Tesis Milagros Sanches PDF
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TESIS
Para optar el Título Profesional de
MÉDICO VETERINARIO
Asesor:
M.V. M. Sc. Fernando Alberto Oblitas Guayán
Cajamarca – Perú
2013
2
Dedicatoria:
Médico Veterinario.
Agradecimientos
A todas las mascotas y sus propietarios que colaboraron para que este trabajo de
investigación se realice.
Milly
4
RESUMEN
ABSTRACT
This research was taken in Cajamarca city located on 2650 asl, between the
months September to December 2012; where was take 120 clinically healthy
dogs, were separated in males and females, and subdivided each one in 4
groups by age: puppies, young, adult and geriatrics, colleting 3 ml of blood
from cephalic vein using vacutainer system with EDTA tubes, to establisher
normal ranges and made references limits to blood values for Cajamarca city,
including parameters of reference, for both sex and four ages. The results for
erythrocytes (5,0 - 8,6 ×106/µl), hematocrit (40 - 58%), hemoglobin (14,5 -
23,5 gr/dl), MCV (59,7 - 85,9 fl), MCH (21,4 – 34,8 pg), MCHC (31,1–46,3
g/dl), leukocytes (6,4 – 11,2×103/µl), leukocytes shape: segmenter
neutrophils (62 - 71%), band neutrophils (0 - 4%), eosinophils (1 - 5%),
monocytes (0 - 3%), lymphocytes (23 - 32%) y basophils (0 - 0%); absolutes
values: segmenter neutrophils (4.3 - 7.5 × 103/µl), band neutrophils (0 - 0.3
×103/µl), eosinophils (0 - 0.4 ×103/µl), monocytes (0 – 0,3 ×103/µl),
lymphocytes (1,6 – 3,2 × 103/µl) y basophils (0,0 – 0,0 ×103/µl). Erythrocyte
sedimentation rate (0,3 – 2,7 mm/h) and platelets (130 – 200 ×103/µl). The
results obtained for erythrocytes, leukocytes, erythrocyte sedimentation rate
and platelets are different to the reported by Gómez (1988).
ÍNDICE
DEDICATORIA
AGRADECIMIENTO
RESUMEN
ABSTRACT
CAPITULO I Página
INTRODUCCIÓN 1
OBJETIVOS 3
1. Objetivo General 3
2. Objetivos específico 3
HIPÓTESIS 3
CAPITULO II 4
MARCO TEÓRICO 4
1. Eritrocitos 4
1.1 Morfología. 5
1.2 Metabolismo de los eritrocitos 7
1.2.1 Reticulocitos: 8
1.3 Eritropoyesis 8
1.4 Destrucción eritrocitaria 10
2. Volumen globular aglomerado o hematocrito (VGA) 10
2.1 Microhematocrito 11
3. Hemoglobina 12
4. Valores corpusculares medios: 13
4.1 Concentración media de hemoglobina corpuscular 13
(CMHC)
4.2 Hemoglobina corpuscular media (HCM) 14
4.3 Volumen corpuscular medio (VCM) 14
5. Leucocitos 14
5.1 Neutrófilos 16
5.1.1 Función 16
5.1.2 Morfología 17
5.1.3 Variaciones de la morfología normal 17
7
a. Neutrófilos en banda. 17
b. Cantidad 18
5.2 Linfocitos 18
5.3 Monocitos 19
6.3.1 Función 20
6.3.2 Morfología 20
5.4 Eosinófilos 21
6.4.1 Función 21
6.4.2 Cantidad 21
6.4.3 Morfología 21
5.5 Basófilos 22
6.5.1 Función 23
6.5.2 Cantidad 23
6.5.3 Morfología 23
6. Plaquetas 23
7. Velocidad de sedimentación 25
8. Cuadros de valores de referencia 27
8.1 Valores de Referencia para Cajamarca 27
Tabla N° 01 27
Tabla N° 02 28
Tabla N° 03 29
Tabla N° 04 30
Tabla N° 05 31
Tabla N° 06 31
8.2 Valores de Referencia de otros autores: 32
Tabla N° 07 32
Tabla N° 08 33
Tabla N° 09 34
Tabla N° 10 35
Tabla N° 11 35
CAPITULO III 36
MATERIALES Y MÉTODOS 36
1. Localización 36
1.1 Datos Meteorológicos. 36
8
2. Materiales 37
2.1 Material biológico 37
2.2 Material de campo 37
2.3 Material de escritorio 37
2.4 Material de laboratorio 37
2.5 Reactivos 38
3. Metodología 38
3.1 Selección de muestras: 38
3.2 Obtención de muestras: 39
3.3 Del Número de Muestras 39
3.4 Parámetros hematológicos por analizar. 39
3.5 Análisis estadístico: 40
CAPITULO IV
RESULTADOS 41
CAPITULO V
DISCUSIÓN 68
CAPITULO VI
CONCLUSIONES 78
CAPITULO VII
BIBLIOGRAFÍA 82
ANEXOS 85
1
CAPITULO I
INTRODUCCIÓN
Gómez (1988), reporta un estudio cuyo objetivo principal era establecer los
valores de referencia para caninos según el sexo (50 hembras y 50 machos)
sin distinción de edad en la ciudad de Cajamarca. Esta información ha
venido siendo usada por los profesionales Médicos Veterinarios durante sus
prácticas clínicas y en el diagnóstico de diferentes alteraciones en los
caninos de la ciudad de Cajamarca.
OBJETIVOS
Objetivo General
Objetivos Específicos
HIPÓTESIS
CAPITULO II
MARCO TEÓRICO
1. Eritrocitos
1.1 Morfología.
1.2.1 Reticulocitos:
1.3 Eritropoyesis:
Los eritrocitos por tener una densidad específica más elevada, se puede
determinar su volumen por el método del microhematocrito, cuyo
principio de centrifugar es el de obtener la máxima aglomeración de los
eritrocitos y que lo mínimo de plasma permanezca entre los ellos; con un
pequeño error inherente (+1%) (Benjamin, 1990; Schalm 1964).
2.1 Microhematocrito
3. Hemoglobina
La hemoglobina absorbe oxígeno contenido en el aire de los pulmones
con el que, forma oxihemoglobina, sustancia que con facilidad cede su
oxígeno a los tejidos con los que entra en contacto. Y su mayor
formación ocurre en la fase del eritrocito denominada normablasto
ortocromático antes de la formación de reticulocito. (Kraft y Dürr, 2000).
tomado por los enterocitos como iones libre o como grupo heme por
diferentes caminos (Harvey, 2012).
5. Leucocitos
Son unidades móviles del sistema retículo endotelial, se forman en parte
en la médula ósea (granulocitos), y en parte en los diversos órganos
linfógenos, incluyendo ganglios linfáticos, bazo, timo, amígdalas y
diversos restos linfáticos del intestino (linfocitos y monocitos), pero
después de producidos son transportados por la sangre a diferentes
partes de la anatomía, donde ejercerán sus funciones. El valor
fundamental de los leucocitos consiste en que, son transportados
específicamente a zonas donde hay inflamación intensa, proporcionando
así una defensa rápida y enérgica contra cualquier posible agente
infeccioso (Guyton, 1991).
5.1 Neutrófilos
5.1.1 Función
5.1.2 Morfología
Tamaño: 12 - 15 µm en diámetro.
a. Neutrófilos en banda
Los Neutrófilos en banda, que se pueden ver en bajo
número de sangre periférica de caninos y gatos sanos,
tienen un núcleo alargado o ligeramente retorcido con
formas en U o J y con menos condensación de cromatina
que los Neutrófilos maduros. La lobulación nuclear está
ausente o pobremente definida (Cowell, 2009).
5.1.4 Cantidad
5.2 Linfocitos
5.3 Monocitos
5.3.1 Función
5.3.2 Morfología
5.4 Eosinófilos
5.4.1 Función
5.4.2 Cantidad
5.4.3 Morfología
5.5 Basófilos
5.5.1 Función
5.5.2 Cantidad
5.5.3 Morfología
6. Plaquetas
CONSTANTES VALORES
PROMEDIO D.S. C.V. %
HEMATOLÓGICAS EXTREMOS
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN
VALORES HEMATIMÉTRICOS
Donde:
VEE = Volumen de eritrocitos empaquetados
D.S.: Desviación estándar
C.V.: Coeficiente de variabilidad
V.C.M.: Volumen corpuscular medio
H.C.M.: Hemoglobina corpuscular media
C.H.C.M.: Concentración de hemoglobina corpuscular media
27
CONSTANTES VALORES
PROMEDIO D.S. C.V. %
HEMATOLÓGICAS EXTREMOS
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN
VALORES HEMATIMÉTRICOS
Donde:
VEE = Volumen de eritrocitos empaquetados
D.S.: Desviación estándar
C.V.: Coeficiente de variabilidad
V.C.M.: Volumen corpuscular medio
H.C.M.: Hemoglobina corpuscular media
C.H.C.M.: Concentración de hemoglobina corpuscular media
28
CONSTANTES VALORES
PROMEDIO D.S. C.V. %
HEMATOLÓGICAS EXTREMOS
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN
VALORES HEMATIMÉTRICOS
Donde:
VEE = Volumen de eritrocitos empaquetados
D.S.: Desviación estándar
C.V.: Coeficiente de variabilidad
V.C.M.: Volumen corpuscular medio
H.C.M.: Hemoglobina corpuscular media
C.H.C.M.: Concentración de hemoglobina corpuscular media
29
CONSTANTES VALORES
PROMEDIO D.S. C.V. %
HEMATOLÓGICAS EXTREMOS
Donde:
D.S.: Desviación estándar
C.V.: Coeficiente de variabilidad
30
CONSTANTES VALORES
PROMEDIO D.S. C.V. %
HEMATOLÓGICAS EXTREMOS
CONSTANTES VALORES
PROMEDIO D.S. C.V. %
HEMATOLÓGICAS EXTREMOS
Donde:
D.S.: Desviación estándar
C.V.: Coeficiente de variabilidad
31
PARÁMETRO
Eritrocitos Hematocrito Hemoglobina Leucocitos Plaquetas
106/µl % g/dl 103/µl 103/µl
POBLACIÓN
POBLACIÓN (4.22 – 7.74) (30.1 – 56.2) (10.1 – 19.6) (7 – 20.1) (103 – 353)
TOTAL [5.98] [43.2] [14.9] [13.5] [228]
Significancia
0.540 0.403 0.911 0.821 0.582
(p < 0.05)
Significancia
0.269 0.373 0.247 0.139 0.134
(p < 0.05)
Significancia
0.115 0.569 0.211 0.238 0.726
(p < 0.05)
( ): Límites
[ ]: Promedio
32
Significancia
0.865 0.149 0.605 0.707 0.435 -
(p<0.05)
Significancia
0.795 0.258 0.313 0.862 0.587 -
(p < 0.05)
Significancia
0.807 0.459 0.688 0.718 0.969 -
(p < 0.05)
33
PARÁMETRO
Neutrófilos Neutrófilos
Linfocitos Monocitos Eosinófilos Basófilos
segmentados abastonados
103/µl 103/µl 103/µl 103/µl
103/µl 103/µl
POBLACIÓN
Significancia
0.296 0.248 0.372 0.333 0.182 -
(p < 0.05)
Significancia
0.887 0.806 0.232 0.839 0.707 -
(p<0.05)
Significancia
0.570 0.749 0.192 0.310 0.731 -
(p < 0.05)
34
Valores
Serie roja Promedio del total
referenciales
Eritrocitos x 1012/L 6.6 +/- 1.0 4.7 – 8.5
CAPITULO III
MATERIALES Y MÉTODOS
1. Localización
1
Servicio Nacional de Meteorología e Hidrología (SENAMHI Cajamarca 2012).
36
2. Materiales
2.1 Material biológico
Guantes.
Lapicero.
Caja térmica
Tubos capilares
37
Gradilla portatubos
Espectrofotómetro
Pipeta de Thoma
Colorante Wright
Plastilina
2.5 Reactivos
Solución de Gower
Diluyente original
3. Metodología
3.1 Selección de muestras:
2
Merck. Hemacolor ® Rapid staining of blood smear staining set for microscopy.
3
VALTEK ® Diagnosis. Chile
38
b) Número:
De acuerdo a la edad:
4
Vacutainer ®
39
CAPITULO IV
RESULTADOS
VARIABLES VALORES DE
UNID. X+/-DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
% 0 +/- 0 0-0
Basófilos
103 /µl 0 +/- 0 0,00 - 0,00
42
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
Velocidad Sedimentación mm/h 1,5 +/- 0,6 0,3 - 2,7
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
% 0 +/- 0 0-0
Basófilos
103 /µl 0 +/- 0 0,00 - 0,00
45
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
% 0 +/- 0 0-0
Basófilos
103 /µl 0 +/- 0 0,00 - 0,00
48
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
Variable
Unid. Hembras Machos
Hematológica
Variable
Unid. Hembra Macho
Hematológica
Leucocitos 103/µl 8,94 ± 1,3 a 8,73 ± 1 a
% 0 0
Basófilos
103/µl 0 0
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
Eritrocitos 106 /µl 6,1 +/- 0,5 5,1 - 7,1
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
segmentados
103 /µl 6,1 +/- 0,6 4,9 - 7,3
% 1 +/- 0,8 -1 - 3
Monocitos
103 /µl 0,1 +/- 0,1 0 - 0,3
% 29 +/- 2 25 - 33
Linfocitos
103 /µl 2,6 +/- 0,3 2 - 3,2
% 0 +/- 0 0 - 0
Basófilos
103 /µl 0 +/- 0 0 - 0
54
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
Eritrocitos 106 /µl 6,9 +/- 0,7 5,5 - 8,3
Hematocrito % 50 +/- 3 44 - 56
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
% 0 +/- 0 0-0
Basófilos
103 /µl 0 +/- 0 0-0
57
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
Velocidad Sedimentación mm/h 1,5 +/- 0,5 0,5 - 2,5
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
Leucocitos ×103/µl 8,4 +/- 1,1 6,2 - 10,6
% 3 +/- 1 1 - 5
Eosinófilos
103 /µl 0,3 +/- 0,1 0,1 - 0,5
% 1,4 +/- 1 -1 - 3
Monocitos
103 /µl 0,1 +/- 0,1 0 - 0,3
% 0 +/- 0 0 - 0
Basófilos
103 /µl 0 +/- 0 0 - 0
60
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
Velocidad Sedimentación mm/h 1,5 +/- 0,5 0,5 - 2,5
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
Leucocitos ×103/µl 8,7 +/- 1,1 6,5 - 10,9
% 0 +/- 0 0-0
Basófilos
103 /µl 0 +/- 0 0-0
63
VARIABLES VALORES DE
UNID. X +/- DE
HEMATOLÓGICAS REFERENCIA
Velocidad Sedimentación mm/h 2,1 +/- 0,6 0,9 - 3,3
Edades
Variable
Hematológica 3 m a <1año 1 a <3 años 3 a <7 años > de 7 años
7,02 ± 0,9 a
Eritrocitos 106 /µl 6,05 ± 0,5 b 6,94 ± 0,7 a 7,23 ± 0,9 a
Edades
Variable
Hematológica
3 m a < 1 año 1 a < 3 años 3 a <7 años > de 7 años
Variable Edad
Velocidad de
Sedimentación 0,93 ± 0,29 c 1,47 ± 0,5 b 1,47 ± 0,5 b 2,02 ± 0,6 a
mm/h
Plaquetas 103/µl 16,3 ± 1,97 a 17,03 ± 1,8 a 16,33 ± 1,7a 16,3 ± 1,8 a
CAPITULO V
DISCUSIÓN
DE LA POBLACIÓN TOTAL
Además, se difiere con Schalm (1979) quien propone que en el canino, el valor
normal de hemoglobina aceptado es de 12 a 17 gr/dl de sangre. Sin embargo
no se conoce el grupo de estudio de Schalm, y tampoco el lugar donde se
realizó. Se debe manifestar además que, en algunos casos el error en altos
valores de hemoglobina según Latimer (2003) pueden ocurrir con la presencia
68
Los promedios obtenidos para los índices eritrocitarios: VCM 72,8 fl., CHCM
son 38,7 g/dl y HCM 28,1 pg., son mayores que los trabajos reportados. Los
resultados de ésta investigación, como se aprecian son superiores a los de los
autores consultados, ésta mayor variación se debería a que el trabajo fue
realizado a una altura de 2 650 msnm y donde la concentración de oxigeno es
menor a la concentración del mismo a nivel del mar. Esta situación se corrobora
con los manifestado con Kirk (1997), García (1995) y Latimer et al. (2003)
quienes mencionan que, entre los factores que afectan al recuento eritrocitario,
así como a la concentración de hemoglobina y concentración de otros
constituyentes hemáticos, está la altitud, entre otros.
Con respecto a Gómez (1988) se encontró una menor diferencia, éste autor no
menciona en su trabajo la raza, edad, condiciones de manejo y sanidad de los
animales con los cuales trabajó, a pesar de que las condiciones de altitud son
iguales a esta investigación, por lo que no podemos establecer las causales de
diferencia entre ambos estudios.
Según, Wittwer y Böhmwald (1987), mencionan que para los caninos, suelen
presentarse grandes fluctuaciones en el recuento de leucocitos. Por otro lado
también se debería a factor predominante de raza, manejo y alimentación y
salud.
SEGÚN SEXO:
Los valores encontrados en este trabajo son similares a los reportados por
Gómez (1988), Choquehuanca (2008) y Chu (2010) para ambos sexos.
ser los resultados elevados con respecto a otros autores, además de que no se
tomaron en consideración para el estudio perras en celo y/o estado o sospecha
de gestación.
SEGÚN EDAD
Según Kraft y Dürr (2000), se coincide que existen variaciones del dosaje de
hemoglobina en relación al sexo y edad ya que en el can estos valores
comienzan a disminuir a partir del nacimiento, seguidas de un incremento
gradual desde los cuatro meses. Así también (Harvey, 2012) menciona que la
absorción del hierro, sustancia importante para la formación de hemoglobina,
se realiza desde la dieta, lo cual depende de la edad, especie, reservas de
hierro, capacidad de eritropoyesis, inflamaciones y preñez, como también la
cantidad y la forma química ingerida. Un pequeño porcentaje de hierro en la
dieta es absorbido en animales adultos normales.
74
Sin embargo coincide con Serrano (2011) quien menciona que las plaquetas
son totalmente funcionales desde el nacimiento y su número es similar al de
los adultos.
como las tonsilas, nódulos linfáticos, bazo, tejidos linfoides bronquiales, cuya
presencia se encuentra elevada en edades temprana de vida.
CAPITULO VI
CONCLUSIONES
CAPITULO VII
BIBLIOGRAFÍA
19. Núñez O. L., Bouda J. (Ed.) (2007). Patología Clínica Veterinaria. (1ra
edición) México: Universidad Nacional Autónoma de México. Facultad de
Medicina Veterinaria y Zootecnia. Departamento de Patología.
20. Pedrozo, R., Quintana, G., Bazán, A., Florentín, M. (2010). Valores
hematológicos de referencia en caninos adultos aparentemente sanos,
que concurren a una clínica privada de Asunción. Consultado el 15 de
abril de 2012, Mem. Inst. Investig. Cienc. Salud, página web:
http://www.iics.una.py/n/pdf/revista/116.pdf
83
21. Rebar A. H., MacWilliams P. S., Feldman B. F., Metzger, L. F., Pollock
R.V. H., Roche J., (2002). Manual de hematología de perros y gatos.
España. Multimédica.
ANEXO
ANEXO N° 01
1. Recuento de eritrocitos:
Benjamín (1990), describe el siguiente procedimiento:
Método: Método del Hemocitómetro
Muestra: Sangre con anticoagulante
Reactivos:
Solución de Gower a base de:
- Sulfato de sodio 15.63 gr.
- Acido acético 41.65 ml
- Agua destilada 250 ml
Material: Pipeta de Thoma, pieza de caucho, cámara de Neubauer,
gradillas portatubos.
Técnica:
1. Colocar la pieza de caucho a la pipeta cuenta glóbulos de Thoma, la
que se identifica con la marca 101 por encima del bulbo.
2. Homogenizar la muestra de sangre, aspirar suavemente muestra de
sangre hasta la marca 0.5 de la pipeta. Limpiar las paredes exteriores
con papel absorbente.
3. Aspirar el diluyente (Solución de Gower), hasta la marca 101. Poner la
pipeta en forma horizontal y tapar la punta con el dedo antes de retirar
la pieza de caucho. Agitarla por lo menos 2 a 3 minutos con un simple
movimiento de muñeca.
4. Descartar las 3 a 4 primeras gotas, limpiar el área graduada de la
cámara de Neubauer. Llenar el espacio comprendido entre la cámara
y el cubreobjetos anteriormente colocado.
85
Cálculo:
Células contadas X 10 (0.1 mm. de profundidad) X 5 (1/5 de mm2)
X 200 (dilución 1:200) = eritrocitos/microlitro.
Se puede efectuar la suma de las células en los 5 cuadrados
pequeños X 10000 = eritrocitos/microlitro.
2. Recuento de leucocitos:
Guía de Laboratorio Diagnóstico Clínico de la Facultad de Ciencias
Veterinarias de la Universidad Nacional de Cajamarca (1990), describe el
siguiente procedimiento para el recuento de leucocitos.
por lo menos 1 minuto para que los eritrocitos se lisen y que los
leucocitos se sedimenten.
4. Con el objetivo de poco aumento (10 x), se cuentan las células de
cada uno de los 4 cuadrados grandes de las esquinas.
5. El conteo se realiza de izquierda a derecha, se debe tener cuidado de
no contar dos veces la misma célula, pues al final se reflejará con una
diferencia enorme de lo que tiene en realidad el animal.
6. Se requiere contar las células que estén sobre la línea izquierda y la
línea superior para incluirlas, o por el contrario, se cuentan las células
que se encuentran sobre la línea derecha o la inferior del cuadro no se
incluyen en la cuenta.
7. Ya que se tiene la cuenta final (en la cual no debe haber una
diferencia superior de 25% entre cada cuadro de las esquinas).
Cálculo:
Células contadas X 20(dilución 1:20) X 10(profundidad 0.1 mm) = Leucocitos/microlitro
4 (numero de mm 2 contados)
3. Dosaje de hemoglobina
Laboratorio Valtek (1999), describe en su guía de reactivos el siguiente
procedimiento para la cuantificación de hemoglobina en la sangre.
Método: Método de la cianometahemoglobina
Fundamento: Los eritrocitos son lisados por un agente tensioactivo,
liberando la hemoglobina en la solución. Esta es oxidada a
metahemoglobina por el ferricianuro, siendo esta ultima convertida a
cianometahemoglobina por la presencia del cianuro. La absorbancia de la
cianometahemoglobina es medida a 540 nm, siendo la intensidad del
color obtenido, directamente proporcional a la concentraron de
hemoglobina en la sangre.
Reactivos:
Ferricianuro de potasio 0.6 mM
Cianuro de potasio 0.7 nM
87
Sterox – SE
Buffer y estabilizadores no reactivos c.s.p.
Estándar de hemoglobina (18 g/dl)
Material:
Pipeta de capacidad de 10 a 100 ul, espectrofotometro, gradillas.
Técnica:
1. Colocar 3 ml de reactivo para hemoglobina en los tubos de ensayo.
2. Invertir y homogenizar la sangre. Pipetear 12 ul de sangre, limpiar y
secar las paredes exteriores de la pipeta.
3. Introducir la pipeta en los tubos con el reactivo para hemoglobina.
4. Mezclar e incubar 3 minutos a temperatura ambiente. Leer las
absorbencias llevando a cero el equipo con el blanco.
Cálculos:
Factor = 18 / Absorbancia del estándar.
Hemoglobina (g/dl) = Factor X Absorbancia desconocida.
Técnica:
B.3 Observación:
Se realizó la observación de acuerdo a los pasos que describen Carr
y Rodak (2010), describen lo siguiente:
1. El frotis sanguíneo se comienza con el análisis del frotis con un
barrido del portaobjetos con el objetivo de 10X o de bajo
aumento, que determinaría la calidad general del frotis, incluida
la distribución de los eritrocitos que sugiere la presencia de
rouleaux o la de un número desproporcionado de grandes
células nucleadas en los bordes del extendido.
Luego se emplea el objetivo 40X, con el que se busca los
eritrocitos que se encuentren uniformemente distribuidos y en
donde apenas se toquen unos con otros. Se multiplica el número
promedio de leucocitos por campo de gran aumento por 1000
para obtener una aproximación del total de leucocitos contados
×103/µl.
El paso siguiente es la evaluación del frotis con el objetivo de
100X, el cual es realizar el estimado del recuento de leucocitos,
pero utilizando el objetivo de inmersión en aceite 100X. Cuando
se analiza el área correcta de un frotis de un paciente con el
recuento normal de eritrocitos, se observan alrededor de 200 a
250 eritrocitos por campo de 100X. Por lo general, el recuento
diferencial incluye el conteo y la clasificación de 100 leucocitos
consecutivos y el informe de estas clases como porcentajes. El
recuento diferencial se realiza de modo sistemático; para ello se
utiliza un recorrido en patrón de guarda griega, que minimiza los
errores de distribución de los leucocitos. Los resultados se
informan como porcentajes de cada tipo de leucocito observado
durante el recuento.
91
5. Índices hematimétricos
Benjamín (1990), manifiesta que los índices eritrocíticos definen el
tamaño y el contenido de hemoglobina del eritrocito de valores obtenidos
por la cuenta eritrocítica, la concentración de hemoglobina y el
hematocrito; estos índices son obtenidos mediante cálculos matemáticos
y son los siguientes:
A. Volumen Corpuscular Medio (VCM): expresa el volumen promedio
del eritrocito individual, es una forma de calcular el tamaño del
eritrocito, y se calcula con la siguiente fórmula:
VCM = VGA X 10
N° eritrocitos (millones/microlitro)
ANEXO N° 02
Datos Generales:
Nombre del propietario:……………………………………………………………
Dirección:……………………………………………………………………………
Teléfono:…………………………………………………………………………….
Nombre de la mascota:……………………………………………………………
Fecha de nacimiento:………………………………………………………………
Tipo de alimentación:………………………………………………………………
Signos clínicos:
Sexo:……………………… Peso:…………………………..
T°:………………………… Mucosas:………………………
Ciclo sexual:………………………… Lat./min:……………………….
(En caso de hembras) T/LLc:………………………….
93
ANEXO N° 03
Fuente de variación GL SC CM F P
Sexo 1 0,7971 0,79707 1,36 0,2467
Edad 3 24,4389 8,14629 13,86 0,0000
Sexo*Edad 3 4,9618 1,65395 2,81 0,0425
Error 112 65,834 0,5878
Total 119 96,0318
CV: 11,26% Promedio: 6,81
Fuente de variación GL SC CM F P
Sexo 1 4,41 4,408 0,41 0,5231
Edad 3 1037,23 345,742 32,18 0,0000
Sexo*Edad 3 191,76 63,919 5,95 0,0008
Error 112 1203,2 10,743
Total 119 2436,59
CV: 6,67 % Promedio: 49,14
Fuente de variación GL SC CM F P
Sexo 1 79,19 79,189 1,76 0,1876
Edad 3 27,98 9,3254 0,21 0,8914
Sexo*Edad 3 189,19 63,0637 1,4 0,2466
Error 112 5045,12 45,0457
Total 119 5341,48
CV: 9,91% Promedio: 72,85
94
Fuente de variación GL SC CM F P
Sexo 1 199,42 199,425 20,21 0,0000
Edad 3 77,73 25,909 2,63 0,0539
Sexo*Edad 3 403,74 134,579 13,64 0,0000
Error 112 1104,94 9,866
Total 119 1785,83
CV: 8,11% Promedio: 38,709
Fuente de variación GL SC CM F P
Sexo 1 1,37 1,3696 1,28 0,2597
Edad 3 13,589 4,5295 4,24 0,007
Sexo*Edad 3 30,332 10,1106 9,47 0,000
Error 112 119,515 1,0671
Total 119 164,805
CV: 11,69% Gran Media: 8,84,
Fuente de variación GL SC CM F P
Sexo 1 0,0333 0,03333 0,16 0,6863
Edad 3 17,6062 5,86875 28,87 0,0000
Sexo*Edad 3 0,6167 0,20556 1,01 0,3906
Error 112 22,7667 0,20327
Total 119 41,0229
CV: 30,65% Gran Media:1,47
95
ANEXO N° 04