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    Determinación Reacciones Febriles y Rosa de Bengala

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    Jarely Solis
    Este documento describe los procedimientos para realizar las pruebas de Reacciones Febriles y Rosa de Bengala. La prueba de Reacciones Febriles detecta anticuerpos para enfermedades como la fiebre tifoidea y brucelosis mediante aglutinación. La prueba de Rosa de Bengala también detecta anticuerpos contra Brucella a través de aglutinación. El documento explica los fundamentos, metodologías, valores de referencia e interpretación de resultados para ambas pruebas.

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    Este documento describe los procedimientos para realizar las pruebas de Reacciones Febriles y Rosa de Bengala. La prueba de Reacciones Febriles detecta anticuerpos para enfermedades como la fiebre tifoidea y brucelosis mediante aglutinación. La prueba de Rosa de Bengala también detecta anticuerpos contra Brucella a través de aglutinación. El documento explica los fundamentos, metodologías, valores de referencia e interpretación de resultados para ambas pruebas.

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    Determinación Reacciones febriles y Rosa de bengala

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    Este documento describe los procedimientos para realizar las pruebas de Reacciones Febriles y Rosa de Bengala. La prueba de Reacciones Febriles detecta anticuerpos para enfermedades como la fiebre tifoidea y brucelosis mediante aglutinación. La prueba de Rosa de Bengala también detecta anticuerpos contra Brucella a través de aglutinación. El documento explica los fundamentos, metodologías, valores de referencia e interpretación de resultados para ambas pruebas.

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    Este documento describe los procedimientos para realizar las pruebas de Reacciones Febriles y Rosa de Bengala. La prueba de Reacciones Febriles detecta anticuerpos para enfermedades como la fiebre tifoidea y brucelosis mediante aglutinación. La prueba de Rosa de Bengala también detecta anticuerpos contra Brucella a través de aglutinación. El documento explica los fundamentos, metodologías, valores de referencia e interpretación de resultados para ambas pruebas.

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    de 6

    26 de noviembre de 2020

    ANALIZA Y FRACCIONA SANGRE CON FINES


    TRANSFUNCIONALES
    Sem: 5to Gpo: D
    No. de actividad: 5
    Nombre de act: Determinación de
    Reacciones febriles y Rosa de bengala.
    Solís Jiménez Persia Jarely

    Fundamento
    Se basa en la demostración de anticuerpos específicos presentes en el suero del paciente para los
    antígenos de los agentes causales como la fiebre tifoidea (Salmonella typhi), paratifoideas (Salmonella
    enteritidis, S. partyphi A y B), tifo epidémico (Rickettsia prowazekiie) y brucelosis o fiebre de malta
    (Brucella sp). Solo para el caso de las especies de Rickettsia causantes del tifo epidémico se utilizan
    componentes antigénicos de Proteus (OX-19, OX-2 y OX-K), dado que cruzan antigénicamente.

    Metodología
    TÉCNICA RÁPIDA EN PLACA
    1. Colocar en una placa una gota (50 ul) de suero y agregar una gota (50 ul) de suspensión de
    Antígeno.
    2. Mezclar y agitar la placa en forma circular durante 2 minutos.
    3. Observar la presencia o ausencia de aglutinación utilizando una luz indirecta sobre fondo oscuro.
    TITULACIÓN RÁPIDA EN PLACA
    1. Dividir una placa de vidrio en sectores de 4 cm2 aproximadamente.
    2. Empleando las micropipetas apropiadas colocar en estos sectores 0.08, 0.04, 0.02, 0.01 y 0.005
    ml respectivamente de suero límpido. Repetir el procedimiento para un control negativo y uno
    positivo.
    3. Colocar 1 gota de Antígeno previamente agitado sobre cada gota de suero.
    4. Mezclar el suero y el Antígeno utilizando una varilla abarcando un área de 2 cm de diámetro
    aproximadamente. Debe emplearse una varilla distinta para cada dilución de suero o la misma
    varilla mezclando a partir de la muestra más diluida.
    5. Agitar la placa durante 2 minutos en forma circular.
    6. Observar la aglutinación utilizando luz indirecta sobre fondo oscuro.
    Nota: como en sueros normales puede haber aglutininas de tipo variable, la reacción de aglutinación
    positiva tiene poco valor, para que los resultados adquieran significado se debe repetir varias veces
    la prueba para demostrar un aumento del título durante el curso de a infección:
    Mililitros de suero Dilución
    0.08 1:20
    0..04 1:40
    0.02 1:80
    0.01 1:160
    0.005 1.320

    Valores de referencia
    >1:80. Salmonelas y Brucelas
    >1:160. Indicativos de infecciones recientes.
    <1:160. Proteus. Considerado no significativo.
    Un resultado positivo aislado tiene menor significado que la demostración de un aumento o disminución
    del título en muestras tomadas del mismo.

    Interpretación de resultados
    + + + +: todos los microorganismos aglutinan.
    + + +: aglutinan aproximadamente el 75%.
    + +: aglutinan aproximadamente el 50%.
    +: aglutinan aproximadamente el 25%.
    Negativo: no aparece aglutinación.
    Técnica I: se indica solamente positivo o negativo.
    Técnica II: el título se considerará la última dilución que da aglutinación del 50% (++).
    Fundamento
    La prueba del Rosa Bengala o prueba del antígeno tamponado de Brucela, es una técnica rápida de
    aglutinación en porta para la detección de anticuerpos anti-Brucela en sueros animales y humanos1-3.
    La suspensión bacteriana es reactiva tanto con anticuerpos IgG como IgM, siendo los primeros
    detectados más precozmente (infecciones sub-clínicas) y por un período más largo de tiempo (fase
    crónica) que con el procedimiento convencional de tubo.

    Metodología
    MÉTODO CUALITATIVO
    1. Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La sensibilidad del ensayo
    disminuye a temperaturas bajas. 2.
    2. Depositar 50 µL de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los controles Positivo y
    Negativo, sobre círculos distintos de un porta.
    3. Mezclar el reactivo de Rosa de Bengala vigorosamente o con el agitador vortex antes de usar.
    Depositar una gota (50 µL) junto a cada una de las gotas anteriores.
    4. Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del
    círculo. Emplear palillos distintos para cada muestra.
    5. Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80 – 100 r.p.m. durante 4 minutos. El exceso de
    tiempo de agitación puede originar la aparición de falsos positivos.
    MÉTODO SEMICUANTITATIVO
    1. Realizar diluciones dobles de la muestra en solución salina 9 g/L.
    2. Proceder para cada dilución, como en la prueba cualitativa.

    Valores de referencia
    Hasta 25 IU/mL. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.

    Cálculo
    La concentración aproximada de anticuerpos anti-Brucella en la muestra del paciente se obtiene de la
    siguiente manera: 25 x Título de anti-Brucella = UI/mL
    Interpretación de resultados
    Examinar macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación inmediatamente después de
    retirar el porta del agitador. La presencia de aglutinación indica una concentración de anticuerpos anti-
    Brucela igual o superior a 25 UI/mL. En el método semicuantitativo, se define el título como la dilución
    mayor que da resultado positivo.
    BIBLIOGRAFÍA
    Reacciones febriles
     Instituto Politécnico Nacional. (s. f.). Manual de Prácticas de Inmunología. Escuela Nacional de
    Medicina y Homeopatía.
    https://www.enmh.ipn.mx/assets/files/enmh/docs/docentes/academias/manualesdelaboratorio
    /Manual%20de%20Practicas%20de%20Inmunolog%C3%ADa%20M%C3%A9dica.pdf

     Wiener Lab. (s. f.). Antígenos febriles. https://www.wiener-


    lab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/antigenos_febriles_sp.pdf

     LINEAR CHEMICALS. (s. f.). Febrile antigens. LINEAR.


    https://linear.es/ficheros/archivos/2199435%20cas%20Rev.%2003.pdf

    Rosa de bengala
     MONLAB TEST. (s. f.). ROSA DE BENGALA. Monlab.
    https://www.monlab.es/document/Microbiologia/Rosa%20de%20bengala/IFU%20rosa%20be
    ngala%20monlabtest.pdf

     LINEAR CHEMICALS. (s. f.-b). Rose Bengal. LINEAR.


    http://www.linear.es/ficheros/archivos/322_2210005cas.pdf

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