación de señal debida a la unión de
    dos o mas Ac 2° por cada Ac 1°.
    INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA
     La técnica de IFI , emplea
    como Ag sobre la Epimastigotes
    de t. cruzi obtenidos de cultivo y
    fijados en laminas
     Que se realiza la reacción Ag-
    Ac. La formación de este
    complejo es evidenciada por una
    antiglobulina humana
     Marcada con fluoresceína.
    RESULTADO DE UNA IFI POSITIVA
    MUCHAS GRACIAS

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