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    Biosensores Mecánicos

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    Vanessa Bermello Jiménez
    Este documento presenta una revisión de los biosensores mecánicos cantilevers y sus aplicaciones en el área biológica y alimentaria. Describe los diferentes tipos de biosensores cantilevers, modos de detección, funcionalización y diseños. También presenta ejemplos de biosensores cantilevers desarrollados para detección de bacterias, virus, biomoléculas y sus características. Concluye señalando que si bien estos biosensores tienen potencial para el área de alimentos, se requiere más desarrol

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    Biosensores Mecánicos

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    Este documento presenta una revisión de los biosensores mecánicos cantilevers y sus aplicaciones en el área biológica y alimentaria. Describe los diferentes tipos de biosensores cantilevers, modos de detección, funcionalización y diseños. También presenta ejemplos de biosensores cantilevers desarrollados para detección de bacterias, virus, biomoléculas y sus características. Concluye señalando que si bien estos biosensores tienen potencial para el área de alimentos, se requiere más desarrol

    Descripción original:

    BIOSENSORES

    Título original

    Biosensores mecánicos

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    Este documento presenta una revisión de los biosensores mecánicos cantilevers y sus aplicaciones en el área biológica y alimentaria. Describe los diferentes tipos de biosensores cantilevers, modos de detección, funcionalización y diseños. También presenta ejemplos de biosensores cantilevers desarrollados para detección de bacterias, virus, biomoléculas y sus características. Concluye señalando que si bien estos biosensores tienen potencial para el área de alimentos, se requiere más desarrol

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    Biosensores Mecánicos

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    Vanessa Bermello Jiménez
    Este documento presenta una revisión de los biosensores mecánicos cantilevers y sus aplicaciones en el área biológica y alimentaria. Describe los diferentes tipos de biosensores cantilevers, modos de detección, funcionalización y diseños. También presenta ejemplos de biosensores cantilevers desarrollados para detección de bacterias, virus, biomoléculas y sus características. Concluye señalando que si bien estos biosensores tienen potencial para el área de alimentos, se requiere más desarrol

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    UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MANABÍ

    FACULTAD DE CIENCIAS MATEMÁTICAS, FÍSICAS Y QUÍMICAS

    ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA

    PROCESAMIENTO DE ALIMENTOS Y LABORATORIO I

    ANÁLISIS DEL ARTÍCULO:

    Biosensores mecánicos cantilevers en la evaluación


    de productos alimentarios.

    AUTORES:

     BERMELLO JIMÉNEZ VANESSA MONSERRATE


     REYES CHIQUITO TATIANA JUANA

    DOCENTE:

    ING. FELIPE JADAN PIEDRA

    NIVEL:

    NOVENO ¨A¨

    PERIODO:

    Octubre 2019- febrero 2020


    PORTOVIEJO – MANABI –ECUADOR
    BIOSENSORES MECÁNICOS EN EL ÁREA BIOLÓGICA Y
    ALIMENTARIA: UNA REVISIÓN
    MECHANICAL BIOSENSORS IN BIOLOGICAL AND FOOD AREA: A REVIEW

    A.G. Mendoza-Madrigal1, J.J. Chanona-Pérez, H. Hernández- Sánchez, E. Palacios-


    González, G. Calderón-Domínguez, J. V. Méndez-Méndez, J. Blasco y L.A. Villa-Vargas

    Revista Mexicana de Ingeniería Química Vol. 12, No. 2 (2013) 205-225

    Recibido 20 de enero de 2013; Aceptado 13 de mayo de 2013

    BIOSENSORES MECÁNICOS

    Cantilevers

    Los sensores basados en cantilevers han tenido un desarrollo y aplicación importantes


    en los últimos años. La gran relación de área superficial con respecto al volumen hace
    que estos sensores sean extremadamente sensibles a la superficie de detección
    (Dufour y col., 2010). Entre la superficie activa del cantilever y el medio donde se
    realizará la detección se puede registrar tensión, calor y masa, debido a interacciones
    físicas y químicas. En general, uno de los elementos de unión se coloca sobre un
    cantilever mientras que el resto de elementos están presentes en el medio ambiente
    (Lang y col., 2002). La caracterización de las fuerzas y la dinámica de las interacciones
    moleculares en este tipo de sensores ofrece una oportunidad para el desarrollo de
    dispositivos de alta sensibilidad, miniaturizados y libres de marcaje (Kim y col., 2009).

    Modos de detección en biosensores basados en cantilevers

    La microscopía fotónica (MF), microscopía electrónica de barrido y de transmisión


    (MEB y MET) y microscopía de fuerza atómica (MFA), se utilizan en los procesos de
    funcionalización y verificación de deposición física y química de las capas orgánicas o
    sustancias activas sobre los dispositivos, así como para obtener las señales para
    evaluar los cambios de masa o de deflexión en los sensores. Tradicionalmente, la MFA
    se ha utilizado para obtener imágenes topográficas de una superficie mediante un
    cantilever de punta fina que escanea línea por línea superficies en los ejes xyz; el
    escaneo se realiza con un piezoeléctrico como sistema actuador. Así, se puede obtener
    una imagen topográfica como un patrón rectangular o cuadrado de líneas paralelas de
    barrido (Fig. 1a).
    Fig. 1. a) Diagrama del principio de operación de un microscopio de fuerza atómica
    (MFA), el láser es reflejado desde la punta del microcantilever al foto detector (PSD,
    por sus siglas en inglés position sensitive photodetector) que sigue los movimientos de
    la punta en los tres ejes cuando esta escanea la superficie de la muestra. El sistema
    escáner- controlador-computadora permite dirigir el barrido y obtener la imagen
    topográfica o la curva de frecuencia de resonancia- amplitud. b) Microcantilever
    operando en modo estático y c) en modo dinámico.

    Sensores basados en cantilevers bimetálicos han permitido detectar cambios de


    temperatura del orden de 10−5 K en aplicaciones térmicas (Fig. 2b). Además, se han
    propuesto otras aplicaciones de micro calorimetría para medir cambios de entalpía,
    transiciones de fase y para espectroscopía fototérmica con sensibilidades de hasta 150
    fJ, con tiempos de respuesta de milisegundos (Raiteri y col., 2001, Kim y col., 2010).
    Otros biosensores son los magnéticos (Fig. 2c) que han servido para detectar
    Salmonella typhimurium directamente en la superficie de tomates empleando un
    biosensor milimétrico magneto elástico recubierto con fagos como elemento de
    reconocimiento (Li y col., 2010).

    Por ejemplo, (Gfeller y col., 2005) reportaron el caso particular de un biosensor de


    masa basado en cantilevers funcionalizados con una capa nutritiva de agar de
    alrededor de 200 nm, que sirvió para evaluar el crecimiento activo de E. coli. Los
    autores despreciaron los cambios en la constante de elasticidad debido a la adhesión
    bacteriana y registraron un cambio negativo en la frecuencia de resonancia provocada
    por el crecimiento de la bacteria, a pesar de que la pérdida de masa puede ser
    promovida por la respiración aeróbica del microorganismo y el agotamiento de los
    nutrientes. De acuerdo con los resultados presentados, éstas pérdidas se compensaron
    con la absorción de agua en la capa nutritiva, de forma que el para medir la viscosidad
    en fluidos ya que la carga de la masa que proporciona el medio viscoso promueve un
    cambio de la frecuencia de resonancia (Raiteri y col., 2001). Estos efectos de
    amortiguación en la oscilación en el cantilever se pueden usar para crear micro-
    viscosímetros (Fig. 2f).

    Fig. 2. Esquema de algunas aplicaciones de cantilevers usados como transductores en


    sensores operados I) en modo estático (deflexión) y II) en modo dinámico (frecuencia
    de resonancia). a) Sensor de masa por estrés, b) térmico, c) sensor magnético a través
    de superficies o partículas con carga, d) sensor de masa por cambio de frecuencia de
    resonancia, usado para evaluar el crecimiento de microorganismos en una capa
    nutritiva, e) Biosensor por interacción entre anticuerpos-antígenos o inmunosensor, f)
    micro-viscosímetro. En todos los casos la señal es obtenida por un medio óptico, por
    ejemplo a través de microscopia de fuerza atómica, los modos de detección pueden
    ser intercambiable para todos los sensores ejemplificados (Adaptada de Raiteri y col.,
    2001).

    Tipos de funcionalización y cantilevers usados en biodetección

    Como se ha visto, una etapa importante para la construcción de biosensores basados


    en cantilevers es la funcionalización de soportes inorgánicos con biomolecular o
    elementos de reconocimiento. En la Fig. 3 se describen algunas opciones para
    funcionalizar un cantilever, como películas de agarosa, células completas,
    bacteriófagos, proteínas, ADN y anticuerpos. Algunos biosensores han logrado
    registrar una detección del orden de los zeptogramos y se emplean ampliamente en el
    área médica y alimentaria.
    Los cantilevers pueden ser de diferente material, tamaño y configuración geométrica.
    Cuando no se colocan películas de oro, el material base del cantilever se puede tratar
    empleando compuestos sililados para formar una monocapa auto-ensamblada que
    provea una superficie hidroxil-reactiva afín a grupos hidroxilo como es el caso de la
    agarosa, que se ha empleado para la detección de E. coli (Gfeller y col. 2005); también
    se puede emplear NHS o Sulfo-NHS (N-hidroxisuccinamida) para preparar ésteres de
    aminas reactivas de grupos carboxilo para su marcaje, inmovilización o reticulación
    (Van der Hur y Evoy, 2013).

    La Fig. 4 muestra algunos de estos diseños. El más básico es el rectangular (Fig. 4a) que
    es tal vez la configuración más usada en los biosensores mecánicos dada su facilidad
    de fabricación y bajo costo. Normalmente se diseñan para el modo resonante
    modificando su proporción de largo y ancho, o su espesor y longitud en el modo
    estático para maximizar su sensibilidad. Se han aplicado de forma generalizada para
    detectar el crecimiento activo de bacterias, hongos, esporas, virus y biomoléculas en
    general (Waggoner and Craighead, 2007; Johnson y Mutharasan, 2012). La Fig. 4b
    representa un cantilever que puede tener una capa aislante, ser bimetálico, o con una
    cubierta polimérica, que se puede emplear como sensor térmico y de gases (Lang y
    col., 2002, Datskos y col., 2005).

    Fig. 3. Algunos ejemplos de funcionalización de cantilevers usados como biosensores.


    Fig. 4. Algunas configuraciones geométricas de cantilevers usados en biodetección a)
    Rectangular, b) Rectangular con capa polimérica o bimetálico, c) Arreglo de cantilevers
    rectangulares d) Rectangular en “U” o interdigitado, e) Arreglo de cantilevers
    interdigitados, f) Rectangular con cabeza y funcionalizado en la punta, g) En forma de
    “T” o de paleta, h) En forma de “V” o triangular, i) Resonador de doble soporte.

    Aplicaciones e influencia de las variables de operación y diseño

    La Tabla 1 muestra una selección de diferentes biosensores mecánicos desarrollados


    para el área biológica y alimentaria, se han condensado algunos aspectos de interés de
    su operación y diseño como el tipo de biosensor, tamaño, geometría, elemento de
    reconocimiento, modo de operación y sensibilidad.

    Tabla 1. Selección de ejemplos de biosensores mecánicos aplicados en el área


    biológica y de los alimentos.
    Conclusiones y tendencias futuras

    El desarrollo en biosensores está impulsado actualmente por el uso de la micro y


    nanotecnología. Sin embargo, otras áreas diferentes a la biomédica requieren una
    mayor atención, como es el caso de los alimentos, donde existe un rezago importante.
    Por ejemplo, en alimentos se han usado pocos microbiosensores directamente sobre
    las muestras; solamente dos de los casos revisados se han aplicado directamente sobre
    tomate para detectar S. typhimurium, y aunque las sensibilidades alcanzadas hasta el
    momento son suficientes y superan las pruebas tradicionalmente usadas para el
    control de la inocuidad alimentaria, se requiere una mayor portabilidad, reducción del
    costo, capacidad de reutilización y que permitan evaluar muestras en medio líquido y
    sin tratamiento previo.

    Por ello, se visualiza un área de oportunidad para el desarrollo e investigación de


    biosensores de uso específico en alimentos para la detección de aromas,
    microorganismos en la superficie o dentro de productos frescos, pesticidas,
    contaminantes, fertilizantes, genes, estimación de madurez y vida de anaquel, uso de
    aditivos o detección de metales pesados entre otras aplicaciones. Todas estas
    aplicaciones se pueden desarrollar aprovechando el avance ya realizado en otras
    áreas, por lo que es posible que estos desarrollos lleguen a ser muy pronto de uso
    cotidiano también en el área agroalimentaria.

    Esta revisión del estado del arte de los biosensores para aplicaciones biológicas y
    alimentarias, se presenta como una guía general e introductoria que intenta cubrir los
    aspectos más relevantes de esta tecnología, haciendo énfasis en los biosensores
    mecánicos ya que tienen un importante potencial de aplicación, y también como
    ejemplo para ilustrar los métodos para evaluar el desempeño de microbiosensores
    aprovechando plataformas accesibles como por ejemplo la microscopía de fuerza
    atómica y el uso de microcantilevers como elemento de transducción.
    Referencias bibliográficas

    1. Datskos, P. G., Lavrik, N. V., Sepaniak, M. J. (2005). Chemical and biological


    sensors based on microcantilevers. Chapter 11 en: Smart Sensors and MEMS
    (Yurish S. Y. y Gomes M.T.S.R.), Pp. 331-379. Kluwer Academic Publishers,
    Netherlands.

    2. Dufour, I., Josse, F., Heinrich, S., Lucat, C., Ayela, C., Me´nil, F., Brand, O. (2010).
    Unconventional uses of cantilever for chemical sensing in gas and liquid
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    3. Gfeller, K. Y., Nugaeva, N., Herner, M. (2005). Micromechanical oscillators as rapid


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    cantilever sensors: A review. Biosensors and Bioelectronics 32, 1-18.

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