O documento descreve o teste de Coombs direto, que avalia a presença de anticorpos ligados diretamente às hemácias. O teste é usado para diagnosticar anemia hemolítica adquirida autoimune, doença hemolítica do recém-nascido e transfusões incompatíveis, entre outras condições. O procedimento envolve lavar as hemácias do paciente, incubá-las com anticorpos anti-IgG e verificar se ocorre aglutinação, indicando um resultado positivo.
O documento descreve o teste de Coombs direto, que avalia a presença de anticorpos ligados diretamente às hemácias. O teste é usado para diagnosticar anemia hemolítica adquirida autoimune, doença hemolítica do recém-nascido e transfusões incompatíveis, entre outras condições. O procedimento envolve lavar as hemácias do paciente, incubá-las com anticorpos anti-IgG e verificar se ocorre aglutinação, indicando um resultado positivo.
O documento descreve o teste de Coombs direto, que avalia a presença de anticorpos ligados diretamente às hemácias. O teste é usado para diagnosticar anemia hemolítica adquirida autoimune, doença hemolítica do recém-nascido e transfusões incompatíveis, entre outras condições. O procedimento envolve lavar as hemácias do paciente, incubá-las com anticorpos anti-IgG e verificar se ocorre aglutinação, indicando um resultado positivo.
O documento descreve o teste de Coombs direto, que avalia a presença de anticorpos ligados diretamente às hemácias. O teste é usado para diagnosticar anemia hemolítica adquirida autoimune, doença hemolítica do recém-nascido e transfusões incompatíveis, entre outras condições. O procedimento envolve lavar as hemácias do paciente, incubá-las com anticorpos anti-IgG e verificar se ocorre aglutinação, indicando um resultado positivo.
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IMUNOLOGIA
POP TESTE: COOMBS DIRETO
PRECEPTORA: KEROLAINE FONSECA COELHO
O teste de coombs é um exame que avalia a presença de anticorpos
específicos que atacam as hemácias/eritrócitos, provocando a sua destruição e podendo levar ao surgimento de um tipo de anemia conhecida como hemolítica.
Existem dois tipos principais deste exame, que incluem:
• Teste de Coombs direto: avalia diretamente as células vermelhas do
sangue, verificando se há anticorpos ligados à hemácia e se esses anticorpos são derivados do próprio sistema imune da pessoa ou recebidos por transfusão. • Teste de Coombs indireto: avalia o soro, identificando os anticorpos ali presentes, e geralmente é solicitado em situações de transfusão, para garantir que o sangue que será doado é compatível com quem está recebendo.
TESTE DIRETO DA ANTIGLOBULINA (COOMBS DIRETO)
FINALIDADE
Uso do soro Antiglobulina humana para pesquisa de anticorpos irregulares (PAI),
teste da antiglobulina direta (TAD) e provas de compatibilidade.
Usa-se o teste direto de antiglobulina (Coombs direto) para determinar
se o anticorpo de ligação de eritrócitos (IgG) ou complemento (C3) está presente nas membranas dos eritrócitos; Os eritrócitos do paciente são incubados com anticorpos anti-IgG humana e C3. Se a IgG ou o C3 estiverem ligados às membranas dos eritrócitos, ocorre aglutinação — que configura resultado positivo; IMUNOLOGIA POP TESTE: COOMBS DIRETO PRECEPTORA: KEROLAINE FONSECA COELHO
Um resultado positivo sugere a presença de autoanticorpos nos
eritrócitos. Um falso positivo pode ocorrer e nem sempre equivale à hemólise. Portanto, os resultados sempre devem estar correlacionados com os sinais e sintomas clínicos.
Aplicações:
Na pesquisa de anticorpos já fixados às hemácias, como ocorrem em:
o Anemia Hemolítica Adquirida Autoimune;
o Doença Hemolítica de Recém Nascido o Pacientes que tenham recebido transfusões incompatíveis.
PRINCÍPIO DE AÇÃO:
A imunização de coelhos com antiglobulina e complemento produzem a
antiglobulina humana e anticomplemento humano. No teste da antiglobulina as células são lavadas sucessivamente para remoção das globulinas não ligadas às células, as lavagens são necessárias para impedir a neutralização da antiglobulina humana através da molécula anti IgG C3d não ligada. A globulina poliespecífica humana adicionada nas células lavadas causarão aglutinação se as células estiverem sensibilizadas com imunoglobulina ou complemento. Células não sensibilizadas não aglutinarão com a globulina anti-humana. IMUNOLOGIA POP TESTE: COOMBS DIRETO PRECEPTORA: KEROLAINE FONSECA COELHO
AMOSTRA:
As amostras coletadas em EDTA ou Heparina devem ser tipadas em até
48 horas. Se a demora para a execução do teste for inevitável, hemácias de sangue coagulado e as colhidas em EDTA ou heparina devem ser separadas do soro/plasma, lavadas e ressuspendidas em solução preservativa de glóbulos. Estocar a 2º-8ºC por no máximo 20 dias. O armazenamento prolongado de hemácias antes da execução do teste pode causar deterioração de antígenos e resultar em reações mais fracas.
PROCEDIMENTO:
1- Centrifugar amostra de sangue (EDTA) e separar o plasma das hemácias
a serem testadas (paciente); 2- Preparar uma solução de hemácias de 3% a 5% diluídas em solução salina;
Ex: A 5% seria 950uL de solução salina (0,9%) + 50 uL de hemácias;
A 3% seria 970uL de solução salina (0,9%) + 30 uL de hemácias;
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3- Colocar em um tubo de ensaio uma gota ou 50µl da suspensão de
eritrócitos diluídos; 4- Lavar as hemácias dos tubos com solução fisiológica 3 vezes, adicione solução fisiológica até preencher 2/3 do tubo, 5- Centrifugue a 1000 rpm de 1 a 3 min; 6- Despreze o sobrenadante com cuidado para deixar o “botão” de hemácias no fundo do tubo; 7- Repita esse passo mais duas vezes (total = 3 lavagens); 8- Após a última lavagem remover completamente a salina secando bem as bordas do tubo com auxílio de um papel de filtro/toalha; 9- Adicionar 2 gotas (100 µL) do Soro antiglobulina humana de coombs (Anti-IgG monoespecífico ou Anti-IgG+ C3d poliespecífico) em cada tubo; 10- Homogeneizar; 11- Centrifugar novamente 1 a 3 min a 1000 rpm; 12- Ressuspender suavemente o botão de hemácias, agitando delicadamente o tubo, observando a presença ou não de aglutinação; 13- Análise dos resultados macroscopicamente e microscopicamente. 14- Registrar os resultados.
