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    Preparación de Agar Chromoult

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    Este documento proporciona instrucciones para preparar Agar Chromocult, un medio de cultivo utilizado para aislar coliformes totales y E. coli. Explica los ingredientes del medio, cómo esterilizar el agua y agregar el medio seco en una cabina de flujo laminar para evitar la contaminación. Además, detalla los pasos para disolver completamente el medio y agregar el suplemento selectivo para coliformes antes de distribuirlo en placas de Petri y almacenarlas en refrigeración.

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    Este documento proporciona instrucciones para preparar Agar Chromocult, un medio de cultivo utilizado para aislar coliformes totales y E. coli. Explica los ingredientes del medio, cómo esterilizar el agua y agregar el medio seco en una cabina de flujo laminar para evitar la contaminación. Además, detalla los pasos para disolver completamente el medio y agregar el suplemento selectivo para coliformes antes de distribuirlo en placas de Petri y almacenarlas en refrigeración.

    Descripción original:

    Preparación de Agar Chromocult

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    Este documento proporciona instrucciones para preparar Agar Chromocult, un medio de cultivo utilizado para aislar coliformes totales y E. coli. Explica los ingredientes del medio, cómo esterilizar el agua y agregar el medio seco en una cabina de flujo laminar para evitar la contaminación. Además, detalla los pasos para disolver completamente el medio y agregar el suplemento selectivo para coliformes antes de distribuirlo en placas de Petri y almacenarlas en refrigeración.

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    PREPARACIÓN DE AGAR CHROMOULT

    Chromocult Agar o Agar para Coliformes, es un medio de cultivo sólido


    utilizado para aislamiento de microorganismos del grupo de los Coliformes
    Totales y Fecales; este medio de cultivo es enriquecido con un suplemento
    selectivo para Coliformes y E. coli, el cual es suministrado después de
    adicionar el medio de cultivo (6).

    Casa comercial: Merck.

    Contenido Neto: 500 g.

    Composición: Peptona (3,0 g/L), Cloruro Sódico (5,0 g/L), Dihidrogenofosfato


    Sódico (2,2 g/L), Hidrogenofosfato Di sódico (2,7 g/L), Triptófano (1,0 g/L),
    Piruvato Sódico (1,0 g/L), Tergitol (7 0, 15), Sorbitol (1,0 g/L), Agar-agar (10,0
    g/L), 6-cloro-3-indoxil-beta-D-galactopiranosido (0,2 g/L), Isopropil-beta-D-
    tiogalactopiranosido (0,1 g/L), 5-bromo-4-cloro-3-indoxil-beta-D-glucurónico
    ácido (0,1 g/L); pH final de 6,8 ± 0,2.

    Conservación: El medio de cultivo deshidratado debe conservarse bien


    sellado, en un lugar seco y a una Temperatura de 25°C para evitar su
    hidratación y conservar la calidad del producto. Luego de su preparación tiene
    una vida útil de 7 días y debe mantenerse en refrigeración a 4°C ± 2.

    Preparación del medio de cultivo: Para la preparación del medio de cultivo


    es necesario tener un frasco shot del volumen a preparar, probeta graduada,
    pipeta graduada estéril, pipeteador, espátula, agitador magnético, papel
    metálico, plancha magnética y balanza digital.

    NOTA: Este medio de Cultivo no se puede llevar a la autoclave por lo que es


    necesario esterilizar el agua destilada y después adicionar el medio en la
    Cabina de Flujo Laminar con el fin de no contaminar la preparación.

    Reconstitución:

     Medir con la probeta graduada 250 ml de Agua destilada.


     Adicionarlos al frasco shot.
     Insertar el agitador magnético y tapar.
     Esterilizar en la autoclave durante 15 minutos a 121°C.
     Después de esterilizar llevar a la Cabina de Flujo Laminar para adicionar el
    medio de cultivo.
     Prender la Balanza digital.

     Colocar el papel metálico y llevar a cero.


     Con la espátula tomar porciones del medio de cultivo.
     Pesar 6.6 g de medio Chromocult Agar.
     Llevar a la Cabina de Flujo Laminar.
     Adicionar el medio al frasco shot con el Agua Destilada Estéril y tapar.
     Llevar a la Plancha magnética, poner en agitación y calentamiento hasta que
    se disuelva por completo el medio de cultivo.
     Llevar a la Cabina de Flujo Laminar y con una pipeta estéril adicionar 1 ml de
    suplemento para Coliformes a 250 ml de medio de cultivo.
     Llevar nuevamente a la Plancha Magnética y poner en agitación.
     Dejar reposar y servir en la Cabina de Flujo Laminar 10 ml en Cajas de Petri
    pequeñas o 15 ml en Cajas de Petri grandes estériles previamente marcadas
    (las Cajas Petri se marcan en la tapa con la inicial del medio “Chr”).
     Dejar solidificar.
     Empacar en bolsas o papel plástico.
     Marcar la bolsa con el nombre del medio y la fecha de preparación.
     Guardar en nevera a 4°C ± 2 para su conservación.

    Preparación de Suplemento para Coliformes Totales y E. coli:

    A un vial de suplemento en polvo adicionar 2 ml de Agua Destilada Estéril, agitar


    hasta que se disuelva; de este se toma 1 ml para 250 ml de medio de cultivo.
    Todo este procedimiento se debe realizar en la Cabina de Flujo Laminar para
    evitar cualquier tipo de contaminación del suplemento. Luego de reconstituir el
    suplemento se debe conservar en refrigeración a una Temperatura de 2 a 8 °C.

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