Avaliação I - Biologia Molecular - Enviada
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1 As bibliotecas de DNA e cDNA são essenciais para manter e replicar um fragmento clonado por
tempo indeterminado. Sobre essas técnicas, associe os itens, utilizando o código a seguir:
I- Biblioteca de cDNA.
II- Biblioteca de DNA.
III- Hibridização em colônia.
( ) Técnica que detecta os fragmentos do DNA de interesse com sondas específicas em meio de
cultivo sólido.
( ) Clonagem de fragmentos aleatórios do DNA, permitindo a sua identificação, isolamento e
sequenciamento do genoma.
( ) Clonagem de mRNAs, em que cada célula/tecido pode originar uma biblioteca diferente,
considerando o padrão de expressão gênica específico, relacionado sempre a sua função.
B I - III - II.
C I - II - III.
D III - II - I.
PORQUE
II- Assim que o vetor é inserido, em condições adequadas de diluição e meio de cultivo, em poucas
horas corre a formação de diversos clones dos fragmentos inseridos, sendo cada um encontrado em
uma colônia diferente de crescimento bacteriano.
C Uma biblioteca de DNA contém somente os íntrons de uma molécula de DNA, sendo
extremamente específico para identificar o conteúdo expresso em uma célula ou tecido.
C A técnica de Sanger, utiliza terminadores de sequência em réplicas de DNA de uma fita molde
diferenciada.
São utilizados iniciadores (primers), fitas de DNA réplicas da mesma fita molde, ou seja, com a
D mesma extremidade 5' e diferentes terminações 3', devido à inserção dos didesoxinucleotídeos,
que são nucleotídeos terminadores de cadeia (ddNTP: ddATP, ddTTP, ddCTP e ddGTP).
6 Para detecção do DNA em bibliotecas de DNA, uma membrana é colocada em contato com as
colônias na placa logo após o crescimento das colônias bacterianas em placas de cultivo contendo
meio sólido. Algumas células irão se aderir à membrana, formando uma impressão das colônias
presentes na placa. Em seguida, as células aderidas sofrem lise celular, a fim de liberar o DNA, que
permanece aderido à membrana. Por fim, a membrana é incubada com sondas de hibridização
marcadas, complementares à porção do gene de interesse, permitindo a visualização da posição dos
clones que contêm o fragmento de interesse. Sobre a técnica exposta, assinale a alternativa
CORRETA:
A Hibridização em colônia.
B Hibridização in situ.
C Northen-blot.
D Southern-blot.
B O RNA é uma estrutura em dupla hélice, composta pela desoxirribose, nucleotídeos e fosfato.
C O RNA é composto por cinco nucleotídeos, adenina, uracila, timina, guanina e citosina.
D O RNA é uma estrutura em fita simples, composta pela pentose denominada como ribose; os
nucleotídeos adenina, uracila, citosina e guanina e fosfato.
8 A escolha do gel para a técnica de eletroforese deve-se dar através do tamanho da molécula a ser
isolada e do objetivo do isolamento. Com base nas matrizes de agarose e poliacrilamida para a
técnica de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir:
I- A poliacrilamida pode separar fragmentos de DNA com até mesmo uma única base nitrogenada de
diferença.
II- A agarose, apresenta menor resolução, ou seja, cada banda presente no gel, representa um
agrupamento de moléculas de tamanho semelhantes.
III- No gel de poliacrilamida, uma menor faixa de tamanho das moléculas pode se movimentar,
enquanto fragmentos maiores de DNA podem migrar facilmente no gel de agarose.
9 O processo de transcrição reversa, é uma das técnicas mais utilizadas na área de pesquisa de
expressão gênica. Essa técnica é conhecida como RT-PCR, ou transcrição reversa, seguida por PCR.
Com base no RT-PCR, analise as sentenças a seguir:
10 Para construir uma biblioteca de DNA, utiliza-se técnicas de clivagem com enzimas de restrição
e clonagem em vetor. Com base nas etapas para construção de uma biblioteca de DNA, ordene os
itens a seguir:
I- Fragmentos de DNA são inseridos em vetores idênticos e ligados através da DNA ligase.
II- Clivado do DNA com uma enzima de restrição, formando centenas a milhares de fragmentos de
DNA.
III- Inserção do vetor em células hospedeiras, produzindo a clonagem dos diferentes fragmentos.
IV- Extrair e isolar o DNA genômico de uma célula, tecido ou até mesmo de um organismo.
B IV - II - I - III.
C I - III - II - IV.
D IV - II - III - I.
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