Cultivo de Rotífero

Los Rotíferos son muy fáciles de mantener en casa. Se alimentan de

micro algas, por lo general de tamaño 1 a 10 micras. La micro alga
más utilizada es la Nannochloropsis, una pequeña alga verde no
móvil (no tiene cilios ni capacidad de nadar) Esta alga tiene un alto
contenido de proteínas, carbohidratos y lípidos. Otros comúnmente
utilizadas son las micro algas Isochrysis y Pavlova. Se considera
generalmente que una alimentación basada en Nannochloropsis e
Isochrysis al 50% es idónea y proporciona muy altos niveles de
HUFAS.

No hay que olvidar que el rotífero en sí mismo tiene poco valor

alimenticio. Los motivos de su cultivo generalizado son su tamaño,
idóneo para muchas larvas de peces e invertebrados, su facilidad de
cultivo y velocidad de propagación, y uso como alimento
encapsulado. Para esto, es necesario que el rotífero sea cultivado con
una dieta que maximice su valor energético con proteínas,
carbohidratos y lípidos. Esta dieta son las algas, que es lo que
realmente y en última instancia alimentará y mantendrá sanas
nuestras larvas de peces, invertebrados o corales.

Los Rotíferos tienen un metabolismo muy alto y la necesidad de

comer cada 4 horas. Afortunadamente esto es fácil de hacer al
suministrarles micro algas en el agua con ellos. Idealmente es
necesario alimentar varias veces cada día para mantener un buen
nivel en el cultivo rotíferos. Basta con añadir unas gotas de
Nannochloropsis hasta que el agua se vuelva de un verde claro. Si
observamos que la siguiente vez que vamos a añadir algas el tanque
de cultivo sigue ligeramente verde, como el té, es que estamos
agregando la cantidad correcta. Demasiado verde estamos
sobrealimentando, y color ambar-transparente es que alimentamos
demasiado poco.

Es siempre mejor pecar por defecto que por exceso, y el ritmo y

cantidad de alimento deben ser medidos por el criador, en base a la
densidad de rotíferos que mantiene en cada momento. Tenga en
cuenta que los rotíferos se desarrollarán mucho más rápidamente al
principio por lo que la comprobación sobre el color -óptimamente-
debería realizarse varias veces al día y la adición de algas si es
necesario. La práctica más común para alimentar a los rotíferos es
hacerlo por la mañana y la noche.

Un cubo de 15 litros es una buena configuración para un pequeño

sistema de cultivo. Son baratos, fáciles de mover, y fáciles de limpiar.
Un cubo de 15 litros que contenga 10-12 litros de agua a 500
rotíferos / ml (baja densidad) mantendrá un total de
aproximadamente 7,5 millones de rotíferos y se le puede sacar un
rendimiento de 2,5 millones de rotíferos por día, con una cosecha del
33% diario.
Es una buena práctica asimismo, mantener dos cultivos en paralelo,
por si alguno de los dos falla o se estropea.
Los motivos de un fallo en el cultivo están casi siempre relacionados
con la calidad de agua del cultivo. Otros factores pueden ser los
cambios de salinidad o temperatura muy repentinos.
El agua retirada en cada cosecha debe ser repuesta con agua nueva,
y en esta operación podemos aprovechar para introducir nuevas
algas. Asimismo cada cierto tiempo y dependiendo del volumen del
cubo de cultivo, los restos de algas y rotíferos muertos se irán
acumulando en el fondo y en las pareces, por lo que pueden
convertirse en material anóxico y provocar un aumento de las
bacterias y ciliados del sistema.

Además de la evidente degradación de la calidad del agua, estos

organismos competirán por la comida con los rotíferos por lo que
debemos mantener una cierta higiene tanto del agua como del cubo
de cultivo. Para 10 litros de cultivo puede ser una buena rutina el
cambiar un cubo por otro limpio cada mes como máximo.

Otro indicador de la salud de nuestro cultivo es el numero de rotíferos

hembras. Con un microscopio barato, simplemente a 100x, podemos
revisar muestras del agua para comprobar si el número de rotíferos
portando huevos es igual o superior al 50%. En caso contrario, si el
numero de machos es mayoría, nuestra cepa está envejeciendo y
debe ser reemplazada ya que hay muchas posibilidades de que con el
tiempo el cultivo irá decreciendo.
Publicado por Fernando Pérez-Vigo en 3:15

III. CULTIVO DE ROTIFFROS

En el phylum rotífera se encuentran especies muy importantes

objeto de estudio de Zoólogos y Ecólogos, pues son organismos
muy activos considerados depredadores en el mundo del plancton
pues consumen altas concentraciones de microorganismos, tienen
una alta tasa de reproducción y su afloramiento abate rápidamente
la concentración de oxígeno en el medio. Es por ello que su
localización en los ambientes acuáticos permiten indicar la
presencia de materia orgánica (medios eutróficos) por lo que
revisten gran interés en estudios de Ecología y contaminación.

En la década de los 60's empezaron a considerarse seriamente

como una alternativa de alimentación en Acuacultura por sus
características de desarrollo, facilidad de cultivo y aporte nutricional.

Una de las especies seleccionadas para su uso en AcuaĎultura es

Brachionus plicatilis del que presentamos sus alternativas de
producción en cultivo en los siguientes incisos.

1. CONSIDERACIONES CENERALES SOBRE LOS CULTIVOS DE

ROTTFEROS

Brachionus plicatlis es miembro de la Familia Brachionidae. El ciclo

de vida de este organismo involucra una alternancia en la
reproducción sexual y asexual; la taxonomía de este organismo es
descrita por Ruttner & Kolisko (1974). Este organismo ha sido tema
de polémica sobre su sistemática, ya que los datos aportados en
cuanto a talla y forma concluyen que esta especie en relación al
hábitat es variable, ya que soporta amplios rangos paramétricos y
está ampliamente distribuida, y esta distribución se debe a la alta
longevidad y resistencia de huevos latentes. Los rangos de
salinidad que soporta van desde 1 a 97 ppm (Ruthner & Kolisko,
1974) con el límite extremo de 200 ppm. Este mismo autor concluye
que el agua de mar es el medio óptimo de este organismo. Es
también importante mencionar que en dilución rápida del agua de
mar se obtiene un incremento en el número de hembras y
producción de huevos. El número de huevos producidos por
hembra, es un indicador de las condiciones óptimas del medio. Su
amplia distribución indica que es una especie Euriterma (5~20°C).
La Figura 12 describe la anatomía de B. plicatilis (R. Huches, en: B.
Pejler et al., 1983).

B. plicatilis es una especie que no selecciona su alimento (polífago),

es un filtro-alimentador, se puede alimentar de micro algas:
Cianofíceas, Clorofíceos, Peoniáceas, etc., bacterias y levaduras
(Hirayama, 1973 y otros). Pejler (1983) señala que no se incluye en
su dieta las Familias Cryptomonas y Chrysophytas. Otros trabajos
demuestran que sólo pueden ingerir partículas de 12–15μ en
tamaño (Hirayama, 1978). Existen diferentes trabajos que reportan
tasas de ingestión de: 0.14μ 1/min de Chlamidomonas, 0.034 1/min
de Olisthodiscus, 0.1 1/min de Chlorella, 0.025μ 1/min de Dunaliella
(Hirayama et al., 1972, y otros.

2. CULTIVO MASIVO Y CALIDAD NUTRICIONAL

La producción masiva del rotífero Brachionus plicatilis se inició en

Japón alrededor de los años 60's. Estos se cultivaron inicialmente
transfiriéndolos de un estanque a otro de Chlorella con una
densidad de 10 a 20 × 106 c/ml (SISFFA, 1964a, b). Por lo
impráctico de la técnica se iniciaron una serie de investigaciones
tratando de encontrar el método adecuado para la producción
continua de rotíferos, sin depender de los cultivos masivos de
Chlorella y otras microalgas; una de éstas propuso el uso de la
levadura de pan (Saccharomyces cerevisiae) como alimento (Hirata
& Mori, 1963). Se pensó que ésta resolvería la producción de
rotíferos, pues esta técnica permite obtener densidades muy altas
de más de 100 rotíferos/ml, después de la publicación de estos
resultados, otros investigadores se interesaron en estudiar la
composición química de los rotíferos alimentados con diferentes
microalgas y levaduras (Fukusho et al., 1976; Hirata et al., 1980;
Imada, 1980; Watanabe, 1978; Kitajima et al., 1980).
FIG. 11) Anatomía de Brachionus plicatilis (Rotífera) en: B. Pejler et
al., 1983).

En la Figura 13 se muestran los resultados obtenidos por Hirata et

al., en relación a la utilización de: a) Chlorella, b) Levadura y c)
Levadura/Chlorella. Como se puede observar los resultados
obtenidos con las dietas a y c, son densidades altas hasta de 100
R/ml. Por otro lado, se realizaron investigaciones en cuanto al
aporte nutricional de los rotíferos para el cultivo de larvas de peces
y se observó que en las larvas de peces alimentados con rotíferos
producidos a partir de ladieta de levadura o la mezcla 95% levadura
y 5% Chlorella ocurrían altas mortalidades. Se identificó la causa
como un desvalance nutricional en cuanto a los ácidos grasos
esenciales (Fukusho et al., 1976; Kitajima et al., 1980ab; Watanabe,
1978). Otras investigaciones aportaron la utilización de una
levadura mejorada con ácidos grasos del tipo W3 altamente
insaturados, la cual recibe el nombre de “Levadura Omega” (Imada,
1980; Watanabe, 1978; Kitajima et al., 1980a,b, etc.). En la Tabla 18
se muestra la composición de aminoácidos en B. plicatilis con
diferentes dietas.
Los estudios comparativos de la concentración de ácidos grasos W 3
que Chlorella (especies marinas) posee, es de 29%, la levadura de
pan 1.3% y la Levadura Omega 34.7%. Esta última se produce
comercialmente en Japón (Kitajima, 1980). Otros trabajos más
prácticos y baratos aportaron datos en relación a la determinación
del contenido nutricional de diferentes especies del zooplancton:
Acartia clausi, Tigriopus japonicus, Artemia sp y Moina sp. Se
encontró que la abundancia y calidad de estas especies de
zooplancton dependen de su nutrición, y que la elección de una
especie de microalgas, levadura u otro microroganismo para
alimentar a éstos depende de la composición química, temperatura,
fotoperíodo y tipo de cultivo al que esté sometida esta especie de
microorganismo. Por ejemplo, las especies de zooplancton
alimentados con Chlorella obtienen un enriquecimiento en ácidos
grasos de un 12.7 a un 18.8% (Imada et al., 1979; Imada, 1980;
Watanabe, 1978b, 1980).

Para fines prácticos, la producción masiva de microalgas y la

utilización de levadura de pan aportan buenos resultados en la
producción masiva de larvas de peces y otros invertebrados,
tomando en cuenta que esta utilización permita un enriquecimiento
de los cultivos de zooplancton llamado “tratamiento verde”, (6 a 12 h
en un cultivo de microalgas) después de haber obtenido una alta
densidad con levadura por tres a cuatro días (pueden ser obtenidos
más de 100 R/M).

Esto permite que el zooplancton obtenga la concentración necesaria

de ácidos grasos y aminoácidos esenciales para el buen desarrollo
de las diferentes especies de invertebrados y peces producidos
mediante esta técnica. En la Tabla 19 se muestra la composición de
aminoaécidos en cuatro especies del zooplancton de uso en
acuacultura.
FIG. 12) Densidad de rotíferos con diferentes alimentos A)
Chlorella; B) Levadura; C) Chlorella/Levadura; D) Control (Hirata,
1980).

TABLA 19. COMPOSICION DE

AMINOACIDOS EN Brachionus
plicatilis, CULTIVADO CON DIFERENTES
MICROALGAS
Y LEVADURAS (g/100 g PROTEINA CRUDA)
  Nagasaki Gifu
  1975 1976 1975
1
Lev 3
Lev
2 adu 1
Lev Chl Lev adur 3Chl Lev 4Chl
ra +
  adu orell adu a+ orell adu orell
Chl
ra a ra Chlo a ra a
orell
rella
a
Isoleu
2.9 2.8 3.1 4.4 4.0 4.0 3.2 3.4
cina
Leuci
5.5 5.3 5.6 6.9 6.1 6.2 6.2 6.1
na
Methi
0.8 0.8 0.8 1.0 0.9 0.9 0.9 0.8
onina
Cysti
0.7 1.1 0.8 0.7 0.7 0.7 0.9 0.6
na
Phen
ylalan 3.5 3.4 3.5 4.5 4.1 4.1 3.9 3.9
ina
Tyrosi
3.0 3.0 3.2 3.0 2.8 2.9 3.2 3.1
na
Threo
3.5 3.1 3.4 4.0 3.5 3.4 3.4 3.2
nina
Trypt
opha 1.1 1.2 1.2 1.1 1.1 1.2 1.2 1.2
no
Valin
3.6 3.5 3.8 4.4 4.0 4.2 4.0 4.2
a
Lysin
5.7 5.8 5.8 6.6 6.0 6.0 5.5 6.1
a
Argini
4.2 4.5 4.6 5.2 4.6 4.8 4.4 4.6
na
Histidi
1.4 1.4 1.4 1.7 1.5 1.7 1.5 1.5
na
Alani 3.2 3.2 3.7 3.9 3.5 3.5 3.9 3.8
na
Acido
Aspár 7.7 7.5 8.0 9.8 8.9 8.8 8.5 8.0
tico
Acido
10. 10.
Glutá 8.9 8.8 9.3 9.7 9.5 9.8
1 1
mico
Glyci
2.9 2.9 3.1 3.6 3.1 3.2 3.1 3.1
na
Prolin
5.2 5.9 5.8 5.0 4.8 4.9 6.1 6.7
a
Serin
3.7 3.7 3.9 3.7 3.6 3.7 4.2 4.0
a
TOTA 71. 79. 73. 74. 74.
67.5 67.9 72.9
L 0 5 7 2 1
Muestra obtenida con Etanol al 80%, por
hidrólisis con éter dietílico.
1. Rotíferos cultivados con Chlorella minutissima.
2. Rotíferos cultivados con levadura.
3. Rotíferos cultivados con Chlorella marina y
levadura (1 g de levadura/10 cel/ml agua de
mar/día).
4. Rotíferos cultivados con levadura y enriquecidos
con Chlorella marinapor 36 horas (Watanabe, et al.,
1978b; Hirata, 1983).
TABLA 20. COMPOSICION DE
AMINOACIDOS EN DIFERENTES
MICROCRUSTACEOS (g/100 g PROTEINA
CRUDA)
(WATANABE et al., 1978b)
Artemi Acarti Trigriopu
Moin
Aminoácidos a a s
a sp.
salina1 clausi japonicus
Isoleucina 2.6 3.5 2.5 2.5
Leucina 6.1 5.5 5.0 6.0
Methionina 0.9 1.5 1.1 1.0
 Cystina 0.4 0.8 0.7 0.6
Phenylalanin
3.2 3.7 3.5 3.6
a
Tyrosina 3.7 3.6 4.0 3.3
Threonina 1.7 4.2 3.8 3.8
Tryptophano 1.0 1.1 1.1 1.2
Valina 3.2 4.5 3.3 3.2
Lysina 6.1 5.4 5.7 5.8
Arginina 5.0 4.3 5.2 5.1
Histidina 1.3 1.9 1.6 1.6
Alanina 4.1 5.4 4.9 4.9
Acido
7.5 9.0 9.0 8.3
Aspártico
Acido
8.8 9.5 10.8 9.8
Glutámico
Glycina 3.4 4.6 4.5 3.7
Prolina 4.7 4.6 4.8 4.2
Serina 4.6 3.3 4.3 4.0
TOTAL 68.3 76.4 75.8 72.6
1. Nauplios de Artemia recien eclosionados

3. TECNICAS ALTERNATIVAS DE PRODUCCION MASIVA

Para el cultivo de B. plicatilis en condiciones óptimas se recomienda

la utilización de agua de mar (32~35%), la temperatura óptima de
25°C (Hirata & Mori, 1963; Watanabe, 1978, e Hirata 1980), y en
cuanto a la selección del mejor método de cultivo masivo a
continuación se describen esquemáticamente, algunos ejemplos de
sistemas de cultivo desarrollados por diferentes autores para la
producción masiva de rotíferos.

El primer sistema utilizado fue el llamado método de estanque de

transferencia en cultivos sucesivos de Chlorella (SISFFA, 1964a,b)
(Figura 14).

Posteriormente la producción de B. plicatilis con levadura de pan

(Hirata & Mori, 1967) (Figura 15) sustituye la transferencia sucesiva
por tanques de recirculación, mejorando el tanque con grava en el
fondo y colocando un ascensor de aire en el centro.

La Figura 16 muestra un cultivo sistemático, alternando la dieta de

Chlorella y levadura llamado “thinning out method” (Fukusho et al.,
1976). Este método es el de mayor uso en cultivos masivos pues
reporta una alta producción de rotíferos (300 R/ml).

Y finalmente el método desarrollado por Hirata et al. (1977), llamado

“sistema de retroalimentación”, semejando un ecosistema con la
participación de bacterias pseudomonas (producción de nutrientes
por biodegradación) para Chlorella y ésta como alimento de
rotíferos, los desechos de éstos hacia un biodepósito, etc. (Figura
17) (“Feedback System”; Hirata, 1980). Las tasas de conversión de
alimento de este tipo de sistemas diariamente se incrementan. Se
puede concluir que los sistemas de retroalimentación tienen dos
ventajas al mismo tiempo: la purificación del agua y la minimización
de pérdida de energía a través de la alimentación. Esto permite el
establecimiento de un cultivo de producción continua, como se
muestra en las Figuras 18 y 19.

4. IMPORTANCIA DEL CULTIVO DE Brachionus plicatilis

Las principales ventajas que ofrece el cultivo de Brachionus plicatilis

son: rangos amplios de T° y S%, y diferentes alternativas prácticas
de cultivo masivo, su pequeño tamaño (100–300μ), lo que permite a
las lavas de peces y crustáceos ingerirlos cuando todavía no
pueden ingerir nauplios de artemia, su fácil y barata alimentación
con diferentes especies de fitoplancton, levaduras y dietas
artificiales. Su alta velocidad de reproducción bajo condiciones
óptimas de cultivo, pudiendo duplicarse la población en menos de
24 horas, lo que permite obtener altas densidades (Theilacker &
McMaster, 1971; Amat, 1975; Funikowa & Idaka, 1973; Hirayama &
Kusano, 1972; Hirata, 1975; Hirata et al., 1985; Watanabe et al.,
1979; Kitajima et al., 1979; Imada et al., 1979; Yufera et al., 1983;
Trotta, 1983).

En cuanto a su contenido nutricional, como ya se mencionó

anteriormente B. plicatilis ofrece la gran ventaja de incrementar su
contenido nutricional en relación de su dieta como lo demuestran
los trabajos de Watanabe et al. (1983) y cuyos resultados en
relación a contenido de ácidos grasos esenciales se presentan en
las Tablas 20 y 21.
Para el buen manejo de la población de rotíferos en cultivo, es
recomendable el uso de ecuaciones sencillas como las que se
muestran en la Tabla 22, que nos permiten conocer la
concentración adecuada de alimento y la tasa de reproducción y
fecundidad, factores que nos indican el buen desarrollo del cultivo,
que si son bien controlados nos permitirán el establecimiento de
cultivos continuos y densos para su uso como alimento vivo.

FIG. 13) Método del tanque de transferencia.

FIG. 14) Esquema del sistema de cultivo en tanque de recirculación:

A) Bomba de aire; B) Rotíferos en el medio; C) Tubo de vinil (25 cm
de diámetro); D) Filtro de recirculación; E) Tina de policarbonato
(Pan-light), cubierta de fibra de vidrio..
FIG. 15) Técnica de cultivo desarrollada por la asociación The Seto
Inland Farming Fisheries Association (SISSFFA) y la Estación de
Maricultura de Nagasaki. Este método es el más comúnmente
utilizado y es llamado “Thinning out method” (Fukusho et al., 1976).
FIG. 16) Sistema de retroalimentación de nutrientes (“Feedback
System”) para el cultivo masivo de rotíferos (Hirata, 1980).

FIG. 17) Variaciones en la densidad de rotíferos en el sistema de

cultivo de retroalimentación (“Feedback System”) en tanque de
2,700 l (Hirata et al., 1980).
FIG. 18) Sección del sistema de retroalimentación del cultivo de
rotíferos: A) Tanque de 2,700 l; B) Biodepósito en zig-zag; C)
Aereador móvil; D) Motor de reducción; E) Regulador de automóvil;
F) Compresor.

TABLA 21. TIPO DE ACIDOS GRASOS

PRESENTES EN ROTIFEROS PRODUCIDOS
EN VARIOS SUSTRATOS
ROTIFE ROTIFE
ACIDOS
RO RO ROTIFE ROTIFE
GRASO
LEVADU LEVADU RO RO
S
RA (S. RA + Chlorella AGUA
CULTIV
cerevicea Chbrella marina DULCE
O
e) marina
16:0 8.7 11.7 16.8 8.9
16:1ω7 24.2 16.6 24.3 18.9
18:0 4.8 6.0 1.7 1.6
18:1ω9 33.9 22.8 10.1 9.0
18:2ω6
5.8 + 10.4 + 3.2 + 15.7 +
+
18:3ω3
0.6 + 2.2 + 0.4 + 10.2 +
+
20:1 6.0 + 3.3 2.4+ 0.3
20:3ω3 0.4 2.3 4.4 0.8
20:4ω6 0.4 2.3 4.4 0.8
20:4ω3 0.5 0.6 0.2 1.1
20:5ω3° 1.0° 8.1° 24.1° 1.9°
 22:1 1.7 1.5 1.3 -
22:5ω3 0.2 1.7 3.8 0.3
22:6ω3° 0.5° 0.9° 0.5 -°
εω3HUF
2.2° 11.3° 28.6° -°
A°
* Watanabe et al., 1983
°
Acido graso esencial para especies marinas
+ Acido graso esencial para especies de agua dulce
TABLA 22. TIPO DE ACIDOS GRASOS
PRESENTES EN ROTIFEROS ALIMENTADOS
CON LEVADURA (Saccharomyces cerviceae) Y
LEVADURA OMEGA (W°)
ACIDO LEVADU ROTIFER CULTIVAD
LEVADU
S RA (S. OS OS EN
RA
GRAS cerevicea LEVADUR LEVADUR
OMEGA
OS e) A A OMEGA
13.4 –
16:0 8.3 – 20.0 6–7 10 – 12
16.9
14.2 –
16:1ω7 5.0 – 6.6 26–27 10 – 11
38.2
18:0 3.4 – 8.4 2.3 – 2.6 3–4 2–3
26.1 – 15.5 –
18:1ω9 26–30 22 – 24
43.9 16.4
18:2ω6 2.8 – 15.1 1.0 – 1.1 7–9 2–4
18:3ω3 0.5 – 6.4 0.8 – 0.9   0.7 – 0.8
20:1 tr - 1.6 8.4 – 9.2 3–4 8 – 10
20:3ω3   3.0 – 3.4 1–2 3–4
20:4ω6   3.0 – 3.4 1–2 3–4
20:5ω3 13.4 –
-* 1–2* 9 – 12*
* 17.4*
22:5ω3   0.9 – 1.4 0–0.4 2–3
12.8 –
22:6 3 -* * 7 – 9*
15.6*
εω3 33.5 –
-* 2–44* 25 – 26*
HUFA* 35.8*
 W° La levadura W está enriquecida con una fuente de
ácidos grasos esenciales
* Son ácidos grasos esenciales

TABLA 23. TASAS DE ALIMENTACION,

REPRODUCCION Y FECUNDIDAD
EN CULTIVOS DE ROTIFEROS Brachionus plicatilis
donde: R = tasa de
alimentación
S = suplemento alimenticio (g)
Tbω = peso total de la muestra
de rotíferos (g)

Reproducción:  
donde: P.H. = producción de
huevos
           NRh = número de
 
rotíferos con huevos
           T.R. = número total de
rotíferos de la muestra
donde: D.H. =
 
densidad de huevos
           D.R. =
 
densidad de rotíferos

Indice de fecundidad:

Tasa de recuperación:
donde: A = población en
momento t1
 
           B = población en
momento t2