1.00251.

0001
Microscopía
Kit de plateado de reticulina
según Gordon & Sweets
para la detección de fibras reticulares en tejido
histológico

Solamente para uso profesional

Producto sanitario para diagnóstico in vitro

Finalidad prevista
El presente “Kit de plateado de reticulina según Gordon & Sweets - para
la detección de fibras reticulares en tejido histológico” es utilizado para el
diagnóstico celular en la medicina humana y se emplea en el examen his-
tológico de muestras de origen humano. Se trata de un kit de tinción listo
para el uso que se utiliza para la visualización de estructuras de destino
(mediante fijación, inclusión, tinción, contratinción, montaje) en material
de examen histológico, como pueden ser cortes histológicos p. ej. del riñón,
del corazón o del hígado en combinación con otro in vitro diagnostica de
nuestra cartera.
Con el Kit de plateado de reticulina se determinan fibras reticulares en
muestras histológicas de tejido.
Las estructuras sin teñir son relativamente pobres en contrastes y apenas
si pueden diferenciarse bajo el microscopio óptico. Las imágenes generadas
con ayuda de las soluciones de tinción permiten a un examinador auto-
rizado y cualificado reconocer mejor la forma y la estructura. Tal vez se
requieren exámenes más complejos para un diagnóstico final. 

Principio
Las fibras de reticulina, en las que se puede precipitar plata metálica, pue-
den ser representadas mediante sales de plata.
Primero se oxida el material con permanganato potásico. Se forma una
plata metálica que procede de la solución amoniacal de nitrato de plata,
que se fija en las estructuras de destino en forma de precipitación de color
pardusco. El formaldehído acelera el proceso gracias a su efecto reductor.
Durante el matizado con cloruro de oro, la plata metálica es transformada
en el más estable compuesto de oro. Esto intensifica los resultados.
La plata inespecífica es ligada mediante tiosulfato sódico.

Material de las muestras

Muestras de tejido fijadas con formalina neutra tamponada
Espesor de corte recomendado para muestras punzonadas de la cresta
ilíaca y para cuerpos vertebrales 4 - 5 µm, otros tejidos 2 - 3 µm

Reactivos
Art. 1.00251.0001
Kit de plateado de reticulina según Gordon & Sweets
Componentes del envase:
El kit de tinción contiene
Reactivo 1: Solución de permanganato potásico 16 ml
Reactivo 2: Ácido sulfúrico 16 ml
Reactivo 3: Ácido oxálico 30 ml
Reactivo 4: Solución de sulfato de hierro (III) y amonio 30 ml
Reactivo 5*: Solución amoniacal de nitrato de plata 30 ml
Reactivo 6: Solución de formaldehído 30 ml
Reactivo 7: Solución de cloruro de oro 30 ml
Reactivo 8: Solución de tiosulfato sódico 30 ml

*N
 ota importante:
El conjunto de pipeta que acompaña el kit de test es enroscado en la
botella de vidrio (Reactivo 5) antes del primer uso. Para evitar el ensu-
ciamiento, no se debería volver a quitar después (la solución de nitrato
de plata es muy reactiva). La botella debería ser almacenada en posición
vertical con los otros componentes del kit de prueba según las instruccio-
nes.

Necesario además:
Art. 100121 Rojo nuclear en solución de aluminio sulfato al 0,1% 500 ml
para microscopía
Preparación de las muestras Resultado
La toma de muestra debe ser realizada por personal especializado. Fibras reticulares negro
Todas las muestras deben tratarse de acuerdo con el estado de la tecnología. Núcleos celulares rojo
Todas las muestras deben estar rotuladas inequívocamente. Fondo rojo
Deben usarse instrumentos adecuados para la toma de muestras y en la
preparación, y deben seguirse las instrucciones del fabricante para la apli- Colágeno rojo
cación / el empleo.
Al usar los correspondientes reactivos auxiliares deberán tenerse en cuenta Localización de errores
las respectivas instrucciones de empleo. Las técnicas de plateado pueden ser difíciles y precisan un especial esmero
Desparafinar de forma típica los cortes y rehidratar. durante la realización.

Preparación del reactivo Imagen Posible causa Remedio

Las soluciones utilizadas para los procesos de tinción están listas para el microscópica
uso, la dilución de las soluciones no es necesaria y empeora el resultado de Las fibras de La solución de cloruro Véase “Técnica”
la tinción así como la estabilidad. reticulina están de oro ha sido incubada
representadas de demasiado
forma débil
Técnica
Las fibras de El preparado no ha Aumentar el número de
La tinción con los reactivos 1 - 8 se realiza en un banco de tinción fabricado
reticulina están sido cubierto de forma gotas o servirse de histo-
de plexiglás o envuelto con plástico.
representadas de suficiente con reactivo marcador
Desparafinar de forma habitual los preparados histológicos y rehidratar en forma débil
serie descendente de alcohol.
Las fibras de Corte demasiado fino Véase “Material de las
Los reactivos son goteados sucesivamente sobre el corte de tal manera que reticulina están muestras”
el corte quede completamente cubierto. representadas de
Enjuagar con agua destilada sirviéndose de un frasco lavador. forma débil
No utilizar pinzas de metal, y tampoco permitir el contacto de otros objetos Las fibras de Almacenamiento Tener en cuenta lo indicado
metálicos con los preparados. reticulina están inadecuado / sobre el almacenamiento
Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los representadas de Caducidad del kit y la estabilidad
períodos indicados. forma débil o no
están representadas
en absoluto
Portaobjetos con preparado histológico
Falta de limpieza Enjuague insuficiente Véase “Técnica”
Agua destilada 10 segundos del preparado /
Precipitaciones
Reactivo 1 (solución de permanganato 4 gotas en 5 minutos Fibras de reticulina La solución de cloruro Véase “Técnica”
potásico) y cada caso están demasiado de oro ha sido incubada
Reactivo 2 (ácido sulfúrico) teñidas demasiado poco tiempo
dispensare in sequenza
Fibras de reticulina Corte demasiado grueso Véase “Material de las
Agua destilada 10 segundos están demasiado muestras”
teñidas
Reactivo 3 (ácido oxálico) 8 gotas 2 minutos
Agua destilada 10 segundos Notas técnicas
Reactivo 4 (solución de sulfato de hierro 8 gotas 2 minutos El microscopio usado debería corresponder a los requisitos de un laboratorio
(III) y amonio) de diagnóstico médico.
Si se utilizan histoprocesadores o aparatos automáticos de tinción, deberán
Agua destilada 10 segundos tenerse en cuenta las instrucciones de operación del fabricante, tanto del
aparato como del software.
Reactivo 5 (solución de nitrato de plata) 4 gotas 2 minutos
Agua destilada 10 segundos Diagnóstico
Reactivo 6 (solución de formaldehído) 8 gotas 2 minutos Los diagnósticos deberán ser establecidos solamente por personas autoriza-
das y cualificadas.
Agua destilada 10 segundos Deberán emplearse terminologías vigentes.
Este método debe aplicarse complementariamente en el diagnóstico humano.
Reactivo 7 (solución de cloruro de oro) 8 gotas 2 minutos Deberán elegirse y realizarse ensayos ulteriores según métodos reconoci-
Agua destilada 10 segundos dos.
Cada aplicación debería implicar controles adecuados (p. ej. ISOSLIDE®
Reactivo 8 (Solución de tiosulfato sódico) 8 gotas 2 minutos Reticulina, art. 1.00361.0001) para descartar resultados erróneos.
Agua destilada 10 segundos
Almacenamiento
Etanol 70 % 1 minuto
Guardar el Kit de plateado de reticulina según Gordon & Sweets - para la
Etanol 96 % 1 minuto detección de fibras reticulares en tejido histológico de +2 °C a +8 °C.
Etanol 100 % 1 minuto El conjunto de pipeta que acompaña el kit de test es enroscado en la bote-
lla de vidrio (Reactivo 5) antes del primer uso. Para evitar el ensuciamiento,
Etanol 100 % 1 minuto no se debería volver a quitar después (la solución de nitrato de plata es
muy reactiva). La botella debería ser almacenada en posición vertical con
Xileno o Neo-Clear® 5 minutos los otros componentes del kit de prueba según las instrucciones.
Xileno o Neo-Clear® 5 minutos
Estabilidad
Montar con Neo-Mount los preparados humedecidos con Neo-Clear®, o
®

los preparados humedecidos con xileno con Entellan® Nuevo y cubreob- El Kit de plateado de reticulina según Gordon & Sweets - para la detección
jetos. de fibras reticulares en tejido histológico puede ser utilizado hasta la fecha
de caducidad indicada.
Los preparados histológicos pueden ser montados y almacenados con Después de abrir el frasco por primera vez, el contenido almacenado entre
medios de montaje anhidros (p. ej. Entellan® Nuevo, Neo-Mount®) y cubre- +2 °C y +8 °C es utilizable hasta la fecha de caducidad indicada.
objetos después de la deshidratación (series de alcohol ascendentes) y la Los frascos deben mantenerse siempre bien cerrados.
clarificación con xileno o Neo-Clear®.
Capacidad
Resultado El envase es suficiente para hasta 110 aplicaciones.
Fibras reticulares negro
Notas sobre el empleo
Técnica “Tinción nuclear con solución de rojo nuclear sólido” Solamente para uso profesional.
después del plateado en el banco de tinción o en la cubeta de Para evitar errores, la aplicación debería ser realizada por personal especia-
tinción lizado.
Deben cumplirse las directivas nacionales sobre seguridad en el trabajo y
Rojo nuclear en solución de aluminio sulfato al 0,1% 3 minutos aseguramiento de la calidad.
Deben emplearse microscopios equipados de acuerdo con el estándar.
Agua destilada 10 segundos
Desaguar, clarificar y montar en húmedo de forma típica los cortes. Protección contra infecciones
Debe observarse a toda costa una protección eficaz contra infecciones de
acuerdo con las directivas de laboratorio.
Indicaciones para la eliminación de residuos Aviso general
El envase y posibles preparados de control restantes deberán ser elimi- Si se produce un incidente grave durante el uso o a causa del mismo, sírva-
nados de acuerdo con las directivas válidas respecto a la eliminación de se informar al fabricante y/o a su apoderado y a su autoridad nacional.
residuos.
Las soluciones usadas y las soluciones caducadas deben eliminarse como Literatura
desecho peligroso, debiéndose cumplir las directivas locales de eliminación
de residuos. Podrá pedirse información sobre los procedimientos de elimina- 1. R
 omeis - Mikroskopische Technik, Editors: Maria Mulisch, Ulrich Welsch,
ción bajo el Quick Link “Hints for Disposal of Microscopy Products” en 2015, Springer Spektrum, 19. Auflage
www.microscopy-products.com. Dentro de la UE tiene validez el REGLA- 2. Welsch Sobotta - Lehrbuch Histologie, Editor: Ulrich Welsch, 2006,
MENTO (CE) Nº 1272/2008 sobre la clasificación, el etiquetado y el ELSEVIER Urban&Fischer, 2. Auflage
envasado de sustancias y mezclas, por el que se modifican y derogan las 3. Histotechnik, Gudrun Lang, 2013 Springer Verlag, 2. Auflage
Directivas 67/548/CEE y 1999/45/CE y se modifica el Reglamento (CE) Nº
4. Theory and Practice of Histological Techniques, John D Bancroft, Marilyn
1907/2006.
Gamble, 2008, Churchill Livingstone ELSEVIER, 6th Edition
5. Laboratory Manual of Histochemistry, Linda L. Vacca, 1985, Raven Press
Reactivos auxiliares
6. Basiswissen Histologie und Zytologie, Karl Heinz Stein, Hellmut Flenker,
Art. 100121 Rojo nuclear en solución de aluminio sulfato 500 ml 1998, uZv, 2. Auflage
al 0,1% para microscopía
7. Histological & Histochemical Methods: Theory & Practice, J. A. Kiernan,
Art. 100361 ISOSLIDE® Reticulina Preparados de control 25 tests 1990, Pergamon Press, 2nd Edition
con tejido de referencia para la detección
de fibras reticulares en histología 8. Histological and Histochemical Methods, Theory and practice, J. A.
Kiernan, 2015, Scion Publishing Ltd, 5th Edition
Art. 100579 DPX nuevo 500 ml
medio de montaje anhidro
para microscopía
Art. 100974 Etanol desnaturalizado con aprox. 1 l, 2,5 l
1 % de metiletilcetona
para análisis EMSURE®
Art. 103699 Aceite de inmersión Type N según ISO 8036 frasco gotero de
para microscopía 100 ml
Art. 104699 Aceite de inmersión frasco gotero de
para microscopía 100 ml, 100 ml,
500 ml
Art. 107961 Entellan® Nuevo 100 ml, 500 ml,
medio de montaje rápido 1l
para microscopía
Art. 108298 Xileno (mezcla de isómeros) 4l
para histología
Art. 109016 Neo-Mount® frasco gotero de
medio de montaje anhidro 100 ml, 500 ml
para microscopía
Art. 109843 Neo-Clear® (sustituto de xileno) 5l
para microscopía

Clasificación de substancias peligrosas

Art. 1.00251.0001
Tener en cuenta la clasificación de substancias peligrosas en la etiqueta y
las indicaciones en la ficha de datos de seguridad.
La ficha de seguridad está disponible en el sitio web y a solicitud.
¡ATENCIÓN! Contiene sustancias CMR. Por favor, respete los avisos de se-
guridad correspondientes en la ficha de datos de seguridad.

Componentes principales del producto

Art. 1.00251.0001
Reactivo 1
KMnO4 5 g/l

Reactivo 2
H2SO4 8 g/l

Reactivo 3
C2H2O4 10 g/l

Reactivo 4
(NH4)Fe(SO4)2 x 12 H2O 25 g/l

Reactivo 5
AgNO3 10 g/l
NH3 16 g/l
NaOH 36 g/l

Reactivo 6
CH2O 40 g/l

Reactivo 7
HAuCl4 0,8 g/l

Reactivo 8 Observe las Fabricante Número de Código del

Na2S2O3 0,1 mol/l instrucciones de catálogo lote
uso

Otros productos de IVD

Art. 102472 ISOSLIDE® Warthin-Starry Preparados de control 25 tests
con tejido de referencia para la detección de Atención, observar la do- Utilizable hasta Delimitación de
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Art. 102473 ISOSLIDE® Metenamina Preparados de control 25 tests
con tejido de referencia para la detección de
estructuras argentafiles en tejido histológico Status: 2020-Oct-20
Merck KGaA, 64271 Darmstadt, Germany,
Tel. +49(0)6151 72-2440
www.microscopy-products.com
EMD Millipore Corporation, 400 Summit Drive
Burlington MA 01803, USA, Tel. +1-978-715-4321
Sigma-Aldrich Canada Co. or Millipore (Canada) Ltd.
2149 Winston Park, Dr. Oakville, Ontario, L6H 6J8
Phone: +1 800-565-1400