Rev Chil Infect (2003); 20 (3): 178-183

ARTCULO ORIGINAL

Bioequivalencia entre dos formulaciones de claritromicina en suspensin peditrica existentes en el mercado chileno
LEONARDO GAETE G.1, OSCAR SCHATLOFF B.2, M. PIEDAD BELLO P.2, CRISTIN SERRANO A.2, VERNICA CEBALLOS N.2, FRANCO ANZIANI O.2, JAIME SOLS G.3, PABLO VENEGAS F.4 e IVN SAAVEDRA S.1

Bioequivalence evaluation of two brands of clarithromycin suspension available in the Chilean pharmacopeia
A comparative bioavailability study was conducted in order to test the bioequivalence between two formulations of clarithromycin in suspension 250 mg/5 mL, a local formulation (Pre-Clar), and the original product (Klaricid). In both cases, a single oral dose of 500 mg was used. A microbiological assay was used to determine the antibiotic plasmatic concentrations. The assay is based on the correlation between the inhibition of bacterial growth in agar plates and the plasmatic concentration of clarithromycin. A total of twelve healthy young volunteers participated and completed the study protocol, which was approved by the local ethic committee. None of the pharmacokinetic parameters such as peak plamatic level (Cmx), half-live (t1/2), area under the curve of plasmatic levels vs time, from 0 to inifinity (ABC0-) and velocity rate constant (Kabs), showed significant differences for both products. According to the guidelines recommended by the FDA and by means of our findings, we can assure that Pre-Clar and Klaricid in suspension are bioequivalents. Therefore, we may assume that both products are interchangeable without compromising clinical efficacy. Key words: Clarithromycin; Suspension; Bioequivalence; Pharmacokinetics. Introduccin La biodisponibilidad de un frmaco es la fraccin de un frmaco que efectivamente llega a la circulacin sistmica, y la velocidad con que se realiza este proceso1. La biodisponibilidad relativa o bioequivalencia individual es una medida comparativa de la calidad de una formulacin farmacutica, en donde se compara un producto nuevo (en trminos de la velocidad y la cantidad de principio activo que entrega) con el producto original (innovador del mercado), permitiendo estimar si dos formulaciones son similares o no, en relacin con la velocidad y extensin en que son absorbidas2.
Facultad de Medicina, Universidad de Chile: 1 Programa de Farmacologa Molecular y Clnica, ICBM. 2 Estudiante de Medicina Universidad de Chile. 3 Clnica Psiquitrica. 4 Servicio de Neurologa, Hospital Clnico. Recibido: 9 septiembte 2002 Aceptado: 7 julio 2003

Por otra parte, la intercambiabilidad es el acto realizado por un mdico de utilizar indistintamente una formulacin u otra, disponiendo de elementos de juicio suficientes para asegurar que la calidad de uno de los productos farmacuticos es comparable o similar a la del otro (alternativas farmacuticas)3. La claritromicina es un antimicrobiano macrlido de segunda generacin, derivado semisinttico de la eritromicina. Difiere de sta solamente en la metilacin del grupo hidroxilo en posicin 6 del anillo lactnico. Suele ser bacteriosttica, pero se ha demostrado capacidad bactericida contra microorganismos muy sensibles cuando la concentracin del antimicrobiano es elevada4.

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Su biodisponibilidad es cercana al 60%, alcanzndose la mxima concentracin plasmtica (Cmx) entre una y dos horas despus de la administracin oral. Entre el 20 y 40% de la dosis se excreta de forma inalterada en la orina y otro 10 a 15% como 14- hidroxi metabolito. La vida media de eliminacin (t1/2) es de 3 a 7 h y de 5 a 9 h para la 14-hidroxiclaritromicina, su principal metabolito que tambin tiene actividad farmacolgica8. Este frmaco ha experimentado un uso creciente en la poblacin peditrica, especialmente en el tratamiento de las infecciones respiratorias altas y bajas, lo que ha trado consigo la aparicin de nuevas formulaciones del frmaco en el mercado chileno. Esto hace necesario la realizacin de estudios de bioequivalencia, que permitan la caracterizacin de las propiedades farmacocinticas de los productos nacionales en comparacin con los productos innovadores. Para el caso de la claritromicina en su presentacin de suspensin peditrica (250 mg/5 ml) no existen antecedentes en el medio nacional que permitan concluir cules productos pueden considerarse bioequivalentes respecto del producto innovador. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un estudio de biodisponibilidad relativa de una formulacin nacional de claritromicina en suspensin de 250 mg/5 ml, respecto de la misma formulacin del producto innovador. La formulacin de referencia fue el producto original (Klaricid) y el producto test fue una formulacin similar conteniendo claritromicina (PreClar).

Material y Mtodos Voluntarios. En el estudio participaron doce sujetos voluntarios sanos de sexo masculino, cuyas caractersticas antropomtricas se resumen en la Tabla 1. Todos los voluntarios fueron informados apropiadamente sobre la metodologa a emplear durante el estudio, la duracin de ste, los fines que se perseguan y los posibles efectos adversos que podran presentarse durante el desarrollo del mismo. Una vez informados, decidieron su participacin en el estudio, mediante consentimiento informado. A los voluntarios seleccionados se les someti a un completo examen fsico por parte de un mdico cirujano, y a un conjunto de pruebas de laboratorio, las cuales no mostraron desviaciones significativas que pudiesen indicar patologas renales, hepticas, cardacas o gastrointestinales. El protocolo del estudio fue aprobado por el Comit de tica de la Facultad de Medicina de la Universidad de Chile. En todo momento se siguieron las recomendaciones para guiar los estudios en seres humanos, emanados de la declaracin de Helsinki9. El diseo del estudio fue doble ciego, randomizado y cruzado, administrndose 10 ml de cada producto (500 mg) a los voluntarios, en dos perodos separados por 14 das. Productos farmacuticos y procedimiento. Los productos farmacuticos de claritromicina en

Tabla 1. Caractersticas antropomtricas de los voluntarios N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Promedio DS* * DS: desviacin estndar Edad (aos) 20 19 22 20 19 19 20 19 19 18 18 18 19 1 Peso (kg) 74 78 75 51 65 81 73 75 74 81 65 68 71,6 8,4 Talla (cm) 183 178 180 165 171 178 175 175 179 174 175 171 175,3 4,8

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suspensin de 250 mg/5 ml utilizados (Klaricid, Abbott Laboratories-producto A y Pre Clar, Laboratorio Chile SA-producto B), fueron adquiridos en oficinas de farmacia y reconstituidos por uno de los investigadores, una hora antes de administrarlo, siguiendo las indicaciones de los respectivos fabricantes. Para cautelar el ciego, los productos se dispusieron en frascos de vidrio previamente esterilizados, rotulndose como Producto A o Producto B. Los doce voluntarios concurrieron en ayunas, a las 6:30 horas de cada perodo del estudio. A cada voluntario se le sirvi un desayuno equilibrado estndar. Despus de ste y segn protocolo, cada voluntario recibi la forma farmacutica (10 mL del producto A 10 mL del producto B) con 200 mL de agua potable, bajo la estricta vigilancia de los investigadores. Posteriormente se procedi a extraer las muestras de sangre en los horarios preestablecidos (muestras a tiempo 0 (pre dosis), 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10 y 12 horas). Las muestras sanguneas fueron centrifugadas inmediatamente despus de su obtencin a 2.000 rpm durante 10 minutos a 4 C, en una centrfuga clnica. El plasma obtenido fue almacenado a 20 C hasta el momento del anlisis. Despus de extrada la muestra de sangre correspondiente a las 6 horas a cada voluntario se le dio un almuerzo estndar. Dos horas despus, cada voluntario recibi una merienda tambin estandarizada. A las once horas post administracin del frmaco, se les dio una cena tambin estandarizada. Dos semanas ms tarde se realiz la segunda sesin, procedindose al cruce de los probandos, es decir, los voluntarios que haban recibido el Producto A en la primera sesin, recibieron el Producto B y viceversa. Todas las muestras fueron analizadas, dejndose una contra muestra almacenada a 20 C. La medicin de la concentracin de antimicrobiano en las muestras se realiz dentro de la misma semana en que fueron obtenidas. En el primer da de anlisis se utilizaron las muestras correspondientes a los tiempos 0 (pre dosis), 1, 2, 3 y 4 h. Para el segundo da de anlisis se utilizaron las muestras correspondientes a los tiempos 5, 6, 8, 10 y 12 horas. Determinacin de claritromicina en el plasma. Se utiliz un mtodo microbiolgico estandarizado y adaptado en el Laboratorio de Farmacocintica de la Facultad de Medicina de la Universidad de Chile. El mtodo microbiolgico utilizado en el presente trabajo para la determinacin de niveles

plasmticos corresponde al protocolo de Pollini et al10. Dicho mtodo se basa en la medicin de halos de inhibicin de crecimiento bacteriano que se producen al colocar sensidiscos impregnados con plasma de los voluntarios que han recibido el antimicrobiano en un medio de cultivo que contiene una cepa bacteriana sensible a dicho antimicrobiano; en este caso particular la cepa utilizada fue Micrococcus luteus ATCC 9341. Este mtodo ha sido validado y es ampliamente aceptado para determinar concentraciones de antimicrobianos en fluidos biolgicos11,12. As, para mayores concentraciones plasmticas del antimicrobiano se producir un halo de inhibicin mayor, y para concentraciones menores un halo menor. Con los datos de tamao del halo de inhibicin de crecimiento bacteriano, se puede obtener la concentracin plasmtica de claritromicina. Para ello, se confecciona una curva de calibracin, la cual es una relacin entre una concentracin conocida del analito, en este caso el antimicrobiano, y la respuesta que se obtiene a esta concentracin, es decir, el dimetro del halo de inhibicin obtenido para esa concentracin. Anlisis farmacocintico y estadstico. Los valores de tmx y Cmx se obtuvieron por inspeccin directa de la curva de concentracin plasmtica versus tiempo de cada voluntario. Los parmetros farmacocinticos: reas bajo la curva (entre 0 y 12 horas), tiempo de vida media, el clearance corporal total y el volumen de distribucin, se determinaron a travs del programa computacional AUC-RPP13, el cual se basa en un anlisis de regresin de la fase terminal, del rea bajo la curva (ABC) y del rea bajo la curva en el primer momento. Los valores de los parmetros Cmx y ABC obtenidos para ambas formulaciones se expresaron en forma logartmica y fueron sometidos a anlisis de varianza (ANOVA). Se determinaron intervalos de confianza del 95% para la diferencia entre los promedios de los parmetros farmacocinticos obtenidos con ambas formulaciones. Se estimaron como significativas aquellas diferencias en las que el valor de p fue menor que 0,0514. Resultados Durante el desarrollo del estudio no se presentaron dificultades en la administracin de los tratamientos, cumpliendo todos los voluntarios en forma satisfactoria con el protocolo establecido. No hubo contratiempos con ninguna de las

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Figura 1. Concentraciones plasmticas promedio de claritromicina obtenidas con dos productos del mercado nacional en 12 voluntarios sanos. Los 12 voluntarios recibieron 10 mL (500 mg) de claritromicina suspensin. Las concentraciones plasmticas se determinaron mediante ensayo microbiolgico de difusin en disco de papel. Cada punto representa el promedio de concentracin con su desviacin estndar.

muestras obtenidas, siendo por lo tanto, todas ellas sometidas a posterior anlisis. La tcnica analtica de medicin result ser bastante reproducible y sensible. Los valores del halo de inhibicin para el estndar de referencia de 0,25 g/ml fluctuaron entre 11 y 15 mm. A su vez, los controles de calidad empleados permitieron establecer que el coeficiente de variacin del mtodo fue en promedio de 9,2% (rango: 5,4-13,2%), observndose la mayor variabilidad con las concentraciones menores de 0,25 g/ml. En la Figura 1 se presentan las curvas promedio de concentracin plasmtica de claritromicina versus el tiempo transcurrido desde la administracin de claritromicina en suspensin, hasta las doce horas, en los doce voluntarios. Ambas curvas exhiben la misma forma (ajustando a un modelo farmacocintico de un compartimento), con cinticas de absorcin y de eliminacin de primer orden. La absorcin puede caracterizarse como lenta, con un tmx para ambas formulaciones cercano a las 4 horas, aun cuando ya despus de una hora de la administracin se alcanzan concentraciones plasmticas efectivas. Las concentraciones mximas alcan-

zadas tambin son comparables, con promedios de 3,67 y 3,57 g/ml para A y B respectivamente. Anlogamente, para el parmetro ABC de concentraciones plasmticas, desde tiempo cero hasta las doce horas post administracin, los valores alcanzados son muy similares: 22,6 y 21,1 gh/ml. Adems, se encontr que los parmetros farmacocinticos obtenidos con ambas formulaciones estn en concordancia con los descritos en la literatura para este frmaco15. En la Tabla 2 se presentan los parmetros farmacocinticos promedio de tiempo de vida media (t1/2), concentracin plasmtica mxima (Cmx), tiempo requerido para alcanzar la concentracin plasmtica mxima (tmx), ABC de concentraciones plasmticas en el tiempo, desde el tiempo 0 hasta 12 horas, clearance total (Cl t) y volumen de distribucin (Vd) obtenidos con los productos A y B. Al utilizar la prueba de ANOVA con un intervalo de confianza del 95%, en la comparacin de los parmetros farmacocinticos obtenidos con ambos productos, no se encontr diferencias estadsticamente significativas para alguno de ellos.

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Bioequivalencia entre dos formulaciones de claritromicina en suspensin peditrica - L. Gaete G. et al Tabla 2. Parmetros famacocinticos promedio de claritromicina y su desviacin estndar, en 12 voluntarios sanos, con dos formulaciones del frmaco en suspensin (dosis: 500 mg) Parmetro Cmx (g/ml) tmx (h) ABC 0-12 (mgh/ml) t (h) Vd (L/kg) Cl t (ml/kg/min) Producto A 3,67 3,92 22,60 3,96 1,50 4,40 0,71 0,90 4,50 0,79 0,30 0,8 Producto B 3,57 4,08 21,10 4,14 1,70 4,90 1,03 1,00 6,70 1,09 0,50 1,30 P 0,78 0,68 0,52 0,81 0,24 0,27

Cmx = concentracin plasmtica mxima. tmx = tiempo requerido para alcanzar la Cmx. ABC0-12 = rea bajo la curva de concentraciones plasmticas versus tiempo, desde cero a 12 horas. t = tiempo de vida media. Vd = volumen de distribucin. Cl t = depuracin del frmaco.

Discusin En este trabajo se realiz un estudio de biodisponibilidad relativa entre dos formulaciones farmacuticas que contienen claritromicina. Para ello, a un mismo grupo de voluntarios sanos se les administr en forma cruzada 500 mg de claritromicina, proveniente de dos formulaciones en suspensin que contienen 250 mg/5 ml de claritromicina y que se expenden en el mercado chileno. La FDA recomienda que para considerar bioequivalentes a dos productos farmacuticos, stos deben poseer la misma concentracin de principio activo y la misma formulacin (comprimidos, jarabe, cpsulas, suspensin, etc). Pero ms importante an es que los parmetros de Cmx y de ABC obtenidos con ambos productos y expresados en forma logartmica deben ser similares. El resto de los parmetros farmacocinticos (Kabs, T1/2, Kel, Cl, Vd) ayudan a la mejor caracterizacin de los productos a comparar, pero no determinan la intercambiabilidad de los mismos. Adems, la FDA recomienda que para estudios de bioequivalencia, debe medirse solamente el frmaco parental y no el metabolito (claritromicina y 14-hidroxiclaritromicina en nuestro estudio). La base racional para esta recomendacin es que el perfil de concentracin versus tiempo del frmaco parental es ms sensible a los cambios en la calidad de la formulacin. La formacin de metabolito por su parte, es el reflejo de la cantidad de frmaco parental que ingres al organismo y que es biotransformado. Cuando dos productos farmacuticos tienen

una biodisponibilidad comparable, reflejada por una ABC y Cmx, dentro de rangos muy definidos, se considera que ellos son bioequivalentes. De esto se deduce que son alternativas farmacuticas intercambiables y bajo las recomendaciones de la comisin de medicamentos de la OMS, la copia debe recibir el nombre de producto genrico16. De acuerdo a nuestros resultados, podemos afirmar que ambas formulaciones de claritromicina en suspensin son bioequivalentes, ya que no se observaron diferencias estadsticamente significativas para ninguno de los parmetros farmacocinticos determinados en este estudio. Puesto que, este estudio fue realizado en voluntarios sanos, no puede tomarse como evidencia para utilizar una u otra formulacin con fines teraputicos. Conclusiones acerca de la efectividad clnica de las formulaciones utilizadas en el presente estudio, no pueden obtenerse a partir de los datos aqu presentados. La evidencia aqu presentada, seala claramente que con ambos productos se obtienen concentraciones plasmticas y reas bajo la curva estadsticamente iguales, y por lo tanto pueden considerarse bioequivalentes. Resumen Se realiz un estudio comparativo de biodisponibilidad, para evaluar la bioequivalencia entre dos formulaciones de claritromicina en suspensin de 250 mg/5 mL, una nacional (Pre-Clar), y el innovador del mercado (Klaricid). En ambos casos, se administr una dosis de 500 mg. Se utiliz un ensayo microbiolgico para determinar las concentraciones plasmticas del

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antimicrobiano. El ensayo est basado en la correlacin entre la inhibicin del crecimiento bacteriano y la concentracin plasmtica de claritromicina. Un total de 12 voluntarios, jvenes sanos, participaron y completaron el protocolo del estudio, el cual fue aprobado por el Comit de tica de la Facultad de Medicina de la Universidad de Chile. Los parmetros farmacocinticos de concentracin plasmtica mxima (Cmx), tiempo de vida media (t1/2), rea bajo la curva concentraciones plasmticas versus tiempo, desde cero a infinito (ABC0-) y la constante de velocidad de absorcin (Kabs), no mostraron diferencias estadsticamente significativas entre los productos utilizados. De acuerdo a los criterios recomendados por la FDA y sobre la base de nuestros resultados, se concluye que las formulaciones en suspensin peditrica de 250 mg/5 mL Pre-Clar y Klaricid son bioequivalentes asumindose que tendrn igual eficacia clnica.

Bibliografa
1.- FDA: Guidance for Industry. Bioavailability and bioequivalence studies for orally administered drug products General Considerations. October 2000. 2.- FDA: Guidance for Industry. In vivo Bioequivalence Studies Based on Population and Individual Bioequivalenece Approaches. October 1997. 3.- FDA: Guidance for Industry. Average, Population, an Individual Approaches to Establishing Bioequivalence. August 1999.

4.- Kapusnik-ulner J, Sande M, Chambers H. Las bases farmacolgicas de la teraputica. Captulo 47, novena edicin 1996. 5.- Al-assi M, Ramrez F, Lew G, Genta R, Graham D. Clarithromycin, tetracycline, and bismuth: a new nonmetronidazole therapy for Helicobacter pylori infection. Am J Gastroenterol 1994; 89: 1203-5. 6.- CDC. Recommendations on prophylaxis and therapy for disseminated Mycobacterium avium complex for adults and adolescents infected with human inmunodeficiency virus. 1993 c; 42: RR-9, 17-20. 7.- CDC. Sexually transmitted diseases treatment guidelines. 1993b; 42: RR-14, 1-102 8.- Fraschini F, Scaglione F, Demartini G. Clarithromycin clinical pharmacokinetics. Clin Pharmacokinet 1993; 25: 189-204. 9.- Declaracin de Helsinki. Documentos sobre tica mdica, Colegio Mdico de Chile AG; Grupos comunicacionales, 1986: 91-5. 10.- Pollini R, Lettieri B, Nanney M. Assay microbiological: clarithromycin in plasma-paper disc method. Protocolo N w96-124, ABBOTT Laboratories, Argentina 1996. 11.- Coleman M R, Peloso J S, Moran JW. Microbiological plate assay for determination of tilmicosin in bovine serum. JAOAC Int 1995; 78: 659-62. 12.- Breier A R, Garca C V, Oppe T P, Steppe M, Schapoval E E. Microbiological assay for azithromycin in pharmaceutical formulations. J Pharm Biomed Anal 2002; 29: 957-61. 13.- Ritschell W. AUC-RPP basic computer program for compartment model independent pharmacokinetic analysis. Meth Find Exptl Clin Pharmacol 1986; 8: 633-40. 14.- FDA: Guidance Statistical Approaches to establishing Bioequivalence. February 2001. 15.- AHFS. Drug information. 1996. Pg. 231. 16.- Arias T. Glosario de Medicamentos 1 Edicin OPS/ OMS, 1999. Correspondencia a: Leonardo Gaete G. E-mail: [email protected]

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