Guia 6 Bacterias

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Guia 6 bacterias
Microbiología (Universidad de San Carlos de Guatemala)
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UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS Y FARMACIA
ESCUELA DE QUIMICA BIOLOGICA
Departamento de Microbiología
Curso: Microbiología
Carreras de Biología y Química
Pablo González 201403349
Hoja de Trabajo No. 7: Crecimiento Bacteriano II.

Fecha de entrega: día jueves 1º de agosto de 2016.
1. Defina los siguientes términos, bajo el concepto de crecimiento microbiano

 Crecimiento de poblaciones: aumento de organismos celulares de una población.
 Tiempo de generación: tiempo en el cual se duplica el número de células y masa celular .
 Crecimiento exponencial: modelo de crecimiento poblacional con periodos fijos de tiempo en

los que se duplican los organismos.
 Solutos compatibles: El soluto utilizado en el interior celular para ajustar la actividad hídrica del
citoplasma que no inhibe los procesos bioquímicos celulares.
(Madigan, Martinko, Dunlap y David, 2009)
2. Dibuje la curva de crecimiento bacteriano y explique en detalle sus fases. Conteste las siguientes
preguntas:
a. ¿De qué depende la fase de latencia (Lag). ¿Qué condiciones afectan su duración?
b. ¿En la fase estacionaria cuáles son los factores que limitan el crecimiento bacteriano?
c. ¿Qué sucede con las bacterias en la fase de muerte?
d. ¿En qué fase de la curva de crecimiento se forman las esporas bacterianas?
a. Depende de la historia de cultivo y de las condiciones de crecimiento. Algunas condiciones

como si el cultivo es viejo o nuevo, si cuenta con los nutrientes preciosos para su reproducción
alterna su periodo de duración.
b. Agotamiento de nutrientes en medio de cultivo, acumulación de desechos de metabolismo que
cesa el crecimiento exponencial.
c. Las bacterias sufren una lisis celular.

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d. En la fase estacionaria.
(Madigan et al., 2009)
3. Explique: ¿Porqué los microorganismos bombean iones inorgánicos hacia dentro de la célula o
sintetizan solutos orgánicos? ¿De qué depende su concentración y qué nombre reciben?
Los utilizan para crear gradientes y obtener agua y otras sustancias en contra de gradientes (Madigan et
al., 2009).
4. ¿Porqué se usan medios con una concentración de 7.5- 10% de NaCl para aislar al género
Staphylococcus? ¿Cómo se clasifica este género de acuerdo a su relación con el NaCl?
Debido a que esta bacteria es halotolerante lo que le permite tener un crecimiento en este medio a
diferencia de las demás bacterias (Madigan et al., 2009)
5. ¿Qué otro tipo de solutos usan las bacterias halófilas y las cianobacterias?
Utilizan prolina como soluto compatible (Madigan et al., 2009).
6. Elabore un cuadro en donde incluya el nombre que reciben los diferentes grupos de bacterias
de acuerdo a sus requerimientos de O2, tipo de metabolismo, el hábitat en donde se les puede
encontrar y dos ejemplos de cada grupo.
Grupo Requerimiento de O2 Metabolismo Hábitat Ejemplos
Aerobias 21% de oxígeno Respiración Piel, polvo Micrococcus luteus,
Lactobacillus sp.
Microaerófilos 5% de oxígeno Respiración Lagos Spirilum volutans,
Netseria sp.
Aerobios Pueden o no utilizarlo Respiración o Intestino grueso Escherichia coli,
facultativos fermentación corynebacterium
Anaerobios No lo utilizan aunque Fermentación Tracto Streptococcus
aertolerantes pueden crecer en respiratorio pyogenes,
presencia de el superior Fusobacterum sp.
mismo.
Anaerobios Muerte en presencia Fermentación Digestores de Methanobacterium
estrictos de oxigeno aguas negras, fornicium, Gemella sp.
sedimentos
7. Explique cuál es la composición del caldo de Tioglicolato de sodio. ¿Cómo favorece el crecimiento
de los anaerobios estrictos?. ¿Cuál es el nombre del indicador que tiene y cuál es su función?
Esta compuesto de pequeñas cantidades de agar con tioglicolato y resazurina que es indicador de
reacción redox, es decir, de presencia de oxígeno. Favorece el crecimiento ya que el mismo reduce el
oxígeno por agua, creando un ambiente anóxico (Madigan et al., 2009)
8. Realice un esquema del equipo y materiales que se usan para el cultivo de anaerobios crear un
ambiente anóxico en el laboratorio.

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9. Nombre las formas tóxicas del Oxigeno. Explique: ¿Porqué se forman y cómo actúan?
Singlete de oxígeno, son bastante reactivos llevando a cabo oxidaciones indeseables para la célula,
se produce fotoquímicamente o por vía bioquímica por peroxidasas. Anión superoxido, peróxido de
hidrógeno y radical hidroxilo, se producen durante la reducción de oxígeno a peróxido de hidrógeno
en la respiración. Oxidan cualquier macromolécula (Madigan et al., 2009).
10. ¿Qué enzimas destruyen las formas tóxicas del O2? Elabore un cuadro en donde coloque en
que grupo de bacterias se encuentran presentes estas enzimas (en aerobias, aerotolerantes,
anaerobias, etc.).
Enzima Bacterias
Catalasa Aerobias, Aerobias facultativas
Peroxidasa Microaerofilicas
Superoxido dismutasa Aerobias, Aerobias facultativas, aerotolerantes
Superoxido reductasa Archeas
11. Defina que es un cultivo batch y un cultivo continuo. Establezca diferencias, usos, ventajas y
desventajas.
El cultivo de Batch es un cultivo microbiano en un sistema cerrado de volumen constante, el cultivo
continuo estudia las variables de pH, temperatura, concentración de nutrientes, manteniendo constante
el valor de masas (Madigan et al., 2009)
12. Defina cultivo mixto, cultivo puro, cultivo axénico, cepa y clona. ¿Cuál es la importancia
microbiológica de obtener cultivos puros?
 Cultivo Mixto: mezcla de colonias de distintos organismos.
 Cultivo Puro: cultivo que contiene solo un tipo de microorganismos a partir de colonias aisladas.
 Cultivo axénico: cultivo de una cepa microbiana.
 Cepa: población de células de una sola especie descendientes de una única célula.
 Clona: conjunto de individuos que se derivan de una misma célula.
(González, Torrico y Merida, 2012)
13. Realice un cuadro comparativo donde enumere y describa brevemente las técnicas para
preservar cultivos puros. Incluya ventajas y desventajas.
Método Ventajas Desventajas

Liofilización Muy efectivo a largo plazo Causan una gran mortandad de bacterias
Resiembra Económico Alta probabilidad de contaminación
Desecación Los cultivos no sufren daño Daño de material genético
Congelación Buena conservación de los organismos Alto costo
Nitrogeno Muy buena conservación Muy costoso
líquido
(Hernandez, 2006)

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14. Complete el siguiente cuadro de métodos de medición del crecimiento bacteriano:

Mètodo Principio Ventaja Desventaja Aplicaciones
Métodos directos
Recuento de células Utilizan Rápido No permite Ecología
totales. camaras de distinguir entre microbiana
recuento y células vivas o
porta objetos muertas, las
modificados en células
rejilla pequeñas son
difíciles de ver
en el
microscopio, la
precisión
afecta la
medición, se
requiere un
microscopio de
contraste de
fase, el método
no es bueno
para muestras
de baja
densidad, las
células con
movilidad
deben
inhibirse.
Recuento de células Cuenta céulas Menor Depende de la Determinación
viables: Incluya los 3 capaces de contaminació adecuada de tipos celulares
métodos. dividirse y n técnica y del particulares
originar medio de
descendencia, cultivo,
se determina el diferencia de
número de datos debido al
céulas de la mal pipeteo.
meustras capaz
de formar
colonias sobre
un medio sólido
adecuado
Mètodos indirectos
Se basa en la Rápido Irregularidades Realizar estudios
Turbidimetría turbidez que se en formación sin dañar la

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genera por la de colonias, muestra.

presencia de otras forman
DNA y biofilms.
proteínas,
determinando
la masa celular
total
Determinación de técnica que Rápido y Poca precisión Determinación
nitrógeno. permite versátil en recuenta de bacterias en
determinar bacteriano medicina.
indirectamente
la masa de una
población
bacteriana.
Existen distintas
técnicas para
determinar la
cantidad de
nitrógeno que
contiene una
muestra con
relación al
compuesto que
se quiera
determinar.
Puede
analizarse el
nitrógeno no
proteico
mediante el
NO2-, NO3-,
NH4+, el
nitrógeno
proteico
mediante
absorción en
UV, Reacción de
Biuret,
Reacción de
Lowry, o el
nitrógeno total
mediante la
Digestión de
Kjeldahl.
Determinación de Concentración Fácil de El Análisis
peso seco. celular realizar procedimiento microbiológico
bacteriana es muy largo y de alimentos
expresada en tedioso

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unidades de
peso seco
Determinación de La medida de la Procedimiento Se debe ser Análisis de
actividad bioquímica. masa de los de alta bastante suelos.
constituyentes fiabilidad cuidadoso par
de la célula a no alterar los
bacteriana es datos
utilizada
frecuentement
e como base
para la medida
de una
actividad
metabólica, o
de un
constituyente
metabólico o
químico.
15. Explique por qué se debe reportar en el recuento de células viables como Unidades formadoras de
Colonias (UFC/ml de muestra y NO por número de células/ml o /gramo.
Debido a que permite el conteo de las células vivas y descarta cualquier célula muerta que entraría en el
conteo por gramo. (Hernandez, 2006)
Bibliografía
González, C., Torrico, G. y Merida, M. (2012). MEDIOS DE CULTIVO EN UN LABORATORIO DE
MICROBIOLOGÍA. Madrid: MeriLab.
Hernandez, A. (2006). Microbiología Industrial. México D.F.: EUNED.
Madigan, M., Martinko, J., Dunlap, P. y David, C. (2009). Brock: Biología de los microorganismos.
Madrid: Pearson Education.

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 Tiempo de generación: tiempo en el cual se duplica el número de células y masa celular .

 Crecimiento exponencial: modelo de crecimiento poblacional con periodos fijos de tiempo en

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