Manual Analitica

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUÍMICAS
SECCIÓN DE QUÍMICA ANALÍTICA
MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE QUÍMICA ANALÍTICA IV

(Q)
CLAVE DE CARRERA: 211 CLAVE ASIGNATURA: 1715
AUTORES:
Ruth Martínez Reséndiz

Martha Angélica Villegas González
Dalia Bonilla Martínez
Pablo Hernández Matamoros
Vigencia: Semestre 2022-I

INTRODUCCIÓN.
Uno de los objetivos importantes en los cursos de Química Analítica a nivel licenciatura y sobre
todo en los laboratorios de enseñanza experimental es que el alumno adquiera la experiencia y el
razonamiento crítico e independiente, necesarios para abordar los problemas de trabajo que se
presentan en la práctica profesional.
Problemas comunes en los laboratorios de análisis químico son la separación, identificación

y cuantificación de los componentes de una mezcla, el químico cuenta con una gran diversidad de
métodos y técnicas de análisis que le permiten resolverlos; el éxito en la identificación y cuantificación
de un componente en una muestra real se debe en gran porcentaje a que el analista seleccione la
técnica adecuada. En la actualidad los métodos utilizados pueden ser clasificados como clásicos
(volumetrías, gravimetrías, extracción, intercambio iónico, etc.) é instrumentales (cromatografía de
gases o líquidos, absorción atómica, voltamperometrías, polarografía, etc.).
La asignatura de Química Analítica IV considera en sus cursos de laboratorio una serie de

prácticas que introducen al alumno en el estudio de métodos de separación como son: la extracción
líquido-líquido, la cromatografía, la electrogravimetría, que permiten al estudiante comprender como
tratar una muestra para separarla en sus componentes individuales, esto con la finalidad de eliminar
interferencias y/o separar al analito de interés. Además, de conocer el manejo de algunas técnicas
instrumentales que son utilizadas con frecuencia en la cuantificación de diversas sustancias como: la
espectroscopia de absorción atómica, espectrofotometría molecular, la polarografía, la cromatografía
de gases y líquidos de alta resolución, enfocando el conocimiento a los fundamentos teóricos, pero
sobre todo al funcionamiento del equipo y el tipo de muestras que se analizan por cada técnica.
También se incluyen en las prácticas el manejo de métodos estadísticos básicos, como son:
estadística descriptiva, regresión lineal, etc., que permite al estudiante inferir sobre la exactitud y
precisión de sus análisis. Elaboración de curvas de calibración de patrón externo y adición patrón,
además de métodos puntuales como el factor respuesta como métodos de cuantificación, así mismo,
discusiones sobre la utilidad de cada uno de ellos.
Todo esto ubica a la materia como una de las mas importantes, dentro de los programas de
Química Analítica de la carrera de Química, sin embargo, esta solo enseña al alumno un número muy
limitado de técnicas instrumentales, el estudiante debe consultar la bibliografía que le permite adquirir
un mayor conocimiento sobre los métodos instrumentales modernos como son: la electroforesis
capilar, la cromatografía de gases capilar con diversos detectores, la electrocromatografía, la
cronopotenciometría, la cronoamperometría, etc.
2
Es por lo anterior que este manual pretende ser una guía de apoyo a los estudiantes y
profesores que imparten la asignatura de Química Analítica IV. En lo que concierne a técnicas o
procedimientos experimentales básicos, se pretende que el alumno aplique métodos y técnicas en el
área de Química Analítica que lo introduzcan a los métodos de separación, así como, que comprenda
la importancia que tiene los procesos de obtención e interpretación de datos experimentales para la
cuantificación de algunas sustancias de interés en el curso. Además, el contenido de cada una de las
prácticas del manual le sirvan al alumno para desarrollar habilidad operatoria en el manejo de algunos
equipos instrumentales básicos; también, cuidar la exactitud en las observaciones, demostrar y
resolver los problemas del planteamiento de un experimento, facilitar la comprobación experimental
de hechos o fenómenos que son reproducibles, cuyos conceptos teóricos han sido establecidos de
antemano y al mismo tiempo, mejorar la comprensión de esos conceptos. Así mismo se pretende
reafirmar los conocimientos que se adquieren a la par con otras asignaturas y así obtener un óptimo
desarrollo dentro del laboratorio.
3
I. OBJETIVOS
Objetivo general
El programa de la asignatura Química Analítica IV de la Carrera de Química pretende que los

estudiantes tengan la capacidad de:
“Describir los métodos de separación y técnicas de cuantificación instrumentales más utilizados en
la industria, además de haber adquirido el criterio para la adecuada selección del método analítico
en función a las propiedades fisicoquímica de la sustancia a analizar e interpretar los resultados
experimentales para la cuantificación de sustancias de interés mediante el tratamiento adecuado para
lo cual se requiere de métodos estadísticos básicos”.
Objetivos del Curso Experimental
En las sesiones experimentales se pretende que el estudiante adquiera las siguientes habilidades y
destrezas:
• Preparar soluciones de uso común empleando diferentes unidades de concentración.
• Conocer los métodos de separación de cromatografía y extracción líquido-líquido, que permitan al
estudiante comprender el tratamiento adecuado de una muestra para poder cuantificar
posteriormente cada uno de los analitos
• Conocer y manejar los instrumentos de uso más frecuente en las sesiones experimentales:
potenciómetro, espectrofotómetro, cromatógrafo, polarografo, etc.
• Aplicar métodos estadísticos básicos que permitan el adecuado tratamiento a los resultados
obtenidos.
4
SECCIÓN DE QUÍMICA ANALÍTICA
CALENDARIO DE ACTIVIDADES PRESENCIALES DE

LABORATORIO DE QUÍMICA ANALÍTICA IV (Q)
Semestre:
El curso está programado de la siguiente forma:
ACTIVIDADES SEMANA FECHA
Presentación, manejo de equipo básico (balanza, 1

potenciómetro, etc.)
Práctica 1. Espectrofotometría visible. Determinación de 2

azul de timol
Práctica 2. Espectrofotometría visible. 3
Práctica 3. Absorción atómica: Determinación de Bi. 4

Asignación de proyecto
Práctica 4. Electroquímica 5
1ª Revisión del proyecto 6
Examen 1 7
Práctica 5. Extracción de ditizona. 8
Práctica 6. Extracción de Cu(II) y Mn(II) usando oxina como 9

agente quelante.
Práctica 7. Cromatografía de Gases (estándar interno) 10
Práctica 8 . Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución 11
2ª Revisión del proyecto, tutoriales de cromatografía 12
Examen 2 13
1ª sesión de experimentación del proyecto 14
2ª sesión de experimentación del proyecto 15
Entrega de Calificaciones. Aplicación del cuestionario 16

(Seguimiento de Calidad)
5
El curso comprende prácticas que ayudarán al estudiante en la elaboración de un proyecto al final
del laboratorio. Cada una de las prácticas incluye la entrega de un cuestionario previo y la elaboración
de un reporte.
El proyecto es propuesto por el asesor al inicio del curso, la revisión de los avances se hace durante
el semestre en las fechas establecidas, incluye la entrega del siguiente material:
a) Una revisión bibliográfica

b) La entrega de un diseño experimental (Pre-Proyecto)
c) Elaboración de un reporte
d) Exposición Oral
Las evaluaciones del curso se realizan por cada bloque de acuerdo con los siguientes porcentajes:
EVALUACION, CLASES PRESENCIALES PORCENTAJE
Cuestionarios previos 5
Trabajo de laboratorio 5
Reportes 20
Exámenes 45
Proyecto 25
Las calificaciones resultantes por bloque se promedian para dar la calificación final de laboratorio,
debiéndose tener aprobado por lo menos uno de los exámenes escritos.
PROYECTO
DESCRIPCIÓN
En la semana 4, el profesor asignará un tema de proyecto a cada equipo de estudiantes. El equipo
de trabajo deberá responder con un protocolo el cual tendrá dos revisiones de los avances que se
realizan durante el semestre en las fechas establecidas e incluye la entrega del siguiente material:
a) La entrega de un diseño experimental basado en una revisión bibliográfica

(PROTOCOLO)
b) Elaboración de un REPORTE Ó INFORME DE TRABAJO
c) Exposición Oral
El PROTOCOLO es un documento escrito que entregarán, en él, se deben incluir los siguientes
puntos:
1. Planteamiento del problema. Es el título del proyecto que hace referencia al tema asignado por
el profesor.
2. Investigación bibliográfica. El equipo de estudiantes podrá consultar cualquier fuente de

información confiable para dar resolución al problema solicitado. No se aceptará información
obtenida de sitios de poca seriedad de internet, sólo se permite la búsqueda de información de
artículos de revistas de alto impacto.
En la introducción, fundamentos de la determinación, entre otros, se integrarán la información o

datos relevantes que justifican la propuesta experimental.
3. Propuesta experimental. Esto corresponde a la interpretación que los estudiantes dan a toda la
información recopilada, la cual presentará en forma desglosada como a continuación se expresa:
6
a) Reactivos. Es necesario verificar que los reactivos que se propongan estén
disponibles en el laboratorio, o bien en el almacén de reactivos de la Sección de
Química Analítica. De no ser así, discutir con los profesores la posibilidad de sustituirlo
por otro equivalente.
b) Preparación de soluciones. Considerar con extremo cuidado las cantidades que se
utilizarán durante el desarrollo experimental para evitar el desperdicio o la insuficiencia
de volumen de las disoluciones que se requerirán. Deben incluirse, el volumen por
preparar, nombre de la sustancia y concentración.
c) Procedimiento experimental. Basado en la información encontrada en la literatura,
o bien, propuestas personales, se realizará la descripción detallada del experimento.
Mencionar en detalle: la capacidad del material de vidrio por utilizar, especificando si
debe ser volumétrico o graduado, entre otros.
d) Diagrama de flujo. El diagrama de flujo deberá incluir la asignación de actividades
para cada una de las personas que integran el equipo de trabajo, así como una
estimación del tiempo que tomará cada actividad. No olvidar que existen actividades
que se pueden realizar en forma paralela, esto permite optimizar el tiempo.
e) Tablas o gráficos para la recolección de resultados. Con la finalidad de que los
resultados puedan ser transferidos durante el transcurso del desarrollo experimental,
se propondrán tablas para ser completadas con la información experimental, y en caso
de que amerite, incluir el gráfico en que se pueda representar los datos tabulados.
f) Resultados esperados o respuesta esperada. En este sentido, deberá manifestarse
la tendencia que se espera gráficamente, si esto es posible, o un resultado analítico si
la expectativa es un valor único.
4. Referencias
Para el INFORME DE TRABAJO del proyecto, además de lo presentado anteriormente, se incluirán:
5. Resultados y discusión. Deben ir presentándose de manera simultánea los resultados y la

discusión, recuérdese que en todo libro o artículo se discuten los resultados a la par en que éstos
se presentan.
6. Conclusiones. Se caracterizan por ser concretas y están en relación directa con los objetivos
del proyecto.
7. Referencias (adicionales al protocolo). En este punto, se anexarán las consultas realizadas

por el hecho de justificar los resultados experimentales o explicar los inconvenientes presentados
durante el desarrollo empírico del proyecto.
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DIVISIÓN DE CIENCIAS QUÍMICAS-BIOLÓGICAS
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUÍMICAS
REGLAMENTO GENERAL DE SEGURIDAD E HIGIENE PARA LOS

LABORATORIOS DE LA SECCIÓN DE QUÍMICA ANALÍTICA
OBJETO DEL REGLAMENTO

Dar a conocer las reglas de seguridad e higiene que deben cumplirse al ingresar a los Laboratorios de Química
Analítica.
ART. 1.- Al ingresar Alumnos, Profesores, personal de la Sección y visitas deben portar bata blanca, se
realice actividad experimental, examen o cualquier otra actividad dentro del laboratorio, (excepto personal
de limpieza o mantenimiento quienes usan su uniforme).
Durante la actividad experimental debe usarse lentes de seguridad y zapato cerrado en el laboratorio.
ART. 2.- Se deberán conservar limpias las instalaciones (en especial las campanas de extracción, canaletas
y tarjas de las mesas de laboratorio), el material y el equipo de trabajo (incluyendo las balanzas analíticas)
al inicio y al final de cada sesión experimental.
ART. 3.- Se deberá guardar orden y disciplina dentro del laboratorio, durante la sesión experimental deberán
colocar las mochilas en los anaqueles que están indicados, no jugar, no correr.
ART. 4.- Queda estrictamente prohibido fumar, consumir alimentos y bebidas dentro del laboratorio y en el
inter del mismo, ya que muchas de las sustancias químicas que se emplean son corrosivas y/o tóxicas.
ART. 5.- Es importante que antes de trabajar, el estudiante conozca las características de las sustancias
químicas que va a utilizar para que pueda manipularlas adecuadamente (se deberá apoyar en la consulta
de las hojas de seguridad).
ART. 6.- Para la extracción de reactivos líquidos, se deberán emplear perillas de hule y nunca succionar con
la boca.
ART. 7.- Los reactivos químicos no deberán ser manipulados directamente, se deberán usar implementos
como pipetas, espátulas, cucharas, etc.
ART. 8.- Después de manipular sustancias químicas es necesario lavarse las manos con agua y jabón.
ART. 9.- Si se utilizan parrillas o cualquier otro equipo, se deberá estar atento en su manejo para evitar un
accidente.
ART. 10.- En caso de ingestión, derrame o inhalación de algún reactivo por parte de algún estudiante, deberá
ser notificado al asesor del grupo, el cual tomará las acciones pertinentes, previa consulta de las hojas de
seguridad.
ART. 11.- Al término de la sesión experimental, el asesor de grupo, deberá regresar los reactivos al inter-
laboratorio y las disoluciones empleadas a su lugar de resguardo correctamente etiquetadas con la etiqueta
del Sistema de Gestión de Calidad.
8
ART. 12.- Todas las personas que elaboren disoluciones y/o generen residuos deben etiquetar
correctamente los frascos que se utilicen para este propósito utilizando la etiqueta del Sistema de Gestión
de Calidad (solicitar al laboratorista) y colocarse en los lugares asignados.
ART. 13.- Los residuos de cada experimento deberán tratarse y eliminarse adecuadamente por los alumnos,
previa consulta del diagrama ecológico incluido en el manual de prácticas y con el apoyo del asesor. Los
ácidos y bases deben ser tratados sin demora.
ART. 14.- Cuando el residuo no pueda ser eliminado, el alumno deberá resguardarlo, en un contenedor,
debidamente etiquetado y cerrado, y colocarlo en el anaquel destinado para ello.
ART. 15.- Antes de iniciar las actividades experimentales se le solicitará al laboratorista el material y equipo
necesarios, para ello, una persona responsable del equipo dejará su credencial (únicamente de la UNAM)
en depósito y firmará un vale por el material y equipo recibidos. En caso de que existiera un defecto en el
material o equipo recibido, éste deberá ser anotado en el vale.
ART. 16.- Es responsabilidad del alumno revisar el estado en que recibe el material, ya que al término de la
sesión experimental lo debe regresar en las mismas condiciones en las que lo recibió y perfectamente limpio.
ART. 17.- En caso de extravío o daño del material o equipo de laboratorio, se resguardará el vale de solicitud
de material y la credencial del estudiante responsable del daño o extravío hasta su reposición con iguales
características.
ART. 18.- Los alumnos que adeuden material de laboratorio, deberán reponerlo a la mayor brevedad posible
o a más tardar el último día de realización de prácticas, de lo contrario los deudores serán reportados al
Departamento de Servicios Escolares.
ART. 19.- El número máximo de alumnos que podrán permanecer en el cuarto de balanzas (L-101-102) será
el mismo que el número de balanzas disponibles.
ART. 20.- Cuando sea asignada, una gaveta a los alumnos y por razones de olvido o pérdida de la llave,
queda prohibido forzarla. En tal situación los alumnos deberán solicitar su apertura, por escrito, al
responsable del laboratorio o Jefe de Sección, previa autorización del profesor del grupo. Queda prohibido
guardar residuos en las gavetas.
ART. 21.- La gaveta podrá usarse hasta la semana 15 del semestre por lo que, el grupo de estudiantes
deberán desocuparla a más tardar en la semana 16.
ART. 22.- No se permitirá el uso de balanzas y equipos a personas ajenas al laboratorio o fuera del horario
de su sesión experimental. Si una persona ajena al laboratorio solicita reactivos, equipo o materiales debe
acudir con el Jefe de Sección con un oficio de solicitud.
ART. 23.- Queda prohibida la entrada al Inter del laboratorio y al Laboratorio de la Sección a toda persona
ajena (incluyendo niños).
ART. 24.- Usar correctamente los equipos, consultando las guías de uso y registrando en las bitácoras, así
como dejarlos limpios al terminar de usarlos.
ART. 25.- Si un equipo está descompuesto, se debe reportar en el formato FITE-CQ-DEX-03-02 que se
encuentra al lado del Inter especificando lo que se observa del problema y se debe entregar al laboratorista.
9
ART. 26.- Si se tiene alguna queja al incumplimiento de la seguridad en los laboratorios, manifestarla en el
buzón de quejas y sugerencias.
VoBo. del Comité de Calidad del Departamento de Ciencias Químicas
26 de junio de 2018
10
TABLA DE CONTENIDO
Clases Presenciales Pág.

I. Introducción
II. Objetivos
III. Calendario de actividades
IV. Evaluación
V. Reglamento
VI. PRÁCTICAS
Práctica 1. Espectrofotometría visible. Determinación de azul de Timol
Práctica 2. Espectrofotometría visible.

Práctica 3. Absorción Atómica: Determinación de Bi mediante una curva de
calibración y una curva de adiciones patrón.
Práctica 4. Electroquímica
Práctica 5. Reparto de Ditizona entre cloroformo y agua en función de pH.
Práctica 6. Extracción de Cu(II) y Mn(II) utilizando oxina como agente

quelante.
Práctica 7. Cromatografía de gases: Separación de alcoholes y análisis de

licores por cromatografía de gases capilar.
Práctica 8. Cromatografía de líquidos de alta resolución: Determinación de

cafeína en diversas muestras.
Anexo. Fichas de Seguridad
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PRÁCTICA 1. DETERMINACIÓN DE AZUL DE TIMOL POR ESPECTROFOTOMETRÍA UV-
VISIBLE
La espectrofotometría es un conjunto de procedimientos que utilizan la luz para determinar las
concentraciones de especies químicas, cuyo principio es el siguiente: un haz luminoso de longitud de
onda determinada atraviesa la solución objeto de análisis y de la proporción de la intensidad luminosa
absorbida por la solución se deduce la concentración de la Especie absorbente, esta relación se
expresa mediante la Ecuación de Lambert-Beer:
A=eb[Especie]
Donde A es la Absorbancia que es adimensional, e es el coeficiente de Absortividad Molar de la
especie absorbente en M-1cm-1, b es la longitud o ancho de celda en cm y [Especie] esta expresada
en M.
La ley de Beer afirma que la absorbancia es proporcional a la concentración de la especie absorbente.
Sin embargo, no se cumple rigurosamente mas que en condiciones adecuadas como:
1. La luz utilizada debe ser suficientemente monocromática.
2. La concentración de la especie absorbente debe ser diluida (≤0.01M)
3. La ley no se cumple en el caso de soluciones fluorescentes o de suspensiones
4. Equilibrios Químicos-Puede haber variaciones aparentes muy importantes cuando la dilución
desplace sensiblemente los equilibrios químicos.
Las partes de un espectrofotómetro son:
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CONOCIMIENTOS PREVIOS  
1. ¿En qué se fundamenta la espectrofotometría ultravioleta-visible?

 
2. ¿Qué es un espectro de absorción y que utilidad tiene?  
3. Menciones las partes principales de un espectrofotómetro de absorción

ultravioleta-  visible  
4. Investigue las características físico-químicas más importantes del azul de timol.  
5. ¿Qué es el coeficiente de absortividad molar ( ε ) y qué unidades tiene?  
1.- OBJETIVOS
Determinar la concentración de Azul de Timol en una solución problema mediante una curva de
Calibración de estándar externo por espectrofotometría visible.
PARTICULARES
• Analizar la importancia del medio químico en el análisis para la determinación de Azul de
Timol.
• Determinar la longitud de onda óptima para realizar la cuantificación de una disolución
problema de Azul de Timol en una curva de calibración.
2.-PROCEDIMIENTO
1.-Prepare por lo menos cinco sistemas de azul de Timol en el intervalo de concentraciones de 5.0x
10-6M a 2.5 x 10-5M en el medio químico indicado por el profesor.
2.-Determine la longitud de onda óptima con el sistema más concentrado.
3.-Realice dos curvas de calibración a dos longitudes de onda; la óptima y otra.
4.-Interpole la solución problema en cada curva de calibración.
5.- Calcule la concentración de la solución problema en la muestra inicial.
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3. INFORME DE TRABAJO
PUNTOS MÍNIMOS QUE DEBE CONTENER EL REPORTE
a) Gráficos de:
Ø Espectros de absorción del azul de Timol en medio ácido y básico indicando las longitudes de
onda a las que realizó la determinación de las curvas de calibración.
Ø Curvas de Calibración a las dos longitudes de onda elegidas con análisis de regresión.
b) Cálculos para la preparación de la solución Stock así como la de los sistemas.
c) Cálculo de la concentración Molar y en mg/mL del sistema problema y de la Solución
problema.
d) Determinación del Coef. de absortividad Molar (e) a las dos longitudes de onda
diferentes indicando si hay o no diferencia y a que se debe.
e) Investigue los valores de pKa´s del Azul de Timol y con ayuda de los espectros de absorción
justifique el uso del medio químico adecuado para el análisis de Azul de Timol.
4. REFERENCIAS
1. Análisis Instrumental. Douglas A. Skoog y James J. Leary, 4° edición. Mc Graw Hill Interamericana
de España. 1994.
2. Análisis Químico cuantitativo. Daniel C. Harris. Editorial Reverté S. A. 2001, 2a. edición.
3. Química Analítica Contemporánea. Judith F. Rubinson, Kenneth A. Rubinson. Prentice- Hall.
Hispanoamericana, S. A. 1a. Edición, 2000.
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Diagrama ecológico.
Determinación de azul de
timol por espectrofotometría
visible
Azul de Timol en Azul de Timol en

NaOH 0.1M HCl 0.1M
R1* R2*
Mezclar
R1*y R2* de ser necesario neutralizar con ácido sulfúrico al 10% ó NaOH hasta pH entre 5.5 y 10. Desechar en la tarja con agua en exceso.
15
PRÁCTICA 2. DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE HIERRO (II) EN TABLETAS DE
HEMOBION CON OFEN MEDIANTE UNA CALIBRACIÓN DE ESTÁNDAR EXTERNO Y CURVA
DE ADICIÓN PATRÓN.
OBJETIVOS
• Cuantificar espectrofotométricamente Hierro(II) presente en una tableta de Hemobión
utilizando el equilibrio de complejación con Ortofenantrolina para formar una especie que
absorba mediante curva de calibración de patrón externo y curva de adiciones patrón.
• Establecer la ecuación química de la reacción involucrada entre Hierro y Ortofenantrolina.
• Determinar el coeficiente de absortividad molar de la especie que absorbe.
CUESTIONARIO PREVIO
1. ¿Cuál es la reacción química que ocurre entre hierro (II) y Ortofenantrolina?
2. ¿En qué se diferencia un método de cuantificación directo de uno indirecto?
3. ¿Cuál es la especie responsable de la respuesta analítica, y cómo se determina esto?
4. Plantee mediante una tabla de las condiciones iniciales y al equilibrio para establecer la
ecuación matemática que relaciona la A con la concentración de la especie que absorbe.
5. Mencione las ventajas y desventajas de la curva de calibración de estándar externo y
curva de adición patrón.
PARTE EXPERIMENTAL
MATERIAL
1 piseta con agua destilada
3 vasos de precipitado de 50 mL
1 espátula
1 matraz volumétrico de 1L (Solo un equipo)
1 matraz volumétrico de 100 mL
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1 mortero con pistilo
1 parrilla con agitación
5 matraces volumétricos de 10 mL
pipetas volumétricas de 0.5, 1, 2 3, 4 y 5 mL
3 pipetas graduadas de 1 mL
1 gradilla
7 tubos de ensaye
1 espectrofotómetro con celdas de vidrio
Preparación de soluciones
Solución Stock de Fe(II): Pesar aproximadamente 50 mg de sulfato ferroso amoniacal, agregar

aproximadamente 5 mL de agua, 5 gotas de ácido sulfúrico concentrado y aforar con agua destilada
a 25 mL. De la solución anterior medir 2 mL y aforar a 50 mL.
Clorhidrato de hidroxilamina 5 %: Pesar aprox. 1.25 g de reactivo y aforar a 25 mL con agua.
O-fenantrolina 0.4%: Pesar aproximadamente 100 mg de orto-fenantrolina, disolver en 20 mL de agua
y adicionar 10 gotas de ácido sulfúrico concentrado antes de aforar, para facilitar la solubilidad y
aforar a 25 mL con agua destilada.
Acetato de sodio 0.2 M: Realizar los cálculos necesarios para preparar por equipo 25 mL.
Solución problema: Se requiere de una muestra comercial que contenga sulfato ferroso. Realizar el
tratamiento adecuado y las diluciones necesarias, de tal manera que se tengan 25 mL de solución
problema de concentración 35 ppm de Fe(II) aproximadamente.
Preparación de la curva de calibración.

De acuerdo con las tablas 1 y 2, preparar los sistemas, adicionando las soluciones en el orden
establecido.
Tabla 1. Curva de calibración de estándar externo.

Sistema BCO 1 2 3 4 5 Prob
Sol Stock Fe(II) (mL) 0 1 2 3 4 5 0
Sol Prob Fe(II) (mL) *** *** *** *** *** *** X
Hidroxilamina (mL) 1 1 1 1 1 1 1
Acetato de sodio (mL) 1 1 1 1 1 1 1
o-fenantrolina (mL) 1 1 1 1 1 1 1
Aforo agua destilada (mL) 10 10 10 10 10 10 10
17
Para la curva de adición patrón, realizar previamente una dilución de 25 mL de la solución stock de
sulfato ferroso amoniacal en 50 mL y considerar la siguiente tabla para la preparación de los
sistemas.
Tabla 2. Curva de adición patrón.

Sistema 1 2 3 4 5
Fe(II) Stock (mL) 0 1 2 3 4
Fe(II) Prob (mL) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Hidroxilamina (mL) 1 1 1 1 1
Acetato de sodio (mL) 1 1 1 1 1
o-fenantrolina (mL) 1 1 1 1 1
Aforo agua destilada (mL) 10 10 10 10 10
Una vez preparados los sistemas de las curvas, se recomienda esperar al menos 20 min, para
favorecer el desarrollo máximo del color característico del complejo (rojo-naranja).
Obtención del espectro de absorción.

Una vez transcurrido el tiempo, seleccionar el sistema 5 de la curva de calibración (Tabla 1) y realizar
el espectro de absorción de 600 a 400 nm calibrando con el blanco en cada cambio de longitud de
onda (encender el espectrofotómetro 5 min antes de utilizarlo). Seleccionar la longitud de onda de
máxima absorción.
Tabla 3. Espectro de absorción del complejo hierro(II)-o-fenantrolina

λ (nm) 600 590 580 570 560 550 540 530 520 510 500
A
λ (nm) 490 480 470 460 450 440 430 420 410 400
A
18
0.6
0.5
0.4
A
0.3
0.2
0.1
0
400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600
Longitud de onda (nm)
Figura 1. Espectro de absorción del complejo Fe(II)-o-fenantrolina
Medición de la absorbancia para cada sistema de las curvas.

Medir a la longitud de onda seleccionada cada uno de los sistemas de ambas curvas empezando del
sistema más diluido al más concentrado, enjuagando la celda en cada lectura con el sistema
siguiente. Anotar los resultados en las tablas 4 y 5 y realizar el tratamiento de datos adecuado.
Tabla 4. Resultados obtenidos para la curva de calibración.

Sistema [Fe] (ppm) [Fe](mol/L) A Ecuación de la recta [Fe] prob
1 A=f(Fe)
2 ppm ppm
3
4 mol/L mol/L
5
19
0.6
0.5
0.4
A
0.3
0.2
0.1
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8 2
[Fe(II)] std (ppm)
Figura 2. Curva de calibración para Fe(II)-o-fenantrolina.
Tabla 5. Resultados obtenidos para la curva de adición patrón.

Sistema [Fe] (ppm) Fe (mol/L) A A corr Ecuación de la recta [Fe] prob
1 Acorr=f(Fe)
2 ppm ppm
3
4 mol/L mol/L
5
0.6
0.5
0.4
A y Acorr
0.3
0.2
0.1
0
0 0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8 2
[Fe(II)] std (ppm)
Figura 3. Curva de adición patrón para Fe(II)-o-fenantrolina.
20
El Informe de trabajo debe de contener lo siguiente, empleando un formato de reporte.
1. El procedimiento experimental de cada actividad realizada durante la sesión experimental.
2. Las tablas de resultados.
3. Los gráficos de: (a) espectro de absorción A=f(λ) y especificar la longitud de onda
seleccionada, (b) curvas de calibración y adición patrón A=f(concentración de Fe(II) std en
ppm).
4. Ecuación generalizada y representativa de la reacción involucrada a las condiciones de
trabajo y valor de Keq y Keq condicional.
5. Análisis de la linealidad de las curvas por el método de mínimos cuadrados.
6. Establecer las ecuaciones que relacionan cada una de las variables con su gráfico
correspondiente, especificar el valor de la pendiente y la ordenada al origen indicando sus
unidades.
7. Los cálculos realizados para determinar la concentración de Fe(II) std en cada sistema de la
curva, así como los cálculos correspondientes para la cuantificación en la muestra problema.
8. Determinar la concentración de Fe(II) por ambas curvas y compararlas con la reportada en el
marbete de la muestra.
9. Conclusiones y referencias.
MANEJO DE RESIDUOS
• Medir el pH de la solución sobrante de Fe(II)std y si éste se encuentra entre 5 y 8 desechar a
la tarja con abundante agua.
• La solución sobrante de Fe(II) problema así como de acetato de sodio pueden verterse a la
tarja.
• Todos los sistemas de la curva así como las soluciones restantes de o-fenantrolina y
clorhidrato de hidroxilamina, deben almacenarse en un frasco de residuos perfectamente
etiquetado.
REFERENCIAS
1. Harris, D. C., “Análisis Químico Cuantitativo”, 3ª ed., Iberoamericana, México, 1992

2. Skoog/ West, “Química Analítica”, editorial Mc Graw Hill
3. Determinación colorimétrica del hierro [en línea] disponible en:
http://sgpwe.izt.uam.mx/files/users/uami/jpn/file/Quimica_Inorganica/1_Determinacion_Colori
metrica_del_Hierro.pdf
4. Determinación de hierro por el método 1-10-fenantrolina [en línea] disponible en:
http://es.calameo.com/read/000279659a3e6c7d28e06
5. Métodos Instrumentales de Análisis. Habart H. Willard y Lynne L. Merrit, Jr. Grupo Edit.
Iberoamericana. 1991, México D. F.
6. Análisis Instrumental. Douglas A. Skoog y James J. Leary, 4° edición. Mc Graw Hill
Interamericana de España. 1994.
7. Instrumentación Química, Howard A. Strobel. Editorial Limusa. México,1974.
Analytical Chemistry. Principles and Techniques. Larry G. Hargis. Prentice Hall. 1988.
8. Métodos Instrumentales de Análisis en Química analítica. Gary T. Bender, Ph. D.
editorial Acribia, S.A. España 1987
21
9. Chemistry Experiments for Instrumental Methods. Donald T. Sawyer, William R.
Heineman. John Wiley & Sons, Inc. 1984
10. Química Analítica. Gary D. Christian. Noriega Editores. Editorial Limusa. 1990, 2ª
Edición.
12. Química Analítica Contemporánea. Judith F. Rubinson, Kenneth A. Rubinson. Prentice-
Hall. Hispanoamericana, S. A. 1a. Edición, 2000.
13. Química Analítica 2° edición. Donald J. Pietrzyk. Nueva Editorial Interamericana S. A.
de C. V. México, D.F. 198
22
PRÁCTICA 3. ABSORCIÓN ATÓMICA: DETERMINACIÓN DE BISMUTO MEDIANTE CURVA DE
CALIBRACIÓN DE ESTÁNDAR EXTERNO Y CURVA DE ADICIÓN PATRÓN.
La mayoría de los compuestos a temperatura suficientemente alta, se descomponen en átomos en
fase de vapor. En espectroscopía atómica, las muestras se vaporizan y la concentración de átomos
se determina midiendo la absorción o emisión a longitudes de onda característica. Dada su gran
sensibilidad, su capacidad para distinguir un elemento de otro en muestras complejas, así como para
realizar análisis multielemental simultáneo, y la facilidad con que se puede analizar automáticamente
muchas muestras, la espectroscopía atómica es una técnica de gran importancia, especialmente en
instalaciones industriales.
1. OBJETIVOS
• Familiarizarse con los conceptos de Absorción, Emisión y Fluorescencia Atómica.
• Conocer los componentes y el manejo de un espectrofotómetro de Absorción Atómica.
• Cuantificar Bismuto en una muestra problema empleando una curva de calibración de patrón externo
y una curva de adiciones patrón.
2. CUESTIONARIO PREVIO
1. ¿En qué consisten los fenómenos de Absorción, Emisión y Fluorescencia a nivel atómico?
2. ¿Cuál es el efecto de la temperatura en la Absorción y Emisión atómica?
3. ¿Cómo son los espectros en absorción atómica y qué relación tienen con el ancho de una línea
espectral?
4. ¿Cómo se define la sensibilidad y el límite de detección en absorción atómica?
5. Describa los diferentes los tipos de interferencia que existen en absorción atómica.
23
6. Dibuje y describa brevemente los componentes básicos de un espectrofotómetro de absorción
atómica.
7. ¿Qué es y cómo funciona una lámpara de cátodo hueco?
8. ¿En qué consiste el método de Adiciones Patrón y cuál es su utilidad?, ¿en qué casos es
conveniente utilizar este método?
9. Realice los cálculos de las soluciones para la práctica y traer 5 tabletas de PEPTO-BISMOL por
equipo.
3. PARTE EXPERIMENTAL
PREPARACIÓN DE HNO3 0.01M
• Realice los cálculos necesarios para preparar 1 litro de disolución 0.01M de ácido nítrico aforado
con agua desionizada (disolución ácida).
PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN STOCK
• Preparar 100 mL de una solución estándar de 250 µg/mL de Bismuto elemental a partir del reactivo
analítico Bi(NO3)3·5H2O, utilizando para el aforo la disolución ácida.
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
• Se pesan 5 tabletas de Pepto-Bismol (Subsalicilato de Bismuto), calcule el peso promedio por
tableta, posteriormente se trituran las tabletas en un mortero. Pesar la cantidad de 170 mg de polvo
de tableta. Coloque el polvo en un vaso de precipitado, agregué aproximadamente 3 mL de HNO3 del
24
Reactivo analítico, 10 mL de la disolución ácida, calentar y agitar aproximadamente de 5 a 10 minutos.
Por último filtre hasta que la disolución se presente transparente y afore a 100 mL (utilizando para el
aforo la disolución ácida).
PREPARACIÓN DE CURVA DE CALIBRACIÓN DE ESTÁNDAR EXTERNO
• La Tabla 1 muestra los volúmenes necesarios de solución stock y de la muestra para la preparación
de la curva:
Tabla 1. Preparación de la Curva de Calibración de Estándar Externo.

SISTEMA BCO 1 2 3 4 5 Problema
VSTOCK 250 ppm (mL) 0 1 2 3 4 5 0
VMUESTRA (mL) 0 0 0 0 0 0 3
VAFORO (mL) 25 25 25 25 25 25 25
Recuerde que los volúmenes se miden con pipetas volumétricas. Todos los sistemas se aforan con la
disolución ácida.
• Determinar la absorbancia de cada sistema en las condiciones de funcionamiento óptimo previsto
en el manual del instrumento de Absorción atómica para el Bismuto, empleando flama como sistema
de atomización. Anotar los datos de absorbancia en la Tabla 3.
• Determinar la absorbancia del sistema problema.
PREPARACIÓN DE LA CURVA DE ADICIÓN PATRÓN
• A partir de la solución Stock preparar una solución estándar de 125 ppm de Bi elemental.
• La Tabla 2 muestra los volúmenes necesarios de solución estándar y de muestra para la preparación
de la curva de adiciones patrón.
25
Tabla 2. Preparación de la Curva de Adición Patrón.
SISTEMA BCO 0 1 2 3 4 5 6
VESTÁNDAR 125 ppm (mL) 0 0 1 2 3 4 5 6
VPROBLEMA (mL) 0 2 2 2 2 2 2 2
V AFORO (mL) 25 25 25 25 25 25 25 25
Recuerde que los volúmenes se miden con pipetas volumétricas. Todos los sistemas se aforan con la
disolución ácida.
• Determinar la absorbancia de cada sistema y aspirar agua desionizada entre cada sistema. Anotar
los datos de absorbancia en la Tabla 4.
Disposición de Residuos:
Los sistemas obtenidos de ambas Curvas se deben neutralizar con NaOH hasta valor de pH entre
5.5 y 10, verter en el desagüe con suficiente agua.
26
4. RESULTADOS
Tabla 3. Resultados de Curva por patrón Externo.
Sistemas [Bi] estándar (ppm) Absorbancia
Muestra
m=
b=
r=
Cada tableta de Pepto Bismol contiene ______mg de Subsalicilato de Bismuto
Tabla 4. Resultados de Curva de Adición Patrón.
Sistemas [Bi] estándar (ppm) Absorbancia
m=
b=
r=
Cada tableta de Pepto Bismol contiene ______mg de Subsalicilato de Bismuto
27
PUNTOS MÍNIMOS QUE DEBE CONTENER EL REPORTE
Curva de calibración por Patrón Externo.
1. Construir una curva de calibración de A= f([ Bi ]Std).
2. Determinar si la curva de calibración presenta un comportamiento lineal, si no lo es, explicar las
causas de la no-linealidad.
3. Determinar la concentración de Bismuto en la muestra y determinar la cantidad de principio activo
(Subsalicilato de Bismuto) por tableta.
4. Calcular la sensibilidad analítica de Bismuto, es decir la concentración que daría una A = 0.0044
o Transmitancia = 0.99 tomando como base la absorbancia la primer lectura de la Curva de
Calibración.
Curva de calibración por Adiciones Patrón.
5. Realizar el gráfico de A= f([ Bi ]Std).
6. Decir si es lineal la curva de adiciones patrón, si no lo es, explicar las causas de la
no-linealidad.
7. Determinar la concentración de Bismuto en la muestra y determinar la cantidad de principio activo
(Subsalicilato de Bismuto) por tableta.
8. Comparar ambos métodos de cuantificación. Discutir ampliamente sobre sus ventajas y
desventajas de cada método.
9. ¿Cuál es el % de pureza de Subsalicilato de Bismuto en la muestra?
10. ¿Cuál es el % de principio activo con respecto al marbete?
11. ¿Cuál de los dos resultados es importante para un análisis de Control de Calidad?
28
6. BIBLIOGRAFÍA
1. Métodos Instrumentales de Análisis. Habart H. Willard y Lynne L. Merrit, Jr. Grupo Edit.
Iberoamericana. 1991, México D. F.
2. Análisis Instrumental. Douglas A. Skoog y James J. Leary, 4° edición. Mc Graw Hill Interamericana
de España. 1994.
3. Instrumentación Química, Howard A. Strobel. Editorial Limusa. México,1974.
4. Analytical Chemistry. Principles and Techniques. Larry G. Hargis. Prentice Hall. 1988.
5. Métodos Instrumentales de Análisis en Química analítica. Gary T. Bender, Ph. D. editorial Acribia,
S.A. España 1987
6. Chemistry Experiments for Instrumental Methods. Donald T. Sawyer, William R. Heineman. John
Wiley & Sons, Inc. 1984
7. Química Analítica. Gary D. Christian. Noriega Editores. Editorial Limusa. 1990, 2ª Edición.
9. Química Analítica Contemporánea. Judith F. Rubinson, Kenneth A. Rubinson. Prentice- Hall.
Hispanoamericana, S. A. 1a. Edición, 2000.
10. Química Analítica 2° edición. Donald J. Pietrzyk. Nueva Editorial Interamericana S. A. De C. V.
México, D.F. 198
ANEXO.
Subsalicilato de Bismuto (C6H5BiO4) tiene un peso molecular de 362.11 g/mol
29
PRÁCTICA 4. ELECTROGRAVIMETRÍA: ELECTRODEPOSICIÓN DE UNA MEZCLA DE Cu(II) Y
Ni(II)
INTRODUCCIÓN.
El análisis electrogravimétrico o de electrodeposición se basa en depositar electrolíticamente
el analito en forma de sólido sobre la superficie del electrodo. El aumento de masa del electrodo nos
indica cuánto analito había presente.
En esta técnica electroanalítica los equilibrios se establecen de manera efectiva con una
agitación vigorosa de la solución, usando un agitador magnético o haciendo girar uno de los
electrodos, de tal forma que los gradientes de concentración se eliminan por completo o casi por
completo. Con ello, el potencial del electrodo está relacionado a la concentración del analito por medio
de la ecuación de Nernst.
Aparato para análisis electrogravimétrico. Electrodos de malla de platino.
Típicamente, el analito se deposita sobre un cátodo de malla de Pt, químicamente inerte, que se ha
limpiado cuidadosamente. Posteriormente se realizan ensayos para saber si la reacción ha sido
30
completa, como pueden ser: observar la desaparición del color de una disolución, de la que se ha
eliminado la especie que la coloreaba; comprobar si sigue habiendo deposición en una nueva
superficie del electrodo que antes no estaba sumergida en la disolución; o bien, sacar una pequeña
muestra de la disolución y hacer un análisis cualitativo para ver si aún queda analito.
El análisis electrogravimétrico sería sencillo si sólo interviniese un analito en una disolución,
sin embargo, en la práctica puede haber otras especies electroactivas que interfieran. El agua por
ejemplo es electroactiva, y puede descomponerse a un voltaje determinado, produciendo burbujas
de gases que interfieren en la deposición de sólidos. A causa de estas complicaciones, para realizar
un buen análisis es importante controlar el potencial del electrodo.
1.- OBJETIVOS
• Identificar las diferentes técnicas para llevar a cabo una electrodeposición, así como los principios
fundamentales en que se basan estas técnicas.
• Determinar el método electrogravimétrico que permita llevar a cabo la separación cuantitativa de
una mezcla de cationes, en disolución acuosa.
• Evaluar si la electrodeposición se realiza con rendimiento adecuado para fines cuantitativos.
2.- CUESTIONARIO PREVIO
1. ¿Qué es una reacción electroquímica?
2. Enunciar la primera Ley de Faraday.
3. ¿Cuál es la diferencia entre una determinación electrogravimétrica y coulombimetrica?
4. ¿Qué es un sistema rápido o reversible y lento o irreversible?
5. Defina los conceptos de electrolisis, macro y micro electrólisis.

31
6. Explicar qué es una electro deposición a potencial y a intensidad controlada; ¿Cuál es más
selectiva?. Explique ampliamente.
7. ¿Qué es un dominio de electroactividad y de qué depende?
8. ¿Qué es una sustancia electroactiva?
9. Las reacciones electroquímicas del agua, ¿son lentas o rápidas sobre electrodo de platino?
10. Expresar las reacciones electroquímicas de los muros de oxidación y reducción en medio ácido,
neutro, básico, en medio acuoso y con un electrodo de Platino. ¿Cómo afecta el pH la la posición del
muro en la curva i vs E en cada caso?
11. Mencione algunas aplicaciones de los procesos de electrodeposición.
12. Elabore Ios D.Z.P. pNH3 = f(pH) para los metales Ni(II) y Cu(II).
3.- PARTE EXPERIMENTAL
Electrodeposición a intensidad controlada
a) Electrodeposición de Cobre
1.- En un vaso de precipitados de 100 mL se colocan 50 mL de una mezcla de Cu(II) y Ni(Il) de
concentraciones conocidas, y se añade 1 mL de H2S04 1:1.
2.- Introducir dos electrodos de rejilla de platino (limpios y pesados) dentro del vaso y agregar agua
destilada hasta que el nivel de la solución se encuentre aproximadamente 3.0 cm por debajo de la
parte superior de las rejillas.
3.- Se enciende el agitador, y si es necesario se alinean los electrodos, de tal manera que en la
agitación no se toquen entre ellos. Se aplica intensidad a 0.5 amperes (A) durante todo el proceso (la
deposición de Cobre se observa por la aparición de un depósito rojizo).
32
4.- Después de 20 minutos, añadir agua destilada para elevar el nivel de la solución y observar si
continua él deposito de cobre en la superficie recién cubierta del electrodo, si es así se continua el
proceso por 10 minutos más, o hasta que se demuestre la desaparición del cobre en la solución.
5.- AI finalizar el proceso se sacaran los electrodos de la solución y se lavan sin interrumpir la fuerza
electromotriz. La solución resultante se conserva para efectuar el procedimiento de la siguiente
sección (b).
6.- Se interrumpe la fuerza electromotriz, se retira el cátodo, se lava con etanol, se seca en la estufa
durante unos minutos a 110 °C, se enfría y se pesa.
7.- Disolver el depósito introduciendo el electrodo en HN03 1:1. (En este proceso se desprenden
óxidos de nitrógeno, por lo que debe realizarse en la campana de extracción). Finalmente, el electrodo
se lava, se seca y se pesa.
b) Electrodeposición de Níquel
8.-La solución proveniente de la sección anterior se neutraliza con amoniaco concentrado (verificar
con papel indicador de pH) y se agregan 15 mL en exceso.
9.- Se le introducen los electrodos de rejilla de platino, se enciende el agitador, se aplica una
intensidad de corriente de 0.6 amperes y se sigue el mismo procedimiento que en el caso de cobre,
excepto que el proceso se detiene cuando la prueba de la dimetilglioxima* resulta negativa.
10.- Lavar el cátodo con etanol, secarlo y pesarlo. Disolver el depósito de Níquel con HNO3 1:1 y
nuevamente lavar, secar y pesar.
*Nota: Cuando realice la prueba de la Dimetilglioxima tenga cuidado de que el pH de la solución se
encuentre alcalino.
33
Electrodeposición a potencial controlado
a) Electrodeposición de Cobre
1. En un vaso de precipitados de 100 mL se colocan 50 mL de una mezcla de Cu(II) y Ni(Il) de
concentraciones conocidas, y se añade 1 mL de H2S04 1:1.
2. Introducir dos electrodos de rejilla de platino (limpios y pesados) dentro del vaso y agregar
agua destilada hasta que el nivel de la solución se encuentre aproximadamente 3.0 cm por debajo
de la parte superior de las rejillas.
3. Realizar el montaje Experimental de la Figura 1.
4. Se enciende el agitador, y si es necesario, se alinean los electrodos de tal manera que en la
agitación no se toquen entre ellos. Se enciende el agitador y se ajusta el potencial del cátodo a -300
mV (ECS). No permita que el potencial impuesto sea menor de -300mV (ECS)
5. Después de 10 minutos, añadir agua destilada para elevar el nivel de la solución y observar
si continúa el depósito de cobre en la superficie recién cubierta del electrodo. Si es así, se continua
el proceso por 20 minutos más, o hasta que se demuestre la desaparición del cobre en la solución.
6. AI finalizar el proceso, se sacan los electrodos de la solución y se lavan sin interrumpir la
fuerza electromotriz. La solución resultante se conserva para efectuar el procedimiento de la siguiente
sección (b).
7. Se interrumpe la fuerza electromotriz, se retira el cátodo, se lava con etanol, se seca en la
estufa durante unos minutos a 110 °C, se enfría y se pesa.
8. Disolver el depósito introduciendo el electrodo en HN03 1:1. (En este proceso se desprenden
óxidos de nitrógeno, por lo que debe realizarse en la campana de extracción). Finalmente, el electrodo
se lava, se seca y se pesa.
34
b) Electrodeposición de Níquel
9. La solución proveniente de la sección anterior se neutraliza con amoniaco concentrado
(verificar con papel indicador de pH) y se agregan 15 mL en exceso.
10. Se le introducen los electrodos de rejilla de platino, se enciende el agitador, se ajusta y se
realiza el electro ajustando el potencial a -1350 mV (ECS) aproximadamente y se sigue el mismo
procedimiento que en el caso de cobre, excepto que el proceso se detiene cuando la prueba de la
dimetilglioxima* resulta negativa.
11. Lavar el cátodo con etanol, secarlo y pesarlo. Disolver el depósito de Niquel con HNO3 1:1 y
nuevamente lavar, secar y pesar.
La disolución resultante para el lavado de los electrodos de HNO3 se debe neutralizar con NaOH
hasta valor de pH entre 5.5 y 10, verter en el desagüe con suficiente agua.
A las soluciones provenientes del estudio de electrodeposición a intensidad y potencial constante se
les mide el pH y si este se encuentra entre 5.5 y 10 se desecha directamente en la tarja con suficiente
agua.
4.- RESULTADOS
%Cu recuperado %Ni recuperado

Potencial controlado
Intensidad impuesta
35
5.- INFORME DE TRABAJO
PUNTOS MÍNIMOS QUE DEBE CONTENER
1. Establecer las reacciones electroquímicas que tienen lugar en cada uno de los electrodos durante
el análisis electrogravimetrico, considere las condiciones de trabajo.
2. Justificar por qué mediante el control de pH (adición de H2SO4 y amoniaco) es posible llevar a cabo
la electrodeposición de cada metal.
3. Explicar cada una de las condiciones experimentales seguidas en la técnica.
4. Explicar de qué manera influye la composición del electrolito en la cuantitatividad del
electrodeposito.
5. En el método a potencial controlado, justificar los valores de potenciales a los que se controla el
potencial del cátodo.
6. Calcular el porcentaje de metal electrodepositado.
7. Proponer un esquema sencillo y completo de los circuitos eléctricos empleados en las
electrodeposiciones efectuadas en la práctica.
8. Conclusiones.
36
Potenciómetro
-
Electroanalizador -
30300
mV
Cátodo Ánodo Electrodo

Referencia
Pt Pt
Electrolito
Mezcla
Cu(II) y Ni(II)
Figura 1. Montaje Experimental para el Estudiode Electrodeposición a Potencial constante
6.- BIBLIOGRAFIA
1. Sánchez Batanero, P. Química Electroanalítica: Fundamentos y Aplicaciones, Editorial Alhambra.
2. Chartlot, G. “Las Reacciones Electroquímicas”, Toray-Masson, Barcelona (España).
3. Charlot, G. "Curso de Química Analítíca General", Toray-Masson, Barcelona (España).
4. Charlot, G. "Química Analítica General", Toray-Masson, Barcelona (España), Tomos I al IV.
5. Erwing, G. W., "Métodos Instrumentales de Análisis Químicos", Mc Graw-Hill, México.
6. Harris, D.C., "Analísis Químico Cuantitativo", Iberoamericana, México, 1992.
7. Skoog, D.A., West D.M., "Análisis Instrumental”, Interamericana, México.
8. Vassos, B.H., y Ewing G.W., "Electroquímica Analítica", Limusa, México.
37
PRÁCTICA 5. REPARTO DE LA DITIZONA (HDz) ENTRE CLOROFORMO Y AGUA EN FUNCIÓN
DEL pH.
La extracción líquido-líquido constituye uno de los métodos más importantes de separación y
preconcentración analíticas. Los procesos de extracción son utilizados como auxiliares en
determinaciones cuantitativas y cualitativas. En los últimos años la extracción líquido-líquido se ha
convertido en uno de los métodos de separación más usados en los laboratorios analíticos, debido a
importantes ventajas tales como rapidez, eficiencia, sencillez y gran campo de aplicación. La técnica
puede llevarse a cabo a toda escala de trabajo; desde el microanálisis hasta procesos industriales.
Además se aplica tanto para componentes en alta concentración como para trazas de elementos. Se
emplea muy a menudo a escala de laboratorio e industrial con distintas finalidades como son:
a) Técnica de concentración de trazas.
b) Fines de separación de elementos interferentes.
c) Facilitar la determinación analítica, que a veces no es factible o se dificulta en medio acuoso.
d) Técnica de preparación y purificación de reactivos.
e) Técnica para la determinación de constantes que rigen sistemas químicos.
La extracción líquido-líquido es una técnica de separación de los procesos de reparto o distribución;
que se basan en la transferencia de una ó más sustancias entre dos fases inmiscibles puestas en
contacto íntimo entre sí, con la finalidad de incrementar la fracción molar de un componente de la
mezcla inicial con relación a los demás. Estos procesos son de tipo físico fundamentalmente,
basándose la separación en la diferencia de solubilidad de los solutos entre las dos fases y las fuerzas
puestas en juego en procesos de partición, los cuáles comprenden equilibrios de distribución a los
que se le aplican relaciones termodinámicas, tales como la constante de distribución o reparto, la
regla de las fases, las expresiones de Gibbs, Causius-Clapeyron, entre otras.
38
Desde el punto de vista operativo, la extracción líquido-líquido puede realizarse de tres maneras: a)
simple, b) sucesiva y c) varias etapas; en este último caso la técnica se denomina extracción a
contracorriente o reparto Craig.
Los factores esenciales de que se disponen para mejorar las separaciones por extracción son: la
solubilidad de los compuestos minerales en los reactivos orgánicos, el pH de la disolución acuosa, la
formación de complejos neutros, la variación de los disolventes, el cambio de los coeficientes de
actividad y algunos otros.
Existe una variedad de condiciones técnicas para llevar a cabo el proceso de extracción, siendo
necesario seleccionar las adecuadas para conseguir la separación completa del soluto. Algunas de
estas condiciones técnicas son: relación de volúmenes de fase, tiempo y forma de agitación,
separación de fases y temperatura.
Las dos características fundamentales de un método analítico son la selectividad y sensibilidad, sin
embargo no son suficientes para solucionar problemas reales. Las muestras contienen normalmente
especies de características semejantes que implican interferencias en la detección individual; la etapa
previa de separación es indispensable para eliminar las especies perturbadoras o bien aislar la
especie problema, por ello la aplicación de las técnicas de extracción son importantes.
1. OBJETIVOS
• Establecer espectrofotométricamente el reparto de la Ditizona (HDz) entre cloroformo y agua en
función del pH.
39
• Obtener la grafica de % RDz’ experimental en función del pH y comparar con la gráfica teórica.
1. Definir el reparto o distribución simple y explicar los factores que lo afectan.
2. ¿Cuáles son las características que deben de poseer los disolventes entre si para ser utilizados en
extracción líquido-líquido?
3. Mencionar tres pares de disolventes inmiscibles entre si y su densidad respectiva.
4. Definir el concepto de Rendimiento en extracción.
5. Describir las propiedades físicas y químicas de la Ditizona que sean de interés para la práctica.
Preparación de sistemas acuosos a diferentes pH´s
1. Se colocan en un vaso de precipitado aproximadamente 100 mL agua desionizada y se ajusta el
pH a 1 con la cantidad necesaria de HCl o NaOH y la ayuda de un pHmetro.
2. Preparar 6 sistemas adicionales, para los siguientes pH´s = 3, 5, 7, 9, 11, 13 y se procede como
se describió en el paso anterior.
PROCEDIMIENTO:
PARTE I (Preparación de los sistemas de extracción)
1. Colocar en un embudo de separación de 60 mL limpio y seco, 10 mL de agua desionizada con
pipeta volumétrica a la cual previamente el pH se ajustó a 1.0
40
2. Agregar 5 mL de Ditizona/CHCl3 2.5x10-5 M con una pipeta volumétrica (en ese mismo embudo)
3. Agitar por 3 minutos y anotar las observaciones: color y apariencia de las fases. (Tabla 2).
4. Separar las fases guardando la fase orgánica en matraces volumétricos de 10 mL (asegurándose
que estén perfectamente secos con acetona) y la fase acuosa en tubos de ensayo.
5. Repetir los pasos anteriores a los pH's faltantes (3, 5, 7, 9, 11, 13) ayudarse de la Tabla 1.
Parte II (Obtención de espectros y datos experimentales)
6. Obtener el espectro de absorción de la fase acuosa (al sistema con pH = 13) entre 300-700 nm,
utilizando el agua desionizada como blanco. (Determinar la lmáxima).
7. Obtener el espectro de absorción de la fase orgánica (al sistema con pH = 1 ) entre 300-700nm,
utilizando cloroformo como blanco. (Determinar la l máxima).
8. Medir la absorbancia de todas las fases acuosas en la longitud de onda, determinada en el paso
6. Anotar los valores obtenidos en la Tabla 2.
9. Medir la absorbancia de todas las fases orgánicas en la longitud de onda, determinada en el paso
7. Anotar los valores obtenidos en la Tabla 2.
10. Medir directamente la absorbancia de la solución de Ditizona en cloroformo (Amax)
11. Medir el pH final de la fase acuosa para todos los sistemas. Anotar los valores en la Tabla 2.
Tabla 1. Preparación de los sistemas.

Sistema pH exp Volumen de Dz Volumen de fase
-5
2.5X10 M (mL) acuosa (mL)
1 1 5 10
2 3 5 10
3 5 5 10
4 7 5 10
5 9 5 10
6 11 5 10
7 13 5 10
41
NOTAS
• Lavar los embudos de separación con suficiente agua y quitando la llave para asegurar que las
conexiones estén perfectamente limpias. Enjuagar enseguida con agua destilada y finalmente con
agua desionizada.
• Verificar que la coloración verde de la Ditizona en cloroformo no cambie en los embudos de
separación. Si esto sucede, desechar la fase orgánica y lavar nuevamente el embudo.
• Para preparar la solución de Ditizona y pesar la cantidad adecuada para una concentración 2.5x10-
5
M, hay que tomar en cuenta que cada equipo utilizará aproximadamente 35 mL de esta solución,
por lo que para un grupo de 4 equipos se requieren como mínimo 140 mL.
• El pH del agua desionizada se ajusta con soluciones de HCl y NaOH 1M.
• No utilizar celdas de plástico para la solución orgánica.
Colocar los desechos de fase orgánica en un contenedor perfectamente etiquetado que se ubique en
la campana de extracción y etiquetado como RESIDUOS DE CLOROFORMO. Así como los
desechos de fase acuosa en donde haya residuos de CLOROFORMO.
42
4. RESULTADOS
Tabla 2. Datos obtenidos del reparto de Ditizona en Agua y Cloroformo.
(Antes de agitar ) ( Después de agitar y separar fases )

OBSERVACIONES* OBSERVACIONES* Absorbancia
Sistema
Sistema
pHinicial Fase Fase pHfinal Fase Fase Fase Fase

acuosa Orgánica acuosa orgánica acuosa Orgánic
a
1
La ditizona en fase orgánica tiene una Amáx de : _____________
* Anotar las coloraciones de las fases al inicio y después de la extracción.
PUNTOS A CUBRIR DENTRO DEL REPORTE
1. Construir en una misma gráfica A = f (pHexperimental) para la Ditizona en ambas fases.
2. Justificar mediante los diagramas de Log DDz' = f(pH) y pDz´ = f(pH) el reparto observado
experimentalmente de la Ditizona. El cuál previamente se construyó en la sesión de laboratorio.
3. Explicar ampliamente porque cambia la concentración de la Ditizona en fase orgánica y acuosa.
4. Construir el grafico de %R experimental en función del pH; para ello utilice la expresión:
%R experimental = 100* (Aorg sistema / Aorg max)
compararlo con el diagrama teórico y concluir.
43
Datos: ____
Log DHDz = 5.7 HDz HDz
HDz pKa = 4.5
6.REFERENCIAS
1. Valcárcel Cases M. Y Gómez Hens A. Técnicas Analíticas de Separación. Reverté, Barcelona,
1988.
2. Valcárcel Cases M. Y Gómez Hens A. Teoría y Práctica de extracción líquido-líquido.
Reverté.Barcelona, 1988.
3. King C.J., Procesos de Separación. Ed. REPLA s.a., México D.F., 1988.
4. Ringbom A., Formación de complejos en Química Analítica, Alhambra, Madrid, 1979.
5. CRC Handbook of Organic Analytical Reagents, CRC Press, Inc., Boca Raton, Florida, 1990.
6. Paez Hernández M. E., Ramírez Silva M.T., Rojas Hernández A. Temas Selectos de Extracción
Líquido-Líquido para el Análisis Químico, UAM-Iztapalapa, México D.F.1997.
7. Trejo Córdova G. Rojas Hernández A. y Ramírez Silva M. T. Diagramas de Zonas de Predominio
Aplicados al Análisis Químico. UNAM-Iztapalapa. México, D. F. 1993.
8. Day Jr. R.A. y Underwood A. L. Química Analítica cuantitativa. 5ª Edición. Prentice-Hall , México,
D. F. 1989.
44
PRÁCTICA 6. EXTRACCIÓN DE Cu(II) Y Mn(II) USANDO OXINA COMO AGENTE
QUELANTE
Para que la extracción se lleve a cabo se necesita del contacto entre dos fases líquidas inmiscibles
entre sí con la finalidad de que ocurra el reparto de la especie a separar en el solvente de extracción.
Sin embargo muchas veces no es posible separar por extracción simple una especie química, por lo
que se utiliza un agente quelante para éste proceso. Un agente quelante, es una sustancia que forma
complejos con iones de metales pesados.
La importancia de extracción empleando agente quelantes radica en que al formarse los quelatos con
los iones metálicos, se facilita el reparto de los iones en forma de complejos hacia la fase orgánica.
Este método de separación tiene un campo de gran importancia dentro del área de Química Analítica,
pues proporciona la posibilidad de llevar a cabo separaciones extremadamente selectivas.
1. OBJETIVOS
• Analizar los factores que influyen en la separación de cationes metálicos con agentes
quelantes mediante extracción líquido-líquido.
• Establecer espectrofotométricamente el reparto de la oxina entre el agua y cloroformo en
función del pH.
• Establecer espectrofotométricamente la extracción de dos quelatos metálicos en función de
pH.
• Determinar cualitativamente el intervalo de pH adecuado para la separación de una mezcla
de Cu(II) y Mn(II), usando oxina como agente quelante.
45
1. ¿En qué consiste la extracción con un agente quelante? y su campo de aplicación.
2. ¿Qué factores influyen en este tipo de procesos de extracción?
3. Características físicas y químicas de la oxina.
4. Definir el concepto de selectividad en la separación de quelatos metálicos.
5. Realizar los cálculos necesarios para la preparación de todas las soluciones de la práctica
considerando el material de laboratorio existente.
REPARTO DE LA OXINA
Preparación de sistemas acuosos a diferentes pH´s
1. Se colocan en un vaso de precipitado aproximadamente 100 mL agua desionizada y se ajusta
el pH con la cantidad necesaria de HCl ó NaOH con la ayuda de un pHmétro.
2. Preparar los sistemas a los siguiente pH´s 1, 3, 5, 7, 9, 11 y 13.
PARTE I. REPARTO DE OXINA
pipeta volumétrica a la cual previamente el pH se ajustó a 1.0.
2. Agregar 5 mL de Oxina de conc. 0.01 M en cloroformo con una pipeta volumétrica (en ese mismo
embudo).
46
3. Agitar por 3 minutos y anotar las observaciones: color y apariencia de las fases (Tabla 4).
4. Separar las fases guardando la fase orgánica en matraces volumétricos de 10mL (asegurándose
5. A la fase acuosa medir el pH. Medir la absorbancia de la fase orgánica a l de 360 nm contra blanco
cloroformo y la absorbancia de la fase acuosa a l de 415 nm contra blanco de agua. Anotar los datos
en la Tabla 4.
6. Repetir los cinco pasos anteriores a los pH's faltantes (3, 5, 7, 9, 11 y 13) ayudarse de la Tabla 1
para los demás sistemas.
Tabla 1. Sistemas del reparto de Oxina/H2O y Cloroformo.

Sistema pH exp Volumen de Oxina en Volumen de fase
CHCl3 0.01M (mL) acuosa (mL)
1 1 5 10
2 3 5 10
3 5 5 10
4 7 5 10
5 9 5 10
6 11 5 10
7 13 5 10
47
PARTE II. EXTRACCIÓN DE Cu (II)
7. Colocar en un embudo de separación de 60 mL limpio y seco, 9 mL de agua desionizada con pipeta
volumétrica a la cual previamente se le ajusto el pH a 1.0. Adicionar 1 mL con pipeta volumétrica de
CuSO4 de conc. 4x10-4 M.
8. Agregar 5 mL de Oxina con pipeta volumétrica (en ese mismo embudo)
9. Agitar por 3 minutos y anotar las observaciones: color y apariencia de las fases.(Tabla 5)
10. Separar las fases guardando la fase orgánica en matraces volumétricos de 10mL (asegurándose
11. A la fase acuosa determinarle el pH y medir la absorbancia de la fase orgánica a longitud de onda
máxima del complejo Cu(Ox)2 (l = 400 nm), utilizando como blanco el sistema orgánico de oxina a
pH= 1. Anotar los datos en la Tabla 5. (Cuidando de utilizar el blanco respectivo para los demás
sistemas).
12. Repetir los cinco pasos anteriores a los pH's faltantes (3, 5, 7, 9, 11 y 13) ayudarse de la Tabla 2
para los otros sistemas.
Tabla 2. Sistemas del reparto de Cu(Ox)2/H2O y Cloroformo.

Sistema pH exp Volumen de Volumen de fase Volumen de CuSO4
Oxina 0.01M (mL) acuosa (mL) 4x10-4M (mL)
1 1 5 9 1
2 3 5 9 1
3 5 5 9 1
4 7 5 9 1
5 9 5 9 1
6 11 5 9 1
7 13 5 9 1
48
PARTE III. EXTRACCIÓN DE Mn(II)
pipeta volumétrica a la cual previamente se le ajusto el pH a 1.0. Adicionar 1 mL con pipeta
volumétrica de MnSO4 de concentración 4x10-4 M.
2. Agregar 5 mL de Oxina con pipeta volumétrica (en ese mismo embudo)
3. Agitar por 3 minutos y anotar las observaciones: color y apariencia de las fases.(Tabla 6)
4. Separar las fases guardando la fase orgánica en matraces volumétricos de 10 mL
(asegurándose que estén perfectamente secos con acetona) y la fase acuosa en tubos de ensayo.
5. A la fase acuosa determinarle el pH y medir la absorbancia de la fase orgánica a longitud de
onda máxima del complejo Mn(Ox)2 (l= 410 nm), utilizando como blanco el sistema orgánico de oxina
a pH= 1. Anotar los datos en la tabla 6. (Cuidando de utilizar el blanco respectivo para los demás
sistemas).
6. Repetir los cinco pasos anteriores a los pH's faltantes (3, 5, 7, 9, 11 y 13) ayudarse de la Tabla
3 para los otros sistemas.
Tabla 3. Sistemas del reparto de Mn(Ox)2/H2O y Cloroformo.

Sistema pH exp Volumen de Volumen de fase Volumen de MnSO4
Oxina 0.01M (mL) acuosa (mL) 4x10-4M (mL)
1 1 5 9 1
2 3 5 9 1
3 5 5 9 1
4 7 5 9 1
5 9 5 9 1
6 11 5 9 1
7 13 5 9 1
Notas
49
• De ser necesario obtener el espectro de absorción para los complejos con Oxina, Cu(Ox)2,
Mn(Ox)2 para las fases orgánicas a pH 13 y usando el blanco respectivo.
• Utilizar celdas de vidrio para medir las soluciones orgánicas.
Al final de la práctica coloque los desechos de la fase orgánica en un contenedor etiquetado DESECHO DE
CLOROFORMO, que está en la campana de extracción.
4. TABLAS DE RESULTADOS.
Tabla 4. Datos obtenidos del reparto de Oxina en Agua y Cloroformo.

Sistema
Sistema
pHinicial Fase Fase pHfinal Fase Fase Fase Fase

acuosa Orgánica acuosa orgánica acuosa orgánica
l=415nm l=360 nm
1
NOTA: * Anotar las coloraciones de las fases al inicio y después de la extracción.
50
Tabla 5. Datos obtenidos del reparto de Cu(Ox)2 en Agua y Cloroformo.
Sistema
Sistema
pHinicial Fase Fase pHfinal Fase Fase Fase orgánica

acuosa Orgánica acuosa Orgánica (l=400nm)
1
Tabla 6. Datos obtenidos del reparto de Mn(Ox)2 en Agua y Cloroformo.

Sistema
Sistema
pHinicial Fase Fase pHfinal Fase Fase Fase orgánica

acuosa orgánica acuosa Orgánica (l=410nm)
1
51
PUNTOS MÍNIMOS QUE DEBE CONTENER:
1) Colores de las fases (resultados de todo el grupo en las Tablas 4-6).
2) Trazar la gráfica A = f(pH) para la oxina y justificar mediante su diagrama de extracción el
comportamiento de la misma.
3) Trazar la gráfica A = f(pH) para los oxinatos metálicos en la misma hoja.
4) Calcular y trazar los diagramas teóricos %RM' = f(pH) para los oxinatos metálicos en la misma hoja.
5) Comparar los gráficos teóricos y experimentales de los puntos 3 y 4. Concluir sobre la separación
de una mezcla de ambos cationes. ¿Cuál es el intervalo de pH para la separación?
DATOS:
Log DHox = 2.6
H2Ox+ pKa = 5.0
HOx pKa = 9.7
Cu(OH)+ Log b1 = 6.0
Mn(OH)+ Log b1 = 3.4
Cu(Ox)n+2-n Log b1 = 12.1 Log b2 = 23.0
Mn(Ox)n+2-n Log b1 = 6.8 Log b2 = 12.6
______
Cu2+ + 2Ox - Cu(Ox)2 Log Kext = 26.48
______
Mn2+ + 2Ox- Mn(Ox)2 Log Kext = 15.42
52
6.- REFERENCIAS
1. Valcárcel Cases M. Y Gómez Hens A. Técnicas Analíticas de Separación. Reverté, Barcelona,
1988.
2. Valcárcel Cases M. Y Gómez Hens A. Teoría y Práctica de extracción líquido-líquido.
Reverté.Barcelona, 1988.
3. King C.J., Procesos de Separación. Ed. REPLA S.A., México D.F., 1988.
4. Ringbom A., Formación de complejos en Química Analítica, Alhambra, Madrid, 1979.
5. CRC Handbook of Organic Analytical Reagents, CRC Press, Inc., Boca Raton, Florida, 1990.
6. Paez Hernández M. E., Ramírez Silva M.T., Rojas Hernández A. Temas Selectos de Extracción
Líquido-Líquido para el análisis Químico, UAM-Iztapalapa, México D.F.1997.
7. Trejo Córdova G. Rojas Hernández A. y Ramírez Silva M. T. Diagramas de Zonas de Predominio
aplicados al análisis químico. UNAM-Iztapalapa. México, D. F. 1993.
8. Day Jr. R.A. y underwood A. L. Química analítica cuantitativa. 5ª Edición. Prentice-Hall , México,
D. F. 1989.
9. Química Analítica General Cuantitativa e Instrumental. Vol 1. Francisco Bermejo Martínez, MG.
Editorial. Paraninfo, S. A. Impreso en España. 1991
53
PRÁCTICA 7. CROMATOGRAFÍA DE GASES: SEPARACIÓN DE ALCOHOLES Y
ANÁLISIS DE LICORES POR CROMATOGRAFÍA DE GASES CAPILAR
La técnica cromatográfica en la cual, la fase móvil es un gas en movimiento y la fase estacionaria
que ya sea un sólido o un líquido adsorbido sobre un sólido, recibe el nombre de cromatografía en
fase gaseosa. Es un método de separación en multietapas, es decir, las separaciones se
fundamentan en interacciones repetidas (reparto) de un soluto entre un gas o vapor en movimiento y
una fase estacionaria.
Cuando ambas fases se han escogido en forma apropiada, los componentes de la muestra se
separan gradualmente en bandas en la fase móvil. Al final del proceso los componentes separados
emergen en orden creciente de interacción con la fase estacionaria. El componente menos retardado
emerge primero, el retenido mas fuertemente eluye al último. El reparto entre las fases aprovecha las
diferencias entre las propiedades físicas y/o químicas de los componentes de la muestra. Los
componentes adyacentes (picos gaussianos) se separan cuando el pico que sale después es
retardado lo suficiente para impedir la sobreposición con el pico que emergió antes. La representación
gráfica de los compuestos eluidos de la columna recibe el nombre de cromatograma y cada
componente da lugar a un cromatograma, el cual aporta tres unidades de información: posición, altura
y anchura de los picos; la posición da información cualitativa, la información cuantitativa se obtiene
del ancho y altura del pico. La columna de separación es el corazón del cromatógrafo. Proporciona
versatilidad en los tipos de análisis que pueden realizarse. Esta característica, debida a la amplia
gamma de selección de materiales para la fase móvil y estacionaria, permite separar moléculas que
difieren muy poco en sus propiedades físicas y químicas.
La cromatografía comprende un grupo de métodos que permiten separar, identificar y cuantificar
compuestos presentes en mezclas complejas que no podrían separarse de otra manera. Las
separaciones se basan en la diferencia de velocidad de migración de los componentes a través del
sistema. Tiene numerosas aplicaciones en los campos químicos, es ampliamente usado en la
investigación Bioquímica para la separación e identificación de compuestos químicos de origen
54
biológico. En la industria del Petróleo la técnica es empleada para analizar muestras complejas de
hidrocarburos.
Como un método de separación, la cromatografía tiene un gran número de ventajas sobre otras
técnicas más antiguas y tradicionales por ejemplo, la cristalización, extracción con solventes y
destilación. Es capaz de separar todos los componentes de una mezcla química compleja sin requerir
de una completa información previa sobre la identidad, número, o cantidad relativa de las sustancias
presentes.
Uno de los puntos a considerar en la cromatografía de gases es la resolución que pueda lograrse
entre los componentes en una columna dada. Los factores que le afectan son: las dimensiones de la
columna, la temperatura, velocidad del flujo del gas portador o acarreador, volumen de la muestra y
caída de presión en la columna.
De los factores mencionados, el que se estudiará en esta práctica es la temperatura del horno sobre
la separación e identificación de cinco alcoholes. Se analizará cómo puede modificarse la temperatura
para que ésta ocasione que dos solutos no resueltos bajo condiciones isotérmicas, puedan resolverse
satisfactoriamente y por tanto, determinarse en forma cuantitativa. Posteriormente, se aplicará el
método del estándar interno como método de análisis en la cuantificación de componentes en una
muestra.
1. OBJETIVOS
• Señalar y reconocer cada una de las partes de un cromatógrafo de gases.
• Estudiar los parámetros que afectan la elusión, la resolución y la eficiencia de los picos en la
cromatografía de gases.
• Separar, identificar y cuantificar etanol y metanol en licores comerciales por cromatografía de
gases.
55
1. ¿Cuál es el fundamento de la cromatografía de gases (gas-líquido y gas-sólido)? Explique
ampliamente.
2. ¿Qué tipo de fase móvil y estacionaria se emplean en cromatografía de gases?
3. ¿Qué sustancias pueden separarse por cromatografía de gases?
4. Mencione las ventajas y desventajas de la cromatografía de gases con respecto a otros métodos
cromatográficos.
5. ¿Qué es resolución y tiempo de retención?
6. ¿Cuáles son los factores que afectan a la resolución y cómo lo hacen?
7. Mencione los componentes básicos de un cromatógrafo de gases y explique brevemente en qué
consisten cada uno de estos.
8. Explique de forma breve el fundamento de cada uno de los tipos de detectores que existen para
cromatografía de gases.
9. ¿Qué es el factor de respuesta y cuál es su utilidad?
10. Diga en qué consiste el método de patrón interno y cuál es su utilidad en la cromatografía de
gases.
11. Establecer las diferencias existentes entre la cromatografía de líquidos de alta resolución y la
cromatografía de gases, así como las ventajas y desventajas de cada una.
56
A. CONDICIONES DEL EQUIPO Y DEL SOFTWARE
1. Abrir los gases del equipo (llave del tanque) y ajustar la presión a 40 psi para H2, 60 psi para Aire
y 80 psi para N2.
2. Abrir los gases de las válvulas de la parte frontal del equipo.
3. Encender la computadora y acceder al software.
B. ANÁLISIS CUALITATIVO DE DIVERSOS ALCOHOLES
Realice la inyección de 1 µL de STD de cada uno de los siguientes alcoholes Metanol, Etanol, n-
propanol, n-butanol y n-amílico, con el fin de identificar el orden de elusión de cada compuesto.
Condiciones de la corrida:
Flujo de Nitrógeno 2.8 ± 0.2 mL/min
Temperatura del Horno de la columna: isotérmico 100oC
Temperatura del inyector (front inyector type 1079): 200 oC, hold time 1
Split ratio: 20
Temperatura del Detector: 250oC, FID, rango 9
57
Tabla 1. Resultados obtenidos en el análisis cualitativo de alcoholes*
Analito tR (min) W 1/2 AREA N

MeOH
EtOH
n-propanol
n-butanol
n-amílico
C. INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA EN LA RESOLUCION
1. Prepare una mezcla de 100 µL de cada uno de los STD de alcoholes y realice la inyección de
1 µL de esta muestra a las mismas condiciones del apartado anterior (isotérmica a 100 oC).
2. Inyecte 1 µL de la misma mezcla anterior pero en condiciones isotérmicas a 200oC (recuerde
cambiar la temperatura en el método)
3. Inyecte 1 µL de la misma mezcla anterior pero realizando un gradiente de temperatura del
horno de 80 oC por 2 min. Con una rampa de 15oC/min, hasta 180 oC, hold 0.0. Para lo anterior llame
el método c:\AnaV\Alcohol
Tabla 2. Resultados obtenidos en el análisis cualitativo de la mezcla de alcoholes a varias
temperaturas
Analito tR (min) tR (min) tR (min) W 1/2 W 1/2 W 1/2

a 100oC a 200oC gradiente a 100oC a 200oC gradiente
MeOH
EtOH
n-propanol
n-butanol
n-amílico
58
D. ANÁLISIS DE METANOL Y ETANOL EN LICORES POR EL MÉTODO DE FACTOR DE
RESPUESTA
Para la obtener el factor de respuesta se utilizara n-propanol como estándar interno, por lo que se
prepararan los siguientes sistemas:
Tabla 3. Preparación de los sistemas para la cuantificación de MeOH y EtOH
por el método de factor de respuesta
Sistema MeOH EtOH n-Prop Problema Aforo/H2O

STD (µL) STD (µL) STD (µL) (mL) (mL)
STD´s 200 200 100 - 10.0
Prob. MeOH - - 100 9.90
Prob. EtOH - - 100 0.24 10.0
* deberá calcular las concentraciones de los estándares de los alcoholes con datos de pureza y densidad.
Inyectar cada uno de los sistemas bajo las condiciones de corrida del apartado C número 3 (gradiente
del horno).
Tabla 4. Resultados obtenidos de los cromatogramas de la determinación de MeOH y EtOH por el
método de factor de respuesta
Sistema AREA de AREA de AREA de Factor Conc. Del

MeOH EtOH n-Prop Respuesta Analito
F.R.
Prob. MeOH
Prob. EtOH
E. ANÁLISIS DE METANOL Y ETANOL EN LICORES POR EL MÉTODO DE CURVA DE
CALIBRACION (o estándar externo)
Prepara la siguiente tabla de los sistemas para las 5 diferentes concentraciones de la curva de
calibración y los sistemas problema:
59
Tabla 5. Preparación de los sistemas para la cuantificación de MeOH y EtOH por el método de
curva de calibración
Sistema MeOH STD EtOH STD n-Prop Problema Aforo/H2O

(µL) (µL) STD (µL) (mL) (mL)
1 40 40 100 - 10.0
2 80 80 100 - 10.0
3 120 120 100 - 10.0
4 160 160 100 - 10.0
5 200 200 100 - 10.0
Prob. MeOH - - 100 9.90 10.0
Prob. EtOH - - 100 0.24 10.0
Inyectar cada uno de los sistemas bajo las condiciones de corrida del apartado C número 3 (gradiente
del horno).
Tabla 6. Resultados obtenidos de los cromatogramas de la determinación de MeOH y EtOH por el
método de curva de calibración
Sistema Conc. MeOH AREA de Conc. EtOH AREA de

STD (mg/mL) MeOH STD (mg/mL) EtOH
1
2
3
4
5
AREA de Conc. MeOH AREA de Conc. EtOH
MeOH Prob (mg/mL) EtOH Prob (mg/mL)
Prob. MeOH - -
Prob. EtOH - -
Disposición de residuos:
La mezcla de alcoholes así como los sistemas para la cuantificación se resguardaran en un envase
perfectamente etiquetado.
60
PUNTOS MÍNIMOS QUE DEBE CONTENER
1. Identificar cada uno de los alcoholes en la mezcla, con la ayuda de los tiempos de retención de los
estándares.
2. Discutir como influye la temperatura en la resolución de los componentes de la muestra calculando
la N y la Rs para cada componente a las diferentes temperaturas (100, 200 oC y gradiente)
3. Explicar ampliamente si es más adecuado utilizar un programa de temperatura pare separar una
mezcla de alcoholes. Mencionar las mejores condiciones de separación de los alcoholes estudiados
4. Realice la cuantificación del contenido de MeOH y EtOH en el licor analizado y compárelo con el
contenido reportado en la botella. Discuta al respecto.
ANEXO 1. DATOS DE LOS REACTIVOS Y DE LA COLUMNA
Columna DB-WAX 304
30 m x 0.32 mm ID, film 0.25 µm, bonded fused silica open tubular polyethylene glycol column (PEG),
High polarity,
Lower temperature limit of 20°C is lowest of any bonded PEG phase; improves resolution of low boiling
point analytes, Temp. Limit: 250oC
Bonded and cross-linked
Gas acarreador: Nitrógeno de alta pureza AGA
Gases para el Detector de Ionización de Flama (FID): Hidrógeno-aire de alta pureza AGA
ETANOL, J. T. Baker, P.M. 46.0 g/mol, 99.85 % de Pureza, densidad 0.79 g/mL, P.ebullición: 78.3
o
C
METANOL, J. T. Baker, P.M. 32.04 g/mol, 99.9 % de Pureza, densidad 0.82 g/mL, P.Ebullición: 64.6
o
C
61
n-BUTANOL, Monterrey, P.M. 74.12 g/mol, 99.0 % de Pureza, densidad 1.04 g/mL, Punto de
ebullición: 117.6 oC
n-PROPANOL, J. T. Baker, P.M. 60.097 g/mol, 99.0 % de Pureza, densidad 0.80 g/mL, Punto de
ebullición: 97.2 oC
n-AMILICO, J. T. Baker, P.M. 88.15 g/mol, 98.0 % de Pureza, densidad 0.812-0.819 g/mL,
P.ebullición: 130.0 oC
62
PRÁCTICA 8. CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS DE ALTA RESOLUCIÓN (C.L.A.R.)
DETERMINACIÓN DE CAFEÍNA EN MUESTRAS DIVERSAS
El término “cromatografía de líquidos”, abarca una gran cantidad de procedimientos en el que la fase
móvil es un líquido y la fase estacionaria un sólido (como ejemplo se tiene a la cromatografía en capa
fina) u otro líquido inmiscible con la fase móvil (como la cromatografía de partición). No obstante, la
cromatografía de líquidos más usada en la actualidad, corresponde a la cromatografía líquida de alta
resolución (CLAR). Este término, se relaciona con la capacidad de esta técnica en permitir
separaciones muy selectivas y de alta calidad en un mínimo de tiempo o en un tiempo razonable.
Esto se consigue haciendo pasar una fase líquida móvil a alta presión, a través de un soporte
estacionario finamente dividido, de 3 a 10 m de diámetro. Teóricamente pueden obtenerse de 40
000 a 100 000 platos por metro. Dado que es de alta sensibilidad y selectividad, se le utiliza para
identificar y cuantificar analitos en mezclas complejas, así como en la purificación de productos.
Los analitos se disuelven en un disolvente o mezcla de disolventes. La muestra se inyecta en el
puerto de inyección en el cromatógrafo y pasa, con ayuda de una bomba, a alta presión por la
columna. La separación se hace por partición de los solutos (analitos) entre la fase móvil y la fase
estacionaria (material de empaque) de la columna de CLAR, la cual mide de diámetro interno 3 o 4
mm y de longitud desde 10 cm hasta 30 cm; con frecuencia se encuentra en un compartimiento de
temperatura controlada. El analito menos retenido, alcanzará el detector en menor tiempo que el resto
de los componentes. Diversos detectores son utilizados por acoplamiento al instrumento.
Los detectores de UV-Visible son los más frecuentes en uso por su sensibilidad, amplio margen de
respuesta lineal y capacidad de detectar amplio número de analitos. Sin embargo, para analitos
fluorescentes, el detector de excelencia es el de fluorescencia, resulta obvio que sólo se puede utilizar
limitadamente a éstos. Otros detectores muy sensibles, son los electroquímicos amperométricos, sólo
debe asegurarse que la fase móvil sea suficientemente conductora para permitir el paso de corriente
por el disolvente entre los electrodos, en esta modalidad se utilizan electrodo de trabajo, electrodo
auxiliar y uno de referencia. Otros detectores son los electroquímicos de conductividad, detectores
63
de infrarrojo y los diferenciales de índice de refracción.
En esta práctica se utilizará un detector de absorción UV-Vis para determinar cuantitativamente
cafeína en distintas muestras por el método de curva del estándar externo.
1. OBJETIVOS
• Establecer las características principales de la cromatografía de líquidos de alta resolución y su
utilidad como método analítico.
• Estudiar los parámetros que afectan la resolución de los picos de elución en la cromatografía de
líquidos.
• Conocer la cromatografía de líquidos de alta resolución de fase inversa o reversa.
• Determinar la concentración de cafeína en algunas bebidas por cromatografía de líquidos de alta
resolución en fase reversa.
1. ¿Qué es la cromatografía de líquidos de alta resolución (C.L.A.R.)?
2. Señalar las principales características que deben de cumplir tanto las sustancias a separar como
la fase móvil a utilizar.
3. Mencionar los diferentes tipos de cromatografía en C.L.A.R. y sus aplicaciones, incluyendo la
cromatografía de fase normal y de fase reversa.
4. Mencione algunos tipos de fases estacionarias y clasifíquelas con base a su polaridad.
5. ¿Qué factores determinan la separación en C.L.A.R.?
6. Describir los componentes básicos de un sistema C.L.A.R. y señalar brevemente la función de
cada parte del mismo.
64
7. Mencionar los diferentes tipos de detectores utilizados en C.L.A.R., así como sus ventajas y
desventajas.
8. ¿Qué es la cafeína? ¿En qué alimentos está presente?
• Preparar la fase móvil en una proporción 30:70 de metanol:agua y ajustarla a pH 3.5 con HCI de
concentración 1 M. Colocarla en ultrasonido de 10-15 minutos y filtrar a través de una membrana de
0.44 µm con vacío (se debe preparar aproximadamente un litro).
• Preparar 25 mL de una solución estándar de cafeína de 20 ppm.
Pesar 25 mg de cafeína estándar, disolverlo con fase móvil y llevarlo a un aforo de 25mL. Realizar
de la disolución anterior dos diluciones; una de 1mL en 10mL y a partir de esta última otra de 5mL en
25mL.
• Preparar soluciones en un intervalo de concentraciones de 2.0 a 10 ppm de cafeína (10 mL de cada
solución, ver Tabla 1), diluyendo con la mezcla de fase móvil. Colocar en ultrasonido de 5-8 minutos
para degasificar las soluciones y asegurar la disolución de la cafeína.
Tabla 1. Curva de Calibración de Cafeína
SISTEMA 1 2 3 4 5 Problema
VSTOCK(mL) 1 2 3 4 5 0
20 ppm
VMUESTRA(mL) 0 0 0 0 0 *
VAFORO(mL) 10 10 10 10 10 10
*Revisar la preparación de la muestra
65
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
• Preparar té y café (pesar y diluir a un volumen conocido cada uno). En matraces volumétricos de
10 mL colocar por separado 2.5 mL de café y 5 mL de té. Llevar al aforo cada matraz con la fase
móvil y colocar en ultrasonido durante 5 minutos.
• Por otra parte, bebidas de Cola como Pepsi y Coca-Cola requieren ser descarbonatadas
previamente (este paso realícelo en su casa), para ello se agitan fuertemente durante 30 minutos,
luego se calientan por otros 15 minutos y se colocan en ultrasonido durante una hora. En matraces
volumétricos de 10 mL colocar el volumen calculado (a partir del contenido de cafeína encontrado en
la investigación previa) de Pepsi-Cola y llevar al aforo con la fase móvil. Lo mismo para la muestra
de Coca-Cola.
DETERMINACIÓN DE CAFEÍNA.
• Fijar el flujo del cromatógrafo en 1.5 mL/min en la longitud de onda del detector a 272 nm. Pasar
fase móvil por la columna durante 15 minutos para asegurar que no haya otras sustancias en la
misma de experimentos previos, observar que la línea base permanezca estable.
• Inyectar en el cromatógrafo los estándares. Posteriormente inyectar las bebidas de cola, el café y
el té por separado.
• Después de la última inyección, lave la columna con una mezcla de metanol:agua 20:80.
Disposición de residuos:
Los residuos que contengan Fase móvil se resguardaran perfectamente etiquetados para un
tratamiento posterior.
66
4.- RESULTADOS
Tabla 2. Resultados de los sistemas de la curva de Calibración
SISTEMA 1 2 3 4 5
[Cafeína]
exacta en ppm
tR(min)
wbase
Area
Altura
PUNTOS MÍNIMOS QUE DEBE CONTENER:
1. Justifique la técnica de fase reversa empleada en la práctica para la determinación de cafeína.
2. Mencione qué otros métodos existen para su análisis.
3. Determine la cantidad de cafeína en las soluciones problema.
4. ¿La construcción de una curva de calibración basada en la altura de los picos, en lugar del área,
da resultados exactos en la determinación?. Explique.
5. Analice la posibilidad de emplear una columna de intercambio iónico para la determinación de
cafeína.
6. Calcule la eficiencia de la columna (No. de platos teóricos y A.E.P.T.)
6. BIBLIOGRAFÍA
1. Métodos Instrumentales de Análisis. Habart H. Willard y Lynne L. Merritt, Jr. Grupo edit.
Iberoamericana. 1991, México. D. F.
2. Análisis Instrumental. Douglas A. Skoog y James J. Leary, 4° edición. Mc Graw Hill/ Interamericana
de España. 1994.
67
3. Química analítica, Margarita Watty B. Editorial Alambra. Mexicana S. A. 1° edición, 1982.
4. Analytical Chemistry. Principles and Techniques. Larry G. Hargis. Prentice Hall. 1988.
5. Métodos Modernos de Análisis químico. Robert L. Peckson. Editorial Limusa, México, 1983.
Tercera Reimpresión. Reinhold Company,1975.
6. Introduction To Modern Liquid chromatography. L. R. Snyder. Second Edition. John Wiley & Sons,
Inc. 1979
7. Detection in HPLC. Diode Array. Edited by Ludwig Huber, Stephan A. George Marcel Dekker, Inc.
1993
8. High- Performance Liquid Chromatography advances and perspectives. Vol 1-5
9. The HPLC Solvent Guide. Paul C. Sandek. John Wiley & Sons, Inc 1996
10. Química Analítica Cuantitativa. R. A. Day, Jr. A. L. Underwood. Prentice- Hall Hispanoamericana,
S. A. Naucalpan de Juárez, Edo. De México. 1989
11. Análisis Químico cuantitativo. Daniel C. Harris. Editorial Reverté S. A. 2001. 2a. edición.
68

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

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Presentación, manejo de equipo básico (balanza, 1

Práctica 1. Espectrofotometría visible. Determinación de 2

Práctica 3. Absorción atómica: Determinación de Bi. 4

1ª Revisión del proyecto 6

Práctica 5. Extracción de ditizona. 8

Práctica 6. Extracción de Cu(II) y Mn(II) usando oxina como 9

Práctica 7. Cromatografía de Gases (estándar interno) 10

Práctica 8 . Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución 11

2ª Revisión del proyecto, tutoriales de cromatografía 12

1ª sesión de experimentación del proyecto 14

2ª sesión de experimentación del proyecto 15

Entrega de Calificaciones. Aplicación del cuestionario 16

a) Una revisión bibliográfica

a) La entrega de un diseño experimental basado en una revisión bibliográfica

2. Investigación bibliográfica. El equipo de estudiantes podrá consultar cualquier fuente de

En la introducción, fundamentos de la determinación, entre otros, se integrarán la información o

Para el INFORME DE TRABAJO del proyecto, además de lo presentado anteriormente, se incluirán:

5. Resultados y discusión. Deben ir presentándose de manera simultánea los resultados y la

7. Referencias (adicionales al protocolo). En este punto, se anexarán las consultas realizadas

REGLAMENTO GENERAL DE SEGURIDAD E HIGIENE PARA LOS

OBJETO DEL REGLAMENTO

VoBo. del Comité de Calidad del Departamento de Ciencias Químicas

Clases Presenciales Pág.

III. Calendario de actividades

Práctica 2. Espectrofotometría visible.

Práctica 6. Extracción de Cu(II) y Mn(II) utilizando oxina como agente

Práctica 7. Cromatografía de gases: Separación de alcoholes y análisis de

Práctica 8. Cromatografía de líquidos de alta resolución: Determinación de

Anexo. Fichas de Seguridad

La espectrofotometría es un conjunto de procedimientos que utilizan la luz para determinar las

concentraciones de especies químicas, cuyo principio es el siguiente: un haz luminoso de longitud de

onda determinada atraviesa la solución objeto de análisis y de la proporción de la intensidad luminosa

absorbida por la solución se deduce la concentración de la Especie absorbente, esta relación se

expresa mediante la Ecuación de Lambert-Beer:

Donde A es la Absorbancia que es adimensional, e es el coeficiente de Absortividad Molar de la

especie absorbente en M-1cm-1, b es la longitud o ancho de celda en cm y [Especie] esta expresada

La ley de Beer afirma que la absorbancia es proporcional a la concentración de la especie absorbente.

Sin embargo, no se cumple rigurosamente mas que en condiciones adecuadas como:

1. La luz utilizada debe ser suficientemente monocromática.

2. La concentración de la especie absorbente debe ser diluida (≤0.01M)

3. La ley no se cumple en el caso de soluciones fluorescentes o de suspensiones

4. Equilibrios Químicos-Puede haber variaciones aparentes muy importantes cuando la dilución

desplace sensiblemente los equilibrios químicos.

Las partes de un espectrofotómetro son:

1. ¿En qué se fundamenta la espectrofotometría ultravioleta-visible?

3. Menciones las partes principales de un espectrofotómetro de absorción

4. Investigue las características físico-químicas más importantes del azul de timol.

4. Investigue las características físico-químicas más importantes del azul de timol.  

5. ¿Qué es el coeficiente de absortividad molar ( ε ) y qué unidades tiene?  