Quimica Analitica Instrumental Manual de

Universidad Autónoma del Estado de México
Facultad de Química
Licenciatura en Ingeniería Química
Cuarto semestre
QUÍMICA ANALÍTICA INSTRUMENTAL

MANUAL DE LABORATORIO
Dr. Jorge Javier Ramírez García
2016
Manual de laboratorio
Química Analítica Instrumental
ÍNDICE
I- Introducción General
II – Propósitos Generales del Curso
III – Reglamento de Laboratorio
IV – Prácticas
Practica 1 “Valoración de HCl con NaOH potenciométricamente y

comparación de la curva experimental con la obtenida en
forma teórica”
Practica 2 Determinación potenciométrica de los puntos de equivalencia

del ácido fosfórico.
Practica 3 Uso y aplicaciones de la espectrofotometría de ultravioleta

visible en los colorantes órgano sintéticos
Practica 4 Preparación de la curva de calibración para determinar Cr

VI
Practica 5 Determinación de plomo en suelo urbano mediante

espectroscopía de absorción atómica
Practica 6 Manejo de Muestras para ser leídas en Espectrofotometría de

Luz Infrarroja.
Practica 7 Examen de laboratorio
Practica 8 Determinación de etanol en bebidas alcohólicas por

cromatografía de gases.
Practica 9 Determinación de colorantes por HPLC.
Practica 10 Determinación de azúcares por Calorimetría Diferencial de

Barrido. (DSC).
2
I.- INTRODUCCIÓN GENERAL
El Ingeniero Químico debe tener el criterio adecuado para escoger correctamente las
técnicas analíticas que le ayuden a conocer la composición y las características sensoriales,
físico-químicas y microbiológicas de los diferentes tipos de productos para entender sus
comportamientos, con el fin de transformarlos y conservarlos.
Para tal efecto tiene a su disposición una serie de métodos de análisis como:
1. Los análisis sensoriales
2. Los análisis físico-químicos
3. Los análisis microbiológicos
Los análisis físico-químicos se pueden clasificar en dos grupos fundamentales, a partir

de los procedimientos utilizados para su desarrollo:
1. Los métodos de análisis que utilizan procedimientos químicos

2. Las técnicas físicas para caracterizar y medir sustancias químicas.
En la asignatura de Química Analítica Instrumental se tratarán los temas relacionados a

la teoría de las técnicas instrumentales basadas en principios fisicoquímicos.
 Potenciometría
 Espectrofotometría de UV
 Espectrometría de Absorción Atómica
 Espectrofotometría infrarroja
 Cromatografía de Líquidos
 Cromatografía de Gases
 Análisis Térmicos
3
II.- PROPÓSITOS GENERALES DEL CURSO PRÁCTICO
Este curso práctico tiene el propósito de capacitar al alumno en el conocimiento y la

aplicación de las principales técnicas analíticas especiales (métodos instrumentales), en la
identificación y/o cuantificación de los componentes orgánicos e inorgánicos en cantidades
mayores hasta nivel de traza.
Para eso, el alumno deberá aplicar la metodología científica para tomar la decisión:
¿Qué método y como aplicarlo a un análisis específico? :

-componente a analizar
- identificación y/o cuantificación
- muestreo
- preparación de la muestra
- método de análisis.
El alumno demostrará su dominio del conocimiento en la redacción propia del reporte del
experimento:
- investigación de la técnica y su aplicación
- parte experimental (material, reactivos y equipo de laboratorio, preparación de la muestra,
desarrollo del análisis)
- resultados y discusión
- conclusiones
- bibliografía
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III.- REGLAMENTO DEL LABORATORIO
1 - HORARIO DE LABORATORIO
- Miércoles de 09:00 a 12:00 horas. (grupo 45)

- jueves de 17:00 a 20:00 horas. (grupo 46)
- Laboratorio 5 y Laboratorio de Instrumental de la Facultad de Química.
- Se aceptara un retraso máximo de 10 minutos.
- Se aceptaran máximo 3 retrasos, al cuarto retraso el alumno no podrá entrar a la practica
y se le reportará una falta.
- Para tener derecho a examen ordinario de la asignatura, el alumno deberá acreditar el 80%
de las prácticas de laboratorio. En el caso de examen Extraordinario o titulo de suficiencia
deberá acreditar el 80% de asistencia.
2 - NORMAS
- Se respetaran las normas de seguridad de los laboratorios donde se trabaja.

- El uso de la bata es OBLIGATORIO.
- El alumno que no traiga bata, no podrá entrar al laboratorio y realizar la práctica. Se le
Considerará como falta.
- Se respetarán a los otros grupos de la Facultad de Química que trabajen en el mismo
laboratorio o laboratorios vecinos.
3 - MATERIAL Y EQUIPOS
- El material que se utilizará durante la sesión de laboratorio está a cargo de los alumnos.
- Cada grupo de alumnos deberá preparar el material en la mañana.
- De no ser así, no se podrá realizar la práctica y se considerará como falta.
4 - REPORTE DE LABORATORIO
- Se entregara a los alumnos el manual de laboratorio con el descriptivo de las diferentes

prácticas.
- En caso de modificar una práctica se avisará con una semana de anticipación a los alumnos y
se les entregará el nuevo temario.
- Cada grupo de alumnos deberá llegar a la práctica con el protocolo redactado:
a) Titulo de la práctica
b) Objetivos de la práctica
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c) Introducción breve de la técnica empleada y justificación

d) Lista de reactivos, material y equipo
e) Preparación de la muestra
f) Metodología y descripción del análisis
Al iniciar la práctica, se verificará el protocolo y se calificará (50% de la

calificación global de la práctica).
-A la siguiente práctica, se entregara el reporte final de la práctica:
g) Resultados y discusión
h) Conclusiones
Se calificará a ese momento la segunda parte (50% de la calificación global de la

práctica).
La calificación general correspondiente a la parte de laboratorio será el promedio de las

calificaciones de los reportes y participará en un 20% de la calificación general de la asignatura
de Química analítica.
6
ANÁLISIS QUÍMICO INSTRUMENTAL.
La palabra INSTRUMENTO, es todo aquello de lo que se vale para efectuar una

acción. En forma estricta, todos aquellos análisis en los que utilicemos cualquier objeto,
para efectuar alguna medición podría considerarse dentro del campo del Análisis
Instrumental.
Prácticamente cualquier propiedad física característica de un elemento particular o

de un compuesto, puede ser la base de un método para su análisis.
Por lo tanto, la absorción de la luz, la conductividad de una solución, o la
ionizabilidad de un gas, puede servir como herramienta analítica.
Una de las diferencias primordiales en los dos tipos de análisis, es el tipo de
propiedad que se analiza (Química o Física).
Desde el punto de vista práctico, no se puede considerar a ninguna de las dos
clasificaciones como la más importante, ya que cada una tiene su función y aplicación.
El análisis por Vía húmeda, es el antecedente del Análisis Instrumental, por razones
históricas, y de hecho, debe considerarse como fundamento del análisis, ya que cuando
algún método instrumental no da resultados positivos, tenemos que recurrir a un método
por vía húmeda, que por lo general ya está estudiado y que no presenta problemas.
El Análisis Químico por vía húmeda, tiene cuando menos 200 años de desarrollo,
mientras que el Análisis Instrumental, tiene solamente 50 años.
Es casi imposible desligar los dos tipos de análisis, y es difícil creer que el Análisis
por vía húmeda sea totalmente desplazado por el Análisis Instrumental.
Un analista debe dominar los dos tipos de análisis, para resolver cualquier problema
químico. Por otra parte, ambos tipos de análisis están ligados, ya que la preparación o
separación de la muestra, casi siempre se hace por alguna técnica de vía húmeda, antes del
análisis por vía instrumental.
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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE MÉXICO

FACULTAD DE QUÍMICA
PRACTICAS DE QUÍMICA ANALÍTICA INSTRUMENTAL
PRACTICA 1
“Valoración de HCl con NaOH potenciométricamente y comparación de la

curva experimental con la obtenida en forma teórica”
INTRODUCCIÓN
En numerosos análisis químicos es necesaria la utilización de soluciones ácidos y bases

fuertes de concentraciones conocidas.
La concentración de dichas soluciones puede determinarse por medio de titulaciones o
valoraciones de neutralización.
La titulación o valoración es la operación básica de la volumetría, mediante la cual se
agrega solución patrón o un peso exacto de reactivo puro disuelto a la muestra que se
analiza, hasta que se completa la reacción.
Se considera que una titulación de neutralización o valoración ácido - base termina cuando
el número de equivalentes del ácido es igual al número de equivalentes de la base,
momento en el cual se alcanza el punto de equivalencia de la reacción.
El punto de equivalencia de la titulación es un concepto teórico; la estimación práctica de
su valor se conoce como punto final.
Para las titulaciones ácido - base, los dos métodos más comunes para la determinación de
los puntos finales son el empleo de indicadores coloreados o el uso de un peachímetro para
controlar el pH de la solución en función del volumen del titulante agregado.
Sin embargo, la mayoría de las veces no se encuentra en punto final en el volumen que se
espera.
OBJETIVO
8
Observar que parámetros influyen en la valoración potenciométrica para que no se

encuentre el punto final en el volumen calculado y sobreponer la curva experimental con la
calculada de forma teórica.
REACTIVOS EQUIPO
HCl Conc. Potenciómetro
NaOH .
Ftalato de potasio
Carbonato de sodio
Indicador Naranja de Metilo
Indicador Fenolftaleína
MATERIAL
1 Matraz aforado de 100 mL Una perilla
1 Matraz aforado de 250 mL Una pizeta
Micropipetas de volumen variable Espátula
Un soporte universal Papel para limpiar los electrodos
Una parrilla con agitación
Una pinzas de tres dedos
Una bureta de 50 mL
Un agitador magnético (Tamaño arroz)
3 vasos de precipitados de 250 mL
3 vasos de precipitados de 50 mL
EXPERIMENTAL
1. Preparé 100 mL de HCl aproximadamente 0.1N y valore con Carbonato de sodio,

para determinar su concentración real.
2. Preparé 250 mL de NaOH aproximadamente 0.1N y valore con Ftalato de potasio,
para determinar su concentración real.
3. Realice la titulación con 25 mL de HCL con el NaOH preparado,
4. Coloque los datos de la titulación en una hoja de Excel y sobreponga la curva
Experimental con la obtenida de forma teórica.
Cuestionario
1.- Numere los requisitos que deben cumplir la solucion patrón ideal.
2.- Discuta que parámetros influyen en la determinación del punto final.
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3.-Qué % de error encontró entre el punto final experimental comparado con el

calculado.

PRACTICA 2
DETERMINACIÓN POTENCIOMÉTRICA DE LOS PUNTOS DE EQUIVALENCIA

DEL ÁCIDO FOSFÓRICO.
INTRODUCCIÓN
Una forma del electrodo de vidrio consiste en un tubo de vidrio terminado en un ampolla de pared
fina, con un contacto de platino sumergido en una solución reguladora, en presencia de una solución
problema. Su potencial (EG) depende del pH y viene expresado por la ecuación:
R T
EG  cons tan te  ln a H 
F
Donde a H  designa la actividad de los iones hidrógeno en la solución problema. El conocimiento
del potencial exacto de este electrodo no es de gran importancia ya que incluye un potencial de
asimetría (debido posiblemente a tensiones en la interfase de vidrio/solución) que se encuentra a
través de la membrana de vidrio incluso cuando las soluciones de uno y otro lado, son de la misma
actividad. En la práctica sin embargo, puede medirse el pH en el curso de una valoración empleando
el dispositivo indicado más abajo. En consecuencia puede utilizarse este pH como indicador en
valoraciones ácido/base, ya que el punto de equivalencia experimenta un cambio relativamente
grande. En esta experiencia se conecta en serie el electrodo de vidrio con un electrodo de referencia.
OBJETIVO
El objetivo de esta práctica es determinar potenciométricamente los puntos de equivalencia del

ácido fosfórico por medio de la primera derivada.
MATERIALES Y REACTIVOS
Un potenciómetro Solución de ácido fosfórico 0.2 (50 mL

Un soporte universal Solución de hidróxido de sodio 0.5 M (100 mL)
Un agitador magnético
Una parrilla con agitación
Una pinzas de tres dedos
Una bureta de 50 mL
Un matraz erlenmeyer de 250 mL
Un matraz aforados de 100 mL
Un matraz aforado de 50 mL
Una pizeta
Una perilla
10
Cuatro vasos de precipitados de 50 mL

Papel para limpiar los electrodos
Espátula
Micropipeta
MÉTODO
En un matraz erlenmeyer de 250 mL se vierten 50 mL de ácido fosfórico y se valora con hidróxido

de sodio hasta tener un volumen considerable después del último punto de equivalencia.
REPORTE
Los resultados se tabulan de la siguiente manera:

VOLUMEN DE PH D(PH)/DV
HIDRÓXIDO DE SODIO
EN ML
Trace en ecxel los siguientes gráficos:
a) pH en función del volumen en mL de hidróxido de sodio

d ( pH )
b) en función del volumen en mL de hidróxido de sodio
dv
c) Sobre poner ambas gráficas.
pH d(pH)/dv
NaOH en mL NaOH en mL
(a) (b)
Los puntos de inflexión que se observan en la primera curva corresponden a los picos que aparecen
en la segunda gráfica.
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Determinar en que pH se encuentran los puntos de equivalencia.
Explicar porque se encuentran tan sólo dos puntos de equivalencia en la valoración de este ácido.
Realizar el diagrama de distribución del ácido fosfórico y verificar que los pKa coincidan con los
puntos de equivalencia, en caso contrario, discuta los resultados.

PRACTICA 3
USO Y APLICACIONES DE LA ESPECTROFOTOMETRIA DE ULTRAVIOLETA

VISIBLE EN LOS COLORANTES ORGANOSINTÉTICOS
INTRODUCCIÓN
Los colorantes utilizados por la industria como son el rojo 40, amarillo 5, etc. son
factibles de ser analizados por espectrometría de absorción, de una manera rápida y con
alta exactitud.
PROPÓSITO
El alumno aprenderá a utilizar el equipo de ultravioleta-visible para analizar la

pureza de los colorantes organosintéticos por medio del modo de barrido.
Aprenderá a dar lectura a un espectro de ultravioleta, a identificar los parámetros de
medición en el espectro y a sacar conclusiones a través de la lectura de esos parámetros.
APLICACIÓN
Aplicable a colorantes artificiales alimenticios.
FUNDAMENTO TEORICO
La absorción molecular en la región ultravioleta y visible del espectro depende de la

estructura electrónica de la molécula. La absorción de energía se cuantifica y da por
resultado la elevación de los electrones desde orbitales en el estado básico a orbitales de
mayor energía en un estado excitado. Para muchas estructuras electrónicas, la absorción no
ocurre en una porción fácilmente accesible de la región ultravioleta. En la práctica, la
espectrometría ultravioleta está limitada en gran parte a los sistemas conjugados.
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Sin embargo se tiene gran ventaja en cuanto a la selectividad de la absorción

ultravioleta: los grupos característicos pueden reconocerse en moléculas de complejidad
ampliamente variable. Una gran parte de la molécula relativamente compleja puede resultar
transparente en el ultravioleta de modo que existe la posibilidad de obtener un espectro
similar al de una molécula bastante mas simple. Mas bien nuestro objetivo consiste en
establecer las correlaciones entre los espectros y la estructura que puede utilizar el químico.
El espectro ultravioleta está formado por una gráfica de la longitud de onda en función de la
intensidad de absorción.
Intensidad
A

nm
Figura 1. Representación de una gráfica de un espectro de ultravioleta.
Los datos frecuentemente se muestran en forma de gráfica o presentación tabular de

la longitud de onda en función de la absorptividad molar o el logaritmo de la absorptividad
molar max o log máx
El uso de la absorptividad molar como unidad de la intensidad de absorción tiene la
ventaja de que todos los valores de intensidad se refieren al mismo número de especies
absorbentes.
Las longitudes de onda en la región ultravioleta generalmente se indican en
nanómetros (lnm=10-7 cm) o amstroms, (1A= 10-8 cm). Ocasionalmente, la absorción se
indica en números de onda; nosotros estamos principalmente interesados en la región de
ultravioleta que se extiende desde 200 hasta 300 nm. La atmósfera es transparente en está
región que resulta ser fácilmente accesible con la óptica del cuarzo.
La energía total de la molécula es la suma de su energía electrónica de unión, su
energía vibracional y su energía rotacional. La magnitud de estas energías disminuye en el
orden siguiente:
Eelec, Evib, y Erot. La energía absorbente en la región ultravioleta produce cambios en la

energía electrónica de la molécula que resulta de las transiciones de electrones de valencia
en la molécula. Estas transiciones consisten en la excitación de un electrón desde un
orbital molecular lleno al siguiente orbital de energía mayor. El orbital anti-enlace se
designa por un asterisco se indica de la siguiente forma:   *
La relación entre la energía absorbida en una transición electrónica y la frecuencia
(v), longitud de onda  y número de ondas de la radiación que produce la transición es:
E=hv=hc/=hvc
13
Donde h es la constante de Planck, y c la velocidad de la luz.E es la energía absorbida en

una transición electrónica en una molécula desde un estado de energía bajo hasta un estado
de energía alto (estado excitado). La energía absorbida depende de la diferencia de energía
entre el estado básico y el estado excitado; cuanto menor es la diferencia de energía mayor
la longitud de onda de la absorción. El exceso de energía en el estado excitado puede dar
por resultado la disociación o ionización de la molécula o se puede volver a emitir en forma
de calor o luz. El desprendimiento de energía en forma de luz da por resultado la
fluorescencia o fosforescencia.
Ya que la energía ultravioleta es cuantificada, el espectro de absorción que se
origina de una transición electrónica simple debe consistir en una línea discreta simple.
Los espectros de las moléculas simples en estado gaseoso consisten en picos de
absorción estrechos, representando cada uno de los mismos una transición desde una
combinación particular de niveles vibracionales y rotacionales en el estado básico
electrónico hasta una combinación correspondiente en el estado excitado; Donde los niveles
se designan como v0, v1, v2 y así sucesivamente.
En las moléculas de mayor complejidad que contienen más átomos, la multiplicidad de los
subniveles vibracionales y la cercanía de su espaciamiento da lugar a que las bandas
discretas se derrumben, obteniéndose bandas de absorción amplias.
Las principales características de una banda de absorción son su posición e

intensidad. La posición de la absorción corresponde ala longitud de onda de la radiación
cuya energía es igual a la requerida para la transición electrónica. La intensidad de la
absorción depende principalmente de dos factores: la probabilidad de interacción entre la
energía de radiación y el sistema electrónico para elevar el estado básico al estado
excitado, así como la polaridad del estado excitado.
La absorción intensa se presenta cuando la transición va acompañada de un gran

cambio en el momento de transición. La absorción con máx 104 es una absorción de alta
intensidad; la absorción de baja intensidad corresponde a los valores de máx 103. Las
transiciones de baja probabilidad son transiciones “ prohibidas”.
La intensidad de la absorción puede expresarse como trasmitancia (T) definida por

T= I/I0
Donde I0=intensidad de la energía radiante que incide en la muestra e I=intensidad
de la energía radiante que sale de la muestra. Una expresión más conveniente para la
intensidad de absorción es la que se deriva de la ley de Lambert-Beer:
log10= (I0/I) =kcb= A

donde k = constante característica del soluto
c = concentración del soluto
b = longitud de la trayectoria a través de la muestra
A = absorbancia
Cuando c se expresa en moles por litro = A = cb donde él término  se conoce

como absorptividad molar.
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Si ahora se define la concentración c del soluto como g/l, la expresión se

transforma en
A = abc
donde a es la absorptividad y consecuentemente relacionada con la absorptividad
molar mediante
 = aM
donde M es el peso molecular del soluto.
La intensidad de una banda de absorción en el espectro ultravioleta generalmente

se expresa como la absorptividad molar a la máxima absorción, máx o log máx. Cuando se
desconocen la constitución de un material absorbente, la intensidad de la absorción puede
expresarse en la forma:
Ecm% =A / cb
Donde
c = concentración en gramos por 100 mL
b = longitud de la trayectoria a través de la muestra en centímetros.
IDENTIFICACION ESPECTROMETRICA DE COMPUESTOS ORGANICOS

Es necesario definir algunos términos que frecuentemente se utilizan en la descripción de
los espectros electrónicos.
CROMÓFORO. Un grupo insaturado covalentemente que es responsable de la

absorción electrónica por ejemplo C=C, C=O Y NO2.
AUXÓCROMO. Un grupo saturado que, cuando se encuentra unido a un

cromóforo, altera tanto la longitud de onda como la intensidad del máximo de absorción;
por ejemplo OH, Cl.
Desplazamiento batocrómico. Es el desplazamiento de la absorción a una mayor longitud

de onda debido al efecto del solvente.
Desplazamiento hipsocrómico. Es el desplazamiento de la absorción a una menor longitud

de onda debido a un efecto de solvente.
Efecto hipercrómico. Aumento de la intensidad de absorción.
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Efecto hipocrómico. Disminución de la intensidad de absorción.
Las características de absorción de las moléculas orgánicas en la región ultravioleta

dependen de las transiciones electrónicas que pueden ocurrir y del defecto del medio
atómico en las transiciones.
La siguiente figura se resume las facilidades relativas con que pueden ocurrir las
diversas transiciones.
 * de anti-enlace
 * de anti-enlace
E n(p) sin enlace
 de enlace
 de enlace
Aún cuando los cambios de energía no se muestran a escala, se puede observar fácilmente,
por ejemplo que la transición n  * requiere de menor energía que la transición   .
Las transiciones n  * también denominadas bandas R de los grupos cromóforos
simples tal como el grupo carbonilo es prohibido y las bandas correspondientes se
caracterizan por bajas absorptividades molares, también están caracterizadas por el
desplazamiento hipsocrómico.
Cuando las bandas adicionales hacen su aparición, la transición n  * se desplaza a una

mayor longitud de onda pero puede quedar hundida en bandas de mayor intensidad.
Las bandas atribuidas a las transiciones   * ( bandas K) aparecen en el espectro de las

moléculas que tienen estructuras    .
Estas transiciones   * están caracterizadas por una alta absorptividad molar,máx

10000.
Las transiciones   * ( bandas K) de los sistemas di o polieno conjugados pueden

distinguirse de las correspondientes a los sistemas de enona al observar el efecto de
cambiar la polaridad del solvente. Las transiciones   * de los sistemas dieno o polieno
no son esencialmente sensibles a la polaridad del solvente, los dobles enlaces de
hidrocarburo no son polares. Sin embargo, las absorciones correspondientes de las enonas
quedan sometidas al desplazamiento batocrómico, el cual frecuentemente va acompañado
del aumento en la intensidad conforme se incrementa la polaridad del solvente.
Las bandas B ( bandas bencénica) son características de los espectros de moléculas

aromáticas y heteroaromáticas. El benceno muestra una banda de absorción amplia, con
picos múltiples, en la región del ultravioleta cercano entre 230 y 270 nm.
16
Cuando un grupo cromoforo está unido al anillo aromático, las bandas B se observan a
mayores longitudes de onda que las transiciones   *
Las bandas E ( bandas etilénicas), igual que las bandas B, son características de las
estructuras aromáticas. Las bandas E1 y E2 del benceno se observan cerca de 180 nm y 200
nm respectivamente. La sustitución auxocrómica lleva la banda E 2 a la región del
ultravioleta cercano.
En la sustitución auxocrómica, el heteroátomo con el par solo de electrones comparte

estos electrones con el sistema de electrón  del anillo, facilitando la transición   .
La absorptividad molar de las bandas E generalmente varía entre 2000 y 14 000.
ASPECTOS DE HIGIENE Y SEGURIDAD
1) Las soluciones preparadas deberán ser desechadas en la tarja.

2) Se deberá usar bata, la cual deberá estar debidamente abrochada.
3) No se deberá pipetear con la boca.
4) Para prevenir contaminación de los estándares, se deberá lavar la espátula de pesada y
enjuagar los matraces volumétricos.
5) No secar con papel higiénico las celdas de cuarzo pues se rayan.
6) No derramar muestra dentro del equipo.
MATERIALES Y METODOS
Balanza analítica
Espectrofotómetro
Matraz volumétrico de 1000 mL (2)
Vaso de precipitado de 100 mL
Vaso de precipitado de 500 mL
Pipeta de 25 mL
Matraz volumétrico de 500 mL
Agua destilada
Estándares de colorantes hidrosolubles: Amarillo 5, Amarillo 6, Azul 1, Rojo 40.
PROCEDIMIENTO
A) Uso del equipo, lectura del espectro, modos de operación.
Pesar el estándar con el fin de obtener una concentración de 0.01 g/l y aforar en
matraz volumétrico. Colocar la muestra dentro de una celda de cuarzo y efectuar un barrido
espectofotométrico de 380 a 750 nm. Determinar la absorbancia a la máxima longitud de
onda. Repetir la operación para otras concentraciones con el fin de que se obtenga una
absorbancia que caiga dentro de la linearidad que marca la ley de Beer.
17
Reportar:
Procedimiento de análisis de la muestra

Longitud de onda de l pico o picos máximos
Explicar los modos de operación del equipo.
Tabla1
Colorante  de Onda (nm) Con. (g / l) absortividad (l / g cm)

Amarillo 5 428 0. 01 53
Amarillo 6 484 0. 01 55
rojo 40 502 0. 01 55.6
Azul 1 630-625
18

PRACTICA 4
PREPARACIÓN DE LA CURVA DE CALIBRACIÓN PARA

DETERMINAR Cr VI
INTRODUCCIÓN
La espectroscopia es muy útil como técnica de análisis cuantitativo, en compuestos muy

diversos, desde los orgánicos complejos hasta inorgánicos y metales como Cr, siempre y
cuando sean grupos cromóforos , que posean color o formen complejos coloridos.
OBJETIVO
Que el alumno aplique los conocimientos adquiridos acerca de la espectrofotometría visible

en la elaboración de una curva de calibración con el fin de realizar un análisis cuantitativo
de muestras problema.
MATERIAL
 12 Matraces aforados de 25 mL.

 2 matraces aforados de 100 mL
 1 matraz aforado de 50 mL
 2 pipetas volumétricas de 10 mL
 5 pipetas volumétricas de 1mL
 1 frasco color ambar
 1 vaso de pp de 500 mL
REACTIVOS
 Difenilcarbazida
 HNO3 concentrado
 K2Cr2O7
 H2SO4
EXPERIMENTAL
Preparar las siguientes disoluciones:
1) Disolución de difenilcarbazida (DFC).
Pesar 0.125g de DFC y disolver en un matraz volumétrico de 25 mL con acetona, y aforar.

Almacenar en un frasco color ámbar y refrigerar.
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2) Solución de HNO3 al 10%
En un matraz aforado de 100 mL, colocar 10 mL de HNO3 concentrado y aforarlo con agua
destilada.
3) Disolución Madre de Cromo (500 g/L)
Pesar 0.141 g de K2Cr2O7 y ponerlo en 30 mL de agua. Agregar 10 mL de HNO3 al 10% y

aforar con agua a 100 mL y medir el pH.
4) Disolución estándar (STD) de Cromo (VI)
Tomar 1mL de la solución Madre y aforar a 100 mL
5) Disolución de H2SO4 1.2 M
En un matraz volumétrico de 50 mL, añadir 3.33 mL de H2SO4 concentrado y aforar.
PROCEDIMIENTO PARA PREPARAR LA CURVA DE CALIBRACIÓN
En 11 matraces aforados de 25 mL adicionar en cada uno de ellos las siguientes cantidades

de solución STD de Cr VI.
mL. 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 (solución STD de Cr VI)

g 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
A cada matraz adicionar 1 mL de H2SO4 y 1mL de DFC y aforar a 25 mL con agua

destilada, posteriormente se procede a leer en el equipo UV-VIS para realizar la curva de
calibración.
PROCEDIMIENTO PARA CUANTIFICAR Cr VI.
Una vez, que se tienen las disoluciones preparadas, se realiza los siguientes pasos para
cuantificar en el mismo equipo:
En un matraz volumétrico de 25 mL:
1) Agregar 1 mL de la muestra
2) Agregar 1 mL de H2SO4 1.2 M
3) Agregar 1 mL de DFC
4) Agregar 1 mL de HNO3 al 10%
5) Aforar con agua destilada
Medir el pH de la disolución. Posteriormente se procede a cuantificar con la curva de

calibración realizada.
20

PRACTICA 5
DETERMINACIÓN DE PLOMO EN SUELO URBANO MEDIANTE

ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN ATÓMICA
Fundamento
La utilización del compuesto Pb-tetraetilo como antidetonante en algunas gasolinas

constituye una fuente de contaminación adicional provocada por los motores de combustión
que la utilizan. El plomo liberado junto a los gases de combustión se deposita en el suelo en
forma de pequeñas partículas, en su mayor parte en forma de óxido de plomo. En algunas
calles de nuestras ciudades en las que el tráfico es intenso se pueden encontrar
concentraciones de plomo en el suelo urbano del orden de 2000 ppm o incluso superiores.
En días de viento este elemento puede ser inhalado por los transeúntes, incorporado a las
aguas y a las plantas.
Su elevado carácter tóxico ha obligado a dictar una normativa europea por la que se
prohibirá a partir del año 2000 la circulación de vehículos que utilicen combustibles que
contengan dicho elemento.
En esta práctica se determina el contenido en plomo de una muestra de suelo

urbano suministrada por el alumno. Para ello se somete a la misma a un proceso previo de
lixiviación con una disolución ácida, al objeto de extraer el elemento y separarlo del resto
insoluble. Seguidamente se determina por espectroscopía de absorción atómica.
Reactivos y disoluciones necesarias
 Ácido nítrico concentrado

 Disolución de ácido nítrico 0.01 M.
 Solución patrón de Pb de 1000 ppm.
Material e Instrumentación necesarios
 Espectrofotómetro de absorción atómica.

 Lámpara de cátodo hueco de Pb.
 Papel de filtro de cenizas conocidas.
 Matraces aforados de 50 mL.
 Tamiz
21
Condiciones de trabajo del Espectrofotómetro de absorción atómica
- Intensidad de la lámpara: 10 mA.

-  = 283.3 nm.
- Rendija (slit) = 0.7nm.
- Flujo de gases: Aire (4.5), Acetileno (2.0).
Procedimiento de operación
1. Tratamiento de la muestra
Pesar exactamente alrededor de 0.5 g de muestra, previamente tamizada y desecada

durante 2 h. a 110 ºC, y transferirla a un vaso de precipitado de 100 mL. Añadir 5 mL
de HNO3 y calentar en una parrilla hasta casi sequedad. Añadir 10 mL de HNO 3 0.01
M, calentar unos minutos para disolver las sales y filtrar. Transferir el líquido filtrado a
un matraz de 50 mL y aforarar con HNO3 0.01 M.
2. Determinación de plomo en la disolución de la muestra
- Preparar varias disoluciones patrón de Pb a partir de la disolución de 1000 ppm, en las

concentraciones indicadas en la tabla siguiente. Utilizar matraces de 10 mL y aforar
con ácido nítrico 0.01 M.
Estándar de Pb 1000 ppm [Pb]Final

Volumen (mL) (ppm)
2
10
20
40
60
80
- Encender el espectrofotómetro de A.A. e introducir los parámetros de trabajo para

medir en condiciones óptimas. Medir las absorbancias de las disoluciones patrón y de la
muestra problema, ajustando el blanco con una disolución de HNO3 0.01 M.
22
- Si el contenido en plomo de la muestra problema fuera demasiado elevado y la medida

de absorbancia se saliera del intervalo de calibración, se diluye la disolución problema
con HNO3 0.01 M y se repite la medida.
Resultados
Peso de la muestra es de:
[Pb](ppm) 2 6 10 20 40 60 80 Problema
Absorbancia
Cálculos
 Realizar una gráfica con las absorbancias obtenidas frente a la concentración de Pb.
 Ajustar una recta a los puntos experimentales, y a partir de la misma calcular el

contenido en plomo de la disolución problema y posteriormente el que hay en la
muestra.
[Pb]muestra es de: (g/g)
23

PRACTICA 6
MANEJO DE MUESTRAS PARA SER LEÍDAS EN ESPECTROFOTOMETRÍA

DE LUZ INFRARROJA.
INTRODUCCIÓN
Espectroscopia de infrarrojo.
La espectroscopia de luz infrarroja tiene una gran aplicación en el análisis
cualitativo y cuantitativo. Su principal utilización ha sido la identificación de compuestos
orgánicos, que por lo general presentan espectros complejos en el infrarrojo medio con gran
número de máximos y mínimos que resultan útiles al efectuar comparaciones.
En muchos casos el espectro de infrarrojo medio proporciona una huella única con
unas características que se distinguen fácilmente de los modelos de absorción del resto de
compuestos; solo los isómeros ópticos absorben exactamente de la misma forma.
La ordenada de la gráfica corresponde a una escala lineal de transmitancia y la

abscisa mide linealmente los números de onda en unidades de cm –1.
La región infrarroja del espectro electromagnético incluye la radiación con números

de onda entre los 12 800 y los 10 cm -1, lo que corresponde a longitudes de onda de 0.78 a
1000 m1.
La tabla 1 identifica las regiones del Espectro de infrarrojo desde el punto de vista
de las aplicaciones y del instrumento a utilizar la región del espectro.
Tabla 1. Regiones del espectro infrarrojo.

Región Intervalo de longitudes Intervalo de números Intervalo de
de onda(), m de onda(), cm-1 frecuencias(), Hz
Cercano 0,78 a 2,5 12 800 a 4000 3,8 x 1014 a 1,2 x 1014
Medio 2,5 a 50 4000 a 200 1,2 x 1014 a 6,0 x 1012
Lejano 50 a 1000 200 a 10 6,0 x 1012 a 3,0 x 1013
La más 2,5 a 670 4000 a 670 1,2 x 1014 a 2,0 x 1013
utilizad
a
La gran mayoría de las aplicaciones analíticas del espectro infrarrojo se han

restringido al uso de una parte de la región comprendida entre los 4000 y los 400 cm-1 ( de
2,5 a 25 m). Sin embargo en la analítica actual se van encontrando un número creciente de
aplicaciones de la espectroscopía infrarroja cercana y lejana.
24
Además de su aplicación como herramienta en análisis cualitativo, las medidas en el

infrarrojo también están encontrando un uso cada vez mayor en el análisis cuantitativo. En
este caso, su elevada selectividad a menudo hace posible la cuantificación de una sustancia
en una mezcla compleja, no siendo necesaria una separación previa. El principal campo de
aplicación de este tipo de análisis se halla en la cuantificación de contaminantes
atmosféricos que provienen de procesos industriales.
Cambios dipolares durante las vibraciones y las rotaciones.

Por lo general, la radiación infrarroja no es suficientemente energética como para producir
las transiciones electrónicas que se dan cuando se trata de las radiaciones ultravioleta y
visible.
La absorción de radiación infrarroja se limita así en gran parte a especies moleculares para
las cuales existen pequeñas diferencias de energía entre los distintos estados vibracionales y
rotacionales.
Para absorber radiación infrarroja, una molécula debe experimentar un cambio neto en el
momento dipolar como consecuencia de un movimiento de vibración o de rotación. Sólo en
estas circunstancias, el campo eléctrico alternante de la radiación puede interaccionar con la
molécula, y causar así cambios en la amplitud de algunos de sus movimientos. Por ejemplo,
la distribución de carga alrededor de una molécula tal como el cloruro de hidrógeno no es
simétrica, ya que el cloro posee una mayor densidad electrónica que el hidrógeno. Por
tanto, el cloruro de hidrógeno posee un momento dipolar significativo, y por ello se dice
que es una molécula polar. El momento dipolar está determinado por la magnitud de la
diferencia de carga y por la distancia entre ambos centros de carga.
Dado que la molécula de cloruro de hidrógeno vibra, se produce una fluctuación regular del
momento dipolar lo que origina un campo que puede interaccionar con el campo eléctrico
asociado a la radiación. Si la frecuencia de la radiación iguala exactamente a la frecuencia
de vibración natural de la molécula, ocurre una transferencia neta de energía que da lugar a
un cambio en la amplitud de la vibración molecular; como consecuencia se absorbe la
radiación. De manera análoga, la rotación de moléculas asimétricas alrededor de sus
centros de masa produce una fluctuación dipolar periódica que puede interaccionar con la
radiación.
Cuando se trata de especies homonucleares como el O2, N2 o Cl2, el momento dipolar no se

altera durante la vibración o la rotación y, este tipo de compuestos no absorben en el
infrarrojo.
Técnicas para la manipulación de las muestras.
1-. Muestra de gases.
El espectro de un líquido de bajo punto de ebullición o de un gas se puede obtener

permitiendo a la muestra que se expanda en una cubeta a la que se le ha hecho el vacío.
Existe una variedad de cubetas para este objeto, con longitudes de camino óptico que varían
25
desde unos pocos centímetros a varios metros. Las mayores longitudes de camino óptico se
obtienen en cubetas compactas que poseen superficies reflectantes interna, de modo que el
haz pasa numerosas veces por la muestra antes de salir de la cubeta.
2-. Disolventes.
No existe un solo disolvente que sea transparente en toda la región del infrarrojo medio.
El agua y los alcoholes se utilizan rara vez, no sólo porque absorben intensamente, sino
porque también atacan a los haluros de metal alcalino, que son los materiales más comunes
que se utilizan en las ventanas de las cubetas. Por estas razones, es necesario secar los
disolventes indicados en la figura anterior antes de ser utilizados.
Debido a la tendencia de los disolventes a absorber, las cubetas para el infrarrojo suelen ser
mucho más estrechas (0,1 a 1 mm) que las empleadas en las regiones ultravioletas y visible.
Los caminos ópticos en el infrarrojo requieren por lo común, concentraciones de muestra de
0,1 a un 10 %. Con frecuencia, las celdas son desmontables, con espaciadores de Teflón que
permiten variar la longitud del camino óptico. Las celdas de camino óptico fijo se pueden
llenar o vaciar con una jeringa hipodérmica.
Las ventanas de cloruro de sodio son las más utilizadas y aun teniendo cuidado, éstas
finalmente se velan debido a la absorción de humedad. Si se pulen con un polvo
amortiguador vuelven a su condición original.
3-. Líquidos puros.
Cuando la cantidad de muestra es pequeña o cuando no se dispone del disolvente

apropiado, es habitual obtener los espectros del líquido puro. En este caso, sólo una película
muy delgada tiene un camino óptico suficientemente corto como para producir espectros
satisfactorios. Por lo común, una gota del líquido puro se comprime entre dos placas de sal
de roca para obtener una placa con un grosor de 0.01 mm o menos. Las dos placas se
mantienen unidas por capilaridad y se colocan entonces en la trayectoria del haz. Sin duda,
con esta técnica no se obtienen datos de transmitancia muy reproducibles, pero resulta
satisfactoria para muchas investigaciones cualitativas.
4-. Sólidos.
Los espectros de sólidos que no pueden disolverse en un disolvente transparente al

infrarrojo, se obtienen con frecuencia dispersando el analito en una matriz líquida o sólida,
y analizando la mezcla resultante. Estas técnicas requieren que el tamaño de la partícula del
sólido suspendido sea menor que la longitud de onda del haz infrarrojo; si no se cumple
esta condición, se pierde una parte de la radiación por dispersión.
Uno de los métodos utilizados para preparar la mezcla a analizar consiste en triturar de 2 a
5 mg de una muestra finamente pulverizada (tamaño de partícula  2 m) en presencia de
una o dos gotas de un aceite pesado de un hidrocarburo (Nujol). Si es probable que
26
interfieran las bandas del hidrocarburo, se puede utilizar Fluorolube, un polímero

halogenado. En cualquier caso, la mezcla resultante se examina luego como una delgada
película entre planas de sal.
En una segunda técnica, se parte de un miligramo o menos de una muestra finamente
triturada que se mezcla íntimamente con unos 100 mg de polvo de bromuro de potasio
desecado. La mezcla se puede efectuar con un mortero, y mejor aún en un pequeño molino
de bolas. La mezcla se comprime luego en un troquel especial a una presión de 700 a 1000
kg/cm2, para obtener un disco transparente. Se obtienen mejores resultados si se forma el
disco en el vacío para eliminar él aire ocluido. A continuación, el disco se coloca en el haz
del instrumento para su análisis espectroscópico. Los espectros resultantes a menudo
presentan bandas a 345 y 1640 cm-1 (2,9 y 6,1 m) debidas a la humedad absorbida.
5-. Reflectancia difusa.
La espectroscopia de reflectancia difusa en el infrarrojo se ha convertido en una técnica

importante para la determinación rutinaria de los constituyentes en sólidos finamente
divididos. De hecho es ampliamente utilizada en la determinación de proteínas, humedad,
almidón, aceites, lípidos y celulosa en productos agrícolas tales como granos y aceites de
semillas, etc.
En la espectroscopía de reflectancia en el infrarrojo cercano, la muestra finamente
pulverizada se irradia con una o más bandas de radiación de longitud de onda comprendida
entre 1 y 2,5 m, o 10 000 y 4000cm-1. Se produce una reflectancia difusa, en la que la
radiación penetra a través de la superficie de la capa de partículas, excita los modos de
vibración de las moléculas del analito, y luego se dispersa en todas direcciones. De este
modo, se produce un espectro de reflectancia que depende de la composición de la muestra.
En el gráfico se escribe en el eje de la ordenada el logaritmo de la inversa de la reflectancia
R, donde R es el cociente entre la intensidad de radiación reflejada por la muestra y la
reflectancia de un patrón, como puede ser el sulfato de bario u óxido de magnesio
finamente pulverizados. Para las mediciones de la reflectancia, las muestras se pulverizan
hasta un tamaño de partícula controlado y homogéneo y se mide su reflectancia a dos o
más longitudes de onda. Para establecer las longitudes de onda óptimas se ha de emplear un
tiempo y un esfuerzo considerables.
La gran ventaja de los métodos de reflectancia en el infrarrojo cercano es su rapidez y su

simplicidad en la preparación de la muestra.
Aplicaciones cualitativas de la absorción en el infrarrojo medio.
La identificación de un compuesto orgánico a partir de los espectros de infrarrojo es un

proceso en dos etapas. La primera etapa implica la determinación de los grupos funcionales
que parece más probable que estén presentes, examinando la región de frecuencias de
grupo, que abarca la radiación comprendida desde los 3600 cm -1 a los 1200 cm-1
27
aproximadamente. La segunda etapa consiste en una comparación detallada del espectro

desconocido con los espectros de compuestos puros que contienen los grupos funcionales
encontrados en la primera etapa. En este caso, la región de la “huella digital”, de 1200 cm -1
a 600cm-1, es muy útil, debido a que pequeñas diferencias en la estructura y la constitución
de una molécula provocan cambios significativos en el aspecto y la distribución de los
picos en esta región. En consecuencia, una gran coincidencia de la región de "huella
digital" (así como en otras) entre los espectros de dos compuestos constituye casi una
evidencia de su identidad.
La frecuencia aproximada ( o número de onda) en la que un grupo funcional, como C=O,

C=C, CH, CC, o OH, absorbe radiación infrarroja, se puede encontrar en tablas
especializadas.
Debido a las interacciones con otras vibraciones asociadas con uno o ambos átomos que
forman el grupo, estas frecuencias denominadas frecuencias de grupo rara vez
permanecen invariables. Por otra parte, los efectos de las interacciones suelen ser pequeños;
como consecuencia de ello, se puede asignar un intervalo de frecuencias dentro del cual es
muy probable encontrar el pico de absorción para un grupo funcional determinado.
La tabla 2 muestra de forma abreviada las frecuencias de grupo para algunos de

los grupos orgánicos funcionales más comunes.
Enlace Tipo de compuesto Intervalo de frecuencias, cm-1 Intensidad
CH Alcanos 2850 – 2970 Fuerte

1340 – 1470 Fuerte
CH Alqueno 3010 – 3095 Media
C C 675 – 995 Fuerte
H
CH Alquinos (CCH) 3300 Fuerte

CH Anillos aromáticos 3010 – 3100 Media
690 – 900 Fuerte
OH Alcoholes, fenoles 3590 – 3650 Variable
Alcoholes con puente de 3200 – 3600 Variable, a veces ancha
hidrógeno, fenoles.
Ácidos carboxílicos Media
Ácidos Carboxílicos con 3500 – 3650 Ancha
puente de hidrógeno 2500 – 2700
NH Aminas, amidas 3300 – 3500 Media
CC Alquenos 1610 – 1680 Variable
CC Anillos aromáticos 1500 – 1600 Variable
CC Alquinos 2100 – 2260 Variable
CN Aminas, amidas 1180 – 1360 Fuerte
CN Nitrilos 2210 – 2280 Fuerte
CO Alcoholes, éteres, ácidos 1050 – 1300 Fuerte
carboxílicos, ésteres
CO Aldehídos, cetonas, ácidos 1690 – 1760 Fuerte
carboxílicos, ésteres
NO2 Nitrocompuestos 1500 – 1570 Fuerte
1300 – 1370 Fuerte
28
Tabla 3. PROPIEDADES DE LOS MATERIALES PARA VENTANAS EN INFRARROJO
Material índice de refracción Rango de transmisión útil cm-1 Rango de transmisión útil Solubilidad en
1 000 cm-1(10m) agua(g/g de agua)
CLORURO DE 0.25-16 40 000-625 1.49 36 (a 20C)
SODIO (NaCL)
BROMURO DE 0.25-26 40 000-385 1.52 65.2 (a 20 C)
POTASIO (KBR)
CLORURO DE 0.25-20 40 000-500 1.46 34.7
POTASIO (KCl)
IODURO DE 0.30-50 33 000-200 1.74 160
CESIO (CsI)
SILICA FUNDIDA 0.20-4 50 000-2 500 1.42 Insoluble
(SiO) (a 3333 cm-1)
FLORURO DE 0.20-9 50 000-1 100 1.39 1.51 X 10 -3
CALCIO(CaF) (a 2000 cm-1)
FLORURO DE 0.2-13 50 000-770 1.42 0.12
BARIO (BaF)
BROMOIODUYR 0.6-40 16 600-250 2.37 4.76 x 10 -2
O DE TALIO(Krs-
5)
BROMURO DE 0.5-35 20 000-285 2.2 12 s 10-6
PLATA (AgBr) (aproximado)
SULFITO DE 1-14 10 000-715 2-20 Insoluble
ZINC
POLICRSITALINO
(IRTRAN-2)
ZnS
SELENURO DE 1-19.5 10 000-515 2.41 Insoluble
ZINC
POLICRISTALINO
(IRTRAN-4)
ZnSe
TELURIO DE 2-2.28 5 000-360 2.67 Insoluble
CADMIO (CdTe)
POLIETILENO 16-333 625-30 1.54 Insoluble
(ALTA (a 5 000cm-1)
DENSIDAD)
Debe observarse que aunque la mayoría de las frecuencias de grupo están en

intervalo de 3600 cm-1 a 1250 cm-1, unas pocas veces se encuentran en la región de la
“huella digital”. Estas incluyen la vibración de tensión C-O-C a unos 1200 cm -1 y la
vibración de tensión C-Cl en 700 a 800 cm-1.
En la región de la “huella digital” entre 1200 y 700 cm -1 pequeñas diferencias en la

estructura y la constitución de las moléculas originan cambios importantes en la
distribución de los picos de absorción. Como consecuencia, la estrecha correspondencia
entre dos espectros en esta región ( y en otras ) constituye una evidencia de la identidad de
los compuestos que producen los espectros. La mayoría de los enlaces simples originan
bandas de absorción a estas frecuencias y como sus energías son aproximadamente iguales,
se produce una fuerte interacción entre los enlaces vecinos. Las bandas de absorción son
pues el resultado combinado de estas distintas interacciones y dependen de la estructura
básica general de la molécula.
29
Debido a su complejidad, raramente es posible la interpretación exacta de los

espectros en esta región; por otra parte, esta complejidad es la que conduce a la
singularidad y por consiguiente a la utilidad de la región para fines de identificación.
PROPOSITO
Que el estudiante aprenda a hacer un análisis cualitativo de algunos empaques usados

en la industria.
1. Que el estudiante conozca las diferentes partes de un Espectrofotómetro de Luz
Infrarroja.
2. Que el estudiante aprenda a manejar una muestra para ser tratada en IR
3. Qué el estudiante compare los resultados obtenidos entre los métodos de manejo de
muestra para IR.
FUNDAMENTO TEÓRICO
Dependiendo de la forma de manejar una muestra para ser leída por IR será el
resultado del espectro o interferograma obtenido, ya que una muestra puede ser disuelta,
pulverizada o leída de manera directa; de la forma como sea tratada dependerá la cantidad
de interferencias o picos de fondo que deban tomarse en cuenta, para interpretar un espectro
de IR.
Todo el material debe estar perfectamente seco y limpio al igual que las manos de quien manipule
las muestras.
MATERIALES Y METODOS
1.-Espectrofotómetro de Luz Infrarroja Nicolet

2.-Espátula
3.- Mortero de ágata con pistilo de ágata
4.- Ventanas par IR de NaCl
5.- Prensa
6.- Dado para pastillas de IR
7.- Soporte para pastillas
REACTIVOS:
Las sustancias que a continuación se mencionan deben ser grado espectro, a menos que se
indique lo contrario.
 KBr
 Cloroformo
 Progesterona
 Argón HUP
30
PROCEDIMIENTO
a) Pastilla
1. Coloque una pequeña cantidad de KBr (20mg aprox.) en el mortero de ágata y
muélalo un poco.
2. Arme el dado para hacer pastillas como le indique el profesor (a) y coloque el KBr
dentro del dado.
3. Elabore una pastilla con ayuda de la prensa y retírela con las pinzas, no la toque con las
manos.
4. Coloque la pastilla en el soporte para pastillas.
5. Léala como background en el equipo de FT-IR.
6. Retire el soporte y la pastilla del equipo, retire la pastilla del soporte y regrésela al
mortero completa, adicione la punta de la espátula de progesterona y muela todo junto
un poco.
7. Elabore nuevamente una pastilla con esta mezcla.
8. Colóquela en el soporte para pastillas y léala como sample en el equipo FT-IR.
9. Imprima el espectro resultante.
b) Líquida
10. Coloque en un vial una pequeña cantidad de progesterona y adicione lo menos posible
de cloroformo para disolverla.
11. Coloque dentro de la celda para líquidos de NaCl, cloroformo. Tape perfectamente y lea
como background en el equipo de FT-IR
12. Limpie la celda con flujo de argón.
13. Adicione la progesterona disuelta en cloroformo a la celda de líquidos.
14. Colóquela en el porta celdas y léala como sample en el equipo de FT-IR.
15. Imprima el espectro resultante
c) Film o película
16. Coloque una gota de cloroformo entre dos ventanas de NaCl.
17. Coloque las ventanas en el porta ventanas y lea como background.
18. Retire las ventanas y coloque un poco de progesterona disuelta en cloroformo entre dos
celdas de NaCl.
19. Lea como sample en el equipo de FT-IR.
20. Imprima el espectro resultante.
REPORTE
1. Interprete cada uno de los espectros basándose en las tablas de la introducción.

2. Compare los espectros resultantes
3. Reporte lo que observa en cada uno de los espectros que imprimió.
31
CUESTIONARIO.
1. ¿Cuál es la principal diferencia entre los espectros de IR obtenidos?
2. ¿A qué crees que se deban estas diferencias?
3. ¿Para que es necesario correr un background antes de cada corrida de IR?
4. Investiga de que materiales pueden ser las celdas de IR y ¿por qué se usan más
comúnmente, las elaboradas con NaCl?
EVALUACIÓN:
50% Cuestionario
50% Reporte de la práctica
32

PRACTICA 7
EXAMEN DE LABORATORIO
PROPOSITO
Que el estudiante tenga el criterio de seleccionar una técnica de Análisis Instrumental para
identificar y cuantificar una muestra problema proporcionada por el profesor.
MATERIALES Y REACTIVOS
Serán prestados por el encargado de Laboratorio de acuerdo a la Necesidad de la muestra
problema.
33

PRACTICA 8
DETERMINACION DE ETANOL EN BEBIDAS ALCOHOLICAS

POR CROMATOGRAFIA DE GASES
INTRODUCCIÓN
La cromatografía es una técnica en donde se lleva a cabo la separación de compuestos con

el propósito de identificar, cuantificar o purificar cada uno de los componentes de una mezcla de
solutos, basándose en las velocidades con las que se mueve cada soluto a través de un medio poroso
arrastrado por un solvente, una mezcla de solventes o por gas.
Existen diferentes divisiones en la práctica para la cromatografía como la de adsorción,

reparto, intercambio iónico, exclusión molecular, y por afinidad. En esta cromatografía un soluto
gaseoso (vapor de un líquido volátil) es transportado por una fase móvil gaseosa.
De acuerdo al tipo de fases estacionaria se clasifica en dos:
La fase estacionaría suele ser un líquido no volátil que recubre el interior de la columna o
un soporte sólido de grano fino. Esta forma más común de cromatografía de gases se llama
cromatografía de reparto o de partición gas – líquido.
En ocasiones se utilizan como fase estacionaria partículas sólidas sobre las que el soluto
puede adsorberse.
En este caso la técnica se denomina cromatografía de adsorción gas – sólido.
PROPOSITO
Que el estudiante aprenda a hacer un análisis cualitativo y cuantitativo de mezclas de sustancias
orgánicas.
1. Que el estudiante conozca las diferentes partes de un Cromatógrafo de Gases.

2. Que el estudiante aprenda a hacer un análisis cualitativo de una mezcla de sustancias
orgánicas.
3. Que el estudiante aprenda a hacer un análisis cuantitativo de una muestra problema, a partir
de una curva de calibración, mediante el método del estándar externo y del estándar interno.
4. Qué el estudiante compare los resultados obtenidos entre los métodos de cuantificación
empleados.
34
FUNDAMENTO TEÓRICO
La cromatografía de gases se utiliza para separar, identificar y cuantificar
cualquier material que contenga una presión de vapor apreciable (1 a 1000 mm Hg) a una
temperatura de operación de la columna (medio de separación) desde –70° C a 400° C.
Análisis cualitativo
Se basa en la diferencia de velocidades de migración de los componentes de una
mezcla entre dos fases; una estacionaria y una móvil (gas), de tal manera que cada
componente es selectivamente retenido por la fase estacionaria y eluye a un cierto tiempo
(tiempo de retención), dependiendo del programa empleado para su análisis.
Análisis cuantitativo
El auge creciente de la cromatografía durante las últimas cuatro décadas se debe en
parte a su rapidez, simplicidad, relativamente bajo costo, y a su gran aplicabilidad como
herramienta de separación. Su uso se ha extendido tanto porque puede también
proporcionar información cuantitativa acerca de las especies separadas. Por lo tanto
debemos tener en cuenta los aspectos cuantitativos aplicados a todos los tipos de
cromatografía.
La cromatografía en columna cuantitativa se basa en la comparación de la altura, o

del área, del pico del analito con la de uno o más estándares. En cromatografía plana, el
área cubierta por las especies separadas sirve como parámetro analítico. Si se controlan las
condiciones adecuadamente, esos parámetros varían linealmente con la concentración.
Método del % de Área

- Todos los componentes deben ser registrados.
- El factor respuesta para todos es el mismo.
- % de área.
Ai
Se obtiene mediante la fórmula % A   100
 Ai
*PICO No. Tr (min.) AREA % DE AREA
1 2.71 85,000 37.6931
2 3.48 72,000 31.9283
3 4.23 43,200 19.1570
4 5.78 25,305 11.2215
TOTAL 225,505 100
*Datos de la muestra
Método del % de Normalización.

- Todos los componentes deben ser registrados.
- El factor respuesta para cada componente de la muestra es diferente.
- Se emplea un estándar de cada uno de los componentes de la muestra para determinar el
factor de respuesta.
-
35
*PICO No. Tr (min.) AREA % DE AREA

1 2.71 85,000 37.6931
2 3.48 72,000 31.9283
3 4.23 43,200 19.1570
4 5.78 25,305 11.2215
TOTAL 225,505 100
Datos de la muestra estándar
*PICO No. tr (min.) AREA CONC (mg)
1 2.71 50.000 15
 2 (ref) 3.48 70.000 15
3 4.23 80.000 15
4 5.78 65.000 15
Como se calcula el factor de respuesta. ref = estándar de referencia.

Factor de Respuesta (FR) i = Analito
FRi =  Ci  x  A ref  C = Concentración
Ai C ref A = Area
FR 1= __15 x 70.000 = 1.4 FR1= 1.4

50.000 15
FR 2= __15 x 70.000 = 1.0 FR2= 1.0

70.000 15
FR 3= __15 x 70.000 =0.875 FR3= 0.875

80.000 15
FR 4= __15 x 70.000 = 1.076 FR4= 1.076

65.000 15
Porciento de normalización %N
%N = Ai x FR i x 100
 ni=1 Ai x FR i
% N 1 = _______________(85.000) (1.4)_____________
(85.000) (1.4) + (72.000) (1) + (43.200) (0.875) + (23.305) (1.076)
% N 1 = _________119.000_______ % N1 = 46.8732
119,000+72,000+37,800+ 25,076.18
% N2 = (72.000) (1) x 100 %N2 = 28.3602

253,876.18
% N 3= 14.8891
%N3 = (43,200) (0.875) x 100
253,876.18
%N4 = 9.8773
36
%N4 = (23,305) (1.076) X 100

253,876.18
%NT = 99.9998
Método del Estándar Externo.

Se debe inyectar primero la mezcla en el cromatógrafo con cantidades conocidas de cada
uno de sus componentes de interés y determinar el factor de respuesta de cada componente. La
relación de la cantidad de estándar con la respuesta (usualmente el área del pico) es conocida como
factor de calibración para ese componente particular.
Cuando se analiza una mezcla de concentración desconocida, la cantidad de cada componente

es obtenida multiplicando
- El factor de respuesta para todos es calculado.
- Se inyecta siempre la misma cantidad.
Hacer cromatograma problema y las áreas halladas dividirlas por el factor de respuesta.
Calibración y Patrones
El método más sencillo para el análisis cromatográfico cuantitativo implica la preparación
de una serie de disoluciones de patrón de composición a la de la muestra. A continuación se
obtienen los cromatogramas de los patrones y se representan las alturas o áreas de pico en función
de la concentración. La representación de los datos debería originar una línea recta que pasara por
el origen de coordenadas; los análisis se basan en esta gráfica. Para una mayor exactitud es
necesario una estandarización frecuente.
Al utilizar este método, la fuente más importante de error en los análisis es normalmente la
incertidumbre en el volumen de la muestra; ocasionalmente la velocidad de inyección de la muestra
es también un factor a considerar. A menudo, las muestras son pequeñas (aproximadamente 1
microlitro) y la incertidumbre asociada con la inyección de un volumen reproducible de ese tamaño
con una microjeringa puede significar un cierto porcentaje relativo, tal vez de varias unidades. La
situación se pone más de manifiesto en la cromatografía gas-líquido, donde la muestra se ha de
inyectar en un bloque de inyección caliente; aquí, la evaporación en el extremo de la aguja puede
conducir a una gran variación del volumen inyectado.
Datos de la muestra. i=1

*PICO No. tr (min.) AREA % DE AREA
1 2.71 85,000 37.6931
2 3.48 72,000 31.9283
3 4.23 43,200 19.1570
4 5.78 25,305 11.2215
TOTAL 225,505 100
Datos de la muestra estándar

37
*PICO No. tr (min.) AREA CONC (mg)

1 2.71 50.000 15
 2 (ref) 3.48 70.000 15
3 4.23 80.000 15
4 5.78 65.000 15
Como obtener el factor de calibración.

Factor de Calibración (FC)
FCi= C ci
A ci
FC1 = 15 mg = 3.000x 10 -4 FC1 = 3.000x 10 -4
50,000
FC2 = 15 mg = 2.142 x10 -4 FC2 = 2.142 x10 -4
70,000
FC3 = 15mg = 1.875 x 10-4 FC3 = 1.875 x 10-4
80,000
FC4 = 15 mg = 2.307 x 10-4 FC4 = 2.307 x 10-4
65,000
Cantidad del componente (cx)
Cxi = (ACi) (FCi)
C1= (85,000) (3.000x 10 -4) = 25.5 mg C1= 25.5 mg
C2 = (72,000) (2.142 x10 -4) = 15.4 mg C2= 15.4 mg
C3 = (43,200) (1.875 x 10-4) = 8.1 mg C3= 8.1 mg
C4 = ( 25,305) (2.307 x 10-4)= 5.8 mg C4= 5.8 mg
EXACTITUD DEL VOLUMEN INYECTADO (FV)
FV= V im
V is
Vim = Volumen inyectado de muestra

Vis = Volumen inyectado de estándar.
Entonces:
Cxi = (A C i) ( F C y)
FVi
El método del estándar interno.

En cromatografía cuantitativa la mayor precisión se consigue por el uso de patrones internos debido
a que se evitan las incertidumbres que se introducen en la inyección de la muestra. En este
procedimiento, el estándar interno elegido debe reunir las siguientes características:
- Proporcionar un pico bien resuelto
- Aparecer en el cromatograma en la mitad del mismo.
- No debe encontrarse en la muestra
38
- Su composición debe ser similar a la de los componentes de la mezcla.
1-. Se realiza un cromatograma patrón con todas las sustancias y el estándar interno con cantidades
conocidas. *
2-. Realizar el cromatograma problema con una cantidad de estándar interno conocida. *
 (hacer 3 inyecciones y promediar)
3.- Conociendo el área del analito (Ai), l área del estándar interno (Aref), y el factor de repuesta de
ambos (FRref =1), así como la concentración del estándar interno realizar el siguiente cálculo para
conocer la concentración de i.
Ci = (Cref x Ai x Fri) / Aref
1 Todo el material de vidrio debe estar limpio

2 Usar Siempre el material adecuado para cada fin por ejemplo, pipetear con una propipeta, no
con la boca.
3 Los residuos que se generen de la práctica deberán deponerse en el envase destinado para ello.
MATERIALES Y MÉTODOS.
Agua Destilada
Problema (bebida alcohólica)
Acetona R.A.
Matraces volumétricos de 10mL
Pipetas volumétricas de 5 y 1 mL
Cromatógrafo de Gases Varian 3300
Columna megaboro de polaridad media.
Integrador Varian 4290
Papel para integrador
PROCEDIMIENTO.
Preparar una curva de calibración de Etanol con las concentraciones al 10, 20, 30, 40% de Etanol en
agua agregando a cada matraz una cantidad de acetona que será el std interno (preparar 10mL de
cada std; agregar 1 mL de acetona para cada std).
Tomar 5mL de muestra y colocarla en un matráz volumétrico de 10mL en agregar 1 mL de acetona

y aforar con agua destilada.
Leer las muestras en el Cromatógrafo de Gases, ajustando la sensibilidad y rango.

Columna:
Programa de columna: 40°C /5 min. a 150°C/min, 10°/min.
Temperatura del inyector: 200°C
Temperatura del detector: 250°C
Flujo de gas acarreador: 5mL/min.
Los datos obtenidos para la curva de calibración graficarlos concentración en % contra el área.
39
Leer la muestra problema y el área obtenida interpolarla en la gráfica elaborada para conocer su
concentración.
Realizar las operaciones matemáticas correspondientes al estándar interno.
Reportar la cantidad de Etanol presente en la muestra.
Nota: Si la bebida escogida es edulcorada hacerla pasar previamente por una cama de carbón para
retener los azucares y colorantes que pudiese contener.
CUESTIONARIO
1.-¿ Cuál es el fundamento de la Técnica de Cromatografía de Gases?
2.-¿ Qué características debe tener una muestra para poder ser analizada por Cromatografía de
Gases?
3.- Si la muestra que voy a analizar es polar, ¿Qué tipo de columna debo emplear para el análisis?
4.-¿ Cuales son las partes de un Cromatógrafo de Gases?
5.-¿Qué características deben tener los gases que se emplean para el detector FID?
6.- ¿Qué es el tiempo de retención relativo?
7.- Dibuja un diagrama de un Cromatógrafo de Gases y menciona ¿cuál es el trayecto de un analito

dentro del equipo?
EVALUACIÓN:
Valor del cuestionario 50%
Valor del reporte 50%
40

PRÁCTICA 9
DETERMINACIÓN DE ACIDO ACETIL SALICÍLICO
POR HPLC
INTRODUCCIÓN
PRINCIPIOS BÁSICOS DE LA CROMATOGRAFÍA.
La cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC), fue introducida como técnica

analítica en los años 60. La cromatografía es un método de análisis inmediato que permite
la separación de uno o varios componentes de una mezcla para lograr su identificación o
cuantificación utilizando las diferencias entre sus constantes de equilibrio, con la
participación de la fase móvil en la que los componentes de la mezcla son solubles y la
fase estacionaria o fija que va a ejercer sobre ellos un efecto retardador. A este sistema que
permite efectuar la separación se denomina sistema de fases.
Después de la inyección, la mezcla disuelta en la fase móvil es transportada a través de la
columna y las moléculas entran en contacto con la fase estacionaria provocando los
fenómenos de intercambio que darán origen a la separación.
El proceso de separación
La separación de sustancias presentes en una mezcla depende del hecho de que un

compuesto sea retenido mas tiempo en la fase estacionaria que otro. En la superficie de la
fase estacionaria, se ejercen fuerzas de atracción que retienen o adsorben durante un corto
instante los compuestos a separar.
Después de un cierto tiempo, dichos compuestos regresan a la fase móvil (eluyente) y son
transportados a otro sitio de la columna, volviendo a iniciarse el proceso de separación un
repetido número de veces.
La retención de un compuesto depende mucho del eluyente. Así una sustancia puede ser
más o menos retenida según la fase móvil utilizada.
El tiempo que tarda una sustancia desde que es inyectada en él aparato hasta que sale de la
columna se denomina tiempo de retención (tr).
La retención de una sustancia depende tanto de la naturaleza de la fase estacionaria como

de la fase móvil con que se trabaje.
41
La separación de una mezcla en sus diferentes componentes se debe principalmente a la

estructura porosa del soporte en la fase estacionaria. La ventaja de este tipo de estructuras
reside en la enorme área superficial que se genera.
La fase móvil fluye a través de las partículas del soporte quedando retenidas en los poros.
De esta manera, la muestra en estudio pasa a través de toda la superficie de la fase
estacionaria y sus componentes son separados según su tiempo de retención.
De acuerdo al tipo de interacción entre la fase estacionaria y las moléculas en estudio

tenemos la siguiente clasificación:
CROMATOGRAFIA
En fase gaseosa En fase supercrítica En fase Líquida
Columna placa
(CCF)
Adsorción Partición Intercambio Pares de Intercambio Transferencia Afinidad Exclusión

(sílice) iónico iones de ligantes de carga
PROPÓSITO
Demostrar cuantitativamente el contenido de cafeína y ácido acetilsalicílico en un

analgésico mediante cromatografía líquida de alta eficiencia. Demostrar las ventajas de la
técnica para control de calidad.
FUNDAMENTO TEÓRICO
Observar el avance diferencial que se produce a lo largo de una columna de las distintas
fracciones de solutos inyectados.
Así como apreciar que los distintos compuestos de una mezcla compleja, y demostrar que
cuanto más avancen por la columna mejor separados quedan.
42
1. Todo el material de vidrio debe estar limpio

2. Usar Siempre el material adecuado para cada fin por ejemplo, pipetear con una propipeta,
no con la boca.
3. Los residuos que se generen de la práctica deberán deponerse en el envase destinado para
ello.
MATERIAL Y EQUIPO.
- Columna ODS (Octadecilsilano) de 150 mm de largo por 4.5 mm de diámetro interno,

partículas de 5µm.
- Cromatógrafo de líquidos de alta eficiencia con detector UV (254 nm)
- Microjeringa de 10 µl
- Centrífuga
- Tubos para centrífuga
- Mortero con pistilo.
REACTIVOS
- Fase móvil: metanol – agua (contenido 1% de ácido acético) 45:55 v/v

- Solución de cafeína 1.0 mg/mL (usando la fase móvil como disolvente)
- Solución de ácido acetilsalicílico 10.0 mg/mL (fase móvil como disolvente)
- Cafiaspirina o producto similar.
- Metanol.
PROCEDIMIENTO
Se fija el flujo de la columna en 1 mL/min

1.- Determinación del orden de elusión:
Inyecte 10 µl de cada uno de los estándares por separado.
2.- Calibración de la detección

Prepare varias mezclas de cafeína y de aspirina a partir de las soluciones anteriores e
inyecte 10 µl de cada mezcla por triplicado. Calcular el área de los picos obtenidos y trazar
la curva de calibración de cada componente.
3.- Cuantificación del problema

a) Preparación de la muestra:
Muela una tableta de Cafiaspirina y mezcle el polvo con 25 mL de metanol,
centrifugue y afore a 50 mL
b) Análisis
Inyecte por triplicado 10 µl de la solución anterior.
43
c) Efecto de la longitud de onda:

Repita la inyección de 10 µl a otras dos longitudes de onda diferentes ( por ejemplo 245 y
265). Establezca sus conclusiones.
CÁLCULO
El cálculo se realizará por medio del Software, tomando en cuenta las concentraciones de
las soluciones de referencia y muestra, así como los tiempos de retención.
A partir del Cromatograma que presente los mejores resultados, calcular el número
de platos teóricos con la siguiente ecuación:
 tr   tr  2
N = 16   2
= 5.54  
W   
tr = tiempo de retención del pico.
W = longitud del pico en la base definido como la distancia entre los puntos de intersección
de las tangentes de inflexión con la línea base.
 = Longitud o ancho del pico a media altura
CUESTIONARIO
1.- ¿ Cuál es el principio de la Cromatografía?

2.- ¿Diferencia entre Cromatografía de Gases y Líquidos?
3.- ¿Cuáles son los criterios para la elección de la fase móvil?
4.- ¿Cuantos tipos de detectores existen?
5.- ¿Qué función lleva a cabo la bomba?
7.- ¿Qué es el tiempo de retención?
EVALUACIÓN
El alumno reportará la concentración final de las soluciones inyectadas, contrastadas a la

curva de calibración.
FORMA DE REPORTE
El alumno entregará anexado a su reporte una copia de la información proporcionada por

el equipo con respecto a las soluciones que inyectó.

44
PRACTICA 10
COMPARACION DE AZUCAR Y ASPARTAME POR
CALORIMETRIA DIFERENCIAL DE BARRIDO (DSC)
INTRODUCCIÓN
El procesado de los azúcares amorfos no cristalinos es la base de la tecnología
utilizada en la producción de muchos alimentos, por ejemplo el empleo de la lactosa amorfa
en los productos lácteos en polvo. Existen procesos industriales de fabricación de productos
con azucares en su composición en los que se persigue la formación de estructuras amorfas,
por ejemplo la concentración de disoluciones a altas temperaturas y el posterior
enfriamiento rápido, la liofilización, el enfriamiento rápido de diluciones o la fusión de
cristales y su enfriamiento rápido. El criterio seguido para la estabilidad de los productos
amorfos es almacenarlos a temperaturas por debajo de la Tg. En este caso, el principal
interés radica pues en el estudio de transición vítrea.
PROPOSITO
Que el estudiante aprenda a hacer un análisis térmico de compuestos de interés.
1. Que el estudiante conozca las diferentes partes de un Calorímetro Diferencial de

Barrido.
2. Que el estudiante aprenda interpretar un termograma.
3. Qué el estudiante compare los resultados obtenidos entre los 2 termogramas y los
discuta.
FUNDAMENTO TEÓRICO.
El estudio de compuestos orgánicos, inorgánicos y matrices complejas como los

alimentos y compositos, se ha realizado en los últimos años por medio de la calorimetría
diferencial de barrido, ya que esta técnica resulta de gran utilidad al ser empleada para
monitorear las condiciones de pureza, estabilidad, transición vítrea, Tg de polímeros,
capacidad calorífica, etc..
La técnica de la Calorimetría Diferencial de Barrido mejor conocida por sus siglas

en inglés DSC (Diferential Scanning Calorimetry), consiste en analizar los cambios de fase,
estudiando los cambios observados, por la medida del flujo calorífico dentro o fuera de la
muestra, (relativo a un material de referencia) como una función de la temperatura durante
el propio proceso.
Por ejemplo, el punto de fusión es un proceso endotérmico, durante el cual la

muestra toma en red cantidades de calor (determinadas por el calor de fusión molar de la
muestra), y se determina como un pico en la curva DSC. La posición del pico en el eje de
temperatura, está determinada por el punto de fusión y la forma del pico está determinado
por la pureza de la muestra (entre otros parámetros).
En DSC la muestra y la referencia se mantienen a la misma temperatura (T= Ts -Tr

= 0) a través de un programa controlador de la temperatura, cualquier diferencia de energía
en la fuente de la muestra y la referencia será grabada en el programa de temperatura.
45
FUNCIONAMIENTO.
Antes de realizar medida alguna debe de calibrarse el calorímetro para obtener en
unidades de mcal la constante de calibración y la escala de calorías debe determinarse con
exactitud.
El rango de las temperaturas de operación del DSC-7 Perkin Elmer es de

-68ºC a 500ºC.
TECNICAS DE MUESTREO.
Sobre un crisol limpio de Al3 se coloca la muestra, se tapa y se sella, el aspecto
cualitativo del termograma se verá afectado por la disposición de la muestra aunque el área
del pico no variará. Para obtener picos estrechos y finos debe asegurarse el contacto total de
la muestra con la superficie del crisol.
Existen crisoles que son capaces de soportar hasta 2 a 3 atm. dependiendo de su

forma y de la forma en que son prensados. Si la muestra se oxidara en el intervalo del
tiempo de trabajo deben usarse este tipo de crisoles mencionados y encapsulados en una
atmósfera inerte. Se ha observado también una célula pero su elevada masa da lugar a una
menor precisión en los datos de entalpia obtenidos.
 Tener mucho cuidado al introducir las muestras a la celda del equipo, ya que no deben
presionarse, pues se corre el riesgo de dañar los filamentos que se encuentran debajo de estas.
 Asegurarse de que los pans que contengan las muestras estén bien sellados, para evitar fugas y
derrames que pueden dañar el equipo.
 Todo el material debe estar limpio, los crisoles o pans de aluminio se lavan con acetona y se
secan en la estufa, no se tocan con las manos.
 Usar siempre el material adecuado para cada fin por ejemplo, ( usar pinzas, para transportar los
pans, no con la mano)
 Los residuos que se generen de la práctica deberán deponerse en el envase destinado para ello.
MATERIALES Y MÉTODOS.
1. Azúcar
2. Aspartame
3. Gas Nitrógeno.
4. Paneles de aluminio para líquidos.
5. Espátula
6. Pinzas.
7. Calorímetro Diferencial de Barrido DSC7 marca Perkin Elmer
8. Intra-cooler II marca Perkin Elmer.
9. Balanza analítica Mettler
10. Prensa para celdas de líquidos.
PROCEDIMIENTO.
46
1. Pesar 2.5 mg +/- 0.2mg de la muestra de azúcar y aspartame por separado en paneles
limpios de aluminio previamente tarado
2. Sellarlo herméticamente con la prensa para líquidos
3. Colocar el panel que contiene el azúcar en la celda de DSC con una referencia que
consiste en un panel vacío, exactamente igual al de la muestra.
4. Equilibrar la temperatura de la muestra e iniciar el calentamiento a partir de la
temperatura ambiente, a una velocidad de 20°C/min hasta 240°C.
5. Retirar el panel usado y colocar el que contiene la muestra de aspartame.
6. Analizar los resultados.
Temperatura inicial 30°C

Temperatura final 240°C
Velocidad de barrido 20 °C/min
Peso de la muestra 2.5 mg (colocar el peso exacto)
Condiciones de encapsulamiento en paneles para líquidos
Atmósfera de trabajo Nitrógeno
7. Comparar los termogramas que se obtuvieron y discutirlos.

8. Opcional. Ingresar una muestra de un polvo para preparar agua y tratar de identificar
si lo que contiene es azúcar o aspartame o bien otro edulcorante.
CUESTIONARIO
1.- ¿Cuál es el principio de la técnica de Calorimetría Diferencial de Barrido?
2.- ¿Para qué se emplea básicamente la técnica de Calorimetría Diferencial de Barrido?
3.- ¿Cuáles son los cambios Físicos o químicos que pueden detectarse en un material y
como se representan estos en el termograma?
4.-¿Si mantengo un material a cierta temperatura por un tiempo conocido que técnica estoy
empleando?
5.-¿ Para analizar un compuesto desconocido, que precauciones debes tener para realizarle
un análisis?
6.- Elabora un diagrama de flujo del DSC.
EVALUACIÓN:
Valor del cuestionario 50%

Valor del reporte 50%
47

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Universidad Autónoma del Estado de México

Licenciatura en Ingeniería Química

QUÍMICA ANALÍTICA INSTRUMENTAL

Dr. Jorge Javier Ramírez García

II – Propósitos Generales del Curso

III – Reglamento de Laboratorio

Practica 1 “Valoración de HCl con NaOH potenciométricamente y

Practica 2 Determinación potenciométrica de los puntos de equivalencia

Practica 3 Uso y aplicaciones de la espectrofotometría de ultravioleta

Practica 4 Preparación de la curva de calibración para determinar Cr

Practica 5 Determinación de plomo en suelo urbano mediante

Practica 6 Manejo de Muestras para ser leídas en Espectrofotometría de

Practica 7 Examen de laboratorio

Practica 8 Determinación de etanol en bebidas alcohólicas por

Practica 9 Determinación de colorantes por HPLC.

Practica 10 Determinación de azúcares por Calorimetría Diferencial de

I.- INTRODUCCIÓN GENERAL

1. Los análisis sensoriales

2. Los análisis físico-químicos

3. Los análisis microbiológicos

Los análisis físico-químicos se pueden clasificar en dos grupos fundamentales, a partir

1. Los métodos de análisis que utilizan procedimientos químicos

En la asignatura de Química Analítica Instrumental se tratarán los temas relacionados a

II.- PROPÓSITOS GENERALES DEL CURSO PRÁCTICO

Este curso práctico tiene el propósito de capacitar al alumno en el conocimiento y la

¿Qué método y como aplicarlo a un análisis específico? :

III.- REGLAMENTO DEL LABORATORIO

- Miércoles de 09:00 a 12:00 horas. (grupo 45)

- Se respetaran las normas de seguridad de los laboratorios donde se trabaja.

- Se entregara a los alumnos el manual de laboratorio con el descriptivo de las diferentes

c) Introducción breve de la técnica empleada y justificación

Al iniciar la práctica, se verificará el protocolo y se calificará (50% de la

Se calificará a ese momento la segunda parte (50% de la calificación global de la

La calificación general correspondiente a la parte de laboratorio será el promedio de las

ANÁLISIS QUÍMICO INSTRUMENTAL.

La palabra INSTRUMENTO, es todo aquello de lo que se vale para efectuar una

Prácticamente cualquier propiedad física característica de un elemento particular o

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE MÉXICO

“Valoración de HCl con NaOH potenciométricamente y comparación de la

En numerosos análisis químicos es necesaria la utilización de soluciones ácidos y bases

Observar que parámetros influyen en la valoración potenciométrica para que no se

1. Preparé 100 mL de HCl aproximadamente 0.1N y valore con Carbonato de sodio,

3.-Qué % de error encontró entre el punto final experimental comparado con el

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE MÉXICO

DETERMINACIÓN POTENCIOMÉTRICA DE LOS PUNTOS DE EQUIVALENCIA

El objetivo de esta práctica es determinar potenciométricamente los puntos de equivalencia del

Un potenciómetro Solución de ácido fosfórico 0.2 (50 mL

Cuatro vasos de precipitados de 50 mL

En un matraz erlenmeyer de 250 mL se vierten 50 mL de ácido fosfórico y se valora con hidróxido

Los resultados se tabulan de la siguiente manera:

Trace en ecxel los siguientes gráficos:

a) pH en función del volumen en mL de hidróxido de sodio

Determinar en que pH se encuentran los puntos de equivalencia.

UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE MÉXICO

USO Y APLICACIONES DE LA ESPECTROFOTOMETRIA DE ULTRAVIOLETA

El alumno aprenderá a utilizar el equipo de ultravioleta-visible para analizar la

Aplicable a colorantes artificiales alimenticios.

La absorción molecular en la región ultravioleta y visible del espectro depende de la

Sin embargo se tiene gran ventaja en cuanto a la selectividad de la absorción