UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

FACULTAD DE CIENCIAS
E. A. P. BIOLOGA EN ACUICULTURA

Ao de la Promocin de la Industria Responsable y del Compromiso Climtico

Cultivo experimental de Brachionussp.

ASIGNATURA:Cultivo de Zooplancton

INTEGRANTES:

SANTOS ROJAS LUIS ENRIQUE

GALLARDO CARRIL ANGEL
CORDOVA PERALTA ZULY
CRUZ VALIENTE ERICK
VALIENTE MONTES SERGIO

DOCENTE:

CARHUAPOMA GARAY JUAN

CICLO:

VI

Nvo. Chimbote, Noviembre del 2014

1. INTRODUCCION
El alimento vivo (fitoplancton y zooplancton) es esencial durante el desarrollo larvario
de peces, crustceos y moluscos. En la actualidad la investigacin orientada hacia los
microorganismos como fuente de alimentacin est en pleno desarrollo. En pases como
Japn, donde se prctica con xito la maricultura, los cultivos masivos de microalgas,
rotferos, coppodos y cladceros son la base de la produccin comercial (FAO 1989).
Es bien conocido que en el ambiente, la supervivencia de las larvas presenta altas
fluctuaciones, debido a mltiples factores que provocan valores de supervivencia desde
10% hasta 0.1% .Estos factores se pueden dividir en: 1) factores externos y 2) factores
internos. 1) Los factores externos se pueden subdividir en dos grupos: a) los fsicos,
como la temperatura, la iluminacin, el flujo de agua, corrientes, etc., y b) los qumicos,
como el oxgeno disuelto, el amonio, la salinidad, el pH, etc., que pueden ser
considerados algunos de los ms limitantes para la supervivencia y crecimiento. 2) en el
caso de factores internos, pueden ser subdivididos en cuatro tipos: a) los genticos, los
cuales son conferidos por los padres a travs del material heredado, b) los etolgicos,
que se relacionan directamente con el comportamiento alimenticio y procesos de escape
para evitar ser capturada, c) los biolgicos, donde la competencia y depredacin rigen
su supervivencia , y d) los nutricionales, los cuales conferirn a las larvas la energa
necesaria para mantener su metabolismo, crecer y asegurar su supervivencia.
Los criaderos de peces y crustceos marinos, necesitan cultivar zooplancton para
adicionrselo a las larvas. Estas larvas no terminan de formar su sistema digestivo hasta
unos das despus de nacidas, y su capacidad de digestin es bastante limitada. Lo
mismo ocurre con su agudeza visual, prestando atencin (sobre todo en caso de los
peces) solamente a objetos en movimiento. Debido a estas y otras razones, las larvas
han de comenzar su alimentacin en base a presas vivas, es decir, a zooplancton. En
general, hasta que los peces no comienzan a realizar la metamorfosis, no son capaces de
ingerir y digerir adecuadamente grnulos de pienso).
El alimento vivo tiene cualidades que no tiene un alimento inerte, como es el
movimiento, que estimula ser atrapado por el depredador; el color, que es atractivo para
su captura; la calidad nutritiva ya que, los organismos que se aprovechan como

alimento y que se cultivan, contienen la cantidad y la calidad de nutrimentos

indispensables para el adecuado crecimiento de las especies en el agua. Por otra parte,
el alimento vivo tiene la cualidad de no afectar la calidad del agua, debido a que este es
consumido antes de que llegue al fondo, sin causar ningn tipo de descomposicin, a
diferencia del alimento inerte, que si no tiene buena flotabilidad, (o sea que permanezca
por un perodo considerable en la superficie) se ir al fondo, donde se descompone y
afecta al medio, causando a veces una mortalidad total en el estanque. (Castro Barrera
et al., 2003)
Los rotferos eurihalinos, Brachionus sp. son cultivados y utilizados como alimento
vivo para larvas de peces y crustceos en todo el mundo, la supervivencia larval en los
sistemas de cultivo depende de la disponibilidad de estos, sin embargo, problemas en su
produccin masiva, tales como reducida reproduccin o mortalidad total son causa de
los mayores impactos econmicos en Larvicultura, por lo que el comienzo de la
alimentacin en estadios larvales tempranos, parece ser el mayor cuello de botella para
el escalamiento industrial del cultivo de peces.
Aunque estos son ideales como primer alimento exgeno, son incompletos como fuente
de alimento, ya que son bajos en cidos grasos altamente insaturados n-3 (HUFA), pues
los cidos docosahexaenoico (DHA, 22:6n3) y eicosapentaenoico (EPA, 20:5n-3) son
requeridos para el desarrollo y supervivencia en larvas de peces. El enriquecimiento de
rotferos con HUFA n-3 es un proceso esencial en el campo de Larvicultura marina,
pudiendo estos ser alimentados y enriquecidos con microalgas seleccionadas o alimento
formulado. Debido a su importancia para el crecimiento larval y desarrollo en peces, un
numero de productos comerciales para enriquecimiento de rotferos han sido
desarrollados para proveer altos niveles de HUFA (Cabrera, 2008; Ando et al., 2004;
Dhert et al., 2001).
2. OBJETIVOS:
Lograr el aislamiento y manteniendo de Brachionussp.
Evaluar el efecto de las diferentes dietas sobre la fecundidad y crecimiento de
Brachionussp. en base a un cultivo Batch.

3. ANTECEDENTES
3.1.

ASPECTOS GENERALES DE Brachionussp.

Brachionussp. es un rotfero de aguas salobres compuesto de aproximadamente

1000 clulas.Estos filtran pequeas partculas de la columna del agua (bacterias o
microalgas) por medio de la corona de cilios localizada en la regin anterior del
cuerpo (figura 1) que adems usan para la locomocin (Fulks y Main 1991).

Figura1 Brachionussp.indicando sus rganos (modificado de Dhert1996).

El rango de talla est entre 100 y 340 m, y su incremento se debe slo al

incremento del plasma celular. La epidermis se compone de una densa capa de
queratina y protenas, la lrica. La forma de la lrica y el perfil de las espinas y
ornamentos permiten la determinacin de las diferentes especies y morfotipos.

3.1.1. Ciclo de vida.El ciclo de vida comprende la va partenogentica y la va

sexual (figura 2). En la primera, que ocurre en condiciones ambientales
normales, las hembras producen huevos diploides (2n), que dan lugar a
hembras genticamente iguales a sus progenitoras. La va sexual ocurre en
condiciones desfavorables como respuesta fisiolgica a la calidad del agua,
altas densidades de cultivo y cambios en la cantidad y/o calidad del
alimento. En este caso se producen hembras mcticas y amcticas. Aunque
ambas no son morfolgicamente diferentes, las hembras mcticas producen
huevos haploides (n) que originarn machos haploides, predominando la
reproduccin sexual y la produccin de huevos resistentes, que estarn en
latencia hasta cuando las condiciones ambientales sean mejoradas

Figura 2. Ciclo de vida de Brachionussp.(Modificado de Dhert 1996).

3.1.2. Taxonoma. La clasificacin considerada para este estudio es la de Suzuki

(1964) que agrupa a los rotferos dentro del phylumAschelminthes(Tabla 1) y
a Brachionussp. como un complejo de subespecies con diferencias
morfolgicas entre s.
Tabla 1. Clasificacin taxonmica de Brachionussp. (Segn Suzuki 1964).

3.2.

IMPORTANCIA DE Brachionussp.

3.2.1. Descubrimiento e importancia en la larvicultura. Aunque Brachionussp.

est presente en aguas marinas y estuarinas, pudiendo formar parte de la
dieta natural de las larvas silvestres, originalmente fue reconocido por los
japoneses como un organismo daino para los cultivos de anguilas, pues por
su alta tasa reproductiva agotaban el oxgeno de los estanques de cultivo.
Este fenmeno fue llamado desnaturalizacin del agua y para prevenirlo
se realizaron diferentes estudios entre los aos 1950 y 1960. De estos
estudios se concluy que por el contrario, su uso en la larvicultura de peces
mejoraba la supervivencia de las larvas, siendo utilizados por primera vez en
1965 para alimentar larvas del pez Pargusmajor. Brachionussp. es ideal
como alimento vivo debido a su pequea talla, lento desplazamiento,
habilidad de estar suspendidos en la columna de agua, facilidad relativa de
cultivar a altas densidades y de bioencapsulacin de substancias nutritivas o
profilcticas. Su uso est muy extendido en la larvicultura de peces y

crustceos marinos, siendo esencial en los programas de larvicultura de

peces marinos
3.2.2. Valor nutricional. La composicin bioqumica y valor nutricional es
determinada por la dieta. Watanabeet al. (1983) observaron que los rotferos
alimentados con Nannochloropsiscontenan en peso seco un 75% de
protenas, 22% de lpidos y 3% de cenizas mientras los alimentados con
levaduras un 71%, 17% y 12% respectivamente. Tambin observaron que a
diferencia de los rotferos alimentados con Nannochloropsis, los alimentados
con levaduras, eran pobres en cidos grasos altamente insaturados (AGAI)
de las series 22: 5n - 3 y 26: 6n - 3 esenciales en la larvicultura de peces
marinos
La capacidad de bioencapsulacin que presentan los rotferos es
aprovechada con el fin de mejorar su valor nutricional aumentando as la
supervivencia y crecimiento de las larvas alimentadas. De este modo, los
niveles de AGAI de los rotferos alimentados con levaduras pueden ser
mejorados

mediante

la

bioencapsulacin

de

microalgas

como

Nannochloropsise Isochrysis, de diversos productos comerciales con

excelente composicin de AGAI y niveles de protenas, o preparaciones
caseras como harina de calamar o aceite de hgado de bacalao. La
bioencapsulacin permite adems el enriquecimiento de rotferos con
vitaminas y aminocidos.

3.3.

CONDICIONES GENERALES DEL CULTIVO

3.3.1. Salinidad. El rango de tolerancia de Brachionussp.a la salinidad oscila entre

1 y 97 g/L siendo ptimo entre 4 y 35 g/L (Dhert 1996).
3.3.2. Temperatura. El rango ptimo de temperatura vara de acuerdo a factores
especficos e intraespecficos como especie o cepa. Los rotferos del

morfotipo L crecen mejor cuando la temperatura del agua est entre 18 y 25

C mientras que los del morfotipo S crecen mejor entre 28 y 35 C
3.3.3. Oxgeno disuelto. Est reportado que los rotferos pueden sobrevivir en
aguas con niveles de oxgeno tan bajos como 2 ppm.
3.3.4. pH. En el medio natural los rotferos pueden vivir a niveles de pH inferiores
a 6,6.El rango ptimo de produccin ha sido establecido entre 6,6 y 8,0
(Hoff y Snell 1999).
3.3.5. Amonio (NH3). En el agua los niveles de amonio no ionizado (NH3) estn
en equilibrio con el ionizado (NH4+) en una relacin NH3/NH4+ que es
afectada por la temperatura y el pH del agua. Altos niveles de NH3 son
txicos para los rotferos por lo que en cultivos debe vigilarse que estos no
superen 1 ppm de concentracin
3.3.6. Presencia de microbios. Los cultivos de rotferos son adecuados para la
proliferacin de microorganismos que pueden afectar el cultivo o representar
un riesgo sanitario a las larvas por alimentar. Algunos microorganismos
(Pseudomonas) producen vitamina B12, necesaria para la reproduccin de
los rotferos; otros son oportunistas que deterioran la calidad del agua y
aparecen indicando exceso de materia orgnica (los ciliados Euplotesy
Uronema), tambin existen patgenos como las bacterias Vibrio sp y los
hongos Aspergillus que producen una disminucin drstica de la poblacin
de rotferos.

4. MATERIALES Y METODOS

4.1.

Tratamiento del agua para el cultivo:

El agua para el cultivo de rotferos pas tratamientos de filtrado para aislamiento,

mantenimiento y enriquecimiento de cepas, realizado en baldes de (5 L) tapado con

bolsa colocndosele aireacin moderada y constante, suministrada travs de una

manguera y una piedra difusora.
4.2.

Cultivo de MicroalgaScenedesmussp.

Las muestras fueron donadas por el Laboratorio De Cultivos Auxiliares, la cual su

mantenimiento se hizo en medio lquido en botellas de 3L conteniendo de 200 mL, luego se
pas sucesivamente a 500 mL, 1 y 2 L. Estas algas crecieron en medio HM (Merino, 2012).
Este cultivo se mantuvo en agitacin permanente por burbujeo con aire, lo que proporciona
CO2 necesario para el crecimiento, tambin con iluminacin constante.

4.3.

Colecta y Aislamiento de Brachionussp.

Las muestras fueron tomadas del estanque situado frente a la Escuela Profesional
de Biologa en Acuicultura en la Universidad Nacional del Santa, perteneciente al
distrito de Nuevo Chimbote en el departamento de Ancash.
La muestra pas por captacin del medio natural realizado con ayuda de un tamiz
pequeo y colocada en baldes plsticos de 4 litros, traslado, recepcin de muestras,
adaptacin, limpieza, purificacin y aislamiento de cepas.
El mantenimiento del stock comprendi: la preservacin de la cepa aislada. La
obtencin de cepas se realiz a travs de aislamiento de 50 rotferos con ayuda de
microscopio estereoscpico. Estos fueron colocados en vasos de precipitado con 50 ml
de agua filtrada a la cual se le adicion como alimento algas unicelulares
(Scenedesmussp.) se mantuvo las cepas en un ambiente controlado con temperatura
ambiente e iluminacin constante.

TRATAMIENTO DEL

MEDIO DE
CULTIVO

Cepa
Bachionussp
AISLAMIENT

Figura 3. Flujo grama del tratamiento, aislamiento y manteniendo de

Brachionussp.

Figura
4.

Aislamiento de Brachionussp. presentando 2 huevos.

4.4.

Cultivo Batch (enriquecimiento):

Se realiz el trasvase de cepas a 2 botellas de plstico en forma cnicas (2

tratamientos) conteniendo 300 ml-1 c/u (3750 rot.), se inocularon los rotferos en
ambas botellas a una densidad 27 rot.ml-1 (3750 rot. en cada botella) .La primera
botella fueron alimentadas con algas unicelulares Scenedesmussp. (Figura 6a) y la
segunda con levadura de panificacin (Figura 6b) durante 3 das; no se le practic
renovaciones parciales de agua. Diariamente se determinaron parmetros abiticos
como Temperatura, pH y salinidad, as mismo para cada tratamiento se realiz el
conteo de rotferos a fin de determinar densidad poblacional (indiv.mL-1) y el
nmero de huevos por hembra para determinar la fecundidad (F) (huevos.indiv-1),
la cual se calcul como:
F = nmero de huevos amicticos/ nmero de hembras
Se determin la tasa de crecimiento poblacional(TC) (da-1), mediante la siguiente
frmula:
TC = (lnNt ln No)/t
La productividad (R) en rot.L-1.da-1
R = Nt - No / t
Dnde: Ntes la densidad de rotferos (indiv.mL-1) al tiempo t, No densidad inicial
de rotferos (indiv.mL-1) y t el periodo de cultivo (das).

Figura 5. Sistema Batch: (a) Cultivo monoalgalde Scenedesmussp. (b)

Botella con Brachionussp.alimentadas con Scenedesmussp. (c) Botella
con Brachionusspalimentadas con levadura.
(a)Se realiz el conteo de las microalgasScenedesmussp. (b) Levadura.
351
1gota
351

0.05
X

1m
X = 7020

0.05

105ro
3750

1gr de
X
X

= 0.04 gr

Cantidad que ser

sumistrada al cultivo de
Brachionussp. (Botella 2).

7020
X

1800
X = 12x106

1800

12x106
100000

X
X = 15 ml.

Cantidad que ser

sumistrada al cultivo de
Brachionussp. (Botella 1).

Figura 6. Flujograma para el clculo de las concentraciones de alimento

que sern suministradas al cultivo de Brachionussp. (a)Microalgas.
(b)Levadura.

5. RESULTADOS:
Parmetros de cultivo
Los parmetros abiticos se muestran en la tabla 1, Temperatura y pH se mantuvieron
en niveles normales, la temperatura fluctu entre 23 y 26 C. En relacin a el pH vario
de 8.07 9.5.
Tabla 2. Parmetros abiticos (M DS) registrados en el cultivo del rotfero
Brachionussp. utilizandomicroalga y levadura
TRATAMIENTOS
Temperatura C
pH

T1 = Microalga
23-26
8.07- 9.5

T2= Levadura
23-25
7.86-8.4

Fecundidad (F)
Se observ que T1 presento mayor F a las 24 y 48 horas con 0.52 y 0.47 huevos.indiv -1
respectivamente, con valores menores a las 24 y 72 horas. Estos valores son mayores a
los encontrados por Hamreet al., (2008), en un experimento realizado con una cepa del
generoBrachionusespecie no identificada, durante 4 das, utilizando 4 dietas a base de
levadura con enriquecedores, estos autores encontraron valores de 0.32 huevos.indiv.-1
a las 72 horas (experimento 1) y 0.40 huevos.indiv.-1 a las 48 horas (experimento 2).
Tabla 3. Fecundidad (M DS) (huevos.indiv-1), obtenida en el cultivo del rotfero
Brachionussp. utilizandomicroalgas y levadura.
HORAS

T1

T2
Huevos.indiv-1

0
24
48
72

0.23
0.52
0.47
0.16

0.22
0.32
0.39
0.19

Densidad final y productividad (R).

Se observ una mayor R en T1 (5490 rot.L-1 da-1).Este resultado fue menor a losobtenidos
por Abu-Rezq& James (2005), quienesencontraron un R de 12130 rot.L-1.da-1alimentando
rotferos conlevadura+Chlorella+bacterias lcticas, as como6640 rot.L-1.da-1 con la
misma dieta pero sinbacterias.
Tabla 4. Estimacin de la densidad final (indiv.mL-1), y Productividad (R) (c),
obtenidas en el cultivo del rotfero Brachionussp. conmicroalga y levadura
TRATAMIENTOS
D. Final
R

T1
82
5490

T2
63
3600

6. DISCUSIONES:
Kotani&Hagiwara (2003) se refieren que la temperatura de cultivo influencia la
fertilizacin de los rotferos y la temperatura optima es diferente para las diferentes
cepas de rotferos y aun entre las mismas, pues las condiciones ambientales afectan las
generaciones sucesivas.Vasileiadouet al. (2009) mencionan que las diferentes especies
de Brachionussp. difieren en sus preferencias de temperatura, salinidad, pH y oxgeno
disuelto. En este trabajo, la temperatura mayor a 26 C parece influenciar el
crecimiento, ya que en diversas experiencias realizadas en nuestro laboratorio, se
observ buen rendimiento poblacional.
Se recomienda el uso de levadura como alimento porque proporciona elevadas
densidades poblacionales a bajo costo de produccin (Hirayama y Funamoto, 1983).
El uso de levadura de panificacin S. cereviciae se recomienda para la alimentacin de
los rotferos porque permite obtener altas densidades a menor costo de produccin. Sin
embargo, es de hacer notar que ello puede resultar en un escaso valor nutritivo de los
rotferos (Watanabe et al., 1983).
(Gmez 1997) La levadura de pan nacional, se obtuvo menor crecimiento (K =0,45
rotjda y R= 1 1,8x104 roi/L/da
El uso de levadura de pan S. cereviciae se recomienda para la alimentacin de los
rotferos porque permite obtener altas densidades a menos costo de produccin, Gomez

(1997), sin embargo los resultados obtenidos en nuestra prctica, muestra una baja
densidad en el tratamiento con levadura, lo cual estuvo contaminado con protozoarios
lo cual pudo ser el motivo de la baja densidad en este tratamiento.
Segn Ascn (1992), el rotfero B. plicatilis se ha convertido en un elemento esencial de
alimentos organismo vivo en el cultivo de larvas de peces marinos y crustceos y que
las

tcnicas

del

cultivo

masivo

no han cambiado sustancialmente y es aprovechado por ser un filtrador no selectivo

filtrando partculas de hasta 30 micras dimetro, como las microalgas, levaduras,
especies bacterianas, y partculas inorgnicas. Indudablemente el crecimiento y el
desarrollo de las especies cultivadas dependen en gran medida de la naturaleza y
composicin qumica del alimento por su participacin en los procesos anablicos para
la produccin de tejidos, como catalizador de procesos metablicos y en la creacin de
energa para alimentar estos procesos. Desde el punto de vista nutricional, es muy
importante considerar la composicin qumica del material a utilizar como alimento
para la produccin de alimento vivo.

7. CONCLUSIONES:
Se logr aislar a los rotferos y alimentarlos con levadura y microalgaas.
La levadura es un buen alimento para los rotferos porque aumenta los niveles de densidad
del cultivo; pero el mejor resultado en el caso de nuestra experiencia la densidad fue mucho
mejor en el tratamiento a base de microalgas

8. REFERENCIA BIBLIOGRAFICAS:
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marine fish hatcheries.Marine finfish Aquaculture Network. July September 2005.
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YOFERA, M. Tesis para el Grado de Doctor en Biologia.1982. Aislamiento,
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Hamre A., Srivastava A., Rnnestad I., Mangor-Jensen A. &Stoss J. 2008. Several
micronutrients in the rotifer Brachionussp. may not fulfil the nutritional requirements of
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Kotani T. & Hagiwara A. 2003. Fertilization between rotifer Brachionusplicatilis strains at
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Vasileiadou K., Papakostas S., Triantafyllidis A., Kappas I. &Abatzopoulos T. 2009. A multiplex
PCR method for rapid identification of Brachionusrotifers.Mar biotechnol (2009) 11:53-61.

FAO, 1989. La produccin de alimento vivo y su importancia. Programa de cooperacin

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Castro, B. T., De Lara Andrade, R., Castro, G., Castro Meja, J., Malpica, A., 2003.
Alimento vivo en acuicultura. Dpto. El Hombre y su ambiente. Divisin de CBS: UAM.
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