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Vol. 5, Nm. 1, Ene.-Abr. 2012

pp 24-28

Caso clnico

Seguridad transfusional:
La determinacin de anticuerpos
contra Treponema pallidum en
donantes de sangre. Reporte de caso
Csar Cerdas-Quesada*
Resumen

Abstract

El tamizaje de laboratorio para sfilis est usualmente

llevado a cabo por serologa. No se observaron resultados falsos positivos cuando se utiliz ID-PaGIA pero
s se observ una excelente sensibilidad y especificidad
de esta prueba treponmica. Las ventajas del mtodo
son el tiempo de reaccin de tan slo 20 minutos, la
simplicidad del procedimiento con poco equipo de laboratorio, la posibilidad de realizar lecturas automatizadas
as como de mantener un rcord de los resultados y,
con ello, la trazabilidad. El caso clnico se sustenta en el
hecho de que las poblaciones de baja prevalencia tienen
un porcentaje ms alto de resultados falsos positivos que
una poblacin de alta prevalencia.

Laboratory diagnosis of syphilis is usually accomplished

by serology. No false-positive results were found with
ID-PaGIA and compared with other treponemal tests
ID-PaGIA has excellent sensitivity and specificity. Advantages of the PaGIA are the fast reaction time of only
20 minutes, the simplicity of the procedure with minimal
technical equipment, the possibility of automated readings, to mantain a record and, thus, traceability. It has
been clear that the low-prevalence population had higher
percentage of false-positive tests results.

Palabras clave: Sfilis, ID-PaGIA, Treponema pallidum,

pruebas treponmicas, donadores.

Key words: Syphilis, ID-PaGIA, Treponema pallidum,

treponemal test, blood donors.

Introduccin
La sfilis es una enfermedad causada por espiroquetas del gnero Treponema. La sfilis
sexualmente adquirida ocurre por distribucin
mundial y es causada por T. pallidum subespecie

pallidum. Los bancos de sangre y servicios de

transfusin tienen diferentes requerimientos en
cuanto a las pruebas para sfilis.1
Las pruebas especficas para T. pallidum utilizan tanto organismos completos como antgenos
del patgeno.2 La preparacin de un antgeno

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* Curso Internacional de Inmunohematologa y Medicina Transfusional. Universidad Nacional de Rosario e Instituto Universitario Italiano de Rosario, Rosario, Argentina.
Este artculo puede ser consultado en versin completa en http://www.medigraphic.com/medicinatransfusional/

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Rev Mex Med Tran, Vol. 5, Nm. 1, pp 24-28 Enero - Abril, 2012

Cerdas-Quesada C. Determinacin de anticuerpos contra T. pallidum en donantes

reproducible es una tarea difcil debido a que la

bacteria no puede cultivarse y debe ser mantenida en animales. Estas caractersticas son lo que
la hacen elegible para el tamizaje serolgico. Es
un importante problema de salud pblica, hay
una fase de latencia bien reconocida, pruebas
serolgicas validadas a un costo relativamente
bajo y los efectos adversos pueden ser serios en
casos no diagnosticados.1 De aproximadamente 40 protenas de T. pallidum que pueden ser
separadas por inmunoelectrofresis, slo unas
cuantas han sido utilizadas para propsitos
diagnsticos.3 Mientras que las protenas responsables del transporte de nutrientes o movilidad
tienen eptopos en comn con otras bacterias,
se ha demostrado alta especificidad para tres
protenas llamadas TpN15, TpN17 y TpN47.2,4
La variacin de la estrategia de tamizaje
empleada depende de diversos factores, tales
como la necesidad de detectar todos los estadios
de sfilis o solamente la infeccin propiamente
dicha.1
La desventaja de las pruebas no treponmicas
es la baja sensibilidad en el estado tardo de la
infeccin (falsos negativos); con estas pruebas,
el tamizaje solamente puede acarrear reacciones
falsamente positivas en varias condiciones agudas y crnicas en ausencia de sfilis (reacciones
falsas positivas biolgicas).1
Debido a que la ocurrencia y frecuencia de
resultados falsos positivos vara en los diferentes
tipos de pruebas, se ha recomendado que una
prueba treponmica positiva sea confirmada con
otro tipo de anlisis treponmico; as mismo, los
casos confirmados en el laboratorio deben tener
al menos dos ensayos treponmicos diferentes
positivos.5-8 Una persona que tenga resultados
negativos en dos mtodos es asumida como no
infectada.
En la actualidad, el uso de antgenos recombinantes con el potencial de elevar la especificidad de los test diagnsticos forma parte de los
desarrollos recientes; sin embargo, en nuestro

pas an se siguen utilizando pruebas de aglutinacin que presentan limitaciones tcnicas,

falta de automatizacin y la condicin subjetiva
de quien las realiza.9-12
El inmunoensayo de partculas en gel (PaGIA
por sus siglas en ingls) es un mtodo que consiste en microtubos que contienen una matriz de
gel y un polmero particulado rojo sensibilizado
con los antgenos recombinados TpN15, TpN16
y TpN47 en una suspensin lista para usar. El PaGIA ha mostrado una sensibilidad similar al ELISA y FTA-Abs y ms alta que el TPHA (Treponema
pallidum hemagglutination assay). Adems, se
ha documentado el uso de PaGIA en el tamizaje
de donadores de sangre donde se reportaron
niveles de sensibilidad y especificidad similares.
Las ventajas del mtodo son el tiempo de reaccin de tan slo 20 minutos, la simplicidad del
procedimiento con poco equipo de laboratorio,
la posibilidad de realizar lecturas automatizadas
y la posibilidad de mantener un rcord de los
resultados y con ello la trazabilidad.11

Reporte de caso
Mujer de 33 aos, se present a donar voluntariamente en una colecta extramural en la
empresa donde actualmente labora. Luego de
completar la plantilla de Entrevista de donante
y pasar las pruebas preliminares de entrevista y
exmenes fsicos (presin arterial y temperatura)
y de laboratorio (hemoglobina, hematcrito,
recuento de leucocitos y plaquetas), se le colect la donacin. Posteriormente, en el Banco
de Sangre, se procedi a realizar los anlisis
serolgicos de sus muestras y para sfilis se
utiliz la Prueba ID-PaGIA de DiaMed. En resumen, se pipetea 10 mL de suero en el pocillo
del microtubos apropiado, un volumen de 50
mL de partculas con los antgenos previamente
mezcladas por Vortex se agregan. La mezcla
se incuba a temperatura ambiente de 5 a 10
minutos. Despus de la centrifugacin de 10

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Cerdas-Quesada C. Determinacin de anticuerpos contra T. pallidum en donantes

minutos en una centrfuga de identificacin (ID),

se leyeron los resultados en el sistema Banjo de
lectura automatizada de tarjetas de gel DiaMed.
Se emple suero siguiendo las especificaciones
del fabricante.
La prueba PaGIA result reactivo (Fuertemente
reactiva ++) por lo que se puso en marcha el
algoritmo vigente en el Banco de Sangre. Como
el tamizaje es reactivo, se descart la unidad
implicada y a los componentes que se obtuvieron
de la misma, y previo al descarte, se recolect
una alcuota de la unidad para repetir la prueba
de tamizaje. Con la misma tcnica, se realiz la
repeticin de la prueba de tamizaje por duplicado a la muestra original que result reactiva
y a la alcuota tomada de la unidad. Ambas
determinaciones fueron reactivas (Figura 1).
Adems, de acuerdo con el algoritmo, se
realiz un anlisis interlaboratorio, es decir, se
envi la muestra a otro laboratorio y con otra
tecnologa. En este caso, se realiz un FTA/ABS
(Fluorecent Treponemal Antibody Absortion) IgG
con resultado positivo.
Si la prueba confirmatoria (o dependiendo del
caso, suplementaria) con la muestra implicada y

muestras del donante tomadas posteriormente

son positivas, se debe notificar al donante.
Posteriormente, se le realiz un VDRL (Venereal Disease Research Laboratory) a la muestra
y a la bolsa para comparar los resultados de
ambas pruebas. El VDRL en ambos casos fue
no reactivo. Se envo otra alcuota de la muestra original para el anlisis interlaboratorial de
VDRL, cuyo resultado tambin fue no reactivo.
Se hizo la determinacin de VDRL debido a que
en el pas la gran mayora de Bancos de Sangre
la utilizan como prueba de tamizaje, a pesar de
que su sensibilidad es muy baja.11

Discusin
La respuesta humoral a T. pallidum sugiere infeccin previa y constituye un marcador valioso
para el tamizaje en los Bancos de Sangre y el
seguimiento de la terapia, adems de que es un
marcador de conductas de riesgo.
En el tamizaje de donantes de sangre, el
empleo de mtodos no treponmicos no es recomendable debido a la generacin de resultados
falsos negativos; por lo cual es necesario generar
estrategias costo-efectivas como los ensayos
inmunoenzimticos, reproducibles y confiables
que incrementen la seguridad transfusional.12
El ID-PaGIA Syphilis ofrece excelentes especificidad y sensibilidad, similar a la de las otras
pruebas treponmicas y en comparacin con
los ELISA tiene las ventajas de operacin simple
(sin fases de lavado, equipo tcnico mnimo); el
bajo costo con respecto a los ELISA y un tiempo
de reaccin de aproximadamente 20 minutos, lo
destaca como un mtodo atractivo de eleccin
para la deteccin de anticuerpos anti- T. pallidum. La prueba en gel, adems, es til en la
realizacin de diluciones seriadas de la muestra
para obtener el reporte de un ttulo.
Las pruebas de anticuerpos treponmicos s
son positivas y a menudo siguen siendo de por
vida, a pesar del tratamiento de su enfermedad;

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Figura 1. Anlisis de la muestra original, alcuota de la bolsa y
las repeticiones de la donadora y controles negativo y positivo
en ID-PaGIA Syphilis de DiaMed.

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Cerdas-Quesada C. Determinacin de anticuerpos contra T. pallidum en donantes

sin embargo, es posible que ninguna prueba

aislada sea suficiente, si se tienen en cuenta las
complicaciones del tratamiento, las reacciones
biolgicas positivas y negativas falsas.13
Arroyo-Prez et al documentan que las pruebas de reaginas rpidas poseen una sensibilidad de 52.38% con valor predictivo positivo de
0.6875 y un valor predictivo negativo de 0.9967.
Por otra parte, los ensayos inmunoenzimticos
evidencian una sensibilidad de 100% y una
especificidad de 99.80% con un valor predictivo positivo de 0.7778 y un valor predictivo
negativo de 0.100.12 Esta evidencia del riesgo
transfusional que estas pruebas acarrean se
pone en evidencia cuando se comparan varios
mtodos con las mismas muestras. En este caso,
el inmunoensayo en partculas de gel mostr
una sensibilidad de 98.8% y una especificidad
de 100%, mientras que una prueba de ELISA
mostr valores de sensibilidad y especificidad
similares al inmunoensayo en gel, segn anlisis
de Q de Kendall y Chi cuadrada.11
Se ha documentado hasta un 20% de falsos
positivos con el VDRL, lo cual indica que es ms
difcil de interpretar, ya que se debera recurrir a
una segunda prueba para determinar si el donante se reingresa al sistema de donacin regular o si realmente se deben diferir y descartar las
unidades, sin contar la prdida de donantes por
primera vez al tener que pasar por un sistema
que les difiere temporalmente y les solicita una
segunda muestra debido a problemas del mtodo. La introduccin de esta prueba, adems de
las ventajas anteriormente sealadas, acortara
el tiempo de cuarentena de unidades o en su
defecto, el descarte de unidades por serologa
debido a malas interpretaciones. Cabe recalcar
que este sistema tambin ofrece un lector de
tarjetas con la posibilidad de documentar los
resultados en una base de datos.11,12
En este caso, queda en evidencia que el uso
de pruebas no treponmicas pone en riesgo la
seguridad transfusional puesto que, a pesar de

que no hay riesgo cero en las transfusiones, la

mejor transfusin es la que se hace con criterio en
todos sus eslabones.11 El VDRL es sensible en la
etapa primaria y al ser no reactivo, nos descarta
ese estadio. Es necesario revisar la historia clnica
del paciente para examinar cules medicamentos
ha tomado en el ltimo ao con el fin de considerar si se clasific de manera tarda debido a que
las IgG se mantienen positivas fuertes incluso a
2-3 aos y la IgM incluso por 1 ao.
Asimismo, las poblaciones de baja prevalencia tienen un porcentaje ms alto de resultados
falsos positivos que una poblacin de alta prevalencia.14

Conclusiones
En el tamizaje de donantes de sangre, el empleo
de mtodos no treponmicos no es recomendable debido a la generacin de resultados falsos
negativos, por lo cual es necesario generar
estrategias costo-efectivas como los ensayos
inmunoenzimticos, reproducibles y confiables,
que incrementen la seguridad transfusional.
Adems, muestran una especificidad del 100%
en donadores de sangre.

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Correspondencia:
Dr. Csar Cerdas-Quesada
Banco de Sangre, Hospital Hotel La Catlica.
San Jos, Costa Rica.
Tel. (506) 8885-4654
E-mail: [email protected]

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