Aula 6 e 7 Sinalização Celular 2019
Aula 6 e 7 Sinalização Celular 2019
Aula 6 e 7 Sinalização Celular 2019
Sinalização Celular
9 de Dezembro de 2019
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Recetores associados à proteína G
R associados à
proteína G
Mediadores
intracelulares
cAMP Ca2+
Algumas proteínas G regulam a síntese de cAMP
cAMP modulando a actividade da adenilciclase
Adenilciclase:
Proteína transmembranar
Domínio catalítico no lado citosólico
da membrana plasmática
Conversão ATP cAMP
Principal sintoma da cólera: diarreia aquosa e abundante causada por fluxo de água do sangue
para o lúmen intestinal através das células epiteliais do intestino,
podendo levar à morte por desidratação.
Toxina da cólera:
- peptídeo produzido pela bactéria Vibrio cholerae;
- Heterodímero com actividade enzimática que
catalisa a transferência de ADP-ribose do NAD+
citosólico para a subunidade G sa .
Recetores α2
Adrenalina adrenérgicos
Proteína Gi
somatostatina
Glândula
Stress Supra-Renal Adrenalina
Início do desenvolvimento
embrionário
Ca2+
Células musculares contracção
Ca2+
Células nervosas secreção
A concentração de Ca 2+ no citosol é, normalmente, mantida muito baixa (~10-7 M), enquanto que a sua
concentração no fluido extracelular (~10-3 M) e no lúmen do retículo endoplasmático é elevada
Elevado gradiente electroquímico que tende a transportar Ca2+ para o citosol através da membrana plasmática
e da membrana do retículo endoplasmático.
Quando um sinal transitoriamente abre os canais de Ca2+, a concentração de Ca2+ no citosol aumenta
abruptamente para valores 10 - 20 vezes superiores, activando processos dependentes de Ca2+ na célula.
Na célula em repouso, a concentração de Ca 2+ no citosol é mantida baixa (da ordem dos nM )
através de vários mecanismos:
Bombas de Ca2+ na membrana plasmática: utilizam a energia da hidrólise do ATP para bombear Ca2+ do citosol para o
meio extracelular;
Trocador Na+/Ca2+ na membrana plasmática: acopla o efluxo de Ca2+ com o influxo de Na+ (atuam quando existem
níveis de Ca2+ extremamente elevados pois possui baixa afinidade para o Ca2+);
Bombas de Ca2+ (baixa afinidade, elevada capacidade) na membrana interna da mitocôndria: utilizam o gradiente
electroquímico gerado através da membrana, durante a transferência de electrões na fosforilação oxidativa, para captar Ca2+ a
partir do citosol;
Canais de Ca2+ sensíveis a IP3: permitem o fluxo de Ca2+ do retículo endoplasmático para o citosol quando a via
C ytosol
Endoplasmic r eticulum
Receptores de rianodina: reagem a uma alteração do potencial da membrana plasmática, libertando Ca2+ do retículo
sarcoplasmático e estimulando a contracção das células
musculares; encontram-se também no retículo
endoplasmático de muitas células não-musculares,
incluindo neurónios, contribuindo para a sinalização por
Ca2+.
Algumas proteínas G activam a via dos fosfoinositóis por
activação da PLC-b
Difunde-se no citosol
liga-se a canais de Ca2+ sensíveis a IP3 na membrana do retículo endoplasmático (ER) e abre-os
Efeitos do IP3 e do DAG podem ser mimetizados pela adição de agentes famacológicos a células intactas:
IP3: A23187 ou ionomicina (ionóforos de Ca2+) permitem o fluxo de Ca2+ do meio extracelular para o citosol
Efeitos:
Entre as proteínas alvo da calmodulina encontram-se muitas enzimas e proteínas
envolvidas no transporte membranar
(ex.: a Ca2+/calmodulina liga-se e activa a bomba de Ca2+ da membrana plasmática que bombeia Ca2+ do citosol para o meio
extracelular; quando a concentração de Ca2+ no citosol aumenta, a bomba é activada, baixando os níveis citosólicos de Ca2+
para valores normais).
Muitos efeitos do Ca 2+ são indirectos e mediados pela fosforilação de proteínas catalisada por
uma família de cinases dependentes de Ca 2+/calmodulina (CaM-cinases). Tal como a PKA e
a PKC, as CaM-cinases fosforilam resíduos de serina ou treonina em proteínas ( ex.: CREB).
Ex: CaM-cinase II (multifuncional)
Algumas proteínas G regulam canais iónicos, directamente
Exemplo:
Este efeito é mediado por uma classe especial de receptores de
acetilcolina (muscarínicos) que activam proteínas Gi
Algumas proteínas G triméricas regulam a actividade de canais iónicos de uma forma menos
directa, por fosforilação desses canais (pela PKA, PKC ou CaM-cinase, por ex.) ou pela produção ou
degradação de nucleótidos cíclicos que directamente activam ou inactivam canais iónicos.
O olfacto e a visão são exemplos de processos que dependem da activação
de receptores acoplados a proteínas G que regulam canais iónicos
sensíveis a nucleótidos cíclicos
Olfacto
Os humanos podem distinguir mais de 10 000 cheiros diferentes, que são detectados por
neurónios receptores olfactivos que existem na superfície interna do nariz.
Receptores
O axónio transmite os sinais eléctricos
olfactivos para o cérebro quando a célula é activada
por uma substância odorante, originando
um potencial de acção
cAMP
Despolarização e transmissão do Abertura de canais de Na +
impulso nervoso ao cérebro sensíveis a cAMP
Visão
• Formação de imagens em
tons de cinzento e pouco
nítidas
Neurónios da retina
No processo da visão, em vertebrados, estão envolvidos canais iónicos sensíveis a
nucleótidos cíclicos, neste caso, o cGMP
cGMP
Guanilciclase
5’-GMP
Rodopsina: Receptor acoplado a proteínas G (7 segmentos transmembranares)
Activação do rodopsina
Escuro (receptor)
Activação da cGMP
fosfodiesterase
Papel importante na resposta a proteínas sinalizadoras que promovem o crescimento, proliferação, diferenciação ou
sobrevivência das células (factores de crescimento); medeiam também efeitos directos e rápidos no citosqueleto.
Nos receptores com actividade intrínseca de cinases de tirosina, a ligação do ligando leva
à formação de um homodímero activado fosforila vários resíduos de tirosina no seu
próprio domínio citosólico (auto-fosforilação), assim como determinadas proteínas
Receptores com actividade intrínseca de cinase de tirosina
Auto-fosforilação
- PI 3-cinase
- Proteína ativadora de
GTPase (GAP)
- Fosfolipase C-γ
Auto-fosforilação
- PI 3-cinase
- Proteína ativadora de
GTPase (GAP)
- Fosfolipase C-γ
RAS INATIVA
GDP
GAP GNRP
RAS
GTP ATIVA Diferenciação e Proliferação
Vias de sinalização comuns activadas por receptores acoplados a
proteínas G e receptores de cinase de tirosina
Estes 2 tipos de receptores activam múltiplas vias de sinalização, onde diferentes segundos
mensageiros e proteínas sinalizadoras intracelulares podem mediar a mesma resposta celular
Bibliografia
(Sinalização Celular)
Capítulo 13
Capítulo 15