Guia de Practicas Micologia Unfv 2014

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GUIA DE PRACTICAS 2013

ESCUELA PROFESIONAL DE LABORATORIO Y ANATOMIA PATOLOGICA


FACULTAD DE TECNOLOGIA MEDICA
UNUVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL
MICOLOGIA
Autores: Lic. Roberto E. Rojas Len
Lic. Alberto Daz Tello
INTRODUCCI ON
Aunque algunas veces ignorados, los hongos son importantes por las diversas patologas que producen en el
humano, las micosis, estas enfermedades de acuerdo a su severidad van desde presentaciones meramente
cosmticas hasta aquellas en las que nos ponen en riesgo de muerte. En las ltimas dcadas, la casi totalidad del
diagnstico micolgico que se desarrollaba en la mayora de los laboratorios de Micologa, estaban relacionados
con las micosis superficiales y cutneas, el cambio drstico de ese hecho se debi, en particular, al avance
tecnolgico de la medicina y el aumento de la sobrevida de los pacientes con enfermedades complejas e
inmunodeficiencias, creando una gran y altamente poblacin susceptible. Pacientes en riesgo incluyen pacientes
con cncer (con y sin neutropenia), transplantes de rganos, SIDA, ciruga abdominal, alimentacin parenteral,
infantes prematuros, quimioterapia, entre otros. Hasta la dcada de los 80 las especies fngicas relacionas a
micosis en humanos eran de aproximadamente 150 especies, hasta el ao 2000 se incrementa sustancialmente
llegando casi a 400 especies, siendo una pequea fraccin de las aproximadamente 100,000 especies de hongos
descritas, lo cual hace suponer que cualquier hongo es un potencial oportunista. Por todo ello el alumno de
pregrado debe adquirir conocimientos y destrezas para el correcto aislamiento e identificacin de hongos de
importancia mdica.





















INDICE DE PRACTICAS
Prctica Tema
1 Preparacin de reactivos, colorantes y medios de cultivos.
2 Observacin de colonias fngicas y preparaciones microscpicas
3 Observacin de estructuras fngicas y hongos ambientales
4 Susceptibilidad antifngica por disco difusin (M44-A22004)
5 Aislamiento de hongos de fuentes naturales.
6 Examen de cultivos (fragmentacin del talo, cinta adhesiva, microcultivos).
7 Examen e identificacin de cultivos de dermatofitos
8 Procesamiento de microcultivos
9 Identificacin de levaduras (tubo germinativo, morfologa y fisiologa).
10 Examen e identificacin de cultivos de hongos demateaceos, Sporothrix schenckii.
11 Examen y procesamiento de muestras clnicas
12 Seminarios: CALIDAD EN EL LABORATORIO DE MICOLOGIA
13 Presentacin de Resultados del procesamiento de muestras clnicas.
14 Examen de preparaciones microcpicas de H. capsulatum y P. brasiliensis
15 Examen de preparaciones de hongos productores de micosis oportunistas


























I. PRACTICA No. 1
Preparacin de reactivos, colorantes y medios de cultivos
Marco terico
a. Medios de cultivo
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes,
preparados en el laboratorio, que suministran los compuestos necesarios para el desarrollo de los
microorganismos. Actualmente no existe un medio de cultivo que satisfaga el aislamiento de todos
los hongos de importancia mdica, por ello en el laboratorio de micologa existe una amplia
variedad de medios de cultivo, cuyos usos estn condicionados al hongo a investigar. Tambin son
importantes la temperatura y el tiempo incubacin, as como tambin los contenedores de los
medios de cultivo (placas o tubos). Generalmente se recomienda como temperatura de incubacin
de 28-30 C, as como tambin a temperatura ambiente. Para el reparto de los medios de cultivo en
micologa, eventualmente pueden usarse placas petri, por cuanto ofrecen mayor superficie en donde
pueda diseminarse el material a cultivar, pudiendo evitarse la deshidratacin dispensando
aproximadamente 40 ml. de medio de cultivo por placa; el uso de tubos tapa rosca de gran calibre
son lo ms recomendable, usualmente no presenta el problema de deshidratacin, no debiendo
dejarse la tapa totalmente cerrada, sino ligeramente abierta, para permitir una adecuada aireacin,
porque el desarrollo ser anormal o inhibido, retardando as la identificacin de los hongos. La
incorporacin de agentes antibacterianos como cloranfenicol (16 ug/ml), gentamicina (5-100
ug/ml), penicilina (20 ug/ml), estreptomicina (40 ug/ml), norfloxacina (5 ug/ml), y ciprofloxacina
(5ug/ml), incrementan considerablemente la posibilidad de obtener cultivos libres de presencia
bacteriana como contaminante. Tambin se puede usar la cicloheximida (actidione, 0.5 ug/ml), para
inhibir el desarrollo de hongos saprfitos de rpido crecimiento, pero este es adems capaz de
inhibir el desarrollo de algunas levaduras como C. neoformans, especies de Candida, especies de
Trichosporon, especies de Aspergillus, P. boydii, entre otros; por esta razn el uso de
cicloheximida debe ser cuidadosamente empleada en los medios usados. Para incrementar la
recuperacin de algunos hongos dimrficos se emplea Agar Infusin de Cerebro-Corazn con 10-
20% de sangre de carnero. Tambin se emplea compuestos especficos o indicadores para poner de
manifiesto caracteres bioqumicos esenciales distintivos de gneros y especies.

b. Reactivos y colorantes
Para el estudio de los hongos es necesario del uso de reactivos y colorantes. Si se trata de una
muestra clnica (pus, esputo, raspados de piel, fragmentos de pelo, etc.) es necesario el empleo de
aclarantes que permitan resaltar las estructuras fngicas al disolver el moco o queratina de la
muestra. Teir es un proceso de colorear artificialmente los microorganismos con colorantes o
reactivos con el objeto de facilitar su observacin y estudio al microscopio. Los colorantes son
compuestos orgnicos conformados por anillos bencnicos que tienen un grupo auxocromo
(intensifican el color y mejoran la afinidad del colorante) y uno cromforo (imparte color). Los
colorantes deben conservarse en frascos de color mbar. Se recomienda preparar en cantidades para
un consumo no mayor de un mes. Cada vez que las soluciones colorantes sean trasvasadas a los
pequeos cuentagotas que se emplean para la tincin, deben filtrarse. Los frascos cuentagotas y sus
tapas deben ser lavados con todo cuidado cada vez que se renueve su contenido.

Competencias
Explica la preparacin de medios de cultivo, colorantes y reactivos utilizados en el laboratorio
de micologa.
Materiales y equipos
a. Peptona
b. Glucosa
c. Agar
d. Agar micobiotic o micosel
e. Papa
f. Granos de arroz blanco no enriquecido
g. Harina de maz


h. Tween 80
i. Agua destilada
j. Material de vidrio (tubos tapa rosca, probeta, matraz, beaker, otros)
k. Papel filtro
l. Fenol
m. Azul de metileno
n. Acido lctico
o. Glicerina
p. Azul de algodn o sol. acuosa 1%
q. Hidrxido de potasio
r. Mechero de bunsen
s. Rejilla de asbesto
t. Trpode
Procedimiento
a. Medios de cultivo
i. AGAR SABOURAUD CON CLORANFENICOL Y CICLOHEXIMIDA (MICOBIOTIC,
MICOSEL)
Para recuperacin de hongos patgenos a partir de muestras muy contaminadas con
hongos saprfitos y bacterias, como dermatofitos y hongos dimrficos. Su utilizacin
requiere de algunas consideraciones por cuanto en capaz de inhibir hongos de importancia
mdica (Candida no albicans, especies de Aspergillus, Zygomycetes, Cryptococcus
neoformans, especies de Trichosporon, P. boydii entre otros).
Agar micobiotic o micosel 36 g
Agua destilada 1000 ml
Adicionar el agar al agua, mezclar y hervir hasta disolver el medio completamente.
Ajustar el pH a 6.5 0.2 y dispensar alcuotas de 20 ml. en tubos tapa rosca limpios.
Esterilizar en autoclave por 15 min. a 121 C. e inclinar los tubos hasta que el agar se
solidifique.


ii. AGAR PAPA DEXTROSA
Medio que estimula la formacin de conidias, pigmento (rojo en T. rubrum, rosa salmn
en M. audouinii y amarillo en M. canis). Tambin utilizado en la realizacin de
microcultivos o cepario.
Papa 200 g
Glucosa 10 g
Agar 15 g
Agua destilada 1000 ml
Lavar, pelar y cortar la papa en dados pequeos, adicionar el agua y autoclavar por 10
min. a 121 C para hacer la infusin de papa. Filtrar la infusin a travs de gasa. Adicionar
el agar y la glucosa, hervir hasta disolver. Llevar el volumen total a 1000 ml con agua
destilada si fuera necesario. Dispensar en tubos tapa rosca limpios. Esterilizar en autoclave
por 15 min. a 121 C. e inclinar los tubos hasta que el agar se solidifique.


iii. AGAR SABOURAUD DEXTROSA (Modificado por Emmons)
Medio estndar para el aislamiento, esporulacin y conservacin de muchos hongos.
Peptona 10 g
Glucosa 20 g
Agar 15 g
Agua destilada 1000 ml
Mezclar los componentes y hervir hasta disolucin completa. Dispensar en tubos tapa
rosca. Esterilizar en autoclave por 15 min. a 121 C. e inclinar los tubos hasta que el agar
se solidifique.


iv. AGAR HARINA DE MAIZ TWEEN 80 (Agar morfologa)


Para la identificacin morfolgica de levaduras.
Harina de maz 40 g
Agar 20 g
Tween 80 10 ml
Agua destilada 1000 ml
Mezclar el harina de maz con el agua y calentar por 1 h a 65 C., filtrar a travs de gasa y
luego con papel de filtro Whatman n 2. Agregar el agar, hervir hasta disolver. Completar
a 1000 ml con agua destilada si fuese necesario, adicionar el tween 80 y mezclar.
Esterilizar en autoclave por 15 min. a 121 C. Dispensar aspticamente en placas petri
estriles.


v. SOLUCION ANTIBIOTICA
Usado como inhibidor bacteriano de medios de cultivo.
Cloranfenicol (cpsula) 500 mg
Etanol 95% 10 ml
Disolver el contenido de la cpsula en el alcohol y utilizar 1 ml por litro de medio de
cultivo a preparar.

b. Reactivos y colorantes
i. COLORANTE DE KANE
Empleado en la demostracin de estructuras fngicas en raspados de piel, especialmente
en lesiones provenientes de la pitiriasis versicolor.
Glicerina 10.0 ml
Tween 80 10.0 ml
Fenol 2.5 g
Azul de metileno 1.0 g
Agua destilada 480.0 ml

Disolver la glicerina, el Tween 80 y el fenol en el agua destilada calentando ligeramente,
luego aadir el azul de metileno hasta disolver. Conservar en frasco color caramelo.

ii. LACTOFENOL DE AMMAN
Este aclarante se emplea preferentemente para la observacin microscpica de los cultivos
y de algunas muestras en las que se quiere mantener la estructura de sus elementos.
Fenol 20 g
Acido lctico 20 ml
Glicerina 40 ml
Agua destilada 20 ml
Primero se mezcla el cido lctico y la glicerina con el agua destilada, y seguidamente se
aaden los cristales de fenol, previamente fundido a 60 C en bao mara, bajo agitacin
hasta la disolucin de los mismos.

iii. AZUL DE LACTOFENOL
Es usado como colorante y lquido de montaje. El cido lctico acta como agente
aclarante y ayuda en la preservacin de estructuras fngicas, el fenol acta como agente
fungicida, la glicerina previene la deshidratacin y el azul de algodn da el color a las
estructuras.
Fenol 20 g
Acido lctico 20 ml
Glicerina 40 ml
Agua destilada 20 ml
Azul de algodn (o sol. acuosa 1%, 2 ml) 0.05 g
Fundir el fenol previamente a 60 C. en bao mara y mezclar con el cido lctico,
glicerina y el agua, luego agregar el azul de algodn (azul de Poirrier y azul de anilina son
anlogos al azul de algodn).

iv. HIDROXIDO DE POTASIO 20%


Usado en la deteccin de estructuras fngicas en muestras clnicas por examen
microscpico. Su concentracin vara entre el 10 y 40%.
Hidrxido de potasio 20 g
Glicerina 10 ml
Agua destilada 70 ml
Los cristales de KOH se aaden lentamente en agitacin hasta su completa disolucin.

Resultados
El alumno obtendr el material para sus futuras prcticas
Cuestionario
Cul es el objetivo de usar un antibacteriano en los medio de cultivo en micologa?
Cuales son las funciones de los componentes del azul de lactofenol?
Fuentes de informacin
Kern E, Martha y Blevins S., K. 1997. Medical Mycology: a self-instructional text. 2da.
Edicin. F.A. Davis Company. Philadelphia.
De Hoog GS, Guarro J, Gen J, Figueras MJ. 2000. Atlas of clinical fungi. 2nd Ed. Utrecht &
Reus, Centraalbureau loor Schimmelcultures / Universitat Rovira i Virgili.
Koneman, E y Roberts, G. 1987. Micologa. Practica de laboratorio. Traducido por Editorial
Mdica Panamericana s.a. ed. editorial mdica panamericana s.a. Bs. As. ed. Tercera.
Emmons CW, Binford CH, Utz JP, Kwon-Chung KJ. 1977. Medical Mycology. Philadelphia,
Lea & Febiger.





















II. PRCTICA No. 2
Observacin de colonias fngicas y preparaciones microscpicas
Marco terico
En el laboratorio los hongos son observados de dos maneras, bajo el microscopio
(microscpicamente) y como una colonia sobre una placa de agar (microscpicamente).
a. Morfologa microscpica
Microscpicamente la clula fngica es observada ya sea como hifa (mohos) o como
levadura.
i. Hifas, propia de los mohos
1. Por su tabique
a. Septadas, presentan tabiques o paredes transversales,
delimitando a cada una de las clulas que conforman las hifas,
estas hifas de 3 a 4 um de dimetro son propias de los
Ascomycota, Basidiomycota y hongos mitospricos.
b. Aseptadas (continuas, cenociticas o en sifn), usualmente no
presentan tabiques, propias de los Zygomycota, son anchas en
forma de cintas de 6 a 10 um de dimetro.
2. Por su funcin
a. Area, se extiende por encima del agar y puede soportar
estructuras reproductivas (conidias).
b. Vegetativa, est por debajo de la superficie del agar sirviendo
para la nutricin del hongo.
c. Hifa vegetativa no reproductiva, puede poseer caractersticas no
reproductivas muy distintivas, lo cual ayuda en la identificacin
de especies.
i. Candelabros fvicos
ii. Organos nodulares
iii. Hifas en raquetas
iv. Hifas en espiral
3. Por su pigmentacin
a. Hialinos o incoloras, como en los Mucedinceos.
b. Hongos negros o pardos como en los Demateceos.
ii. Levaduras, clulas redondeadas a ovales, las cuales brotan para formar clulas
hijas.
b. Morfologa macroscpica
Aunque muchos hongos no tengan una morfologa colonial caracterstica suficiente, que
permita su identificacin sin otro criterio adicional, algunas son muy distintivas. Ciertos
trminos generales son usados para describir las colonias fngicas:
i. Textura
Describe la altura de las hifas areas. La textura est relacionada y mejor
descrita si practicramos un corte transversal de la colonia, como se ilustra en la
Figura 1. Colonias algodonosas o lanosas producen un micelio areo muy alto y
denso; colonias aterciopeladas tienen un micelio areo bajo el cual semeja a la
tela terciopelo; colonias granulares o pulverulentas son planas y friables
debido a la densa produccin de conidias. La textura granular es rugosa,
semejante al azcar granulado y las pulverulentas al harina, estos dos trminos
son indistintamente usados, y las colonias glabrosas o serosas tienen una
superficie lisa debido a que ellas no producen micelio areo, usualmente las
levaduras corresponderan a esta apariencia macroscpica.

















Fig. 1. Esquema de la textura de las colonias fngicas.


ii. Topografa
Describe las variadas disposiciones de montculos y aplanamientos vistos sobre
las colonias de hongos, Fig. 2. La topografa es a menudo enmascarado por las
hifas areas, por lo tanto esta caracterstica es mejor observada sobre el reverso
de la colonia; una colonia plana entonces no tiene topografa. Las colonias
rugosas tienen surcos profundos irregularmente radiados desde el centro de la
colonia; las colonias umbilicadas poseen una elevacin central a manera de
botn, estas pueden estar acompaadas por pliegues alrededor del botn y las
colonias verrucosas exhiben una superficie arrugada y retorcidas.
iii. Color
Dado especficamente por la produccin de pigmento de la colonia, pudiendo
ser en el frente (haz) y reverso (envs), eventualmente algunas especies de
hongos producen un pigmento difusible en el medio de cultivo.
iv. Velocidad de crecimiento
La velocidad de crecimiento fngico es variable, algunos hongos maduran entre
3-4 das mientras que otros requieren de 3-4 semanas. As tenemos los de
crecimiento rpido, las cuales maduran en 5 das o menos, las de crecimiento
intermedio (6-10 das) y las de crecimiento lento (11-21 das).


















Fig. 2. Esquema de la topografa de las colonias fngicas


Competencias
Describe el crecimiento in vitro de los hongos.
Materiales y equipos
Cultivos en placas de levaduras y mohos.
Lminas montadas con microcultivo de hongos.


Procedimiento
Realizar el estudio macroscpico y microscpico con objetivos de 10x, 20x y 40x de aumento, localizando y
diferenciando las principales estructuras fngicas.
Resultados
Realice esquemas de sus observaciones microscpicas, que observ y aumento.
Realice esquemas de sus observaciones macroscpicas de colonias fngicas.
Cuestionario
En las preparaciones microscopicas es importante una tcnica asptica para realizarla?
Cite diferencias en el talo unicelular y pluricelular
Fuentes de informacin
Saldarriaga O., Yamille y Pineda G., F. 2001. Manual de micologa aplicada. 1ra. Edicin.
Editorial Universidad de Antioquia. Medelln.
Kern E, Martha y Blevins S., K. 1997. Medical Mycology: a self-instructional text. 2da.
Edicin. F.A. Davis Company. Philadelphia.
De Hoog GS, Guarro J, Gen J, Figueras MJ. Atlas of clinical fungi. 2nd Ed. Utrecht & Reus,
Centraalbureau loor Schimmelcultures / Universitat Rovira i Virgili, 2000.
Koneman, E y Roberts, G (1987) Micologa. Practica de laboratorio. Traducido por Editorial
Mdica Panamericana s.a. ed. editorial mdica panamericana s.a. Bs. As. ed. Tercera.
Emmons CW, Binford CH, Utz JP, Kwon-Chung KJ. Medical Mycology. Philadelphia, Lea &
Febiger, 1977






















III. PRACTICA N 3
Observacin de estructuras fngicas y hongos ambientales
Marco terico
Levaduras, crecen como clulas nicas. Muchas se reproducen por un proceso asexual llamado
brotacin o gemacin. La clula madre produce un brote llamado blastonidio o blastospora, la cual
se separa y crece igual que su progenitora. Muchas levaduras tambin producen estructuras llamadas
pseudohifas. Estas son blastoconidias individuales que estn elongadas y permanecen unidas. Estas
se diferencian de las hifas verdaderas de los mohos por una constriccin de la pseudohifa vista al
finadle las clulas individuales. Las hifas verdaderas vistas en los mohos y ciertas levaduras no
tienen constriccin. Ciertas levaduras producen tres tipos de estructuras: blastosporas, pseudohifas e
hifas. Otra estructura producida por pocas especies de levaduras es el tubo germinativo. Este es una
estructura tubular que se desarrolla en la superficie de la levadura. Este tiene paredes paralelas sin
constriccin. Los tubos germinativos son vistos al examen directo de muestras clnicas o despus del
desarrollo de levaduras en medios que estimulan su produccin.
a. Reproduccin sexual. Las levaduras se reproducen sexualmente ya sea por ascosporas o
basidiosporas. Las ascosporas son esporas sexuales formadas dentro de un saco especial,
llamado asco. Las basidiosporas son formadas sobre unas estructuras en forma de garrote,
llamada bside.
b. Reproduccin asexual. Todas las levaduras verdaderas pueden producir blastosporas y
pueden producir otras estructuras asexuales. Las levaduras pueden producir pseudohifas y
verdaderas hifas. Si la hifa verdadera se fragmenta en clulas individuales, estas son
llamadas artroconidias. Muchas levaduras producen blastoconidias y pseudohifas. Una
excepcin son especies de Trichosporon, los cuales producen blastoconidias, artroconidias,
pseudohifas e hifas verdaderas.
Mohos, el filamento individual de un moho es llamado hifa, Las paredes de las hifas son paralelas y
no constreidas, como si lo son las pseudohifas las cuales se ven en las levaduras.
a. Reproduccin sexual. Los mohos se reproducen sexualmente va ascosporas, basidiosporas
o por zigosporas. Las zigosporas son formadas despus del contacto y unin de las puntas
de dos hifas. Estas puntas contienen esporas sexuales y se unen para formar una espora en
reposo de pared gruesa, llamada zigospora. Esta espora es ms grande que la hifa y es
formada por el flujo de protoplasma y ncleos en la estructura.
b. Reproduccin asexual. Los mohos se reproducen asexualmente usando una variedad de
clulas o estructuras. En los Zygomicetes, la estructura bsica es llamado esporangio. Esta
es una clula en forma de saco en la cual estructuras internas son formadas en unidades
individuales, llamadas esporangiosporas. Estas esporangiosporas pueden ser aleatoriamente
distribuidas en el esporangio, o pueden estar dispuestos en hilera. Los esporangios son
llevados por una hifa especializada llamada esporangiforo, el cual se origina de la hifa
vegetativa. Muchos hongos de inters mdico no producen esporangios, pero producen
estructuras llamadas conidias. Conidia por definicin son estructuras que desarrollan de
manera asexual, diferente de un esporangio. Las conidias son producidas de hifas
especializadas llamadas clulas conidigenas.
c. Tipos de conidias estn basados en su clula de origen.
i. Aleuroconidia. Conidia nica producida por liberacin al final de la clula
conidigena.
ii. Aneloconidia. Blastoconidia producida en la base de la clula conidigena (anlido);
el conidio ms antiguo est en el pice y la ms joven en la base. Cuando un conidio
es producido, una cicatriz o anelacin es dejada en la superficie externa de la clula
conidigena.
iii. Artroconidia. Conidia producida por fragmentacin de la hifa en clulas individuales.
iv. Blastoconidia. Conidia producida por brotacin o brotes de una porcin de la clula
preexistente o progenitora
v. Fialoconidia. Conidia producida de una clula conidigena (filide) que no
incrementa su longitud cuando las conidias son producidas.
vi. Poroconidia. Conidia producida a travs de poros en la clula conidigena.
Competencias


Describe la morfologa microscpica de algunos hongos y tipo de conidiognesis estudiados en
micologa mdica.
Materiales y equipos
Lminas con microcultivos de diferentes mohos.
Lminas con levaduras de diferentes gneros.
Microscopio.
Procedimiento
Realizar el estudio macroscpico y microscpico con objetivos de 10x, 20x y 40x de aumento,
localizando y diferenciando las principales estructuras reproductivas fngicas.
Resultados
Realizar esquemas de sus observaciones microscpicas, que observ y aumento (ficha de
trabajo 3).
Cuestionario
Cmo demostrara la presencia de levaduras ascgenas?
En la industria panadera Cul es la levadura ms importante?
Fuentes de informacin
Kern E, Martha y Blevins S., K. 1997. Medical Mycology: a self-instructional text. 2da.
Edicin. F.A. Davis Company. Philadelphia.
De Hoog GS, Guarro J, Gen J, Figueras MJ. 2000. Atlas of clinical fungi. 2nd Ed. Utrecht &
Reus, Centraalbureau loor Schimmelcultures / Universitat Rovira i Virgili.
Koneman, E y Roberts, G. 1987. Micologa. Practica de laboratorio. Traducido por Editorial
Mdica Panamericana s.a. ed. editorial mdica panamericana s.a. Bs. As. ed. Tercera.
Emmons CW, Binford CH, Utz JP, Kwon-Chung KJ. 1977. Medical Mycology. Philadelphia,
Lea & Febiger.



















IV. PRACTICA N 4
Susceptibilidad antifngica por disco difusin (M44-A2004)
Marco terico
En los ltimos aos se ha vuelto una necesidad realizar pruebas de susceptibilidad antifngica
de mas fcil disponibilidad, la prueba de susceptibilidad antifngica por disco difusin (M44-A2004), provee y
establece la metodologa por disco difusin para especies de Candida, interpretacin de resultados para
fluconazol y rangos de control de calidad para fluconazol y voriconazol.
Competencias
Describe los procedimientos de laboratorio para la determinacin de susceptibilidad
antifngica para especies de Candida mediante el mtodo de disco difusin.
Materiales y equipos
Estufa de 35 C
Estndar de turbidez Mc Farland 0.5
Hisopos de algodn
Solucin salina fisiolgica.
A. Mueller-Hinton con glucosa 2% y 0.5 ug/ml de azul de metileno (AMH+GMB)
Regla
Procedimiento
Preparar un inculo de la levadura a testar y ajustar a la escala 0.5 Mc Farland, equivale a 1
x10
6
a 5 x10
6
clulas por ml.
Sumergir y humedecer el hisopo de algodn estril en la suspensin del inculo.
Remover el exceso de humedad por rotacin del hisopo en el interior de la pared del tubo por
encima del nivel del fluido.
Estriar el hisopo sobre el medio AMH+GMB dos o mas veces, rotando aproximadamente 60
cada vez.
Los discos se dispensan sobre la superficie del agar, presionando ligeramente.
Las placas se invierten y se colocan en la estufa a 35 C. por 24 hrs.
Resultados
Medir los dimetros de las zonas de inhibicin completa, usando una regla, interpretando con
los rangos establecidos (fluconazol 25 ug, sensible 19 mm y resistente menor o igual a 14 mm)
Cuestionario
El medio de cultivo empleado para la prueba de susceptibilidad antifngica Por cunto tiempo
puede ser almacenados hasta su uso?
A que familia de antifngicos pertenecen las drogas empleadas en la M44-A CLSI?
Fuentes de informacin
Method for antifungal disk difusin susceptibility testing of yeasts. M44-A, 2004. CLSI.








V. PRACTICA N 5
Aislamiento de hongos de fuentes naturales
Marco terico
Los hongos son organismos cosmopolitas, se encuentran sobre una gran diversidad de hbitat
(suelo, aire, agua, plantas, animales, etc.).
Loe hongos por su hbitat natural especfico, se clasifican como geoflicos, acuticos, zooflicos,
fitoflicos o antropoflicos. Tambin se les puede aislar de fuentes no naturales como superficies de
mesas, catteres, estufas, aire acondicionado, microscopios, entre otros.
Existe diversidad de tcnicas que nos permiten aislar diferentes especies de hongos a partir de
variados sustratos. En determinados casos es necesario utilizar medios especiales que faciliten el
aislamiento de dichos hongos.
Competencias
Explica y describe las diferentes tcnicas empleadas en la recuperacin de hongos a partir de
fuentes naturales.
Materiales y equipos
a. A. Sabouraud.
b. A. micobiotic
c. A. papa dextrosa
d. Tubrculos y frutas contaminadas
e. Tierra de jardn
f. Solucin salina fisiolgica
g. Agua destilada
h. Asas de Khole
i. Gradilla
Procedimiento
Inoculacin directa
a. Con el asa micolgica coger una pequea porcin de la muestra, proveniente de fruta o
tubrculo infectado por hongos.
b. Inocular por puntura con el asa micolgica sobre el agar papa dextrosa.
c. Incubar a temperatura ambiente por una semana.
Exposicin de placas al medio ambiente
a. Las placas de A. Sabouraud y micobiotic exponerlas al medio ambiente elegido, por
15 minutos.
b. Incubar a temperatura ambiente por una semana.
Resultados
Esquematizar y presentar los resultados de sus experiencias.
Cuestionario
Qu grupo de hongos son los ms frecuentemente aislados del aire?
Qu temperatura de incubacin empleara para su aislamiento?
Fuentes de informacin
Kern E, Martha y Blevins S., K. 1997. Medical Mycology: a self-instructional text. 2da.
Edicin. F.A. Davis Company. Philadelphia.
De Hoog GS, Guarro J, Gen J, Figueras MJ. 2000. Atlas of clinical fungi. 2nd Ed. Utrecht & Reus,
Centraalbureau loor Schimmelcultures / Universitat Rovira i Virgili




VI. PRACTICA N 6
Examen de cultivos (fragmentacin del talo, cinta adhesiva, microcultivos)
Marco terico
Una vez que la colonia del hongo ha madurado, lo cual se observa por su morfologa microscpica,
la apariencia colonial puede ayudar a identificar a un hongo, sin embargo esta morfologa puede
variar grandemente entre cepas de hongos, tiempo y temperaturas de identificacin y medios de
cultivo empleados. Para mohos, la identificacin final depende bsicamente de la morfologa
microscpica, aunque existen pocas pruebas bioqumicas tiles. Para levaduras las pruebas
bioqumicas son la base principal para su identificacin, con menor nfasis en la apariencia
microscpica y macroscpica. Hay diferentes procedimientos frecuentemente usados para el examen
microscpico de un cultivo fngico:
a. Montaje por fragmentacin del talo
Una preparacin por fragmentacin es la tcnica mas comn y rpida para montaje de
hongos y su examen microscpico. Desde que el crecimiento de los mohos, fragmentado
con agujas de diseccin, conidias o esporas pueden ser dislocadas de las clulas
conidigenas o esporgenas. Puede ser necesario el uso de tcnicas de microcultivos si la
identificacin no puede ser realizada de los montajes con cinta scotch.
b. Montaje con cinta adhesiva (scotch)
Este Mtodo usualmente mantiene la posicin original de las estructuras fngicas
caractersticas. Sin embargo, el organismo debe crecer sobre medios plaqueados adems de
ser examinados por este mtodo.
c. Microcultivos
Exacta identificacin de hongos filamentosos basada sobre examen
microscpico de estructuras de esporulacin de una colonia. Mientras que la
fragmentacin del talo es til, ella tiene 2 principales desventajas: 1) Si demasiado
desarrollo es removido o no es bien desmenuzado, o si el material es tomado de un
rea sin esporulacin, ser dificultoso discernir estructuras de esporulacin. 2)
Esporas y conidias son a menudo separadas durante la preparacin del montaje. El
sistema de microcultivo consiste de una mini cmara de incubacin diseada para
producir condiciones ptimas de esporulacin. Permite examinar la colonia en
varios estadios de desarrollo y mejora las oportunidades de observar la
configuracin natural de las esporas y conidias sobre las estructuras fructferas.
Competencias
Explica las ventajas y desventajas del montaje por fragmentacin del talo, con cinta scotch y
microcultivos, para el examen de los crecimientos fngicos.
Materiales y equipos
a. Asas Micolgicas
b. Mechero
c. Lminas portaobjetos
d. Laminillas cubreobjetos
e. Pinzas
f. Cinta scotch
g. Azul de Lactofenol
h. Lactofenol de Aman
i. Sistema estril
j. Placa
k. Angulo de vidrio hueco
l. Papel filtro
m. Papel
Procedimiento
a. Montaje por fragmentacin del talo


i.Colocar una gota de azul de lactofenol justo por fuera del centro de la lmina portaobjetos
limpia.
ii.Con la aguja de inoculacin, remover suavemente un fragmento del crecimiento entre la mitad
del centro y borde de la colonia. Colocar el material en el lactofenol.
iii.Con las dos agujas de diseccin, fragmentar suavemente la porcin de colonia hasta
diseminarla finamente en el azul de lactofenol.
iv.Colocar el cubreobjetos por el borde del azul de lactofenol, y presionar suavemente con un
objeto punteagudo.
v.Evitar la formacin de burbujas de aire bajo el cubreobjetos. Remover el exceso de azul de
lactofenol de los bordes del cubreobjetos por secado con papel toalla.
vi.Sellar los bordes del cubreobjetos con esmalte de uas para preservar el montaje
b. Montaje con cinta adhesiva (scotch)
i. Doblar una cinta adhesiva transparente con el lado adhesivo hacia fuera, de aproximadamente 4
cm.
ii. Mantener la punta asegurada con una pinza y presionar firmemente la superficie de la colonia
con el lado adhesivo.
iii. Retirar la cinta suavemente. Hifas areas quedan adheridas a la cinta.
iv. Separar las puntas de la cinta y colocarla sobre una pequea gota de azul de lactofenol sobre
una lmina portaobjetos gasta que se adhiera completamente sobre la lmina.
v. Examinar bajo el microscopio
c. Microcultivos
i. Preparacin del sistema estril
(1) Encaje en el fondo de la placa petri, papel filtro del mismo dimetro.
(2) Poner una varilla de vidrio doblada en forma de V sobre el papel de filtro, colocar
encima una lmina portaobjetos. Sobre el papel de filtro depositar adems 2 cubreobjetos
de 22x22.
(3) Volver a poner la tapa, envolver con papel, hornear a 180 C x 1 h.
Verter una capa delgada de agar papa dextrosa en una placa de petri estril y cortar
bloques de agar de 5 mm de lado y aproximadamente 3-4 mm de espesor. Depositar un bloque
de agar sobre el portaobjetos.
Usando en todo momento una tcnica asptica, remover con un asa en ngulo recto,
una parte de material esporulante de la colonia e inocular en los cuatro lados del bloque. Con la
ayuda de una pinza, colocar el cubreobjetos encima del bloque y presionar ligeramente.
Adicionar 1-2 ml de agua destilada estril al papel de filtro, volver a tapar la placa
petri, incubar y observar esporulacin a intervalos regulares examinando la preparacin bajo el
microscopio. Realizar el montaje con azul de lactofenol, cuando el hongo esporule antes que
sobre-desarrolle en el cubreobjetos, lo cual sucede usualmente entre 7-21 das.

Resultados
Presentar los resultados de sus observaciones de los hongos procesados, Ficha de trabajo 4.
Cuestionario
Para un microcultivo permanente, que coloraciones alternativas podra emplear?
Con fines docentes que tcnica es la mas recomendable para la demostracin microscpica de
hongos?
Fuentes de informacin
Koneman, E y Roberts, G. 1987. Micologa. Practica de laboratorio. Traducido por Editorial Mdica
Panamericana s.a. ed. editorial mdica panamericana s.a. Bs. As. ed. Tercera









VII. PRACTICA N 7
Examen e identificacin de cultivos de dermatofitos
Marco terico
Los dermatofitos son un grupo de hongos causantes de la dermatofitosis, conidialmente se les agrupa en tres
gneros (trichophyton, epidermophyton y microsporum) y de acuerdo a su presencia en la naturaleza son
antropoflicos, geoflicos y zooflicos. De acuerdo a su ubicacin topogrfica en individuos afectados
pueden ser conocidos como tia capitis, tia barbae, t. unguium, tia corporis, tia pedis, etc.
El estudio para su identificacin estriba fundamentalmente en el reconocimiento de estructuras
conidiales as como de caractersticas macroscpicas.
Competencias
Describe a los dermatofitos causantes de tias en nuestro pas.
Materiales y equipos
a. Cepas
i. Microsporum canis
ii. Microsporum gypseum
iii. Trichophyton rubrum
iv. Trichophyton mentagrophytes
v. Trichophyton tonsurans
b. Asas de Khole en ngulo recto
c. Azul de lactofenol
d. Lminas portaobjetos
e. Laminillas cubreobjetos
f. Agar urea de Christensen
g. Agar papa dextrosa
Procedimiento
a. De las cepas suministradas realizar exmenes directos con ALF.
b. Visualizar y esquematizar estructuras propias de las diferentes especies de dermatofitos.
c. Inocular los dermatofitos sobre Agar urea de Christensen, Medio de arroz y Agar papa
Dextrosa, registrar los resultados desde los tres das hasta las dos semanas.
Resultados
Presentar mediante esquemas y cuadros los resultados de sus hallazgos.
Cuestionario
Cul es el dermatofito ms comn en nuestro pas?
Qu grupo etreo es el mas afectado en la tia capitis?
Fuentes de informacin
Kern E, Martha y Blevins S., K. 1997. Medical Mycology: a self-instructional text. 2da.
Edicin. F.A. Davis Company. Philadelphia.
De Hoog GS, Guarro J, Gen J, Figueras MJ. 2000. Atlas of clinical fungi. 2nd Ed. Utrecht &
Reus, Centraalbureau loor Schimmelcultures / Universitat Rovira i Virgili.












VIII. PRACTICA N 8
Procesamiento de microcultivos

Marco terico
Microcultivos
Exacta identificacin de hongos filamentosos basada sobre examen microscpico de
estructuras de esporulacin de una colonia. Mientras que la fragmentacin del talo es til, ella tiene 2 principales
desventajas: 1) Si demasiado desarrollo es removido o no es bien desmenuzado, o si el material es tomado de un
rea sin esporulacin, ser dificultoso discernir estructuras de esporulacin. 2) Esporas y conidias son a menudo
separadas durante la preparacin del montaje. El sistema de microcultivo consiste de una mini cmara de
incubacin diseada para producir condiciones ptimas de esporulacin. Permite examinar la colonia en varios
estadios de desarrollo y mejora las oportunidades de observar la configuracin natural de las esporas y conidias
sobre las estructuras fructferas.
Competencias
Explica las ventajas y desventajas del montaje permanente y semipermanente a partir de
microcultivos, para el examen de los crecimientos fngicos.
Materiales y equipos
Asas Micolgicas
Mechero
Lminas portaobjetos
Laminillas cubreobjetos
Pinzas
Cinta scotch
Azul de Lactofenol
Lactofenol de Aman
Blsamo de Canad
Procedimiento
Para montar el cubreobjetos remover este, del bloque de agar con una pinza. Cubrir el rea de crecimiento
con azul de lactofenol o lactofenol de Aman, y montar sobre un portaobjetos limpio, montaje semipermanente.
Para montar el portaobjetos sostenerlo con pinzas, con un asa de inoculacin en punta levantar el bloque de
agar y descartar en solucin desinfectante. Limpie el reverso del portaobjetos con papel toalla embebido con
solucin desinfectante sin alterar el preparado. Coloque una gota de medio de montaje permanente (blsamo de
Canad), en el centro del crecimiento y aplicar un cubreobjetos, montaje permanente.
Observar bajo el microscopio a diferentes aumentos y reconocer los gneros de hongos encontrados.
Resultados
Microcultivos permanentes y semipermanentes de hongos ambientales para ser lminas de
referencia para los estudiantes.
Cuestionario
Ventajas de los microcultivos permanentes y semipermanentes.
Fuentes de informacin
Koneman, E y Roberts, G. 1987. Micologa. Practica de laboratorio. Traducido por Editorial
Mdica Panamericana s.a. ed. editorial mdica panamericana s.a. Bs. As. ed. Tercera










IX. PRACTICA N 9
Identificacin de levaduras (tubo germinativo, morfologa y fisiologa)
Marco terico
La identificacin de levaduras de importancia mdica cada vez se hace ms necesaria, por ello
recurrimos a pruebas que nos garanticen su correcta identificacin. Entre estas pruebas tenemos a la
prueba del tubo germinativo, estudio de la morfologa y pruebas fisiolgicas entre otras.
Competencias
Describe la identificacin de las levaduras de importancia mdica.
Materiales y equipos
a. Plasma o suero estril
i. Alcuotas de 0,5 ml almacenados a -20 C.
b. Organismos control
i. C. albicans
ii. C. tropicalis
c. Asas de Khole
d. Bao mara a 35 C. 1 C
e. Lminas portaobjetos.
f. Laminillas cubreobjetos
g. Harina de Maiz con Tween 80 (AHM-T80)
h. Galeria API 20 C AUX
i. Cmara de incubacin
j. Ampolla de API C Mdium
k. Hojas de resultados
l. Index de identificacin de levaduras
m. Pipetas de rango multiple de 50-200 ul y tips.
n. Recipiente con desinfectante.
o. Tubos de 16 x 150 mm con agua destilada estril.
Procedimiento
a. Tubo germinativo
i. Tocar ligeramente una colonia con el asa de Khole.
ii. Suspender las levaduras en el plasma o suero.
iii. Incubar en bao mara a 35 C por 2.5 h.
iv. Colocar 2 a 3 asadas de la suspensin sobre un portaobjetos rotulado con el nmero de
muestra.
v. Cubrir la suspensin con laminilla cubreobjetos.
vi. Examinar a 40x y 100x para la deteccin o ausencia de tubos germinativos.
b. Morfologa
i. Preparar placas con Agar Harina de Maiz con Tween 80 (AHM-T80).
ii. Con un lpiz para vidrio dividir la placa en 4 sectores y utilizar cada sector rotulando con
el nmero de muestra de cada levadura aislada.
iii. Con una aguja de inoculacin tocar ligeramente la colonia a probar, practicar dos estras
de aproximadamente 1.5 cm. de longitud separadas por 1 cm., sin excavar el medio.
iv. Despus de flamear y enfriar la aguja de inoculacin, practicar una estra en forma de S
cruzando las dos estras realizadas anteriormente, el aspecto final del preparado es similar
al signo de dlares $.
v. Finalmente cubrir el preparado con una laminilla cubreobjetos previamente flameada y
enfriada.
vi. Incubar la placa a 28 C y examinar a 24, 48 y 72 h. bajo el microscopio retirando la tapa,
empleando objetivo de bajo (10x) y alto (40x) poder.
c. Fisiologa
i. Preparar una suspensin de la levadura problema correspondiente al tubo 2 de la escala de
Mc. Farland.
ii. Verter 5 ml de agua destilada estril en la cmara de incubacin.


iii. Tomar 100 ul de la suspensin e inocular la ampolla de API C Mdium, agitar y dispensar
aproximadamente 197 ul en cada cpula de la galeria API 20 C AUX, hasta su llenado
horizontal no exceder.
iv. Colocar la galeria dentro de la cmara de incubacin y tapar.
v. Incubar a temperatura ambiente 48 72 horas.
vi. Registrar las lecturas de las 48 y 72 hrs. Respectivamente en la hoja de resultados.
Resultados
a. Con el perfil encontrado ubicar en el index de perfiles la identificacin de la levadura.
Cuestionario
fenotpicamente como diferenciara a C. albicans de C. dubliniensis?
Fuentes de informacin
Kern E, Martha y Blevins S., K. 1997. Medical Mycology: a self-instructional text. 2da.
Edicin. F.A. Davis Company. Philadelphia.
De Hoog GS, Guarro J, Gen J, Figueras MJ. 2000. Atlas of clinical fungi. 2nd Ed. Utrecht &
Reus, Centraalbureau loor Schimmelcultures / Universitat Rovira i Virgili.
Koneman, E y Roberts, G. 1987. Micologa. Practica de laboratorio. Traducido por Editorial Mdica
Panamericana s.a. ed. editorial mdica panamericana s.a. Bs. As. ed. Tercera.

































X. PRACTICA N 10
Examen e identificacin de cultivos de hongos demateaceos, Sporothrix schenckii
Marco terico
Las micosis subcutneas son aquellas que involucran la piel y el tejido subcutneo. Su diseminacin
a otros rganos usualmente no ocurre. Sin embargo involucra grandes masas musculares pudiendo
llegar incluso a los huesos. Los agentes productores de estas micosis generalmente habitan el suelo
de regiones tropicales y subtropicales. El hombre acta como husped accidental, pudiendo
infectarse ya sea por implantacin traumtica de los organismos o por introduccin de esporas
viables dentro de la lesin. Las presentaciones clnicas de estas afecciones incluyen micetomas,
cromomicosis, rinosporidiosis y esporotricosis. La cormomicosis es una enfermedad que afecta pies
y manos. Los agentes causales de esta enfermedad son conocidos como hongos demateaceos, debido
a que ellos tienen un pigmento marrn a negro debido a la presencia de melanina. Estos hongos son
de crecimiento lento, geofilicos. Los agentes mas comunes son Cladosporium carrioni, Phialophora
verrucosa, Fonsecae pedrosoi y raramente Fonsecae compacta. La esporotricosis es una micosis
producida por Sporothrix schenckii. La lesin primaria es usualmente sobre algn dedo de la mano,
es un ndulo subcutneo pequeo, mvil, que crece lentamente y se adhiere a la piel, tornndose
rosado luego con necrosis, finalmente se ulcera.
Competencias
Describe a mohos demateaceos de importancia mdica y a Sporothrix schenckii.
Materiales y equipos
a. Cepas de demateaceos y Sporothrix schenckii.
b. Asas de Khole en ngulo recto
c. Azul de lactofenol
d. Lminas portaobjetos
Laminillas cubreobjetos
Procedimiento
a. De las cepas suministradas realizar exmenes directos con ALF.
b. Visualizar y esquematizar estructuras propias de las diferentes especies de demateaceos y
Sporothrix schenckii.
c. Enfocar y esquematizar lminas patrones de microcultivos y cortes histolgicos.
Resultados
Presentar mediante esquemas los resultados de sus hallazgos.
Cuestionario
Cul es el gnero de demateceo mas frecuente encontrado en el laboratorio de micologa?
Fuentes de informacin
Kern E, Martha y Blevins S., K. 1997. Medical Mycology: a self-instructional text. 2da.
Edicin. F.A. Davis Company. Philadelphia.
De Hoog GS, Guarro J, Gen J, Figueras MJ. 2000. Atlas of clinical fungi. 2nd Ed. Utrecht & Reus,
Centraalbureau loor Schimmelcultures / Universitat Rovira i Virgili.












XI. PRACTICA N 11 y 13
Examen y procesamiento de muestras clnicas (11)
Presentacin de Resultados (13)
Marco terico
Las micosis tienen como agentes a mohos y levaduras, siendo las micosis ms frecuentes en el
laboratorio de micologa las micosis superficiales y cutneas, se pone nfasis especial en el
aislamiento e identificacin de estos agentes; para lograr este objetivo complementamos el
diagnstico clnico con los hallazgos en el laboratorio de micologa.
Competencias
Describe agentes productores de micosis superficial y cutnea.
Materiales y equipos
a. Muestras clnicas (raspados de uas, piel, LCR, orina, etc.).
b. A. Sabouraud, micobiotic.
c. Aceite de oliva.
d. Estufas 35 C.
e. Asas micolgicas
f. Tinta china
g. KOH 20%
h. Lminas portaobjetos
i. Lminillas cubreobjetos
Procedimiento
De acuerdo a los conocimientos y destrezas adquiridos, aislar e identificar los agentes
productores de micosis en las muestras clnicas asignadas.
Resultados
Aislamiento e identificacin de hongos a partir de muestras clnicas asignadas
Presentacin de resultados, respaldados por los hallazgos documentados en el procesamiento
de las muestras clnicas asignadas.
Cuestionario
Cules son los dermatofitos ms frecuentemente aislados?
Para el aislamiento de dermatofitos y especies del gnero Malassezia, se emplean los mismos
procedimientos?
Fuentes de informacin
Saldarriaga O., Yamille y Pineda G., F. 2001. Manual de micologa aplicada. 1ra. Edicin.
Editorial Universidad de Antioquia. Medelln.
Kern E, Martha y Blevins S., K. 1997. Medical Mycology: a self-instructional text. 2da.
Edicin. F.A. Davis Company. Philadelphia.
De Hoog GS, Guarro J, Gen J, Figueras MJ. Atlas of clinical fungi. 2nd Ed. Utrecht & Reus,
Centraalbureau loor Schimmelcultures / Universitat Rovira i Virgili, 2000.
Koneman, E y Roberts, G (1987) Micologa. Practica de laboratorio. Traducido por Editorial
Mdica Panamericana s.a. ed. editorial mdica panamericana s.a. Bs. As. ed. Tercera.
Emmons CW, Binford CH, Utz JP, Kwon-Chung KJ. Medical Mycology. Philadelphia, Lea &
Febiger, 1977



XII. PRACTICA N 12
Seminarios: CALIDAD EN EL LABORATORIO DE MICOLOGIA
Marco terico
En el laboratorio de micologa se deben garantizar los procedimientos y materiales, empleados en el
correcto y oportuno aislamiento e identificacin de hongos productores de micosis; por ello es
pertinente manejar el control de calidad, inventario de almacn y mantenimiento preventivo de
equipos por ello deben contarse con fichas de registro de los mismos.
Competencias
Propone fichas de registros de control de calidad de medios de cultivo, reactivos, almacn y
mantenimiento de equipos de un laboratorio de micologa.
Materiales y equipos
Manuales de medios de cultivos de diferentes marcas (Oxoid, Merck, etc)
Hojas de seguridad de materiales de reactivos
Hojas oficio cuadriculadas
Procedimiento
Elaborar fichas de control de calidad para Agar Sabouraud, Agar Micobiotic, Hidrxido de
potasio 20%, Azul de lactofenol.
Elaborar fichas de registro de temperaturas de incubadoras.
Elaborar fichas de mantenimiento preventivo de microscopios.
Resultados
Fichas de control de calidad de medios de cultivo, reactivos y mantenimiento preventivo de
equipos.
Cuestionario
Son necesarios los registros de control de calidad en micologa?
Con que frecuencia se realiza el mantenimiento preventivo de los microscopios?
Fuentes de informacin
Henry D. Isenberg. Clinical Microbiology Procedures Handbook, 2nd edition, ASM Press, 2004.






















XIV. PRACTICA N 14
Examen de preparaciones microcpicas de H. capsulatum y P. brasiliensis
14.1 Marco terico
La Histoplasmosis es una infeccin aguda, subaguda crnica producida por especies del gnero
Histoplasma. Existen 3 formas clnicas, Histoplasmosis (H. clsica, Enfermedad de Darling o H. de
pequeas formas) cuyo agente es Histoplasma capsulatum; H. africana (H. de grandes formas) cuyo
agente es H. duboisii y la Linfangitis epizotica de caballos o mulos producida por H. farciminosum.
Su hbitat es el suelo rico en excremento de aves y murcilagos. Su va de ingreso es la inhalatoria
(infeccin asintomtica). H. duboisii, tambin tiene la misma va pero puede llegar incluso a piel y
hueso. Su teleomorfo es un ascomiceto la Emmonsiella capsulata. La paracoccidioidomicosis es
causada por Paracoccidioides brasiliensis, siendo una enfermedad endmica de Sudamrica. Hongo
saprfito, cuyo habitat es el suelo. Las esporas son inhaladas, produciendo lesiones pulmonares
similares a la tuberculosis y otras micosis. Presentaciones menos frecuentes son en la mucosa oral y
encas, como consecuencia de infeccin traumas del chactado de vegetales contaminados.
14.2 Competencias
14.2.1 Describe a H. capsulatum y P. brasiliensis como productores de micosis sistmicas en nuestro
pas.
14.3 Materiales y equipos
14.3.1 Montajes permanentes de cultivos y cortes histolgicos de H. capsulatum y P. brasiliensis.
14.4 Procedimiento
14.4.1 Enfocar y esquematizar lminas patrones de microcultivos y cortes histolgicos.
14.5 Resultados
14.5.1 Presentar mediante esquemas los resultados de sus hallazgos.
14.6 Cuestionario
14.6.1 Cules son los hongos dimrficos que se encuentran en nuestro pas?
14.6.2 Para la demostracin de H. capsulatum que coloraciones alternativas se pueden usar?
14.7 Fuentes de informacin
14.7.1 Kern E, Martha y Blevins S., K. 1997. Medical Mycology: a self-instructional text. 2da.
Edicin. F.A. Davis Company. Philadelphia.
14.7.2 De Hoog GS, Guarro J, Gen J, Figueras MJ. 2000. Atlas of clinical fungi. 2nd Ed. Utrecht &
Reus, Centraalbureau loor Schimmelcultures / Universitat Rovira i Virgili.














XV PRACTICA N 15
Examen de preparaciones de hongos productores de micosis oportunistas
15.1 Marco terico
El avance tecnolgico de la medicina y el aumento de la sobrevida de los pacientes con
enfermedades complejas e inmunodeficiencias, crean una gran y altamente poblacin
susceptible, pacientes en riesgo incluyen pacientes con cncer (con y sin neutropenia),
transplantes de rganos, SIDA, ciruga abdominal, alimentacin parenteral, infantes
prematuros, quimioterapia, entre otros. Todo hongo que se encuentra en el ambiente es un
potencial productor de micosis oportunistas, las condiciones del husped son cruciales para que
se produzca este fenmeno. Hasta la dcada de los 80 las especies fngicas relacionas a
micosis en humanos eran de aproximadamente 150 especies, hasta el ao 2000 se incrementa
sustancialmente llegando casi a 400 especies, siendo una pequea fraccin de las
aproximadamente 100,000 especies de hongos descritas, lo cual hace suponer que cualquier
hongo es un potencial oportunista.
15.2 Competencias
15.2.1 Describe a hongos productores de micosis oportunistas.
15.3 Materiales y equipos
15.3.1 Montajes en fresco y permanentes de cultivos y cortes histolgicos de hongos.
15.4 Procedimiento
15.4.1 Enfocar y esquematizar lminas patrones de montajes, microcultivos y cortes
histolgicos.
15.5 Resultados
15.5.1 Presentar mediante esquemas los resultados de sus hallazgos.
15.6 Cuestionario
15.6.1 Cules son los hongos productores de micosis oportunistas?
15.6.2 Para la demostracin de la cpsula de Cryptococcus neoformans que procedimiento
se utiliza?
15.7 Fuentes de informacin
15.7.1 Kern E, Martha y Blevins S., K. 1997. Medical Mycology: a self-instructional text.
2da. Edicin. F.A. Davis Company. Philadelphia.
15.7.2 De Hoog GS, Guarro J, Gen J, Figueras MJ. 2000. Atlas of clinical fungi. 2nd Ed.
Utrecht & Reus, Centraalbureau loor Schimmelcultures / Universitat Rovira i Virgili.
















Mantenimiento de Cepario

Tcnica de cultivos cubiertos con aceite
Obtener un pequeo pero activo crecimiento fngico sobre un corto inclinado de
ASD. Vierta encima de esta aceite mineral pesado estril de buen grado (viscosidad
330 a 100 F, autoclavado a 15 lb/in
2
por 45 min. en un frasco de 250 ml medio
lleno). Es absolutamente necesario que el aceite cubra no solamente la colonia del
hongo sino tambin completamente la superficie del agar; de otra forma el agar
expuesto puede actuar como mecha y en su momento causar que el medio se seque
y la colonia muera.
Los cultivos stock son almacenados parados a temperatura ambiente, y
muchos de ellos pueden permanecer viables por muchos aos.
Desafortunadamente, algunos de ellos son dificultosos de mantener vivos.
Para transferir un hongo con cultivo en aceite, remover una pequea porcin
de la colonia con una aguja de inoculacin larga o un palo aplicador estril.
Escurrir el aceite a lo largo del interior del tubo y colocar el inculo sobre un agar
fresco inclinado.

Tcnica de cultivo en agua destilada
Raspar una torunda estril humedecida sobre la superficie de una colonia
fngica con conidiacin/esporulacin activa. Lavar la torunda en un tubo tapa
rosca conteniendo aproximadamente 4 ml de agua destilada estril. Ajstese la
tapa y almacenar a temperatura ambiente. Adicionar agua destilada estril
peridicamente si ocurre alguna evaporacin.
Para preparar un subcultivo, agitar el cultivo en agua para suspender al
hongo. Abrir el tubo, flamear la boca y con una pipeta pasteur estril transfiriendo
aproximadamente 0.4 ml de la suspensin a un ASD inclinado. Incubar el ASD a 25-
30 C.

Tcnica de refrigeracin de cultivos
Cultivar un hongo sobre APD en tubo de vidrio tapa rosca. Incubar a 25-30 C
hasta que el organismo alcance la madurez y se encuentre produciendo
activamente conidias o esporas. Cerrar la tapa ajustada y colocar los tubos dentro
de un congelador. Mejores resultados son obtenidos a -70 C, pero a -20 C tambin
puede ser usado exitosamente. Si los organismos son almacenados a -20 C, puede
ser necesario subcultivarlos anualmente.














GLOSARIO

Abombado: De figura convexa. En micologa se refiere a una cualidad del sombrero cuya cspide
aparece bruscamente hinchada en forma de mameln.
Acrvulo: capa de hifas que da lugar a conidifros, densamente empaquetados, que constituyen
una masa en forma de almohadilla. Son caractersticos de los Melanconiales.
Acetbulo. Receptculo esporfero con forma de copa ancha.
Acicular. Esporas o ascosporas con forma semejante a una aguja, generalmente rectas.
Acre: spero y picante al gusto y al olfato.
Acrgeno: Que crece o nace en el vrtice. Desarrollo de clulas conidiales en el pice del
conidiforo.
Aculeolada/o: Caracterstica del sombrero de una seta que tiene mechones o que se halla erizada
de aguijones.
Acuminado: Afilado, que se estrecha gradualmente para terminar en un punto.
Adnato. Apotecio aplanado sin constriccin en la base.
Aleuria: Talospora terminal o lateral con una faceta plana de implantacin a cuyo nivel se rompe el
esporforo, para su liberacin, dejando un collarete membranoso en la base de la aleuria o
aleuriospora (esporas pequeas de los dermatofitos).
Aliceo. Referente al ajo.
Alutceo. De color de cuero.
Afiloforales: Setas que carecen de laminillas, como las clavarias. Todo el cuerpo se halla cubierto
por el himenio.
Agarical: Orden de hongos que comprende setas verdaderas, Las setas tpicas provistas de laminillas
en la cara inferior del sombrero, la mayora son carnosas y se descomponen con facilidad.
Anamorfo: estructuras caractersticas de la reproduccin asexuada de los hongos, utilizada
generalmente para describir la forma imperfecta de los dermatofitos.
Anastomosada. Parfisis ramificadas que presentan puntos de fusin unas con otras.
Anastomosis: Dicese cuando dos lminas se unen o juntan.
Anelascaceas (anelasceas, anelferas). Ascas con un anillo apical.
Anlido: Tipo de clula conidigena que produce conidios blsticos de una forma basipeta; se alarga
con la produccin de cada conidio, quedando restos o cicatrices en su superficie externa en forma
de anillos.
Aneloconidio: Conidio producido por un anlido.
Anteridio: gametangio masculino, visible en el estado teleomorfo de algunos hongos.
Antropofilo: Hongo, generalmente dermatofito, que se desarrolla exclusivamente en el hombre.
Apice o apical: Extremo superior o punta de una cosa.
Apculo: Punta corta, aguda y poco resistente.
Apfisis: Dilatacin en el extremo de un filamento miceliano (esporangioforo), situada debajo del
esporangio de los Zygomycetos.
Apotecio: Ascocarpo abierto, fruto aplanado de los Discomycetes (Ascomycotino).
Artroconidio (artrspora): Talospora resultante de la segmentacin de una hifa en elementos
cilndricos.
Asco: Estructura en forma de saco del estado perfecto de Ascomycotina, en cuyo interior se forman
las esporas (ascosporas), generalmente en numero par.
Ascocarpo: El fruto compuesto de hifas diferenciadas que contienen los ascos.
Ascogonio: Clula u rgano femenino de Ascomycotina.
Ascohimenial: Con ascas en el himenio.
Ascomiceto (Ascomycotina): Hongo que se reproduce sexualmente mediante ascos.
Ascosporas: Esporas sexuadas que se forman en el interior del asco, generalmente en numero par
(la mitad del signo + y la otra mitad del signo -)
Ascostroma: Ascocarpo estromtico, portador de ascos directamente en lculos, dentro del
estroma.
Aseptado. Sin paredes transversales.
Asexual: Reproduccin en la que no intervienen la cariogamia ni la meiosis.
Aspergilosis: Enfermedades del hombre y los animales ocasionadas por varias especies de
Aspergillus.
Asporgeno: No formador de esporas.


Asterospreas: Se refiere a las setas cuyas esporas estn siempre adornadas con puntas, crestas y
redes en relieve.
Aterciopelado: Calidad del terciopelo. De finura y suavidad parecidas al terciopelo. Cuando nos
referimos al sombrero o al pie de una seta queremos significar que presenta un aspecto mate, suave
y fino como el terciopelo
Autocompatible: Autofertil; hace referencia al talo que se reproduce sexualmente sin la
intervencin de otros.
Autoincompatible: Autoesteril; se refiere al talo que no se puede reproducir sexualmente por si
mismo, sin la intervencin de otro.
Autolisis: Autodegradacin del micelio debida a un proceso enzimtico por agotamiento de los
nutrientes, principalmente nitrogenados.
Auttrofo: Microorganismos que crecen sin necesidad de utilizar compuestos orgnicos como fuente
de energa.
Auxonograma: Mtodo seguido para el estudio de las levaduras basado en las propiedades de
asimilacin de compuestos hidrocarbonatos y nitrogenados.
Balistospora: Espora proyectada activamente en la madurez, presente en Basidiomycotina.
Bside: Clula habitualmente terminal, de los basidiomicetos en la cual se forman esporas externas
de origen sexual.
Basidiocarpo: Cuerpo fructfero que lleve basidios.
Basidiospora: Esporas sexuadas que se originan en la parte externa de un basidio despus de la
cariogamia y la meiosis, propias de Basidiomycotina.
Baspeto: Que crece en direccin hacia la base.
Bayo: Referido a las setas, de un color pardo rojizo.
Biatorino. Apotecio blando y coloreado, lecideno.
Bipolar: Genricamente que tiene dos polos. En micologa se dice de una especie cuyos micelios se
clasifican en dos grupos tales que un micelio primario no puede producir un micelio secundario ms
que reunindose con un micelio del otro grupo.
Biseriado: Dispuesto en dos filas o ringleras.
Bisoide: En el excpulo el tejido formado por hifas libres y flexuosamente entrelazadas.
Bsporas. Dos esporas.
Bitunicado: Asco que presenta una pared interna elstica que, en el momento de liberar las
esporas, se estira ms all de la pared externa.
Blstica: Conidiogenesis en la que comienza a formarse una blastopora que termina separndose de
la clula madre mediante un tabique.
Blastoconidio: Conidio de origen blstico.
Blastospora: Espora formada por gemacin (sin blastoconidio).
Bucle: Rizo en forma helicoidal.
Bullado: Referido al talo, con arrugas o ampollas pequeas.
Calccola: Cualidad de algunos hongos que solamente crecen y se desarrollan sobre terrenos
calcreos.
Campilidio: Estructura especial de reproduccin asexual encontrada en algunos grupos de hongos
liquenizados; la capa conidigena est parcialmente expuesta, una parte de ella est cubierta por
un lbulo de simetra bilateral.
Capiliceo. Estructuras estriles filiformes, presentes entre las esporas en los cuerpos fructferos de
muchos Myxomicetes y Gasteromycetes .
Cariogamia: Fusin de dos ncleos.
Carpforo. Aparato reproductor de las setas. Es el conjunto formado por el sombrero, el himenio y
el pie, es decir la propia seta.
Catenulado: Referido a los conidios. Conidios sin septos, con constricciones que los conectan como
eslabones de una cadena.
Cenoctico: Clulas o hifas u otras estructuras que contienen muchos ncleos y, en el caso de las
hifas, muy pocos tabiques.
Cerebriforme. Que tiene aspecto fsico de la sustancia del cerebro.
Cereo: parecido a la cera de abeja.
Clamidospora (clamidoconidio): Talospora de pared celular gruesa, intercalar o terminal, que
almacena material nutritivo, actuando como rgano de resistencia.


Clava: Palo toscamente labrado que va aumentando de dimetro desde la empuadura hasta el
extremo opuesto.
Claviforme: En forma de clava.
Clavada: Referido a las ascas. Ascas alargadas con la base pronunciadamente ms alargada y el
pice ms redondeado.
Cleistotecio: Ascocarpo cerrado sin ostolo, de forma esfrica, con pared constituida por una trama
de micelio compacto, en cuyo interior existen ascos y ascosporas.
Columela: Dilatacin, en forma de cpula situada en el interior de un esporangio, visible sobre todo
al romperse la pared del esporangio.
Conidio: Espora asexuada externa no mvil, que suele formarse en el pice o en el lado de una
clula esporgena; en algunos casos, una clula hifal preexistente puede convertirse en un conidio,
desprendindose al madurar.
Conidioforo: Estructura especializada que soporta las clulas conidigenas o sobre la cual se
desarrollan directamente las conidias. La forma de los conidiforos y conidios es muy importante en
taxonoma.
Continuo: Referido al talo. Talo compuesto de una nica mancha de forma y tamao variable.
Coprfilo: Dcese de las especies de hongos que se desarrollan sobre el estircol.
Copronos: Especie de hongo del orden de los agaricales, familia de las coprinceas, cuya
caracterstica principal es que se convierten lquido o simplemente desaparece el sombrero en la
madurez.
Coremio: Grupo de hifas (o Esporoforos), generalmente verticales, a veces fusionadas, que en sus
vrtices originan las esporas.
Coriceo: Perteneciente o relativo al cuero.
Corimbiforme: Nacimiento de grupos de ramas convexas o planas de las que pueden nacer ramas
secundarias, que surgen de diferentes puntos de una rama principal.
Cortcola: Talo que prefiere como sustrato las cortezas de troncos o ramas.
Crateriforme. Que tiene forma de crter.
Cuculiforme: Que tiene la forma de cpula.
Cuerpo de Woronin: cuerpo esfrico denso en electrones, existente en las hifas de Ascomycotina y
muchos Deuteromycotina; suelen encontrarse situados cerca de los tabiques.
Dehiscente. Que tiende a abrirse por s solo.
Delicuescente: Cualidad de los copronos, los cuales, se convierten en lquido en la madurez.
Dematiceo: Hifas o esporas de color oscuro o fuliginoso (del latn, fuligio, holln).
Dermatofito: Hongos queratinfilos de los gneros Microsporurm, Trichophyton y Epidermophyton,
agentes de las tias o dermatofitosis.
Dermatofitosis: Enfermedades producidas por los dermatofitos (tia).
Dermatomicosis: Enfermedades que afectan a los tejidos queratinizados, ocasionadas por hongos
queratinfilos.
Deuteromiceto: Hongo en el que se desconoce su forma sexuada, reproducindose solo
asexuadamente (anamorfo). Se les denomina tambin hongos imperfectos. Se incluyen dentro de la
subdivisin Deuteromycotina.
Diahifa: Hifas especializadas que se forman en los hifforos de las Gomphillaceas, productoras de
clulas conidiales que sirven como propgulos.
Dicaritico: Clulas que tienen dos ncleos haploides, en general, genticamente diferenciados.
Dicotmica: Hifa que se divide en dos ramas aproximadamente iguales.
Dictiospora (dictioconidio): Espora con tabiques verticales y horizontales (espora muriforme).
Dimrfico: Hongos que morfolgicamente muestran dos formas diferentes (levaduriforme y
filamentosa). Propio de algunos agentes patgenos de micosis profundas.
Diploide: Ncleo que contiene un nmero doble de cromosomas (2 n).
Disgnico: Se refiere a variedades atpicas de crecimiento lento y atpico de algunas especies.
Disperso: Talo compuesto de varias manchas aparentemente aisladas que pueden o no estar
conectadas por un protalo hialino.
Ectotrix: Que se desarrolla por fuera del pelo, entre la corteza y la epidermcula.
Endotrix: Que se desarrolla en el cuerpo del pelo.
Elipsoide: Esporas ms anchas en el centro y delgadas hacia los pices, con forma de elipse.
Epifitos: Se denominan as a los hongos que viven sobre otras plantas.


Epitecio: Parte superior del himenio, generalmente formado por el pice de las parfisis, pude ser
incoloro o pigmentado por la presencia de cristales y puede o no contener clulas del ficobionte.
Equinulado (del latn echinum y el griego ekhinos = erizo de mar): En castellano, equin (o) se usa
como prefijo en voces compuestas. Muy utilizado por los ingleses (echinulate) para las formaciones
espinosas de algunos elementos fngicos, como los macroconidios de Microsporum.
Erumpentes: Apotecios inmersos en el talo en un estadio joven, finalmente cuando maduros
rompen el talo, emergiendo y exponiendo el himenio; pueden perder totalmente los restos del talo
que lo cubran o mantenerlo en forma de lbulos, generalmente triangulares que cubren
parcialmente el disco.
Esclerocio: Estructura esfrica, compactada, formada por hifas, sin esporas, que puede permanecer
durante largos periodos de tiempo en condiciones ambientales desfavorables conservndose viable.
Especie: Unidad de clasificacin; grupo de individuos estrechamente relacionados parecidos unos a
otros en ciertos caracteres heredados; se designa mediante una nomenclatura binomial formada por
su nombre genrico y el epteto especifico.
Esponuloso: Cubierto de diminutas espinas.
Espora: Es la menor unidad de propagacin de los hongos, frecuentemente multicelular, de origen
sexuado o asexuado.
Esporada: Amasijo de esporas recogido de un carpforo. Se utiliza para definir, exactamente, el
color de las esporas e identificar algunos tipos de setas. Para obtener una esporada, basta con
colocar el sombrero de una seta, a la que hayamos separado el pie al ras, sobre un papel blanco con
las laminillas hacia abajo y esperar 24 horas.
Esporangio: Fructificacin asexuada de los Zygomycetes, con pared peridial homognea, anhista, y
numerosas esporas internas.
Esporangioforo: Hifa que soporta los esporangios.
Esporangiolo: Esporangio pequeo, que contiene pocas esporas.
Esporangiospora: Espora formada dentro de un esporangio.
Esporodoquio: Estroma en forma de almohadilla, recubierto de conidioforos.
Esporforo: Sinnimo de conidioforo.
Esporulacin. Accin y efecto de esporular: producir esporas.
Esterigma: Pedculo o la ltima ramificacin del esporforo que sostiene un esporangio, un conidio
a una basiodiospora.
Estipe: Pie de una seta.
Estolon: Hifas que crecen horizontalmente sobre la superficie del medio, originando con frecuencia
rizoides que penetran en el agar y esporangiforos que ascienden hacia el aire.
Estroma: Masa o matriz de filamentos vegetativos que rodea a un fruto o que lleva una
fructificacin.
Eucariote: Clulas que tienen ncleo provisto de membrana nuclear, grnulos o filamentos de
cromatina y un nucleolo.
Eumiceto: Hongo verdadero.
Excpulo: Pseudotejido externo en forma de anillo o copa que sirve de soporte al himenio.
Excoriada: Cualidad de la piel cuando se halla despellejada
Facultativo: Microorganismo parsito no obligado; puede vivir como saprobio.
Falciforme: Que tiene forma de hoz.
Fase imperfecta: Fase asexuada (ordinariamente conidial) de un hongo.
Fialide: Esporforo en forma de frasco con un cuello y abierto en forma de copa en su extremidad,
que origina conidios blsticos de manera baspeta, sin aumento detectable de su longitud.
Ficobionte / fotobionte: Alga que participa de la simbiosis liqunica.
Ficomicetos: Hongos que se clasifican en la clase Phycomycetes, que inclua las actuales
subdivisiones Zigomycotina y Mastigomycotina. Trmino en desuso.
Ficomicosis: Termino que actualmente se ha sustituido por zigomicosis.
Filiforme: Esporas con forma de hilo, muy delgadas y generalmente curvadas.
Filosfera: Referente a todos los organismos que habitan sobre una hoja.
Fimcola: Dcese de los hongos que se reproducen sobre el estircol.
Fisin: Forma de divisin transversal de una clula de un hongo, generalmente de las levaduras.
Flagelo: Estructura en forma de ltigo, liso o barbulado, que sirve para la propulsin de una clula
mvil.


Flocoso: Crecimiento de aspecto algodonoso de las hifas de algunos hongos sobre la superficie del
medio de cultivo.
Folicola: Organismos que viven sobre la epidermis de hojas vivas.
Forma perfecta: Estado sexuado o teleomorfo de los hongos.
Forfito: Husped sobre el que se desarrollan los lquenes.
Fuliginoso: denegrido, oscurecido.
Fungus: Hongos en latn.
Funculo: Cordn pequeo delgado, por el cual los peridiolos de algunas Nidulariales estn unidos al
basidiocarpo que los ha formado.
Furfurcea: Descamacin fina, como salvado.
Fusiforme: Que tiene forma de huso (en francs, fuseaux; en ingles, spindle-shaped).
Gametangio: Clula que contiene gametos o acta como un gameto.
Gameto: Una clula o ncleo sexual que puede fusionarse con otra clula o ncleo sexual
compatible durante la reproduccin.
Gemacin: Forma de multiplicacin de las levaduras, en la cual la clula hija se desarrolla a partir
de un brote de la clula madre, forma de reproduccin asexuada.
Gnero: Categora taxonmica que comprende una o varias especies; el nombre genrico es el
primero del binomio.
Gefilo: Hongo que vive normalmente en el suelo.
Gimnocarpico: Del griego gymnos, descubierto: fruto expuesto.
Gimnotecio: Ascocarpo sin ostiolo parecido a un cleistotecio, en el cual las hifas que forman su
pared son laxas y los ascos estn situados en su parte central de forma irregular. Es caracterstico
de hongos pertenecientes a las familias Gymnoascaceae y Arthrodermataceae.
Glabra: Lisa, lampia.
Glauco: De color verde claro.
Glucano: Polmero de la glucosa que forma parte de la pared de las clulas de levaduras.
Glutinoso: Pegajoso.
Granular: Se refiere a las colonias de algunos hongos, cuya superficie esta constituida por un polvo
de partculas gruesas.
Gtula. Gotita de aceite.
Hbitat: Territorio en el que una especie o un grupo de especies encuentran un complejo uniforme
de condiciones de vida a las que estn adaptadas.
Halofilo: Microorganismos que tolera altas concentraciones de sales.
Haplofase: La parte del ciclo vital de un hongo, en el cual las clulas son haploide.
Haploide: Clulas cuyos ncleos presentan una sola dotacin cromosomita, o numero n de
cromosomas.
Haploides: Del griego haplooid, simple, ncleo con un numero n de cromosomas, por reduccin
cromosmica o meiosis.
Haustorio: Organo de absorcin que se origina en una hifa de un parasito y penetra en una celular
del husped; con frecuencia, este rgano se forma en parsitos obligados, pero tambin es
producido por algunos parsitos facultativos.
Helicicospora: Espora enrollada o helicoidal.
Hemiangiocrpico: Apotecios que se encuentran abiertos antes de la madurez.
Hemisporas: Cadeneta de talosporas resultante de la divisin de una hifa llamada proconidia,
limitada en su base por una estrangulacin con pared celular espesada.
Heterocaritico: Clula con dos o mas ncleos genticamente diferentes.
Heterotlico: Se refiere a las especies que aisladamente son estriles sexualmente, siendo
necesario para lograr la reproduccin sexuada que se fusionen dos talos de distinto signo, en los
cuales primero tiene lugar la plasmogamia y posteriormente la cariogamia.
Heteotrfico: Que requiere compuestos orgnicos como fuentes de energa.
Hialino: Sin color, transparente.
Hifa: Un filamento, tabicado o continuo (sin tabiques), que constituye una unidad estructural del
micelio vegetativo de los hongos. Hifa del griego hyphe, tejido: Rama del micelio filamentoso.
Hifa ascogena: Hifa especializada, que da lugar a uno o ms ascos.
Hifas peridiales: Hifas gruesas, diferenciadas, que rodean un ascocarpo.
Hifforos: Estructuras especializadas de multiplicacin asexual, presentes en las Gomphillaceas.
Generalmente provistas de un soporte que sostiene a las diahifas productoras de conidias.


Hifomiceto: Hongos pertenecientes a los Deuteromycetos filamentosos que originan clulas
conidigenas libres.
Hifopodium: Un apresorio de forma y tamao constante.
Higrfano: Que se hace translcido con la humedad.
Himenio: Capa de micelio frtil en donde se originan los ascos, basides o conidiforos. Himenio del
griego hymen, membrana: Superficie esporgena de Ascomycotina y Basidiomycotina.
Hipotecio: Capa del apotecio localizada debajo del himenio, generalmente entre ste y el excpulo
basal.
Hspido: cubierto de pelo spero, hirsuto, erizado
Holoblstico: Conidiognesis blstica en la que todas las capas de la pared celular forman parte de
la pared del bastoconidio.
Holocrpico: Trmino que se aplica a un organismo cuyo talo se convierte por entero en una o mas
estructuras reproductivas.
Holomorfo: Se refiere a la totalidad de un hongo (incluyendo su estado anamorfo y teleomorfo).
Homotlico: Cultivo puro o monocelular, capaz de formar fructificacin sexuada sin previo
apareamiento.
Homotalico: Se refiere a los hongos para cuya reproduccin sexuada se requiere solamente un talo,
siendo, por lo tanto, autocompatible.
Imbricado: Se aplica a las escamas del sombrero cuando se presentan sobrepuestas como las tejas
de un tejado.
Infundibuliforme: En forma de embudo.
Intercalar: Situado entre dos celulas de una hifa.
Isidro: Propgulo de multiplicacin asexual, con forma definida y estructura similar a la del talo.
Isolocular: Esporas con clulas aproximadamente del mismo tamao.
Lamelas: Lminas perpendiculares y paralelas.
Lanoso: Textura que recuerda la de la lana.
Lenticulares: Que tienen forma semejante a la semilla de la lenteja.
Leucospreo: De esporas blancas.
Levadura: Hongo unicelular, redondeado u ovoide, que se reproduce por gemacion o escisin. Su
anamorfo se incluye en Deuteromycotina y el teleomorfo en Basidiomycotina y Ascomycotina.
Levaduriforme: En forma de levadura.
Lgncola: Se aplica a los hongos que se desarrollan sobre la madera.
Lvido: De un color gris nuboso. Plido.
Lculo: Cavidad excavada en un estroma.
Macroceflico: Esporas que tienen una clula distal de mayor tamao que las restantes.
Macroconidio (macroaleuriospora): El mayor de dos tipos de conidios en los hongos que dan origen a
esporas grandes y pequeas; generalmente es multicelular.
Macromicetos: Hongos superiores, el ascocarpo de los cuales es de tamao macroscopico (setas).
Mcula: Mancha.
Mameln: Pequea eminencia carnosa semejante a un pezn que muestran los sombreros de
distintas especies de hongos.
Mamelonado: que posee mameln.
Manano: Polmero de la manosa, abundante en la pared de las levaduras.
Meiosis: (del griego, reduccion), reduccin de la cromatina de 2n a n durante la divisin celular.
Mesfilo: Microorganismo cuya temperatura optima de crecimiento esta entre 20-35C.
Mesoperidio: Lo que est en medio del peridio.
Mtula: La clula situada debajo de las fialides en algunos Aspergillus y Penicillium.
Micelio: Conjunto de las hifas que constituyen en talo del hongo.
Micelio esteril: Un orden de hongos imperfectos (Deuteromycetos) que no originan conidios o
esporas.
Micobionte. Hongo que participa de la simbiosis liqunica.
Micofagia: Comer hongos o setas.
Micologa: Ciencia que estudia los hongos.
Micorriza: Conjunto de un hongo y las raicillas de una planta que viven en simbiosis ayudndose
mutuamente.
Micosis: Enfermedad producida por hongos


Microconidio: La menor de dos formas diferentes de conidios producidos por una misma especie de
hongo.
Microides: Trmino empleado por Sabouraud para la invasin de los pelos por pequeas esporas
ectotrix (propias de T. mentagrophytes).
Micromicetos: Hongos cuyos aparatos de fructificacin son de tamao microscpico.
Myxomicetes: Cierto orden de hongos. Organismo inferior sin clorofila
Mohos: Hongos filamentosos de aspecto algodonoso, que en general se desarrollan como saprobios.
Moniliceo: Se refiere a hongos que originan conidiforos aislados y son hialinos o ligeramente
coloreados.
Moniliasis: Trmino en desuso con que se designaban hace algunos aos a las candidosis.
Moniliforme: Hifa con zonas dilatadas a intervalos regulares.
Mucilaginosa: Que contiene mucilago (subtancia viscosa ms o menos transparente).
Muriforme: Esporas con varios septos transversales y longitudinales que las dividen en numerosas
clulas, dndole el aspecto de una pared de ladrillos.
Musccola: Que tiene como sustrato a musgos.
Naviforme. Con forma de nabo.
Napiforme: Que tiene forma de nabo.
Noduloso. Provisto de ndulos pequeos
Nomen dubium: Del latn, nombre de un taxn que solamente es conocido por el material tipo,
pero este no se encuentra, est desaparecido o no sirve para la identificacin del taxn.
Obclavado: Forma de maza a la inversa; la porcion distal es mas pequea.
Oblongo: Esporas alargadas, con forma intermedia entre fusiforme y bacilar, con la regin media
levemente convexa y los pices redondeados.
Obtuso: romo, sin punta. Refirindose al sombrero, cuando carecen de cspide evidente y se
presentan ligeramente convexos.
Ocratoxinas: Micotoxinas de A. ochraceous y P.viridicatum.
Ocresporea: color ocre o pardo rojizo de las esporas.
Oleaginosas. Aceitosas.
Oliva: Del color del verde de las aceitunas.
Onfaloide. Parecido al hombligo.
Onicomicosis: Enfermedades de las uas por hongos.
Oogonia: Clula (gametangio) que contiene uno o mas vulos; propio de los Oomycetes.
Oosfera: Gameto femenino grande, desnudo, no mvil.
Oospora: Espora de pared gruesa, que se desarrolla a partir de una oosfera, previa fecundacin o
partenognesis.
Oprculo: Abertura de un fruto o clula frtil mediante una tapa.
Orbicular: Circular, redondo.
Ostolo: Abertura de un fruto en forma de boca.
Ovoide: Esporas en forma de huevo, generalmente un poco alargadas.
Papirceo: De consistencia y delgadez del papel.
Parfisis: Estructuras estriles, unidas basalmente, existentes en un himenio.
Parsito: Dcese del organismo que vive a expensas de otro y de cuya sustancia se nutre.
Paraplectenquimtico: Excpulo con hifas densamente entrelazadas formando clulas
isodiamtricas que le dan el aspecto de un parnquima verdadero.
Pectnea: Hifa en forma de peine.
Pedicelo: Columna carnosa que sostiene el sombrerillo de las seyas.
Pednculo. Pedicelo.
Penicilado: En forma de pincel.
Peridio Pared celular de un cuerpo fructfero.
Perstoma: Dispositivo destinado a regular la salida de las esporas conforme a la humedad del
ambiente.
Peritecio: Fructificacin perfecta de los Ascomycotina en forma de frasco, con un poro en la parte
superior, ostiolo verdadero y una pared propia, en cuyo interior los ascos nacen de una capa
himenial.
Pezizal: hongos con apotecios. Orden de dichos hongos.
Picnidio: Cuerpo fructfero, generalmente en forma de frasco o botella, en cuyo interior se forman
esporas asexuadas.


Picnidiospora: Conidio formado en un picnidio.
Pigmentado: Esporas oscuras o con pigmentacin, comunes en el orden Dothideales.
Pigmento: materia colorante que poseen los hongos y es el que les da color.
Piriforme: Se dice de lo que tiene forma de pera
Plectnquima: Conglomerado de hifas vegetativas semejante a un tejido.
Pleomrfico: Mutante estril o con escasa fructificacin de los dermatofitos.
Pleurgeno: Que nace lateralmente. Del griego pleura, costado.
Plisado: Fruncido con pliegues.
Poro: En general abertura hacia el exterior. Refirindose a los hongos orificios de los tubos cuyo
color es distinto de los propios tubos.
Poro germinativo: Orificio superficial, invisible a simple vista.
Primordio: Es el origen de una seta. Se presenta como la cabeza de un alfiler generalmente blanca.
Proconidio: Hifas vegetativas terminales o laterales, que se forman en cadenetas de talosporas por
tabicamiento en sentido baspeto.
Protalo: Regin que rodea al talo, formada solamente por hifas, a veces transparente o ms clara,
generalmente separando manchas de un mismo talo o talos distintos.
Pubescente: vellosidad, peludo.
Pseudomicelio (seudomicelio, seudohifa): Filamentos observados en las levaduras del gnero
Candida, que se originan por el crecimiento de blastosporas alargadas, que permanecen unidas,
diferencindose del micelio por estar el filamento estrechado en los puntos de unin de unas clulas
con otras.
Quitina: Polisacrido constituido por unidades de N-acetilglucosamina, que forma parte de la pared
celular de los hongos.
Radicular: se denominan as el conjunto de cordones miclicos que se aprecian a simple vista.
Reniforme: De forma de rin.
Reproduccin: Produccin de nuevos individuos que poseen todas las caractersticas tpicas de la
especie.
Reproduccin sexual: Reproduccin en la que interviene la fusin nuclear y la meiosis.
Rizoide: Hifas vegetativas semejantes a raicillas.
Rodospreo: esporas rojas o rojizas.
Rugoso: Que tiene arrugas, lleno de asperezas
Salvajes: Se refiere a las cepas de hongos aisladas directamente de la naturaleza o de lesiones.
Saprobio (saprofito): Seres hetertrofos que se nutren de materia orgnica muerta.
Saxcola: Que prefiere como sustrato a piedras o rocas.
Septo: Tabique que separa las clulas de las hifas de los hongos o de algunas conidias o esporas.
Ssil: Conidio que se une por su base directamente a la pared de la hifa.
Seta: Estructura elevada sobre el talo generalmente delgada formada por haces de hifas
aglutinadas.
Seudomicelio: (Ver Pseudomicelio).
Seudoparnquima: Que simula el tejido de las plantas superiores.
Sifonadas: Hifas carentes de tabique (ver cenoctico).
Simpodial: Caracterizado por crecimiento continuo, despus que la hifa principal haya formado la
espora Terminal, se originan una sucesin de pices, cada uno de los cuales se forma por debajo y a
los lados del pice anterior.
Sinema: Conjunto de hifas o conidiforos erectos, mas o menos unidos, que forman estructuras
alargadas, portadoras de esporas en el pice (sinnimo de coremio).
Sinuado: Que tiene senos.
Sorus: Grupo de frutos o de esporas.
Suberosos: Se dice de los polporos que tienen la consistencia del corcho o incluso de la madera.
Talo: Cuerpo vegetativo de un hongo.
Taloconidio: Conidio que esta constituido por conidiognesis tlica (artroconidios, aleuroconidios).
Talofita: Planta cuya fase somtica esta desprovista de tallo, raz u hojas, y que se propoga por
medio de esporas.
Taxn: Unidad taxonmica.
Taxonoma: Ciencia de la clasificacin.
Teleomorfo: Fase sexual de un hongo (forma perfecta).


Teliospora o teleutospora: Espora de invierno (de reposo) de Uredinales o Ustilaginales, que al
germinar, producen bsides.
Termfilo: Hongo en el que la temperatura optima de crecimiento se encuentra entre 35-45C.
Tia: Afeccin cutnea ocasionada por dermatofitos (sinnimo de dermatofitosis).
Tomentoso: vello suave de algunas plantas. Se utiliza de una forma grosera como sinnimo de
aterciopelado.
Trichophyton y Epidermophyton: Patgenos, agentes de las tias o dermatofitosis.
Turbinado: que tiene la cualidad de un trompo, es decir, que se engruesa desde la base hacia arriba
Umblicado: Con figura de ombligo.
Uncinado: del latn uncus, gancho, doblado en forma de gancho.
Ungulado: Que tiene forma de casco de caballo
Unitunicado: Asco cuyas paredes interna y externa son ms o menos rgidos y no se separan durante
la expulsin de las esporas.
Velo: Bajo esta denominacin hacemos referencia a todos los tejidos que en los orgenes de la seta
abrigan la formacin del himenio, ya se trate de la volva, el anillo o de la cortina.
Verticilado: Ramificacin de hifas dispuestas alrededor de un eje y a un mismo nivel.
Vescula: Formacin dilatada de algunos conidiforos (Aspergillus).
Volva: Velo tenue que suele envolver a los hongos distinta del sombrero
Yema: Primordio celular que se forma a partir de una levadura, constituyendo el inicio de una
blastognesis y cuyo final es un blastoconidio.
Zigomicosis: Micosis debida a hongos de la divisin Zygomicotina.
Zigospora: Espora sexual que se origina despus de la fusin de dos gametangios en los
Zygomicotina.
Zigosporangio: Esporangio que contiene una zigospora y se desarrolla despus de la fusin de dos
gametangios.
Zigote: Clula diploide resultante de la fusin de dos clulas haploides.
Zofilo: Hongo patgeno para los animales.
Zoosporangio: Esporangio que contiene zoosporas.
Zoosporas: Espora mvil formada en un zoosporangio.

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